细胞模型实验报告精编版
细胞模型实验报告精编版
细胞模型实验报告精编版⼴西医科⼤学实验报告科⽬：细胞模型实验年级：研究⽣院2016级组别：A组学号：*************姓名：********实验⼆MTT法测定药物对细胞⽣长的抑制作⽤实验原理：ＭＴＴ⽐⾊法原理是活细胞内的琥珀酸脱氢酶能将淡黄⾊的ＭＴＴ还原为蓝紫⾊的结晶甲臜。
后者结晶产物的量与活细胞数⽬成正相关，⽽死细胞或红细胞没有此功能。
结晶⽤ＤＭＳＯ、⽆⽔⼄醇、酸化异丙醇等溶解，在酶标仪上以波长为490ｎｍ进⾏⽐⾊,所检测吸光值的⼤⼩可反应细胞代谢活性的强弱。
实验步骤：1：贴壁细胞消化和吹打：加1ml0.5%胰蛋⽩酶并轻摇使其遍布所有细胞表⾯⾄镜下观察发现胞质回缩、间隙增⼤停⽌,倒掉,加⼊含⼩⽜⾎清的培养液,反复吹打⾄瓶壁上⽆贴壁细胞为⽌。
2：计数与分板：取20ul细胞悬液于计数板计数,⽤1640培养液调整使其细胞数约为5×104个/ml,在96孔培养板中加⼊细胞悬液每孔100ul,共18个,培养箱孵育12h。
3：加药与孵育于培养板中分别加⼊浓度为0.1,0.2,0.4,0.8,1.6mg/ml环磷酰胺注射液各100ul,每组重复3孔,设空⽩对照组3孔各100ul,孵育24⼩时。
4：MTT显⾊每孔加MTT20ul，3⼩时候弃上清，每孔加DMSO100ul。
5：酶标仪测定：490nm处测其吸光度实验结果及讨论:1.不同浓度药物的⽣长抑制率如下浓度（ug/ml）平均吸光度（x±s）抑制率（%）存活率（%）1600 -0.15367 -18.98% 118.98%800 -0.01133 -1.40% 101.40%400 0.254333 31.42% 68.58%200 0.075667 9.35% 90.65%100 0.121667 15.03% 84.97%0 0.32 39.53% 60.47%2.浓度与抑制率关系图注：横坐标为浓度对数值、纵坐标为抑制率3. 讨论：1. 本次实验出现错误较多，OD值出现负值和其中还有400ug/ml组加悬液过量，致使数据有所偏离。
制作真核细胞的三维结构模型实验报告
实验名称：尝试制作真核细胞的三维结构模型 时间：2017.11.6 第5节 实验仪器：圆形泡沫塑料、大头针、橡皮泥 、小刀 、牙签、 实验步骤： 1、将泡沫切割成半圆形，多色橡皮泥揉成多种形状做成细胞结构 2、细胞核：黄色--椭圆状 ，用牙签捅成蜂窝状 ，洞构成核孔 3、线粒体：紫色--略长的椭圆状 4、高尔基体：蓝色--大小不一的圆柱和小的球， 将圆柱压成扁状折叠，将球放在它的周围或面上 5、内质网：4块不同大小的橘色--按成扁状，叠放在一起 6、溶酶体：白色---一个椭圆状 7、中心体：黑色---两个圆柱状 ，摆成垂直形状 8、核糖体：红色---多个球状。 实验结论：制作动物细胞模型 仪器是否1班
细胞模型定理实验报告
一、实验目的通过细胞模型定理实验，了解细胞内分子和结构的相互作用，掌握细胞模型构建的方法和原理，提高对细胞生物学知识的理解和应用能力。
二、实验原理细胞模型定理是细胞生物学研究的重要方法之一，它通过构建模拟细胞内分子和结构的数学模型，来研究细胞内各种生物学过程。
本实验以细胞膜电位为例，介绍细胞模型定理的构建和应用。
三、实验材料1. 实验仪器：计算机、绘图软件、电子天平、量筒、秒表等。
2. 实验试剂：KCl、NaCl、CaCl2、MgCl2、葡萄糖、ATP等。
3. 实验动物：哺乳动物细胞。
四、实验步骤1. 准备实验材料：根据实验需求，配制KCl、NaCl、CaCl2、MgCl2、葡萄糖、ATP等溶液。
2. 构建细胞膜电位模型：利用计算机软件，构建细胞膜电位模型。
首先，建立细胞膜电位的初始条件，包括膜内外离子浓度、电位差等。
然后，设置模型参数，如离子通道的开放和关闭、离子泵的转运等。
3. 模拟实验条件：根据实验需求，设置不同的实验条件，如温度、pH值、离子浓度等。
4. 运行模型：启动模型，观察细胞膜电位的变化。
通过调整模型参数，研究不同实验条件下细胞膜电位的变化规律。
5. 数据分析：对实验结果进行分析，得出结论。
五、实验结果与分析1. 在不同实验条件下，细胞膜电位发生了明显的变化。
随着离子浓度的增加，细胞膜电位逐渐降低；随着温度的升高，细胞膜电位逐渐升高。
2. 通过调整离子通道的开放和关闭，可以改变细胞膜电位。
例如，关闭Na+通道，细胞膜电位降低；关闭K+通道，细胞膜电位升高。
3. 在实验条件下，细胞膜电位的变化与理论预测基本一致，说明细胞模型定理在细胞生物学研究中的应用具有可行性。
六、实验结论1. 细胞模型定理是一种有效的细胞生物学研究方法，可以帮助我们更好地理解细胞内分子和结构的相互作用。
2. 通过构建细胞膜电位模型，可以研究不同实验条件下细胞膜电位的变化规律，为细胞生物学研究提供理论依据。
3. 本实验结果表明，细胞模型定理在细胞生物学研究中的应用具有可行性，为后续研究提供了有益的参考。
生物模拟细胞实验报告(3篇)
第1篇一、实验名称生物模拟细胞实验二、实验目的1. 了解细胞的基本结构和功能。
2. 掌握细胞膜、细胞质、细胞核等细胞结构的模拟制作方法。
3. 培养学生的动手操作能力和观察能力。
三、实验原理细胞是生物体的基本结构和功能单位，由细胞膜、细胞质、细胞核等组成。
本实验通过模拟制作细胞膜、细胞质、细胞核等结构，让学生了解细胞的基本结构和功能。
四、实验材料1. 胶水2. 面粉3. 水彩笔4. 橡皮筋5. 透明胶带6. 白纸7. 记号笔五、实验步骤1. 制作细胞膜：将胶水均匀涂抹在白纸上，形成薄膜状，待胶水半干时，用橡皮筋固定薄膜，使其保持形状。
2. 制作细胞质：取适量面粉，加水搅拌成糊状，将糊状物均匀涂抹在薄膜上，形成细胞质层。
3. 制作细胞核：用记号笔在细胞质上画一个圆圈，代表细胞核。
4. 制作细胞器：用彩色水彩笔在细胞质上画出线粒体、内质网、高尔基体等细胞器。
5. 观察并记录：将制作好的细胞贴在透明胶带上，用显微镜观察并记录细胞的结构。
六、实验结果与分析1. 观察到的细胞结构：细胞膜、细胞质、细胞核、线粒体、内质网、高尔基体等。
2. 结果分析：（1）细胞膜：具有保护细胞内部结构、调节物质进出的作用。
（2）细胞质：含有各种细胞器，参与细胞代谢活动。
（3）细胞核：含有遗传物质DNA，控制细胞的生命活动。
（4）线粒体：细胞内的能量工厂，参与细胞呼吸作用。
（5）内质网：参与蛋白质合成和修饰。
（6）高尔基体：参与蛋白质的加工和分泌。
七、实验结论通过本实验，学生成功模拟制作了细胞结构，了解了细胞的基本结构和功能，提高了学生的动手操作能力和观察能力。
八、实验心得1. 在实验过程中，要注意操作规范，确保实验结果的准确性。
2. 通过模拟制作细胞结构，可以更直观地了解细胞的结构和功能，有助于提高学生的学习兴趣。
3. 实验过程中要注重团队合作，共同完成实验任务。
九、注意事项1. 实验过程中，注意保持实验环境整洁，避免污染。
2. 操作过程中，注意安全，避免误伤。
细胞模型检测实验报告
一、实验目的1. 掌握细胞模型的制备方法；2. 学习细胞模型的应用，以评估不同化合物的生物效应；3. 了解细胞模型在药物研发和毒理学研究中的应用价值。
二、实验原理细胞模型是生物研究中常用的工具，可以模拟生物体内各种细胞的功能和特性。
通过构建细胞模型，我们可以研究细胞在不同条件下的生物学行为，如细胞增殖、分化、凋亡等。
本实验采用诱导多能干细胞（iPSC）来源的心肌细胞和神经元细胞模型，测试不同化合物的效果，并分析其作用机制。
三、实验材料1. 诱导多能干细胞（iPSC）来源的心肌细胞和神经元细胞；2. ImageXpress Pico个人型高内涵成像分析系统；3. 钙振荡频率、细胞活力、细胞骨架完整性、细胞凋亡和线粒体功能检测试剂盒；4. 心脏活性药物、神经递质和神经毒性或心脏毒性化合物。
四、实验方法1. 细胞培养：将iPSC来源的心肌细胞和神经元细胞分别培养于DMEM/F12和Neurobasal培养基中，添加10%胎牛血清和1%双抗，置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
2. 细胞模型构建：将培养至一定时期的细胞进行钙振荡频率、细胞活力、细胞骨架完整性、细胞凋亡和线粒体功能检测，筛选出功能正常的细胞作为模型。
3. 化合物处理：将筛选出的细胞模型分为实验组和对照组，实验组加入不同浓度的化合物，对照组加入等体积的溶剂。
4. 自动化成像分析：使用ImageXpress Pico系统对细胞进行多参数分析，包括钙振荡频率、细胞活力、细胞骨架完整性、细胞凋亡和线粒体功能等指标。
5. 数据分析：将实验数据与对照组进行比较，分析不同化合物的生物效应。
五、实验结果1. 钙振荡频率：实验组细胞在加入化合物后，钙振荡频率与对照组相比有所差异，表明化合物对心肌细胞搏动频率有影响。
2. 细胞活力：实验组细胞在加入化合物后，细胞活力与对照组相比有所下降，表明化合物具有一定的毒性。
3. 细胞骨架完整性：实验组细胞在加入化合物后，细胞骨架完整性与对照组相比有所下降，表明化合物对细胞骨架有破坏作用。
模拟细胞活跃实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解细胞活性与细胞生长状态的关系；2. 掌握细胞培养的基本操作；3. 观察细胞在不同培养条件下的生长变化；4. 分析细胞活性与生长状态的相关性。
二、实验原理细胞活性是指细胞在正常生理状态下，能够进行代谢、生长、繁殖等生命活动的能力。
细胞活性与细胞生长状态密切相关，细胞活性越高，生长状态越好。
本实验通过模拟细胞在不同培养条件下的生长，观察细胞活性与生长状态的变化，以探讨细胞活性与生长状态的相关性。
三、实验材料1. 细胞：小鼠成纤维细胞；2. 培养基：DMEM培养基、胎牛血清；3. 培养皿：12孔培养皿；4. 移液器：1ml移液器、200μl移液器；5. 吸管：吸管头、吸管管身；6. 计时器；7. 显微镜；8. 细胞计数板；9. 细胞活性检测剂。
四、实验方法1. 细胞复苏：将冷冻保存的小鼠成纤维细胞复苏，在37℃、5%CO2的恒温培养箱中培养；2. 分组：将复苏后的细胞分为三组，分别为A组（正常培养组）、B组（低温培养组）、C组（高温培养组）；3. 培养条件：A组在37℃、5%CO2的恒温培养箱中培养；B组在4℃的低温培养箱中培养；C组在42℃的高温培养箱中培养；4. 观察与记录：每隔24小时观察细胞生长状态，并记录细胞数量；5. 细胞活性检测：在实验结束时，对各组细胞进行细胞活性检测。
五、实验结果1. 细胞生长状态观察：A组细胞生长旺盛，细胞数量呈指数增长；B组细胞生长缓慢，细胞数量增长缓慢；C组细胞生长停滞，细胞数量基本不变；2. 细胞数量记录：A组细胞数量从第1天到第7天，细胞数量增长约5倍；B组细胞数量从第1天到第7天，细胞数量增长约2倍；C组细胞数量从第1天到第7天，细胞数量基本不变；3. 细胞活性检测：A组细胞活性较高，细胞活性指数约为80%；B组细胞活性较低，细胞活性指数约为50%；C组细胞活性极低，细胞活性指数约为20%。
六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明，细胞活性与细胞生长状态密切相关。
细胞模型建立实验报告
一、实验目的1. 掌握细胞培养的基本操作技术。
2. 学习建立特定细胞模型的方法。
3. 了解细胞模型在研究疾病发生机制及药物筛选等方面的应用。
二、实验原理细胞模型是指通过体外培养细胞，模拟体内细胞在特定生理、病理条件下的功能状态，从而研究相关生物学问题的实验模型。
建立细胞模型的关键在于模拟体内环境，包括细胞培养条件、细胞表型、细胞功能等。
三、实验材料1. 细胞：HL-1细胞（心房肌细胞系）2. 培养基：1640培养基、DMEM培养基3. 试剂：胰蛋白酶、胎牛血清、青霉素、链霉素、双抗、D-半乳糖、油红O、MTT、Fura-2/AM、Hoechst 33258、碘化丙啶、抗氧化药物、护肝清脂片等4. 仪器：细胞培养箱、倒置显微镜、透射电镜、细胞培养皿、酶标仪、离心机、冰箱等四、实验方法1. 细胞培养（1）HL-1细胞培养：将HL-1细胞接种于培养皿中，加入含有10%胎牛血清的1640培养基，置于37℃、5%CO2培养箱中培养。
（2）L-02细胞培养：将L-02细胞接种于培养皿中，加入含有10%胎牛血清的DMEM培养基，置于37℃、5%CO2培养箱中培养。
2. 细胞模型建立（1）HL-1细胞快速起搏模型：采用电场刺激方法，将HL-1细胞置于电场刺激器中，以600次/min、1 V/cm的频率和强度进行电场刺激24 h。
（2）L-02细胞肝脂肪变性模型：将L-02细胞分为模型组和正常组，模型组加入含有游离脂肪酸（油酸和棕榈酸）混合物的1640培养基诱导培养24 h。
（3）D-半乳糖诱导HepG2细胞氧化应激模型：将HepG2细胞分为模型组和正常组，模型组加入不同浓度的D-半乳糖（37.5、75、150、300 mmol/L）处理24、48、72 h。
（4）Aβ诱导PC12细胞凋亡模型：将PC12细胞分为模型组和正常组，模型组加入不同浓度的Aβ（25-35）处理不同时间，观察细胞凋亡情况。
3. 细胞模型鉴定（1）HL-1细胞快速起搏模型：通过全细胞膜片钳技术记录刺激前后HL-1细胞的动作电位周期，并利用透射电镜观察细胞超微结构的变化。
制备细胞模型实验报告
一、实验目的1. 掌握细胞培养的基本原理和方法。
2. 学习并实践细胞模型制备的流程。
3. 了解不同细胞模型的特点和应用。
二、实验原理细胞培养是指将生物体内的细胞取出，在体外模拟生物体内环境，使细胞生长、繁殖并维持其结构和功能的一种技术。
细胞模型制备是细胞培养的重要应用之一，通过制备具有特定形态和功能的细胞模型，可以模拟生物体内细胞间的相互作用，研究细胞生物学和分子生物学相关问题。
三、实验材料与仪器1. 材料：小鼠胚胎成纤维细胞、DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、细胞培养瓶、细胞计数板、移液器、显微镜等。
2. 仪器：CO2培养箱、超净工作台、电子天平、显微镜等。
四、实验步骤1. 细胞复苏：将冷冻保存的小鼠胚胎成纤维细胞取出，用DMEM培养基溶解冻存管中的细胞，转移至培养瓶中，放入CO2培养箱中培养。
2. 细胞传代：当细胞贴壁生长至80%左右时，用胰蛋白酶消化细胞，用DMEM培养基洗涤细胞，按照1:2的比例传代至新的培养瓶中。
3. 细胞模型制备：a. 取一定量的细胞悬液，加入细胞培养瓶中，放入CO2培养箱中培养。
b. 根据实验需求，调整细胞浓度、培养时间等参数，制备不同形态和功能的细胞模型。
4. 细胞模型观察：a. 将制备好的细胞模型用DMEM培养基洗涤，用移液器收集细胞。
b. 将细胞均匀铺在载玻片上，用固定液固定细胞。
c. 用染色剂对细胞进行染色，如伊红、苏木精等。
d. 在显微镜下观察细胞模型的形态和功能。
5. 数据记录与分析：对细胞模型进行拍照、记录形态和功能数据，进行统计分析。
五、实验结果与分析1. 成功制备了具有特定形态和功能的细胞模型。
2. 观察到细胞模型在培养过程中表现出良好的生长状态。
3. 通过显微镜观察，细胞模型呈现出不同的形态，如纤维状、多边形等。
4. 细胞模型在功能方面表现出一定的活性，如细胞增殖、迁移等。
六、实验结论本实验成功制备了具有特定形态和功能的细胞模型，为细胞生物学和分子生物学研究提供了有力工具。
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广西医科大学实验报告
科目：细胞模型实验
年级：研究生院2016级
组别：A组
学号：*************
姓名：********
实验二MTT法测定药物对细胞生长的抑制作用
实验原理：
ＭＴＴ比色法原理是活细胞内的琥珀酸脱氢酶能将淡黄色的ＭＴＴ还原为蓝紫色的结晶甲臜。
后者结晶产物的量与活细胞数目成正相关，而死细胞或红细胞没有此功能。
结晶用ＤＭＳＯ、无水乙醇、酸化异丙醇等溶解，在酶标仪上以波长为490ｎｍ进行比色,所检测吸光值的大小可反应细胞代谢活性的强弱。
实验步骤：
1：贴壁细胞消化和吹打：加1ml0.5%胰蛋白酶并轻摇使其遍布所有细胞表面至镜下观察发现胞质回缩、间隙增大停止,倒掉,加入含小牛血清的培养液,反复吹打至瓶壁上无贴壁细胞为止。
2：计数与分板：取20ul细胞悬液于计数板计数,用1640培养液调整使其细胞数约为5×104个/ml,在96孔培养板中加入细胞悬液每孔100ul,共18个,培养箱孵育12h。
3：加药与孵育于培养板中分别加入浓度为0.1,0.2,0.4,0.8,1.6mg/ml环磷酰胺注射液各100ul,每组重复3孔,设空白对照组3孔各100ul,孵育24小时。
4：MTT显色每孔加MTT20ul，3小时候弃上清，每孔加DMSO100ul。
5：酶标仪测定：490nm处测其吸光度
实验结果及讨论:
1.不同浓度药物的生长抑制率如下
浓度（ug/ml）平均吸光度（x±s）抑制率（%）存活率（%）
1600 -0.15367 -18.98% 118.98%
800 -0.01133 -1.40% 101.40%
400 0.254333 31.42% 68.58%
200 0.075667 9.35% 90.65%
100 0.121667 15.03% 84.97%
0 0.32 39.53% 60.47%
2.浓度与抑制率关系图
注：横坐标为浓度对数值、纵坐标为抑制率
3. 讨论：
1. 本次实验出现错误较多，OD值出现负值和其中还有400ug/ml组加悬液过量，致使数据有所偏离。
2. 加DMSO之后颜色对比明显，并且梯度效果比较好，平行孔间颜色较均匀，随浓度梯度变化相对明显，能够体现出抑制作用。
3.实验数据过少不能够完全判定药物的抑制作用，另因为如果孔内的细胞状态不好也有可能导致细胞死亡。
实验三 HE染色法观察药物作用细胞后的形态学变化
实验原理：
HE染色法采用两种染料即碱性染料苏木素和酸性染料伊红分别与细胞核和细胞质发生作用，使细胞微细结构通过颜色而改变它的折射率,从而在光镜下能清晰显示出细胞图像,染色的结果是酸性的细胞核被碱性的苏木素染成蓝色，碱性的细胞质被酸性的伊红染成红色。
实验步骤：
1.样品制备:胰酶消化贴壁生长细胞,调整细胞浓度为1×105个/ml,每孔2ml加于6孔板,
加盖玻片,加入药物培养相应时间,取出盖玻片,用PBS洗涤3次。
2. 样品固定: 95%乙醇固定20min后PBS清洗2次。
3. 染细胞核: 苏木精染色5-10min后自来水水洗。
4. 染细胞质: 伊红染色1-2min后自来水水洗。
5. 脱水、透明: 70%，95%，100%乙醇逐级脱水,二甲苯透明,吹干。
6. 封片:在载玻片上滴加甘油，将有细胞的一片的盖玻片向下封固于载玻片上。
实验结果及分析:
染色的结果是酸性的细胞核被碱性的苏木素染成蓝色，碱性的细胞质被酸性的伊红染成红色。
如图所示染色的结果随药物浓度变化而变化，药物对细胞的抑制作用较为明显，并且体现出浓度趋势，整体的染色效果尚可。
实验四吖啶橙荧光染色法观察细胞形态学的变化
实验原理：
吖啶橙是一种与DNA和RNA都能结合的荧光染料，在蓝色光或紫外光的激发下，DNA和RNA 都会激发出荧光，活细胞经过固定，染色后细胞DNA成亮绿色，核仁和散布在细胞质中的RNA成橘红色，胞质的其余部分为淡红褐色。
死亡的细胞，因为物质就够发生变化，其细胞核成暗绿色，细胞质也是成暗绿色。
实验步骤：
1.胰酶消化贴壁细胞,调整细胞浓度为1×105 /ml, 每孔2ml加于6孔板, 加盖玻片,加入药
物培养相应时间, 取出盖玻片,用PBS洗涤3次,除去血清
2.95%乙醇固定15~30min
3.1%醋酸作用30s，1×10-4AO染色30s~60s，0.1M CaCl2处理30s~2min
4.PBS漂洗3次
5.甘油封片
实验结果及分析：
对照组IC50组
正常细胞染色后发出绿色荧光，密度不均匀呈结构样特征，而凋亡小体边缘清晰，呈染色增强，荧光亢进且密度均一，实验组与对照组实验结果对照明显，可见细胞数量在加药组减少。
有细胞正在进行分化，还有分化刚刚结束有细胞正在进行分化，还有分化刚刚结束。
实验五 TRIzol试剂快速分离细胞和组织中的RNA、ＤＮＡ、蛋白质
实验原理：
TRIzol试剂是目前最常用的细胞和组织中分离ＲＮＡ的试剂，其主要成
分是苯酚，苯酚的作用是裂解细胞，使细胞中的蛋白和核酸物质释放，由于ＲＮＡ极易被ＲＮａｓｅ分解，所以TRIzol中常加入８－羟基喹啉，异硫氰酸胍等来抑制内源性和外源性ＲＮａｓｅ活性，以保证ＲＮＡ完整。
TRIzol试剂还利用RNA、ＤＮＡ、蛋白质在不同溶液中的溶解性质,加入氯仿离心后,溶液分为水相、中间层和有机相,取出水相用异丙醇沉淀可回收RNA,用乙醇沉淀中间层可回收DNA,用异丙醇沉淀可回收蛋白质,从而实现三者快速分离。
实验步骤：
样品处理: TRIzol处理后的样品在室温放置5min,每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈震荡15s,室温放置3min,离心15min.样品分三层:底层为红色有机相,上层为无色水相和一个中间层.RNA主要在水相,中间层和有机层用于分离DNA和蛋白质。
RNA :
放置干燥RNA沉淀，用无Rnase水在55-60度下溶解ＲＮＡ
取２ｕｌ样品用核算微量检测仪测量ＲＮＡ浓度
另取２ｕｌ在琼脂糖凝胶中跑电泳
DNA：
75%乙醇洗DNA沉淀后再离心
试问晾干后NaOH溶解，再用TE，HEPES调节PH
取2ul在核算微量检测仪上测量ＤＮＡ浓度
蛋白质：
室温晾干后１％ＳＤＳ溶解蛋白质
双缩脲试剂检验
实验结果及分析：
1、RNA电泳图如下：可以看到28，18s，5s三条条带
2.
OD（260nm）/OD（280nm）浓度
RNA 1.79 1192.1 ng/ml
DNA 1.00 174.9 ng/ml 3．蛋白质与双缩脲试剂的反应出现阳性结果，但是不是很明显。
4. 本实验得到的结果虽然都出现阳性结果，但是导致得到的物质的收率不是很高有以下几个原因:
a) RNA的得率：样品匀浆时实际量太少，只是样品裂解不够彻底，RNA沉淀没有完全溶解，还有一些污染等原因导致RNA降解。
b) DNA 蛋白质得率：样品的匀浆和裂解的不彻底，得到的沉淀没有很好溶解,再就是得到的组织没有马上处理导致样品的降解。
我们只有严格的按照试验的流程操作，从操作步骤，样品和仪器的准备，以及注意一些操作环境的维护的事项，这样才能够得到欲想要的大分子，进而进行后续的实验.
实验五流式细胞仪凋亡分析ＡｎｎｅｘｉｎＶ／７-ＡＤＤ双染色法
实验原理：
在凋亡的早期阶段，细胞内的钙离子快速持续上升，使谷氨酰胺转移酶被
激活，造成胞质磷脂不对称丧失，导致膜内侧磷脂酰丝氨酸从细胞内层暴漏与外层，Ａｎｎｅｘｉｎ-Ｖ为３５－３６ＫＤ的钙离子依赖性磷脂结合蛋白，并可被ＦＩＴＣ荧光物指标记，故ＡｎｎｅｘｉｎＶ被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标记之一，７－ＡＤＤ是一种核酸染料，不能透过完整的细胞膜，但在凋亡晚期和坏死的细胞，因为细胞膜受到破坏，而使细胞核染色。
实验步骤：
1.样品处理：2ml(浓度为1×106 /ml)细胞接种于6孔板/培养皿,培养24h后,加入合适凋
亡诱导剂,设置空白对照1孔,加入同浓度药物各3孔(实验组)
2.进行细胞干预刺激24h,收集并用PBS洗涤,计数,离心
3.制备单细胞悬液,将细胞悬重于200ul的1×binding buffer中,每个样本浓度约为1×
106 /ml
4.100ul制备好细胞悬液加入到12mm×75mm试管
5.加入5ulＡｎｎｅｘｉｎ-Ｖ与７－ＡＤＤ于制备好细胞悬液中,混匀,室温孵育5min,加
入400ul稀释后的binding buffer, 1h内进行流式细胞仪检测
6.测定要做3管对照
1单纯细胞样本
2细胞样本只加入5ulＡｎｎｅｘｉｎ-Ｖ
3细胞样本只加入1ul７－ＡＤＤ
7.细胞仪测定:525nm测ＦＩＴＣ,675nm测７－ＡＤＤ,分析凋亡细胞、活细胞和坏死细
胞百分率。
实验结果及分析
1.这是没有做过药物处理的细胞，所以细胞落在左下象限，还有部分落在右上象限的是死细胞。
2.这是经过药物处理的细胞，可以看到在右下象限出现荧光标记，说明细胞处于凋亡早期。
3.在左上象限出现标记，说明药物处理的细胞处于凋亡中、晚期或是坏死细胞。
4.这个图片比较全面，各个时期的细胞特征都能够体现出来。