大鼠血清雌激素水平测定方法总结
疏肝泻火方对雌性性早熟大鼠血清IGF-1、GH、BGP水平的影响
疏肝泻火方对雌性性早熟大鼠血清IGF-1、GH、BGP水平的影响尹蔚萍;夏杰;祁燕;杨若俊;张亚男;张记成【期刊名称】《山东中医药大学学报》【年(卷),期】2018(42)5【摘要】目的：观察疏肝泻火方对雌性性早熟大鼠身长、胫骨长度和血清胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、生长激素（GH）、骨钙素（BGP）水平的影响。
方法：取SD雌性大鼠60只,随机分为正常对照组、性早熟空白组、亮丙瑞林组以及疏肝泻火高、中、低剂量组6组,除正常对照组外,其余组大鼠采用兴奋性氨基酸-N-甲基-DL-天冬氨酸（NMA）诱导建立性早熟模型,并分别予药物干预,观察大鼠顶臀径、胫骨长度及黄体出现情况,测定血清IGF-1、GH、BGP水平。
结果：与性早熟空白组比较,正常对照组、亮丙瑞林组、疏肝泻火高剂量组大鼠顶臀径较小（P 〈0.05）;与性早熟空白组比较,亮丙瑞林组与疏肝泻火高、中剂量组血清GH、IGF-1、BGF的浓度均较低（P〈0.05）,低剂量组血清GH、IGF-1浓度较低（P 〈0.05）,但高于亮丙瑞林组（P〈0.05）。
结论：疏肝泻火方改善性早熟患儿成年身高的机制可能与降低血清GH、IGF-1、BGF的浓度有关,且治疗效果与疏肝泻火方剂量相关。
【总页数】3页(P449-451)【关键词】疏肝泻火方;性早熟;大鼠;胰岛素样生长因子-1;生长激素;骨钙素【作者】尹蔚萍;夏杰;祁燕;杨若俊;张亚男;张记成【作者单位】云南中医药大学,云南昆明650200;云南省中医医院,云南昆明650021【正文语种】中文【中图分类】R289.59【相关文献】1.疏肝泻火方对雌性性早熟大鼠性腺、雌激素和下丘脑GnRH、垂体GnRH-R表达的影响 [J], 尹蔚萍;李小丝;张亚男;龚洁;夏杰2.滋阴疏肝方对雌性中枢性性早熟大鼠褪黑素和受体表达的影响 [J], 王蔚华;鄢素琪;邓玉萍;汤建桥;周广文;张领领;向楠3.滋肾疏肝泻火方对特发中枢性性早熟女童第二性征和生长发育的影响 [J], 张庆梅;尚清;马彩云;林海凤;张玉4.疏肝泻火方对雌性中枢性性早熟大鼠下丘脑KISS-1/G蛋白偶联受体54系统的影响 [J], 尹蔚萍;夏杰;祁燕;徐寅;张亚男5.滋阴泻火方对性早熟大鼠血清类胰岛素样生长因子-Ⅰ水平的影响 [J], 王旭;孙青;李海浪;郑意楠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠肝细胞雌激素受体水平
大鼠肝细胞雌激素受体水平王小燕 李文君 史京衡 顾 耀 魏霞芳 滕小洪(附属铁路中心医院内科 上海,200072)摘要 目的 了解不同年龄组大鼠肝细胞核雌激素受体与外周血雌激素的改变。
方法 采用放免法及放射配体法测定大鼠(成熟动情期、未成熟组各20只)肝细胞核雌激素受体及外周血雌激素。
结果 成熟动情期血雌二醇(E2)、雌二醇受体(ER)较未成熟期明显升高,且E2及ER之间具有良好的正相关。
结论 大鼠肝细胞ER与E2及性成熟有关。
关键词 肝;受体;雌二醇;大鼠 分类号 R588.6 肝脏虽非性激素靶器官,但性激素主要在肝脏代谢、灭能,与肝脏细胞的某些功能有相互作用,而其生物效应的产生必须通过与受体结合。
为探讨大鼠肝细胞核雌激素受体与外周血雌激素关系,我们观察了不同年龄组大鼠的肝细胞核雌激素受体与外周血雌激素的水平。
1 材料与方法1.1 动物 纯种SD大鼠,雌性,由中国科学院上海分院实验动物中心提供。
自由摄食饮水。
A组为成年组,n=20,3月龄,体重280350g。
B组为未成年组,n=20,3周龄,体重80100g。
1.2 试剂 〔3H〕雌二醇(英国放化中心)0.1-10nmol/L作10点分析,雌二醇标准品系中国生物制品鉴定所产品。
1.3 方法1.3.1 细胞核制备 成年组于动情期切断颈动脉处死后,取肝组织1g,冲去肝内血液,加10倍体积Tris缓冲液制备肝匀浆,2500r/min离心10min,取上清,1000g离心20min,再清洗2次,所得沉渣加入1ml Tris缓冲液,为细胞核悬液〔1〕。
1.3.2 雌激素受体测定 总结合管加一定量的〔3H〕E2(0.110nmol/L)中选10个浓度,非特异结合管加等量的〔3H〕E2及超过标记物100倍的非标记E2。
37℃孵育60min。
应用多头细胞收集器,通过玻璃纤维膜负压抽吸,清洗游离甾体,滤膜经80℃20min烘干后液闪测定其放射活性,应用Scatchard分析计算出最大结合量及平衡解离常数kd〔1〕。
大鼠血清雌激素水平测定方法总结
1、酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。
该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等，具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。
2、放射免疫分析（英语：radioimmunoassay，缩写为RIA）简称放免或放免法，是一种在无须采用生物测定方法的情况下，用于检测抗原（例如血清之中激素的水平）的实验室测定方法。
这一方法是由罗莎琳·萨斯曼·耶洛和Solomon Aaron Berson于1950年代创建的。
通过抽取的少量血液或病人标本，利用放射性核素标记的抗原和未标记的抗原（两者的免疫原性相同）对专一抗体的竞争性相结合反应，来分析测定体内抗原的含量。
放射免疫分析法具有灵敏性高（可达10－12g~10-15g）。
3、免疫荧光法（免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）FIA）是标记免疫技术中发展最早的一种。
用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。
主要缺点是：非特异性染色问题尚未完全解决，结果判定的客观性不足，技术程序也还比较复杂。
4、化学发光免疫分析（CLIA）亦称化学发光标记免疫测定，是用化学发光剂直接标记抗原或抗体（化学发光剂标记物），与待测标本中相应抗体或抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反应，通过磁场把结合状态（沉淀部分）和游离状态的化学发光剂标记物分离开来，然后加入发光促进剂进行发光反应，通过对发光强度的检测进行定量或定性检测。
5、时间分辨荧光分析法也叫时间分辨荧光免疫分析（time-resolvedfluoroimmunoassay, TRFIA）是以具有独特荧光特性的镧系元素及其螯合剂作为示踪物，建立的一种新型的非放射性微量分析技术。
自从1983年Pettersso n等采用时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）法定量测定hCG以来，TRFIA方法学研究和临床应用发展迅速，成为继RIA之后标记免疫分析发展的一个新的里程碑，国内外相继研制了多种TRFIA仪和配套的商品化试剂盒。
大鼠雌二醇(E2)说明书
大鼠雌二醇（E2）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T3ng/L -80ng/L使用目的：本试剂盒用于大鼠血清，血浆及相关液体样本中雌二醇（E2）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠雌二醇（E2）水平。
用纯化的大鼠雌二醇（E2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入雌二醇（E2）再与HRP标记的雌二醇（E2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的雌二醇（E2）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠雌二醇（E2）浓度。
试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
大鼠雌二醇(E2)说明书
大鼠雌二醇（E2）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T3ng/L -80ng/L使用目的：本试剂盒用于大鼠血清，血浆及相关液体样本中雌二醇（E2）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠雌二醇（E2）水平。
用纯化的大鼠雌二醇（E2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入雌二醇（E2）再与HRP标记的雌二醇（E2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的雌二醇（E2）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠雌二醇（E2）浓度。
试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
大鼠促黄体激素(LH)elisa试剂盒使用说明书
大鼠促黄体激素(LH)elisa试剂盒使用说明书检测范围：48T1.5 ng/L - 40 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中促黄体激素(LH)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠促黄体激素(LH)水平。
用纯化的大鼠促黄体激素(LH)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入促黄体激素(LH)，再与HRP标记的促黄体激素(LH)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的促黄体激素(LH)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠促黄体激素(LH)浓度。
试剂盒组成1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
大鼠雌激素受体(ER)酶联免疫分析试剂盒 说明书
大鼠雌激素受体（ER）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中雌激素受体（ER）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中雌激素受体水平。
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入雌激素受体、生物素化的抗大鼠雌激素受体抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的雌激素受体呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为20000pg/mL，做系列倍比稀释后，分别稀释成20000pg/mL，10000pg/mL，5000pg/mL，2500pg/mL，1250pg/mL，625pg/mL，312pg/mL，其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0pg/mL，临用前15分钟内配制。
如配制1000pg/mL标准品：取0.5ml20000pg/mL的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3.样品稀释液：1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6.检测溶液A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A1：100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul 检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液B1：100稀释。
大鼠雌激素诱导蛋白(PS2)酶联免疫分析
大鼠雌激素诱导蛋白（PS2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T5ng/L - 180 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中雌激素诱导蛋白（PS2）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠雌激素诱导蛋白（PS2）水平。
用纯化的大鼠雌激素诱导蛋白（PS2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入雌激素诱导蛋白（PS2），再与HRP标记的雌激素诱导蛋白（PS2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的雌激素诱导蛋白（PS2）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠雌激素诱导蛋白（PS2）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
针刺对更年期雌性大鼠血清雌二醇、睾酮、促性腺激素水平的影响
针刺对更年期雌性大鼠血清雌二醇、睾酮、促性腺激素水平的影响段淑香;李亚东;李健男;丛树园【期刊名称】《针灸临床杂志》【年(卷),期】2006(022)011【摘要】目的:探讨针刺对更年期雌性大鼠血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)含量的影响.方法:选用15～16月龄雌性Wistar大鼠为自然更年期模型,以电针针刺足三里、关元穴28天后测定血清雌二醇、睾酮、促性腺激素含量.结果:经比较更年期针刺组与更年期对照组,E2含量显著提高(P＜0.05),T和FSH含量明显下降(P＜0.06).结论:针刺"足三里"、"关元"穴对更年期雌性大鼠生殖内分泌有调节作用,从而可以起到预防或降低更年期综合征的作用.【总页数】2页(P44-45)【作者】段淑香;李亚东;李健男;丛树园【作者单位】黑龙江中医药大学,黑龙江,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学,黑龙江,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学,黑龙江,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学,黑龙江,哈尔滨,150040【正文语种】中文【中图分类】R246.3【相关文献】1.促性腺激素释放激素类似物/地欧酮对长臀鮠血清雌二醇和睾酮质量浓度的影响[J], 周立斌;刘晓春;林浩然;叶卫2.低蛋白水平饲料对黄鳝血清雌二醇和睾酮含量的影响 [J], 王淳懿;袁汉文;杨代勤3.探讨隐睾患儿抗精子抗体(AsAb)与手术、绒毛膜促性腺激素(HCG)应用的相关性及术后血清雌二醇(E2)、睾酮(T)水平的变化 [J], 郭燕萍; 姚志广; 许琴芳; 马达4.探讨隐睾患儿抗精子抗体(AsAb)与手术、绒毛膜促性腺激素(HCG)应用的相关性及术后血清雌二醇(E2)、睾酮(T)水平的变化 [J], 郭燕萍; 姚志广; 许琴芳; 马达5.电针刺激去势雌性大鼠肾俞脾俞双穴对其血清中睾酮、雌二醇和孕酮浓度的影响[J], 余晓星;刘梦捷;吴群英;黄俊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
去卵巢大鼠不同时期骨量、骨转换指标、雌激素水平的变化规律及相关性
去卵巢大鼠不同时期骨量、骨转换指标、雌激素水平的变化规律及相关性沈耿杨;张顺聪;姚珍松;任辉;江晓兵;梁德;杨志东;唐晶晶;崔健超;林顺鑫;庄洪【摘要】BACKGROUND:There are so many studies about ovariectomized rats at present, but the research on the change rules of bone mass, bone turnover markers, estrogen levels and their correlation in different periods of ovariectomized rats is rarely reported. OBJECTIVE:To analyze the change rules of bone mass, bone turnover markers, estrogen level and their correlation in different periods of ovariectomized rats. METHODS: Thirty-four 3-month-old female Sprague Dawley rats were randomly divided into three groups: baseline group, ovariectomized group and sham operated group. At the beginning of the experiment, the rats in the baseline group were sacrificed, then rats in the ovariectomized group and sham operated group were executed at 4, 8, 12 weeks postoperative respectively. The bone mineral density, bone mass content, area of different zones of the L1-3 lumbar vertebrae and femurs were detected by dual-energy X-ray absorption method, and meanwhile the serum levels of type I procolagen amino-terminal pro-peptide, I colagen carboxy-terminal peptide and estrogen were determined by ELISA. At last, we analyzed the correlation between body mass, bone mineral densityin vitro, type I procolagen amino-terminal pro-peptide, I colagen carboxy-terminal peptide and estrogen levels and the age of ovariectomized rats. RESULTS AND CONCLUSION: (1) The bone mineral density and bone mass contentof the lumbar vertebral and femurs in the ovariectomized group were significantly lower than those in the sham operated group and baseline group at the 4th week after operation (P < 0.05). The bone mineral density and bone mass content in the ovariectomized group were ameliorated obviously at the 8th and 12th weeks compared with those at the 4th week after operation (P < 0.05). The bone mass loss was highest in the L1 and intertrochanteric regions. (2) Serum levels of type I procolagen amino-terminal pro-peptide and I colagen carboxy-terminal peptide in the ovariectomized group were significantly higher than those in the baseline group and sham operated group at the 4th week after operation, but there was no difference at the 8th and 12th weeks. (3) The serum estrogen level in the ovariectomized group was prominently lower than that in the sham operated group and baseline group at the 8th and 12th weeks after operation (P < 0.01 at the 8th week,P < 0.05 at the 12th week). (4) The age was positively correlated with body mass and bone mineral density of the lumbar vertebrae and femursin vitro, while the serum levels of type I procolagen amino-terminal pro-peptide and I colagen carboxy-terminal peptide were negatively correlated with the bone mineral density of the lumbar vertebrae and femurs in vitro (P < 0.01). These results suggested that the bone mass of the lumbar vertebrae and femurs in ovariectomized rats was decreased rapidly firstly, and then rose slowly with time; the bone mass in the L1 and intertrochanteric regions lost seriously; the bone turnover markers showed a significant increase at the beginning of ovariectomy and reduced gradualy to normal condition, while the estrogenlevel was increased at the first month after ovariectomy and then decreased rapidly. In addition, the body mass, bone turnover markers and estrogen level were associated with the change of bone mass.%背景：目前对去卵巢大鼠的研究较多，而对不同时间点大鼠骨量、骨转换指标、雌激素水平的变化规律及各因素的相关性研究报道较少。
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1、酶联免疫吸附实验(ELISA)
即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。
该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等，具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。
2、放射免疫分析（英语：radioimmunoassay，缩写为RIA）
简称放免或放免法，是一种在无须采用生物测定方法的情况下，用于检测抗原（例如血清之中激素的水平）的实验室测定方法。
这一方法是由罗莎琳·萨斯曼·耶洛和Solomon Aaron Berson于1950年代创建的。
通过抽取的少量血液或病人标本，利用放射性核素标记的抗原和未标记的抗原（两者的免疫原性相同）对专一抗体的竞争性相结合反应，来分析测定体内抗原的含量。
放射免疫分析法具有灵敏性高（可达10－12g~10-15g）。
3、免疫荧光法（免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）FIA）
是标记免疫技术中发展最早的一种。
用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。
主要缺点是：非特异性染色问题尚未完全解决，结果判定的客观性不足，技术程序也还比较复杂。
4、化学发光免疫分析（CLIA）
亦称化学发光标记免疫测定，是用化学发光剂直接标记抗原或抗体（化学发光剂标记物），与待测标本中相应抗体或抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反应，通过磁场把结合状态（沉淀部分）和游离状态的化学发光剂标记物分离开来，然后加入发光促进剂进行发光反应，通过对发光强度的检测进行定量或定性检测。
5、时间分辨荧光分析法也叫时间分辨荧光免疫分析（time-resolved
fluoroimmunoassay, TRFIA）
是以具有独特荧光特性的镧系元素及其螯合剂作为示踪物，建立的一种新型的非放射性微量分析技术。
自从1983年Pettersso n等采用时间分辨荧光免疫分析
（TRFIA）法定量测定hCG以来，TRFIA方法学研究和临床应用发展迅速，成为继RIA之后标记免疫分析发展的一个新的里程碑，国内外相继研制了多种TRFIA仪和配套的商品化试剂盒。
是近十年发展起来的非同位素免疫分析技术，是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10^(-12)g/ml，较放射免疫分析（RIA）高出3个数量级。
它用镧系元素标记抗原或抗体，根据镧系元素螯合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非特异荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度。
由于其高灵敏度，在临床上得到了广泛的应用，逐渐代替了放射免疫分析。
缺点是E2的线性浓度范围为2.5-200pg/ml.
???正常值
检测方法检测范围
常规免疫mg~μg(10-3 ~10-6 g)
荧光免疫,酶免疫μg~ng(10-6 ~10-9 g)
放射免疫,发光免疫 ng~pg(10-9 ~10-12 g)
PCR pg~fg(10-12 ~10-15 g)
这些正常检测范围等没有统一的说法，但可以肯定的是TRFIA最优。