分析方法验证指导程序
ICH指南指导原则Q2(R1)分析方法的验证
1.概述
为什么要进行分析方法的验证？
方法验证的目的是判断采用的分析方法是否科学、合理，是否能有 效控制药品的内在质量。从本质上讲，方法验证就是根据检测项目的要 求，预先设置一定的验证内容，并通过设计合理的试验来验证所采用的 分析方法能否符合检测项目的要求。
(2) 缺乏专属性的分 析方法，应由其他 分析方法来作补充; (3) 某些情况下可能 需要；
2. 分析方法验证：正文
2.4 下列情况需要重新验证：
原料药合成方法的改变 制剂组分的改变 分析 方法的改变
需要重新验证的程度应根据改变的情况而定，某些其他的改变可能也要求 验证。
2. 分析方法验证：正文
物质来验证。 参比物质的纯度要求与使用目的应一致。
3. 分析方法验证：方法学
3.2 专属性
鉴别 通过与参比物（结构相同）比较得到阳性/阴性结果。 通 过与被测物结构相似或相关物质比较得不到阳性结果。
含量测定和杂质检查 色谱方法 使用具有代表性的色谱图来证明专属性（标出每一成分） 分离度——专属性的标准 非专属性方法 使用其他支持性分析方法来辅助证明专属性
2. 分析方法验证：正文
2.5 术语表
精密度（Precision） 精密度指的是规定条件下对同一均质样品多次取样进行一系列检测结果的 一致程度（离散程度）。精密度可以从三方面考虑：重复性、中间精密度、 重现性。
精密度考察应使用均质的、可信的样品。如果得不到，可用人为配制的样 品或样品溶液进行研究。
2.5 术语表
有关物质分析方法验证方案
有关物质分析方法验证方案物质分析方法验证是确保实验室分析方法的准确性、可靠性和适用性的重要步骤。
验证方案是根据相应的法规、准则和指南来制定的，旨在提供明确的实验室管理和质量控制的标准。
以下是一个关于物质分析方法验证方案的详细描述，包括验证目标、实施步骤和结果解释。
一、验证目标1.确定分析方法是否足够准确和可靠，以满足监管机构的要求和行业标准。
2.确定分析方法的适用性，即该方法是否适用于特定样品类型和矩阵。
3.确保实验室分析设备和仪器的正确使用和性能稳定性。
二、实施步骤1.选择合适的验证样品：根据实验室所涉及的应用领域和样品类型，选择一定数量和范围的样品进行验证。
2.样品准备：对于涉及样品预处理的方法，如提取、浓缩等，按照方法要求进行样品的准备。
3.参考方法的建立：验证样品和参考方法之间的结果比较是验证方法准确性的关键步骤。
如果没有可用的参考方法，可以选择其他方法进行比较。
4.准确性评估：确定方法的准确性，包括从反应的选择性、灵敏性和偏倚等方面进行评估。
例如，可以进行内标法、标准样品法或平行样品法。
5.精密度评估：确定方法的精密度，包括重复性和中间性的评估。
例如，可以进行重复性试验和不同实验员的中间性试验。
6.确定方法的线性范围：在方法的线性范围内进行一系列稀释或浓度变化试验，确定方法的线性范围和相关系数。
7.确定方法的限值：根据参考方法或法律法规的要求，确定方法的检出限、定量限和限量限。
8.确定方法的稳定性：评估方法所需的稳定性，包括短期稳定性、中期稳定性和长期稳定性。
例如，可以进行样品在不同温度条件下的稳定性试验。
9.确认方法的适用性：根据实际应用的需求，进行方法的适用性验证，包括对样品矩阵的适应性、干扰物质的影响等。
三、结果解释1.根据验证结果，确定分析方法是否满足准确性、可靠性和适用性的要求。
如果符合要求，可进行分析实验的正式应用。
2.如果有部分验证结果不符合要求，需要进一步优化方法，重新进行验证或根据结果进行确认范围的限制。
【FDA指南】分析方法验证
【FDA指南】分析方法验证---中国CDE颁布的《化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则》；---2015版药典附录XIX A《药品质量标准分析方法验证指导原则》；---ICH Q2《VALIDATION OF ANALYTICALPROCEDURES: TEXT AND METHODOLOGY》；---FDA指南《Analytical Procedures and Methods17 Validation》---FDA指南《Guidelines for Submitting Samplesand Analytical Data for Methods Validation》。
在2015年7月，FDA颁布了指南《Analytical Procedures and Methods Validation for Drugs and Biologics》的终稿文件，这份关键的指南文件，为制药行业的分析方法验证提供了技术指导。
这部指南介绍了很多内容，包括起草背景、法规要求、分析方法的研发、分析方法的内容要求、标准品和试剂的要求、分析方法验证的要求、统计分析和模型、分析方法的生命周期管理、方法确认的内容。
第一部分：分析方法研发的要求在方法研发的早期，应对方法的耐用性进行评估和研究，因为该属性可以帮助申请者决定提交哪个方法去获得批准。
研发早期的分析方法是基于对基础方法学的了解和之前的经验来建立的。
早期程序的实验数据可以用于指导进一步的研发。
如果这些研发数据支持分析方法的验证的话，申请者应该在方法验证部分提交相关的研发数据。
为了全面了解分析方法参数变更的影响，申请者应该采用一个系统的方法进行方法耐用性研究（例如设计一个方法参数实验）。
开始申请者应采用风险评估，然后进行多变量实验。
这样的方法能让申请者了解参数因子对方法性能的影响。
对方法性能评估可以包括分析来自生产工艺中的中控阶段到成品阶段的样品。
从这些方法变化来源的研究中获得的知识可以帮助申请者评估方法的性能。
FDA最新版-药物分析程序及方法验证指导原则-中文翻译版
药品及生物制品的分析方法和方法验证指导原则目录1.介绍 (1)2.背景 (2)3.分析方法开发 (3)4.分析程序内容 (3)A.原则/范围 (4)B.仪器/设备 (4)C.操作参数 (4)D.试剂/标准 (4)E.样品制备 (4)F. .................................................................................................................... 标准对照品溶液的制备 (5)G.步骤 (5)H.系统适应性 (5)I.计算 (5)J.数据报告 (5)5.参考标准和教材 (6)6 分析方法验证用于新药，仿制药，生物制品和DMF (6)A.非药典分析方法 (6)B.验证特征 (7)C.药典分析方法 (8)7.统计分析和模型 (8)A.统计 (8)B.模型 (8)8.生命周期管理分析程序 (9)A.重新验证 (9)B.分析方法的可比性研究 (10)1.另一种分析方法 (10)2.分析方法转移的研究 (11)C.报告上市后变更已批准的新药，仿制药，或生物制品 (11)9.美国FDA 方法验证 (12)10.参考文献前言本指导原则草案，定稿后，将代表美国食品和药物管理局（FDA）目前关于这个话题目前的想法。
它不会创造或赋予或任何人的任何权利，不约束FDA 或公众。
您可以使用另一种方法，如果该方法符合适用的法律和法规的要求。
如果你想讨论一个替代方法，请与FDA 工作人员负责实施本指南。
如果你不能确定适当的FDA 工作人员，请拨打本指南的标题页上所列的电话号码。
介绍：该修订指南草案将取代行业2000 年的指导分析方法和方法验证草案，并最终确定后，也将取代1987 年美国FDA 行业指南《提交的样品和分析数据的方法验证》。
该草案提供了有关申请人如何提交分析程序和方法验证数据来支持说明原料药和制剂具有强度、质量、纯度和效用的文件。
化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则
化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则化学药物质量控制分析方法验证是确保药物质量稳定可靠的重要环节。
它通过验证分析方法的准确性、精密度、恢复度、线性度、特异性等指标，确保分析方法能够准确地测定药物中的活性成分或者指标物质的含量。
本文将从方法验证的目的、步骤、技术指导原则以及常见问题和挑战等方面进行介绍。
一、方法验证的目的和步骤1.目的：确保分析方法满足药品质量控制的要求，可靠稳定，可用于药物批次的检验。
2.步骤：（1）方法开发：根据药物的特性和质量控制要求，选择适当的分析方法。
（2）方法优化：对选择的分析方法进行优化，包括调整工作条件、选用合适的内标物质等。
（3）方法准确性验证：重复测定样品，评估准确性，并对结果进行统计分析。
（4）方法精密度验证：通过重复测定样品，计算相对标准偏差，评估方法的精密度。
（5）方法线性度验证：通过测定不同浓度的标准品，评估方法的线性关系。
（6）方法特异性验证：通过测定样品的含量，检查方法对其他组分的干扰情况。
（7）方法稳定性验证：评估方法在不同条件下的稳定性，包括反应时间、温度等。
（8）方法恢复度验证：通过添加已知浓度的标准品到药物样品中，评估方法的回收率。
1.确保方法的准确性：方法应具有良好的回归方程和拟合度，并通过统计分析确定测定值的范围。
2.确保方法的精密度：通过反复测定样品确定相对标准偏差，评估方法的精密度，并确保结果的重复性。
3.确保方法的恢复度：通过添加已知浓度的标准品到药物样品中，测定回收率，评估方法的准确性和恢复度。
4.确保方法的线性度：通过测定不同浓度的标准品，构建标准曲线，并通过相关系数确定方法的线性范围。
5.确保方法的特异性：通过测定样品的含量，并检查方法对其他组分的干扰情况，确保方法对药物成分的特异性。
6.确保方法的稳定性：通过评估方法在不同条件下的重复性和稳定性，确定方法的适用范围。
7.验证结果的报告和文档：方法验证应记录在正式的报告和关联文档中，并以书面形式确认。
分析方法确认与验证管理规程
一、目的：规范药品检验方法确认与验证的管理，证明采用的方法适合相应的检测要求及在实验室条件下的适用性，保证检验结果准确、可靠。
二、适用范围：适用于中药和化学药品（包括物料和产品）的理化分析方法和仪器分析方法的确认与验证。
不适用于中药和化学药品（包括物料和产品）微生物分析方法的确认与验证。
三、相关职责：QC班组长：QC班组长根据检验方法的来源确定开展方法确认或验证。
由其本人或者其他有经验的检验人员起草方案；负责确认或验证方案的培训；安排有经验的人员参与方法确认或验证过程实施；对确认或验证过程中出现的偏差要严格按照相关管理规程的程序执行，如需要提出变更申请；对确认或验证工作中出现的问题及时纠正并记录；总结确认或验证报告。
QC主管：负责审核检验方法确认或验证方案，并对方案的执行过程进行追踪；负责组织偏差的调查，变更的审核；负责总结报告的审核。
化验室QA：监督各项目按照已制定的方案进行；参与确认或验证过程中的偏差调查；对提出的变更进行评估，确认变更的是否成立，跟踪变更实施。
QA主管：负责审核检验方法确认或验证方案，确保其法规符合性；参与偏差的调查，变更的审核；负责总结报告的审核。
验证专员：审核检验方法确认或验证方案；审核总结报告；负责验证证书的发放；负责方法确认或验证方案、记录和报告的整理、存档。
质量管理负责人：批准检验方法确认或验证方案；批准方案实施过程中出现的偏差和变更；批准总结报告。
四、制定依据：《药品GMP指南》（质量控制实验室与物料系统）、《药品生产质量管理规范》（2010年修订）、《中国药典》（2020年版）、《化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则》、ICH分析方法验证：正文和方法学Q2（R1 ）、中国药品检验标准操作规范（2010年版）（原子吸收分光光度法）。
五、内容：1、术语1.1方法验证方法验证系指根据检验项目的要求，预先设置一定的验证内容和验证标准要求，并通过设计合理的实验来验证所采用的分析方法是否符合检验项目的要求。
【中文】Q2(R2)：分析方法验证(草案)
国际人用药品技术协调会ICH协调指导原则分析方法验证Q2草案2022年3月24日签署目前公开征求意见在ICH进程的第2阶段， ICH大会将由ICH专家工作组认可的共识草案文本或指导原则按照国家或地区程序交给ICH区域的监管机构进行内部和外部征求意见。
Q2文件历史法律声明：本文件受版权保护，除ICH标志外，在始终承认ICH拥有本文件版权的前提，基于公开许可可以使用、复制、在其他文件中引用、改编、修改、翻译或传播。
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因此，对于版权归第三方所有的文件，必须获得该版权持有者的转载许可。
ICH协调指导原则分析方法验证Q2ICH共识指导原则目录1引言 (1)2范围 (2)3分析方法验证研究 (2)3.1分析方法生命周期中的验证 (4)3.2可报告范围 (5)3.3稳定性指示特性的证明 (6)3.4多变量分析方法的考虑 (6)3.4.1参比分析方法 (6)4验证试验、方法学和评价 (7)4.1专属性/选择性 (7)4.1.1无干扰 (7)4.1.2正交方法比较 (7)4.1.3技术固有合理性 (7)4.1.4数据要求 (8)4.1.4.1鉴别 (8)4.1.4.2含量测定、纯度和杂质检查 (8)4.2工作范围 (9)4.2.1响应 (9)4.2.1.1线性响应 (9)4.2.1.2非线性响应 (10)4.2.1.3多变量校正 (10)4.2.2范围下限验证 (10)4.2.2.1根据信噪比 (10)4.2.2.2根据线性响应值的标准偏差和标准曲线斜率 (11)4.2.2.3根据范围下限的准确度和精密度 (12)i4.2.2.4数据要求 (12)4.3准确度和精密度 (12)4.3.1准确度 (12)4.3.1.1参比物比较 (13)4.3.1.2加标研究 (13)4.3.1.3正交方法比较 (13)4.3.1.4数据要求 (13)4.3.2精密度 (14)4.3.2.1重复性 (14)4.3.2.2中间精密度 (14)4.3.2.3重现性 (14)4.3.2.4数据要求 (14)4.3.3准确度和精密度的合并评价方式 (15)4.3.3.1数据要求 (15)4.4耐用性 (15)5术语 (16)6参考文献 (24)7附件1验证试验选择 (24)8附件2分析技术例证 (25)ii1引言12本指导原则是讨论药物在ICH成员监管机构注册申请时，递交的分析方法验证所3需考虑的要素。
分析方法的验证和确认与转移ppt实用课件
此外，含有不同辅料、抗氧化剂、缓冲剂或包装浸出物的制剂产品可能会对药典 方法产生潜在干扰。
在这些情况下，需要进行更加ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ尽的评价，证明方法适用于特定的原料药或制剂 产品。其它分析性能参数，比如杂质方法的检测限/定量限和精密性评价，对证 明药典方法在实际使用条件下适用非常有用。
当分析方法转移顺利完成后，分析人员应起草分析方法转移报告，其中应描述转移的结果，是否有符合标准规定，并应有结论确定接收方是可以使用转移的分析方法。
经过讨论并获得U各S方P一3致9同<1意225> Verification of Compendial Procedure
4法规规定的其他需要验证的方法
--CP2021<9101>USP 39<1226> Validation of Compendial Procedure
方法转移的步骤--USP39<1224>
阶段 分析方法
负责人 接收方
工作
1.分析方法应起草成书面文件，其中应对细节详细说明并有明确指 示，以便经过培训的人员可以顺利的进行检验。2.如果使用的是液 相或气相进行检验，那么进样的数量以及进样的顺序应明确规定； 如果是溶出试验，进行溶出试验的样品数量也应明确规定。
1采用新的检验方 法；2检验方法需 要变更的；3采用 CP及其他法定标准 未收载的方法；4 法规规定的其他需 要验证的方法
1不需要进行验证 的检验方法； 2药典方法和其他 法定方法
分析方法由A实验 室转移到B实验室
按照方法的用途， 对方法学验证参数 进行全部或部分验 证
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目的：建立分析方法学验证的指导程序，用以证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求，保证验证工作能够有计划、按步骤的进行，同时使与质量检验有关的活动符合GMP的要求。
范围：适用于本公司所有的分析方法的验证的活动。
职责：QC：负责起草分析方法验证的验证方案、报告；负责按批准的验证方案执行验证；负责检验仪器运行和保养。
QA：负责确定分析方法的验证条件、标准、限度及检验方法；负责验证方案、报告的审核；QA负责人负责方案、报告的批准。
1 相关定义1.1 分析方法：法是为完成检验项目而设定和建立的测试方法，它详细描述了完成分析检验的每一步骤。
一般包括分析方法原理、仪器及仪器参数、试剂、供试品溶液与对照品溶液的制备，测定，计算公式及检测限度等。
1.2 方法验证：方法验证就是根据检验项目的要求，预先设置一定的验证内容，并通过设计合理的实验来验证所采用的分析方法是否符合检验项目的要求。
在建立产品质量标准时，分析方法需经验证。
1.3 方法确认：在应用已验证的药典方法和其他法定方法前，应在当前的实验室条件下进行方法确认来证明方法在该实验室的适用性。
2 验证的适用范围2.1 产品的物料、中间产品、中间过程控制和产品的理化分析方法的验证和确认；2.2 清洁验证方法的验证。
3 需要验证的分析项目根据检验项目的设定目的和验证内容的不同要求，将需验证的检验项目分为四类：3.1 鉴别试验；鉴别的目的在于判定被分析物是目标化合物，而非其它物质。
用于鉴别的分析方法要求具有较强的专属性和耐用性。
3.2 杂质的限度检查与定量测定；杂质检查主要用于控制主成分以外的杂质，如无机杂质，有机杂质等。
杂质检查分为限度检查和定量测定两部分。
用于限度检查的分析方法验证侧重专属性、检测限和耐用性。
用于定量测定的分析方法验证强调专属性、准确度、精密度、线性、范围、定量限和耐用性。
3.3 含量测定；含量测定对准确度要求较高，因此所采用的分析方法要求具有一定的专属性、准确度和线性等。
3.5 除此之外还有一些物理项目的检测如粒径分布、旋光度、熔点和硬度，其要求与其它检验项目有所不同，通常在进行分析方法验证应有不同的要求。
3.6 《中国药典》2010版关于不同的检验项目需要验证不同的内容：②如一种方法不够专属，可由其它分析方法予以补充。
③视具体情况予以验证。
4 验证内容4.1 准确度准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。
一般用回收率表示。
准确度应在规定的范围内测试。
4.1.1 验证方法准确度是定量测定的必要条件，因此含量测定、杂质定量测定均需验证准确度。
具体方法如下：4.1.1.1 含量测定：可以用已知纯度的对照品或供试品进行测定。
也可以用本法所得结果与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较。
如该分析方法已经测试并求出精密度、线性和专属性，在准确度也可推算的情况下，准确度可向制可不必再做。
4.1.1.2 杂质的定量测定：可以向样品中加入已知量杂质进行测定。
如果不能得到杂质或降解产物，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较，如药典方法或经过验证的方法。
在不能测得杂质或降解产物的响应因子或不能测得对原料药的相对响应因子的情况下，可用原料药的响应因子。
应明确单个杂质和杂质总量相当于主成分的重量比（％）或面积比（％）。
例如：测定含量的准确度, 按标示量的80%, 100%和120%配制三个浓度的溶液，每个浓度各分别制备3 份供试品溶液，进行测定。
根据测定结果与配制浓度计算出平均回收率以及相对标准偏差。
4.1.2 数据要求：在规定的范围内，至少用9个测定结果进行评价。
例如，设计3个不同浓度，每个浓度各分别制备3 份供试品溶液，进行测定。
应报告已知加入量的回收率（％）或测定结果平均值与真实值之差及其相对标准偏差或置信区间。
4.2 精密度精密度系指在规定的测试条件下，同一均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。
精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。
精密度与准确度的不同在于。
精密度测定了一系列重复性的被分析物之间的接近程度，但它不能表达与已建立的真值之间的符合程度，后者由准确度来测定。
通过一系列的测定值，可以得到良好的精密度，但是由于所用分析方法存在的偏差，所得的平均值不一定与真实值相符，在这种状况下，需要修改方法以消除偏差。
4.2.1 验证方法精密度可从重复性、中间精密度、重现性三个层次考察。
4.2.1.1 重复性：在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性。
在规定范围内，至少用9 次测定结果进行评价。
例如，设计3 个不同浓度，每个浓度各分别制备3 份供试品溶液，进行测定3 次，或将相当于100％的浓度水平的供试品溶液，用至少测定6 次的结果进行评价。
4.2.1.2 中间精密度：在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果之间的精密度，称为中间精密度。
为考察随机变动因素对精密度的影响，应设计方案进行中间精密度试验。
变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备。
4.2.1.3 重现性：在不同实验室之间由不同分析人员测定结果之间的精密度，称为重现性。
法定标准采用的分析方法或在不同实验室之间进行方法转移时，应进行重现性试验。
例如建立药典分析方法时，通过协同检验得出重现性结果。
协同检验的目的、过程和重现性结果均应记载在起草说明中，应注意重现性试验用的样品本身的质量均匀性和贮存运输。
4.2.2 数据要求：均应报告标准差、相对标准偏差（变异系数）和置信区间。
4.3 专属性专属性系指在其他成分(如：杂质、降解产物、辅料等)可能存在下，采用的方法能正确测定出被测物的特性。
通常,鉴别反应、杂质检查、含量测定均应考察其专属性。
如一种方法不够专属，可由其它分析方法予以补充。
4.3.1 验证方法4.3.1.1 鉴别试验：用于确认被测成分符合其特征。
专属性要求证明其能与可能共存的物质或结构相似化合物区分。
含被测成分的供试品呈正反应，而不含被测成分的供试品以及结构相似或组分中的有关化合物，应均呈负反应。
对于药品，辅料不得干扰其有效成分的鉴别。
4.3.1.2 含量测定和杂质测定：色谱法和其他分离方法，应附代表性图谱，以说明方法的专属性，并应标明诸成分在图中的位置，色谱法的分离度应符合要求。
在杂质可获得的情况下，对于含量测定，可向试样中加入杂质或辅料，考察测定结果是否受干扰，并可与未加杂质和辅料的试样比较测定结果。
对于杂质测定，也可向试样中加入一定量的杂质，考察杂质与共存物质能得到分离和检出，并具有适当的准确度与精密度。
在杂质或降解产物不能获得的情况下，专属性可通过测定含有杂质或降解产物的试样，与另一个已验证的方法或药典方法比较结果。
或对试样用强光照射，高温，高湿，酸（碱）水解或氧化的方法进行加速破坏，以研究可能的降解产物和降解途径。
对于含量测定应对比二法测定的结果。
杂质检查应比对破坏前后检出的杂质个数。
必要时可采用二极管阵列检测和质谱检测进行峰纯度检查，证明含量测定成分的色谱峰中不包含其他成分。
4.4 检测限（DL ）检测限系指试样中的被分析物能够被检测出的最低量。
鉴别试验和杂质测定，均应通过测试确定方法的检测限。
4.4.1 验证方法4.4.1.1非仪器分析目视法：用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。
4.4.1.2信噪比法：用于能显示基线噪音的分析方法，即把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，计算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。
一般以信噪比为3：1 或2：1 时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。
4.4.1.3 除信噪比法外，还可根据响应因子的标准偏差和斜率计算出检测限。
LOD = Sσ33⋅ 式中：s 为响应值的标准差；S 为校正曲线的斜率，S= m 。
斜率S 可以通过样品的校正曲线来估算。
s 的值可以由以下途径估算。
例如：根据空白的标准差（通过几份空白样品的分析，然后计算其响应值的标准差，测出分析背景响应值的大小），根据校正曲线（通过对含有检测限范围内被分析物样品的分析来研究其标准曲线，回归线的剩余标准差或回归线的y 轴截距标准差都可以作为标准差）。
4.4.2 数据要求：应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。
4.5 定量限（QL ）定量限系指试样中的被分析物能够被定量测定的最低量，其测定结果应具有一定的准确度和精密度。
杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定方法的定量限。
4.5.1 验证方法4.5.1.1 常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比为10：1 时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。
4.5.1.2 除信噪比法外，还可根据响应因子的标准偏差和斜率计算出定量限。
LOD = Sσ10 式中：s 为响应值的标准差（通过空白样品测背景响应值或Y 轴截距）；S 为校正曲线的斜率（通过样品的校正曲线求得），S= m 。
斜率S 可以通过样品的校正曲线来估算。
s 的值可以由以下途径估算。
例如：根据空白的标准差（通过几份空白样品的分析，然后计算其响应值的标准差，测出分析背景响应值的大小），根据校正曲线（通过对含有定量限范围内被分析物样品的分析来研究其标准曲线，回归线的剩余标准差或回归线的y轴截距标准差都可以作为标准差）。
4.6 线性线性系指在设计的测定范围内，检测结果与试样中被测物的浓度直接呈正比关系的程度。
线性是定量测定的基础，涉及定量测定的项目，如杂质定量测定和含量测定均需验证线性。
4.6.1 验证方法应在设计的测定范围内测定线性关系。
可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样，制备一系列供试样品的方法进行测定，至少制备5个浓度的供试样品。
每一个浓度的样品3份，以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，用最小二乘法进行线性回归。
必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。
4.6.2 数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图。
4.7 范围范围系指能够达到一定的精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。
范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果和要求确定。
含量测定需涵盖的最低浓度范围至少为标示量的80 -120% (ICH)，推荐包含50%-150%的浓度。
杂质的定量测定，范围应根据初步实测，拟订为规定限度的±20%。
如果含量测定与杂质检查同时进行，用百分归一化法，则范围应为杂质规定限度的-20%至含量限度（或上限）的+20%。
推荐包含LOQ －规定限度的＋20%。
4.8 耐用性耐用性系指测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为使方法可用于常规检验提供依据。
开始研究分析方法时，就应考虑其耐用性。
经试验，应说明小的变动能否符合系统适用性试验要求，以确保方法有效。
如果通过耐用性研究发现分析方法对某个或某些测试条件敏感或要求苛刻，建议在方法中予以写明。