免疫组化在转移癌鉴别诊断中的应用
免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用
3．神经内分泌肿瘤标记：包括类癌、胰岛、 ．神经内分泌肿瘤标记：包括类癌、胰岛、 垂体瘤、甲状腺髓样癌、皮肤 细胞癌、 垂体瘤、甲状腺髓样癌、皮肤Merkel细胞癌、 细胞癌 原始神经外胚层瘤（ 原始神经外胚层瘤（PNET）等，目前应用 ） NSE、嗜铬蛋白颗粒A（CgA）及触突素 、嗜铬蛋白颗粒 （ ） （Syn）三种抗体同时或两种一起用，因NSE ）三种抗体同时或两种一起用， 不够特异。 不够特异。
6．S-100蛋白：是一种周围神经雪旺氏细胞 ． 蛋白： 蛋白 特异标记抗体，后发现对脂细胞、 特异标记抗体，后发现对脂细胞、朗格罕氏 细胞、肌上皮细胞、 细胞、肌上皮细胞、黑色素细胞及其肿瘤均 可阳性。 可阳性。 7．酸性或碱性磷酸酶：对骨与软骨肿瘤标 ．酸性或碱性磷酸酶： 记好。 记好。
（三）双向分化肿瘤标记 即有上皮与间叶两种细胞分化的肿瘤的 标记，如滑膜肉瘤、间皮肉瘤、脑膜瘤、 标记，如滑膜肉瘤、间皮肉瘤、脑膜瘤、癌 肉瘤、上皮样肉瘤等，一般采用 肉瘤、上皮样肉瘤等，一般采用CK、EMA 、 标记上皮，Vim等标记间叶细胞。另外有一 标记上皮， 等标记间叶细胞。 等标记间叶细胞 种恶性纤维组织细胞瘤，由纤维细胞、 种恶性纤维组织细胞瘤，由纤维细胞、肌纤 维母细胞和组织细胞混合组成的恶性肿瘤， 维母细胞和组织细胞混合组成的恶性肿瘤， 故应用Vim和组织细胞标记来诊断。 和组织细胞标记来诊断。 故应用 和组织细胞标记来诊断
4． 霍奇金淋巴瘤 （ Hodgkin’s lymphoma， ． ， HL）R-S细胞（Reed-Sternberg cell）标记抗 细胞（ ） 细胞 ） 体：CD15、CD30 、 5 ． 白 细 胞 共 同 抗 原 （ leucocyte common Antigen，LCA）：它对淋巴网状细胞均为膜 ， ） 阳性，作第一线抗体为好。 阳性，作第一线抗体为好。 注 ： （ 1） 国际上将百余种标记抗体统称为 ） CD（Cluster Designation）系列。 （ ）系列。 （2）淋巴细胞标记与R-S细胞多数为膜 ）淋巴细胞标记与 细胞多数为膜 阳性， 与组织细胞标记为胞浆阳性。 阳性，而Ig与组织细胞标记为胞浆阳性。 与组织细胞标记为胞浆阳性
免疫组化在病理诊断中的应用及意义
免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义(一)作者：联合病理转贴自：本站原创点击数：3833一、病理外检中常用抗体标记上皮类标记·AE1/AE3最常用胞浆阳性着色，细丝状与低、中分子量角蛋白反应肝细胞为阴性，而胆管细胞阳性用于确定肿瘤为上皮源性·CAM 5.2胞浆阳性着色，细丝状包含CK8 和CK18，主要染色神经内分泌细胞和腺上皮，正常鳞状上皮阴性用于染小细胞癌用于胸腺瘤和梭形细胞癌用于肝细胞癌：AE1/AE3 - CAM5.2 +用于乳腺外的Paget’s病·CK34BE胞浆阳性着色鳞状上皮和鳞状细胞癌阳性用于染前列腺的基底层细胞，鉴别浸润癌用于染涎腺肿瘤的肌上皮用于染Mallory 小体·EMA细胞膜/细胞浆阳性着色上皮标记的替代品浆细胞阳性，很好的内对照用于染滑膜肉瘤 EMA +用于大细胞分化不良性淋巴瘤 EMA +用于L&H 富于淋巴细胞的结节状何杰金用于脑膜瘤 EMA+ AE1/AE3 –用于浆细胞瘤常常 EMA +·CK7 和CK20胞浆阳性着色两者联合应用可鉴别很多种癌的原发部位CK7 常常在胃肠道的癌为阴性CK20 只有胃肠道癌和Merkel 细胞癌阳性间皮细胞标记·Calretinin细胞核和细胞浆阳性着色，核阳性着色为必需间皮强阳性，Sertoli和肥大细胞阳性用于鉴别间皮瘤（+）和腺癌（-），常加CEA用于鉴别梭形细胞间皮肉瘤（+）和其他的浆膜腔肉瘤（-）用于鉴别胸、腹水中的癌细胞和间皮细胞确定为间皮细胞，如大网膜内陷入的一团细胞或腺瘤样瘤神经元分化标记，如中枢神经细胞瘤帮助确诊心脏粘液瘤，几乎全为（+）白细胞标记·非何杰金淋巴瘤大致分类CD20 （L26），CD3怀疑T 细胞淋巴瘤者加UCHL-1（CD45RO）怀疑浆细胞瘤者LCA（CD45RB）,CD79a, CD138小B 细胞淋巴瘤者，CD79a, CD43（MT1）·LCA （CD45RB）几乎所有的白细胞（+ ）有些淋巴母细胞淋巴瘤、大细胞分化不良性淋巴瘤、外周T 细胞淋巴瘤（- ）经典Hodgkin 的R-S 细胞（-）以往浆细胞瘤（-），现（+）HE 下明确的淋巴瘤不必要染LCAB细胞相关标记·CD20 （L26）胞膜阳性着色，浆阳者不可判为阳性各阶段B 细胞阳性，除了原始的前B 和非常成熟的浆母、浆细胞用于染B 细胞淋巴瘤，除了小细胞、淋巴母细胞（不恒定）和浆细胞瘤（常-）梭形细胞胸腺瘤（+）·CD79a胞浆阳性着色，有/无核周聚集全B 细胞标记，包括浆母和浆细胞标记滤泡中心比mantle和滤泡间B要弱比CD20 贵得多用于鉴别淋巴母细胞淋巴瘤/白血病弥漫性小B 细胞淋巴瘤/白血病浆细胞瘤（常CD20–而CD79a >50% +T细胞相关标记·CD3 （polyclonal）胞浆阳性着色，核周凝聚，有时高尔基体也阳性极好的T 细胞标记，与CD43 不同，髓系细胞和组织细胞不着色极好的T 细胞和NK 淋巴瘤标记，虽然有些大细胞型T 细胞淋巴瘤阴性·CD43 （MT1）只有膜阳性才能判为阳性T 细胞、T 细胞淋巴瘤、真性组织细胞肿瘤、粒细胞肉瘤阳性一部分浆细胞瘤阳性小B 细胞淋巴瘤阳性，这一特点可辅助表明增生的小淋巴细胞为肿瘤性！EBV 感染的B 细胞阳性·UCHL-1（CD45RO）细胞膜阳性着色，有时Golgi 阳性，弥漫性胞浆阳性者非真阳性阳性：正常/ 反应性的T 细胞，组织细胞、粒细胞肉瘤和T 细胞淋巴瘤罕见情况下B 细胞淋巴瘤阳性·CD5细胞膜阳性着色T 细胞阳性，但极少B 细胞也阳性尤其用于慢性淋巴细胞性白血病和Mantle 淋巴瘤，而MALToma 和Marginal Zone 淋巴瘤阴性用于鉴别胸腺癌（CD5+）和其他癌瘤与激活相关的标记·CD30 （Ki-I，Ber-H2）只有膜染色和Golgi体染色才是真阳性正常淋巴滤泡周单个的大细胞为阳性激活的淋巴细胞阳性：如传单、弓浆虫感染、Kikuchi淋巴结炎等、浆细胞也阳性用于大细胞分化不良性淋巴瘤用于一些传统的大细胞淋巴瘤外周T和B细胞淋巴瘤中的一些单个大细胞经典何杰金病中的R-S细胞，但非L&H细胞淋巴瘤样丘疹病等皮下CD30+的淋巴增生疾病一些浆细胞瘤胚胎性癌组织细胞标记·CD68（PGM1）胞浆内颗粒状阳性着色较好的组织细胞和单核细胞（包括浆样单核细胞）及其肿瘤的标记有些非组织细胞也可阳性，包括：肾小管、粒细胞肉瘤、恶黑、血管瘤样恶纤组等髓系细胞标记·Myeloperoxidase胞浆阳性着色，常呈颗粒状髓系细胞及其肿瘤的高度特异且敏感的标记奇怪的是在Kikuchi 淋巴结炎和狼疮性坏死性淋巴结炎中，其中的组织细胞myeloperoxidase 也为阳性与淋巴瘤相关的标记·ALK-1(Anaplastic lymphoma kinase-1)胞核+ 胞浆阳性着色用于大细胞分化不良性淋巴瘤，不能证实ALK1+ 与良好预后有关用于一种罕见的大B 细胞细胞瘤，ALK1 阳性而CD20 阴性，但IgA 阳性·Bcl-2在核周围区阳性着色在正常淋巴结，生发中心阴性，但mantle 和滤泡间细胞强阳性在滤泡性淋巴瘤，（>80% 病例）生发中心强阳性，阴性不能排除滤泡性淋巴瘤也用于鉴别单核样B 细胞增生（- ）和单核样B 细胞淋巴瘤（+ ）有人用于诊断孤立性纤维性肿瘤·Cyclin-D1核阳性着色主要用于Mantle 区淋巴瘤，几乎所有病例均为阳性，有些可能为弱阳性与分化阶段相关的标记·Tdt细胞核阳性着色不成熟的T 或B 淋巴细胞标记，前T/ 前B 细胞用于诊断淋巴母细胞淋巴瘤/ 白血病诊断胸腺瘤（富于不成熟的T 细胞）肌原性标记·Desmin胞浆阳性着色平滑肌/ 骨骼肌及其肿瘤的良好标记，肌纤维母细胞有时也阳性，但肌上皮阴性一些间皮瘤阳性desmoplastic small cell tumor·MSA（Muscle-specific actin）胞浆阳性着色极好的肌源性标记用于·平滑肌、骨骼肌及其肿瘤·肌纤维母细胞及相关肿瘤（恶纤组、结节性筋膜炎等）·肌上皮及其肿瘤·血管周细胞肿瘤·一些间皮瘤血管原性标记·CD31细胞膜阳性着色内皮细胞、巨核系细胞/ 血小板阳性有时浆细胞/ 浆细胞瘤阳性主要用于诊断血管性肿瘤：特异且敏感用于识别骨髓中不正常的巨核细胞用于巨核细胞系白血病·CD34细胞膜+/-细胞浆阳性着色血管内皮/巨核细胞/血小板 +很好的血管标记，但特异性差多种肿瘤CD34阳性，包括：CD34阳性的肿瘤·a) Some myeloid leukemias (especially the primitive ones). ·b) Vascular tumors·c) Solitary fibrous tumor; angiomyofibroblastoma·d) Hemangiopericytoma·e) Dermatofibrosarcoma protuberans·f) Gastrointestinal stromal tumor·g) Mammary myofibroblastoma·h) Epithelioid sarcoma·i) Spindle cell lipoma·j) Scattered cells in peripheral nerve sheath tumors·k) Megakaryoblastic leukemia血管原性标记·Factor VIII related antigen (F-VIII)胞浆阳性着色，常为颗粒状内皮细胞、巨核系细胞/ 血小板阳性主要用于血管原性肿瘤特异性好，敏感性差神经、神经内分泌及神经外胚层细胞浆阳性着色是神经和神经内分泌细胞很好的标记特异性和敏感性均好·Paraganglioma ·Pheochromocytoma ·Neuroblastoma·Olfactory neuroblastoma ·Ganglioneuroma ·Ganglioneuroblastoma·PNET·Parathyroid tumor·Medullary thyroid carcinoma ·Islet cell tumor·Pituitary tumor·Carcinoid tumor·Small cell carcinoma·Merkel cell carcinoma ·Thyroid follicular cell tumor ·Adrenocortical tumor·CgA胞浆内颗粒状着色染神经内分泌细胞的分泌小泡，因此神经元和神经节细胞阴性神经内分泌非常特异性指标，敏感性较差，阳性信号取决于瘤细胞内神经内分泌颗粒的多少小细胞癌：信号少类癌、Merkel细胞癌、甲状旁腺腺瘤等强阳性神经性肿瘤可阳可阴·GFAP （Glial fibrillary acidic protein ）胞浆阳性着色星形细胞、室管膜细胞阳性，一些肌上皮阳性星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、室管膜瘤和脉络丛乳头状瘤阳性，少突胶质细胞瘤常阴性；一些外周神经鞘瘤可阳性涎腺多形性腺瘤常可阳性乳腺的肌上皮有时也可阳性·S-100细胞核+/-细胞浆阳性着色，核阳性着色为必需用处非常多：·glial cells, Schwann cells (astrocytoma, schwannoma, neurofibroma, malignant peripheral nerve sheath tumor). In benign nerve sheath tumors, almost all the tumor cells are positive; while in malignant peripheral nerve sheath tumor, usually only a fraction of the neoplasticcells are S100 positive. Note that S-100 protein antibody can also highlight the sustentacular cells that envelope the islands of tumor cells in paraganglioma and olfactory neuroblastoma.S-100·Melanocytes and nevus cells (Melanocytic nevus, malignant melanoma, malignant melanoma of soft parts/clear cell sarcoma of tendons and aponeurosis)·Myoepithelial cells·Fat cells (Lipoma, liposarcoma)· Cartilage cells (Chondroma, chondroblastoma, chondrosarcoma·Histiocytes of sinus histiocytosis with massive lymphadenopathy (Rosai-Dorfman disease)·Interdigitating dendritic cells and Langerhans cells (Langerhans cell histiocytosis, interdigitating dendritic cell sarcoma). Juvenile CML is often S-100 positive·HMB45胞浆内颗粒状着色恶性黑色素瘤和交界痣，而正常的痣细胞常为阴性肾和肝的血管平滑肌脂肪瘤、肾被膜瘤肺的淋巴管肌瘤病、糖瘤·Melan-A胞浆内颗粒状着色阳性表达的细胞包括：黑色素细胞、肾上腺皮质、性索（Leydig, granulosa）用于：·黑色素瘤·支持- 间质细胞瘤和颗粒细胞瘤·血管周细胞瘤·肾上腺皮质肿瘤与乳腺癌相关的抗体·ER细胞核阳性着色·PR细胞核阳性着色·Ki-67细胞核阳性着色G1, S, G2 and M phases of the cell cycle 阳性Ki-67 index: 阳性细胞所占比例·P53细胞核阳性着色正常细胞因P53蛋白很快降解故阴性，而恶性肿瘤中因突变或存在使P53稳定的因素，故可阳性·C-erBb2细胞膜阳性着色分级Herceptine 治疗还用于鉴别乳腺内/外的Paget’s病和恶黑用于乳腺内/外Paget’s病和表皮的一些透明细胞（Toker cell）用于显示Paget’s病切缘是否干净激素类抗体·Thyroglobulin胞浆阳性着色极好的甲状腺滤泡上皮及肿瘤的标记，分化极差的甲状腺癌可阴性·Calcitonin胞浆阳性着色极好的C细胞及髓样癌的标记，如CgA+则更支持髓样癌个别喉的类癌+·PTH （parathyroid hormone）胞浆阳性着色甲状旁腺细胞及其肿瘤的标记·垂体腺瘤类激素胞浆阳性着色GH，PRL，TSH，FSH，ACTH，LH·HCG胞浆阳性着色极好的滋养叶细胞及肿瘤的标记：绒癌、胚胎性癌等一些胃和膀胱的癌也可阳性·PSA胞浆阳性极好的前列腺癌标记有时膀胱和尿道周的癌也可阳性·TTF-1（thyroid transcription factor-1）单纯的核阳性着色正常情况下只有甲状腺和肺泡上皮细胞阳性，大的支气管上皮阴性在肿瘤中：主要用于确定肿瘤来源于肺或甲状腺·AFP胞浆+/- 核阳性成熟组织中阴性，而胚胎性肝、胃肠道、神经上皮成分中+用于诊断肝细胞癌和肝母细胞瘤用于诊断胚胎性癌和卵黄囊瘤用于显示不成熟畸胎瘤中的神经上皮成分其他抗体·CD99细胞膜阳性着色正常存在于不成熟T细胞（胸腺细胞）和胰岛细胞用于T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病胸腺瘤（淋巴组织成分+）尤文氏肉瘤和PNET间叶性软骨肉瘤颗粒细胞瘤和支持细胞（Sertoli）瘤孤立性纤维性肿瘤其他：滑膜肉瘤、血管周细胞瘤、脑膜瘤等·CD117 （c-Kit）胞膜阳性着色+/- 胞浆阳性，胞膜为必需正常时胃肠道的Cajal 细胞、黑色素细胞、肥大细胞阳性用于诊断GIST用于诊断mastocytosis用于诊断精原细胞瘤/ 无性细胞瘤·Inhibin胞浆内，常呈颗粒状着色用于诊断性索间质肿瘤：颗粒细胞瘤、Sertoli-Leydig细胞瘤用于诊断肾上腺皮质肿瘤·BRST-2（Gross cystic disease fluid protein-15, GCDFP-15）用于确定肿瘤来源于乳腺少部分汗腺、涎腺或其他肿瘤也可+·CEA细胞膜+/- 细胞浆阳性着色几乎所有的腺癌为阳性用于诊断乳腺/ 乳腺外的Paget’s 病，+ 而恶黑-显示涎腺或汗腺肿瘤中的腺体成分用于鉴别腺癌和间皮瘤用于诊断甲状腺髓样癌，尤其是小细胞型用于诊断肝细胞癌前列腺癌的免疫组化表型·AE1/AE3 +·PSA +·P504S +·CK34BE -·P63 –免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义(二)作者：联合病理整理转贴自：中杉生物公司交流资料点击数：4071二、免疫组化在病理诊断中的应用（一）免疫组织化学在外科病理诊断中的重要性免疫组织化学染色技术发展到今天，已经成为外科病理诊断中必不可少的手段，如同组织化学染色一PAS、网染等一样，同时也是提高诊断水平、为临床提供诊疗依据，预测治疗效果和预后，减少医疗纠纷的重要手段。
免疫组化辅助转移性肿瘤的病理诊断
• 用途
– 鉴别肺的腺癌、鳞状细胞癌
• 使用CK5、p63联合 • 鳞癌CK5+/TTF-1-/p63+ • 腺癌CK5-/TTF-1+/p63• P63/CK5方案适合于头颈部、食道、宫颈和阴道来 源的鳞癌
– 鉴别间皮瘤和腺癌
• 间皮瘤 TTF-1• 腺癌 TTF-1+
– 鉴别小细胞癌和Merkel细胞癌
肺腺癌
结肠腺癌
移行细胞癌
肾细胞癌
注意事项
• 并非绝对的定律
• 需要联用其他器官特异性的标记
通常报道的符合率
CK7 CK20
肺腺癌
结直肠腺癌
90%
75-95% 70-90% 60-80% >90% 70-90% 50-90%
肝细胞癌
肺神经内分泌癌 卵巢浆液性癌 肾细胞癌 肺鳞癌
CK5/6在双向间皮瘤、鳞癌、基底细胞癌、2/3
的移行上皮癌中表达
CK14在鳞癌及基底细胞癌中表达 二者在腺癌中一般均无表达
角蛋白的方法
CK7
CK20
肺腺癌
乳腺癌
卵巢浆液性癌 间皮瘤 子宫内膜样腺癌
CK7
CK20
结肠、直肠腺癌
CK7
CK20
移行细胞癌
卵巢粘液性癌
胰腺癌
CK7
CK20
肝细胞癌 肾细胞癌 前列腺癌 神经内分泌癌 鳞状细胞癌
肺腺癌的标记物 TTF-1
Thyroid transcription factor-1, TTF-1
• 甲状腺转录因子 • 40KD的同源异型结构域蛋白家族转录因子 之一 • 调节肺泡上皮细胞表面活性物质SP-A、 SP-B、SP-C等的表达 • 肺的腺癌、甲状腺滤泡性肿瘤和髓样癌 • 肺的神经内分泌肿瘤中表达率较其他部位 高
免疫组化技术在疾病诊断中的应用
免疫组化技术在疾病诊断中的应用随着生物医学领域的飞速发展，疾病的检测和治疗手段也在不断更新换代。
免疫组化技术就是其中之一，它应用了分子生物学、免疫学等学科的核心理论和技术，为疾病诊断提供了强有力的技术支撑。
但是，相对于其他技术来说，免疫组化技术的应用范围和定位可谓是口耳相传，今天，我们就来了解下它的应用。
一、免疫组化技术的原理免疫组化技术是利用抗体与抗原的特异性结合性质，针对被检测物在细胞或组织中的位置和数量进行定位与计量的方法。
免疫组化技术在诊断发育异常，鉴别组织类型，评估分子分型等方面起着重要作用。
通常包括以下三个步骤：1.抗原修复：对组织标本进行脱水、透明化、石蜡包埋、切片处理后，需要将变性的蛋白质抗原复原，使其在免疫反应中保持原有的构象和活性。
2.抗体标记：采用特定的抗体，针对需要检测的抗原进行特异性识别。
通常会利用荧光素、酶等物质与抗体进行标记。
3.染色反应：通过化学反应使标记后的抗体与抗原发生特异性反应，然后利用化学染色方法将反应产物显示出来。
由于该方法产生直接的显色反应，可以直接在显微镜下观测到抗原的位置、数目和类型。
二、1.肿瘤标志物检测肿瘤标志物是特定癌细胞产生的分子，可以通过类似免疫组化的方法进行检测。
凭借其高度特异性的优势，与肿瘤相关的标志物已被广泛运用于临床诊断中。
例如，抗体检测可以用于检测肺癌、鼻咽癌和乳腺癌等常见癌症，可作为确诊和治疗指南的依据。
2.医学遗传学检测用于检测胚胎性基因突变的技术已经应用于不孕不育和男性生殖系统疾病的研究中。
广泛利用的检测技术包括比色法、荧光抗体法和原位杂交法等。
该技术可在多种组织类型中用于检测精子数、精子质量和卵子质量等遗传学特征。
3.炎症诊断炎症标志物可以识别并跟踪炎性疾病的病理过程，如红斑性狼疮和类风湿关节炎。
适当的抗体检测可为长期的追踪和监测提供经济而可靠的方法。
4.神经学和心理学研究镜片染色和FISH技术的应用可以为神经学和心理学研究提供直接的可视化反馈，使分子分型分析更加容易。
免疫组化在临床诊断中的应用
免疫组化在临床诊断中的应用在临床病理诊断中，免疫组织化学（IHe）是一种很重要的技术和手段，从20世纪70年代开始，免疫组化技术就应用于病理诊断，对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响，同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识，提高了病理诊断与研究水平。
但是，随着免疫组化的广泛应用，发现免疫组化技术存在一些局限性。
深入研究免疫组化原理和技术，必须熟悉各种抗体真阳性反应部位，实现实验室间免疫组化标准化，使免疫组化在病理诊断中发挥最大的辅助作用。
在病理诊断中，随着各种抗体新的用途不断被发现及越来越多的新型抗体的出现，免疫组化在肿瘤诊断及鉴别诊断、分类、预后判断等方面产生了重大的影响。
由于免疫组化技术也存在一些局限性，因此，深入研究免疫组化原理和技术，并努力实现规范化的操作，才能充分发挥免疫组化在病理的诊断及鉴别诊断、判断预后、指导临床治疗中的作用。
1.免疫组化技术观察组织切片中抗原的数量及其在组织中的分布情况，对抗原进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学，由于抗原与抗体特异性结合，因此通过免疫组化使标记抗体的显色剂（酶、荧光素、同位素、金属离子等等）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质）。
IHC所用标本主要为两大类:组织标本和细胞标本，其中制作组织标本最常用、最基本的方法是石蜡切片。
石蜡切片对于组织形态保存好，有利于各种染色对照观察，而且能长期保存；石蜡切片中使用的甲醛固定剂对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中首选的组织标本制作方法。
2.免疫组化技术在临床诊断中的作用目前免疫组化技术应用于临床主要有以下几个方面：2.1肿瘤良恶性的判断对于反应性增生还是肿瘤性增生，可用免疫球蛋白（Ig）的轻链抗体检测B淋巴细胞增生的单克隆或多克隆性来区别。
在滤泡反应性增生时，滤泡反应中心的细胞不表达细胞凋亡蛋白（bc1-2）,be1-2阴性；而在滤泡性淋巴瘤中，由于90%以上肿瘤性滤泡细胞有bc1-2的高表达，bc1-2阳性。
免疫组化在肿瘤诊断上的应用
大脑组织GFAP(+)。
大脑胶质瘤 GFAP (+)。
大脑胶质瘤 GFAP (+)。
脑小胶质母GFAP(+)。
腹主A旁神经节瘤 Syn (+)。
外周原始神经外胚叶肿瘤 Syn (+)。
各种类型的细胞角蛋白在不同部位癌组织中表达
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 癌名称和部位 CK5 CK6 CK7 CH8 CK10 CK13 CK14 CK16 CK17 CK18 CK19
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
鳞癌
肺
＋＋
＋＋ ＋
5、协助制定治疗措施：如乳腺癌测定 ER\PR和C-erbB-2、多药耐药蛋白 MDR-1、MRP等的测定。
二．各种不同组织及其肿瘤常见的标记物：
（一）．上皮组织及其肿瘤标记物： １．存在于所有上皮细胞内的标记物： ⑴ 桥粒蛋白（desmoplakin）； ⑵ 细胞角蛋白（Cytokeratin, CK）。
腺癌
乳腺
＋＋
＋＋
宫颈
＋
＋＋
＋
胃肠
＋
＋＋
胆
＋＋
＋＋
肝
＋
＋
胰
＋＋
＋
卵巢
＋＋
＋＋
内膜
＋＋
＋＋
肾
＋
＋
肺
＋＋
＋＋
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
移行细胞癌 ＋
＋＋ ＋ ＋
免疫组化技术-免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用
• 5.腺管型 主要见于腺癌和具有腺癌样结
构的胚胎性肿瘤。上皮标记物多为胞浆 表达。胃肠低分化腺癌中有时HE很难鉴 别腺样结构，但用癌胚抗原、上皮膜抗 原或结肠癌相关抗原则容易显示出来。
• 6.腔缘型 阳性颗粒主要位于腺癌腔缘的
微绒毛处，沿腺管腔缘表面内衬一薄层 黄色颗粒，基底部多为阴性。结肠癌相 关抗原在胃肠腺癌、胆囊腺癌、乳腺癌 中常表现为这种类型；卵巢癌相关抗原 在卵巢浆液性腺癌亦是如此；肿瘤相关 粘液抗原在许多腺癌中也显示腔缘阳性。
片液中。
（五）某些抗体不着色 1.需要消化而没有消化。 2.封闭内源酶时使抗体活性下降。 3.切片在裱片或干燥时过热。 4.抗体过度稀释，一抗浓度小于二抗。 5.抗体过期或频繁冻融.
（六）内源性酶活性： H2O2 -甲醇封闭不恰当。 （七）脱片 1.切片无粘附试剂。 2.切片不干净。 3.冰冻切片：组织在贴片前已经充分固定。 （八）核轮廓模糊 1.切片已干燥（特别是冰冻切片）。 2.苏木素染液欠佳。
（二）部分区域背景着色 1.切片部分区域干燥。 2.显色反应物在封片介质中是可溶的，造成弥散。 （三）部分区域不着色 1.脱蜡不完全。 2.切片部分区域干燥。
（四）各种孵育结果所有抗体均不着色 1.H2O2终浓度不够或存放过久失效。 2.稀释液中有错误的正常血清（如猪抗兔酶
标抗体稀释液中有正常兔血清）。 3.显色反应物溶于脱水的酒精、二甲苯或封
4.免疫组化与HE切片诊断应以HE切片 诊断为准 当免疫组化诊断结果与HE切 片诊断不一致时，应再结合临床资料、X 线等影像学及实验室结果综合分析，不 能用免疫组化检查结果推翻HE切片诊断。
二、引起假阴性和假阳性结果的原因
1.假阴性结果的原因主要是： （1）抗体已失活或浓度不当或抗体本身达不到应有的敏感度； （2）由于组织自溶，抗原扩散而导致抗原消失，特别在长期
免疫组织化学在诊断中的应用潘华雄
表达，但在 DCIS 通常阴性 ER 在良性病变中通常呈局灶性阳性表达，而在 低度DCIS 呈弥漫强阳性表达，提示为克隆（肿 瘤）性过程
四、原位癌或浸润性癌?
在腺管周围有基底或肌上皮细胞的器官，
此问题已能够解决，如乳腺、前列腺、涎 腺 在原位病变中，仍然有完整的基底或肌上 皮细胞围绕，虽然有时拉长或稀疏了，而 浸润性病变周围缺乏这些细胞
乳腺的原位癌或浸润性癌?
Actin、calponin 或 p63能清晰地显示乳 腺肌上皮细胞
硬化性腺病与小管癌的鉴别
小叶癌化的导管内癌/硬化性腺病还是真正的浸
润性癌?
下列情况除外： (1) 腺样囊性癌有丰富的肌上皮/基底细胞围绕 (2) 微腺管腺病是一种良性病变，缺乏肌上皮细胞
前列腺原位癌还是浸润性癌?
在某些淋巴瘤中，免疫组化标记可以提供
预后信息
高Ki67表达与套细胞淋巴瘤的不良预后有关 间变性大细胞淋巴瘤：ALK+者预后好于ALK-
者 慢性淋巴细胞白血病： ZAP-70是与不良预后 有关的非突变Ig 基因的替代标记物
原发性系统性 ALCL的总体生存率
(Falini et al, 1999)
浆膜腔积液或活检：异常细胞 是癌细胞还是反应性间皮细胞?
浆膜腔积液或活检中的一些异常细胞很难确定
是癌细胞还是反应性间皮细胞 免疫组织化学的应用：
TTF-1：肺癌表达阳性
BerEP4 或 MOC-31：阳性倾向为癌 Calretinin：阳性倾向为间皮细胞
侵袭过程的证据
主要适用于滤泡性淋巴瘤和反应性滤泡增
达） MOC-31 TTF-1（肺源性腺癌）
六、肿瘤的预后判断：预后因子
免疫组化技术在病理诊断中的应用
免疫组化技术在病理诊断中的应用1 免疫组化技术的基本原理免疫组化技术是一种广泛应用于病理诊断的检测方法，它利用特异性抗体与组织标本中目标蛋白相互作用，从而能够检测出组织标本中特定蛋白的存在和分布情况。
该技术的基本原理是将已知特异性抗体标记在组织切片或细胞涂片上，形成复合物，再用酶学或光学等方法进行检测，从而确定蛋白质的存在性、定位、表达量及亚型等相关信息。
免疫组化技术广泛应用于病理诊断、细胞生物学、分子生物学等领域，对临床医生进行准确定位、病理分级和治疗方案的选择等方面起到了重要的作用。
2 免疫组化技术在病理诊断中的应用在病理诊断中，免疫组化技术可以根据肿瘤组织中的多个标志物进行识别和定位。
例如，在乳腺癌的诊断中，HER2、ER和PR等标志物的表达情况可以指导临床医生进行针对性的治疗。
在肺癌的诊断中，TTF-1和Napsin A等标志物的表达情况可以帮助鉴别原发性和转移性肺癌。
在淋巴瘤的诊断中，CD20和CD30等标志物的表达情况可以帮助鉴别不同类型的淋巴瘤。
因此，免疫组化技术在肿瘤组织识别和定位中具有重要作用。
除了肿瘤组织的诊断外，免疫组化技术在许多疾病的诊断中也起着重要作用。
例如，在肝病的诊断中，HBsAg和HCV抗体可以用于检测肝炎病毒感染情况。
在免疫性疾病中，抗核抗体和抗磷脂抗体可以用于诊断类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等疾病，从而指导合理的治疗方案。
在肾病的诊断中，IgG、IgA和IgM等免疫球蛋白的表达情况可以用于鉴别不同类型的肾小球肾炎。
免疫组化技术可以成为一种可靠的工具，有助于诊断和治疗。
3 免疫组化技术的优缺点免疫组化技术的优点是可以提供高度特异性和灵敏度的蛋白检测。
它与常规病理检查相比，具有更高的准确性和敏感性，能够识别很小的组织病变和微小病理变化。
同时，免疫组化技术还可以提供蛋白表达的定位信息，有助于对组织基本结构和功能的理解。
免疫组化技术的缺点之一是存在假阳性和假阴性结果的可能性。
临床分析中的免疫组化技术在肿瘤诊断中的应用
临床分析中的免疫组化技术在肿瘤诊断中的应用在肿瘤诊断中，临床分析中的免疫组化技术发挥着重要作用。
免疫组化技术通过检测组织或细胞中特定蛋白的表达情况，能够帮助医生判断肿瘤的类型、分级以及预后，从而为患者提供更准确的诊断和治疗方案。
一、免疫组化技术简介免疫组化技术是一种在组织学切片或细胞标本中检测特定蛋白表达的方法。
它利用免疫荧光染色、免疫酶染色等技术手段，通过与特定抗体的结合反应来检测目标蛋白的表达情况。
这些特定抗体可以通过单克隆或多克隆制备得到，能够与肿瘤细胞特定的抗原结合，形成可视化的颜色或荧光信号。
二、免疫组化技术在肿瘤诊断中的应用1. 肿瘤类型鉴别免疫组化技术可以帮助医生鉴别不同类型的肿瘤。
例如，对于不明原发肿瘤的患者，通过检测特定蛋白的表达情况，可以判断肿瘤的组织来源。
比如，通过检测CK7和CK20的表达情况，可以区分胃癌和胰腺癌，为临床定位提供重要依据。
2. 肿瘤分级和分期免疫组化技术还可以帮助医生进行肿瘤的分级和分期。
例如，对于乳腺癌患者，通过检测ER、PR和HER2的表达情况，可以帮助医生将肿瘤分为不同的分子亚型，从而确定合适的治疗方案。
此外，免疫组化技术还可以检测Ki-67的表达水平，评估肿瘤的增殖活性，对于预测肿瘤的预后也有一定的价值。
3. 肿瘤预后评估免疫组化技术在肿瘤的预后评估中也发挥着重要作用。
例如，在结直肠癌患者中，检测BRAF和KRAS基因突变以及MSI状态可以预测患者的预后和对化疗的敏感性，从而为个体化治疗提供依据。
此外，检测肿瘤中PD-L1的表达情况，可以预测免疫治疗的疗效，为患者选取合适的治疗方案。
4. 肿瘤复发和转移监测免疫组化技术还可以用于监测肿瘤的复发和转移。
通过检测循环肿瘤细胞(CTC)中特定蛋白的表达情况，可以确定患者是否存在隐匿转移，及时调整治疗方案。
此外，免疫组化技术还可以检测肿瘤标志物如CEA、CA125等的表达水平，对于评估治疗效果和预测复发风险也具有重要意义。
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助于确定肿瘤的原发部位,但不能鉴别良恶性。
• CK 的表型在原发癌和转移癌中表达一致。 • 在所有CK中最有帮助的是 CK 7和 CK20, 其次为CK
5/6、14和 CK17 。
CK 7/CK 20在各种癌中的表达
CK 7+/CK 20+ CK 7+/CK 20 移行细胞癌(89%/25%) ，胰腺癌(65%/77%) 非小细胞肺腺癌(72%/92%)，乳腺癌(82%/89%)， 非黏液性卵巢癌(100%/96%) 子宫内膜癌(80%/100%)，恶性间皮瘤(69%59%) CK 7-/CK 20+ CK 7-/CK 20 结、直肠癌(75%/ 90%) HCC (77%/90%)，肾细胞癌(71%/ 90%)， 前列腺癌(62%/ 75%)，鳞癌(92%/ 50%) 肺小细胞癌(82%/ 73%)
p63+/-，PAX-5+，CK7-/+
• 类癌： CK7+/CK20-，Syn+/CgA+，TTF-1-/+ • 其它神经内分泌癌：Syn+/CgA+，P63+/-
乳腺癌：CK(CK7)+ ER、PR + 以下抗体
特异性抗体
GCDFP-15
乳腺癌
75%
其它癌
5-10%
Mammaglobin
BRST-1
93%
100% 93% 73% 5% 13% 0
13%
31% 31% 4% 98% 100% 73%
BG8 CA19.9 CD15
3% 0 0
73% 67% 58%
甲状腺癌
抗体
CK7+/CK20TGB
乳头癌
+
+
滤泡癌
+
+
髓样癌
+
-
TTF-1
Calcitonin CEA-GOLD1 HBME-1 CK19
+
+ +
+
-
+
+ + -
鳞癌:CK14
器官
宫颈 食管 头颈部
总例数
15 14 30
阳性例数
13 14 27
阳性率
87 100 90
肺
Hale Waihona Puke 157413
67
87
91
总计
总结：器官特异性最好的标志物
乳腺
肺 胃肠道
GCDFP-15
TTF-1 CDX-2
胃
大肠 肝
CDX-2 + Hep
CDX-2 + CK20 Hep
8/18
26 10 0 11 60 60 60 38 0 86
20
0 95 79 3 0 0 40 25 0 10
CK之外的其它标志物
神经内分泌标记物（1）
• Chromogranin (A) – 为神经内分泌颗粒中的一种主要的可溶性蛋白 – 对于含有大量神经内分泌颗粒的肿瘤高度敏感 – 对于含有少量神经内分泌颗粒的肿瘤敏感性较差， 如燕麦细胞癌 – 基本无假阳性
Keratin
• Keratin至少有20个亚型，命名为CK1-20;
• 根据分子量分为高分子和低分子CK；
• 根据等电点分为酸性和碱性CK; • 根据中间丝的类型分为 I型和II型。
• 低分子/酸性/ I 型；高分子/碱性/ II 型
CK亚型在各种组织中的表达
上皮类型
单层上皮
Type II 8 7 Type I 18 19
• PR（Progesterone receptor）
–与ER相似
–PR的器官特异性较差
• 雄激素受体（Testosterone receptor）
几种常见癌中免疫组化的表达特点
肺癌
• 鳞癌：HMK CK (CK34bE12, CK5/6, CK14) ，P63+ • 腺癌：Surfactant，CEA+，P63-/+ – 非黏液型：CK7+/CK20-，MUC1+，TTF-1+ – 黏液型：CK7+/CK20+，CDX-2+，MUC2+，TTF-1• 小细胞癌： Syn+/CgA+，TTF-1+，surfactant-，
肾癌
CD10 RCC CK7 AMACR c-kit CK34βE12
透明细胞癌
乳头状癌 嫌色细胞癌 嗜酸细胞癌 集合管癌
+
+ +/-
+
+ -
+ + +
+ -
+ + -
+
膀胱癌
• 尿路上皮癌
CK7+，CK20-/+，CK5/6+，p63+，uroplakin+
• 腺癌
–转移性: b-catenin(nuc+)，CK7-/CK20+，MUC2+，CDX-2+
%
73 10 26 75 31 100 94
甲状腺
乳头癌 滤泡癌 Hurthle 细胞癌 岛状癌 髓样癌 间变癌 腺瘤
%
96 100 20 100 99 0 87
其它小细胞癌
肺外小细胞癌 Merkel细胞癌 40 0
其它腺癌
乳腺、卵巢、子宫内膜、结肠、 肾、前列腺均为0表达
P63
P63在各类型肺癌中的表达
– 原发性： CK7+/CK20+/血栓调节素（thrombomodulin）+ –脐尿管癌：CK20+，MUC2+，CDX-2+ – 中肾癌：CK7+/CK20+，CD10+，AMACR+
小肠与大肠腺癌的对比
抗体
CK7+/CK20CK7-/CK20+ CK7+/CK20+
小肠癌
33% 0 67%
• 鳞癌
• 小细胞癌 • 大细胞神经内分泌癌 • 大细胞癌 • 腺癌 • 非典型类癌 • 典型类癌
97%
77% 50% 37% 30% 31% 2%
Hepatocyte 在上皮性肿瘤的表达
器官
肝
肿瘤类型
HCC
Total cases 96
Positive cases 88
Percent % 92
肝、肺、胃肠道
• 病理免疫组化：
MCUO: 是否为真正的癌?
• CK系列, Vimentin，S-100，LCA 等 注意：广谱CK最好！ • 有些癌CK可能阴性：
– 肾上腺皮质癌 – 甲状腺未分化癌 – 肉瘤样癌
• 非癌，但表达CK的肿瘤：
– – – –
恶性黑色素瘤 免疫母/间变性淋巴瘤，骨髓瘤 上皮样肉瘤，滑膜肉瘤，横纹肌样瘤 平滑肌和血管源性肿瘤
大肠癌
0% 91% 1%
CK7-/CK20AMACR
0
5%
1%
62%
间皮瘤与肺癌的鉴别
间皮瘤 肺癌
间皮瘤与卵巢浆液性癌
D2-40 Meso 93% Serous Ca 13%
Podoplanin
Calretinin Keratin 5/6 Thrombomodulin MOC-31 Ber-EP4 B72.3
免疫组化在来源未明的 转移癌鉴别诊断中的应用
中山大学附属第一医院病理科
薛
玲
转移癌鉴别的意义：
• 病人想知道 • 临床医生想知道
• 治疗的需要：
一些特殊部位的肿瘤需特殊治疗，如乳腺癌等
如何寻找原发灶？
• 临床路径：
全身CT,MRI,消化道钡餐，乳腺造影（mammography）,
腹部B超，胸部 x-rays,骨扫描,纤支镜,胃镜和肠镜
睾丸生殖细胞肿瘤
OCT4 CD117 CD30 Pan-CK HCG 精原细胞瘤 AFP -
+
+
-
+
-
-
-/+
+/-
胚胎性癌
卵黄囊瘤 绒癌
+
-
+
+ +
+/+/dif+
-/+
+
-
生殖细胞肿瘤?
• • • • • Keratin PLAP EMA OCT4 CD30
•
•
HCG
AFP
CDX-2 的表达
分 布
大多数分泌上皮和实质性细胞 管道上皮 (如胆管、胰管、肾集 合管）和胃肠道上皮
20
胃肠道上皮, 皮肤Merkel 细胞 口腔黏膜味蕾细胞
鳞状上皮的基底细胞，腺上皮， 肌上皮细胞, 间皮细胞 角化性鳞状上皮细胞 非角化性复层鳞状上皮细胞
复层鳞状上皮
5
14 15
8
18,19
CK的表达特点
• CK 在正常组织和其来源的肿瘤中的表达一致，这有
胃 肺 卵巢 肺、胃肠道
神经内分泌癌
腺癌 腺癌 腺癌 类癌
9
13 21 24 10
4
4 5 4 1
44
31 24 16 10
胰腺
肝
腺癌
胆管癌
13
14
1
1
8
7
在其它器官（如大肠、肾、甲状腺等）各种肿瘤中表达几乎为0
受体分子
• ER（Estrogen receptor）
–阳性判断：>10%肿瘤细胞阳性 – 乳腺癌及某些生殖系统肿瘤阳性
85%
75%
15%