班氏试剂和斐林试剂的比较
斐林试剂和本尼迪特试剂检测效果对比

斐林试剂和本尼迪特试剂检测效果对比高中生物学的“检测生物组织中的糖类”是一个经典且重要的实验。
2019版人教版教材中,所用检测试剂为斐林试剂。
2019版浙科版教材中则使用本尼迪特试剂(也称为班氏试剂)。
斐林试剂是由0.1 g/mL NaOH和0.05 g/mL CuSO4配制而成。
其中O.1 g/mL NaOH 溶液称为斐林试剂甲液,0.05 g/mL CuSO4称为斐林试剂乙液。
本尼迪特试剂的配制方法为l将4.3 g硫酸铜(CuS04·5H:0)溶解在50 mL水中,加热使之溶解,冷却后加水至40 mL;另将43 g柠檬酸钠和25 g无水碳酸钠溶解于150 mL水中,加热使之溶解。
冷却后将上述2份溶液混合,用水稀释至250 mL,当溶液不澄清时可过滤。
本尼迪特试剂常被认为是斐林试剂的改良试剂,避免了斐林试剂必须现配现用的缺点,可长期保存。
斐林试剂在储存上具有缺点,而人教版仍选择其作为检测试剂是否存在其他原因?斐林试剂在检测速度和灵敏度等是否具有优势?1、研究背景斐林试剂和本尼迪特试剂反应原理具有一定共性:都是利用Cu(OH)2,与还原性糖的醛基在加热条件下反应,生成砖红色的Cu2O 沉淀以检测还原性糖的存在。
但二者产生cu(OH)2的方式存在差别。
斐林试剂的甲液与乙液直接反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2再与还原性糖反应产生砖红色沉淀。
而本尼迪特试剂中Cu(OH)2的产生过程是:柠檬酸钠和碳酸钠均是强碱弱酸盐,在水中水解产生OH一,与CuSO4溶液混合时,生成的Cu(OH)2与还原性糖反应生成砖红色沉淀。
从原理分析,斐林试剂甲液与乙液强烈反应产生Cu(OH)2,(OH)2很容易沉淀,浓度相对较高。
因此,可推测其检测还原性糖的灵敏度较高。
而本尼迪特试剂利用柠檬酸钠和碳酸钠水解产生OH一,与CuSO4混合后产生的Cu(OH)2。
因为水解产生的OH一数量较少,产生的Cu(OH)2浓度也相对较低。
解读斐林试剂、班氏试剂与双缩脲试剂

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斐林 试 剂 、 氏试 剂 都是 鉴 定 可 溶 性 还原 糖 班
的试 剂 , 高 中生物 实 验 中常交 又使用 , 在 双缩 脲试
剂是 鉴定 蛋 白质 的试 剂 , 配 方 又与 斐 林 试剂 相 其 似 , 现行 高 中生 物 教 材 及课 辅 资 料 均 未作 相 关 但 介绍 , 致使 许多 师生 深感 疑 惑 。 因此 , 者 就这 3 笔 种试 剂 的配 制 方 法 、 定原 理 、 存 及使 用 方 法 、 鉴 保 实验现 象 和结果 进行 对 比 , 以解读 。 作
《 学仪 器 与实验 》 2 教 第 3卷 2 0 0 7年 第 1 2期
・2 ・ 7
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法是 将 等体积 的 乙 液加 入 到 甲液 中 , 合 均 匀 即 混
是。
表 1 裘 林试 剂 与 班 氏 试 剂 配方 比较 表
( ) 缩 脲 试 剂 的 配 制 、 存 和 使 用 方 法 2双 保
1 斐林 试剂 与班 氏试剂 () 1 两种 试剂 的 配方不 同( 表 1 见 )
( ) 种试 剂 的配制 、 存和使 用方法 不 同 2两 保
毛刷 蘸碳 素墨水 刷在 纸上 , 意前后 左右 刷匀 ( 注 如 未刷 匀 , 在纸 晾干后 再刷 一遍 ) 可 。 ④ 待纸 晾干后 , 竹签 从启 口处插 入 , 用 挑开 相 邻 的两边 。用 手揪 住纸 角 , 向拉 动撕 下纸 张 。 反
高中生物实验常用的试剂(归纳总结)

高中生物实验常用的试剂(归纳总结)第一篇:高中生物实验常用的试剂(归纳总结)生物学中常用的试剂:1.斐林试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。
用法:将斐林试剂甲液和乙液混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。
2.班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。
和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。
用于尿糖的测定。
3.双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。
用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。
如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。
4.苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。
用于检测脂肪。
可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。
5.二苯胺:用于鉴定DNA。
DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。
6.甲基绿:用于鉴定DNA。
DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。
吡罗红:检测RNA,呈红色7、50%的酒精溶液:用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。
8、70%的酒精溶液:用于医学临床上的消毒灭菌。
9、95%的酒精溶液:冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA 10、15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。
11.龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色改良苯酚品红染液:检测染色体,红色健那绿:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色12.20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。
(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶)13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。
14.碘液:用于鉴定淀粉的存在。
遇淀粉变蓝。
遇糖原变红15.丙酮:用于提取叶绿体中的色素16.层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开。
班氏试剂与菲林试剂的比较

班氏试剂与菲林试剂的比较班氏试剂的配置取无水硫酸铜1.47g,溶于100ml热水中,冷却后稀释到150ml,取柠檬酸钠173g,无水碳酸钠100g和600ml水共热,溶后冷却并加水至850ml,再将冷却的150ml硫酸铜倾入即可。
鉴定糖尿的结果沸水浴加热后的现象葡萄糖含量(g/dl)透明蓝色无加热时无变化,仅冷却后有少量沉淀微量,约0.5以下加热1分钟后即出现少量黄绿色沉淀少量,约0.5-1加热10-15秒后即出现土黄色沉淀中量,约1-2加热时很快出现多量砖红色沉淀大量,约2以上班氏试剂与斐林试剂比较:首先,两者的配方不一样。
斐林试剂主要由质量浓度为0.1g·mL-1的NaOH溶液和质量浓度为0.05g·mL-1的CuSO4溶液配制而成。
其中0.1g·mL-1的NaOH溶液称为斐林试剂甲,0.05g·mL-1的CuSO4溶液称为斐林试剂乙。
而班氏试剂的配方为:①400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠;②50mL 加热的水中加入8.5g无水硫酸铜,制成CuO4溶液;③把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠?Na2CO3溶液中,边加边搅,如产生沉淀可滤去。
其次,两者在反应原理上略有差别。
利用斐林试剂鉴定时,斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。
而班氏试剂中Cu(OH)2的产生却是这样的:柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐,在水中它们均可水解产生OH-,与柠檬酸钠?Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合时,Cu2+和OH-结合,生成Cu(OH)2,Cu(OH)2与葡萄糖中的醛基反应产生砖红色沉淀。
第三,两种试剂的保存方式不同。
斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2很容易沉淀析出,因此斐林试剂一般为现用现配;而班氏试剂的配方中,柠檬酸钠?Na2CO3为一对缓冲物质,产生的OH-数量有限,与CuSO4溶液混合后产生的Cu(OH)2浓度相对较低,不易析出,因此该试剂可长期保存。
高中生物重点实验:生物学中常用的试剂

高中生物重点实验:生物学中常用的试剂斐林试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。
用法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。
班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。
和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。
用于尿糖的测定。
双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。
用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3-4滴乙液,摇匀。
如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。
苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。
用于检测脂肪。
可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。
二苯胺:用于鉴定DNA.DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。
甲基绿:用于鉴定DNA.DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。
50%的酒精溶液:在脂肪鉴定中,用苏丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色。
75%的酒精溶液:用于杀菌消毒,75%的酒精能渗入细胞内,使蛋白质凝固变性。
低于这个浓度,酒精的渗透脱水作用减弱,杀菌力不强;而高于这个浓度,则会使细菌表面蛋白质迅速脱水,凝固成膜,妨碍酒精透入,削弱杀菌能力。
75%的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。
95%的酒精溶液:冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA.15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。
龙胆紫溶液:(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml)用于染色体着色,可将染色体染成紫色,通常染色3-5分钟。
(也可以用醋酸洋红染色) 20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。
(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶) 斐林试剂:成分:0.1g/mlNaOH(甲液)和0.05g/mlCuSO4(乙液)。
用法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。
费林试剂、班氏试剂与尿糖试纸

费林试剂、班氏试剂与尿糖试纸这三种物质均可用来检验含醛基的有机物的存在,在医学上用来检验糖尿病,其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化,但成份略有不同:
费林试剂:即硫酸铜、氢氧化钠和酒石酸钾钠组成的蓝色混合溶液。
分为菲林试剂A和费林试剂B,A为CuSO4溶液,B为氢氧化钠和酒石酸钾钠的混合溶液,使用时将A、B
等体积混合即成费林试剂。
班氏试剂:即硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸钠组成的混合液,又叫本尼迪克特(Benedict)试剂,它与醛反应的结果是与费林试剂一致的,只是比费林试剂更稳定,所以在临床化验中更常使用。
尿糖试纸:又叫硫酸铜试纸,呈白色, 带兰色斑点,用于糖尿病患者的尿糖测试。
每片含硫酸铜20毫克,枸橼酸300毫克, 碳酸钠80毫克,氢氧化钠235毫克。
尿糖试纸法快速、方便,试纸的正确使用方法为:将试纸条放在尿液中浸湿,一秒钟后取出,在一分钟内观察试纸的颜色,并与标准色板对照,根据不同的颜色来确定尿糖阳性的程度。
斐林试剂和班氏试剂

斐林试剂和班氏试剂斐林试剂和班氏试剂是生物化学领域中常用的实验试剂,它们在分子生物学研究、酶学研究、生物医学和生物工程等领域都有着广泛的应用。
本文将分别介绍斐林试剂和班氏试剂的特点、用途和操作方法。
一、斐林试剂斐林试剂是一种常用的酶标仪底物,它的化学名称为p-氨基苯甲酸亚甲基酯。
斐林试剂的特点是具有良好的溶解性和稳定性,且在酶催化反应中产生的产物具有较高的吸光度。
因此,斐林试剂常用于测定酶的活性、酶动力学研究以及酶抑制剂的筛选。
斐林试剂在酶活性测定中的应用主要基于其与酶催化产物的反应。
当酶催化反应进行时,斐林试剂被酶催化生成对应的产物,该产物能与斐林试剂反应生成有色产物,使溶液颜色发生明显的变化。
通过测定产物的吸光度变化,可以间接测定酶的活性。
操作斐林试剂时,首先需要将其溶解于适当的溶剂中,常用的溶剂有甲醇、乙醇等。
然后将溶解好的斐林试剂加入酶反应体系中,反应一定时间后,通过分光光度计测定产物的吸光度变化,从而计算出酶的活性。
二、班氏试剂班氏试剂是一种常用的酶抑制剂,其化学名称为苯胺甲酸。
班氏试剂的特点是具有较强的抑制酶活性的能力,可以选择性地抑制一些特定的酶。
因此,班氏试剂广泛应用于酶抑制剂的筛选、酶机制研究以及药物研发等领域。
班氏试剂的抑制机制主要是通过与酶结合形成酶-底物复合物,从而阻碍酶底物的结合和催化反应的进行。
班氏试剂与酶之间的结合是可逆的,一般情况下,班氏试剂的抑制效果与其浓度成正相关。
因此,在实验中可以通过调节班氏试剂的浓度来研究酶的抑制效果。
操作班氏试剂时,首先需要将其溶解于适当的溶剂中,常用的溶剂有甲醇、乙醇等。
然后将溶解好的班氏试剂加入酶反应体系中,反应一定时间后,通过测定酶活性的变化来评估班氏试剂的抑制效果。
总结斐林试剂和班氏试剂是生物化学研究中常用的实验试剂。
斐林试剂主要用于测定酶的活性和酶动力学研究,而班氏试剂主要用于酶抑制剂的筛选和酶机制研究。
在实验操作中,需要将斐林试剂和班氏试剂溶解于适当的溶剂中,然后加入酶反应体系中进行实验。
还原性糖的问题

还原性糖在糖类中,分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性。
还原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等。
用斐林试剂检测还原糖都会出现这样的颜色变化的。
蓝色就是斐林试剂本身的颜色。
棕色是从蓝色到砖红色的过度颜色,不是某种物质的颜色。
用美术观点理解。
砖红色就是还原糖与斐林试剂的显色反应的颜色。
其实还原糖都是这个过程,书上说的砖红色沉淀是最终结果。
糖里面多羟基遇到Cu(OH)2会变蓝色沉淀,而且试剂本身是氢氧化铜悬浊液也是蓝色,然后生成了Cu2O(与醛基反应),混在一起棕色,最后都变成Cu2O砖红色。
概念斐林试剂以及由柠檬酸、硫酸铜与碳酸钠配制的本尼迪特试剂常与醛糖及酮糖反应产生氧化亚铜砖红色沉淀,即试剂本身被还原,所以凡能与上述试剂发生反应的糖称为还原糖(reducing sugar),凡不能与上述试剂发生反应的糖称为非还原糖(non reducing sugar),糖苷不能发生上述反应。
葡萄糖分子中含有游离醛基,果糖分子中含有游离酮基,乳糖和麦芽糖分子中含有游离的醛基,故它们都是还原糖。
非还原性糖有蔗糖、淀粉、纤维素,核糖等,但它们都可以通过水解生成相应的还原性单糖。
性质能够还原斐林(H.von Fehling)试剂或托伦斯(B.Tollens)试剂的糖称为还原糖,所有的单糖(除二羟丙酮),不论醛糖、酮糖都是还原糖。
大部分双糖也是还原糖,蔗糖例外。
斐林试剂是含Cu2 络合物的溶液,被还原后得到砖红色Cu2O的沉淀。
托伦斯试剂被还原后能生成单质银,在试管壁上可看到“银镜”。
分子结构中含有还原性基团(如游离醛基或游离酮基基)的糖,叫还原糖。
如葡萄糖。
果糖含有游离的酮基,所以果糖也属于还原糖。
还原性一般情况下,单糖的还原能力主要来自它的醛基,如葡萄糖,而多糖则大多因为半缩醛羟基的存在。
还原后,自己会变成糖酸。
如葡萄糖就会变成葡萄糖酸。
如该糖是一酮糖,酮基就会断裂,分解成两个较小的分子,如果糖。
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班氏试剂和斐林试剂的比较
李佑勇2006-6-23搜集整理
高中生物选修本第一章“血糖的调节”一节有一演示实验——尿糖的鉴定。
该实验所用试剂为糖定性试剂——班氏试剂。
由于该实验在现象和结果上与必修本“生物组织中可溶性还原糖的鉴定”实验完全一样,因此有的学生误认为该实验中的班氏试剂就是必修本中的斐林试剂。
其实两者既有相同的地方,也有不同的地方。
首先,两者的配方不一样。
斐林试剂主要由质量浓度为0.1g·mL-1的NaOH溶液和质量
浓度为0.05g·mL-1的CuSO4溶液配制而成。
其中0.1g·mL-1的NaOH溶液称为斐林试剂甲,0.05g·mL-1的CuSO4溶液称为斐林试剂乙。
而班氏试剂的配方为:①400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠;②50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜,制成CuO4溶液;③把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠Na2CO3溶液中,边加边搅,如产生沉淀可滤去。
其次,两者在反应原理上略有差别。
利用斐林试剂鉴定时,斐林试剂甲和斐林试剂乙直接
反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。
而班氏试剂中Cu(OH)的产生却是这样的:柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐,在水中它们均可水解产生OH-,与柠檬酸钠N2
a2CO3溶液和CuSO4溶液混合时,Cu2+和OH-结合,生成Cu(OH)2,Cu(OH)2与葡萄糖中的醛基反应产生砖红色沉淀。
第三,两种试剂的反应的灵敏度和保存方式不同。
斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈反
应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2很容易沉淀析出,灵敏度较高,因此斐林试剂一般为现用现配,在实际中通常用于研究或者针对个别病人采用;而班氏试剂的配方中,柠檬酸钠Na2CO3为一对缓冲物质,产生的OH-数量有限,与CuSO4溶液混合后产生的Cu(OH)2浓度相对较低,不易析出,灵敏度较低,因此该试剂可长期保存。
在实际中通常用于生产和大多数病人检验采用
当然,同学们在学习中要着重掌握斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈反应,斐林试剂一般为现用现配。
无论利用班氏试剂还是斐林试剂,归根结底都是Cu(OH)2与醛基反应而生成砖红色的Cu2O沉淀,因此两者反应现象一样。