普洱茶生茶抗疲劳作用研究_黄业伟
不同茶叶中所含结合咖啡因比例的分析
不同茶叶中所含结合咖啡因比例的分析黄业伟;徐欢欢;王素敏;李润博;王宣军;盛军【摘要】分析比较不同茶叶的咖啡因含量及所含结合咖啡因的比例,为茶叶中咖啡因的准确分析、茶叶加工过程中茶多酚的氧化程度监测以及不同茶叶中咖啡因的功能差异研究提供理论参考.以具有代表性的中国六大茶类样品为试样,利用低pH沉淀法结合高效液相色谱法(HPLC)检测不同茶叶的咖啡因含量及其结合情况.结果表明,多酚类物质氧化程度越大的茶叶所含结合咖啡因的比例越大.其中,深度发酵的普洱茶(熟茶)和六堡茶中结合咖啡因的比例最大(20％左右);而不发酵的绿茶中结合咖啡因的比例最低(＜2％).结合咖啡因的比例指标在准确判定茶叶加工过程中多酚类物质的氧化程度以及不同来源咖啡因的功效差异研究中具有重要的应用潜力.【期刊名称】《云南农业大学学报》【年(卷),期】2015(030)002【总页数】6页(P228-233)【关键词】茶叶;结合咖啡因;咖啡因;六大茶类【作者】黄业伟;徐欢欢;王素敏;李润博;王宣军;盛军【作者单位】吉林大学生命科学学院,吉林长春130012;云南农业大学,普洱茶学教育部重点实验室,云南昆明650201;云南省茶深加工工程技术研究中心,云南昆明650201;云南农业大学,普洱茶学教育部重点实验室,云南昆明650201;云南省茶深加工工程技术研究中心,云南昆明650201;云南农业大学,普洱茶学教育部重点实验室,云南昆明650201;云南省茶深加工工程技术研究中心,云南昆明650201;云南农业大学,普洱茶学教育部重点实验室,云南昆明650201;云南省茶深加工工程技术研究中心,云南昆明650201;云南农业大学,普洱茶学教育部重点实验室,云南昆明650201;云南省茶深加工工程技术研究中心,云南昆明650201;云南农业大学,普洱茶学教育部重点实验室,云南昆明650201;云南省茶深加工工程技术研究中心,云南昆明650201【正文语种】中文【中图分类】S571.1咖啡因(caffeine, 1, 3, 7-三甲基黄嘌呤)是一种天然生物碱[1]，作为一种世界上应用最为广泛的精神类药物，咖啡因存在于日常生活中的茶叶、咖啡、可可饮料、巧克力以及一些软饮料中[2-4]。
生普洱茶的功效与作用
生普洱茶的功效与作用导语：普洱茶分为生茶和熟茶。
生茶是指用云南大叶种晒青毛茶为原料，以自然的方式陈放，不经过人工“发酵”、“渥堆”处理，但经过加工整理、修饰饰形状的各种云南茶叶(饼茶、砖茶、沱茶)的统称。
大家都知道普洱茶的功效与作用有哪些吗?店铺这就告诉大家，快看看吧!区别生茶新鲜的茶叶采摘后以自然的方式陈放，未经过渥堆发酵处理为生茶。
生茶茶性较烈，刺激，新制或陈放不久的生茶有强烈的茶味，涩味，汤色较浅或黄绿。
生普洱减肥效果好一点但是对胃的刺激比较大。
不建议长期喝生茶。
熟茶普洱茶在制作过程中经过渥堆发酵使茶性趋向温和，称为熟茶。
1973年勐海茶厂与昆明茶厂联合研制渥堆发酵法成功之后，当年昆明茶厂生产的茶砖因其茶汤金黄润泽，参枣味浓郁，倍受普洱茶人推崇。
熟普具有温和的茶性，茶水丝滑柔顺，醇香浓郁，更适合日常饮用。
冲泡冲泡普洱茶原则上应选择软水，如纯净水、矿泉水等，也可用符合饮用水标准的自来水。
如本地能找到上佳山泉水，那就更好，好的山泉水必须符合“清、轻、甘、活、洁、洌”六个要素，清是清澈而透明，轻是水的表面张力大，甘是甘甜可口，活是活水而非死水，洁是清洁无污染，洌是冷洌。
泡茶时要掌握好水温，水温对茶汤的香气、滋味都有很大的影响，普洱茶要求用100℃的沸水冲泡。
投茶量的多少可依个人口味而定，一般以3-5克茶叶，150毫升的水为宜，茶与水的比例在1:50至1:30之间为使茶香更加纯正，有必要进行洗茶即第一次冲下的沸水立即倒出，洗茶可进行1-2次，速度要快，以免影响茶汤的滋味。
正式冲泡时，1分钟左右即可将茶汤倒入公道杯中，叶底继续冲泡，随着冲泡次数的增加，冲泡时间可慢慢延长，从1分钟逐渐增加至数分钟，这样泡出的茶汤才比较均匀。
生普洱茶的功效与作用1、清热止渴、消暑去燥新制成的生普洱由于没有经过充足的陈放贮藏，使得茶叶中所含有的咖啡碱、茶多酚等基本成分没能充分的转化，这样茶叶的味道也就更为浓郁，茶性更烈、更刺激，使用普洱生茶冲泡出的茶汤入口苦涩，这时它的味道接近于绿茶的口味，在夏季饮用就能够起到消暑去燥、清热止渴的作用。
不同存放时间普洱茶内含成分变化研究
２２ ２ 普 洱茶 存放 过 程 中茶 多酚 含 量 的 变化 ．．
茶
多酚 是茶 叶 中 的重要 物 质 ， 也是 形 成 普 洱 茶 品质 的
重 要 成分 。 由于 普 洱 生 茶 与 普 洱 熟 茶 加 工 工 艺 不 同 ， 多酚含 量 在存 放初 期差 异较 大 ， 茶 茶多酚 含 茶 熟 量 在 ９％ 左右 ， 茶含 量在 ｌ 生 ５％左 右 。从 表 ２和 图 ２可 以看 出 ， 经过 一定 时 间的存 放 后 ， 多 酚含 量 均 茶
量也 呈减 少趋 势 ， 主要 内含成 分 中含量 减少最 多 、 是
降幅最大的 １ 种成分。其 中， 普洱熟茶 的含量减少 最多 ， 降幅分别达 ３ ．５％和 ２ ．Ｏ％； ７２ ７９ 普洱生茶降
幅为 ｌ ． ６％ 。 ６３
２２４ 普 洱 茶存 放 过程 中水浸 出物 含 量 的 变化 ．． 茶 叶水 浸 出物 是指 能溶 于水 的物 质总称 。水 浸 出物 含 量 的高低 反 映 了茶 叶 中可 溶性 物 质 的多少 ， 志 标 着 茶汤 的厚 薄 、 味的浓 强程 度 ， 而在 一定 程度 上 滋 从
２１ ０２年 ２ ５卷 １ 期
Ｖ０． ５ 】２ Ｎ０ １ ．
西
南
农
业
学
报
Ｓ ｕｔｗｅｔＣｈｎ ｏ ｒ ｌｏ ｒ ｕｔｒ ｌＳ ｉｎ ｅ ｏ ｈ ｓ ｉａＪｕｎａ ｆＡｇｉ ｌｕａ ｃｅ ｃ ｓ ｃ
文章编号 ：０ １— ８ ９ ２ １ ） １ １１— ４ １０ ４ ２ （０ ２ ０ —０ １ ０
呈减少趋势 ， 生茶含量减少趋势较熟茶明显 ， 降幅在 ８％ 一ｌ ９％ ， 生茶 减 少量 约 为熟 茶 的 ２倍 多 。茶 多 酚含 量 的减 少是 由于普 洱茶在 存放 过程 中受 到外界
抗疲劳益生茶配方及功效研究
胃的方式给药，空白对照组灌输等量生理盐水，连续灌胃
10 d。各组小鼠于实验第 1 d 开始，每天在给药 40 min 后
进行为时 30 min 的游泳训练。最后一次灌胃给药 40 min 后，
给小鼠尾部施加 10% 体重的负荷进行小鼠负重游泳实验，
放入游泳箱中进行观察，游泳箱内水深 30 cm，水温为（26.
44·FOOD INDUSTRY
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益生茶对小鼠负重游泳能力的影响。KM 小鼠雌雄各半，
随机分为 5 组，每组 10 只。每天分别按益生茶低、中、高
剂量组，四叶参对照组按实验分组中的给药剂量，采用灌
表 2），且益生茶高剂量组的延长小鼠缺氧存活时间显著高
于四叶参对照组（P ＜ 0.05），说明益生茶实验组的其他组
分对小鼠耐缺氧的能力起到了协同效应。
耗氧量测定结果表明，各实验组均能明显降低不同时
间的小鼠累计耗氧量，但随观察时间的延长，各实验组与
对照组的差异不断缩小，至小鼠死亡时的总耗氧量各组间
差异无统计学意义。
为克服上述不足，我公司制备出一种具有抗疲劳功效， 且配制饮用方便、无毒副作用、价格低廉、口感适宜的益 生茶。其可提神抗疲劳、清热解毒、清肝润肝、养阴生津， 能有效改善因过度疲劳而引发的身体不适症状（专利 ：一 种护肝润肺茶及其制备方法，专利号 ：201210167059.0）。 其中白茯苓、菊花、草决明、四叶参有宁心安神、消除疲 劳作用，特别是四叶参抗疲劳作用尤为明显。本文基于我 公司的专利产品益生茶，对其抗疲劳功效进行研究。
实验材料
材 料。 四 叶 参、 石 蝉 草、 草 决 明、 菊 花、 罗 汉 果 花、 枇杷花、生地、覆盆子、白茯苓、葛根、昆明种（KM）小 鼠等
茶叶抗疲劳作用的研究进展
屈 萍 等以优秀男性 运动员运 动 （ Ｉ 赛艇运动 员测试 Ｂ Ｎ含量 。结果发现 ，普洱茶特征成分提取物具有显著 Ｕ
２ ０ ｍ￣功仪 ，足球 运动员测试 ２ ０ ｍ跑 ） ００ ８０ 后服药 ， 日 次 的抗疲 劳作 用 ，普洱茶抗疲劳作用并 非完全 由咖啡碱所
测血 清中血尿 素（Ｕ 、 清丙二醛 （ Ａ 含量 以及血清肌 引起 ， Ｂ ）血 ＭＤ ） 而茶褐素 、 茶多糖 以及茶蛋 白等组成 的复合体 同样
１３１茶氨酸的抗疲 劳作 用 ．．
参考文献 ：
［ ］Ａ ｊ ｌ Ｓ ｎ ａ， ｕ ｉ ｄ ｒＫ ｕ ． ａ ｅ ｎ Ｔ ｒｅ ｔ ａ．Ｇ ｅ ｎ １ ｎ ａｉ ｉ ｇ ｌ Ｓ ｒｎ ｅ ａ Ｎ ｖ ｅ ｉｋ ｙ ｅ ． １ ｒ ｅ ｒ
Ｔ ａ Ｅ ｔ ａ ｔ ａ ｄ Ｃ ｔ ｃ ｉ ｍ ｌｏ ａ ｅ Ｃ ｒ ｎ ｃ Ｆ ｔ ｇ ｅ ｅ ｘ ｒｃ ｎ ａ ｅ ｈ ｎ Ａ ｅ ｉ ｒ ｔ ｈ ｏ ｉ ａ ｉ ｕ －
研究结果来看 ， 叶的抗疲劳作用 比较 明显 。 茶 这就可 以通
除 了上述各茶类 ，另有 以茶 叶为主 ，配 以适量其它 过服用 茶叶功能成分或饮茶来减轻人们 日常疲劳及运动 功能成分制成 的保健 茶也有较好的抗疲劳作用 ［６８ ６ －Ｉ ， １。 １ １ ． 叶功 能成 分的抗疲劳作 用研究进展 ３茶
及茶类发展 ， 可分 为绿茶 、 黄茶 、 黑茶 、白茶 、青茶 、黑 量组效果显著 。 茶六大类 。 六大茶类 的组成成分有所差异 ，因此 ， 其抗疲 劳 的效果 和功能成分也可能有所不 同。
１２１ 绿 茶 抗 疲 劳作 用 的研 究 结 果 ．．
廉 志顺 『等研究表 明，普洱茶抗疲劳功效随贮存 时 Ｊ 。 间延长而降低 ，约 １ 年后不再降低 。这可能一方面 由于 ０ 长期贮存过程 中 ， 普洱茶在空气 、 水分和微生物 的作用下
红茶抗疲劳功效研究
2182011, Vol. 32, No. 01食品科学※营养卫生红茶抗疲劳功效研究黄业伟，张冬英，邵宛芳*，袁赛艳(云南农业大学龙润普洱茶学院，云南昆明650201)摘要：目的：探讨红茶抗疲劳的作用，为红茶保健作用提供一定的实验依据。
方法：4组昆明种小鼠，每组20 只，分别连续灌胃生理盐水(对照组)和不同剂量的红茶水浸提物 30d。
按照小鼠体质量给予不同体积的受试物，自由摄食与饮水。
研究红茶对小鼠负重游泳时间、血乳酸(BLA)、血尿素氮(BUN)、血乳酸脱氢酶(LDH)及肝糖原(LG)和肌糖原(MG)等疲劳指标的影响。
结果：与对照组相比，红茶低、中、高剂量组小鼠负重游泳时间均有延长，B LA、B U N含量降低；L D H活力升高；MG、L G含量也有显著提高。
结论：红茶具有抗疲劳作用。
关键词：红茶；抗疲劳；功效Anti-fatigue Effect of Black TeaHUANG Ye-wei，ZHANG Dong-ying，SHAO Wan-fang*，YUAN Sai-yan(College of Long Run Pu-erh Tea, Yunnan Agricultural University, Kunming650201, China)Abstract：Objective: To check if black tea has anti-fatigue effect on mice or not, which will provide a theoretical basis for clarifying the exploitation value of the resource to be developed into healthcare products. Methods: Kunming mice were randomly divided into four groups with 20 mice in each group. The mice in three experimental groups were administered with different doses of black tea extract once per day for consecutively 30 days and the mice in the control group were treated with normal saline. After the last administration, the weight-loaded swimming time, blood lactic acid (BLA), blood urea nitrogen (BUN), blood lactate dehydrogenase (LDH), muscle glycogen (MG) and liver glycogen (LG) of each group of mice were determined. Results: Compared with the control group, the three-dose black tea treatment groups revealed a prolonged swimming time, reduced contents of BLA and BUN, and increased LDH activity and MG and LG contents. Conclusion: Black tea has strong anti-fatigue capability.Key words：black tea；anti-fatigue；effect中图分类号：TS272.5 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2011)01-0218-03 红茶是中国六大茶类中最具影响力的茶类之一，中有抗肿瘤、防癌的功效[ 6 - 7 ]。
国家科学技术进步奖提名书
国家科学技术进步奖提名书(2018年度)一、项目基本情况专业评审组：序号：奖励类别：编号：国家科学技术奖励工作办公室制二、提名意见（适用于提名机构和部门）二、提名意见（适用于提名专家）三、项目简介普洱茶传统加工工艺由摊晾、杀青、揉捻、晒青、渥堆、干燥、压制、包装组成。
项目针对普洱茶加工技术落后、精深加工不足、健康功效缺乏科学依据等制约普洱茶产业发展的关键问题进行了系统研究，创新普洱茶产业关键技术，提升了普洱茶从初加工到精深加工的技术水平，构建了普洱茶自动化加工技术体系，并进行成果转化和产业化应用，实现了普洱茶初加工到精深加工产品的机械化和标准化生产，开发出普洱茶精深加工系列产品；研究发现了茶多酚抗炎作用新靶点，揭示了普洱茶主要功效机理；选育出抗虫茶树新品种，建立了高效生态茶园栽培技术体系，从源头上保障了茶叶的质量安全，并取得了显著经济效益和社会效益。
主要创新点如下：一是构建了普洱茶自动化加工技术体系，开发出普洱茶精深加工系列产品。
该项目创新传统工艺，研制出自动化摊晾—电磁+微波杀青—自动化揉捻—阶梯式太阳能晒青—数字化发酵—机械化压制和包装一体化的普洱茶初加工技术体系；开发出自动投料—数控罐组逆流循环提取—二次连续离心除杂分离—自动出渣—快速干燥—香气回收—自动分装的普洱茶智能化深加工工艺和设备。
筛选获得17种起主要作用的耐热微生物；阐明了普洱茶发酵过程中微生物区系特征和茶多酚氧化聚合形成茶褐素的机理，明确了茶褐素的理化特征并建立了检测方法；该项目开发了“帝泊洱速溶普洱茶”、“茶褐素”、“茶纤素”新产品以及茶多酚食品添加剂等系列深加工产品，延长了普洱茶产业链条。
研发的速溶普洱茶“卓清”成为我国第一个纯茶辅助降血糖保健食品。
项目制定了速溶普洱茶标准3个，创新了普洱茶从初加工到精深加工的技术体系。
二是首次发现茶多酚作用新靶点，阐明了普洱茶主要功效机理。
该项目系统研究了茶叶抗炎以及普洱茶的健康功效和作用机理，为科学饮茶提供了科学依据。
刺五加水提物对小鼠自主活动的影响研究
[2] 戎立保 . 刺五加水提物对小鼠 抗疲劳及抗缺氧能力的影响 [J]. 内蒙古 中医药 ,2014,33(29):55.
药 ,2013,20(18)项目（编号：2016FD026）； 云 南 省 重 大 科 技 专 项 计 划（ 编 号： 2018ZG010）。
作者简介：刘提提（1990—），女， 汉族，山东济宁人，在读博士研究生。 研究方向：功能食品开发和保健功效 机理。
[3] 李 勇 , 马 双 刚 . 刺 五 加 水 溶 性 成 分 研 究 [J]. 中 国 当 代 医
169 Dec. 2018 CHINA FOOD SAFETY Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
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科技文苑
刺五加水提物对小鼠自主活动的影响研究
□ 刘提提 干春霞 陈 飞 尹 丹 徐欢欢 云南农业大学普洱茶学教育部重点实验室 云南农业大学食品科学技术学院 黄业伟 云南农业大学普洱茶学教育部重点实验室 云南农业大学理学院
摘 要：随着人类生活节奏的加快，咖啡因类饮料（如茶叶、咖啡、可乐等）已经成为人们重要的提神饮品。但咖啡 因是一种天然生物碱，具有兴奋中枢神经系统的作用，过度饮用将会产生不同程度的副作用，影响生活质量造成失眠等症状。 基于此，本文利用小鼠进行研究，探讨刺五加水提物对小鼠自主活动的影响机理，从而探索咖啡因对神经兴奋作用的抑制 效果。
图 1 小鼠的自主活动水平 注：数值以 x-±SEM 表示（n=6），
与 Caffeine 组相比，*p ＜ 0.05
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文章编号:1001-4829(2010)03-0801-04收稿日期:2009-11-20基金项目:国家科技支撑课题/普洱茶功能成分与保健功效的研究0(2007BAD58B04)作者简介:黄业伟(1985-),男,在读硕士,研究方向:茶叶生化分析与功效,E -m ai :l Ii chuangye w e i 100@163.co m,*为通讯作者,E-m ai:l zhangdongyi ng365@yahoo .co 。
普洱茶生茶抗疲劳作用研究黄业伟,邵宛芳,冷丽影,张冬英*(云南农业大学龙润普洱茶学院,云南昆明 650201)摘 要:研究普洱茶生茶对小鼠的抗疲劳作用,为普洱茶保健功效研究提供一定的理论依据。
将80只昆明种小鼠(雌雄各半,体重25?4g)随机分为4组(20只/组),即空白对照组和普洱茶生茶高、中、低剂量组,分别灌胃0.9%生理盐水和2.0g/kg .bw 、1.0g /kg .bw 、0.5g /kg .bw 的普洱茶生茶。
按照小鼠体重给予不同体积的受试物,自由摄食与饮水,连续灌胃30d ,测定小鼠力竭游泳时间。
采血、分离血清并取组织样,测定血乳酸(BLA)、血尿素氮(BUN )、血乳酸脱氢酶(LDH )及肝糖元(LG)、肌糖元(M G)指标。
结果显示:与空白对照组相比,普洱茶生茶中、低剂量组显著延长了小鼠游泳时间(P <0.01),尤以中剂量组作用明显,增加率达50.68%;显著降低了运动后血乳酸(P <0.01)和血尿素氮(P <0.05)水平,提高了血清乳酸脱氢酶活力(P <0.01),肌糖元和肝糖元的储备量的增加达极显著水平(P <0.01)。
因此,普洱茶生茶具有良好的抗疲劳生理活性,以中剂量组作用最明显。
关键词:普洱茶生茶;抗疲劳中图分类号:S571.1 文献标识码:AR esearch of Ant-i fatigue E ffect of Unferm ented Pu -erh T eaHUANG Ye -w e,i SHAO W an -fang ,LENG L-i yi ng ,Z HANG Dong -yi ng *(C ollege of Longrun Pu -erh T ea ,Yunnan Agric u lturalUn ivers it y ,Yunnan Kunm i ng 650201,Ch i na)A bstract :The ant-i fatigue effect of unfer m en ted Pu-erh tea on m i ce w as st ud ied to provi de so m e t h eor i es on the functi onary m ech an i s m ofun -f er m ented Pu-erh tea .80m i ce w ere rando m l y assigned to b l ank contro l group ,h i gh dose ,m i dd l e dose and lo w dose experi m en tal groups ac -cord i ng t o t h ei r body w ei gh ts .Nor ma l s ali ne of0.9%w as ad m i n i s t ered i n b l ank con trol group.U nfer m en ted Pu-erh tea w as ad m i n istered i n experi m ental groups w i th doses of 2.0, 1.0,0.5g /kg .bw,respectivel y .E ach group w as g i ven sa m e f ood and w ater.A fter 30days ,the s w i m m i ng test w ere carried out and the death ti m e w as observed and recorded.A fter the m i ce s w i m m i ng f or a per i od ,t he m ice b l ood w ast ak en for d eter m i n i ng b lood l actic -aci d,b l ood u rea n itrogen (BUN )and l actate dehyd rogenase .The li ver and m uscl e w as t ak en for deter m -i n i ng li ver and m uscl e g l ycogen .The results s h o w ed as follo w s :co m pared w ith b lank con trol group ,Un f er m ented Pu-erh t ea ofm i dd l e dose and l ow dose exp eri m en t a lgroup s can sign ificantl y pro l ong s w i m m i ng ti m e(P <0.01),reduce lacti c -aci d(P <0.01)and blood urea n itrogen l evel(P <0.05),i ncrease lactate d ehydrogen ase l evel (P <0.01)and i n crease li ver glycogen and m uscle g l ycogen st orage (P <0.01)after s w i m m i ng .So ,U nfer m en ted Pu -erh tea can all evi ate phys i cal fati gue ofm ice ,and them i dd le dose experi m en t al group s had s i gn ifican t an t-i f ati gue eff ect .K ey words :Un fer m en ted Pu -erh;An t-i fati gue云南是世界茶树原产地之一,历史悠久[1]。
普洱茶是云南特有的茶,其独特的内含成分,具有它茶类所无法比拟的功效。
如今,人的工作、生活和学习压力越来越大,持久或过度劳累后会造成身体不适及工作效率减退,即疲劳感。
长期以来,众多学者期望能寻找到一种安全、有效、无毒副作用的良方来有效延缓疲劳发生和加速消除疲劳。
随着现代科学发展,新分析手段的应用,普洱茶的与众不同,广泛引起了国内外专家、学者的特别关注。
到目前为止,有关普洱茶在降血脂、健齿护牙、抗氧化、抗衰老及抗癌防突变等方面,已开展了较广泛、深入的保健功效研究。
大量研究表明普洱茶具有显著的降脂抑菌、降糖降压、抗辐射、改善心血管疾病等多种保健功效[2~3]。
有关茶叶抗疲劳方面的研究有杨志博、松井阳吉、林智等对8012010年23卷3期Vol 123 No 13西 南 农 业 学 报Southw est Ch i n a Journal ofAgri cu lt u ral S ci ences乌龙茶抗疲劳的研究[4]以及马森、陈培珍、游玉琼等对武夷岩茶抗疲劳抗氧化作用的研究[5],而关于普洱茶的抗疲劳作用研究鲜有报道。
普洱茶生茶是由没有经过后发酵工艺的云南晒青毛茶压制而成的,故其更接近绿茶类产品[6]。
浙江大学茶学系学者研究显示茶多酚清除活性氧自由基效率高达90 %以上,显著优于V it C和V it E。
日本学者的试验则指出,V it E防止脂质过氧化的作用为4%,而富含茶多酚的绿茶效果达74%[7],可见绿茶具有良好的抗氧化作用,而抗氧化与抗疲劳之间有着密切联系。
那么,究竟普洱茶生茶是否具有抗疲劳作用,其剂量关系又如何,至今尚未见相关资料报道。
本试验选用具有代表性的普洱茶生茶样品,通过动物小鼠模型探讨普洱茶生茶抗疲劳效果,以期更深刻地了解普洱茶生茶的抗疲劳功效,为普洱茶保健作用机制提供一定的理论依据,以推进普洱茶产业的健康发展,为中国茶产业作出贡献。
1材料与方法111主要实验材料与试剂选用3个厂家生产的普洱茶生茶,分别由勐海县云茶科技有限责任公司、云南龙润茶业集团和云南省思茅茶树良种场生产。
乳酸测试盒、乳酸脱氢酶测试盒、血尿素氮测试盒、肝/肌糖元测试盒,购自南京建成生物工程研究所。
实验动物为健康昆明种小鼠,由昆明医学院动物中心提供,雌雄各半,体重25?4g。
112茶汤制备茶汤制备工艺流程[8]:茶样y沸水浸提(茶水比为1B20;1B20;1B10;浸提时间分别为20、20、10 m in)y用抽滤机过滤y合并3次浸提茶汤y减压浓缩(60e)y茶汤浓缩液y装瓶灭菌(120e,20 m in)y其浓度相当于1g茶/mL的茶汤浓缩液y低温冷藏(4e)。
113动物分组及给药将小鼠按体重随机分为4个剂量组:空白对照组、普洱茶生茶低、中、高剂量组,每组20只小鼠,雌雄各半。
根据日本东京桑也研究推荐成人每日平均用茶量6g,我国男女总平均体重60kg,则成人每日用茶量为0.1g/kg.bw[9]。
根据保健食品功能评价的要求,各种动物至少应设3个剂量组,其中1个剂量组应相当于人体推荐摄入量(折算为每千克量)的5倍(小鼠),且最高计量不超过人体推荐的30倍[10]。
在此基础上,本实验采用昆明种小鼠按人体推荐量的5倍作为最低剂量,中、高剂量分别为人体推荐量的10倍,20倍,即低、中、高剂量组分别给予普洱生茶0.5、1.0、2.0g/kg.bw;空白对照组给予生理盐水(0.9%)。
每周称重1次,每天早上(9:00~ 11:00)根据体重(0.02mL/g.bw)经口灌胃给药1次,连续给药30d。
114小鼠负重游泳试验每组随机选取10只小鼠(雌雄各半),末次灌胃30m in后,置小鼠在游泳箱中游泳。
水深30c m,水温(30?1)e,距尾尖1c m处用细棉绳系5%体重的铅皮。
记录小鼠自游泳开始至沉下水不再浮起的时间,作为小鼠的游泳时间(s)。
115生化指标测定给药30d的昆明种小鼠在末次灌胃前空腹12h,于末次给药30m i n后,在不负重的情况下将小鼠置于温度为(30?1)e水中游泳30m in,休息10 m i n后眼球采血,离心,制备血清,备用。
将采血后的小鼠立即取肝脏和后腿部的肌肉,经生理盐水漂洗后用滤纸吸干,保存,备用。