HLA-A、B、DR及DQ抗原型别测定结果
临床医学检验临床基础检验
临床医学检验临床基础检验(正高) 胃蛋白酶缺乏者粪便中常见到
临床医学检验临床基础检验(正高) 健康人粪便中一般不能见到的细菌 是
临床医学检验临床基础检验(正高) 不受血红蛋白降解影响的隐血方法 是
临床医学检验临床基础检验(正高) 粪便可产生恶臭味的是
临床医学检验临床基础检验(正高) 下列说法错误的是（ ）
临床医学检验临床基础检验(正高) 理想的肿瘤标志物应符合的条件是 （）
临床医学检验临床基础检验(正高) 以下关于χ2检验的说法正确的有
临床医学检验临床基础检验(正高) 以统计图表示各科室住院患者的构 成情况，可选用
临床医学检验临床基础检验(正高) 计算相对数应注意
临床医学检验临床基础检验(正高) 符合1型糖尿病患者的改变是（ ）
临床医学检验临床基础检验(正高) 临床上可用于乳腺癌诊治的糖蛋白 抗原类肿瘤标志物有（ ）
临床医学检验临床基础检验(正高) 器官移植前为了慎重选择供者，一 般应做哪些检测（ ）
临床医学检验临床基础检验(正高) 目前比较公认的可作为系统性红斑 狼疮标志的自身抗体是（ ）
A 血细胞成分的释放
ABCD
B 血液颜色造成光学影响
C 细胞内成分对检测方法的
影响
D 红细胞碎片对检测结果的
影响
E 对形态学识别的影响
A 检验项目名称、英文缩写 ABCDE B 采用的方法 C 标本类型 D 生物参考区间 E 主要临床意义
A HCT高于正常
BC
B 推片用力不匀
C 用未处理的新玻片
D 冬天适当延长染色时间
ABC
B 类白血病反应
C 慢性粒细胞白血病
肾移植四种配型
群体反应性抗体（PRA）
真空采血管选择：
群体反应性抗体（PRA）
PRA检测的是病人血清中针对人白细胞 抗原（HLA）所产生的一系列抗体根 据结果判断病人的免疫状态与致敏程度。
群体反应性抗体（PRA）
一、分类 1.ABO血型系统 2.HLA分型 3.PRA检测 4.CDC试验
ABO血型系统
ABO血型系统包括A、B、AB和O型 血，在临床肾移植中，血型的选择 是相同或相容。在无相同的血型的 供者情况下，也可以使用交叉配型 阴性O型血供体。
ABO血型系统
即要求供体和受体间的血型要符合输血 原则：A型接受A型或O型、B型接受B型 或O型、AB型可以接受AB型或A型或B型 或O型、 O型只能接受O型。
无致敏：PRA=0%~10% 轻度致敏：PRA=11%~20% 中度致敏：PRA=21%~40% 高度致敏：PRA＞41% PRA阳性率越高，移植物存活率越低
PRA的检测对二次以上移植患者，反复输 血病人和有过妊娠史的女病人，能够系
统的了解其体内抗体水平并及时有效的
选择器官和决定移植时机。
淋巴细胞毒试验（CDC试验）
人类白细胞抗原（ HLA ）
真空采血管选择：
人类白细胞抗原（ HLA ）
1、HLA分型 Ⅰ类抗原 Ⅱ类抗原 Ⅲ类抗原 HLA—A、B、C HLA—DR、DP、DQ C4A 、C4B 、C2 、Bf等补体成分
其中供受者的HLA-DR抗原是否相合最为重 要，HLA-A和HLA-B抗原次之。
人类白细胞抗原（ HLA ）
真空采血管选择：
淋巴细胞毒试验（CDC试验）
临床医学检验：MHC与HLA检测及应用题库考点五
临床医学检验：MHC与HLA检测及应用题库考点五1、判断题血清学分型法是最简单、最快速检测组织相容性的方法之一。
() 正确答案：对2、单选HLA基因复合体位于()A．第6对染色体的短短臂B．第15号染色体（江南博哥）C．第14号染色体D．第9号染色体E．第7号染色体正确答案：A3、单选细胞间相互作用受MHCI类分子限制的是()A．TcB．ThC．TsD．B细胞E．以上均不对正确答案：A4、填空题CDC试验的关键在于获得各种HLA的______________。
正确答案：标准抗血清5、单选HLA细胞学分型法用于检测()A．HLA-A、BB．HLA-DR、DQC．HLA-A、DPD．HLA-D、DPE．HLA-C、D正确答案：D6、填空题PCR-SSO分型法中标记的寡核苷酸称为______________。
正确答案：探针7、单选作HLA-Ⅱ类分子分型时，下列哪种方法是应用最广泛且最简便、快捷和精确的方法()A．SBTB．PCR-SSOC．PCR-SSPD．RFLPE．PCR-SSCP正确答案：B8、单选下列关于单向MLC的描述，错误的是()A．单向MLC以刺激指数作为判断淋巴细胞反应强度的指标B．阴性分型法的SI=标准分型细胞对待测细胞刺激的cpm/待测细胞自身刺激的cpmC．阳性分型法的SI=待测细胞对预致敏淋巴细胞刺激的cpm/预致敏淋巴细胞自身刺激的cpmD．HLA-D抗原可用阴性和阳性分型法检测E．HLA-DP抗原可用阴性和阳性分型法检测正确答案：E9、名词解释纯合子分型细胞(homozygous typing cell)正确答案：是指表面只有一种LD抗原的细胞，以此作为刺激细胞与待分型细胞进行单向MLC，以作HLA分型。
10、单选主要组织相容性复合体是()A．MHCB．MHAC．HLAD．H-2E．RLA正确答案：A11、单选HLA-A*03011写法中“03”代表()A．基因座次B．等位基因数C．等位基因组D．等位基因号E．以上均不对正确答案：C12、多选CDC试验作HLA血清学分型的方法学评价，下列说法正确的是() A．操作简便易行B．结果可靠，重复性好C．需花大量时间去筛选抗血清D．HLA-DQ、-DR抗原分型所用的抗血清须经血小板吸收以除去针对I类抗原的抗体E．待检细胞应为纯化的B细胞正确答案：A, B, C, D, E13、单选对人类来说，HLA抗原属于()A．异种抗原B．同种异体抗原C．独特型抗原D．肿瘤特异性抗原E．改变的自身抗原14、问答题简述HLA的生物学功能及其与临床的关系。
HLA—DR／DQ,HLA—A／B与肺结核相关性研究
Ｄ ＨＩ — ／ Ｑ， Ａ Ｂ基 因 相 关性 。方 法 选 取 ３ 名 已确 诊 肺 结 核 的 患 者 作 为研 究组 ， Ａ ６ 选取 与研 究 组 患 者 年 龄 、 别 无统 计 学 差 异 的 １ ０名健 康 人 作 为对 照 组 ， 取 外周 血 提 取 Ｄ 性 ０ 抽 ＮＡ。使 用 新 型 Ｐ Ｒ Ｓ Ｐ方 法 Ｃ —Ｓ
关 键 词 肺结核
组织相容性 白细胞抗原
基因
序列特异性引物一 聚合酶链
反应
Ｔｈ ｅｅ ｒｈ ｂ ｔ ｅ Ａ－ ｅｒｓａｃ ｅｗｅｎ ＨＬ ＤＲ／ ＤＱ，ＨＬＡ Ａ／ ｌ ｌｓａ ｄ ｐ ｌ ｎ ｒ ｕ ｅ ｃ ｌｓｓＬｉＨｏ ｇ，Ｃａ － Ｂ ａｌ ｅ ｎ ｕｍｏ ａ ｙ ｔｂ ｒｕｏｉ ｎ ｅ ｉ Ｓ ａ ｊ ｎ，Ｊ ａ ｇＭｏ，Ｓ ｈ ｎｕ ｉｎ ｕＧａ ｇ，Ｘｉ Ｂｉ ＬｏＪｕ ｍｉ ｇ．Ｄｅ ａ ｔ ｎ ｆＯｐ ｔ ａ ｍｏｏ ｙ，ｔ ｅ ｆ ｌａ ｎ ｅ ｎ， ｎ ｎ ｐ ｒｍｅ ｔ ｏ ｕｚ ｏ ｅ ｉａ Ｊ ｕ ｎ ｌ２ １ Ｖｏ． ４， ． ｉｈ ｕ Ｍ ｄｃ ｌ ｏ ｒ ａ， Ｏ ０， １３ Ｎｏ ２
ＨＬ — ／ Ｑ， Ａ Ａ Ｂ与肺 结 核 Ａ ＤＲ Ｄ ＨＬ —／ 相关 性研 究 ＊
遵 义 医学 院附 属 医 院 眼 科 （５ ３ 。 ６。 谢
ｐ ｌ ｎ ｒ ｕ ｅ ｃ ｌ ｓｓ ｎ ｏ ｅ ｐ ｏ ｅ ｓ ｓ ｅ ｔｂ ｅ ｇ ｎ ｓ ａ ｓ ｃａ ｅ ｔ ｕ ｍｏ ａ ｙ ｔ ｂ ｒ ｕ ｏ ｉ ｉ ｕ ｍｏ ａ ｙ ｔ ｂ ｒ ｕ ｏ ｉ ，ａ ｄ ｔ ｘ ｌ ｒ ｕ ｃ ｐ ｉ ｌ ｅ ｅ ｓ ｏ ｉｔ ｄ ｗｉｈ ｐ ｌ ｎ ｒ ｕ ｅ ｃ ｌ ｓｓ ｎ ａ
李 红
蔡善君 ▲ 蒋
公卫执业医师考试辅导：HLA分型技术
公卫执业医师考试辅导：HLA分型技术HLA分型并不只是一种应用性的临床检测指标，免疫遗传学研究的发展，很大程度上依赖于以分型为主要手段的HLA多态性分析。
60年代建立的并不断完善的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性；80年代起建立的DNA分型方法则侧重于基因的分型。
一、血清学分型技术（一)HLA-Ⅰ类抗原的检测HLA-A、B、C抗原型别鉴定均借助微量淋巴细胞毒试验（microlymphocytotoxicitytest)或称补体依赖的细胞毒试验（complement dependent cytotoxicitytest)。
原理为取已知HLA抗血清加入待测外周血淋巴细胞，作用后加入免补体，充分作用后加入染料，在倒置显微镜下判断结果，着染的细胞为死亡细胞，表示待检淋巴细胞表面具有已知抗血清所针对的抗原。
标准抗原清取自多次经产妇或计划免疫志愿者。
（二)HLA-DR、DQ抗原检测该二抗原分型方法同HLA-Ⅰ类抗原，但所用抗血清须经过血小板吸收以去除针对Ⅰ类抗原的抗体。
另外，待测细胞须是经纯化的B 细胞。
血清学分型是一项古老的技术，虽然近年来已建立许多新的分型技术，但血清学方法目前仍是HLA分型的基础。
公卫执业医师考试频道为大家推出【年公卫执业医师考试课程！】考生可点击以下入口进入免费试听页面！足不出户就可以边听课边学习，为大家的取证梦想助力!【电脑用户】→点击进入免费试听>>二、细胞学分型技术HLA-Dw特异性与HLA-DP特异性可分别通过纯合分型细胞（homozygote typing cell,HTC)及预致敏淋巴细胞试验（primed lymphocyte test,PLT)检测。
二种方法的基本原理均是判断淋巴细胞在识别非已HLA抗原决定簇后发生的增殖反应。
由于分型细胞来源困难以及操作手续繁琐，细胞学分型技术下正逐渐淘汰。
三、HLA的DNA分型技术上述传统的HLA分型方法有许多不足之处，近年来国内外已将HLA分型技术由抗原水平发展到基因水平。
中华骨髓库CWD表2.2版本
中国常见及确认的HLA等位基因表(CWD)2.2版本中华骨髓库CWD表编撰组2016-02-15前言自1958年发现第一个人类白细胞抗原(HLA)A2抗原以来，各国科学家多年来通过协作和技术创新，极大推动了HLA领域的发展和应用，在HLA结构、功能、多态性、组织器官移植应用、人类群体遗传和进化分析等方面取得了重大成就。
目前HLA分型技术已广泛应用于多个领域，如造血干细胞捐献者建库、HLA群体遗传多态性、HLA生物学功能、实体器官和造血干细胞移植供受者组织相容性配型、与某些疾病的关联、人类遗传进化、药物个性化选择等方面。
HLA系统具有高度遗传多态性，现发现的HLA抗原共有165个，其中HLA-A位点有28个、HLA-B位点有62个、HLA-C位点有10个、HLA-DR位点有24个、HLA-DQ位点有9个、HLA-Dw位点有26个、HLA-DP位点有6个。
根据IMGT/HLA数据库 3.23版本（2016年1月19日发布），总共发现14232个HLA等位基因，其中HLA-A位点为3356个、HLA-B位点为4179个、HLA-C位点为2902个、HLA-DRB1位点为1860个、HLA-DQB1位点为900个。
一、HLA常见及确认等位基因表的提出HLA基因分型技术已得到广泛的应用，主要方法有PCR-SSP、PCR-SSO、Luminex技术、PCR-SBT等。
由于HLA基因高度多态性和检测技术的限制，在检测特定座位的分型中存在模棱两可的等位基因分型结果。
模棱两可的基因型结果是指在HLA基因分型过程中，标本指定结果中存在一种以上的HLA等位基因组合方式。
1、HLA分型检测存在模棱两可的等位基因分型结果随着HLA等位基因数量的增加，等位基因间碱基序列高度同源性也越来越高，同一位点不同等位基因之间碱基差异序列越来越少，造成检测区分难度相对增加；此外在测序过程中存在多种等位基因组合在测序区域内具有相同的杂合序列，可导致HLA基因分型时出现模棱两可的基因型结果。
排斥反应与HLA
排斥反应本质上是一种免疫反应，它是由组织表面的同种异型抗原诱导的。
这种代表个体特异性的同种抗原称为组织兼容性抗原（histocompatibility antigen）或移植抗原（transplantation antigen）。
机体内与排斥反应有关的抗原系统多达20种以上，其中能引起强而迅速排斥反应者称为主要组织兼容性抗原，其编码基因是一组紧密连锁的基因群，称为主要组织兼容性复合体（major histocompatibilitycomplex,MHC）。
控制机体免疫应答能力与调节功能的基因（immune uesponse gene,Ir gene ）也存在于MHC内。
因此，MHC不仅与移植排斥反应有关，也广泛参与免疫应答的诱导与调节。
人类的MH C称为人白细胞抗原系统（human leucocyte antigen,HLA）。
[返回]人类HLA基因复合体对人主要组织兼容性抗原系统及其基因复合体的认识比小鼠约晚10年，法国学者D ausset在1958年首先发现，肾移植后出现排斥反应的患者以及多次输血的患者血清中含有能与供者白细胞发生反应的抗体。
后者所针对的抗原即人类主要组织相溶性抗原。
由于该抗原首先在白细胞表面被发现且含量最高，而且白细胞抗原(human leucocyte anti gen,HAL)；人类MHC，即编码HLA的基因群自然数为HAL复合体。
HLA复合体定位及结构HLA复合体位于人第6号染色体的短臂上。
该区DNA片段长度约3.5～4.0×千个碱基对，占人体整个基因组的1/3000。
图5-2显示HLA复合体结构。
HLA复合体共有数十个座，传统上按其产物的结构、表达方式、组织分布与功能可将这些基因座分为三类。
图5-2 人类HLA复合体结构示意图1．HLA-Ⅰ类基因在Ⅰ基因区内存在多达31个有关的Ⅰ类基因座,其中HLA-A、HLA -B和HLA-C为经典的HLA-Ⅰ类基因,其它基因的产物分布有限,且其功能不明,另外还有许多伪基因.2.HLA-Ⅱ类基因HLA-Ⅱ类基因区包括近30个基因座,其中经典的Ⅱ类基因一般指DR、DP和DQ，它们编码的产物均为双肽链（α、β）分子。
【源版】器官移植和HLA配型
（2）阳性分型法
照射处理 +
预致T敏细胞 待测B淋巴细胞 非HLA-DP1
除DP抗原外，其他 HLA 抗原相同
刺激细胞 HLA-DP1
增殖弱 非HLA-DP1
HLA-DP1 增殖强
2. 双向MLC
遗传型不同的两个个体淋巴细胞在体外混合 培养时，由于两者HLA不同，能相互刺激导致对 方淋巴细胞增殖，故称双向MLC。
（host versus graft reaction,HVGR） 依据反应发生的时间及病理强度分为： 1、超急性排斥反应（术后开始至几个小时） 2、急性排斥反应（术后几天至几周） 3、慢性排斥反应（术后数月至数年）
超急性排斥反应发生示意图
（二）移植物抗宿主反应
（ graft versus host reaction,GVHR ） 更为严重的一种排斥反应
βα βα ββα DP DQ DR
αα α BC A
二、MHC基因遗传特点
（一）HLA为高度多态性基因 MHC基因复合体是由多个位置相
邻的基因座位组成，可以编码相同或相 似的MHC抗原。
MHC为共显性表达
Ⅱ类基因 βα βα βα
DP DQ DR
Ⅰ类基因 αα α BC A
基因型别 等位基因数 抗原特异性
肾源选择的原则： 以ABO血型完全相同者为好，选择最佳HLA配型的
供者器官，供者无传染性疾病。
移植后的临床观测: 1.T细胞总数、CD4/CD8比值、IL-2及其受体的检测， 判断排斥反应的发生和评估免疫抑制剂治疗效果； 2.必要时做肾组织活检； 3.血药浓度检测，指导合理用药，减肝、脏肾毒性 和免疫抑制。
阻断协同刺激信号诱导T细胞失能