Folin-Wu法定量测定血糖的含量(精)
血糖含量的定量测定(Folin-Wu法
一、目的
1、掌握Folin－Wu法测定血糖含量的原理和方法。
2、学会制备无蛋白血滤液。
3、掌握7200型可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理
葡萄糖是一种多羟基的醛类化合物。
其醛基具有还原性，与碱性铜试剂混合加热，葡萄糖分子中的醛基被氧化成羧基，，Cu2+即被葡萄糖还原成Cu+（Cu2O）而沉淀。
无蛋白血滤液中的葡萄糖和酸性钼酸盐溶液共热反应, Cu2O又把酸性钼酸试剂（Mo6+）还原成低价的蓝色钼化合物—钼蓝。
血滤液中葡萄糖的含量与产生的Cu2O成正比，而Cu2O的量与产生的钼化合物的量成正比。
可用比色法定量的测定。
3、实验仪器
1、25mL血糖管×3支；
2、血糖管橡胶塞×3个；
3、1mL胖肚吸管×1支；
4、100mL锥形瓶×2个；
5、漏斗架×1个；
6、普通漏斗×2个；
7、水浴锅×1个；
8、电炉×1个；
9、移液管 1mL×2支; 2mL×3支;5 mL×2支;
10 mL×1支; 10、滤纸×1盒；
11、吸耳球×2个；
12、7200型分光光度计×1台;
13、表面皿×1个
4、实验试剂
1、标准葡萄糖溶液（0.1mg/ml）
(11%葡萄糖母液：称取1.000g葡萄糖，溶于蒸馏水，稀释并定容至100ml。
(2葡萄糖标准液：取1.0ml葡萄糖母液于100ml容量瓶中，加蒸馏水定容。
2、碱性硫酸铜溶液
A液：无水碳酸钠35g，酒石酸钠13g及碳酸氢钠11g溶于蒸馏水，稀释定容至1000ml.
B液：硫酸铜晶体5g，溶于蒸馏水并定容至100ml。
临用时，A液：B液=9：1混合（体积比），混合液于冰箱中保存（4℃）。
3、10%钨酸钠溶液：称取钨酸钠10g，溶于蒸馏水并定容至100毫升。
4、0.33mol/LH2SO4溶液：于53ml蒸馏水中加入1ml的浓硫酸。
5、酸性钼酸盐溶液：
称取钼酸钠600g,用少量蒸馏水溶解后倾入2000ml 的容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，倾入另一较大的试剂瓶中，加溴水0.5ml，摇匀，静止数小时后取上清夜500ml，于1000ml容量瓶中，徐徐加入225ml85%磷酸，边加边摇匀，再加25%硫酸150ml。
置暗处次日，用空气将剩余的溴赶去。
然后加99%醋酸75ml，摇匀，用蒸馏水稀释定容至1000ml,贮于棕色瓶中。
5、实验步骤
1、无蛋白血滤液的制备：
氏吸管吸取全血（已加抗凝剂）1ml,缓缓放入100ml锥形瓶中，加蒸馏水7ml，摇匀，溶血后（血液变为红色透明）加10%钨酸钠1ml，摇匀.。
再加0.33mol/L H2SO41ml，边加边摇，加毕充分摇匀，放置5～15分钟，至沉淀变为暗棕色（如不变色可再加0.33mol/L H2SO41-2滴）。
用干滤纸过滤。
先倾入少许，待滤纸湿润后在全部倒入，如滤液不清需重新过滤。
每毫升无蛋白血滤液相当于1/10ml全血。
2、血糖的定量测定：
1、取25ml的血糖管3支，编号。
第一支血糖管中加入2ml蒸馏水（空白管）；第二支血糖管中加2ml标准葡萄糖液；用吸管吸取无蛋白血滤液2ml，放入第三支血糖管中。
2、然后向三支血糖管中各加入2ml新配制的碱性硫酸铜溶液，同时置于沸水浴中8分钟，取出，在流水中迅速冷却后,勿摇动，各加4ml酸性钼酸盐溶液。
3、一分钟后，用蒸馏水稀释至25ml，混匀，用7200分光光度计在420nm波长处比色，以空白管调节零点。
六、实验结果
样品A1（吸光度）标准液A0
（吸光度）
水
（吸光度）
10.1690.1300.000 20.1900.1350.000 30.1940.1280.000平均值0.1840.1310.000
m=A1/A2*C*10*100
m代表100ml全血中含血糖毫克数
C0代表标准液葡萄糖含量（0.1mg/ml）
A1代表样品液光吸收值
A0代表标准液光吸收值
所以可得出m=0.184/0.131*0.1*10*100=140.4580153···约等于140.458mg。
7、实验分析
1、实验过程中哪些操作可能影响实验结果的准确性？
在沉淀不完全时过滤，吸管中放出血液太快使大量血液黏在吸管内壁，或有亚铜离子氧化成铜离子，比色测量时也可能会出现误差。
2、实验中，血糖管有什么作用？
可减少亚铜离子与空气的接触，防止氧化成铜离子。
3、实验过程中，为什么要用流水冷却加入碱性硫酸铜液反应后的血糖管？
流水冷却比较稳定，可以迅速降温。
如不冷却会继续反应造成误差。
血糖的测定Folin吴法
原理
无蛋白血滤液 葡萄糖
碱性铜试剂 磷钼酸试剂
Cu(OH) 2 磷钼酸
原理
葡萄糖 ＋ Cu(OH)2
Cu2O↓
Cu2O ＋ 磷钼酸
钼兰
原理
钼兰的蓝色深浅与葡萄糖的含量成正比 用比色法可测定空
准
定
白
管
管
管
已知浓度葡 萄糖溶液 0.025mg/ ml
未知浓度 无蛋白血 滤液
蒸馏水
（mg/dl） 空腹血糖
临床意义
正常
怀疑
糠尿病
＜110 110-139 ≥140
餐后两小时血糖 ＜140 140-199 ≥200
服糖后两小时糖 ＜140 140-199 ≥200
注意事项
测定结果比实际血糖含量高，因为 无蛋白血滤液中，除含有葡萄糖外， 尚有微量的其他还原物质 ,如Vit C、 尿酸等。
实验八 血糖的测定
Folin-吴法
Folin-吴法
吴宪：我国著名生物化学家和营养学家 1912 年 美国麻省理工学院 学习化学 1917 年 哈佛大学医学院 师从美国著 名生物化学家福林(Otto Folin）教授 进行血液化学研究
Folin-吴法
研究期间改进血糖定量分析方法 吴宪改进的血糖测定法，为后来的胰岛 素发现奠定了基础
中国海洋大学资料生物化学课件实验实验 Folin-Wu法定量测定 (2)
2、血糖的定量测定：
取25ml的血糖管3支，编号。第一支血糖管中加入2ml蒸 馏水（空白管）；第二支血糖管中加2ml标准葡萄糖液； 用吸管吸取无蛋白血滤液2ml，放入第三支血糖管中。
然后向三支血糖管中各加入2ml新配制的碱性硫酸铜溶
液，同时置于沸水浴中8分钟，取出，在流水中迅速冷
却后,勿摇动，各加4ml酸性钼酸盐溶液。
式中: m=100ml全血中含血糖毫克数 ; C0=标准液葡萄糖含量 （0.1mg/ml） A1=样品液光吸收值 ; A0=标准液光吸收值
0.1：1ml无蛋白血溶液相对于0.1ml全血
七、思考题
实验过程中那些操作可能影响实验结果的
准确性？
实验中，血糖管有什么作用？ 实验过程中，为什么要用流水冷却加入碱
无蛋白血滤液中的葡萄糖和碱性硫酸铜溶液共热反应, Cu2O又把酸性钼酸试剂（Mo6+）还原成低价的蓝色钼化合物— 钼蓝 。 Cu2O+酸性钼酸试剂 蓝色钼化合物 OD420比色
血滤液中葡萄糖的含量与产生的Cu2O成正比，而Cu2O的量 与产生的钼化合物的量成正比。可用比色法定量的测定。三、实Leabharlann 仪器性硫酸铜液反应后的血糖管？
注意事项
1.加硫酸、钨酸钠时，要边加边摇匀 2.沉淀由鲜红变为暗棕色，是因钨酸钠与硫酸生成钨酸，在 适当酸度时，使血红蛋白变性沉淀，如果沉淀不变暗棕色或 重新过滤后仍混浊，是因为血液中所加抗凝剂过多，可以加 入10％硫酸1-2滴，待暗棕色后再过滤。 3.用定量滤纸过滤后应该得到完全澄清无色之无蛋白血滤液。 如果得到仍带有红色的血滤液则说明蛋白质未被完全去除。
五、实验步骤
• 1、无蛋白血滤液的制备：
• 用奥氏吸管吸取全血（已加抗凝剂） 1ml, 缓缓放入 100ml 锥形瓶中，加蒸馏水 7ml ，摇匀，溶血后（血 液变为红色透明）加10%钨酸钠1ml，摇匀.。 • 再加0.33mol/L H2SO41ml，边加边摇，加毕充分摇匀， 放置5～15分钟，至沉淀变为暗棕色（如不变色可再 加0.33mol/L H2SO41-2滴）。 • 用干滤纸过滤。先倾入少许，待滤纸湿润后在全部 倒入，如滤液不清需重新过滤。每毫升无蛋白血滤 液相当于1/10ml全血。
folin吴法测血糖实验报告
folin吴法测血糖实验报告一、实验目的血糖的测定在医学诊断和糖尿病的监测中具有重要意义。
本实验旨在通过 folin 吴法测定血糖浓度，掌握该实验的原理、操作步骤及注意事项，并对实验结果进行分析和讨论。
二、实验原理folin 吴法是一种常用的血糖测定方法。
其原理基于葡萄糖在碱性溶液中与硫酸铜反应生成氧化亚铜，氧化亚铜与磷钼酸试剂反应生成蓝色的钼蓝。
颜色的深浅与葡萄糖的含量成正比，通过比色法可测定血糖浓度。
三、实验材料1、仪器分光光度计、离心机、恒温水浴锅、移液器、试管、刻度吸管等。
2、试剂（1）10%钨酸钠溶液（2）033mol/L 硫酸溶液（3）碱性硫酸铜溶液（4）磷钼酸试剂3、样本待测血液样本四、实验步骤1、样本处理（1）取适量待测血液，加入 10%钨酸钠溶液和 033mol/L 硫酸溶液，摇匀后离心，取上清液备用。
2、反应（1）取两支试管，分别标记为测定管和空白管。
（2）向测定管中加入处理后的上清液和碱性硫酸铜溶液，混匀后置于沸水浴中加热 8 分钟，取出后迅速冷却。
（3）向空白管中加入蒸馏水和碱性硫酸铜溶液，同样进行沸水浴加热和冷却处理。
3、显色（1）向测定管和空白管中分别加入磷钼酸试剂，充分混匀。
4、比色测定（1）使用分光光度计，以空白管调零，在波长 620nm 处测定测定管的吸光度值。
五、实验结果根据标准曲线或计算公式，将测定管的吸光度值转换为血糖浓度。
六、注意事项1、样本采集和处理要严格按照操作规程进行，避免溶血和污染。
2、试剂的配制要准确，保存条件要符合要求，避免失效。
3、反应过程中的温度和时间要控制准确，以保证反应的充分进行。
4、比色测定时要注意仪器的校准和调零，确保结果的准确性。
七、实验讨论1、实验结果的准确性分析可能影响实验结果准确性的因素，如样本采集、处理和保存不当，试剂质量问题，操作误差等，并提出相应的改进措施。
2、与其他血糖测定方法的比较简要介绍其他常见的血糖测定方法，如葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法等，并比较它们与 folin 吴法的优缺点。
实验二血糖定量测定
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分光光度技术
有色溶液对光线有选择性的吸收作用，不同物质由 于其分子结构不同，对不同波长光线的吸收能力也不同， 因此，每种物质都具有其特异的吸收光谱。有些无色溶 液虽对可见光无吸收作用，但所含物质可以吸收特定波 长的紫外线或红外线。分光光度法是利用物质特有的吸 收光谱来鉴别物质或测定其含量的技术。使用的仪器则 称为分光光度计 。
Cu2+( CuSO4 ) 还原糖 Cu2O +酸性钼酸试剂
Cu+(Cu2O) 蓝色钼化合物
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测定血糖含量时必须先除去其中的蛋白质，制成 无蛋白滤液，再行检验。向抗凝血中加入钨酸钠、 硫酸锌、氢氧化锌及三氯乙酸等均可制得无蛋白滤 液，现常用钨酸法。钨酸钠与硫酸作用，生成钨酸， 可使血红蛋白等变性、凝固、沉淀，离心或过滤除 去沉淀，即得无蛋白血滤液，此种滤液还适用于测 定非蛋白氮、肌酸和尿酸等
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754型操作规程
1. 开启电源，用可见光测定时打开钨灯即可，如使用紫外测定则还需打开氘灯， 指标灯亮，使仪器预热20min以上。
2. 按“Mod”键选择测试方式，使开关置于"T"。 3. 打开样品室盖（光门自动关闭），按"0％T"键进行机械调零，使数字显示为
２.０
２.０
２.０
混匀，室温放置２min，以蒸馏水定容至２５ml，混匀，倒入比色杯， 用７５４型分光光度计４４０nm波长比色（先以空白管调节零点，继测标准 管及样品管）。记录各管吸光度值。
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３、结果计算
根据比色结果计算每１００ml血液中所含葡萄糖的毫克数： １００ml全血含血糖毫克数＝OD1/OD2×C×10×100 其中C＝标准葡萄糖含量（mg/ml）； OD1＝样品液光密度 OD2＝标准液光密度
中国海洋大学资料生物化学课件实验生物化学实验教案 (2)
操作： 1、双缩脲的反应：取少量尿素晶体放在干
燥的试管中，微火加热使其熔化成液体， 此时有氨气放出，可用湿润的试纸检验， 至液体重新结晶出现白色固体时， 停止加 热，冷却。然后加10%NaOH溶液1ml，摇匀， 再加2-4滴1% CuSO4溶液，混匀，观察有无 紫色出现。 2、蛋白反应：取蛋白液 1ml，加10%NaOH溶 液 1ml ，摇匀，再加 2-4 滴 1% CuSO4 溶液， 混匀，观察有无紫色出现。
（四）
茚三酮反应
原理：蛋白质与茚三酮共热，产生兰紫色的还原茚三酮、茚 三酮和氨的缩合物。此反应为一切蛋白质及a-氨基酸所共 有。亚氨基酸（脯氨酸和羟脯氨酸）与茚三酮反应呈黄色， 含有氨基的其他物质（氨、β-Ala和许多一级胺）亦呈此 反应。反应灵敏度达1:1500000(pH5-7)，广泛用于氨基酸 定量测定。
匀，用蒸馏水稀释定容至1000ml,贮于棕色瓶中。
五、实验步骤
1、无蛋白血滤液的制备： •用奥氏吸管吸取全血（已加抗凝剂—草酸钠）1ml,缓缓
放入50ml 锥形瓶中，加蒸馏水 7ml ，摇匀，溶血后（血
液 变 为 红 色 透 明 ） 加 10% 钨 酸 钠 1ml ， 摇 匀 。 再 加 0.33mol/LH2SO41ml ，边加边摇，加毕充分摇匀，防止
温下乙醇、丙酮、中性盐硫酸胺等。
不可逆的沉淀反应：内部结构、空间构象遭到破坏，失去天然特性， 不能恢复溶解状态。重金属、生物碱试剂、过酸碱、加热、超声波、
有机溶剂等。
二、实验仪器
1、移液管 2、吸管 3、试管 4、电炉
三、实验试剂
1 、卵清蛋白液：鸡蛋清用蒸馏水稀释 10-20 倍，3-4 层纱布过滤，滤液 放在冰箱里冷藏备用。 2、饱和硫酸铵溶液：100ml蒸馏水中加硫酸铵至饱和。 3、硫酸铵晶体：用研钵研成碎末。 4、95%乙醇。 5、醋酸铅溶液：1g醋酸铅溶于蒸馏水并稀释至100ml。 6、硫酸铜溶液：1g CuSO4晶体溶于蒸馏水，稀释至100ml。 7、氯化钠晶体。 8、10%三氯乙酸溶液：10g三氯乙酸溶于蒸馏水中并稀释至100ml。 9、饱和苦味酸溶液：100ml蒸馏水中加苦味酸至饱和。 10、1%醋酸溶液。
生物化学实验--Folin-Wu法定量测定
2、血糖的定量测定：
• 取25ml的血糖管3支，编号。第一支血糖管中加入2ml蒸馏
水（空白管）；第二支血糖管中加2ml标准葡萄糖液；用吸 管吸取无蛋白血滤液2ml，放入第三支血糖管中。 • 然后向三支血糖管中各加入2ml新配制的碱性硫酸铜溶液， 同时置于沸水浴中8分钟，取出，在流水中迅速冷却后,勿摇
• 掌握7200型可见分光光度计的使用方
法。
二、实验原理
葡萄糖是一种多羟基的醛类化合物。其醛基具有还原性， 与碱性铜试剂混合加热，葡萄糖分子中的醛基被氧化成羧 基，Cu2+即被葡萄糖还原成Cu+（Cu2O）而沉淀。 Cu2+( CuSO4 )+葡萄糖 Cu+ （Cu2O）
无蛋白血滤液中的葡萄糖和酸性钼酸盐溶液共热反应, Cu2O又把酸性钼酸试剂（Mo6+）还原成低价的蓝色钼化合 物—钼蓝 。 Cu2O+酸性钼酸试剂 蓝色钼化合物 OD420比色
血滤液中葡萄糖的含量与产生的Cu2O成正比，而Cu2O的量 与产生的钼化合物的量成正比。可用比色法定量的测定。
三、实验仪器
1、25mL血糖管×3支； 3、沸水浴小锅×1个； 5、电炉×1个； 7、吸耳球×2个； 2、血糖管橡胶塞×3个； 4、100mL锥形瓶×2个； 6、滤纸×1盒； 8、7200型分光光度计×1台;
四、实验试剂
5、酸性钼酸盐溶液： • 称取钼酸钠600g,用少量蒸馏水溶解后倾入2000ml 的容量瓶中，加蒸 馏水至刻度，摇匀，倾入另一较大的试剂瓶中，加溴水0.5ml，摇匀， 静止数小时后取上清夜500ml，于1000ml容量瓶中，徐徐加入 225ml85%磷酸，边加边摇匀，再加25%硫酸150ml。 • 置暗处次日，用空气将剩余的溴赶去。然后加99%醋酸75ml，摇匀， 用蒸馏水稀释定容至1000ml,贮于棕色瓶中。
18生物化学实验吴宪Folin法测定血糖含量
18生物化学实验--吴宪-Folin法测定血糖含量标题：18生物化学实验——吴宪-Folin法测定血糖含量一、实验目的1.掌握吴宪-Folin法测定血糖含量的原理和方法。
2.学习使用分光光度计测量样品吸光度。
3.了解血糖的生理意义及其调节机制。
二、实验原理吴宪-Folin法是一种利用邻甲苯胺和硫酸铜反应生成紫红色络合物的原理，通过测量该络合物在特定波长下的吸光度来测定血糖含量的方法。
由于葡萄糖分子中含有醛基，因此可以利用这一特性进行测定。
本实验采用吴宪-Folin法进行血糖含量的测定。
三、实验步骤1.样品准备：收集受试者在禁食12小时后的静脉血，分离血清备用。
2.试剂准备：将邻甲苯胺、硫酸铜、碳酸钠等试剂按照配方准确称量，溶解定容，现配现用。
3.测定步骤：将试剂和样品按照规定比例混合，在规定温度下静置一段时间，用分光光度计在特定波长下测量吸光度，记录数据。
4.数据处理：根据吸光度和标准曲线计算血糖浓度。
四、实验结果与数据分析1.数据记录：记录受试者血糖吸光度数据（表1）。
表1：血糖吸光度数据记录表表2：血糖浓度计算表3.数据统计：对所有受试者的血糖浓度进行平均值和标准差统计（表3）。
表3：血糖浓度统计表平均值：x̄= ΣC/n (mg/dl) 标准差：s= [Σ(C-x̄)²/n]½五、结论总结与讨论根据实验数据，我们得出以下结论：1.所有受试者的血糖浓度均处于正常范围内。
这表明受试者在禁食12小时后的血糖水平处于生理正常范围。
这一结果与我们所知的人体在禁食状态下的血糖调节机制相符。
当人体处于禁食状态时，胰高血糖素分泌增加，促进肝糖原分解，使血糖水平维持在正常范围。
2.实验结果存在一定差异。
这可能与个体差异、采血时间、实验操作等因素有关。
为了获得更为准确的数据，需要进一步改进实验方法，提高操作精度和标准化程度。
此外，对于不同个体之间的比较，应考虑个体差异对实验结果的影响。
3.吴宪-Folin法是一种灵敏度高、操作简便的血糖测定方法。
2 血糖的定量测定(Folin-Wu法)
中国海洋大学实验报告姓名庞裕智专业年级生命基地班2011 题目血糖的定量测定(Folin-Wu法)学号************科目生物化学实验时间周一90节同组者田特一、实验目的1、掌握Folin－Wu法测定血糖含量的原理和方法。
2、学会制备无蛋白血滤液。
3、掌握7200型可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理葡萄糖是一种多羟基的醛类化合物。
其醛基具有还原性，与碱性铜试剂混合加热，葡萄糖分子中的醛基被氧化成羧基，Cu2+即被葡萄糖还原成Cu+（Cu2O）而沉淀。
Cu2+(CuSO4) + 葡萄糖 Cu+ （Cu2O）无蛋白血滤液中的葡萄糖和酸性钼酸盐溶液共热反应, Cu2O又把酸性钼酸试剂（Mo6+）还原成低价的蓝色钼化合物——钼蓝。
Cu2O+酸性钼酸试剂蓝色钼化合物 OD420比色血滤液中葡萄糖的含量与产生的Cu2O成正比，而Cu2O的量与产生的钼化合物的量成正比。
可用比色法定量的测定。
三、实验仪器1、25mL血糖管×3支；2、血糖管橡胶塞×3个；3、1mL胖肚吸管×1支；4、100mL锥形瓶×2个；5、漏斗架×1个；6、普通漏斗×2个；7、水浴锅×1个；8、电炉×1个；9、移液管1mL×2支；2mL×3支；5mL×2支；10mL×1支；10、滤纸×1盒；11、吸耳球×2个；12、7200型分光光度计×1台；13、表面皿×1个。
四、实验试剂1、标准葡萄糖溶液（0.1mg/ml）(1)1%葡萄糖母液：称取1.000g葡萄糖，溶于蒸馏水，稀释并定容至100ml。
(2)葡萄糖标准液：取1.0ml葡萄糖母液于100ml容量瓶中，加蒸馏水定容。
2、10%钨酸钠溶液：称取钨酸钠10g，溶于蒸馏水并定容至100毫升。
3、0.33mol/L H2SO4溶液：于53ml蒸馏水中加入1ml的浓硫酸。
血糖的测定Folin吴法
吴宪：我国著名生物化学家和营养学家 1912 年 美国麻省理工学院 学习化学 1917 年 哈佛大学医学院 师从美国著 名生物化学家福林(Otto Folin）教授 进行血液化学研究
Folin-吴法
研究期间改进血糖定量分析方法 吴宪改进的血糖测定法，为后来的胰岛 素发现奠定了基础
原理
无蛋白血滤液 碱性铜试剂 磷钼酸试剂 葡萄糖 Cu(OH) 磷钼酸
2
原理
葡萄糖 ＋ Cu(OH)2 Cu2O↓
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱCu2O
＋
磷钼酸
钼兰
原理
钼兰的蓝色深浅与葡萄糖的含量成正比 用比色法可测定血糖的含量
操作
标 准 管 测 定 管 空 白 管
已知浓度葡 萄糖溶液 0.025mg/ ml
未知浓度 无蛋白血 滤液
蒸馏水
临床意义
（mg/dl） 空腹血糖
餐后两小时血糖 服糖后两小时糖
正常 ＜110
＜140 ＜140
怀疑 110-139
140-199 140-199
糠尿病 ≥140
≥200 ≥200
注意事项
测定结果比实际血糖含量高，因为 无蛋白血滤液中，除含有葡萄糖外， 尚有微量的其他还原物质 ,如Vit C、 尿酸等。
18生物化学实验--吴宪-Folin法测定血糖含量
18 生物化学实验--吴宪-Folin法测定血糖含量吴宪 -Folin 法测定血糖含量【目的】1 (掌握吴宪 -Folin 法测定血糖含量的实验方法。
2 (熟悉吴宪 -Folin 法测定血糖含量的实验原理。
【原理】钨酸钠( Na 2 WO 4 )和硫酸作用，生成钨酸，可沉淀血液样品中的蛋白质滤除蛋白质沉淀即可制得无蛋白血滤液，此血滤液中的葡萄糖具有还原性与硷性铜试剂共热可使兰色的二价铜离子( Cu 2+ )还原成红色的氧化亚铜( Cu 2 O )沉淀。
氧化亚铜再使无色的磷钼酸还原成兰色的钼兰。
颜色深浅与葡萄糖含量成正比。
因此，将血滤液和经同样处理的标准葡葡萄溶液分别进行比色，即可求出血糖含量。
其反应如下:1 (硷性铜试剂内的反应2 (定糖显色反应【器材】1 ( Folin- 吴氏定糖管2 (中号试管3 (电炉及加热器4 ( 刻度吸管5 (微量移液器6 (漏斗of the reform of distribution system, linked to the implementation of goals, tasks, benefits, payroll management by objectives approach, effectively mobilized the enthusiasm of the staff. Meanwhile, strengthened cost management, focus on staffTraining, employee skills, service quality has been significantly improved, saving7 (分光光度计【试剂】1 ( 1/3mol/L 硫酸溶液2 ( 10% 钨酸钠3 (碱性铜试剂取无水碳酸钠 40g 溶解于 400ml 蒸馏水中，再加入酒石酸 7.5g ，溶解后定量地移入 1000ml 量瓶中，再加入结晶硫酸铜 4.5g (可先用热水浴稍微加热)，待其完全溶解后加蒸馏水至刻度，混匀贮于棕色瓶中保存。