园艺生物技术
园艺生物技术
一、名词解释
1、组织培养：指在无菌条件下，将植物的离体器官、组织、细胞、胚胎、以及原生质，接种在到人工配制的培养基上，在人工控制的条件下进行培养，使其生长、分化，并长成完整植株的过程。
2、植物细胞的全能型：指植物的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整的植株的潜在能力。
3、植物细胞分化：指在个体发育过程中，细胞在邢台、结构和功能上的特化过程。
4、无病毒苗：是指不含有该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现为阴性反应的苗木。
5、立体快速繁殖：指通过无菌操作，将外植体接种于培养基上，在人工控制的营养和环境条件控制下进行培养，，使其在较短的时间内快速的再生出大量完整植株的方法。
6、脱分化：指植物离体的器官、组织、细胞在培养条件下，经过多次细胞分裂，而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团，并使其恢复到胚性细胞状态的过程。
7、再分化：指离体培养的植物组织或细胞可以由脱分化状态再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器官、甚至是最终再生成完整植株的过程。
8、体细胞无性系变异：在培养阶段发生变异，进而导致再生植株亦发生遗传改变的现象。
9、种质资源的离体保存：是指对离体培养的小植株、器官、组织、细胞或原生质等材料，采用限制、延缓或停止其生长的处理使之保存，在需要时重新恢复其生长，并再生植株的方法。
10、园艺植物的细胞工程：指应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的试验方法和技术，在细胞水平上研究改造园艺植物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或园艺植物新品种的科学。
11、基因工程：将外源基因通过体外的重组后导入受体细胞内使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译、表达的系列操作技术总称。
12、限制性内切酶：从细菌中分离提纯的内切酶，可以识别并切开核酸序列特定位点----分子手术刀。
13、基因文库：指将基因组DNA通过限制性内切酶部分酶解后所产生的基因组DNA 片段随机地同相应的载体重组、克隆，所产生的克隆群体代表了基因组DNA的所有序列。
（是一组DNA或CDNA序列克隆的集合体）
14、图位克隆：又称定位克隆，是根据目标基因在染色体上的位置进行基因可控的一种方法。
15、植物遗传转化：是运用分子重组技术、细胞组织培养技术或种资系统转化技术，
有目的的将外源基因或DNA片段插入到受体植物基因组，并使其在后代植株中得以表达的过程。
16、转基因植物：将外源基因导入植物细胞，在组织中培养，获得能够表达外源基因的植物，称为转基因植物。
17、分子标记：一切能揭示DNA多态性的技术手段，它是DNA在水平遗传多态性的直接反映，也就是通常人们所说的分子标记。
18、生物技术：是以园艺植物为材料，利用生物技术，创造成改良种质或生产生物制品的一门技术。
19、农杆菌：生活在植物根表面依靠由根际组织渗透出来的营养物质生存的一类普遍存在于土壤中的革兰氏阴性细菌。
20、分子农业：以利用重组或转基因植物为基础，大规模生产出稀有的和高价值的产品的农业。
二、填空
1、植物组织培养按照外植体类型的不同分为：胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养、原生质体培养。
按照培养基的性质不同，分为：固体培养、液体培养。
按照培养方法不同分为：静置培养、振荡培养、看护培养、饲喂培养、微室培养。
2、基因工程研究的理论依据：不同基因具有相同的物质基础；基因是可以切割的；基因是可以转移的；多肽与基因之间存对应关系；遗传密码是通用的；基因可以通过复制把遗传信息传给下一代。
3、基因工程的操作技术：分、切、接、转、筛。
4、高等植物基因文库包括：基因组文库、CDNA文库
5、分子标记的种类：分子标记多态性分子产生的分子基础；基于southern杂交的分子标记，基于PCR扩增的DNA标记；基于序列测定的分子标记。
6、先进的工程技术手段：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程。
7、外源裸露DNA的转化方法：化学诱导转化法、电穿孔转化法、基因枪转化法、激光微束穿孔转化法,体内注射转化法、脂质体介导转化法。
8、农杆菌介导载体RT质粒的两个功能区：T-DNA区、vir区。
9、Ti质粒衍生的克隆转化载体必须具备以下的结构特点：具有选择标记的基因；DNA 复制起始位点；T-DNA右边缘序列；单克隆位点；vir区域。
10、基因工程的7大支撑技术：核酸分离技术、核酸电泳技术、核酸体外扩增技术（pcr)、分子杂交技术、图位克隆技术、基因差异表达技术、基因芯片技术。
三、简答题
1.组培的分类
（1）按外植体类型的不同可分为：胚胎培养器官培养细胞培养组织培养原生质体培养
（2）按照培养基的性质不同可分为：固体培养液体培养
（3）按照培养方法不同可分为：静置培养振荡培养看护培养饲喂培养微室培养
2基因概念的发展
（1）1909年，丹麦生物学家johannsen首先使用基因一词，此时基因只是遗传性状的符号
（2）1910-1925年，morgan指出基因不仅是位于染色体上呈直线排列的遗传单位，而且是
携带遗传信息的结构单位和控制遗传性状的功能单位。
（3）1944年，avery等的肺炎球菌转化实验，证明基因的化学本质是DNA，即DNA分子是遗传信息的载体。
（4）1953年，沃森和克里提出了DNA双螺旋结构的模型，阐明了DNA自我复制的机制（5）1955年，Benzer提出顺反概念，认为基因既是一个功能单位，又是一个突变单位和交换单位（6）1961年，通过对调控基因的研究，发现遗传信息储存于核酸之中（7）现认为基因是一个含有特定遗传信息的核苷酸序列，它是遗传物质的最小功能单位
3脱病苗的培育方法
（1）茎尖培育脱毒（2）微体嫁接脱毒（3）热处理脱毒（4）其他脱毒方法
4转基因植物的安全性问题
（1）转基因食品的外源基因对人体有无毒性或是否引起过载（2）外源基因是否转移到人体或其他动物体中（3）外源基因编码蛋白对人体是否有害（4）抗生素标记基因编码蛋白是否会使食用者产生抗生素抗药性（5）转基因植物是否会演变成农田杂草（6）基因漂流到近缘野生种，使之成为超级杂草。
5、组培的技术步骤：（1）、培养器皿的清洗；（2）、培养基的配制、分装和高压灭菌；
（3）、无菌操作——材料的表面灭菌和接种；（4）、将培养物放到培养室培养；
（5）、试管苗的驯化、移栽和初期管理。
四、综合题
PCR原理：根据已知的待扩增的DNA片段序列，人工合成与该DNA两条链末端互补的两段寡核苷酸引物，在体外有模板DNA和4种脱氧核糖核苷存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促作用扩增DNA
1. 反应体系具备的条件
（1）要有与被分离的目的基因5’和3’端序列互补的DNA
（2）具有热稳定性的酶，如TaqDNA聚合酶
（3）dntp（4）作为模板的DNA分子
2.过程：
（1）变性：模板DNA置于95°的高温下，使双链DNA的双链解开变成单链。
（2）退火：将反应体系的温度降至55°左右，使得一对引物分别与变性后的两条模板链相配对。
（3）延伸：将反应体系温度调整到TAP DNA聚合酶作用的最适温度72°，然后以目的基因为模板，合成新的DNA链。
3.引物设计原则
（1）3’末端序列不能有明显的互补性（2）避免引物分子内序列互补
（3）注意熔点温度（4）注意引物内稳定性
（5）检查其同Alu序列或其他短的重复序列的互补性
4.PCR中各成分及作用
（1）PCR反应的缓冲液:起缓冲作用，镁离子能影响反应的特异性和扩增片段的产率。
（2）模板DNA：作模板（3）底物DNTP浓度：dnt浓度过高可加快反应速度，同时增加错误和成本，过低，会导致反应速度下降，但可提高实验的精确度。
4种dNTP在使用时必须注以等量浓度配制，以减少错配和提高使用效率。
（4）引物：作DNA合成的起始引物，两个引物在模板DNA上的结合位点之间的距离
决定了扩增片段的长度。
（5）DNA聚合酶及其浓度：催化核苷酸与引物结合，按着模板DNA的顺序合成DNA 链。
五、论述
云南香蕉冻害、病害，从有关组培、基因工程、病毒检测、DNA提取、PCR扩增等进行论述解决这个问题。
主观题：答题思路：
冻害：用基因工程中的转基因来解决，转入抗冻基因。
病害：1、生产脱毒苗。
2、转抗性基因香蕉。
脱毒苗的检测方法1、形态检测法，2、指示植物法3、血清学检测法。
4、分子生物学检测法。
5、电子显微镜检测法。
组培-----脱毒苗的培育-----脱毒苗的检测
基因工程：1、提取抗冻基因或抗病毒基因，提取的方法有CTAB法和SDS法。
2、将DNA导入受体细胞：外源裸露DNA转化方法；载体介导的DNA转化。
3、组织培养成完整植株
转基因植物的鉴定：1、利用选择标记基因和报告基因鉴定。
2、利用重组DNA分子特征鉴定3、利用外源基因的转录或表达鉴定。
最后，扩大培养，生产种苗。
园艺植物生物技术名词解释
园艺植物生物技术名词解释
园艺植物生物技术名词解释如下：
园艺植物生物技术：以园艺植物为材料，利用生物技术，制造或改良种质或生产生物制品的一门技术，它是园艺学与生物技术的交叉技术学科，是在植物组织培养、植物细胞工程、植物染色体工程、植物基因工程、生物信息学等现代生物技术手段基础上产生和进展起来的。
这些先进的现代生物技术在园艺科学上的应用构成了园艺植物生物技术的主要内容。
园艺植物生物技术的发展趋势是使产业化步伐加快，由转移抗性性状向优质、高产等多种优良性状发展，常规育种与生物技术紧密结合的实用化进程加速（分子标记技术、胚拯救技术和细胞融合技术、单倍体培养技术、体细胞无性系变异与筛选技术），基因表达与功能研究更加深入植物组织培养部分。
园艺生物技术复习资料
园艺生物技术复习资料园艺生物技术复习资料园艺生物技术是指将生物学的原理和技术应用于园艺领域，以提高植物的生长和产量，改善植物的品质和抗逆性。
它涉及到许多方面的知识，包括植物生理学、遗传学、分子生物学等等。
本文将针对园艺生物技术的一些重要内容进行复习资料的整理和总结。
一、植物生理学在园艺生物技术中的应用植物生理学是研究植物生长和发育过程中的生理机制的学科。
在园艺生物技术中，植物生理学的应用非常广泛。
例如，通过研究植物的生长调节物质，可以优化植物的生长和发育过程。
植物生长调节物质包括植物激素和其他生物活性物质，它们可以通过调控细胞分裂、细胞扩张和细胞分化等过程来影响植物的生长和发育。
此外，植物生理学还可以研究植物的抗逆性，通过调控植物的抗逆性来提高植物的适应性和生产力。
二、遗传学在园艺生物技术中的应用遗传学是研究遗传变异和遗传传递规律的学科。
在园艺生物技术中，遗传学的应用非常重要。
通过遗传学的研究，可以改良植物的遗传性状，提高植物的产量和品质。
例如，利用杂交育种的方法，可以将两个具有不同有益性状的亲本进行杂交，产生具有更好性状的杂种。
此外，遗传学还可以通过基因工程技术来改良植物的基因组，使其具有更好的抗病性、抗虫性等性状。
三、分子生物学在园艺生物技术中的应用分子生物学是研究生物分子结构和功能的学科。
在园艺生物技术中，分子生物学的应用也非常广泛。
例如，通过研究植物的基因组和基因表达调控机制，可以揭示植物的生长和发育过程。
此外，分子生物学还可以用于植物的基因工程研究，通过转基因技术将外源基因导入植物中，实现对植物性状的改良。
分子标记技术也是分子生物学在园艺生物技术中的重要应用之一，它可以用于植物的遗传标记和品种鉴定。
四、其他园艺生物技术的应用除了植物生理学、遗传学和分子生物学外，园艺生物技术还涉及到其他一些重要的内容。
例如，组织培养技术是一种常用的园艺生物技术方法，它可以通过培养植物的组织和细胞来繁殖植株和改良植物的性状。
0805园艺生物技术
1、有哪些方法可以用于植物病毒种类的鉴定？答：一、生物学鉴定植物病毒都有一定的寄主范围，并在某些寄主植物上表现特定的症状，这种能鉴别某种病毒的植物通常称为指示植物或鉴别寄主。
鉴别寄主可以是草本和木本植物。
常用的接种方法包括汁液摩擦接种和嫁接传染。
1、草本指示植物汁液摩擦接种鉴定常用的草本指示植物种类：主要包括藜科（昆诺藜、苋色藜、墙生藜）、茄科（心叶烟、克利夫兰烟）、豆科（菜豆）、葫芦科（黄瓜）、苋科（千日红、青箱）等植物。
2、木本指示植物鉴定所有的果树及林木植物病毒都可通过嫁接传染，当病毒侵染其自然寄主不表现明显症状时，可通过嫁接接种到对病毒敏感的木本指示植物上进行鉴定。
常用嫁接接种方法①双重芽接法②双重切接法③指示植物直接嫁接法二、血清学检测方法是检测植物病毒最为常用和有效的手段之一。
它具有快速、灵敏和操作简便等特点。
大多数的植物病毒都可采用血清学技术进行检测，采用该项技术的前提条件是要获得待检病毒的特异抗体。
常用血清学检测方法:用于病毒检测和鉴定的血清学方法包括沉淀反应、凝聚反应、免疫电镜和酶联免疫吸附技术等。
早期应用较多的是沉淀反应，包括试管沉淀、玻片沉淀、毛细管沉淀和免疫双扩散等，这些方法主要是通过观察病毒和相应的抗体形成复合物产生的沉淀反应，而作出判断。
受灵敏度的限制，上述方法在园艺植物病毒检测中较少应用。
目前，植物病毒检测技术逐步向自动化、标准化、定量化和快速灵敏的方向发展。
免疫电镜和酶联免疫吸附技术是较新近发展起来的病毒血清学检测技术，具有灵敏度高的特点，在植物病毒的鉴定、定量和定位分析中得到广泛的应用。
三、核酸分析核酸分析分为直接对病毒及类病毒基因组核酸电泳分析、对已知的基因组核酸序列进行特异PCR扩增，观察特异性条带结果对这些病原进行鉴定。
1、电泳分析该法适用于类病毒的检测。
类病毒为环状单链RNA分子，大小为246-375个核苷酸（nt），内部碱基高度互补。
在自然情况下形成棒状或三叶草状的二级结构，在常规电泳条件下迁移较快；在变性条件下，由于二级结构破坏而成环状，在电泳介质中迁移减缓，而与其他小分子物质分开，表现出类病毒的特有电泳条带。
园艺植物生物技术
遗传标记
1
定义：遗传标记是指与目 标性状紧密连锁、同该性 状共分离且可遗传的等位
基因变异
4
生化标记
2
形态学标记
5
分子标记
3
细胞学标记
常用分子标记原理及实验技术
…… SNP AELP
06 05
04
01 02
03
RFLP
RAPD
将要被淘汰
SSR
感谢聆听
基因工程的分子生物学 基础
基因
基因转录有关 的结构
真核生物基因 表达调控
基因
基因是一段具有遗传功能的特定核 苷酸序列
启动子
定义：DNA分子上与RNA聚合酶特异结合而使转录起始的部位 类型
组成型启动子 组织特异型启动子 诱导型启动子
基因转录有关的结构
外显子
基因DNA中的编码序列，能够转录成RNA，进而翻译成蛋白质
PCR技术
一个基本的PCR反应一般包含7种基本成分
可以改善较短DNA片段扩增的一价阳离子
PCR技术
类型
RT-PCR
RACEPCR
实时荧光 定量PCR
数字PCR
基因工程
基因的分离与克隆
常用的 工具酶
基因克 隆载体
常用的工具酶
限制性核酸内切酶 有三种类型，II
型使用最广泛 ……
基因克隆载体
理想的载体应具有哪些特点
核酸的分离
常用CTAB法和SDS法
步骤
细胞 破碎
释放 核酸
纯化 核酸
加无水乙醇析出DNA沉淀 再加70-75%酒精洗涤
DNA及RNA纯度评定
DNA
D（260nm）/D（280nm）应为1.8 左右，若样品中有蛋白质、小分子片段 或多酚类物质污染时，则明显低于1.8， 若大于2.0，说明有RNA污染
生物技术 园艺植物基因工程步骤
生物技术园艺植物基因工程步骤
园艺植物基因工程是指通过生物技术手段对园艺植物的基因进行改变或调控，以获得所需的遗传特性。
其步骤主要包括以下几个方面：
1. 目标设定：确定要改变的遗传特性和目标基因，例如提高植物的产量、抗性、品质等。
2. 基因克隆：从目标植物中提取DNA，并使用分子生物学技术将目标基因扩增、纯化，以获得目标基因片段。
3. 基因构建：将目标基因片段插入植物基因工程载体（例如农杆菌载体），并利用适当的限制性内切酶将其与载体DNA连接起来，形成重组DNA。
4. 转化方式选择：选择适合的转化方法将重组DNA导入目标植物细胞，主要有农杆菌介导转化、生物弹射法或冷冻融合法等。
5. 遗传转化：将经过构建的重组DNA导入植物细胞，使目标基因插入植物染色体，形成转基因植物。
6. 试管繁殖：对转基因植物进行离体培养，通过细胞分裂和组织增殖等技术，大规模繁殖转基因植物。
7. 筛选和鉴定：利用分子生物学和生化分析等技术对转基因植物进行鉴定和筛选，确认目标基因的存在和表达情况。
8. 田间试验和推广：在试验田或实际种植场进行转基因植物的田间试验，评估其生长发育、产量、品质和抗性等性状，同时进行安全性评估和环境风险评估。
9. 商业化推广：通过权威部门的安全评估和监管审核，将合格的转基因植物品种进行商业化推广，使其广泛应用于园艺产业。
需要注意的是，园艺植物基因工程步骤可能会因具体目标和植物而有所差异，以上步骤仅供参考。
生物技术在园艺育种中的应用
（三）原生质体培养与体细胞杂交
• 1.原生质体的分离 • 2.原生质体的培养 • 3.体细胞杂交 ※般程序主要包括三个环节 • （1）原生质体融合 • （2）杂种细胞筛选 • （3）体细胞杂种植株鉴定
（四）细胞工程在园艺植物育种中 的应用
• • • • • • 1.加速育种进程 2.诱发和离体筛选突变体 3.克服远缘杂交困难 4.提供育种中间材料 5.种质资源长期保存 6.克服远缘杂交与种子萌发中的障碍
三 转基因作物的安全性
（1）转基因作物的环境安全性 转基因作物演变为农田杂草的可 能性 基因漂流到近缘野生种的可能性 对自然生物类的影响 （2）转基因作物的食品安全性 有毒物质 过敏源
转基因产品具有一定的危险性，因此必须从 对人类健康、社会安全和生态平衡的角度 出发采取行之有效的措施： 加强转基因产品的安全性研究 建立完善的检测体系与质量审批制度 加强宏观调控 加强对公众的宣传和教育 为公众提供良好的咨询服务 规范转基因产品市场
※突变体的筛选方法 • 直接法：指新的突变表现型在选择条件下 能优先生长，或预期在感官上可测定其它 可见的变异。可分为正选择和负选择2种类 型。 • 间接法：借助与突变表现型有某种相关的 特征作为间接选择指标的选择方法。 • 此外，还可利用RFLP、 RAPD 、AFLP 、 SSR、 SCAR等分子标记进行选择。
第一节 细胞工程与育种
• 基本概念 • 1.外植体：用于培养的离体材料叫外植体。 如：分生组织 、输导组织 、薄壁组织等组 织，根、茎、叶、花、果实等器官，合子 胚、株心胚、子房、胚乳以及成熟未成熟 的胚胎等。 • 2.继代培养:由最初培养新增殖的组织继续 转入新的培养基上培养的过程。
• 3.无性系:由同一外植体反复继代培养后得 到的一系列无性繁殖后代称为无性系。 • 4.愈伤组织：在培养过程中，从植物各种器 官、组织的外植体增殖形成的一种无特定 结构和功能的细胞团。 • 5.胚状体：由外植体或愈伤组织产生的，与 正常受精卵发育方式类似的胚状结构体称 为胚状体。
生物技术在园林植物育种中的应用
生物技术在园林植物育种中的应用园林工程建设是一项公益性、民生性工程，做好植物育种工作至关重要。
新时期，传统育种技术逐渐无法满足育种工作需求。
在园林植物育种中应用生物技术，能够更好地满足新时期园林植物育种及绿化需求。
一、生物技术概述生物技术属于新型综合性技术，该技术涵盖了多项技术，包括:发酵工程技术、基因工程技术，细胞工程技术、酶工程技术等等。
生物技术是在传统技术的基础之上，融合现代技术的所形成的。
传统生物技术的应用，主要体现在种子选育、啤酒发酵等领域，现代生物技术的应用，主要体现在试管核酸技术、细胞生物学技术、细胞融合技术等等。
和传统生物技术相比较而言，现代生物技术的优势更加明显，目前被广泛应用于各个领域当中，为人们的工作及生活带来了极大的便利，极大地促进了社会发展与进步。
二、生物技术在园林植物育种中的具体应用分析(一)细胞工程育种技术。
现代生物技术凭借自身的诸多优势，被广泛应用于各个领域当中。
在园林植物育种中，生物技术发挥着至关重要的作用，被越来越多的人所关注。
细胞工程育种技术作为现代生物技术的重要体现，利用该技术进行园林植物育种，主要以应用原生质体培养技术、体细胞融合及杂交技术等为主。
充分结合园林植物的特点，对不同植物细胞进行融合，并借助细胞分子技术来改变植物原有性质，培养新型的植物品种。
在细胞工程育种技术中，原生质体培养技术的应用最为广泛。
生物学理论下，植物细胞和动物细胞相比较而言，具备了细胞壁，会给不同细胞的融合造成一定的影响。
然而借助原生质体培养技术，则能够将上述阻碍消除掉，融合多种不同植物的细胞，并获得新的植物种类，使得园林植物种类更加丰富。
现阶段，在园林植物育种工作中，细胞工程育种技术发挥着至关重要的作用，并且取得了良好的效果。
以菊花为例，是园林绿化常见植物，具备较高的观赏性，同时也具备一定的商业价值。
借助细胞工程育种技术展开菊花育种，能够实现组织培养、脱毒苗和大规模繁殖，并且能够更加稳定地遗传菊花的优良特性。
生物技术在园艺作物上的应用
生物技术在园艺作物上的应用
生物技术在园艺作物上的应用主要体现在以下几个方面：
1. 改良作物品质和提高产量：通过基因工程技术，可以克隆出参与光合作用的基因，保证作物产量的提高。
此外，利用生物技术还可以增加园艺作物器官中必需氨基酸或蛋白质的含量，改变作物中油脂的某一成分的含量，以及提高淀粉的质量与含量。
2. 提高园艺作物的抗性：生物技术可以帮助园艺作物抵抗各种逆境，包括抗虫、抗病毒、抗病、抗旱、抗盐碱等。
例如，通过基因工程技术可以培育出抗虫的园艺作物，减少农药的使用，降低环境污染。
3. 促进园艺作物的繁殖：通过花粉花药培育和原生质体融合等育种技术，可以促进园艺作物的繁殖，缩短育种周期，提高育种效率。
4. 检测和鉴定园艺作物的品种和品质：利用生物技术可以对园艺作物的品种和品质进行快速、准确的检测和鉴定，有助于维护市场秩序，保障消费者权益。
总的来说，生物技术在园艺作物上的应用具有广阔的前景，不仅可以提高作物的产量和品质，还可以增强作物的抗性，促进作物的繁殖，以及检测和鉴定作物的品种和品质。
随着科技的不断发展，生物技术在园艺作物上的应用将会越来越广泛。
园艺生物技术
园艺生物技术一、名词解释1、组织培养：指在无菌条件下，将植物的离体器官、组织、细胞、胚胎、以及原生质，接种在到人工配制的培养基上，在人工控制的条件下进行培养，使其生长、分化，并长成完整植株的过程。
2、植物细胞的全能型：指植物的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整的植株的潜在能力。
3、植物细胞分化：指在个体发育过程中，细胞在邢台、结构和功能上的特化过程。
4、无病毒苗：是指不含有该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现为阴性反应的苗木。
5、立体快速繁殖：指通过无菌操作，将外植体接种于培养基上，在人工控制的营养和环境条件控制下进行培养，，使其在较短的时间内快速的再生出大量完整植株的方法。
6、脱分化：指植物离体的器官、组织、细胞在培养条件下，经过多次细胞分裂，而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团，并使其恢复到胚性细胞状态的过程。
7、再分化：指离体培养的植物组织或细胞可以由脱分化状态再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器官、甚至是最终再生成完整植株的过程。
8、体细胞无性系变异：在培养阶段发生变异，进而导致再生植株亦发生遗传改变的现象。
9、种质资源的离体保存：是指对离体培养的小植株、器官、组织、细胞或原生质等材料，采用限制、延缓或停止其生长的处理使之保存，在需要时重新恢复其生长，并再生植株的方法。
10、园艺植物的细胞工程：指应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的试验方法和技术，在细胞水平上研究改造园艺植物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或园艺植物新品种的科学。
11、基因工程：将外源基因通过体外的重组后导入受体细胞内使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译、表达的系列操作技术总称。
12、限制性内切酶：从细菌中分离提纯的内切酶，可以识别并切开核酸序列特定位点----分子手术刀。
13、基因文库：指将基因组DNA通过限制性内切酶部分酶解后所产生的基因组DNA 片段随机地同相应的载体重组、克隆，所产生的克隆群体代表了基因组DNA的所有序列。
园艺植物生物技术
6下列不属于现代生物技术研究的内容有有性杂交
简答题
1. 简述目前园艺植物生物技术的主要研究内容。
答：在园艺植物中主要是细胞工程和基因工程。具体包括：组织培养、原生质体融合、病毒脱除、分子标记、基因克隆和遗传转化等。
2. 简述PCR反应体系的主要成分和反应程序的关键步骤。
5、无土栽培过程中应注意哪些问题？ ???1）、配制营养液时，忌用金属容器，更不能用它来存放营养液，最好使用玻璃、搪瓷、陶瓷器皿。? ???2）、配制营养液时如使用自来水，应加入少量的乙二胺四乙酸钠或腐殖酸盐化合物来处理水中氯化物和硫化物。 ???3）基质应选用具有保水性、排水性和一定强度及稳定性，而且无害的物质。???4）在栽培中，需经常测营养液中的pH，使其保持恒定。???5）在水培中，植物需从营养液中吸氧，注意增加营养液中氧的含量。
与其它遗传标记相比较，DNA分子标记具有诸多优点：
1）能对生物各发育时期的个体、各组织、器官和细胞进行检测，直接以DNA的形式表现，不受环境影响，不存在基因表达与否的问题；
2）数量丰富，遍及整个基因组，可检测座位几乎无限；
3）遗传稳定，多态性高，自然界存在许多等位变异，无须人为创造；
4）对生物体的影响表现为“中性”，不影响目标性状的表现，和不良性状无必然连锁；
⑵、细胞标记（Cytological Markers）
细胞标记主要指染色体组型和带型。染色体组型是指生物体细胞所有可测定的染色体特征总称。包括染色体总数、染色体组数、每条染色体大小和形态、着丝点的位置等。
它是物种特有的染色体信息之一，具有很高的稳定性和再现性。对鉴别真假杂种、对研究染色体结构和数目的变异、物种起源和生物的遗传进化等具有重要价值。