实验7 维生素类药物鉴别、三点校正法测定维生素A含量(学生)
实验7 维生素类药物鉴别、三点校正法测定维生素A 的含量
第一部分 维生素类药物鉴别
一、目的要求：
掌握维生素类药物的鉴别反应的原理及其实验操作。
二、实验原理
（一）、维生素A 的鉴别
原理：结构为含共轭多烯醇或酯结构，维生素A 和氯化锑（III ）中存在的亲电试剂氯化高锑（V ）作用形成不稳定的蓝色碳正离子。
CH 2
O
C
O
R
SbCl 5
CH 2
+
CH 2
SbCl 5 ROO
_
（二）、维生素B 1的鉴别
原理：维生素B1在碱性溶液中，可被铁氰化钾氧化成硫色素。
硫色素溶于正丁醇中，显蓝色荧光。
N
N
H 3C
NH 2CH 2OH
3
NaOH
N
N
H 3C
NH 2
CH 2
N
C O
H CH 3
C SNa
CH 2CH 2OH C
N
N
N
N
CH 3
CH 3
C SNa
CH 2CH 2OH C
环合
N
N
N
H N
CH 3
S
CH 2CH 2OH
CH 3
N
N N
N
CH 3
S
CH 2CH 2OH
CH 3
(O)
（三）、维生素C 的鉴别
原理：维生素C 分子中有二烯醇基，具有强还原性，可被硝酸银氧化为去氢抗坏血酸，同时产生黑色银沉淀。
OH
CH 2OH
H
OH O
HO O
+AgNO 3
OH
CH 2OH
H
O
O
O
O
+
2HNO 3
+Ag
（四）、维生素E 的鉴别
原理：维生素E （Vitamin E ）是一类与生殖功能有关的维生素，化学结构均为苯并二氢吡喃衍生物，结构中有酚羟基，故亦称生育酚。
药用的是其醋酸酯结构。
维生素E 在硝酸酸性条件下，水解生成生育酚，生育酚被硝酸氧化为邻醌结构的生育红而显橙红色。
（五）、维生素D 的鉴别
原理：维生素D （Vitamin D ）又叫骨化醇或麦角骨化醇，是一类抗佝偻病维生素的总称，化学结构均为甾醇的衍生物，遇醋酐浓硫酸显色反应。
三、操作步骤
1. 维生素A 1滴→ 溶于10滴氯仿中→ 加三氯化锑饱和氯仿溶液→即显蓝色、逐渐变成紫红色（紫红基本看
不到）。
2. 取维生素B 1约5mg （绿豆大小）→ 溶于2.5mL NaOH 试液中→ 加铁氰化钾试液0.5mL → 正丁醇3mL → 强
力振摇2min ，放置分层→ 醇层即显强烈的蓝色荧光→ 加盐酸试液，荧光即消失→ 加NaOH 试液后，荧光又出现。
3. 取维生素C 溶液5滴→ 加AgNO 3试液0.5mL → 即发生银的黑色沉淀
4. 取维生素E 1滴→ 加无水乙醇10 mL 溶解→ 加硝酸2mL → 摇匀，75℃水浴加热15min → 溶液显橙红色。
5. 取维生素D 1滴→ 加氯仿5mL 溶解→ 加醋酐0.3mL → 加浓硫酸0.1mL → 振摇→ 显黄色→ 渐变为红色→
迅即变为紫色→ 最后呈绿色。
四、现象记录：
如实记录鉴别实验中的现象
第二部分 三点校正-紫外分光光度法测定维生素A 的含量
一、目的要求：
掌握紫外分光光度法测定维生素A 含量的基本原理与操作。
O
CH 3
H 3C
CH 3
O
CH 3C 16H 33
C H 3C
O
HNO 3 75℃
[O]
O
CH 3C 16H 33
CH 3
H 3C
O
O
二、原理：
维生素A 分子中具有多烯共轭体系得结构在325～328nm 间有选择性的吸收，故可用紫外分光光度法测定含量。
由于维生素A 中加入植物油和混有其他杂质，所测得的吸收度不是维生素A 独有的吸收，非维生素A 物质的无关吸收所引起的误差应用校正公式校正，才能得到正确结果。
本法是在三个波长出测得吸收度，根据校正公式计算吸收度A 校正值后，再计算含量，故本法称为“三点校正法“，其原理主要基于以下两点：
（1）杂质的吸收在310-340nm 的波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度变小。
即A 杂=-ax+b （2）物质对光吸收呈加和性。
即在某一样品的吸收曲线上，各波长的吸收度是维生素A 与杂质吸收度的代数和，而吸收曲线也是它们吸收曲线的叠加。
即A 总=A 纯+A 杂 三、操作步骤：
精密吸取维生素A 供试液1.0mL → 置10mL 容量瓶中→ 加环己烷定容到刻度→ 摇匀→ 以环己烷为空白，分别在300、316、328、340和360nm 处测定吸收度。
（每人做两份样品，即用两个容量瓶稀释供试液） 四、数据记录 五、计算：
1、计算各波长下的吸收度与328nm 波长下的吸收度比值 波长（nm ） 300 316 328 340 360 吸收度比值
0.555
0.907
1.000
0.811
0.299
2、如果最大吸收波长在326nm-329nm 之间，且所测得各波长吸收度比值不超过以上规定的±0.02，直接用328nm 波长出测得的吸收度A328求得%
11cm E 。
3、如所测得各波长吸收度比值超过以上规定±0.02，则按下式求出校正后的吸收度，再判断：
A 328= 3.52（2 A 328 -A 316 -A 340）
（1）若%100328
328
(328⨯-A A A 校正） 所得的数值在±3%以内，则仍然直接用A 328求得%11cm E ；
（2）若%100328
328
(328⨯-A A A 校正）所得的数值在–15～–3%之间，则需用A 328（校正）求得%11cm E ； （3）若
%100328
328
(328⨯-A A A 校正）所得的数值小于-15 %或大于+3%，或者吸收峰波长不在326～329nm 之间，则不能用本法进行测定，必须采用第二法（皂化法）进行含量测定。
%11cm E ：由公式A = %11cm E ·C ·L 得
L C A cm E ⋅=%11即可求得%11cm E 值。
A328（校）A328
-15% -3% 0 3%
5、求效价（IU/g ）效价系指每克供试品中所含维生素A的国际单位数（IU/g ）。
1900为维生素A醋酸酯在环
己烷溶液中测定时的换算因数。
每1g供试品中维生素A的单位数（IU/g ）=
%
1
1cm
E× 1900
六、结论与讨论。
维生素类药物的分析练习试卷1(题后含答案及解析)
维生素类药物的分析练习试卷1(题后含答案及解析) 题型有：1. A1型题 2. X型题1．中国药典(2000年版)采用第一法测定维生素A含量时，若最大吸收波长在326-329nm范围内，并由第15题项下计算出的吸收度比值的差值均不超过±0.02，则于328nm波长处测得的吸收度(A328)则应A．直接代入＝A328/(C·L)计算B．直接代入A328(校正)=3.52(2A328-A316-A340)计算C．不能用本法，应改用第二法测定含量D．不能用本法，应改用皂化法测定含量E．应按A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A33n进行校正后计算正确答案：B 涉及知识点：维生素类药物的分析2．中国药典(2000年版)规定维生素E中特殊杂质--生育酚的检查如下：取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈滴定液(0.01mol/L)滴定，至终点时消耗硫酸铈滴定液(0.01mol/L)不得超过1.0mI。
计算维生素E中生育酚的限量为(生育酚的分子量为430.0，生育酚与硫酸铈的摩尔比为1：2)A．4.0%.B．2.5%.C．8.0%.D．4.0%.E．1.8%.正确答案：B 涉及知识点：维生素类药物的分析3．维生素C的分子结构特性部分是A．类似糖的结构B．二烯醇C．羰基D．内酯环E．多羟基正确答案：B 涉及知识点：维生素类药物的分析4．中国药典(2000年版)采用加硝酸呈色反应鉴别维生素E时，溶解试样的溶剂应为A．水B．乙醇C．无水乙醇D．乙醚E．无醇氯仿正确答案：C 涉及知识点：维生素类药物的分析5．三点校正法测定维生素A含量时的换算因数(1900或1830)是表示A．IU/gB．效价(IU/ggC．效价(IU/g)/ (λmax)D．效价(1U/g)/AmaxE．(λmax)×1900正确答案：C 涉及知识点：维生素类药物的分析6．中国药典(2000年版)采用等波长差法测定的维生素类药物应为A．维生素AB．维生素A醇C．维生素ED．维生素A1E．维生素A醋酸酯正确答案：E 涉及知识点：维生素类药物的分析7．维生素A不溶于以下哪种溶剂A．乙醚B．氯仿C．乙醇D．水E．环己烷正确答案：D 涉及知识点：维生素类药物的分析8．若[A328(校正)-A328]/ A 328 ×100%.所得值小于-15%.或大于+3%.，此时处理的方法是A．改用第二法进行测定B．按A325(校正)：6.815 A325-2.555 A310-4.260A334式校正C．按A328(校正)：3.52(2A 328-A316-A340)D．不用校正，可直接用于测定E．色谱法分除未皂化部分后再测定正确答案：A 涉及知识点：维生素类药物的分析9．《中国药典》(2000年版)规定检查维生素C中铜与铁的方法是A．原子吸收分光光度法B．紫外分光光度法C．可见分光光度法D．TLCE．荧光分析法正确答案：A 涉及知识点：维生素类药物的分析10．第二法测定维生素A醇的重要步骤是A．皂化B．水解C．酯化D．氧化E．纯化正确答案：A 涉及知识点：维生素类药物的分析11．中国药典(2000年版)规定维生素A的含量表示方法为A．百分含量(g/ml)B．单位含量C．百万分之几D．百分含量(g/g)E．生物效价[国际单位(IU/g)]正确答案：E 涉及知识点：维生素类药物的分析12．以下药物的质量控制方法中，不依据药物还原性者为A．碘量法测定维生素C的含量B．硫色素反应鉴别维生素B1C．硝酸反应鉴别维生素ED．GC测定维生素E的含量E．铈量法测定维生素E的含量或检查维生素E中游离维生素E的限量正确答案：D 涉及知识点：维生素类药物的分析13．每1国际单位维生素A醇相当于本品的重量为A．0.344μgB．0.300μgC．0.344mgD．0.344ngE．0.300mg正确答案：B 涉及知识点：维生素类药物的分析14．JP(14)采用HPLC测定维生素E含量时的具体方法为A．对照品对照法B．内标法C．面积归一化法D．保留时间法E．内标加校正因子法正确答案：A 涉及知识点：维生素类药物的分析15．取某一维生素类药物适量，加无水乙醇溶解后，加硝酸，75℃加热15min，溶液则显橙红色，该药物应为A．维生素EB．维生素CC．维生素AD．维生素B1E．维生素类药物正确答案：A 涉及知识点：维生素类药物的分析16．《中国药典》(2000年版)采用紫外分光光度法测定含量的药物有A．维生素AB．维生素A胶丸C．维生素CD．维生素EE．维生素B1正确答案：A,B 涉及知识点：维生素类药物的分析17．维生素C的鉴别试验是A．水解后氧化反应B．与硝酸银试液的反应C．红外光谱法D．与二氯靛酚钠的反应E．硫色素反应正确答案：B,C,D 涉及知识点：维生素类药物的分析18．维生素A的来源主要为A．植物中提取B．动物中提取C．鲸鱼D．鱼肝油E．人工合成正确答案：C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析19．《中国药典》(2000年版)采用第一法测定维生素A醋酸酯时，其测定波长有A．325nmB．328nmC．310nmD．316nmE．340nm正确答案：B,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析20．常用于维生素A的鉴别试验为A．硫色素反应B．紫外吸收光谱C．三氯化锑呈色反应D．硝酸呈色反应E．薄层色谱正确答案：B,C,E 涉及知识点：维生素类药物的分析21．不能使维生素C褪色的试剂为A．碘试液B．亚甲蓝试液C．2，6-二氯靛酚钠试液D．甲基橙酸性指示液E．结晶紫的冰醋酸溶液正确答案：D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析22．由维生素A被氧化而产生的杂质为A．环氧化物B．过氧化物C．维生素A醛D．生育红E．维生素A酸正确答案：A,C,E 涉及知识点：维生素类药物的分析23．三点校正法测定维生素A时，选择波长的原则为A．第1点的波长为维生素A的最大吸收波长(λ1)B．第1点的波长为维生素A的最小吸收波长(λmin)C．第2点和第3点的波长在λ1的左侧D．第2点和第3点的波长在λ1的右侧E．第2点和第3点的波长在λ1的两侧(λ2与λ3)正确答案：A,E 涉及知识点：维生素类药物的分析24．采用水解后氧化反应鉴别维生素E时，应使用的试剂为A．醇制氢氧化钾B．乙醚C．三氯化铁的乙醇液D．硝酸E．2，2’-联吡啶的乙醇液正确答案：A,B,C,E 涉及知识点：维生素类药物的分析25．维生素A的氧化物一般为A．维生素A醇B．维生素A3C．维生素A酸D．维生素A醛E．环氧化物正确答案：C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析26．维生素B1的沉淀反应为A．与三氯化铁反应B．与硝酸反应C．与碘化汞钾反应D．与硅钨酸反应E．与苦味酸反应正确答案：C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析27．三点校正法测定维生素A的原理主要基于A．杂质的最大吸收范围在310～340nmB．物质对光吸收具有加和性C．维生素A的最大吸收范围在325～328nmD．杂质的吸收在310～340nm波长范围内呈一条直线，且随波长增加，吸收度变小E．维生素A和杂质的吸收光谱互不重叠正确答案：B,D 涉及知识点：维生素类药物的分析28．水解后氧化反应鉴别维生素E所需用试剂有A．硝酸B．三氯化铁试液C．醇制KOH试液D．乙醚E．2，2’-联吡啶的乙醇溶液(0.5→100)正确答案：B,C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析29．《中国药典》(2000年版)采用三点校正法测定维生素A含量的主要依据是A．维生素A中含有杂质B．溶剂油干扰测定C．杂质吸收在310--340nm范围内呈一直线，且随波长的增加吸收度变小D．物质对光吸收的合性E．Lmmbert-Beer定律正确答案：C,D 涉及知识点：维生素类药物的分析30．维生素A不具有的性质为A．紫外吸收B．还原性C．与强酸的呈色反应D．与硝酸银试液的沉淀反应E．与三氯化锑的呈色反应(Carr-Price反应) 正确答案：C,D 涉及知识点：维生素类药物的分析31．《中国药典》(2000年版)采用GC测定维生素E含量的色谱条件是A．载气为氮气B．硅酮(OV-17)为固定相C．检测用氢火焰离子化检测器D．热导检测器E．三十二烷为内标物质正确答案：A,B,C,E 涉及知识点：维生素类药物的分析32．维生素E的鉴别试验有A．水解后氧化反应B．与硝酸银的反应C．与二氯靛酚钠试液的反应D．硫色素反应E．与硝酸的反应正确答案：A,E 涉及知识点：维生素类药物的分析33．碘量法测定维生素C含量时，需用的试剂有A．盐酸溶液(9-1000)B．稀醋液C．淀粉指示液D．碘化钾淀粉指示液E．碘滴定液(0.1mol/L)正确答案：B,C,E 涉及知识点：维生素类药物的分析34．中国药典(2000年版)采用等波长差法测定维生素A醋酸酯含量时所选用3个点的相应波是A．λ1=325nmB．λ2=310nmC．λ1=328nmD．λ2=316nmE．λ3=340nm正确答案：C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析35．若第15题中计算得的吸收度比值与中国药典(2000年版)规定的比值分别进行比较，有一个或几个超过±0.02时，则应A．直接用于328nm波长处测得的吸收度(A328)B．于326～329nm波长范围内选数个波长并分别测定吸收度后，求出平均值，计算结果C．按×100%.计算所得数/1328值在±3%.范围内，可直接用A328D．若按×100%.计算所得几328数值在-15%.～-3%.之间，A328必须按规定进行校正后方可用于计算结果E．若按×100%.计算所得数值小于-15%.或大于+3%.，则不能采用第一法，而应采用第二法(皂化法、6/7定位法、等吸收度法、几何法)进行测定正确答案：C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析36．中国药典(2000年版)规定的鉴别维生素E的反应为A．硝酸呈色反应B．水解后氧化反应C．与2，6-二氯靛酚反应D．硫色素反应E．与硝酸银反应正确答案：A,B 涉及知识点：维生素类药物的分析37．维生素E中特殊杂质生育酚的来源、检查原理与方法是A．维生素E酯键断裂生成生育酚B．生育酚具还原性C．以硫酸铈氧化生育酚D．用硫酸铈滴定法进行检查E．以消耗硫酸铈滴定液(0，01mol/L)的体积(1.0ml)控制其限量为2.15%.正确答案：A,B,C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析38．碘量法测定维生素C注射液含量时，需用的试剂有A．丙酮B．甲醛C．淀粉指示液D．稀醋酸E．碘滴定液(0.1mol/L)正确答案：A,C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析39．影响紫外分光光度法测定维生素A含量的因素有A．异构体B．氧化物C．溶剂油D．中间体E．共存物正确答案：A,B,C,D 涉及知识点：维生素类药物的分析40．维生素E中生育酚的检查所用试剂有A．硝酸B．三氯化铁C．乙醚D．硫酸铈滴定液E．二苯胺试液正确答案：D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析41．规定检查维生素C中的铜与铁的原因在于A．铜与铁可和维生素C成盐B．铜与铁可与维生素C成稳定的配位化合物C．铜与铁可促进维生素C的氧化D．铜与铁会加速维生素C的分解E．铜与铁会降低维生素C的生物活性正确答案：C,D 涉及知识点：维生素类药物的分析42．硫色素反应鉴别维生素B1时，所需试剂有A．NaOH试液B．醇制KOH试液C．正丁醇D．铁氰化钾试液E．三氯化铁试液正确答案：A,C,D 涉及知识点：维生素类药物的分析43．维生素B1(盐酸硫胺)的鉴别反应为A．水解后氧化呈血红色反应B．沉淀反应C．硫色素反应D．与碱性酒石酸铜的反应E．与碘的反应正确答案：B,C,E 涉及知识点：维生素类药物的分析44．维生素E含量测定的方法一般有A．硫酸铈滴定法B．HPLCC．GCD．TLCE．IR正确答案：A,B,C 涉及知识点：维生素类药物的分析45．维生素A的药用形式为A．维生素A醇B．维生素A醛C．维生素A酸D．维生素AlE．维生素A醋酸酯正确答案：A,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析46．三点校正法测定维生素A时，按照三点波长的选择方法不同又分为A．等波长差法B．代数法C．等吸收度法D．6/7定位法E．几何法正确答案：A,B,C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析47．维生素B1的鉴别反应有A．与硝酸银试液的反应B．与三氯化锑的氯仿溶液的反应C．与硝酸的反应D．硫色素反应E．Cl-的反应正确答案：D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析48．维生素B1能与碘、碘化汞钾、三硝基酚(苦味酸)、硅钨酸等发生沉淀反应的原因在于A．维生素B1分子结构中的氯离子B．维生素B1分子结构中芳伯氨基C．维生素B1分子结构中的杂环结构D．维生素B1分子结构中的嘧啶环E．维生素B1分子结构中的噻唑环正确答案：C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析49．水解后氧化反应鉴别维生素E的原理包括A．维生素E于碱性溶液中水解为生育酚3+</sup>氧化为对-生育醌，Fe<sup>3+</sup>被还原为Fe2+” value1=“B”>B．生育酚被Fe3+氧化为对-生育醌，Fe3+被还原为Fe2+C．Fe2+与2，2’-联吡啶生成血红色的配位离子3+</sup>与联吡啶反应生成有色化合物” value1=“D”>D．Fe3+与联吡啶反应生成有色化合物E．Fe2+与铁氰化钾生成蓝色正确答案：A,B,C 涉及知识点：维生素类药物的分析50．维生素C规定检查的杂质有A．硒B．氡C．铜D．铁E．钙正确答案：C,D 涉及知识点：维生素类药物的分析51．中国药典(2000年版)采用GC测定维生素KB寸的色谱条件包括A．氮气B．硅酮(OV-17)C．氢火焰离子化检测器D．三十二烷E．热导检测器正确答案：A,B,C,D 涉及知识点：维生素类药物的分析52．维生素C的鉴别试验为A．与硝酸银的反应B．与亚甲蓝、高锰酸钾、磷钼酸、碘、碱性酒石酸铜等氧化剂的反应C．与2，6-二氯靛酚的反应D．糖类性质的反应E．紫外分光光度法正确答案：A,B,C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析53．维生素E与硝酸反应生成橙红色的原理包括A．维生素E的还原性B．维生素正在酸性条件下水解成生育酚C．生育酚再被硝酸氧化为生育红D．硝酸氧化维生素E呈桃红色E．维生素E与硝酸生成盐正确答案：B,C 涉及知识点：维生素类药物的分析54．维生素A的含量测定方法有A．紫外分光光度法B．三点校正法C．第一法D．第三法E．第二法正确答案：A,B,C,E 涉及知识点：维生素类药物的分析55．影响紫外分光光度法测定维生素A含量的杂质为A．维生素A2B．鲸醇C．维生素A的异构体D．维生素A氧化物E．维生素A合成过程中的中间体正确答案：A,B,C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析56．维生素A中的杂质有A．异构体B．中间体C．氧化物D．聚合物E．去氢维生素A和去水维生素A正确答案：A,B,C,D,E 涉及知识点：维生素类药物的分析。
药物分析思考题
（十四）1.三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的依据（原理）是什么？答：⑴物质对光的吸收具有加和性；⑵杂质的无关吸收在310~ 340 nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小。
2.用三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量时，三点波长选择的原则是什么？第一法和第二法有何不同？答：三点波长的选择原则为一点选择在维生素A的最大吸收波长处（即λ1）;其他两点选择在λ1的两侧各选一点（λ2和λ3）。
（1）等波长差法：使λ3-λ1=λ1-λ2.Chp2010规定，测定维生素A醋酸酯时，λ1=328nm; λ2 =316nm; λ3=340nm，△λ=12nm.(2)等吸收比法：使Aλ2=A λ3=6/7A λ1.Chp2010规定，测定维生素A醇时，λ1=325nm; λ2 =310nm; λ3=334nm。
3.Chp收载的两种测定维生素A的方法：★第一法（等波长差法）（适用于酯式维生素A的测定）★第二法（等吸收比法）（适用于维生素A醇的测定）。
4.测定维生素A含量的基本步骤：第一步：选择A （A328 或A328(校正后)）第二步：求百分吸光系数。
第三步：求效价效价（IU/g）(样)=百分吸光系数*换算因数。
第四步：求标示量的百分含量。
5.维生素C的性质：⑴溶解性水中易溶，水溶液呈酸性。
在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。
⑵酸性：烯二醇结构—酸性。
▲C3-OH，pKa=4.17(共轭效应) ▲C2-OH，pKa=11.57(邻位羰基) 。
一元酸.能与NaHCO3作用生成钠盐。
⑶旋光性：维生素C分子中具有2个手性C原子，具有4种光学异构体。
其中生理活性最强的是L（+）-抗坏血酸。
⑷还原性：烯二醇基具极强的还原性，易被氧化为二酮基而成为去氢抗坏血酸，加氢又可被还原为抗坏血酸。
⑸水解性维生素C因双使内酯环变得较稳定，和碳酸钠作用可生成单钠盐，不致发生水解。
但在强碱中，内酯环可水解，生成酮酸盐⑹具有糖的性质：VC结构类似糖结构，Molish试验。
实验七维生素AD软胶囊中维生素A的含量测定
维生素AD软胶囊中维生素A 的含量测定
维生素AD
维生素AD软胶囊为维生素A和维生素D2，加精炼食物油 溶解并调整浓度后密封与软质胶囊材中的胶囊剂，本品内容 物为黄色或深黄色油状液，其组分为：每粒含维生素A 10000 单位，维生素D2 1000 单位。每粒含维生素A应为标示量的 90%-120%
合成维生素A和天然鱼肝油 中的维生素A为酯式维生素
维生素A的含量测定
紫外三点校正法： 维生素A：325~328 nm 杂质： 310~340nm波长范围内呈
一条直线，且随波长的增大吸收
度减小。 且物质对光的吸收具有加和性。
杂质包括：维生素A的多种异构
体、氧化降解产物、合成中间体、 副产物、稀释用油。
测定比色皿B的吸光度，为校正值。 测定：在比色皿B中用待测样品润洗三次，加入待测样品，测 量。样品的吸光度等于测定值减去校正值。
波长（nm） 理论吸光 度比值 300 316 328 340 360 0.555 0.907 1.000 0.811 0.299 比色皿 校正 0.009 0.009 0.009 0.009 0.009 实测 吸光度 0.508 0.752 0.804 0.630 0.231 校正 吸光度 0.499 0.743 0.795 0.621 0.222 实测吸光 度比值 0.628 0.935 1.000 0.781 0.279
校正 吸光度 0.499
A328 (校正) 3.52 （2 0.795 - 0.743- 0.621） 0.796
不超过±3.0%：则不用校正吸光度，仍以未 经校正的吸光度计算含量。 -15%至-3%之间：以校正吸光度计算含量。
0.743
0.795 0.621
维生素a三点校正法计算题
维生素A的三点校正法（Three Point Calibration Method）是一种用于测量维生素A含量的分析方法。
该方法基于利用已知浓度的标准解析液来绘制标准曲线，进而通过测量未知样品的吸光度来确定其维生素A含量。
以下是关于维生素A的三点校正法的相关参考内容：1.仪器与试剂的准备在进行维生素A的三点校正法测量之前，需要准备一些仪器和试剂。
常用的仪器有分光光度计、移液器和离心机等。
而对于试剂，则需要维生素A标准品和溶剂，如醚或丙酮等。
2.标准曲线的绘制首先，准备一系列维生素A标准溶液，浓度依次递增。
然后，分别将标准溶液转移到不同比色皿中，使用分光光度计测量吸光度。
将吸光度的测量结果以Y轴值记录，并将对应的维生素A浓度以X轴值记录。
根据这些数据点，进行线性回归分析，拟合出标准曲线方程。
通常会选择三个浓度点作为标准曲线的校准点。
3.测量未知样品的吸光度将未知样品转移到所选的比色皿中，并使用分光光度计测量吸光度。
将吸光度测量值带入标准曲线方程，计算出对应的维生素A浓度。
维生素A的三点校正法的优缺点如下：优点： - 相对简单易行，不需要复杂的仪器和试剂。
- 分析结果准确可靠，具有较高的精密度和准确度。
- 标准曲线可以用于对样品的快速定量分析。
缺点： - 由于绘制校准曲线时所用浓度点较少，可能会导致曲线非线性或不准确。
- 该方法对于样品中其他组分的干扰比较敏感，可能会影响分析结果的准确性。
- 依赖于标准品的准确性和纯度，若标准品受到污染或分解，测量结果可能出现误差。
维生素A的三点校正法被广泛应用于食品、医药和化妆品等行业中对于维生素A含量的分析。
通过合理的仪器和试剂准备，标准曲线的绘制以及测量未知样品的吸光度，可以得到准确可靠的维生素A浓度结果。
然而，在实际应用中仍需注意如标准品的纯度和测量条件的控制，以确保分析结果的准确性和可靠性。
UV三点校正法测定维生素A的含量-文档资料
结果：测得本品含量为标示量的102.9%。
结论：符合规定（95.0%～105.0%）。
讨论：
1、维生素A具有紫外吸收特征，在 325nm~328nm的范围内有最大吸收；并 且，它能与三氯化锑试剂作用，产生不稳 定的蓝色。故可利用这些性质对其进行鉴 别和含量测定。
2、维生素A醋酸酯的吸收度校正公式是用 直线方程式法（即代数法）推导而来；维 生素A醇的吸收度校正公式是用相似三角 形法（几何法或称6/7定位法）推导而来。
（皂化法）测定含量。
③ 如果最大吸收波长不在326nm～329nm之间， 也不能用本法测定，而应用第二法（皂化法）测 定含量。
第一法校正公式：A328(校正)=3.52(2A328-A316-A340)
维生素A吸收度差值
由扫描结果得最大吸收波长为327.7nm（326~329nm） 各个差值均不超过±0.02，不需用校正公式。故直接用
若A328（校正）与A328的吸收度相差不超过
±3.0%，则不用校正吸收度，仍以未经校正的
A328求ห้องสมุดไป่ตู้ 。
若A328（校正）与A328的吸收度相差在 -15%～-
3%之间，则以A328（校正）得 。
若A328（校正）与A328的吸收度相差小于-15%或
大于+3%，则不能用本法测定，而应用第二法
四、实验过程
精密称取20粒胶丸2.4641g，破壳取内容物，乙 醚洗净胶丸壳并称量得总壳重0.7213g。
精密称取内容物0.0048g（9~15单位/ml范围内） 于小烧杯，用少量环己烷溶解后转移入100ml容 量瓶，再用环己烷定容至100ml。
先在紫外分光光度计下扫描出样品溶液在 200~400nm范围内的吸收度曲线，确定最大吸收 波长。然后分别在 300nm,316nm,328nm,340nm,360nm五个波长下 测定吸收度。
测定维生素A的三种方法比较
测定维生素A的三种方法比较钱玲慧;廖佳宇;李亚妮;莫晓帆;马丽;姚彤炜【期刊名称】《实验技术与管理》【年(卷),期】2012(029)005【摘要】目的:比较测定维生素A含量的3种不同方法,为维生素A及其制剂的质量研究提供参考.方法:分别采用紫外(UV)三点校正法与正、反相高效液相色谱法(HPLC)测定维生素A含量.UV三点校正法以环己烷为溶剂,按照三点校正法测定;NP-HPLC采用Hypersil Si()2柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为正己烷异丙醇(99.8:0.2);RP-HPLC采用C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(97:3).结果:UV三点校正法测得VA含量为95.5％,RSD=1.3％(n=5);NP-HPLC为112.5％,RSD=3.2％(n=5);RP-HPLC为102.3％,RSD=1.0％(n=5).结论:UV三点校正法和RP-HPLC法操作简单易行,NP-HPLC法能较好地控制杂质,但系统稳定性相对较差.【总页数】6页(P43-48)【作者】钱玲慧;廖佳宇;李亚妮;莫晓帆;马丽;姚彤炜【作者单位】浙江大学药学院,浙江杭州310058;浙江大学药学院,浙江杭州310058;浙江大学药学院,浙江杭州310058;浙江大学药学院,浙江杭州310058;浙江大学药学院,浙江杭州310058;浙江大学药学院,浙江杭州310058【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.三种方法测定糖化血红蛋白比较 [J], 金强;胡恩赑;杨晓双2.三种方法对肉松中胆固醇含量的测定及比较 [J], 朱炳祺;刘柱;陈万勤;罗金文3.三种方法测定鲨鱼硫酸软骨素钠含量的比较 [J], 焦广飞4.三种方法测定饲料水分的比较研究 [J], 杨尚霖;王斌星;柏雪;郭春华5.水中总氯测定的三种方法比较研究 [J], 黄柯天骏;钟永美因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
三点校正法测定维生素a的原理
三点校正法测定维生素a的原理宝子们，今天咱们来唠唠这个三点校正法测定维生素A的原理呀。
咱先得知道维生素A是个啥，它对咱身体可老重要了呢。
就像一个小小的健康精灵，在身体里起着各种神奇的作用，像对眼睛好啦，能让咱看东西更清楚，还在皮肤健康等方面有不少贡献呢。
可这维生素A的含量测定也不是个简单事儿。
这时候三点校正法就闪亮登场啦。
那这个三点校正法为啥能测定维生素A呢？这得从维生素A的一些特性说起。
维生素A在特定的波长下有吸收，它不是在一个波长下就完事儿了，而是有好几个有特点的波长。
在这个测定方法里呀，有一个很重要的点就是杂质的影响。
咱知道，实际的样品里不可能只有纯净的维生素A，肯定会有一些杂质在里面捣乱。
这些杂质呢，它们也会在一些波长下有吸收。
要是直接去测维生素A的含量，不考虑这些杂质，那可就乱套了，测出来的数据肯定不准得很。
三点校正法就很聪明地解决了这个问题。
它利用了维生素A和杂质在不同波长下吸收度的差异。
它会选择三个波长，这三个波长可不是随便选的哦。
在这三个波长下，维生素A和杂质的吸收度有着特定的关系。
比如说，在某个波长下，维生素A的吸收度比较强，杂质的吸收度相对弱一些；在另一个波长下，可能两者的关系又有点变化。
想象一下啊，这就像是一场光线的捉迷藏游戏。
维生素A和杂质都在这个光线的舞台上，但是它们有着不同的躲藏和现身的规律。
三点校正法就像是一个聪明的小侦探，通过观察这三个特殊波长下的情况，把维生素A从杂质的干扰中准确地揪出来。
而且呢，这个方法还利用了一些数学原理。
它会根据在这三个波长下测得的吸收度的值，通过一定的计算方法，就像变魔术一样，把杂质的影响给消除掉，最后得到准确的维生素A的含量。
这个过程其实也有点像从一堆混在一起的小珠子里挑出特定颜色的珠子。
维生素A就是我们要找的那种特殊珠子，杂质就是其他颜色的珠子。
三点校正法就像是有一套独特的挑选工具和方法，能精准地把维生素A这个特殊珠子的数量给确定下来。
药物分析笔记：维生素类药物的分析
维⽣素a的分析 维⽣素a在⾃然界中主要来⾃鱼肝油，⽬前主要⼈⼯合成。
⽆然的v a主要是全反式的维⽣素a . ⼀、性质： 1、具紫外吸收 2、易氧化变质 3、能与三氯化锑呈⾊ 4、⽔中不溶。
⼆、鉴别试验： 1、三氯化锑反应 2、紫外吸收光谱 3、薄层⾊谱 三、含量测定：紫外分光光度法（三点校正法）测va含量效价：指每克供试品中所含维⽣素a的国际单位数（u/g） 维⽣素e的分析ve有天然品（右旋体）和合成品（消旋体），药⽤为合成品。
苯环上有⼀个⼄酰化的酚羟基，⼜称⽣育酚。
⼀、性质： 1、⽔中不溶 2、紫外吸收 3、⽔解成游离⽣育酚 ⼆、鉴别试验： 1、硝酸反应： 2、⽔解后氧化反应 3、紫外光谱法 4、薄层⾊谱法 三、特殊杂质——游离维⽣素e的检查：~~有还原性（易氧化），⽤硫酸铈滴定，⼆苯胺为指⽰剂 四、含量测定： 1、⽓相⾊谱法 2、⾼效液相⾊谱法 维⽣素B1的分析 VB1（盐酸硫胺）：两个碱性基团，可与酸成盐。
⼀、性质： 1、⽔中溶解 2、具紫外吸收 3、碱性中可被氧化 4、两个杂环与⽣物碱沉淀试剂 ⼆、鉴别试验： 1、硫⾊素反应：在碱性中被铁氰化钾氧化为具有荧光的硫⾊素，溶正丁醇中显蓝⾊ 2、沉淀反应：⽣物碱沉淀试剂：碘化汞钾、三硝基酚、碘溶液、硅钨酸 三、含量测定：硅钨酸重量法、硫⾊素荧光法、⾮⽔溶液滴定法、紫外分光光度法（2000） 维⽣素C的分析 维⽣素C（ l——抗坏⾎酸）：l构型右旋体活性强。
具⼆烯醇结构有强还原性、旋光性 ⼀、性质： 1、⽔中溶，⽔液酸性 2、具糖的性质 3、⼆烯醇结构易氧化 4、与nahco 成盐 5、四个光学异构体 6、紫外吸收 ⼆、鉴别试验： 1、与硝酸银反应：⼆烯醇基强还原性，被硝酸银氧化，产⽣⿊⾊银 2、与2、6-⼆氯靛酚反应 3、与其他氧化剂反应：被亚甲蓝、⾼锰酸钾、碱性酒⽯酸铜、磷钼酸氧化剂氧化、褪⾊ 4、具糖类性质：在三氯醋酸或盐酸下⽔解［医学教育搜集整理］ 5、紫外分光光度法 三、含量测定：以碘为氧化剂的碘量法 讨论：加稀醋酸使滴定在酸性中进⾏，氧化作⽤减慢，加新沸过的冷⽔减少⽔中溶解氧影响，注射液测定时加2ml的丙酮，以消除抗氧剂亚硫酸氢钠对测定的影响。
维生素a三点校正法计算题
维生素a三点校正法计算题
维生素A的三点校正法是一种常用的方法，用于确定食物或其
他样品中维生素A的含量。
这种方法基于维生素A在不同波长下的
吸光度，通过测定样品在三个不同波长下的吸光度来计算维生素A
的含量。
首先，我们需要准备三个标准溶液，分别在三个不同波长下测
定它们的吸光度，并绘制标准曲线。
然后，我们测定样品在同样的
三个波长下的吸光度，并利用标准曲线来计算样品中维生素A的含量。
具体的计算步骤如下：
1. 准备标准溶液，分别准备含有已知浓度维生素A的标准溶液，并在三个不同波长下分别测定它们的吸光度。
2. 绘制标准曲线，根据标准溶液的吸光度和已知浓度，绘制出
在三个波长下的标准曲线。
3. 测定样品吸光度，用同样的三个波长测定样品的吸光度。
4. 计算维生素A含量，根据样品吸光度和标准曲线，利用三点校正法来计算样品中维生素A的含量。
在计算过程中，需要注意各种仪器的校正、波长的选择、溶剂的选择等因素对结果的影响，并严格按照实验操作规程进行操作，以确保结果的准确性和可靠性。
综上所述，维生素A的三点校正法是一种通过测定样品在不同波长下的吸光度，并利用标准曲线来计算维生素A含量的方法。
通过严格的实验操作和计算步骤，可以得到准确可靠的结果。
维生素A三点校正法含量测定方法的三波长法推导
维生素A三点校正法含量测定方法的三波长法推导
李枝端
【期刊名称】《中国药品标准》
【年(卷),期】2001(002)003
【摘要】@@ 目前各国药典均采用紫外分光光度法(三点校正法)[1,2]测定维生素A的含量,维生素A醋酸酯的吸收度校正公式是用直线方程法(即代数法)推导出来的,维生素A醇的吸收度校正公式是用相似三角形法(几何法或称6/7定位法)推导出来的.由于该法的测定基于吸收度的加和性与杂质吸收在测定波长范围内(310nm～340nm)呈一条直线,符合三波长法[3,4]对测试条件的选择要求,本文试用三波长法对维生素A三点校正法含量测定方法进行推导,旨在证明三点校正法系三波长法特例,并据此提出建议.
【总页数】2页(P29-30)
【作者】李枝端
【作者单位】福建省宁德市医院,宁德,352100
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.补偿密度测井刻度的理论计算：四点刻度对三点刻度的改进推导 [J], 宋有麟
2."三点法"找离心式风机叶轮平衡的理论分析公式推导及应用 [J], 张金意
3.面向药物分析专业本科生的实验教学——高效液相色谱法测定维生素A含量及
其与紫外三点校正法的方法比较 [J], 吕燕平;李嫣;郁颖佳;段更利
4.三点式LC振荡器振幅起振条件的简单推导方法 [J], 陈菊芳;岳丽娟
5.“三点校正法”对鉴定球内异物的应用 [J], 王成业
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