AKTAavant25全自动工艺开发蛋白纯化系统参数(精)
AKTAavant25全自动工艺开发蛋白纯化系统1. 工作条件1电力供应:单相220V±10%,50 Hz (±12工作温度:4︒C - 35︒C3相对湿度:20 - 95%,没有冷凝水4仪器运行的持久性:仪器可连续正常运行。
5工作条件及安全性要求符合中国及国际有关标准或规定。
2. 设备用途及功能快速纯化多种生物分子,如蛋白质、多糖、肽类、寡核苷酸、核苷酸疫苗及病毒等,适合分离纯化活性物质。
其自动化的配置尤其适合方法优化和工艺开发。
1简单迅速启动:预编应用工艺,编程模板,自动缓冲液制备。
2全自动操作:从进样、编程、分离、峰收集、准确结果比较、数据处理以至打印报告皆自动化。
3标配多种自动化配置:自动选择缓冲液、自动选择样品、自动选择柱位、自动选择收集位置和收集方式,便于方法优化和工艺开发。
4人工智能:多种缓冲液配方(内置26种配方,可自行添加,一百多根层析柱数据库,多种纯化方案,内置层析专家。
5整合专业的Design of Experiment 实验设计理念,推荐实验方案,进行数据分析,模型建立,为条件优化提供系统的建议。
6高效率功能:蛋白纯化量微克级以至百毫克级。
3. 技术规格I. 系统泵及样品泵1.1 系统泵1.1.1 精确的全自动微量柱塞泵,双泵四泵头,每个泵头都有独立除气阀。
*1.1.2 流速:0.001–25ml/min1.1.3 压力范围:0–20 MPa (200bar,2900psi*1.1.4 流速重复性:条件:0.25–25 ml/min, < 3 MPa, 0.8–2 cP流速准确度:±1.2%,流速精度:RSD<0.5%1.1.5 增量:1ul/min1.1.6 粘度:0.35–10 cP*1.1.7 具备恒压调速功能,自动根据压力调节流速输出,使压力保持稳定。
1.2 样品泵1.2.1 精确的全自动微量柱塞泵,单泵两泵头,每个泵头都有独立除气阀。
1.2.2 流速:0.01-25ml/min1.2.3 压力范围:0-10Ma (100bar,1450psi*1.2.4 流速重复性:条件:0.25–25 ml/min, < 3 MPa, 0.8–2 cP流速准确度:±2%,流速精度:RSD<0.5%1.2.5 粘度:0.7–10 cP*1.2.6 样品泵有压力控制模式,确保压力不变的情况,自动调节流速II. 检测器2.1 紫外可见检测器2.1.1 使用单一氙灯光源,紫外/可见光切换时无需换灯,无需预热。
2.1.2 波长范围:全波长检测器,190 -700 nm*2.1.3 检测范围:-6 到+6 AU,线性:±2%,在0–2 AU之间*2.1.4 检测波长:通过单色器可以连续选择、同时检测波长范围内任意3个波长2.1.5 压力:0-2Mpa2.1.6 光纤同时传导光源及采集数据,具有较高稳定性。
*2.1.7 光源和流动池分开设计,避免光源过热对样品的影响,测定准确度高。
*2.1.8 流通池:2mm光径,2ul 流通池体积。
自动识别光径,用于结果分析软件,修正峰的信息,便于不同系统的峰形比较。
2.2 电导检测器*2.2.1 检测范围:0.01 - 999.99ms/cm,宽广的电导范围,易于做疏水和反相层析。
2.2.2 噪音:±5%(满刻度校准范围内2.2.3 电导精确度:±10uS/cm,实时自动检测,电脑利用校正因子做自动校正。
2.2.4 压力:0-5Mpa2.2.5 流通池:22ul*2.3 温度检测器2.3.1 温度范围:0 - 99︒C2.3.2 温度准确度:±1.5︒C 在4︒C–45︒C 之间2.4 pH检测器2.4.1 检测范围: 0-14 (有效使用范围2-12*2.4.2 精度: ±0.1 pH单位,温度补偿2.4.3 稳定性: 0.1 pH单位/10小时2.4.4 流通池:76ulIII. 标配多个阀门,实现自动条件优化和工艺开发*3.1 标配的阀门:标配多个阀门整机出厂,每个阀门的位置、连线都在工厂经过合理的优化设计,阀门的性能经过专业人员验证,确保整机达到最佳的性能。
从而避免了在客户处由不同人员安装配件带来的差异和不确定因素。
3.1.1 缓冲液选择阀:2个, 14种缓冲液入口3.1.2 四元阀:1个,4个溶液入口3.1.3 样品选择阀:1个,自动切换7个样品,另外一个位置清洗管路,避免不同样品间的交叉污染。
3.1.4 自动进样阀:1个,无需更改管线连接方式,轻松实现三种上样方式之间的转换:样品泵上样到样品环或super loop;注射器上样到样品环或super loop;样品泵直接上样到层析柱。
3.1.5 柱位选择和方向阀:1个,自动选择5根层析柱,另外一个位置用于系统清洗,同时兼有正反流向控制功能3.1.6收集阀:1个,一个位置与收集器相连,实现数目较多样品的收集,另外有10个位置进行阀收集,收集大体积样品。
最后一个位置接废液。
3.1.7 pH计阀:pH计固定在阀门上,无需移动,即可实现pH计的储存或校正,阀门上同时连接反压阀,可选择pH计和反压阀两者同时使用、单一使用或都不用。
3.2 通过硬件和软件的配合可实现自动条件优化和工艺开发:3.2.1 整合Design of Experiment实验设计理念,根据客户要求推荐实验方案,分析数据、建立模型、进行重要实验条件的筛选、优化,还可进一步细化得出可重复的实验条件。
3.2.2 自动条件摸索,自动优化缓冲液pH、流速、梯度;3.2.3 自动优化层析柱、优化层析介质3.2.4 单独的上样泵可全自动进行多个样品的纯化3.2.5 灵活性好:即可一个样品优化不同的层析介质,也可多个样品在不同柱位上优化3.3 在线自动配制缓冲液3.3.1 26种缓冲液配方,专利改进的缓冲液配制算法,无需补偿离子强度的变化,增加温度反馈,自动温度补偿,调整缓冲液pH的配制。
3.3.2 部分缓冲液提供分别用弱酸碱和强酸碱滴定的不同pH范围和配方3.3.3 可手动设置缓冲液浓度3.3.4 输入缓冲液浓度和温度,自动计算缓冲液配方3.3.5 全新的四元阀,实时在线显示缓冲液配制时,每种溶液混合的比例3.3.6 四元阀也可单独使用,手动输入四种溶液比例,实现不同溶液配比的洗脱IV. 内置组分收集器4.1 盘架:适合96孔板,卡锁避免试管滑落4.2 自动扫描识别多孔板的孔数和盘架放置位置4.3 收集体积:0.1 - 50ml4.4 收集器可按按时间、体积、滴数和峰收集,并可延迟收集。
4.5 保护措施:抽提式、可温控、PEEK惰性材料(安全、可保持蛋白活性 4.6 根据流速不同选择不同的设计方式避免液滴溢出0-2ml/min:液滴同步化设计2ml/min以上:收集臂移动时,累积液滴,避免液滴溢出V. 其它部件:5.1 混合器5.1.1 混合腔体积:1.4ml和5 ml5.1.2 电动混合器,在线溶液搅拌,保证溶液梯度混合时的均匀性。
*5.2 压力感应器:4个,在线监测系统泵、样品泵、层析柱前和柱后的压力,保证系统、层析柱和层析介质及工艺的安全性。
*5.3气泡感应器:3个,A泵溶液入口阀、B泵溶液入口阀、样品溶液入口阀内各整合一个气泡感应器,保护层析柱。
5.4 在线过滤器:在线溶液过滤,保护层析柱,防止细小微粒堵塞。
5.5 多种柱架可选:大层析柱夹、小层析柱夹、同时固定5根HiTrap的柱夹。
5.6 限压器:使系统保持一定压力,保证不同溶液梯度混合时不产生气泡。
5.7 流动池:紫外、电导检测池均为外置,便于管路连接并使死体积最小。
5.8 转动盘:底盘可灵活转动或锁定,便于操作和维修。
5.9 保护槽:万一管路渗漏,将漏夜导入废液瓶,保护系统。
5.10 储物箱:和主机一体化设计、放置常用工具及配件,方便使用。
*5.11 读码器:扫描层析柱上的二维码信息,用于层析柱的信息追踪,建立层析柱档案。
5.12 仪器配件门:自由开启,透明设计,阀门、柱夹,配件管理清晰可见;关门同时可以保护检测器,防止因不慎将缓冲液溅出泄漏而侵蚀检测器。
VI. 控制软件*6.1 独有的层析柱logbook,追踪层析柱历史记录:如使用次数和柱效等,同时配有在位清洗和柱效测定提醒功能。
6.2 直接显示您熟悉的实验流程和每一步的实验条件、即可直接调用模板,删除添加步骤,也可自行修改每一步的参数。
*6.3 专业的Design of Experiment(实验设计模块,根据用户要求给出实验设计方案,同时改变多个变量,用少量的实验次数得到系统信息便于条件优化,符合美国FDA关于设计、分析和生产流程控制的PAT(Process Analytical Technology和QbD (Quality by Design的规定。
*6.4 26种缓冲液配方,能自动配出16种pH间隔0.1的缓冲液,便于pH优化6.5 自动数据处理和打印报告,并可修改报告模式。
6.6 流路实时在现,实时监控。
6.7 便于系统管理和网络连接,易于从实验室研究放大到生产规模。
*6.8 符合GMP/GLP要求。
6.9 多级用户管理模式和电子签名成为实验室管理和工业生产的软件规范。
*6.10 内置上百种层析柱和凝胶的信息,从1ml的小柱到几百升的工业生产柱都符合FDA的标准。
直接选择层析柱、智能编程,无需担心超过层析柱或填料的报警压。
*6.11 Watch功能保证每一次运行的成功。
可直接Watch柱压差,确保恒压装柱。
6.12 压力控制模式在超压时,降低流速,从而保证在超压后还能继续运行。
6.13 即使手动运行的方法也可储存,便于实验后的查找。
*6.14 各种模块之间可自由转换,即系统在运行时,可以同时进行方法编辑和结果处理。
4. 产品基本配置要求:1快速蛋白纯化工艺优化工作站:1台(包括标配所有阀门和收集器的主机2保证仪器设备的正常运行和常规保养所需的附件、专用工具和消耗品5. 技术及售后服务1保修及维修:设备验收合格后保修1年,终身维修。
2培训:安装同时现场培训,掌握基本操作;免费2人次参加每季度举办的再培训.。
akta pure prime avant
1.ÄKTA™pure是一台灵活直观的层析系统，可用于快速纯化从微克到克水平的蛋白、肽和核酸等目标产物。
同时ÄKTA™pure 是一台可靠的系统，它的硬件以及Unicorn软件与各种层析柱和填料仪器可满足任何纯化挑战。
系统支持各种层析技术，并满足需要提供最高纯度的自动化要求。
系统配置灵活，并可以根据您的需要随时升级，进一步提高其性能。
ÄKTA™pure 系统是在蛋白领域拥有超过50年研究经验和30年AKTA纯化系统研究开发经验的结晶。
2.AKTAprime™Plus是简单纯化各种标记或非标记蛋白质和其它生物分子的层析系统。
AKTAprime™Plus的特点是它将所有的简单快速的一步生物分子纯化所需要的组件整合为一体，并且是通过简单的按键控制来进行操作。
系统拥有多种针对一些最经典纯化的预设程序化的方法，包括带组氨酸标记的蛋白质的纯化，单克隆抗体的纯化以及样品的清洗。
3.AKTA TM avant 25最突出的优点就是Design of Experiment (DOE)实验条件智能优化，和UNICORN6.0软件配合堪称是现代纯化工艺优化的最佳搭档。
AKTAavant是用于方法探索和纯化工艺优化的全自动智能型制备层析系统，现有两个型号。
AKTAavant两款系统具有不同的流速/压力参数，但具有相同的硬件装置。
AKTAavant25系统最大设计流速为25ml/min，用于填料筛选，方法优化和数百毫克级样品制备。
专为AKTAavant开发的UNICORN™6版控制软件，用于提高纯化效率。
AKTAavant为快速、高质量的蛋白质分离并同时维持灵活性和工艺可靠性提供一种完整的解决方案.。
KTAavant新一代全自动智能蛋白液相色谱系统-Bio-protocol
系统 ÄKTA avant 25 ÄKTA avant 150 混合池大小 0.6, 1.4, 和 5 ml 1.4, 5, 和 15 ml
PostCP
图 3. 为了提高操作的安全性，在运行期间层析柱前压力（Pre-Cp） 和层析柱后压力（Post-Cp）被连续测定。通过测定层析柱前和层 析柱后压力并计算差异来确定在装填的填料床上的压力差（∆p） 。
4 28-9573-45 RES
在从 190 nm 到 700 nm 的紫外和可见光范 • UV 监测器 ： 围提供吸光值的实时测定。为了能观察到不同波长下 的蛋白分离情况，UV 监测器有一个光栅翻转模式可以 同时检测 3 个波长。当用不同浓度蛋白纯化样品时为 了得到最佳的性能， 有 3 种光径流通池可选择 （0.5、 （标 2 配）和 10 mm） 。优化的流动池设计与先进的光纤一起 提供高信噪比比率，不会引起 UV 流通池的任何的局部 过热（当用热敏感性样品工作时尤其重要） 。UV 检测 池含有长寿命的高强度氙灯，仅需要最短的启动时间 和不需要预热。 每次开启设备时， UV 检测器被自动校正。 测定缓冲液和样品的电导用于在线监测 • 电导检测器 ： 真实的梯度。电导检测器具有一个整合的温度传感器 用于监测温度。温度改变能够导致电导改变，但整合 的温度传感器校正并减小了这种偏离。 连续测定缓冲液和样品的 pH。pH 电极被 • pH 检测器 ： 整合到 pH 阀门内，且内置式校正端口可以方便地在位 校正而无需取出 pH 电极。 ÄKTA avant 具有两个有利的特征尽可能降低分部收集的 交叉污染和溅出。滴同步（DropSync）功能能够被用于 达到 2 ml/min 的流速（仅对于 ÄKTA avant 25） ，通过在 更换收集管时调流速来防止收集溅出。在更高的流速下， 则采用蓄积（Accumulator）功能，即暂时性的在更换收 集管或收集孔时停止流出来防止溅出。 组分收集可以基于时间、体积或自动的峰识别收集。自 动的峰收集可尽可能减少交叉污染，且不需要的洗脱液 可以被转移收集到废液池中。使用收集阀可以收集达到 几升的大体积组分。通过用 2 个额外的收集阀（选配） 扩展系统，32 个出口可以被用于大体积组分收集（参考
AKTAavant25全自动工艺开发蛋白纯化系统参数精
AKTAavant25全自动工艺开发蛋白纯化系统1.工作条件1电力供应:单相220V±10%,50 Hz (±12工作温度:4 ℃ - 35 ℃3相对湿度:20 - 95%,没有冷凝水4仪器运行的持久性:仪器可连续正常运行。
5工作条件及安全性要求符合中国及国际有关标准或规定。
2.设备用途及功能快速纯化多种生物分子，如蛋白质、多糖、肽类、寡核甘酸、核甘酸疫苗及病毒等，适合分离纯化活性物质。
其自动化的配置尤其适合方法优化和工艺开发。
1简单迅速启动:预编应用工艺，编程模板,自动缓冲液制备。
2全自动操作:从进样、编程、分离、峰收集、准确结果比较、数据处理以至打印报告皆自动化。
3标配多种自动化配置:自动选择缓冲液、自动选择样品、自动选择柱位、自动选择收集位置和收集方式，便于方法优化和工艺开发。
4人工智能:多种缓冲液配方(内置26种配方，可自行添加,一百多根层析柱数据库,多种纯化方案，内置层析专家。
5整合专业的Design of Experiment实验设计理念，推荐实验方案，进行数据分析，模型建立，为条件优化提供系统的建议。
6高效率功能:蛋白纯化量微克级以至百毫克级。
3.技术规格1.系统泵及样品泵1.1系统泵1.1.1精确的全自动微量柱塞泵,双泵四泵头,每个泵头都有独立除气阀。
*1.1.2 流速:0.001-25ml/min1.1.3 压力范围:0-20 MPa (200bar,2900psi*1.1.4 流速重复性:条件:0.25-25 ml/min, < 3 MPa, 0.8-2 cP流速准确度:±1.2%,流速精度:RSD<0.5%1.1.5增量:1ul/min1.1.6粘度:0.35-10 cP*1.1.7具备恒压调速功能,自动根据压力调节流速输出，使压力保持稳定。
1.2样品泵1.2.1精确的全自动微量柱塞泵，单泵两泵头，每个泵头都有独立除气阀。
1.2.2流速:0.01-25ml/min1.2.3压力范围:0-10Ma (100bar,1450psi*1.2.4 流速重复性:条件:0.25-25 ml/min, < 3 MPa, 0.8-2 cP流速准确度:±2%,流速精度:RSD<0.5%1.2.5 粘度:0.7-10 cP*1.2.6样品泵有压力控制模式，确保压力不变的情况,自动调节流速II.检测器2.1紫外可见检测器2.1.1使用单一氙灯光源，紫外/可见光切换时无需换灯，无需预热。
UNICORN TM 6软件控制的AKTA TM avant25系统 说明书
ImaginationatWorkUNICORN TM 6软件控制的A ..KTA TM avant25系统，用于研发单克隆抗体（MAb ）纯化的两步色谱工艺过程。
MabSelectSuRe TM ，基于蛋白A 的色谱柱料（合成树脂），用来进行初始的捕获步骤；而多模式阴离子交换剂Capto TM adhere ，用来进行第二步精制步骤，减少不纯物。
实验设计在精制步骤用来筛选上样条件。
样品的pH 、电导率和上样量有所变化。
使用1毫升预装的HiTrap TM 柱子，设计运行时间少于24小时，简化的设计实施确立了工艺过程条件的稳健性。
将功能性整合在UNICORN TM 6软件的实验设计（DoE ），与HiScreen TM 一起使用，在大约一周的时间内将所有的工艺过程进行了优化。
尽管料液研究具有挑战性，靶MAb 的高产率和纯度都达到了目的。
前言在生物药物复合物纯化工艺过程研发中，时间和灵活性是重要条件。
A ..KTA TM avant25是一款专门为全自动工艺过程研发而设计的色谱系统，使用刚性色谱柱料。
功能性整合在UNICORN TM 6软件的实验设计（DoE ），增强了产率。
实验设计（图1）有利于简便快速的工艺过程研发，是工艺过程研发实验室优化色谱条件、增加通量的有力工具。
在单克隆抗体（MAb ）纯化过程中，蛋白A 是捕获步骤选择的色谱柱料，基于它的高分离性产生良好的纯度，无论大规模和小规模都可以方便地使用。
因此，蛋白A 为基础的柱料是进行MAb 纯化的平台方法的根基。
图1嵌入实验设计功能的UNICORN6软件，为简便快速的工艺过程研发而设计。
在实验功能设计中，多因子同时变化，结果数据用来生成统计模型。
模型经过验证后，用来产生系统图为判定提供帮助。
接着，下游的数据处理可以根据不同色谱技术应用指南28-9573-47AA 色谱系统使用A ..KTA TMavant25进行MAb 纯化的快速工艺过程研发模型评价使用模型进行预测和判定输入设计和技术的组合进行（尤其离子交换和疏水相互作用色谱）。
AKTAavanton详细介绍
Buffer stock Titrant stock Water 4 M NaCl
9/ ÄKTAavant™ and UNICORN™ 6.0 Train the Trainer – Instrument Details /
10/06/2009
Quaternary valve 四通阀
• 整合了流向阀
Details
• 最多连接5根柱子 • 整合了柱子压力传感器
pH monitor pH检测 器
在低离子强度下提高PH电极 更加精确
PH探头的标定和保存更加方 便Easy
Note: pH 计只检测不反馈
Quaternary valve 四元阀
新的设计 4 个非常快速变换(7 秒)的电 磁阀.
不能使用乙腈
Mixer 混合器
Easy 改变混合器的体积
使用四元梯度以及BufferPro时的其它硬件
10/06/2009
Injection valve上样阀
在上样阀的LoopF(fill) 和LoopE (empty)位置连接样品环（或者超级上 样环）
21 / ÄKTAavant™ and UNICORN™ 6.0 Train the Trainer – Instrument Details /
Ball inlet check valve
每个50ml润洗系统管中充满了 20%乙醇
13 / ÄKTAavant™ and UNICORN™ 6.0 Train the Trainer – Instrument Details /
10/06/2009
Pumps
手动润泵以及排气
Buffer OUT
10/06/2009
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程一、目的：为了确保蛋白纯化层析系统操作的准确性、稳定性和安全性，保证实验结果的可靠性，制定本操作规程。
二、适用范围：本操作规程适用于实验室内的AKTA蛋白纯化层析系统操作。
三、操作流程：1.准备工作：(1)预热：打开系统电源，预热至设定温度（一般为室温）。
(2)洗涤缓冲液：根据实验要求，制备所需的洗涤缓冲液，确保其浓度和pH值符合要求。
(3)净化缓冲液：根据实验要求，制备所需的净化缓冲液，确保其浓度和pH值符合要求。
(4)样品：根据实验要求，制备所需的样品。
2.系统配置：(1)连接仪器：将系统中的各个模块连接好，包括色谱柱、注射器、检测器等。
(2)配置方法参数：根据实验要求，在系统内设置合适的流速、梯度洗脱条件等相关参数。
3.样品处理：(1)样品加载：将样品注入到加载注射器中，通过样品加载阀注入到色谱柱中。
(2)洗脱：根据实验要求，设置梯度洗脱条件，将混合物中的目标蛋白纯化。
4.系统清洗：(1)注射器清洗：每次实验结束后，将注射器从系统中取出，用纯化缓冲液反复洗涤至无污染为止。
(2)色谱柱清洗：每次实验结束后，将色谱柱从系统中取出，用纯化缓冲液反复洗涤至无污染为止。
5.系统关闭：(1)关闭电源：关闭系统电源，断开电源线连接。
(2)清洗系统：将系统中的各个模块用水冲洗干净，保持干燥。
(3)整理工作台：将使用过的耗材整理归位，清理工作台。
四、操作注意事项：1.操作前应仔细阅读操作手册，了解仪器的基本原理和操作要点。
2.操作时要穿戴实验室个人防护用品，避免吸入或接触有害物质。
3.在操作过程中，要严格按照实验要求进行，避免操作失误。
4.定期检查系统的运行状态，保证系统正常工作。
5.操作完成后，要及时清洗和整理仪器，保持仪器的干净和完好。
五、风险控制与安全措施：1.使用过程中，注意避免溶液飞溅引起的伤害，避免溶剂和化学品的吸入或接触。
2.避免电源短路或其他电气故障引起的意外事故。
蛋白纯化AKTA操作说明
AKTA pure操作说明分子筛层析操作步骤：1. 开机：打开AKTA pure开关，看指示灯，泵同步（泵内有注入液体的声音）。
2. 打开系统：打开电脑：双击 Unicorn 7.0打开系统，进入log on 界面，用户名默认为Default，输入密码：default，点ok键，出现提示对话框，继续点确定，进入系统。
注意：进入系统时会弹出三个界面：System Control 界面， Evaluation界面和Administration界面。
其中system Control界面为主操作窗口，所有的设置选项都是在该界面下完成：Manual---Execute Manual instructions---......； Evaluation界面为结果数据查看及处理窗口；Administration界面为Unicorn 7.0系统设置界面。
3. 洗泵：把A1泵头从20%乙醇中取出，用去离子水冲洗，放入分子筛缓冲液中，在SystemControl界面下，点击manual---Execute Manual instructions---Pumps---Pump A wash---点开inlet，选择A1---Excuse。
4. 设置系统参数：设柱压：Alams---alam systerm pressure---high alam---设置柱压---Execute；设流速：Pumps---System flow ---设置system flow（1mL/min）---Execute。
注意：流速和柱压设置参照“GE蛋白纯化柱表”，不要超出最高限制。
5. 装柱子(先上后下)：接柱子的上面：拧下连接进样阀和检测器之间的线，等进样阀出口有液体流出时，拧开柱上面线头的螺帽，将它连到进样阀出口；接柱子的下面：去掉柱下端连接的注射器，连上接头，连上一段线，待液体滴出滴出液体滴到检测器上的连接口的洞里，滴满，将接头连到检测器的连接口里。
蛋白纯化AKTA操作说明(一)2024
蛋白纯化AKTA操作说明（一）引言概述：蛋白纯化是生物技术研究中常用的一种重要技术手段，通过纯化目标蛋白，可以实现对其结构、功能和相互作用的进一步研究。
AKTA是一种常用的蛋白纯化设备，本文将介绍如何进行AKTA操作以获得高纯度的蛋白样品。
本文分为五个大点：设备准备、准备实验材料、样品制备、纯化操作步骤、数据处理和总结。
正文：一、设备准备：1. 查看设备状况：检查AKTA设备的各个组件是否齐全，并确保设备正常工作。
2. 设备消毒：使用适当的消毒剂对AKTA设备进行消毒，确保实验过程的无菌。
二、准备实验材料：1. 缓冲液：根据实验需要选择不同的缓冲液，并准备足够的量。
2. 标记抗体：根据实验需要选择适当的标记抗体，并准备足够的量。
3. 标记亲和树脂：根据实验需要选择适当的标记亲和树脂，并准备足够的量。
4. 标准品：准备适当浓度的标准品作为纯化过程中的参考。
三、样品制备：1. 细胞裂解：采用适当的方法对细胞进行裂解，获得含有目标蛋白的裂解液。
2. 预处理：根据裂解液的性质，进行适当的预处理，如去除杂质、调整pH值等。
3. 样品加载：将预处理后的样品加载到纯化系统中，确保样品的均匀分布。
四、纯化操作步骤：1. 初始化设备：打开AKTA软件，选择纯化方法，并设置相关参数。
2. 样品加载：将样品加载到设备中，并根据实验要求选择适当的柱子和纯化方案。
3. 洗脱：使用缓冲液进行洗脱，去除非目标蛋白和杂质。
4. 目标蛋白回收：使用适当的缓冲液洗脱目标蛋白，并将其收集到已经标记好的收集管中。
5. 清洗设备：使用适当的缓冲液对设备进行清洗，防止交叉污染。
五、数据处理和总结：1. 数据记录：记录纯化过程中的各项数据，如流速、吸光度和洗脱峰。
2. 数据分析：对纯化结果进行分析和比较，评估纯化效果。
3. 总结经验：根据纯化结果总结操作经验，以优化蛋白纯化的流程和效率。
总结：本文介绍了蛋白纯化AKTA操作的基本步骤。
通过设备准备、准备实验材料、样品制备、纯化操作步骤和数据处理，可以获得高纯度的蛋白样品，为后续的蛋白研究提供了可靠的基础。
(完整word版)蛋白纯化AKTA操作说明
AKTA pure操作说明分子筛层析操作步骤：1. 开机：打开AKTA pure开关，看指示灯，泵同步（泵内有注入液体的声音）。
2. 打开系统：打开电脑：双击Unicorn 7.0打开系统，进入log on 界面，用户名默认为Default，输入密码：default，点ok键，出现提示对话框，继续点确定，进入系统。
注意：进入系统时会弹出三个界面：System Control界面，Evaluation界面和Administration界面。
其中system Control界面为主操作窗口，所有的设置选项都是在该界面下完成：Manual---Execute Manual instructions---......；Evaluation界面为结果数据查看及处理窗口；Administration界面为Unicorn 7.0系统设置界面。
3. 洗泵：把A1泵头从20%乙醇中取出，用去离子水冲洗，放入分子筛缓冲液中，在SystemControl界面下，点击manual---Execute Manual instructions---Pumps---Pump A wash---点开inlet，选择A1---Excuse。
4. 设置系统参数：设柱压：Alams---alam systerm pressure---high alam---设置柱压---Execute；设流速：Pumps---System flow ---设置system flow（1mL/min）---Execute。
注意：流速和柱压设置参照“GE蛋白纯化柱表”，不要超出最高限制。
5. 装柱子(先上后下)：接柱子的上面：拧下连接进样阀和检测器之间的线，等进样阀出口有液体流出时，拧开柱上面线头的螺帽，将它连到进样阀出口；接柱子的下面：去掉柱下端连接的注射器，连上接头，连上一段线，待液体滴出滴出液体滴到检测器上的连接口的洞里，滴满，将接头连到检测器的连接口里。
蛋白纯化AKTA操作说明
AKTA pure操作说明分子筛层析操作步骤：1. 开机：打开AKTA pure开关，看指示灯，泵同步（泵内有注入液体的声音）。
2. 打开系统：打开电脑：双击Unicorn 7.0打开系统，进入log on 界面，用户名默认为Default，输入密码：default，点ok键，出现提示对话框，继续点确定，进入系统。
注意：进入系统时会弹出三个界面：System Control界面，Evaluation界面和Administration界面。
其中system Control界面为主操作窗口，所有的设置选项都是在该界面下完成：Manual---Execute Manual instructions---......；Evaluation界面为结果数据查看及处理窗口；Administration界面为Unicorn 7.0系统设置界面。
3. 洗泵：把A1泵头从20%乙醇中取出，用去离子水冲洗，放入分子筛缓冲液中，在SystemControl界面下，点击manual---Execute Manual instructions---Pumps---Pump A wash---点开inlet，选择A1---Excuse。
4. 设置系统参数：设柱压：Alams---alam systerm pressure---high alam---设置柱压---Execute；设流速：Pumps---System flow ---设置system flow（1mL/min）---Execute。
注意：流速和柱压设置参照“GE蛋白纯化柱表”，不要超出最高限制。
5. 装柱子(先上后下)：接柱子的上面：拧下连接进样阀和检测器之间的线，等进样阀出口有液体流出时，拧开柱上面线头的螺帽，将它连到进样阀出口；接柱子的下面：去掉柱下端连接的注射器，连上接头，连上一段线，待液体滴出滴出液体滴到检测器上的连接口的洞里，滴满，将接头连到检测器的连接口里。