淋球菌临床菌株的收集流程图
淋球菌操作流程
淋球菌操作流程
样本采集
采集方法
男性患者
尿道拭子采集
尿液采集
女性患者
宫颈拭子采集
尿液采集
采集注意事项
采集前准备
核对患者信息
准备采集工具
采集过程
遵循无菌操作原则
避免污染样本
样本处理
样本保存
保存条件
低温保存
避免反复冻融
保存期限
根据实验室要求确定样本运输
运输方式
密封包装
冷藏运输
运输注意事项
遵循生物安全原则
确保样本安全到达实验室淋球菌检测
检测方法
显微镜观察
革兰氏染色观察
暗视野显微镜观察
分子生物学检测
PCR检测
基因测序
检测结果解读
阳性结果
表明存在淋球菌感染
需要进一步治疗
阴性结果
表明未检测到淋球菌
但不能完全排除感染可能
淋球菌感染治疗
治疗方法
抗生素治疗
根据药敏试验结果选择抗生素
遵循医嘱规范用药
局部治疗
清洗患处
局部涂抹药膏
治疗效果评估
复查时间
根据医生建议进行复查
复查结果解读
阴性结果表示治疗有效
阳性结果表示需要继续治疗或调整治疗方案淋球菌感染预防
预防措施
个人卫生
保持外阴清洁干燥
避免不洁性行为
公共卫生
加强性教育宣传
提高公众对淋球菌感染的认识和防范意识疫苗接种
疫苗研发进展
目前尚无针对淋球菌的疫苗上市
疫苗接种建议
关注疫苗研发进展，适时接种。
淋球菌培养及鉴定ppt课件
淋球菌培养
淋球菌是淋病的病原菌，为实验室确诊 淋病提供依据。（培养法为确诊淋病的 金标准） 淋球菌药敏试验，测定药物抑菌或杀菌 能力，以便准确有效利用药敏进行治疗。
淋球菌培养条件
淋球菌的营养要求较复杂，所用的培养 基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的 各种因子。目前国内常用的是血液琼脂 或巧克力琼脂。 国外常用的培养基有Thayer-Martin(TM)培养基、NewYork City(NYC)培养基 和Martin-Lewis(ML)培养基等。
淋球菌感染
淋病是由奈瑟淋球菌所致的泌尿生殖系 统感染。 不仅可引起男性尿道炎、女性宫颈或尿 道炎，还可经血行播散引起菌血症。 临床表现因感染的人群不同，部位不同 而有差别
实验室鉴别淋球菌
直接涂片：取尿道或宫颈脓性分泌物涂 片，作革兰染色，镜下可见大量多形核 白细胞，细胞内可见数量不等的革兰阴 性双球菌。涂片对女性检出率低，有假 阴性，必要时应作培养。 细菌培养：标本在选择性培养基上培养 ，可出现典型菌落，氧化酶试验阳性， 镜检可见到革兰阴性双球菌， 还可用检测淋球菌DNA，直接免疫荧光 试验协助确诊。
淋球菌培养关键
取材部位准确 女性病人标本：取宫颈内膜分泌物 男性病人标本：取尿道口脓性分泌物 培养基预温 立即接种 最好床边接种 合适的培养基 CO2培养
淋球菌检查ppt课件
（3）对无性交史女性可采集阴道处分泌物。 （4）直肠取材时，应将棉拭子插入肛门 2~3cm。 （5）检查淋球菌咽炎时，应从扁桃体及扁桃体 窝取材
2）标本取出后立即接种于培养基中，目前常 用加入多粘菌素的血液琼脂或巧克力培养基 3）初次分离培养应使用5%~10%CO2浊缸， 培养温度36℃为宜，24~48小时后观察
淋球菌检查
【适应证】
淋病 【禁忌证】 无 【并发症】 无
【用物准备】 无菌生理剂等
【操作流程】 1. 分泌物的涂片检查（男性） 1）用灭菌生理盐水洗净尿道口。 2）戴无菌手套，用手指由阴茎根部向尿道口方向挤 出脓液，用棉签拭子蘸取脓液，涂于载玻片上，自 然干燥后加热固定。 3）革兰氏染色 4）显微镜下观察，在多形核白细胞内发现革兰氏阴 性双球菌可明确诊断。
4) 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟，倾去多余溶液。 5）用中性脱色剂如乙醇（95%）或丙酮酸脱色 30秒，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色，革 兰氏阴性菌被褪色而呈无色。 6）用蕃红染液复染30秒，革兰氏阳性菌仍呈 紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳 性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。
2.淋球菌培养 1）取材 （1）男性患者从尿道取材，用细小棉拭子伸入尿道 2~4cm，轻轻转动并停留10~20s后取出。 （2）女性患者在妇检床上取材，先用扩阴器暴露宫 颈口，用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物，另 取一拭子插入宫颈口内1~2 cm，转动并停留 10~20s后取出。
谢 谢！
3）菌落在接触氧化酶试剂15~20S出现红色， 保持30s以上，然后逐渐变成紫色，最后是黑 色，为氧化酶试验阳性，证实为淋球菌
【注意事项】 1）涂片时不要用力涂擦，厚薄要合适。 2）培养取材时拭子伸入尿道或宫颈的深度要足 够，并停留一段时间。 3）取材后应立即接种。 4）对症状不典型的男性患者取材，最好是晨起 排尿前或排尿4h后。
临床微生物标本的采集方法与运送图文
临床微生物标本的采集方法与运送图文在医学诊断中，微生物检测被广泛应用于诊断及治疗方案制定。
正确采集和运送微生物标本是确保检测结果准确的关键步骤之一。
本文将详细介绍临床微生物标本的采集方法及运送注意事项。
采集方法血液标本血液标本采集是常用的微生物检测方法之一。
常规采集方法包括静脉血采集、指尖穿刺采集和动脉血采集等。
1.静脉血采集静脉血采集通常用于需要采集大量样本的情况下，如血培养、真菌检测、病毒检测等。
采集前应先消毒采血部位，选定静脉进行穿刺，然后注入抗凝剂。
2.指尖穿刺采集指尖穿刺采集用于小儿或需要采集微量血液时。
采集前应消毒手指或手掌，然后用专用的采血器进行采集。
3.动脉血采集动脉血采集比较少用于微生物检测，但对于严重感染、危重患者或需要测定动脉血分析得出合理治疗方案的情况下，动脉血采集是必要的。
采集前应选择合适的部位和方法，如可以选择桡动脉或股动脉，用专用的采血器进行采集。
呼吸道标本呼吸道标本采集常用于肺炎、支气管炎等疾病的微生物检测。
常规采集方法包括咳痰、纤维支气管镜、气管切开等。
1.咳痰采集咳痰采集过程中患者需要深呼吸几次，准备好试管，让患者咳出一口痰，不能含有口沫、唾液或食物颗粒等，尽可能采集量充足，同时尽量避免污染。
2.纤维支气管镜纤维支气管镜是通过口腔或鼻腔插入支气管，然后利用摄像技术和采样器具进行采集的方法。
此方法是针对深部病菌感染的有效手段。
3.气管切开气管切开是一种采集深部呼吸道标本的方法，因为它可以避免口咽部的影响。
采集前应选择合适的气管穿刺部位、清洁穿刺部位、取下上管再采集等步骤。
尿液标本尿液标本的采集主要是为了检测尿路感染等微生物，采集前需要保持尿液清洁，防止细菌污染。
1.中段尿采集中段尿采集是指采集尿液的中部部分，采集前应积极清洗外阴，然后让患者将外阴分开并向前弯腰（女性可用专用的尿盆）。
取适量中段尿，例如5ml，尽量避免皮肤分泌物或洗浴用品污染。
2.空腹尿采集空腹尿采集是指清晨患者从自然排空开始（胆红素改变尿色）到第二个排尿前采集尿样，此时虽然尿液浓度高，但细菌数量少，采集丰富，适用于对尿细菌进行检测。
淋病的实验室诊断-PPT课件
概况
• 淋病（gonorrhea）是指由淋病奈瑟氏菌引起的泌尿
生殖器化脓性感染,是法定的乙类传染病 • 主要引起的疾病有：尿道炎、宫颈炎。 • 泌尿生殖器其它部位：附睾炎、前列腺炎、输卵管炎
和盆腔炎等 • 全身其它部位（播散性淋病）：淋球菌性关节炎、腱
鞘炎、心内膜炎和脑膜炎等合并症。 • ※淋菌性咽炎、淋菌性直肠炎和淋球性眼炎、淋菌性
• 用5支70mm×10mm小试管，在1管 ~ 4管中分别加入20%经过滤灭菌的 葡 萄 糖 、 麦 芽 糖 、 蔗 糖 和 乳 糖 溶 液 各 0.05ml 。 第 5 管 不 加 糖 （ 对 照 管）。
• 每管加0.1ml BSS。 • 每管加0.05ml菌悬液，充分混匀。在37℃水浴箱中卵育4小时，观察
纸片扩散法注意事项
• 每类药品选一种为代表 • ※——菌悬液制备：一定18~24小时菌苔 • ——贴纸片的时间：菌液涂布后放置3~5分
钟，30分钟内一定要贴完 • ※——药物纸片的贮存
淋球菌抑菌圈直径判断标准(NCCLS)
药物 含量
青霉素 10IU 头孢曲松 30ug 壮观霉素 100ug 四环素 30ug 环丙沙星 50ug 氟哌酸 5ug
纸片扩散法
• —原理 • ——方法 • ——结果 • ——临床意义 • ——注意事项
纸片扩散法原理
• 将含药纸片贴到涂有淋球菌的培养基上， 药物即扩散到琼脂中。如果淋球菌对此药 敏感，则生长被抑制，在纸片周围形成一 个透明的抑菌圈。琼脂中药物浓度与纸片 距离成反比，距纸片越远药物浓度越小。 因而，可根据抑菌圈的大小判定细菌对该 药的敏感、中介、耐药
过氧化氢酶试验
• ——原理：淋球菌产生过氧化氢酶。该 酶能使过氧化氢迅速分解成水和氧气， 出现气泡。
细菌培养标本的_采集、运送与处理ppt课件
可编辑课件
采血部位
通常采血部位为肘静脉。
疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采 血为宜。
多次采血时, 应在不同部位进行。 不要从血管插管内采血。 切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取
血标本。
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可编辑课件
采血次数与间隔
急性感染患者： 从两臂分别采2份血样。 感染性心内膜炎患者: 24h内采血3次, 每次间
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可编辑课件
痰标本运送和保存
从病人留痰后应在1h内送至实验室 不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。室温下担搁数小时定植于口
咽部的非致病菌呈过度生长而肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血 杆菌检出率明显降低 未用运送培养基的标本送到实验室后应在30分钟内接种到相应培 养基
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可编辑课件
痰标本的处理
培养前的处理：
无菌操作将组织块置于无菌管内立即送检防标本干燥无菌剪刀剪碎接肉汤管内另直接接种血平板三区划线35510co除已接培养瓶的血和无菌体液外凡有真菌培养的均须接种沙氏平板划线方法同其他平板
细菌培养标本的 采集、运送与处理（需氧）
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可编辑课件
内容简介
细菌培养基本原则 常见临床标本的采集、运送与处理
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可编辑课件
及时、准确地从患者血液中分离出病原菌，才 能正确实施有效地抗菌治疗，从而有助于提高 治愈率和降低医疗费用。
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可编辑课件
采血时机
在出现临床症状后应尽快抽血作培养，最好在 发热初期和高峰或寒战时。
原则上应选择在抗菌药物应用之前，对已应用 药物而病情不允许停药的患者也应在下一次用 药前采血。
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隔不少于30分钟。 发热原因不明患者: 24-48h后可再采血2次,间
隔不少于60分钟。
淋球菌检验操作方法
淋球菌检验操作方法淋球菌检验是针对人体泌尿生殖道中淋球菌感染的常用实验室诊断方法，通过检测尿液、分泌物或分离物中的淋球菌，以确定是否存在淋球菌感染。
以下是淋球菌检验的操作方法：1. 收集样本：根据病情，可以选择采集尿液、分泌物或分离物作为样本。
对于尿液样本，应该遵循无菌技术进行采集，尽量避免污染。
对于分泌物或分离物样本，可以使用无菌尿旁采样棉签或取样棉签进行采集。
2. 样本处理：尿液样本可以直接进行培养，而分泌物或分离物样本首先需要进行离心，去除杂质，然后将上清液用于后续实验。
3. 培养：将样本涂布在适宜的培养基上，如Thayer-Martin培养基等。
这种培养基含有丰富的营养物质，可以促使淋球菌的生长。
将涂布后的培养基在CO2孵化箱中孵育，一般在35-37度下孵育24-48小时。
4. 淋球菌的形态观察：在培养箱中观察培养基上是否有典型的淋球菌生长。
淋球菌的形态为革兰氏阴性的小杆状菌，形成典型的透明、粘稠的圆锥形粘液菌落。
在显微镜下观察淋球菌的形态特征，如形态、大小、可运动性等。
5. 淋球菌的生化鉴定：对于淋球菌菌落的鉴定，可以进行一系列的生化试验。
首先是氧化酶试验，因为淋球菌为氧化酶阳性；其次是N脱酰胺酶试验，因为淋球菌能够产生N脱酰胺酶；然后是马刺试验，淋球菌样本在马刺培养基上会形成细长的菌落；最后可以进行特异性血清试验，检测淋球菌菌株的血清学特征。
6. 淋球菌的药敏试验：淋球菌的抗菌药物敏感性试验是非常重要的步骤。
使用淋球菌培养物制备药敏试验所需的菌悬液，将之滴在已经浸透了抗生素的纸片或者培养基上，然后观察抗生素的抑菌圈直径，从而确定哪些抗生素对淋球菌菌株具有抑制作用。
以上是淋球菌检验的一般操作方法。
需要注意的是，操作时需要严格遵守无菌技术，以防止交叉污染。
此外，结果的解读应该综合临床情况，结合其他检查结果进行判断。
淋球菌感染需要及时治疗，以避免引起严重的并发症。
细菌培养及菌体收集
基因工程实验流程参考图：细菌培养及菌体收集挑取单菌落于5 ml 2216E培养基中，8℃培养，100 rpm转速，振荡120 h后，12 000 rpm 离心15 min。
弃去上清液，加入10 ml TE洗涤离心后，用10 ml TE溶解菌体，混匀，–20℃保存备用。
实验一：菌株基因组DNA的提取（CTAB 方法）CTAB/NaCL溶液配制：CTAB/NaCL溶液(10% CTAB，0.7M NaCL 4.1gNaCL 溶于80ml 水中，缓慢加入10gCTAB，加热溶解)；原理：采用溶菌酶破碎细菌细胞壁，加入去污剂CTAB和EDTA消化细胞，可使核蛋白体解析，然后使蛋白和多糖杂质沉淀，DNA进入水相，再用酚、氯仿抽提纯化。
最后得到DNA。
操作流程：取3.5 ml菌悬液，加入184 μl 10% SDS，混匀，溶菌酶浓度为2mg/ml，37℃温育1 h。
加入740 μl 5 M NaCl，再加入512 μl CTAB/NaCl，混匀，65℃温育10 min。
加入等体积氯仿/异戊醇（24:1），混匀，10 000 rpm离心5 min，吸取上清液。
上清液中加入等体积苯酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1)，混匀，10 000 rpm离心5 min，吸取上清液。
加入0.6倍异丙醇，混匀，10 000 rpm离心5 min，收集DNA沉淀，用70%乙醇洗涤DNA沉淀。
用1 ml TE溶解DNA，加入终浓度为20 μg/ml RNaseA，4℃溶解过夜，–20 ℃保存。
实验二：DNA电泳鉴定1．目的学会常用的DNA琼脂糖凝胶电泳、。
2．原理DNA双螺旋分子骨架两侧带有含负电荷的磷酸根，在电场中会向正极方向移动。
不同长度的DNA由于受到凝胶介质的阻力不同，表现为不同的迁移率而被分开。
3．器材电泳仪，水平凝胶电泳槽和梳子及其制胶模块，250ml三角瓶，微波炉，台式离心机，旋涡混合器，凝胶成像系统，分光光度计，微量移液取样器，1.5ml离心管，双面微量离心管架，试管架等。
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淋球菌临床菌株的收集流程图淋球菌临床菌株的收集SOP1、标本的采集、接收与处理1.1标本采集的基本要求1.1.1应使用正规的检查方法和试剂，取材方法要简便，不需要使用特殊的仪器。
1.1.2取标本以不损伤病人为好，尽量使用非侵入性采集方法。
1.1.3所用的器材对病原体的活力无影响或影响很小。
1.1.4操作应规范化。
如取材后需要做细菌培养，应尽快接种。
1.1.5应由医务人员亲自采集标本，一般不应由病人自取。
1.1.6所有标本都应当被视为具有传染性，医务人员应戴手套谨慎操作。
1.2淋球菌培养的标本取材1.2.1男性患者：将男性采样拭子深入到尿道内2—4cm处，轻轻转动并停留10—15秒钟后取出，取出的分泌物带有黏膜细胞。
1.2.2女性患者：从女性患者的宫颈取材时，应先用温水湿润扩阴器（不可用液体石蜡等润滑油），然后将女性采样拭子插入宫颈管1-1.5cm处，轻轻转动并停留20—30秒取出。
为了提高阳性率，可同时取两份标本进行培养。
1.3标本接收的标准1.3.1标本登记：登记内容详见淋球菌菌株来源登记表。
1.3.2 对不合要求的标本，可以拒绝接收。
2、淋球菌的实验室检测2.1分泌物涂片显微镜检查2.1.1原理淋病感染者的泌尿生殖道常见有黄色脓性分泌物，取分泌物作涂片，经过革兰染色后，在显微镜下可见在多形核白细胞内或周围紧相连处有红色的呈双肾形排列的双球菌。
2.1.2方法1)涂片：将拭子在载玻片上轻轻滚动涂片。
2)固定：待涂片在室温中自然干燥，涂片经火焰固定。
3)革兰染色：（BASO珠海贝索快速革兰氏染色液）①第一液（龙胆紫液）：染10秒，水洗甩干。
②第二液（碘溶液）：染10秒，水洗甩干。
③第三液（脱色液）：脱色10-20秒，水洗甩干。
④第四液（沙黄溶液）：复染10秒，水洗甩干。
4)镜检：晾干后的载玻片滴加香柏油，先在低倍镜下找到视野后转换到油镜观察结果。
2.1.3结果2.3.1.1结果判读：淋球菌为革兰氏阴性菌，经革兰染色后呈红色，肾形，常呈双排列，两菌接触面扁平或稍凹。
菌体长约0.7um,宽约0.5um。
2.3.1.2结果报告：根据镜检的“多形核白细胞内找到革兰阴性双球菌”、“多形核白细胞外找到革兰阴性双球菌”和“未找到革兰阴性双球菌”三种结果做出相应的报告。
2.1.4临床意义1)取自男性急性淋球菌性尿道炎患者的标本，检测敏感性及特异性高达95%，作为临床诊断的依据。
2)不推荐用涂片法对女性感染者，亚临床感染和疗效检测者以及取自直肠和咽喉等其他部位的标本进行判断。
3)如果在多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性双球菌，需做培养进行确证。
4)从患者采集的标本，涂片革兰染色结果阳性，不可直接报告“找到淋球菌”2.1.5注意事项1)应根据感染者的性行为方式、病史、临床表现和检测目的，合理的选择采集标本部位。
2)涂片时不要用力涂擦，而应将棉拭子在玻片上轻轻滚动。
涂擦过度或来回涂擦，会使细胞膜破裂或变形，淋球菌从胞内溢出来。
3)涂片厚薄要适宜，脱色时间要根据涂片厚薄做适当调整。
4)革兰染色试剂：BASO珠海贝索快速革兰氏染色液，试剂要做定期的质量检查。
5)找到“革兰阴性双球菌”后按照检测操作规程，根据需要作分离培养及生化鉴定。
6)单纯在细胞外查到革兰阴性双球菌不能定为淋球菌，应作培养鉴定。
诊断淋病一定要遵守细胞内查到革兰阴性双球菌的原则。
2.2淋球菌的分离培养2.2.1原理淋球菌可以在营养丰富的培养基上及合适的环境下培养，并且生长成有一定特征的菌落。
淋球菌培养法是诊断淋病的主要依据，分离的单个菌落经纯培养后，可以进一步进行鉴定。
2.2.2方法2.2.2.1 培养（也可购买成品淋病奈瑟氏菌培养基）2.2.2.1.1T-M培养基的配制(1)准备：成分：1)GC基础粉：36g/L2)血红蛋白粉：20g/L3)VCN抑菌剂：每L添加2瓶4)VITOX添加剂; 每L添加2瓶器皿：1)三角烧瓶（1L、500ml各一个）：清洗并晾干2)水浴箱：调至50℃备用3)分析天平:开机预热30分钟4)生物安全柜：紫外线消毒30分钟5)加热磁珠搅拌器6)无菌平皿(2)配制：1)制备双倍浓度的基础培养基：将GC基础粉36g溶于488ml蒸馏水中（用1L烧瓶），充分混匀，边加热，边搅动，直至煮沸1分钟，使其完全溶解。
2)将20 g血红蛋白粉加到100ml蒸馏水中研成糊状，再逐步加入蒸馏水至488ml制成溶液。
3)将上述二液分别121℃高压灭菌15分钟，冷却到50℃左右备用。
4)配制VCN抑菌剂：每安瓿抑菌液以无菌手续加入蒸馏水2ml，摇动，使充分溶解。
5)配制VITOX增菌剂：每安瓿增菌剂以无菌手续加入所附的稀释液10ml，摇动，使充分溶解。
6)以无菌手续将GC培养基488ml、血红蛋白溶液488ml、增菌剂20ml和抑菌剂4ml混合倾注平皿至4℃储存备用。
2.2.2.1.2培养条件1)温度：淋球菌培养的最适温度为35-36℃，超过38.5℃或低于30℃便生长不良，因此，孵育的温度要恒定。
2)淋球菌为需氧菌，繁殖需要5-10%CO2环境，也可用CO2培养箱。
3)湿度：为保持一定的湿度，可在培养缸内放些浸水棉球。
2.2.2.1.3选择培养标本取材后应尽快接种于预温的TM培养基上，将拭子紧贴在培养基表面滚动涂布约四分之一培养皿；然后用接种环分区划线，以便在培养后获得单个菌落。
标本接种后，立即置于35-36℃、5-10%CO2、湿度＞70%的CO2培养箱中培养。
2.2.2.1.4纯培养挑取单个可疑菌落，转接种到TM培养基中，置35-36℃、5-10%CO2培养24-48小时，以获得纯菌。
2.2.2.2淋球菌的初步鉴定—氧化酶试验2.2.2.2.1方法：0.5-1%盐酸四甲基对苯二胺（或盐酸二甲基对苯二胺）滴加在含有疑似菌落的滤纸上。
2.2.2.2.2结果：深紫蓝色（盐酸四甲基对苯二胺）或深紫红色（盐酸二甲基对苯二胺）的为氧化酶试验阳性，颜色改变很快并且保持30秒以上。
2.2.2.2.3注意事项：1)氧化酶试验阴性可排除淋球菌，但阳性不能判为淋球菌，因某些细菌的氧化酶试验亦呈现阳性。
2)氧化酶试剂不应过分陈旧，正常的试剂应为淡红色。
试剂配好后放在棕色玻璃瓶中于4℃冰箱中避光保存，可使用一周。
3)氧化酶试剂遇铁会产生红色反应而造成假阳性，所以，操作用的接种环应避免用铁丝或电炉丝等制成，选择用镍铬丝、白金丝或一次性接种环为好。
2.2.2.3淋球菌的确证/鉴定—糖发酵试验2.2.2.3.1方法：1)取杭州天和微生物试剂有限公司的葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和乳糖细菌微量生化反应管用砂轮打开。
2)用取菌针挑取纯培养的淋球菌菌落，接种到各糖发酵管中，充分混匀。
3)37℃孵育2-4小时后观察结果。
2.2.2.3.2结果：淋球菌只发酵葡萄糖，不发酵其他糖，产酸不产气。
如葡萄糖管由原来的红色变成黄色，其他糖管颜色不变，为阳性。
2.2.2.3.3注意事项：1)试验所用糖纯度要高，应选用分析纯以上的糖。
2)待检菌株应使用应使用16-18小时的纯培养细菌。
2.2.2.4涂片单个可疑菌落制成的涂片经革兰染色后，可见约25%的菌为典型双球菌，其他75%为单球菌、四联型或八叠型。
2.2.3结果2.2.3.1结果判读：结果判读的依据为根据培养24-48小时后的菌落特征、革兰染色镜检形态、氧化酶反应及糖发酵试验等对菌株进行鉴定的结果。
2.2.3.2结果报告：经24～48小时培养，具有典型的淋球菌菌落特征（菌落为圆形、凸起、湿润、光滑、呈水珠样半透明或灰白色菌落，边缘呈花瓣状，直径0.5-1.0mm），革兰染色阴性及氧化酶试验阳性可报告为“初步鉴定有淋球菌生长”，如有糖发酵试验结果可以报告“确证培养有淋球菌生长”；培养48小时仍无淋病奈瑟菌特征菌落生长可报告”无淋球菌生长”。
2.2.4临床意义培养法有较高的敏感性和特异性，是世界卫生组织推荐的诊断淋病的“金标准”。
对女性和亚临床感染者以及疗效观察者的检测标本都有较高的敏感性。
2.2.5注意事项1)极其少量的消毒剂、防腐剂和润滑剂会影响培养阳性率。
2)淋病奈瑟菌对干燥和温度特别敏感，为了保证标本培养的阳性率，取材后应将标本接种于预温后的TM选择性培养基并尽快送到实验室。
不能及时转送的接种培养基应注意保温。
3)对于未严格按无菌操作采集的标本，标本在低温下保存超过2小时，标示不明、容器破损等的标本，实验室应予拒收。
4)观察菌落形态最好在36小时左右，小于24小时的菌落太小难以辨认，大于48小时的菌落特征会有较大改变可能误判。
3菌株保存3.1琼脂保存：淋球菌在巧克力琼脂上保存，需每天传代3．2牛奶管保存：将培养物洗于脱脂牛奶中，-25摄氏度冰箱可保存2个月，-70摄氏度冰箱可保存1年3.2.1牛奶管制备：a)前期准备：高压消毒大枪头；清洗250ml的量筒一个、500ml三角烧瓶一个、玻棒一根。
晾干备用。
b)称量：预热电子天平30分钟，去皮称量OXOID奶粉20g。
c)配制：将20g奶粉放入500ml三角烧瓶内，加少量蒸馏水，使用玻棒进行搅拌，直至奶粉充分溶解。
将溶解后的奶粉放入250ml量筒，加蒸馏水至200ml。
d)灭菌：将配制好的牛奶放入高压蒸汽灭菌器中进行灭菌消毒，121℃灭菌5分钟。
e)分装：将牛奶分装至灭菌冻存管中，每管500μl。
f)保存：-70℃保存。
(2)牛奶管质量控制：将配制的牛奶管进行无菌试验，利用无菌环取适量的牛奶接种于血平板上，37℃培养24-48h。
未长菌方可使用。
(3)牛奶管菌种保存：取纯培养24小时的新鲜淋球菌菌落，将培养物接种于牛奶管中（菌量不易太多；分管保存，每管500μl），然后冻存于-20℃（可保存2月）或-70℃冰箱保存备用（可保存1年）。
3．2.2注意事项：牛奶管冻存后，需保持低温，若溶解后反复冻融，菌株死亡率高。