2021年洁净手术室空气采样方法
手术室空气采样方法
层流手术室空气日常监测方法：要求日常实行动态监测，必测项目为平板采样法（沉降法）或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。
（1）回风口动态平板采样法：应在手术开始、手术2小时、手术结束前抽检3-4次。
每个回风口中部摆放3个倾斜30℃，Φ90培养皿，暴露30分钟后，37°C培养24小时。
标准：每皿菌落计数平均值应符合表4标准要求。
单皿最大值不应超过平均值3倍。
（2）动态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术进行4小时等，选择不少于3个程序，测定细菌菌落总数。
标准：I级<30cfu/m3；II级<150cfu/m3；III级<450cfu/m3；IV级<500cfu/m3。
（3）其他洁净用房在当天上午10时和下午4时各测1次，在每个回风口中部摆放3个Φ90培养皿，沉降后在37℃下培养24h。
标准：同回风口动态平板采样法标准。
层流手术室静态（空态）时空气采样方法：1、采样方法：（1）当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；当送风口分散布置时，按全室统一布点方法检测。
（2）沉降法采样时，用直径9cm的培养皿，在空气中暴露30min，37℃培养24h，培养皿中的菌落数（cfu）代表空气中沉降下来的细菌数，以个/皿表示。
（3）浮游法采样时，用裂隙采样器在空气中随机采样30min，对采样皿或采样条培养得出的菌落数（cfu），代表空气中浮游下来的细菌数，以个/m3表示。
2、采样高度：（1）采样点可布置在地面上或不高于地面的任意高度上；（2）在手术区检测时应无手术台；当手术台已固定时，检测高度应在台面之上。
3、布点方法：（见表1）4、采样注意事项：（1）在100级区域检测时，采样口应对着气流方向；在其他区域检测时，采样口均向上；（2）采样后的培养基条或培养皿，应37℃条件下培养24h，并计算菌落数，菌落数的平均值均四舍五入选位到小数点后1位；（3）当采用浮游法测定浮游菌浓度时，细菌浓度测点数应和被测区域的含尘浓度测点数相同，且宜在同一位置上。
手术室空气净化微生物监测
手术室管理与监测一、手术室空气净化微生物监测洁净手术室空气净化微生物监测包括静态〔空态〕空气采样和动态空气采样两种方法，采样可以选择平皿沉降法和空气样器法两种方法，我院采用平皿沉降法。
1、静态〔空态〕空气采样法（1）采样时间：新房验收、净化设备检修或更换后，在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样。
（2）采样方法：①静态〔空态〕空气采样宜在其他项目检测完毕，对全室外表进行常规清洁消毒之后进行。
②当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测，当送风口分散布置时，全室统一检测。
采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上。
空气采注：分布在集中送风面正投影区角的采样点距离邻近两边的距离位0.12米。
③当用平皿沉降法采样时，采样布点数既要不少于〔表1〕中的布点数，又应满足〔表2〕规定的最少培养皿数的要求表2 平皿沉降法最少培养皿数被测区域洁净度级别最少培养皿数〔Ø 9cm,以沉降30分钟计〕100级131000级 510000级 3100000级 2300000级 2④不管用何种方法检测细菌密度，都必须有2次空白对照。
第1次对用于检测的培养皿或培养基条做比照试验，每批1个对照皿。
第2次是在检测时，每室或每区1个对照皿，对操作过程做对照试验，模拟操作过程，但培养皿或培养基条打开后应又立即封盖。
两次对照结果都必须为阴性，整个操作应符合无菌操作的要求。
⑤采样后的培养基或培养皿，应立即置于36℃+1℃温箱培养48小时，计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后一位。
(3)结果判断：我国洁净手术室的等级标准以及主要洁净辅助用房等级标准分别见表3表3 洁净手术室的等级标准〔静态或空态〕等级手术室沉降法细菌最大平均密度外表最大空气洁净度级别名称手术区周边区染菌密度手术区周边区I 2 100级1000级手术室Ø9皿Ø9皿II2 1000级10000级手术室Ø9皿Ø9皿III一般洁净2个/30min 4个/30min 5个/cm2 10000级100000级手术室Ø9皿Ø9皿IV 准洁净5个/30min ·Ø9皿5个/cm2 300000级手术室注：I级眼科专用手术室周边区按10000级要求表4 洁净辅助用房的等级标准〔静态或空态〕等沉降法细菌最大平均密度外表最大染菌密度空气洁净度级别级〔个/ cm2〕I· Ø9皿 5 局部100级· Ø9皿其他区域1000级II· Ø9皿 5 10000级III4个/30min · Ø9皿 5 100000级IV5个/30min · Ø9皿 5 300000级注：细菌密度是直接所测的结果，不是沉降法和采样器法互相换算的结果。
洁净手术室空气采样方法
洁净手术室空气采样方法Revised as of 23 November 2020洁净手术室空气采样方法1、采样时间：消毒后、操作前进行采样。
2、采样方法：（1）布点：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线3点，内外点距墙1m；室内面积 >30 m2，设四角及中央5点，四角点距墙1m。
（2）平板暴露法平板直径9cm、采样高度，暴露5min。
3、检验方法平板37℃培养48h。
计数菌落数并分离致病菌。
4、平板暴露法结果计算50000N细菌总数（cfu/m3）=A×TA为平板面积（cm2）； T 为暴露时间（min）；N 为平均菌落数（cfu）5、结果判定（1）I、II类区域，细菌总数≤10cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。
（2）III类区域，细菌总数≤200cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。
（3）IV类区域，细菌总数≤500cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。
6、注意事项：采样前关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样层流手术室空气日常监测方法：要求日常实行动态监测，必测项目为平板采样法（沉降法）或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。
（1）回风口动态平板采样法：应在手术开始、手术2小时、手术结束前抽检3-4次。
每个回风口中部摆放3个倾斜30℃，Φ90 培养皿，暴露30分钟后，37°C培养24小时。
标准：每皿菌落计数平均值应符合表4标准要求。
单皿最大值不应超过平均值3倍。
（2）动态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术进行4小时等，选择不少于3个程序，测定细菌菌落总数。
标准：I级<30cfu/m3 ；II级<150 cfu/m3；III级<450 cfu/m3；IV级<500cfu/m3。
（3）其他洁净用房在当天上午10时和下午4时各测1次，在每个回风口中部摆放3个Φ90培养皿，沉降后在37℃下培养24h。
手术室空气采样方法
1、采样时间：消毒后、操作前进行采样。
2、采样方法：(1)布点：室内面积w 30 m2,设内、中、外对角线3点，内外点距墙1m;室内面积＞30 m2，设四角及中央5点，四角点距墙1m。
(2)平板暴露法平板直径9cm采样高度，暴露5min。
3、检验方法平板37 C培养48h。
计数菌落数并分离致病菌。
4、平板暴露法结果计算50000N细菌总数(cfu/m3 ) =A X TA为平板面积(cm2); T为暴露时间(min); N为平均菌落数(cfu )5、结果判定(1)I、II类区域，细菌总数w 10cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。
(2)III类区域，细菌总数w 200cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。
(3)IV类区域，细菌总数w 500cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。
6、注意事项：采样前关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min进行采样层流手术室空气日常监测方法：要求日常实行动态监测，必测项目为平板采样法(沉降法)或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。
(1)回风口动态平板采样法：应在手术开始、手术2小时、手术结束前抽检3-4次。
每个回风口中部摆放3个倾斜30C,①90培养皿，暴露30分钟后，37°C培养24小时。
标准：每皿菌落计数平均值应符合表4标准要求。
单皿最大值不应超过平均值3倍。
(2)动态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术进行4小时等，选择不少于3个程序，测定细菌菌落总数。
标准：I 级＜30cfu/m3 ；II 级＜150 cfu/m3 ；III 级＜450 cfu/m3 ；IV 级＜500 cfu/m3。
(3)其他洁净用房在当天上午10时和下午4时各测1次，在每个回风口中部摆放3个①90培养皿，沉降后在37C下培养24h。
标准：同回风口动态平板采样法标准。
层流手术室静态(空态)时空气采样方法：1、采样方法：(1)当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；当送风口分散布置时, 按全室统一布点方法检测。
洁净手术室的取样
洁净手术室的取样
百级：布点：局部百级区5点（双对角线布点）、Ⅰ级周边区8点（每边内2点）
千级：布点：Ⅱ级周边区6点（长边内2点，短边内1点）
万级：布点：Ⅲ（10万级）级周边区4点（每边内1点）
布点；Ⅳ（30万级）级周边区，面积＞30m2，布4点（每边内1点）；面积≤30m2，布2点，均避开送风口正下方。
1、测点布置在距地面0.8m的平面上，在手术区检测时应无手术台；当手术台已固定，测点高度在台面之上0.25m。
2、在100级检测时，采样口应对着气流方向，在其他级别区域检测时，采样口均向上。
3、检测人员不得多于2人，都应该穿洁净工作服，处于测点下风向的位置，尽量少动作。
4、采样时间为30min。
5、结果判定：
Ⅰ级洁净手术室：手术区≤10cfu/m3，周边区≤10cfu/m3(特别洁净手术室)
用于关节置换、器官移植手术及脑外科、心脏外科和眼科等手术中的无菌手术。
Ⅱ级洁净手术室：手术区≤25cfu//m3，周边区≤50cfu/m3 (标准洁净手术室)
用于胸外科、整形外科手术、泌尿外科、肝胆胰外科、骨外科和普通外科中的Ⅰ类切口无菌手术。
Ⅲ级洁净手术室：手术区≤75cfu//m3，周边区≤150cfu/m3(一般洁净手术室)
用于普通外科（除去Ⅰ类切口手术）、妇产手术。
Ⅳ级洁净手术室≤175cfu/m3(准洁净手术室）
用于肛肠手术及污染类手术。
空气培养的采样方法
医院常规空气细菌培养（自然沉降法）采样方法一、采样时间?????选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。
二、采样高度与地面垂直高度80-150厘米。
三、布点方法1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1）2．室内面积>30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1米（图2）四、采样方法用9厘米直径普通琼脂平皿，打开盖后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5分钟后，送检培养。
五、结果分析I类区域：<10 cfu/m3II类区域：<200 cfu/m3III类区域：<500 cfu/m3六、附录Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与标准）。
Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。
Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。
Ⅳ类区域：传染病科及病房。
洁净室空气细菌培养监测布点与标准一、局部百级，周围千级：共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。
采样布置点示意图：二、局部千级，周围万级：共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。
采样布置点示意图：三、局部万级，周围十万级：共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。
采样布置点示意图：四、三十万级：面积>30m2布放4点，面积≤30 m2布放2点。
五、要求：1.送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；如送风口分散布置时，全室统一检测，测点可均布，不应布置在送风门正下方；2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m，培养皿放置30分钟；3.采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养48小时；4.然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。
洁净手术室空气采样方法之欧阳体创编
洁净手术室空气采样办法1、采样时间：消毒后、操纵前进行采样。
2、采样办法：（1）布点：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线3点，内外点距墙1m；室内面积>30 m2，设四角及中央5点，四角点距墙1m。
（2）平板流露法平板直径9cm、采样高度1.5m，流露5min。
3、检验办法平板37℃培养48h。
计数菌落数并别离致病菌。
4、平板流露法结果计算50000N细菌总数（cfu/m3）=A×TA为平板面积（cm2）；T 为流露时间（min）；N 为平均菌落数（cfu）5、结果判定（1）I、II类区域，细菌总数≤10cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。
（2）III类区域，细菌总数≤200cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。
（3）IV类区域，细菌总数≤500cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。
6、注意事项：采样前关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样层流手术室空气日常监测办法：要求日常实行静态监测，必测项目为平板采样法（沉降法）或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。
（1）回风口静态平板采样法：应在手术开始、手术2小时、手术结束前抽检34次。
每个回风口中部摆放3个倾斜30℃，Φ90 培养皿，流露30分钟后，37°C培养24小时。
标准：每皿菌落计数平均值应合适表4标准要求。
单皿最年夜值不该超出平均值3倍。
（2）静态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术进行4小时等，选择很多于3个法度，测定细菌菌落总数。
标准：I级<30cfu/m3 ；II级<150 cfu/m3；III级<450 cfu/m3；IV级<500 cfu/m3。
（3）其他洁净用房在当天上午10时和下午4时各测1次，在每个回风口中部摆放3个Φ90培养皿，沉降0.5h后在37℃下培养24h。
标准：同回风口静态平板采样法标准。
层流手术室静态（空态）时空气采样办法：1、采样办法：（1）当送风口集中安插时，应敌手术区和周边区辨别检测；当送风口分离安插时，按全室统一布点办法检测。
手术室常用环境监测方法
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谢 谢！
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手术室常用环境卫生学 检测方法
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主要内容
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医院环境卫生学是研究医院环境与医院人群健康 关系的一门学科,重点是研究医院中各种有害因 素,如物理、化学、生物因素等对患者、医务人 员及社会人群的危害及预防措施的科学。良好的 医院环境可减少和防止医院环境污染，降低医院 内感染的发病率，防止医院生物学有害因素对社 会的传播。
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环境卫生学检测范围
①Ⅰ类环境包括： 层流洁净手术室，层流洁净室。
②Ⅱ类环境包括： 普通手术室，导管室，产房，新生儿 室，早产儿室，普通保护性隔离室，消毒供应中心无菌物 品存放区，烧伤病房，重症监护病房。
③Ⅲ类环境包括： 普通病房的检查室，注射室，换药室， 治疗室，血液净化室，消毒供应中心检查包装及灭菌区。
2、供应室、透析室、各普通病区、母婴同室、门 （急）诊及其检查室、治疗室、感染性疾病科、 肝胆科等（Ⅲ、Ⅳ 类）物体表面细菌菌落总数 ≤10 cfu/ cm2。
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手卫生学监测
手卫生是减少医院感染最简单、最有效、最经 济的方法。医务人员每日坚持高质量的洗手消 毒可使医院感染发生率减低25%~50%；手卫生 是预防和控制医院感染散发和流行爆发的重要 措施，是具有很高效益的医院感染控制措施。
外向内，不能跨越培养皿暴露部位。 5、进行手卫生监测取样时，必须严格按照七步洗手
法认真洗手，并用消毒毛巾擦干水。
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院感规定的取样时间
进
取样的前一天和主班
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洁净手术室空气采样办法
欧阳光明（2021.03.07）
1、采样时间：消毒后、操纵前进行采样。
2、采样办法：（1）布点：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线3点，内外点距墙1m；室内面积>30 m2，设四角及中央5点，四角点距墙1m。
（2）平板流露法平板直径9cm、采样高度1.5m，流露5min。
3、检验办法平板37℃培养48h。
计数菌落数并别离致病菌。
4、平板流露法结果计算
50000N
细菌总数（cfu/m3）=A×T
A为平板面积（cm2）；T 为流露时间（min）；N 为平均菌落数（cfu）5、结果判定（1）I、II类区域，细菌总数≤10cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。
（2）III类区域，细菌总数≤200cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。
（3）IV类区域，细菌总数≤500cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。
6、注意事项：采样前关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样
层流手术室空气日常监测办法：
要求日常实行静态监测，必测项目为平板采样法（沉降法）或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。
（1）回风口静态平板采样法：应在手术开始、手术2小时、手术
结束前抽检34次。
每个回风口中部摆放3个倾斜30℃，Φ90 培养皿，流露30分钟后，37°C培养24小时。
标准：每皿菌落计数平均值应合适表4标准要求。
单皿最年夜值不该超出平均值3倍。
（2）静态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术进行4小时等，选择很多于3个法度，测定细菌菌落总数。
标准：I级<30cfu/m3 ；II级<150 cfu/m3；III级<450 cfu/m3；IV 级<500 cfu/m3。
（3）其他洁净用房在当天上午10时和下午4时各测1次，在每个回风口中部摆放3个Φ90培养皿，沉降0.5h后在37℃下培养24h。
标准：同回风口静态平板采样法标准。
层流手术室静态（空态）时空气采样办法：
1、采样办法：
（1）当送风口集中安插时，应敌手术区和周边区辨别检测；当送风口分离安插时，按全室统一布点办法检测。
（2）沉降法采样时，用直径9cm的培养皿，在空气中流露30min，37℃培养24h，培养皿中的菌落数（cfu）代表空气中沉降下来的细菌数，以个/皿暗示。
（3）浮游法采样时，用裂隙采样器在空气中随机采样30min，对采样皿或采样条培养得出的菌落数（cfu），代表空气中浮游下来的细菌数，以个/m3暗示。
2、采样高度：
（1）采样点可安插在空中上或不高于空中0.8m的任意高度上；
（2）在手术区检测时应无手术台；当手术台已固按时，检测高度应在台面之上0.25cm。
3、布点办法：
洁净手术室空气采关布点位置与办法区域最少测点数手术区图示Ⅰ级洁净手术室5点（双对角线布点）手术区和洁净帮助用房 8点（每边内2点）局部100级区Ⅰ级周边区
Ⅱ～Ⅲ级洁净手术3点（单对角线布点）集中送风面正投影区室手术区 6点（长边内2点，短边内1点）集中送风面正投影区
Ⅱ级周边区4点（每边内1点）Ⅲ级周边区
Ⅳ级洁净手术室及分离 4点（避开送风口正下方）
安插送风口的洁净室面 2点（避开送风口正下方）
积＞30㎡面积≤30㎡
注：散布在集中送风面正投影区角的采样点距离邻近两边的距离位0.12米
4、采样注意事项：
（1）在100级区域检测时，采样口应对着气流标的目的；在其他区域检测时，采样口均向上；
（2）采样后的培养基条或培养皿，应37℃条件下培养24h，并计
算菌落数，菌落数的平均值均四舍五入选位到小数点后1位；
（3）当采取浮游法测定浮游菌浓度时，细菌浓度测点数应和被测区域的含尘浓度测点数相同，且宜在同一位置上。
每次采样应满足表8的最小采样量的要求，每次采样时间不该小于30分钟。
（4）当用沉降法测定沉降菌浓度时，细菌浓度测点数即要很多于含尘浓度测点数，应满足表9规定的最少培养皿数的要求（不含对比皿）。
如沉降时间适当延长，则最少要求培养皿数可按比例减少，但不克不及少于含尘浓度的最少测点数。
（5）不管用何种办法检测细菌浓度，都必须有两次空白对比。
第一次用于检测培养皿或培养基条（每批一个对比皿（条））；第2次对操纵过程做对比试验（每室或每区将1个对比皿（条），掀开后又立即封盖，进行模拟操纵）；两次对比结果必须为阴性，整个操纵过程应合适无菌操纵的要求。
（6）新房验收时，应最后做空气、物表细菌检测。