高效液相法对比紫外分光光度法测定阿莫西林胶囊含量
阿莫西林胶囊
4、系统适用性试验在正式测定样品前要做系统适用性试验，即用规定的对照品对仪器进行试验和调整，以检查该系统的理论塔板数、分离度、重复性、拖尾因子是否符合药典规定。
实验阿莫西林胶囊的含量测定
一、药品检验原始记录
检验日期温度相对湿度
检品名称剂型规格
生产厂家批号效期
检验依据检验目的
检验人：校对人：
二、药品检验报告检品名称生产单位 Nhomakorabea剂型
规格
批号
有效期
包装
检验数量
检验目的
检验项目
检验日期
报告日期
检验依据
检验结论：
检验报告人：；审核人：
药品分析检验报告设计表（第三组）
课题
6、取阿莫西林系统适用性对照品约25mg，置50ml量瓶中用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过.精密量取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图。
7、另取阿莫西林对照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算即得。
标示量%=ＣＲ
（三）、实验后清洗分析结束，先关检测器，再用经过滤和脱气的适当溶剂清洗色谱系统，正向柱一般用正己烷，反向柱一般用甲醇，如使用过含酸、碱或盐的流动相，则将水相换为同比例纯水，再适当提高甲醇比例，最后用甲醇依次冲洗，各种溶剂一般冲洗20~30倍柱体积，特殊情况延长。冲洗结果，逐渐降低流速至零，关泵。进样器用甲醇冲洗。
（二）、操作方法
1、泵的操作及色谱柱的平衡
（1）用流动相冲洗过滤器，再把过滤器浸入流动相中，打开泵的排液阀，设置高流速后启动泵，进行冲泵排气，直到管线内无气泡为止，关泵或将流速阀调至分析数值，关闭排液阀。
执业药师考试药物分析辅导：阿莫西林的分析
（⼀）鉴别
1.⾼效液相⾊谱法
《中国药典》采⽤⾼效液相⾊谱法测定阿莫西林的含量，同时进⾏鉴别。
要求在含量测定项下记录的⾊谱图中，供试品主峰的保留时间，应与阿莫西林对照品主峰的保留时间⼀致。
2.红外分光光度法
《中国药典》采⽤红外分光光度法鉴别本品，要求本品的红外吸收光谱应与对照的图谱⼀致。
（⼆）检查
1.有关物质
阿莫西林中的有关物质主要是其降解产物，《中国药典》采⽤⾼效液相⾊谱法检查。
由于有关物质的种类较多，极性差异较⼤，所以采⽤梯度洗脱的⽅法检查。
2.阿莫西林聚合物
阿莫西林也需检查聚合物，《中国药典》采⽤分⼦排阻⾊谱法检查，⽅法与青霉素钠类似。
3.⽔分
本品含3分⼦结晶⽔，理论含⽔量为13.4%.
取本品，按⽔分测定法（费休法）测定，含⽔分应为12.O%～15.0%.
（三）含量测定
《中国药典》采⽤⾼效液相⾊谱法测定本品的含量，⽅法为：
⾊谱条件与系统适⽤性试验：⽤⼗⼋烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸⼆氢钾溶液（⽤2mol/L氢氧化钠溶液调节pH值⾄5.0）-⼄腈（97.5：2.5）为流动相；流速为每分钟约1ml；检测波长为254nm.理论板数按阿莫西林峰计算不低于2000.
按外标法以峰⾯积计算供试品中阿莫西林的含量。
本法的⾊谱条件属于反相⾼效液相⾊谱法。
（四）贮藏
《中国药典》规定本品应遮光，密封保存。
论高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊的溶出度
论高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊的溶出度【摘要】目的：对阿莫西林胶囊的溶出度采用高效液相色谱法进行测定。
方法：采用水、色谱柱、流动相等进行测定。
结果：当浓度范围为0.3034～0.8946 mg／mL-1的时候，阿莫西林的线性较为良好；回收率为99.67%，RSD为1.27%。
结论：该方法操作简单、方便、可靠，所测出的结果精准，值得广泛的推广和使用。
【关键词】高效液相色谱法；阿莫西林胶囊；溶出度测定阿莫西林是临床治疗中青霉素类的最常用的药物。
该药又名为安莫西林，该药是广谱β-内酰胺类抗生素，该药具有较强的杀作用，能有效的穿透细胞壁，是目前临床上使用比较广泛的口服的青霉素之一。
本文笔者主要是对该药的溶出度采用高效液相色谱法进行测定。
1使用的仪器和试药主要是采用的Agilent 1200高效液相色谱仪器[1]。
采用的试药主要有：色谱纯：乙腈，分析纯试剂：氢氧化钾和磷酸二氢钾。
2测定方法和测定结果2.1色谱的条件所使用的色谱柱主要为200 mm×4.60 mm，5μm的Diamonsil TMC18；其流动相主要是：磷酸盐缓冲液（制备方法：在容量瓶内称取磷酸二氢钾6.8g，再在瓶内加入1000ml的水，混合的摇匀，使用氢氧化钾溶液来调节pH值为5.0±0.05）-乙腈（95∶5）；其流速控制在1.0ml／min-1；其进样量为50ul；检测波长为254nm，色谱柱温度控制在35℃左右；其理论搭板数是根据阿莫西林计算为5500[2]。
2.2制备对照品溶液在50ml的容量瓶内装入30mg的阿莫西林对照品，在瓶子内加入清水，稀释片刻之后混合摇匀。
2.3干扰性的实验各取出规格为250mg的阿莫西林胶囊样品一颗、不含有阿莫西林的空胶囊一颗、阿莫西林的空胶囊一颗，将它们分别装入溶出杯子内，根据本文中溶出度的测定方法，将溶液取出并滤过之后，各取出50ul的续滤液和对照品溶液分别进样，同时，还要做好色谱图。
实验十二阿莫西林胶囊的分析
实验十二阿莫西林胶囊的分析AmoxilinA moxiciHinCjiHijNjOjS * SHrO 419*46一、实验目的1熟悉高效液相色谱仪的结构及正确使用。
2 •掌握阿莫西林胶囊分析的原理及方法。
二、实验原理阿莫西林为B-内酰胺类抗生素，其母核部分与侧链部分均有共轭体系，有紫外吸收, 因此阿莫西林胶囊的鉴别、有关物质的检查、含量测定均采用反相高效液相色谱法。
有关 物质的检查方法为外标法和不加校正因子的主成分自身对照法，含量测定采用外标法定量。
三、实验方法本品含 C 16H 19 N 3O 5S 应为标示量的 90.0% ~110.0%。
【鉴别】 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时问应与对照品溶 液主峰的保留时间一致。
【检查】 水分 取本品的内容物，照水分测定法 （附录M 第一法A ）测定，含水分不得 过 16.0%。
有关物质取本品的内容物适量， 精密称定，用流动相A 溶解并制成每1ml 中含2mg 的溶液，滤过，取续滤液照阿莫西林有关物质项下的方法测定。
单个杂质的峰面积不得大 于对照溶液主峰面积的2倍（2.0 % ），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的 5倍 （5.0% ）。
供试品溶液中汪何小于对照溶液主峰面积 0.05倍的峰可忽略不计） 溶出度 取本品，照溶出度测定法（附录X C 第一法），以水900ml 为溶出介质，转速 为每分钟100转，依法操作，经 45分钟时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液适量，用 溶出介质稀释成缈"ml 中约含130⑷的溶液，照紫外一可见分光光度法（附录W A ），在272nm 的波长处测定吸光度；另取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于平 均装量），按标示量加溶出介质溶解并稀释成每1ml 中约含130⑷的溶液，滤过，取续滤液 作为对照溶液，同法测定，计算每粒的溶出量。
限度为80%，应符合规定。
其他 应符合胶囊片剂项下有关的各项规定（附录I A ）。
阿莫西林胶囊溶出度测定方法研究
doi ：4. 3969/j. Rsc. 406 - 493 0 202 0 03. 04阿莫西林胶囊溶出度测定方法研究**基金项目：国家科技重大专项-重大新药创制课题资助项目［203ZX094401］。
第一作者：沈川，男，大学本科，主治医师，研究方向为临床医学，（电子信箱）00028093@qq. com 。
△通信作者：沈丹丹，女，硕士研究生，工程师，研究方向为药物制剂与药物分析，（电子信箱）499258077@qq. com 。
沈川8，程义5曾令高57,姜学美57,沈丹丹°3A(0重庆市棊江区人民医院，重庆44422； 2.重庆市食品药品检验检测研究院，重庆441121；3.国家药品监督管理局麻醉精神药品质量监测重点实验室，重庆44001)摘要：目的 考察紫外-可见分光光度(UV-Vis)法与高效液相色谱(HPLC)法测定阿莫西林胶囊溶出度的差异。
方法UV-Vis 法测 定波长为272 cm;HPLC 法色谱柱为Icertsil ODk Ci 3柱((50 mmx4.6mm,5 p.m ),流动相为0. 03 mol/L 磷酸二氢钾溶液(用2 mO/L 氢氧化钾溶液调节pH 至30)-乙腈(97. 5 ： 20, V/ V )，检测波长为254 cm,进样量为20 pX,流速为OO mL/mdy 分别以水、pH 0 2的盐酸氯化钠溶液.pH 4. 0的醋酸盐缓冲液、pH 6. 8的磷酸盐缓冲液为溶出介质，采用篮法(转速为40 r/min )测定原研产品(参比制剂)的体外溶出量。
结果 测定参比制剂在以上4种溶出介质中40 min 时的溶出度，UV - VR 法分别为49. 37% ,115.64% , 110. 02% ,04.72% ,HPLC 法分别为42.54% ,77. O% , 40 09% , 42. 24%。
结论 HPLC 法简单、准确，可用于阿莫西林胶囊溶出度的定量测定，且消除了空胶囊壳的干扰，更能真实地反映产品在溶出介质中的溶出度，可用于阿莫西林胶囊的一致性评价。
高效液相法对比紫外分光光度法测定阿莫西林胶囊含量
高效液相法对比紫外分光光度法测定阿莫西林胶囊含量目的HPLC及UV测定阿莫西林胶囊的含量对比。
方法高效液相色谱法选择色谱柱为Agilent C18（4.6×250 mm，5 μm），流动相为0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（pH=5）-乙腈（97.5：2.5），流速为1.0 ml/min，检测波长为254 nm，紫外法选择254 nm波长测定含量。
结果HPLC法中阿莫西林在 2.56 ～56.15ug/ml范围内线性关系良好，回归方程：Y=65257X-3244531（r=0.9996），加样回收率平均值为100.68%，RSD 1.7%。
结论HPLC法对比紫外分光光度法测定阿莫西林含量更为准确，重复性高，专属性强标签：阿莫西林；高效液相色谱法；紫外分光光度法阿莫西林因其耐酸、口服吸收快、生物利用度高等特点，使其在临床上深受医生和患者的厚爱[1]。
2015版药典中推荐使用高效液相色谱法来分析本品[2]，但相对来说紫外分光光度法仪器设备要求简单，检测时间快捷，该法是否可以作为本品基层药物监测的备选方法值得考察。
本文由此出发，对比分析高效液相及紫外分光光度法测定阿莫西林含量。
1临床资料岛津LC-2010CHT 型高效液相色谱仪；岛津UV-2450型紫外分光光度计；乙腈由霍尼韦尔贸易（上海）有限公司提供，为色谱醇；氢氧化钾、磷酸二氢钾、N-溴代丁二酰亚胺均为色谱纯；阿莫西林对照品（中国药品生物制品检定所，批号：130409-201011，纯度85.80%）；阿莫西林胶囊（武汉健民集团随州药业有限公司）。
2实验方法2.1高效液相色谱法2.1.1色谱条件[2] 色谱柱选择Agilent C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相：0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（用 2 mol/LKOH调节pH值5.0）-乙腈（97.5：2.5），检测波长：254 nm，进样量10 μl，1.0 ml/min流速，柱温为室温（25℃）。
高效液相色谱法测量药物中阿莫西林含量的分析
高效液相色谱法测量药物中阿莫西林含量的分析摘要：目的：利用高效液相色谱法，对阿莫西林的含量进行测定。
方法：对阿莫西林应用高效液相色谱法测定，并运用各种分析方法以确定高效液相色谱法对阿莫西林药物检测的可利用性和有效性。
结果：最终测量结果表明，利用高效液相色谱技术测定，阿莫西林的回收率约为88.4％-99.7％左右，在测量的实验样本中检测出阿莫西林的浓度于0.48-1.43mg-1之间时，浓度和峰面积之间表现出良性线性关系。
结论：阿莫西林应用高效液相谱法测量的可实施性较高，具有良好应用的价值，可在临床多实践。
关键词：高效液相色谱法；药物；测量；阿莫西林；含量阿莫西林属于西药，主要针对大部分革兰阴性菌、阳性菌有较强的杀菌、灭菌功能，其中也包含杆菌和球菌，是一种广谱青霉素，临床常用于消化道感染、泌尿道感染、呼吸道感染、软组织和皮肤感染等治疗中[1]。
和青霉素的功能相似，同时让细胞凋零死亡(通过对细菌细胞壁生物合成来实现)，本试验使用了高效液相色谱法来对阿莫西林药品中的浓度进行检测，以此来明确该方式的作用和功能，具体内容如下。
1研究方法与材料1.1实验仪器和试剂采用日本岛津公司LC-2030C 高效液相色谱仪（配备紫外检测器)；奥豪斯EX125DZH型十万分之一电子天平；上海康仪 PHS-3 酸度计；而实验试剂主要就是阿莫西林对照样本；色谱级纯或优级纯甲醇或乙腈。
1.2实验参数指标调整应用高效液相色谱法检测时，得合理调整实验参数指标。
其中包含流动相和固定相。
流动相选择：将6.8g磷酸二氢钾固体粉与1000ml纯水搅拌后溶解，从而形成磷酸二氢钾溶液。
然后，把25ml乙腈溶液与975ml已溶解过的溶剂相混合，随后进行10分钟超声处理。
此外，还需要把阿莫西林对照样品放在大量瓶内(50ml)，采用流动相稀释和溶解，将其溶液摇晃均匀后，制备为0.5mg mL-1的对照溶液。
固定相的指标调整为AgillentSB-C18色谱柱(4.7×150mm，3.5μm)，预柱为(22×3.8mm)，流动相：0.06moL·L-1磷酸盐缓冲液(将它和13.4g磷酸二氢钾共溶并稀释至2000mL，最后采用10个moL l-1氢氧化钾水溶液在调节pH值4.9±0.2)；乙腈(97.5：2.5，v/v)，将流速调整至1min/ml，柱温调整至30℃左右，检测波长度253nm，进样量20μL。
实验十二 阿莫西林胶囊的分析
实验十二阿莫西林胶囊的分析一、实验目的1．熟悉高效液相色谱仪的结构及正确使用。
2．掌握阿莫西林胶囊分析的原理及方法。
二、实验原理阿莫西林为β–内酰胺类抗生素，其母核部分与侧链部分均有共轭体系，有紫外吸收，因此阿莫西林胶囊的鉴别、有关物质的检查、含量测定均采用反相高效液相色谱法。
有关物质的检查方法为外标法和不加校正因子的主成分自身对照法，含量测定采用外标法定量。
三、实验方法本品含C16H19 N3O5S应为标示量的90.0％~110.0％。
【鉴别】在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时问应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
【检查】水分取本品的内容物，照水分测定法(附录M第一法A)测定，含水分不得过16.0％。
有关物质取本品的内容物适量，精密称定，用流动相A溶解并制成每1ml中含2mg 的溶液，滤过，取续滤液照阿莫西林有关物质项下的方法测定。
单个杂质的峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2倍(2.0％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的5倍(5.0％)。
供试品溶液中汪何小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰可忽略不计)溶出度取本品，照溶出度测定法(附录X C第一法)，以水900ml为溶出介质，转速为每分钟100转，依法操作，经45分钟时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液适量，用溶出介质稀释成缈"ml中约含130μg的溶液，照紫外一可见分光光度法(附录ⅣA)，在272nm 的波长处测定吸光度；另取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量(约相当于平均装量)，按标示量加溶出介质溶解并稀释成每1ml中约含130μg的溶液，滤过，取续滤液作为对照溶液，同法测定，计算每粒的溶出量。
限度为80％，应符合规定。
其他应符合胶囊片剂项下有关的各项规定(附录I A)。
【含量测定】1．色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（2mol/L氢氧化钠溶液调节PH值至5.0）–乙(97.5︰2.5)为流动相；流速为1ml/min,检测波长为254nm，理论板数按阿莫西林峰计算不低于2000。
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高效液相法对比紫外分光光度法测定阿莫西林胶囊含量
摘要：目的：HPLC及UV测定阿莫西林胶囊的含量对比。
方法：高效液相色谱法选择色谱柱为Agilent C18(4.6×250mm,5μm),流动相为0.05mol/l磷酸二氢钾溶液（pH=5)-乙腈（97.5:2.5）,流速为1.0mL·min-1,检测波长为254nm,;紫外法选择254nm波长测定含量.结果:HPLC法中阿莫西林在2.56ug·mL-1～56.15ug·mL-1范围内线性关系良好.回归方程：Y =65257X-3244531（r=0.9996），加样回收率平均值为100.68%，RSD1.7%。
结论：HPLC法对比紫外分光光度法测定阿莫西林含量更为准确,重复性高,专属性强.
关键词：阿莫西林；高效液相色谱法；紫外分光光度法
阿莫西林因其耐酸、口服吸收快、生物利用度高等特点，使其在临床上深受医生和患者的厚爱[1]。
2015版药典中推荐使用高效液相色谱法来分析本品[2]，但相对来说紫外分光光度法仪器设备要求简单，检测时间快捷，该法是否可以作为本品基层药物监测的备选方法值得考察。
本文由此出发，对比分析高效液相及紫外分光光度法测定阿莫西林含量。
1材料
1.1仪器与试药
岛津LC-20A2010CHT型高效液相色谱仪；岛津UV-25012450型紫外分光光度计；乙
氧化钾、磷酸二氢钾、N—溴代丁二酰亚胺均为色谱纯；阿莫西林对照品（中国药品生物制品检定所，批号：130409-201011160122，纯度886.25.8%）；阿莫西林胶囊（武汉健民集团随州药业有限公司）。
2实验方法
2.1高效液相色谱法
2.1.1色谱条件[2]
色谱柱选择Agilent C18(250mm×4.6mm,5μm)，,流动相：0.05mol/l磷酸二氢钾溶液（用2mol/LKOH调节p H值至5.0)-乙腈（97.5:2.5）,检测波长：254nm,进样量10μl，1.0mL/min 流速,柱温为室温（25℃）。
2.1.2溶液的制备
2.1.2.1供试品溶液的制备
精密称取10颗阿莫西林胶囊，混合均匀，精密称取上述供试品0.1g置于50ml容量瓶中，加入流动相20ml，摇匀至澄清后，稀释至对应刻度，经微孔滤膜（0.2um）过滤后，待用。
2.1.2.2对照品溶液的制备
精密称取阿莫西林对照品11.23mg于100ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀即得。
2.1.3高效液相色谱法
2.1.
3.1精密度试验
在相同色谱条件下，重复进样6次，每次10ul，分别测定峰面积，并计算6组数据所得的相对标准偏差RSD，结果为 1.6%<2.0%，符合药典规定，提示，本组方法精密度良好。
2.1.
3.2重复性试验
选择同批号阿莫西林胶囊6份，精密称定后，根据供试品“2.1.2.1”项操作制备溶液，采用相同色谱条件，进样10ul，采集6份样品的色谱图，计算溶液的相对标准偏差RSD=1.4%（小于2.0%），符合标准规定，提示本组方法具有较好的重复性。
2.1.
3.3稳定性试验
于0h、4h、8h、12h、24h取供试品溶液，采用相同色谱条件，进样10ul，根据测得的色谱峰面积，供试品组RSD为1.3%<2.0%，提示对照品及供试品溶液在24h内较为稳定。
2.1.
3.4回收率考察
精密移取“2.1.2.1”项供试液5ml，保存至3个锥形瓶内，依次加阿莫西林对照品2.42mg、5.87和10.29mg，混合均匀后取续滤液，进样10ul，对峰面积进行测定，得到回收率分别为：100.93%、100.62%和100.48%，平均100.68%，RSD1.7%，与药典标准相符。
2.1.4线性关系考察
采用移液管精密移取“2.1.2.2”下对照品溶液0.20ml、0.50ml、0.80ml、1ml、2ml、5ml 于10ml容量瓶中，使用流动相稀释至刻度，澄清后，采用微孔滤膜过滤，得到系列标准溶液。
结合对应色谱条件，进样10ul，测定样品色谱峰面积，以峰面积和浓度为坐标，建立标准曲线，得到方程为：Y=65257X-3244531（r=0.9996），提示，阿莫西林浓度在2.56ug·mL-1～56.15ug·mL-1范围内与峰面积存在良好的线性关系。
2.2紫外分光光度法
参考文献[3]，平行精密称取3份阿莫西林胶囊,每份约0.1g,置于100ml容量瓶,加水溶解摇匀至澄清后，补充至刻度，精密量取上述溶液5ml，稀释一倍后再精密量取该液1.0ml,加入0.1mol/L NaoH1.0ml及0.05%NBS（N—溴代丁二酰亚胺）1.0ml,加蒸馏水稀释至5ml 配成检测液,另以0.1mol/L NaoH及0.05%NBS（N—溴代丁二酰亚胺）等体积混合溶液为空白对照于385nm波长处测定吸光度；精密取对照品10.23mg同上法制备不同浓度溶液，测定吸光度，并以吸光度对其浓度进行线性回归，得到线性方程为:Y=23252X–42431，（r =0.9994），结果表明，阿莫西林浓度在2.56ug·mL-1～56.15ug·mL-1范围内与吸光度存在较好线性关系。
参考“2.1.3.1-2.1.3.4”项过程并结合药典，对紫外分光光度法进行精密度、重复性、稳定性、回收率实验，结果上述RSD均小于2%，与药典标准相符。
2.3样品中阿莫西林含量测定
结合上述检测条件，分别测定阿莫西林对照品溶液与3批阿莫西林胶囊供试品溶液（取供试品0.1g），高效液相色谱法及紫外分光光度法均采用自身对照法对供试品内含有的阿莫西林含量进行测定。
3结果
结果显示，高效液相法测定阿莫西林胶囊中阿莫西林平均含量（与标识量比较）为（100.49±0.14）%，而紫外分光光度法测定的平均含量为（101.55±0.47）%，两组差异具有统计学意义（p<0.05），见下表1。
150923、151116、160328
表１阿莫西林胶囊中阿莫西林含量测定结果（%）
批号
阿莫西林含量150923151116160328
高效液相色谱法100.51100.49100.48
紫外分光光度法101.22101.26101.25
4.讨论
通过本文结果我们可知，高效液相色谱法阿莫西林含量低于紫外分光光度法（p<0.05），相较而言，高效液相法更接近药物标识含量。
考虑为高效液相法通过色谱柱的分离作用，将阿莫西林制备过程中的有关物质、杂质等干扰有效分离，而紫外分光光度采用直接测定方式，故高效液相法测定结果相对更为准确。
综上所述，高效液相法及紫外分光光度法测定阿莫西林含量的方法准确性高、精密度好、重现性和相关性均符合相关要求，但高效液相所测结果更接近药物真实含量，建议考虑此种方式来测定阿莫西林胶囊中阿莫西林含量。
参考文献：
[1]陈宏,陈友存,程乐华,等.HPLC测定阿莫西林胶囊中的有效成分[J].光谱实验室,2013, 30(6):2733-2736.
[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[S].北京:化学工业出版社,2015.566-567.
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