16 流行性乙型脑炎病毒实验活动风险评估报告
甲乙流感病毒实验室风险评估
甲型/乙型流感病毒实验室活动风险评估报告一、生物学特征（一）种类和分型流行性感冒病毒（influenza virus），是正粘病毒科（Orthomyxoviridae）的代表种，简称流感病毒，包括人流感病毒和动物流感病毒，人流感病毒分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三型，是流行性感冒（流感）的病原体。
其中甲型流感病毒抗原性易发生变异，多次引起世界性大流行。
例如1918～1919年的大流行中，全世界至少有2000万～4000万人死于流感；乙型流感病毒对人类致病性也比较强，但是人们还没有发现乙型流感病毒引起过世界性大流行；丙型流感病毒只引起人类不明显的或轻微的上呼吸道感染，很少造成流行。
甲型流感病毒于1933年分离成功，乙型流感病毒于1940年获得，丙型流感病毒直到1949年才成功分离。
流感分类根据流感病毒感染的对象，可以将病毒分为人类流感病毒、猪流感病毒、马流感病毒以及禽流感病毒等类群，其中人类流感病毒根据其核蛋白的抗原性可以分为三类: 甲型流感病毒（Influenza A virus），又称A型流感病毒乙型流感病毒（Influenza B virus），又称B型流感病毒丙型流感病毒（Influenza C virus），又称C型流感病毒感染鸟类、猪等其他动物的流感病毒，其核蛋白的抗原性与人甲型流感病毒相同，但是由于甲型、乙型和丙型流感病毒的分类只是针对人流感病毒的，因此通常不将禽流感病毒等非人类宿主的流感病毒称作甲型流感病毒。
在核蛋白抗原性的基础上，流感病毒还根据血凝素HA和神经氨酸酶NA的抗原性分为不同的亚型。
（二）形态结构流感病毒呈球形，新分离的毒株则多呈丝状，其直径在80至120纳米之间，丝状流感病毒的长度可达4000纳米。
流感病毒结构自外而内可分为包膜、基质蛋白以及核心三部分。
病毒的核心包含了存贮病毒信息的遗传物质以及复制这些信息必须的酶。
流感病毒的遗传物质是单股负链RNA，简写为ss-RNA，ss-RNA与核蛋白 (NP)相结合，缠绕成核糖核蛋白体 (RNP)，以密度极高的形式存在。
16 流行性乙型脑炎病毒实验活动风险评估报告
流行性乙型脑炎病毒实验活动风险评估报告一、生物学特性（一）种类和病毒分型流行性乙型脑炎病毒简称乙脑病毒，属虫媒病毒的黄病毒科黄病毒属。
病毒的形态结构，基因组特性、蛋白合成及加工等于黄热病毒、登革热病毒和森林脑炎病毒等其他黄病毒高度相似。
病毒核酸为单正链RNA，基因组全长10976bp，自5’至3’端依次编码结构蛋白C、M、E，以及非结构蛋白NS1~NS5.乙脑病毒抗原性稳定，只有1个血清型。
根据E基因全序列的同源性，可将乙脑病毒分为5个基因型（I、II、III、IV和V），各基因型的分布有一定的区域性。
（二）来源乙脑病毒于1935年最先在日本乙脑患者脑组织中被分离获得，因此，又称日本脑炎病毒，所致疾病在日本称日本乙型脑炎。
1940年。
我国从脑炎死亡病人的脑组织中分离出乙脑病毒，除新疆、西藏、青海外，全国各地均有病例发生。
（三）传染性流行性乙型脑炎（简称“乙脑”）是人畜共患的自然疫源性疾病，人与许多动物（如猪、牛、马、羊、鸡、鸭、鹅等）都可以成为本病的传染源。
人被感染后，仅发生短期病毒血症且血中病毒数量较少，故患者及隐性感染者作为传染源的意义不大。
猪是乙脑病毒的自然感染者，特别是新生的幼猪，由于缺乏免疫力，具有较高的感染率和高滴度的病毒血症。
猪的感染高峰期通常比人群的发病高峰期早3周左右，因此，可通过检查猪的感染率来预测当年的流行趋势。
蚊虫感染后，病毒在蚊体内增殖，甚至随蚊越冬或经卵传代，因此，蚊虫既是传播媒介又是病毒的储存宿主。
（四）传播途径乙脑是一种由蚊类传播的人畜共患病，主要传播媒介是三带喙库蚊。
此外，致乏库蚊、白纹伊蚊、二代喙库蚊、中华按蚊等亦可携带病毒。
除蚊子外，在蠛蠓、库蠓及尘蠓中也分离到乙脑病毒。
蚊子吸血后，病毒先在其肠上皮细胞中增殖，然后进入血液并移行至唾液腺，通过叮咬猪、牛、马、羊等家畜或禽类等易感动物二传播。
受感染的蚊子可携带病毒越冬并可经卵传代。
病毒通过蚊子在蚊-猪-蚊等动物间不断循环，期间带毒蚊子若叮咬人类，则可引起人类感染。
实验活动生物危害评估报告(汇编)
实验活动生物危害评估报告为保证实验室工作人员在工作中不被危害性生物及物品所侵害，保证危害性物品不外泄，对实验室工作环境进行评估，以鉴定生物安全防护等级，保证生物安全。
一、危害程度分类及生物安全防护水平评估本实验室是为医院科研工作提供公共科研平台。
生物源危害主要是由临床取材标本（如血液、组织等）中的微生物，尤其是病原微生物引起的，包括细菌、病毒、寄生虫等，具有潜在危险性，可能引起实验室感染；此外，实验室还存在触电、火灾、化学腐蚀、偷盗等危险。
根据《实验室生物安全通用要求》，本实验室不涉及《人间传染的病原微生物名录》中高致病性微生物的分离培养及高致病性微生物的菌、毒种的保藏，实验室采用一定防护措施就能控制感染或防范灾害，或者对相应病原体存在有效的免疫方法。
评估我实验室生物安全防护水平按二级实验室（BSL-2）生物安全要求。
二、实验室工作人员和实验室安全防护的一般要求1. 吸烟危害评估及防护（1）实验室工作区内绝对禁止吸烟；（2）点燃的香烟是易燃液体的潜在火种2. 实验区内食用食物、饮料及其他危害评估及防护（1）实验室工作区内不得有食物、饮料及存在“手-口”接触可能的其他物质；（2）实验室工作区内的冰箱禁止存放食物，专用存放食物的冰箱应放置在允许进食、喝水的休息区内。
3. 使用化妆品危害评估及防护实验工作区内禁止使用化妆品进行化妆，但允许并建议经常洗手的实验人员使用护手霜。
4. 实验中眼睛和面部的风险评估及防护（1）处理腐蚀性或毒性物质时，需使用护目镜、面罩或其他保护眼睛和面部的防护用品；（2）工作人员在实验室的危险区内不要佩戴隐形眼镜，除非同时使用护目镜或面罩；（3）使用、处理能通过粘膜或皮肤感染的试剂，或有可能发生试剂溅溢的情况时，必须佩带护目镜、面罩。
5. 实验中服装和个人防护装备的一般要求（1）应穿着符合实验室工作需要的服装，工作服应干净、整洁；当工作中有危险喷溅到身上的可能时，应使用一次性塑料围裙或防渗外罩；有时还需要佩戴其他防护装备，如：手套、护目镜、面罩等；（2）个人防护服应定期更换以保持清洁，遇被危险物品严重污染，则应立即更换；（3）不得在实验室内设置值班床，严禁在实验室内住宿。
(2024版)重要病原微生物风险评估方案报告精选全文完整版
人
细菌性痢疾
可以预防和治疗
预防:疫苗。治疗：喹诺酮类,头孢类等抗生素。
7
迟钝爱德华菌
第三类
二
条件致病菌
泌尿、生殖
冷血动物体内稳定存在
人和动物
呼吸道，泌尿道，伤口感染，脑膜炎，败血症
可以预防和治疗
治疗:抗生素敏感性不可预测（须做药敏）
8
变形菌属
第三类
二
条件致病菌
泌尿、伤口、血液
可以预防和治疗
治疗:抗生素敏感性不可预测（须做药敏）
23
马红球菌
第三类
二
条件致病菌
泌尿、伤口、血液
环境中稳定存在
人和动物
免疫力低下患者的各种感染。
可以预防和治疗
治疗:胃肠外糖肽和亚胺培南至少３周，然后口服利副平加大环内脂类或四环素类
24
马隐秘杆菌
儿童咽炎,伤口及软组织感染,骨髓炎,心内膜炎。
可编辑修改精选全文完整版
重要病原微生物风险评估报告
序号
病原菌名称
危害程度分类
实验活动所需生物安全实验室级别
致病性
传播
途径
稳定性
病原微生物的宿主
暴露后的潜在后果
是否可以预防和治疗
有效的预防和治疗措施
1
大肠埃希菌
第三类
二
致病菌
呼吸、血液、泌尿
对理化因素抵抗力不强
人
腹泻,肠外化脓性炎症,败血症,脑膜炎。
可以预防和治疗
27
非典型分枝杆菌
第三类
二
条件致病菌
呼吸、泌尿道、伤口
环境中稳定存在
人和温血动物的患病组织
免疫抑制患者出现的弥散性结节状皮肤病.
甲乙流感病毒实验室风险评估
甲型/乙型流感病毒实验室活动风险评估报告一、生物学特征（一）种类和分型流行性感冒病毒（influenza virus），是正粘病毒科（Orthomyxoviridae）的代表种，简称流感病毒，包括人流感病毒和动物流感病毒，人流感病毒分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三型，是流行性感冒（流感）的病原体。
其中甲型流感病毒抗原性易发生变异，多次引起世界性大流行。
例如1918～1919年的大流行中，全世界至少有2000万～4000万人死于流感；乙型流感病毒对人类致病性也比较强，但是人们还没有发现乙型流感病毒引起过世界性大流行；丙型流感病毒只引起人类不明显的或轻微的上呼吸道感染，很少造成流行。
甲型流感病毒于1933年分离成功，乙型流感病毒于1940年获得，丙型流感病毒直到1949年才成功分离。
流感分类根据流感病毒感染的对象，可以将病毒分为人类流感病毒、猪流感病毒、马流感病毒以及禽流感病毒等类群，其中人类流感病毒根据其核蛋白的抗原性可以分为三类:甲型流感病毒（Influenza A virus），又称A型流感病毒乙型流感病毒（Influenza B virus），又称B型流感病毒丙型流感病毒（Influenza C virus），又称C型流感病毒感染鸟类、猪等其他动物的流感病毒，其核蛋白的抗原性与人甲型流感病毒相同，但是由于甲型、乙型和丙型流感病毒的分类只是针对人流感病毒的，因此通常不将禽流感病毒等非人类宿主的流感病毒称作甲型流感病毒。
在核蛋白抗原性的基础上，流感病毒还根据血凝素HA和神经氨酸酶NA的抗原性分为不同的亚型。
（二）形态结构流感病毒呈球形，新分离的毒株则多呈丝状，其直径在80至120纳米之间，丝状流感病毒的长度可达4000纳米。
流感病毒结构自外而内可分为包膜、基质蛋白以及核心三部分。
病毒的核心包含了存贮病毒信息的遗传物质以及复制这些信息必须的酶。
流感病毒的遗传物质是单股负链RNA，简写为ss-RNA，ss-RNA与核蛋白 (NP)相结合，缠绕成核糖核蛋白体 (RNP)，以密度极高的形式存在。
乙型脑炎病毒研究
中文摘要目的：流行性乙型脑炎是危害人类健康比较严重的虫媒病毒。
尽管目前乙脑的发病率有所下降，但发病区域仍呈现不断扩大的趋势。
加强乙脑的监测，就可以评估该地区乙脑的流行状况。
蚊子是JEV的主要传播媒介，对蚊子的流行性乙型脑炎病毒和虫媒病毒进行分子流行病学监测，对疾病预防具有防范意义。
方法：首先将云南省景洪县采集15份蚊虫样品研磨接种BHK-21和C6/36单层细胞，待出现细胞病变。
提取病毒RNA，并反转录cDNA进行PCR鉴定将目的基克隆到pMD18-T载体，送上海生工测序。
同时进行盖塔病毒、辛德毕斯、基孔肯雅病毒的PCR鉴定，回收并测序。
在此基础上构建了乙脑基因I型标准质粒，建立了基于SYBR Green I染料的Real-time PCR检测方法，选取Ct值制作标准曲线。
结果：乙脑PCR扩增目的基因经测序验证为乙脑基因I型，然后构建应用荧光定量PCR标准质粒。
研究建立的标准曲线能够准确定量目的基因，线性相关度很高，呈现良好的重复性，熔解曲线为单一峰型，未出现非特异性扩增。
SYBR Green I Real-time PCR与传统方法相比灵敏度要高10倍，而且与猪蓝耳病毒等，均不发生非特异性扩增，具有良好的特异性。
结论：鉴定了基因I型乙脑病毒，并构建了快速检测乙脑I型的检测方法。
通过实验初步验证了其具备良好的灵敏性和重复性，为以后乙脑的流行病学调查奠定了基础。
关键词：乙型脑炎病毒基因I型虫媒病毒荧光定量PCR前言乙型脑炎病毒，主要引起病毒性脑炎，每年可导致10,000–15,000人死亡，然而乙型脑炎是一个被忽视的热带病。
本病容易引发中枢神经系统疾病，临床上以高热、意识障碍、呼吸衰竭等神经症状为特征，具有明显的季节性和地域性。
本病的致死率为25-30%，相当一部分为婴儿，50%可造成永久性后遗症。
乙型脑炎病毒分布区域已经广泛而且还在不断地向亚洲和大洋洲区域扩展，因此乙型脑炎病毒被认为是新发和再度出现的病原菌。
流行性乙型脑炎病毒危害评估报告
流行性乙型脑炎病毒危害评估报告流行性乙型脑炎病毒危害评估报告的部分内容如下，流行性乙型脑炎是经蚊虫媒介传播的一种人畜共患性疾病。
1935年日本的学者从病死脑炎病人的脑组织中分离到该病毒，国际上，将这种病原体命名为日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)，简称''乙脑病毒〃。
我国称为''流行性乙型脑炎〃，简称''乙脑〃。
根据《中华人民共和国传染病防治法》，流行性乙型脑炎属于乙类传染病。
(-)不同实验室操作生物安全实验室级别要求根据《名录》的要求，在实验室操作可能含有和确定含有乙型脑炎病毒感染性材料或未经培养的感染性材料以及病毒培养、动物感染实验，务必在BSL—2实验室内进行；在对灭活、无感染性材料进行操作时，确认的乙脑病毒灭活措施有效后，方可进入BSL—1实验室进行诸如ELISA, PCR等后续实验检测过程。
二、背景资料(一)一般生物学特性1、形态染色乙型脑炎病毒属于黄病毒科(Flaviviridae),黄病毒属(flavi-virus)。
电镜下病毒颗粒大致呈球形，直径40~60nm左右。
超薄切片上可看到一层外膜(膜蛋白囊膜)和一个电子密集的核心(RNA蛋白)，围绕成一个清晰的结构。
负染色体可见一些明显的突起部分分布在外膜上，由32个子粒组成的衣壳呈明显的对称二十面体。
病毒基因组为llkb左右的单股、正链RNA。
脂质双分子层中镶嵌有糖基化的包膜蛋白(E)和膜蛋白(M)。
在脂蛋白囊膜表面有血凝素刺突，能凝集鸡、鹅、羊等动物红细胞。
JEV抗原性稳定，人和动物感染JEV后，均产生补体结合抗体、中和抗体和血凝抑制抗体。
2、培养特性JEV能够感染多种细胞,C6/36、BHK21、Vero等细胞株和金黄色地鼠肾、猪肾、狗肾、鸡胚等原代细胞均对乙型肝炎病毒敏感，并引起典型的细胞病变。
较敏感的细胞包括金黄色地鼠肾细胞，猪肾细胞。
乙型肝炎病毒实验活动风险评估报告
乙型肝炎病毒实验活动风险评估报告一、生物学特性（一）种类和病毒分型乙型肝炎病毒（HepatitisBvirus,HBV）在分类上归属于嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA 病毒属，是乙型肝炎的病原体。
电镜下，HBV感染者的血清中可见三种不同形态的病毒颗粒，即大球形颗粒、小球形颗粒和管形颗粒。
1.大球形颗粒亦称Dane颗粒，是具有感染性的完整的HBV颗粒，直径约42nm，由包膜和核心组成。
包膜位于病毒外层，由脂质双层和病毒编码的包膜蛋白组成.包膜蛋白的主要成分是HBsAg.病毒核心内部含病毒的DNA及DNA多聚酶。
2.小球形颗粒直径约22nm,是一种中空颗粒，是HBV感染后血液中最多见的一种。
它由HBsAg，即病毒的包膜组成。
在此颗粒中未检出DNA及DNA多聚酶，因此无感染性。
3.管形颗粒直径约22nm，长度约100～500nm。
实际上它是由小球形颗粒聚合而成，无感染性。
（二）来源1965年，Blumberg等首次报导了澳大利亚抗原。
1967年，Krugman等发现澳大利亚抗原与肝炎有关，故称其为肝炎相关抗原（HAA）。
随后证实这种抗原是HBV的表面抗原。
1970年，Dane在电镜下发现HBV完整颗粒，称之为Dane颗粒。
1979年，Galibert 测定了HBV全基因组序列。
HBV感染是全球性的公共卫生问题。
我国是乙型肝炎的高流行区，人群HBV携带率约为8%～9%，携带者超过1.2亿人。
（三）传染源主要传染源为乙型肝炎患者或无症状HBV携带者。
不论在潜伏期、急性期或慢性活动初期，病人的血清都有传染性。
（四）传播途径1.血液和血制品传播输血或注射是重要的传染途径。
此外，外科和口腔手术、针刺、共享剃刀、皮肤黏膜的微小创伤污染含少量病毒的血液，均可能导致感染。
2.垂直传播多发生于胎儿期和围生期。
此外，HBV也可通过哺乳传播。
3.性传播和密切接触传播由于乙型肝炎患者和HBsAg携带者的精液、阴道分泌物均可检出HBsAg,HBsAg阳性的配偶较其他家庭成员更易感染HBV,表明HBV可以经性途径传播。
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流行性乙型脑炎病毒实验活动风险评估报告一、生物学特性（一）种类和病毒分型流行性乙型脑炎病毒简称乙脑病毒，属虫媒病毒的黄病毒科黄病毒属。
病毒的形态结构，基因组特性、蛋白合成及加工等于黄热病毒、登革热病毒和森林脑炎病毒等其他黄病毒高度相似。
病毒核酸为单正链RNA，基因组全长10976bp，自5’至3’端依次编码结构蛋白C、M、E，以及非结构蛋白NS1~NS5.乙脑病毒抗原性稳定，只有1个血清型。
根据E基因全序列的同源性，可将乙脑病毒分为5个基因型（I、II、III、IV和V），各基因型的分布有一定的区域性。
（二）来源乙脑病毒于1935年最先在日本乙脑患者脑组织中被分离获得，因此，又称日本脑炎病毒，所致疾病在日本称日本乙型脑炎。
1940年。
我国从脑炎死亡病人的脑组织中分离出乙脑病毒，除新疆、西藏、青海外，全国各地均有病例发生。
（三）传染性流行性乙型脑炎（简称“乙脑”）是人畜共患的自然疫源性疾病，人与许多动物（如猪、牛、马、羊、鸡、鸭、鹅等）都可以成为本病的传染源。
人被感染后，仅发生短期病毒血症且血中病毒数量较少，故患者及隐性感染者作为传染源的意义不大。
猪是乙脑病毒的自然感染者，特别是新生的幼猪，由于缺乏免疫力，具有较高的感染率和高滴度的病毒血症。
猪的感染高峰期通常比人群的发病高峰期早3周左右，因此，可通过检查猪的感染率来预测当年的流行趋势。
蚊虫感染后，病毒在蚊体内增殖，甚至随蚊越冬或经卵传代，因此，蚊虫既是传播媒介又是病毒的储存宿主。
（四）传播途径乙脑是一种由蚊类传播的人畜共患病，主要传播媒介是三带喙库蚊。
此外，致乏库蚊、白纹伊蚊、二代喙库蚊、中华按蚊等亦可携带病毒。
除蚊子外，在蠛蠓、库蠓及尘蠓中也分离到乙脑病毒。
蚊子吸血后，病毒先在其肠上皮细胞中增殖，然后进入血液并移行至唾液腺，通过叮咬猪、牛、马、羊等家畜或禽类等易感动物二传播。
受感染的蚊子可携带病毒越冬并可经卵传代。
病毒通过蚊子在蚊-猪-蚊等动物间不断循环，期间带毒蚊子若叮咬人类，则可引起人类感染。
（五）易感性人群对乙脑病毒普遍易感，但感染后多表现为隐性感染及顿挫感染。
显性感染与隐性感染的比例约为1：300.因为成人多由隐性感染过得免疫力，因此，以10岁以下的儿童发病者居多，尤以2~9岁年龄组发病率较高。
近年来，由于在儿童中普遍接种疫苗，故成年人和老年人的发病率相对增高。
（六）潜伏期潜伏期为4~21d，一般为10~14d。
（七）剂量-效应关系目前尚未见有乙脑病毒对人准确感染剂量的报道。
（八）致病性病毒经带毒蚊子叮咬进入人体后，先在皮肤毛细血管内皮细胞和局部淋巴结等处增殖，随后有少量病毒进入血流从而发生短暂的第一次病毒血症。
此时，病毒随血循环散布到肝、脾等处的细胞中继续增殖的大量病毒，再侵入血流从而发生第二次病毒血症。
第二次病毒血症可引起发热、寒战及全身不适等流感样症状。
若不再继续发展者，则成为顿挫感染者，数日后即可自愈；但少数患者体内的病毒可通过血脑屏障进入脑内增殖，引起脑膜及脑组织软化。
临床上表现为高热、头痛、意识障碍、抽搐和脑膜刺激症等。
严重者可进一步发展为昏迷、中枢性呼吸衰竭或脑疝，病死率高达10%~30%，约5%~20%的幸存者会留下后遗症，表现为痴呆、失语、瘫痪及精神障碍等。
（九）变异性乙脑病毒抗原性稳定，只有1个血清型，在同一地区不同年代的分离株之间未发现明显的抗原性变异，不同地区不同时间的分离株之间也无明显差异。
（十）环境中的稳定性乙脑病毒在外界环境中抵抗力不强。
乙脑病毒对热的抵抗力较弱，56℃30min或100℃2min即可灭活。
对低温和干燥的抵抗力很强，冷冻干燥后4℃冰箱中保存数年，如加甘油或血清保存可增加其稳定性。
该病毒对酸、乙醚和三氯甲烷等脂溶剂敏感。
在酸性条件下不稳定，病毒感染性pH7~9时最为稳定。
（十一）药物敏感性目前对乙型脑炎尚无特效的治疗方法。
（十二）消毒剂敏感性乙脑病毒对化学消毒剂较敏感，乙醚、1:1000去氧胆酸钠以及常用消毒剂均可灭活病毒。
（十三）物理灭活紫外线、生物试剂的敏感性，超声波、紫外线可灭活病毒。
毒粒经蛋白酶处理，不仅可以被灭活，而且表面突出物及血凝素也全部消失。
（十四）在宿主体外存活乙脑病毒对低温和干燥的抵抗力很强，冷冻干燥后在4℃冰箱中可保存数年，如加甘油或血清保存可增加其稳定性。
病毒在不同的稀释剂内的稳定性有明显的不同，如10%水解乳蛋白和5%乳糖是比较好的稀释剂。
（十五）预防和治疗方案迄今为止，对乙型脑炎尚无特效的治疗方法，早期可使用利巴韦林、干扰素等。
同时，应采用积极的对症和支持疗法，包括维持体内水和电解质的平衡，密切观察病情变化，重点处理好高热、抽搐，控制脑水肿和呼吸衰竭等为重症状，降低病死率和减少后遗症的发生。
乙脑的预防应采用以防蚊、灭蚊及预防接种为主的综合措施。
消灭蚊滋生地，灭越冬蚊和早春蚊，重点做好牲畜棚等场所的灭蚊工作，减少人群感染机会，使用蚊帐、蚊香，涂擦驱蚊剂等措施防止被蚊叮咬。
此外，预防接种是保护易感人群的根本措施。
目前，在我国使用的是地鼠肾细胞灭活和减毒活疫苗，保护率可达60%~90%。
二、实验室相关活动风险评估与控制（一）实验室感染性因子的种类、来源和危害1.感染性因子的种类根据流行性乙型脑炎病毒病原学特性和本实验室的具体操作内容，可能的感染因子为乙脑病毒。
2.感染性因子的来源（1）用于乙脑病毒抗体检测的血液，包括全血、血清和血浆。
（2）样本采集和抗体检测过程中涉及的所有实验场所。
（3）实验室操作中可能产生的含病毒的气溶胶。
3.感染性因子可能造成的危害（1）被污染的实验器材、器皿等对实验室环境造成污染。
（2）实验室废弃物对环境造成污染。
（3）实验人员暴露后感染。
（4）实验室含病毒的气溶胶对实验室环境造成污染。
（二）实验室常规活动过程中的风险评估与控制1.实验方法（1）风险点识别未采用国家标准、行业标准或未经确认的实验方法进行检测，使用新的或变更过得国家标准或行业标准钱，未经技术确认，可能存在安全风险。
（2）风险控制措施尽量采用国家标准、行业标准进行检测，或使用经过充分验证的实验方法；在使用新的或变更过得国家标准、行业标准前，必须经过严格的技术确认。
2.样品采集（1）所用器材一次性采血针、真空采血管、消毒棉签及一次性利器盒。
（2）风险点是被虽然乙脑四通过蚊子传播的，但采血过程中若被乙脑患者的血液污染了皮肤、黏膜，或被含有乙脑病毒的血液污染了的针头刺破皮肤，也有可能被乙脑病毒感染；血液标本溅洒、废弃物处理不当等造成的环境污染。
（3）风险控制措施使用一次性采血针和真空采血管，采血人员经过正规采血培训，并熟练掌握采血技巧。
采血前做好个人防护（防护服、乳胶手套、口罩）；认真、仔细、谨慎操作，抽血后的针头直接放入利器盒内，禁止用手直接接触使用后的针头或将使用后的针头重新套上针头套；采好血厚直立于试管架中，防止倒翻；消毒棉签等污染物放入医疗废弃物专用袋中，统一进行消毒处理。
3.样本包装和运输（1）所用器材真空密封采血管、95千帕样品输送罐、A类标本运输箱（UN2814冷藏箱）、运送车辆。
（2）风险点识别若使用不合格包装进行输送，采样管、真空采血管等容器密封不严，则将不能安全有效地防止运输过程中包装容器意外破损，从而产生污染扩散的可能。
(3)风险控制措施严格按照生物安全的要求，样品采用A类要求包装和运送。
A类采用三层容器包装：第一层采用真空采血管装样本，应密闭、防渗漏；第二层采用95千帕样品运输罐，可容纳并保护第一层容器，具有密封不易破碎、耐压力防渗透且易消毒；第三层采用A类标本运输箱，要容纳并保护、固定第二层容器，且易于消毒，箱外面应贴上醒目的生物的安全标识。
其由中心专车运回实验室。
4.样品接收和前处理（1）所用器材离心机、生物安全柜。
（2）风险点识别样品管理员未按实验室《样本管理程序》（XJK/CX32）要求交接样品；样品前处理的离心过程中容器意外破碎或渗漏等，可能造成感染性物质溅出从而污染操作者的手、操作台面、器物表面及地面。
（3）风险控制措施样品接受必须在专用的区域进行，合同评审人员和收样人员严格按照样品管理程序要求交接样品，不得擅自打开包装，收样后及时洗手；开始检测前，盛装感染性材料样品的容器必须在生物安全柜中缓慢打开，开启容器时管口不能对着操作者；对含有感染性的样品进行离心时，必须将离心盖严实并关上离心机盖，才能进行离心操作。
5.样本检测过程（1）所用器材离心机、生物安全柜、移液器及吸头、洗板机及酶标仪等设备。
（2）风险点识别①离心过程中，离心管意外破裂，造成血样溢出从而污染离心机腔体，或在高速离心时形成气溶胶而污染环境。
②加样过程中血液样本意外溅洒，造成人员或台面、地面等环境污染。
③洗板、读板时液体溅出从而污染设备表面或工作台面。
④检测过程中发生职业暴露，检测人员被含有病毒的血液污染了破损的皮肤、粘液，有可能被乙脑病毒感染。
（3）风险控制措施所有检测操作均在BSL-2实验室中进行，检测人员在实验前按照二级生物安全防护要求做好个人防护；加样移液操作在生物安全柜内进行，动作轻缓；判读结果时酶标板轻拿轻放，避免体液溅出；待实验完毕，先消毒手部，再脱去手套并立即洗手；若有意外情况发生，应及时采取有效措施。
同时，按《二级生物安全实验室建设与管理》“实验室意外事故”处置。
6.阳性样本的保存（1）所有器材生物安全柜、移液器、外螺旋塑料管、可密封的塑料冻存盒。
（2）风险点识别乙脑病毒血清阳性标本留取时吸液操作不规范，导致血清溅出或污染外螺旋塑料管，阳性样本未执行双人双锁管理，都存在污染人员或环境隐患。
（3）风险控制措施按照二级生物安全防护要求做好个人防护；样本的保留在生物安全柜内进行，动作要轻缓；所有样本的血清或血浆都保留在带有螺旋盖的塑料管内，再装入可密封的塑料冻存盒中，置于—20℃以下冰箱内保存，实行双人双锁管理。
7.阳性样本上送（1）主要实验设备和器材带螺旋盖的塑料管、95千帕样品运输罐（UN2814运输罐）A类标本运输箱（UN2814冷藏箱）和运送车辆。
（2）主要风险点识别若包装不规范或运输工具无安全保障，易造成污染扩散，甚至样本丢失。
（3）风险控制措施阳性样本应严格执行规范3层包装（同样品采集），携带“可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输许可证”，由专车运送，并由专业人员全程护送。
8.实验室的清洁和消毒（1）所用器材70%~75%的酒精、施康清洗消毒液I。
（2）风险点识别工作完毕后，若不及时对工作台面、生物安全柜进行消毒，则有可能会对下次的操作人员造污然或感染。
（3）风险控制措施工作完毕后，及时对检测所涉及的工作台面、地面和生物安全柜进行消毒，使用稀释100倍的施康清洗消毒液I擦拭，用消毒液清洁后要干燥20min 以上。