实验过氧化氢酶和过氧化物酶的作用课件
过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶的作用
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酶的作用和本质 课件
编号
1
2
3
4
步骤
相同 向 4 支试管中分别加入 2 mL 过氧化氢溶液 并放在试管
处理 架上
不同
放入 90 ℃左右 滴入 2 滴 滴入 2 滴肝脏
处理 不处理 的水浴 中加热 FeCl3 溶液
研磨液
观察 试管内产生的 气泡数量 试管内卫生香 燃烧程度
(3)实验中的相关变量：
③无关含义：除自变量以外影响实验结果的变量 变量实例：反应物的性质、浓度、肝脏的新鲜程度等
(4)对照实验：
①含义：除了一个因素以外，其余因素都 保持不变 的实验。 ②原则：除了要观察的变量外，其他变量都应当始终 保持相同 。
二、酶的本质和作用原理 1．本质 (1)合成场所： 活细胞 中。 (2)化学本质：绝大多数是 蛋白质 ，极少数是 RNA 。 2．作用原理 (1)活化能：分子从 常态 转变为容易发生化学反应的 活跃 状 态所需要的能量。 (2)原理：同无机催化剂相比，酶 降低活化能 的作用更显著， 因而催化效率更高。 (3)意义：使细胞代谢能在 温和 条件下快速进行。
[特别提醒] (1)酶和无机催化剂一样，只能催化热力学上允许进行的 反应。 (2)酶可以缩短化学反应到达平衡的时间，但不能改变反 应的平衡点。 (3)在反应前后，酶的化学性质和数量保持不变。
二、酶化学本质的实验验证 1．证明某种酶是蛋白质 实验组：待测酶液＋双缩脲试剂→是否出现紫色反应。 对照组：已知蛋白液＋双缩脲试剂→出现紫色反应。 2．证明某种酶是 RNA 实验组：待测酶液＋吡罗红染液→是否出现红色。 对照组：已知 RNA 液＋吡罗红染液→出现红色。
比较过氧化氢在不同条件下的分解 1．原理 新鲜肝脏中含有过氧化氢酶，Fe3＋是一种无机催化剂。用一定量 的过氧化氢酶和 Fe3＋催化过氧化氢分解成 H2O 和 O2，可比较两者的 催化效率。
过氧化物酶
13
3 3
应
用
纺织行业: 在印染加工过程中，传统的去除过氧化氢的工艺有 两种，一为织物经漂白后用大擞热水、冷水反复清洗 (至少应洗3次)再进行染色；二为织物经漂白后用还原 剂还原，再用水清洗一遍后进行染色。而应用过氧化氢 酶可快速去除过氧化氢，只需要冷洗一遍，甚至不用水 洗，并可以与染色工艺同浴。该方法可节约用水及能源、 缩短工艺时间、实现安全染色、减少布面磨损，并有利 于保护环境.
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3 3
应
用
环保行业: 用CAT取代化学试剂降解工业废水中含有的过氧化 氢可以避免二次污染，同时也可以降解芳环化合物秘脂 族化合物。其中辣根过氧化氢酶(HRP)由予价格便宣且 失活慢，已在很多含酚废水处理中得到了应用。
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3 3
应
用
造纸行业: 近年来造纸行业相继以过氧化氢漂白代替传统漂白 方法，并通常用二氧化硫和亚硫酸氢钠去除漂白后的过 氧化氢。随着世界各国对环境和安全问题的考虑，促进 了去除过氧化氢方法的深入研究，有研究表明，CAT可 在10 min内将过氧化氢降解，在这个领域具有广阔的使 用前景。2004年美国能源部的爱达荷国家工程和环境 实验室(INEEL)的研究者们从中分离并生产了一种过氧 化氢产品(命名为超稳定过氧化氧酶)，可应用于纺织和 造纸行业的漂白过程，该项工作被R&D杂志评为2004年 100个最显著的技术成果之一。
3
3 1
简
介
2.分类 大多数过氧化物酶是亚铁血红素蛋白，一般以 FeIII和原卟啉IX（高铁血红素IX）作为辅基，可 分为哺乳动物过氧化物酶、植物过氧化物酶、微生 物过氧化物酶。 ----影响酶促反应速度的因素 * 底物浓度 米氏公式 * 温度 * 酶浓度 * 激活剂、抑制剂 * pH
过氧化氢酶活性测定
实验29 过氧化氢酶活性测定（高锰酸钾滴定法）过氧化氢酶普遍存在于植物的所有组织中，其活性与植物的代谢强度及抗寒、抗病能力有一定关系，故常加以测定。
一、原理过氧化氢酶（catalase）属于血红蛋白酶，含有铁，它能催化过氧化氢分解为水和分子氧，在此过程中起传递电子的作用，过氧化氢则既是氧化剂又是还原剂。
可根据H2O2的消耗量或O2的生成量测定该酶活力大小。
在反应系统中加入一定量（反应过量）的过氧化氢溶液，经酶促反应后，用标准高锰酸钾溶液（在酸性条件下）滴定多余的过氧化氢。
即可求出消耗的H2O2的量。
二、材料、仪器设备及试剂（一）材料：小麦叶片（二）仪器设备：1. 研钵；2. 三角瓶；3. 酸式滴定管；4. 恒温水浴； 5. 容量瓶。
（三）试剂：1. 10%H2SO4；2. 0.2 mol/L pH7.8磷酸缓冲液；3.0.1mol/L 高锰酸钾标准液称：取KMnO4（AR）3.1605g，用新煮沸冷却蒸馏水配制成1000ml，再用0.1mol/L 草酸溶液标定；4. 0.1mol/L H2O2市售30%H2O2大约等于17.6mol/L，取30%H2O2溶液 5.68ml，稀释至1000ml，用标准0.1mol/L KMnO4溶液（在酸性条件下）进行标定；5. 0.1mol/L 草酸：称取优级纯H2C2O4.2H2O 12.607g，用蒸馏水溶解后，定容至1000ml。
三、实验步骤（一）酶液提取：取小麦叶片2.5g加入pH7.8的磷酸缓冲溶液少量，研磨成匀浆，转移至25ml容量瓶中，用该缓冲液冲洗研钵，并将冲洗液转至容量瓶中，用同一缓冲液定容，4000rpm离心15min，上清液即为过氧化氢酶的粗提液。
（二）取50ml三角瓶4个（两个测定，另两个为对照），测定瓶加入酶液2.5ml，对照加煮死酶液 2.5ml，再加入 2.5ml 0.1mol/L H2O2，同时计时，于30℃恒温水浴中保温10min，立即加入10%H2SO42.5ml。
过氧化物酶、过氧化氢酶活性测定方法及试剂配制
过氧化物酶（POD）活性测定【实验原理】过氧化物酶广泛分布于植物的各个组织器官中，在有H202存在条件下，过氧化物酶能使愈创木酚氧化，生成茶褐色的4-邻甲氧基苯酚，可用分光光度计测生成物的含量来测定活性。
【实验试剂】愈创木酚、30%过氧化氢、20mmol/LKH2PO4、100mmol/L磷酸缓冲液（pH6.0）、反应混合液[100mmol/L 磷酸缓冲液（Ph6.0）50mL，加入愈创木酚28uL,加热搅拌，直至愈创木酚溶解，待溶液溶解冷却后，加入30%过氧化氢19uL，混合均匀保存在冰箱中]【方法步骤】（1）、粗酶液的提取称取小麦叶片0.25g，加20mmol/LKH2PO4 2.5mL，于研钵中研成匀浆，以4000r/min离心10分钟，收集上清液保存在冷处，所得残渣再用20mmol/LKH2PO4 2.5mL提取一次，全并两次上清液，所得的即为粗酶提取液(酶活性过高，稀释10倍)。
（2）、酶活性的测定取试管3只，于一只中加入反应混合液3mL，KH2PO41mL，作为校零对照，另外三只中加入反应混合液3mL，稀释后的酶液1mL（如表1），立即开启秒表，于分光光度计470nm波长下测量OD值，每隔1min读数一次（4min）。
以每分钟表示酶活性大小，将每分钟OD值增加0.01定义为一个活力单位。
表1 紫外吸收法测定POD酶活性配置表管号S0（对照）S1（实验）S2（实验）反应混合液(ml) 3.0 3.0 3.0KH2PO4 (ml) 1.00.00.0酶液 (ml)0.0 1.0 1.04.结果计算以每分钟吸光度变化值表示酶活性大小，即以ΔA 470 /[min · g （鲜重） ]表示之。
也可以用每min 内 A 470 变化 0.01 为 1 个过氧化物酶活性单位（ u ）表示。
POD总活性[u/g(FW)]=FWtV.VA T⨯⨯⨯⨯147001∆式中：POD总活性以酶单位每克鲜重表示。
过氧化氢酶的作用实验报告
过氧化氢酶的作用实验报告
《过氧化氢酶的作用实验报告》
过氧化氢酶是一种重要的酶，在生物体内起着重要的作用。
为了进一步了解过氧化氢酶的作用，我们进行了一系列的实验。
首先，我们收集了一些新鲜的土豆，并将其切成小块。
然后，我们将土豆块放入搅拌机中，搅拌成土豆泥。
接着，我们将土豆泥放入离心机中，离心一段时间后，我们得到了土豆汁。
接下来，我们将土豆汁倒入几个试管中，每个试管中加入不同浓度的过氧化氢溶液。
然后，我们观察了试管中的反应情况。
我们发现，在加入过氧化氢溶液后，试管中的土豆汁出现了气泡并且产生了氧气气体。
这表明过氧化氢酶在土豆汁中催化了过氧化氢的分解反应，产生了氧气气体。
通过这一实验，我们验证了过氧化氢酶对过氧化氢的催化作用。
过氧化氢酶能够加速过氧化氢的分解反应，产生氧气气体。
这一发现对于进一步研究过氧化氢酶的作用机制具有重要的意义。
总的来说，通过这次实验，我们进一步了解了过氧化氢酶的作用，并为未来的研究提供了重要的参考。
希望我们的实验结果能够为相关领域的研究工作提供一些帮助。
新教材人教版生物必修1课件：5.1.(一)酶的作用和本质
情境素养探究
1.【生活情境】水果中也含有蛋白酶,如木瓜和菠萝。木瓜中含有木瓜蛋白酶, 菠萝则含菠萝蛋白酶,将两者提纯后可以得到我们常用的“嫩肉粉”的主要成分。 将嫩肉粉放入腌制的牛肉或猪肉中,可分解肉中的蛋白质,从而使肉类变得更为 嫩滑。
探究: (1)加了“嫩肉粉”的牛肉吃起来比较嫩滑,然而我们只需要加入少量“嫩肉粉” 就可以了,这体现了酶作用的什么特点? 提示:高效性。 (2)我们生吃过多的菠萝,舌头会有一些火辣辣的感觉,请解释可能的原因是什么。 提示:菠萝中的蛋白酶将舌头上的蛋白质水解,使舌头受到损伤。
【微思考】 有人认为酶能为化学反应提供能量,这种说法对吗? 提示:不对,酶不能为化学反应提供能量。
2.酶本质的探索历程: 将下列观点或成就与科学家一一对应(连线):
观点或成就 a.糖类变酒精必须有酵母菌细 胞死亡并裂解释放其中物质 b.少数RNA也具有生物催化 功能 c.从酵母菌细胞中提取引起发 酵的物质——酿酶
探究点二 酶的作用原理和本质 1.酶的作用原理(科学思维): 【图表情境】如图代表某化学反应在有酶催化(②线)和无酶催化(①线)的反应 曲线,思考讨论以下问题:
(1)线段ac表示_无__酶__催__化__需__要__的__活__化__能__;线段bc表示_有__酶__催__化__需__要__的__活__化__能__; 线段ab表示_酶__催__化__所__降__低__的__活__化__能__。
阅读材料思考下列问题: (1)分析酶的本质和基本组成单位: ①本质:_绝__大__多__数__是__蛋__白__质__,_少__数__是__R_N_A_。 ②基本组成单位:_氨__基__酸__和__核__糖__核__苷__酸__。
(2)据材料分析,酶具有什么作用? 提示:催化作用。 (3)萨姆纳提取出脲酶结晶,证明脲酶是蛋白质,并因此荣获诺贝尔化学奖。你能 用简单的实验帮助萨姆纳验证脲酶是蛋白质吗?(写出简单实验思路即可) 提示:用双缩脲试剂检测,用已知的蛋白质样液作对照。
高中生物课件—《酶的作用》—比较过氧化氢在不同条件下的分解
试管编号
步骤
1
2
3
4
一 H2O2 浓度 3%
3%
3%
3%
解密一剂：量2号试管比21m号l 试管产生2m的l 气泡多2m的l 原因是什2m么l ？
二加热反能应促条进件过氧常化温氢的分解90，℃提高反Fe应Cl3速率肝。脏研磨液
解密二剂：量3号试管比—1—号试管—产—生的气泡多2滴的原因是什2滴么？
高结 果反F应气卫e速泡生3+具产 香率生 复有燃催化不不作明复用显燃，能不促少复进量燃过氧化较变氢多亮的分解大复，量燃提
卫生香
燃烧 达到着火点
木棒
未燃烧 未到着火点
降低着火点、增强火力等
分子从常态转变为容易发生化学反应的活 跃状态也需要一定的能量；并称为活化能。
如果化学反应所需活化能越多；则反应越 不容易 （容易/不容易）发生；
各条件使反应加快的本质是： 加热： 提高分子的能量 Fe3+： 降低化学反应的活化能 酶： 更显著地降低化学反应的活化能 结 论：
程度
结论
比较过氧化氢在不同条件下的分解
试管编号
步骤
1
2
3
4
一 H2O2 浓度 3%
3%
3%
3%
解密三剂：量4号试管比21m号l 试管产生2m的l 气泡多2m的l 原因是什2m么l ？
二 反应条件 常温
90℃ FeCl3 肝脏研磨液
后剂来量研究表明—在—动物肝—脏—细胞中确实2滴存在一种能2滴也加
结快过气氧泡化产氢生分解的不物明质显，这少种量物质称为较：多过氧化大氢量酶。
酶是通过降低化学反应的 活化能 来提高反 应速率。
本节核心知识： 酶的作用
后来在细胞中还发现了很多种酶，参与细胞 各种化学反应；且我们把细胞内的这些化学反应 统称为细胞代谢。
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四、实验操作流程
表1 过氧化氢酶的作用
管号 2%过氧化 新鲜猪肝/g 煮沸肝糜/g 生马铃薯/g 熟马铃薯/g 氢溶液/ml
13 23 33 43
0.5
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0.5
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1
观察各试管有无气泡放出?
?
表2 过氧化物酶的作用
试剂
管号
1% 焦性没食子酸（ml） 2% H2O2(滴) 蒸馏水(ml) 新鲜白菜提取液(ml) 煮沸的白菜提取液(ml)
一、实验目的
了解过氧化氢酶和过氧化物酶的作用
二、实验原理
1. E+2H2O2→→ E+2H2O+O2↑
2.E + H2O2 → E + H2O + [O]，
[O]可氧化一些酚类和胺类物质。
焦性没食子酸
[O]
焦性没食子橙(橙红色)
愈创木酸
[O]
愈创木酸的臭氧化物(蓝色)
三、实验用品
1.电子天平、水浴锅、试管； • 马铃薯、新鲜猪肝、2%过氧化氢溶液。 2.电子天平、试管、纱布、研钵、漏斗； • 白菜梗、2%过氧化氢溶液、 1%焦性没食子
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2----22-
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摇匀后，观察各管颜色变化和沉淀的出现。 注：将5克白菜梗加15ml蒸馏水一起放入研钵中研碎，然后用一至二 层纱布过滤，其滤液即为“白菜提取液”。