湖南农业大学 细胞工程 考试重点

胞质体：除去细胞核后由质膜包围的无核细胞。

传代培养：当原代培养成功以后，继续转接培养的过程。

多倍体：体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体。

动物细胞培养：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

单倍体：体细胞染色体组数等于本物种配子染色体组数的个体。

干细胞：一类具有自我更新和分化潜能的细胞。

核体：与细胞质分离后得到的带有少量细胞质并包有质膜的细胞核。

花药和花粉培养：指离体培养花药和花粉，使小孢子改变原有的配子体发育途径，转向孢子体发育途径，形成花粉胚或花粉愈伤组织，最后形成花粉植株，从中鉴定出单倍体植株并使之二倍化的工程技术。

胚胎嵌合（胚胎融合）：将两枚或两枚以上的胚胎细胞部分或全部融合共同发育成为一个胚胎，然后移植到母体内发育成嵌合体后代的技术。

胚胎分割：借助显微操作技术或徒手操作方法切割早期胚胎成二、四等多等份再移植给受体，从而获得同卵双胎或多胎的技术。

人工种子：以植物组织培养的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子。

染色体组：生物体配子的全部染色体。

贴壁培养：指细胞贴附在一定的固相表面进行的培养。

脱分化：已分化的细胞在一定因素作用下恢复细胞分裂能力,失去原有分化状态的过程叫做脱分化。

无菌技术：防止细胞培养等实验过程中被微生物污染的技术。

微细胞：又称微核体，指含有一条或几条染色体，外有一层细胞质和一个完整质膜的核质体。

细胞重组：是指从活细胞中将细胞器及其组分分离出来，再在体外一定条件下将不同来源的细胞器及其组分重新组合，使之重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种技术。

细胞工程：以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。

细胞全能性：指细胞经分裂和分化后仍具有形成完整有机体的潜能或特性。

细胞核移植：将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中，使后者不经过精子穿透等有性过程即无性繁殖即可被激活、分裂并发育成新个体，使得核供体的基因得到完全复制。

细胞融合：是在自发或人工诱导下，两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。

细胞株：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物。

细胞系：指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的，能在体外生存的细胞群体。

细胞工程克隆：指通过无性繁殖手段获得遗传背景相同的细胞群或个体的技术。

细胞株筛选的一般步骤：1、愈伤组织的诱导与培养2、单细胞分离3、细胞无性系的分离4、细胞株筛选5、性能评价6、细胞株的获得
原代培养的步骤：1、取材2、组织块分离3、胰蛋白消化4、Hanks液漂洗两次，低速离心并弃上清液5、分散细胞6、移入培养液中进行薄层培养。

传代培养的步骤：
原代培养：指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。

严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质。

原生质体：脱去细胞壁的细胞叫原生质体。

再分化：已经脱分化的愈伤组织在一定条件下，再分化出胚状体，形成完整植株，这一过程叫作再分化。

植物组织培养：指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

植物细胞培养：在离体条件下，将分离的植物细胞通过继代培养增殖，获得大量细胞群体的一种技术。

植物细胞悬浮培养：将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中进行培养，在培养过程中能够保持良好的分散状态。

植物细胞固定化培养：将游离的植物细胞包埋在支持物内部或表面进行培养的一门技术。

转基因生物反应器：将外源基因转入细胞或动植物，利用细胞增殖或动植物代谢制备外源基因表达产物的技术。

细胞工程的应用有哪些？1、动植物快速繁殖。

2、新品种培育。

3、细胞工程生物制品。

4、细胞疗法和细胞修复。

5、生物反应器生产产品。

实验室的基本组成？准备室、无菌操作室、培养室、缓冲室、分析室。

无菌技术包括哪些？洗涤技术、灭菌技术、无菌操作、污染的检测与控制。

灭菌方法有哪些？物理方法：干热灭菌、湿热灭菌、过滤、灼烧法。

化学方法：抗生素灭菌、灭菌剂。

植物人工繁殖的几种器官发生方式？各有什么特点？1、不定芽型（无菌短枝扦插型）：外植体（带节的茎段）—芽—根。

特点：繁殖率高、能保持遗传稳定性、缩短林木繁殖周期。

2、器官型：外植体（茎、叶、鳞片等）—芽—根。

特点：繁殖率高但速度慢、遗传性稳定。

3、器官发生型：外植体—愈伤组织—芽—根。

特点：繁殖速度较快、愈伤组织是遗传转化、细胞培养或原生质体培养的良好材质、但经愈伤组织再生成植株，遗传性不稳定。

4、胚状体发生型：外植体—胚状体—苗或外植体—愈伤组织—胚状体—苗。

特点：胚状体发生数量多、速度快、结构完整、繁殖系数高、遗传性稳定。

5、原球茎发生型：外植体—原球茎—苗。

特点：繁殖速度快。

只属于兰属植株的繁殖方式。

组成培养基的成分有哪些？无机盐、有机物、植物激素、其他添加物。

人工种子结构上从外向内包括：1、人工种皮外层，保护胚状体中组分免于丧失和防止外力冲击。

2、人工胚乳：含有必要的营养成分和某些植物激素。

3、胚状体或芽。

植物脱毒的方法：1、物理方法：高温处理、低温处理。

2、化学方法：抑制植物体内病毒复制。

3、生物方法：茎尖培养（原理：1、茎尖无维管束，病毒只能通过胞间连丝传递、赶不上细胞分裂速度。

2、茎尖细胞分裂速度快。

）微体嫁接法、愈伤组织诱导脱毒、珠心培养法、花药培养。

试管动物培养的过程：1、精子采集及体外获能。

2、卵子采集及成熟培养。

3、体外受精。

4、受精卵与胚胎体外培养。

5、胚胎移植。

6、体内发育与后代接生。

细胞核移植克隆动物技术：1核供体细胞获得与去核。

2、受体细胞的准备与去核。

3、细胞核移植。

4、重组胚的激活与培养。

5、胚胎移植。

6、核移植后代鉴定。

胚胎冷冻保存：关键是设法减少细胞内冰晶对胚胎细胞的损害。

可用渗透型冷冻保护液、甘油、二甲基飒、丙二醇、乙二醇。

冷冻方法：程序化冷冻法和玻璃化冷冻法。

细胞重组的几种方式及原料：微细胞+完整细胞—微细胞异核体；胞质体+完整细胞—胞质杂种；胞质体+核体—重组细胞；核体+完整细胞—杂种细胞
原料：胞质体、微细胞
细胞融合的步骤：1、两原生质体或细胞互相靠近2、质膜融合形成细胞桥3、胞质渗透4、细胞核融合。

细胞融合的方法：1、生物法：病毒诱导。

2、化学法：聚乙二醇、NaNo3诱导、高浓度Ca+3、物理法：显微操作，电场刺激。

筛选细胞的方法：1、抗药性筛选2、营养互补筛选3、温度敏感突变型融合细胞筛选4、物理特性筛选5、荧光标记法。

多倍体育种方法：化学方法：细胞松弛素B、秋水仙素、N2O、CHClF2和聚乙二醇。

物理法：温度激变，机械创伤、辐射、水静压法和高盐高碱法。

生物方法：体细胞杂交。

人工诱导单倍体发生方式：远缘杂交、延迟授粉核置换、射线照射、染色体筛选、未授粉的子房培育和花粉培养。

单倍体产生途径：1、自发产生2、假受精3、孤雄生殖4、孤雌生殖。

花药和花粉培养程序：1：材料准备：未开放的花蕾取单核靠边期的花粉粒，对花药进行适度的逆境处理。

2、诱导花粉脱分化形成愈伤组织或胚状体。

3、愈伤组织的植株分化或胚状体的正常生长。

4、完整植物体的形成再生小植株的驯化和移植。

植物单细胞获得的一般方法：机械法、愈伤组织法、酶解法。

填空题—初步得到的植物单细胞体外培养时增殖培养困难时通常采用看护培养和饲养层培养两种方式提高培养效率。

体外生长的细胞一般具有贴附、细胞接触性抑制、密度抑制的特点。

植物细胞大规模培养采用分批式培养和添加式培养。

动物~~采用流加式培养和灌流式培养。

秋水仙素诱导的步骤：处理部位：分裂能力强的细胞。

处理方式：浸渍法、涂抹法、喷雾法、注射法等。

使用浓度：一般在0.01%~0.4%左右，以0.2%左右最为常用。

处理时间：一般不少于24h。

温度一般在18~25℃。