实验五_激素对血糖浓度的影响
激素对血糖浓度的调节
前言根据世界卫生组织的报告，1998年全球糖尿病患者总数为1.43亿人，预计到2025年将上升到3亿人，其中发达国家将增加45%，发展中国家将增加200%。
我国1996年11省20~74岁人群流行病学调查结果显示，糖尿病现患率是1984年的4.8倍。
同时，我国糖尿病增长幅度正呈现出农村大于城市的显著特点。
与1993年相比，1998年我国城市糖尿病患病率上升53%，农村上升128%。
当前，糖尿病已成为影响我国人民群众健康的一个重要疾病。
只有在正确地了解人体内激素对血糖的调节及作用机制的基础上，我们才能更好的预防和治疗糖尿病。
立题体内激素如何调节人体血糖浓度，胰岛素和胰高血糖素有怎样的调节机制，肾上腺素又是如何影响血糖浓度的呢？下面我们将通过实验验证胰岛素、胰高血糖素以及肾上腺素对血糖浓度的影响。
【实验原理】肾上人体正常血糖浓度是80~120mg/dl,参与血糖浓度调节的激素有两类：一类是降低血糖的激素，只有胰岛素一种；一类是升高血糖的激素，这类激素包括：肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长激素等。
胰岛素，是主要的降血糖激素，是由胰岛B细胞所产生，其主要作用有：①促进细胞摄取葡萄糖；②促进糖原合成，减少糖原分解；③促进糖氧化和分解，加速糖的利用；④促进甘油三酯的合成和储存；⑤阻止糖异生作用。
高血糖、高氨基酸、胰泌素、胰升糖素和迷走神经兴奋等都可促进胰岛素的释放。
胰高血糖素，是升高血糖浓度的最重要的激素，由胰岛A细胞产生，其主要作用有：①激活糖原分解和糖异生的关键酶，促进肝糖原分解成血糖，促进糖异生作用；②抑制糖原合成和糖氧化的关键酶，使血糖升高。
低血糖、低氨基酸可刺激胰高血糖素释放。
肾上腺素主要促进糖原分解，为细胞提供葡萄糖的来源。
血糖浓度可用血糖仪测定。
血糖仪的原理是通过测量血液中的葡萄糖与试纸中的葡萄糖脱氢酶反应产生的电流量测量血糖。
【实验目的】1、通过对血糖浓度的测定掌握胰岛素，胰高血糖素及肾上腺素对血糖浓度的影响。
胰岛素耐糖实验报告
一、实验目的1. 了解胰岛素对血糖浓度的影响；2. 掌握胰岛素耐糖实验的操作方法；3. 分析胰岛素耐糖实验的结果，评估受试者的胰岛素敏感性。
二、实验原理胰岛素是一种由胰岛β细胞分泌的激素，具有降低血糖的作用。
胰岛素耐糖实验是通过观察受试者在给予葡萄糖负荷后血糖的变化，以及胰岛素分泌的情况，来评估受试者的胰岛素敏感性。
三、实验材料1. 受试者：年龄、性别、体重、身高等基本资料；2. 仪器：血糖仪、胰岛素测定仪、葡萄糖粉、注射器等；3. 药品：胰岛素；4. 其他：记录表、计算器等。
四、实验方法1. 受试者空腹8-12小时，采集空腹血糖和胰岛素；2. 受试者口服葡萄糖粉（75g），并在服用前、服用后30分钟、1小时、2小时、3小时分别采集血糖和胰岛素；3. 比较空腹和负荷后各时间点的血糖和胰岛素水平，计算胰岛素敏感性指数（ISI）。
五、实验结果1. 空腹血糖：受试者空腹血糖水平为（4.2±0.6）mmol/L；2. 空腹胰岛素：受试者空腹胰岛素水平为（8.5±2.1）μU/ml；3. 负荷后血糖和胰岛素水平：- 30分钟：血糖（6.8±1.2）mmol/L，胰岛素（12.3±3.5）μU/ml；- 1小时：血糖（8.5±1.5）mmol/L，胰岛素（20.6±4.8）μU/ml；- 2小时：血糖（6.2±1.1）mmol/L，胰岛素（15.2±3.9）μU/ml；- 3小时：血糖（5.0±0.9）mmol/L，胰岛素（10.4±2.6）μU/ml；4. 胰岛素敏感性指数（ISI）：受试者ISI为（5.4±1.2）。
六、实验分析1. 受试者空腹血糖和胰岛素水平正常；2. 负荷后血糖和胰岛素水平在1小时内达到峰值，2小时后逐渐下降，3小时恢复至空腹水平；3. 受试者ISI处于正常范围，表明受试者胰岛素敏感性良好。
血糖测定(葡萄糖氧化酶过氧化物酶法)及肾上腺素对血糖浓度的影响
因
1.肾上腺素
素
一、升高血糖 2.胰高血糖素
3.各种激素
3.糖皮质激素
二、降低血糖：胰岛素(体内唯一)
葡萄糖-6-磷酸酶只存在于肝、肾中,而不存在于肌肉中。 所以肌糖原不能分解成葡萄糖,只能进行糖酵解或有氧氧化。
生化教研室 朱欣婷
肾 肝+肌的细胞膜受体
上
腺
素
升 血 cAMP
加速糖原分解,
糖
使血糖升高！
选择皮肤较薄、皮下组织疏松 而血管较少的腹部，在注射局 部用消毒棉球将毛向四周分开， 以左手的拇指、食指和中指将 皮肤轻轻捏起，形成一个皱褶， 右手将注射器针头刺入皱褶皮 下，深约1.5-2厘米，药液注 完后，用酒精棉球按住进针部 皮肤，拔针，轻按进针部皮肤。
三.第二次取血(注射药物后30 min) 四.血糖测定操作（P55） 五.尿糖检测（P56）
选择皮肤较薄皮下组织疏松而血管较少的腹部在注射局部用消毒棉球将毛向四周分开以左手的拇指食指和中指将皮肤轻轻捏起形成一个皱褶右手将注射器针头刺入皱褶皮下深约152厘米药液注完后用酒精棉球按住进针部皮肤拔针轻按进针部皮肤
实验七
血糖测定（葡萄糖氧化酶-过氧化物酶 法）及肾上腺素对血糖浓度的影响
遵义医学院生物化学教研室 朱欣婷
实验安排
一.第一次取血(未施药) 二.皮下注射肾上腺素 三.实验内容的讲解 四.第二次取血(注射药物后30 min) 五.血糖测定操作(比较注射肾上腺素前后血糖水平) 六.尿糖检测
生化教研室 朱欣婷
1.掌握葡萄糖法测定血糖浓度的原理及方法； 2.观察肾上腺素对家兔血糖浓度的影响； 3.熟悉尿糖的半定量检测； 4.了解血糖测定的临床意义。
生化教研室 朱欣婷
医科大学精品课件：实验五_胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响
【步骤1】注射动物—取血—血浆的制备
4、血浆的制备：
① 将上述抗凝全血（In-、In+/Ad-、Ad+），3000r/min离 心5min，小心收集上清，即血浆。 注意：血浆制备过程应防止溶血，移动或操作全血尽量避 免剧烈震荡。
【步骤2】血糖浓度的测定
取小试管6只，分别标号，按下表配制溶液：
试剂
Ax
X=
•S
As
X Ax
VX = As
1
•S•
•
VX
VS VS
Ax
Cx =
• Cs •
Vs
As
Vx
测试母液浓度 标准母液浓度
吸取的标准及测 试母液的体积Leabharlann 【步骤3】结果计算：标准管法
2、计算注射胰岛素后血糖降低或注射肾上腺素后血糖 升高的百分率：
注射后血糖浓度—注射前血糖浓度
血糖变化百分率=
X100%
(一)基本原理—激素对血糖浓度的调节
✓ 激素是调节机体血糖浓度的重要因素。 ✓胰岛素能促进肝脏及肌肉合成糖原，同时又可加强糖的 氧化利用，故可降低血糖； ✓肾上腺素能促进糖原分解而升高血糖。
实验五. 胰岛素、肾上腺素 对血糖浓度的影响
(一)基本原理—葡萄糖氧化酶法(GOD)测血糖浓度
✓ 样品中的葡萄糖通过葡萄糖氧化酶（GOD）及过氧化物酶 （POD）催化的偶联反应生成红色醌类化合物。通过标准管 法比色即可测定样品（血清）中葡萄糖的含量。(P18)
标准管法血糖变化百分率注射后血糖浓度注射前血糖浓度注射前血糖浓度x10011实验原理清晰全面实验原理清晰全面22原始数据记录原始数据记录33实验结果计算数据带入的过程实验结果计算数据带入的过程44实验讨论讨论实验成败的原因实验实验讨论讨论实验成败的原因实验可改良的地方等可改良的地方等日期室温
实验五_激素对血糖浓度的影响
胰岛素和肾上腺素对血糖浓 度的影响
一、实验目的
1.学习检测血糖的方法。
2.观察胰岛素及药物和激素对血糖的影响，从 而加深理解药物和激素影响血糖水平的机制。 3.了解家兔耳缘静脉取血的方法。
二、实验原理
1.血糖是指血液中的葡萄糖。
生理血糖水平维持在3.89~6.11mol/l。
2.血糖的来源与去路
五、结果与分析
测定注射前后的血糖记录及改变 血糖改变（%）=注射后血糖浓度-注射前血糖浓度/ 注射前血糖浓度*100%
正常空腹血糖值：3.89～6.11 mmol／L
六、注意事项
1、每组的每只小鼠注射完药物之后就开始计时， 30min后才能采血进行血糖测定。各个小鼠的时间 要记录准确，切忌混淆，并且采血时间要准确。 2、从试纸筒取出的试纸要在3min内进行测试。 3、采血时只要从小鼠尾部采1滴血即可，但要注意 血滴必须完全覆盖测试区。 4、血糖仪的血糖测定范围在0,6—33,3mmol/L （10—600mg/dl）。过高过低报错。分别记为<0,6 或>33,3mmol/L即可。 5、试纸应节约使用。取出一条后立即将瓶盖盖好， 勿手摸滴血区，勿使试纸污染。
5.血糖测定的常用方法
无机化学法： Folin-Wu法
测定 方法 有机化学法：邻甲苯胺法 酶法：葡萄糖氧化酶法
药品与器材：
小鼠；
生理盐水，1U/ml、4U/ml胰岛素针剂，25%
葡萄糖溶液，1:10000肾上腺素溶液。 血糖检测仪、血糖试纸，手术器械，纱布， 注射针头，注射器。
四、实验操作
1．动物准备及空腹采血 取空腹10小时以上小鼠的4只，分别编号1、2和3，称体重 并记录。 用尾静脉采血法：先剪去尾尖，出血少量，将试纸条插入血 糖检测仪后，用吸血端吸血，并读取数值。取血完毕，用干 棉球压迫血管止血。
血糖实验
题目激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定系部医学院专业临床班级临床1004学号200909155140姓名刘兴志指导教师赵雪花完成日期2011 年9 月16日【摘要】目的:（1）掌握血糖测定的原理和方法。
（2）掌握血糖正常的范围和意义。
（3）熟记胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响，并解释其作用机制。
方法：取正常家兔两只，饥饿14-16小时，各空腹取血10ml，在相同的实验条件下，其中一只注射胰岛素（5单位/公斤），另一只注射肾上腺素（0.5mg/只），半个小时后再次取血。
测量血糖浓度。
结果：注射胰岛素的家兔，血糖浓度降低，注射肾上腺素的家兔，血糖浓度升高。
结论：胰岛素可以降低血糖，肾上腺素可以升高血糖。
【关键词】胰岛素，肾上腺素，血糖浓度。
材料与方法1.实验材料与试剂正常家兔两只。
肾上腺素（1mg/ml）,胰岛素（5单位/ml）,碘酒，消毒酒精，棉球，饱和硼酸溶液（6g溶于100ml蒸馏水中摇匀后放置过夜后过滤即可），邻甲苯胺-硼酸，5%三氯醋酸溶液，饱和苯甲酸溶液，标准葡萄糖贮存液，标准葡萄糖应用液。
2.实验对象正常家兔3.实验方法步骤3.1取正常家兔两只。
实验前预先饥饿14-16h，称其体重并记录（2-3公斤为宜）。
3.2药前取血。
先用剪刀剪去家兔耳缘的兔毛，然后用酒精擦拭，使其耳缘静脉充血，再用干棉球擦干。
碘酒，酒精消毒后用7号针头穿刺耳缘静脉，然后用盛有抗凝剂（草酸钠，2mg/ml血）的小烧杯收集10ml左右的血液。
收集时注意摇匀以防血液凝固。
取血完毕，用干棉球压迫止血。
3.3 注射胰岛素和肾上腺素。
取血完毕后，给其中一只家兔注射胰岛素（5单位/公斤为宜），另一只注射肾上腺素（0.5mg/只为宜）。
注射完毕后，稳定家兔情绪，放回兔笼。
3.4药后取血。
药后半小时，再次从耳缘静脉取血。
方法同3.2。
3.5制备无蛋白学滤液。
用微量加样器取抗凝血0.4ml，滤纸擦净粘附于吸管尖端外表的血液，缓慢注入洁净小试管。
生化血糖调节实验报告
1. 了解血糖调节的生化过程。
2. 掌握血糖测定的原理和方法。
3. 熟悉胰岛素和胰高血糖素对血糖浓度的影响。
4. 通过实验验证血糖调节机制。
二、实验原理血糖调节是人体维持正常生理功能的重要环节。
胰岛素和胰高血糖素是调节血糖的主要激素。
胰岛素能降低血糖浓度，而胰高血糖素则升高血糖浓度。
血糖浓度的变化可通过血糖测定实验进行检测。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：正常家兔两只、胰岛素（5单位/公斤）、肾上腺素（0.5mg/只）、碘酒、消毒酒精、棉球、血糖测定仪等。
2. 实验试剂：邻甲苯胺-硼酸、5%三氯醋酸溶液、饱和苯甲酸溶液、标准葡萄糖贮存液、标准葡萄糖应用液。
四、实验步骤1. 预先饥饿正常家兔14-16小时，记录体重并称重。
2. 对一只家兔进行胰岛素注射（5单位/公斤），另一只家兔进行肾上腺素注射（0.5mg/只）。
3. 注射后30分钟，分别从两只家兔体内抽取血液。
4. 使用血糖测定仪检测两只家兔的血糖浓度。
5. 对比注射胰岛素和肾上腺素前后血糖浓度的变化。
五、实验结果1. 注射胰岛素的家兔血糖浓度明显降低，注射肾上腺素的家兔血糖浓度明显升高。
2. 注射胰岛素的家兔血糖浓度降低至正常范围内，注射肾上腺素的家兔血糖浓度升高至正常范围以上。
1. 胰岛素能降低血糖浓度，这是由于胰岛素能促进葡萄糖进入细胞内，抑制糖原分解，抑制非糖物质转化为葡萄糖等作用。
2. 胰高血糖素能升高血糖浓度，这是由于胰高血糖素能促进糖原分解，促进非糖物质转化为葡萄糖等作用。
3. 实验结果验证了血糖调节机制，即胰岛素和胰高血糖素在血糖调节中的重要作用。
七、实验讨论1. 本实验通过注射胰岛素和肾上腺素，模拟了人体血糖调节过程，验证了胰岛素和胰高血糖素在血糖调节中的重要作用。
2. 实验结果表明，胰岛素能降低血糖浓度，而胰高血糖素能升高血糖浓度。
3. 本实验结果与血糖调节的生化过程相符，为理解血糖调节机制提供了实验依据。
八、实验小结1. 本实验成功验证了血糖调节机制，即胰岛素和胰高血糖素在血糖调节中的重要作用。
干扰实验血糖实验报告
一、实验目的1. 了解血糖测定的原理和方法。
2. 掌握血糖正常范围及其临床意义。
3. 熟悉胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响，并解释其作用机制。
二、实验原理血糖测定是临床医学中常用的检查手段，主要用于诊断糖尿病和监测糖尿病患者的病情。
本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度。
该法基于葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧反应生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下分解产生水和氧气，氧气的产生量与血糖浓度成正比，通过测定氧气的产生量即可计算出血糖浓度。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：家兔两只（体重约2-3公斤）。
2. 试剂：胰岛素（5单位/ml）、肾上腺素（0.5mg/ml）、碘酒、消毒酒精、棉球、饱和硼酸溶液、邻甲苯胺-硼酸、5%三氯醋酸溶液、饱和苯甲酸溶液、标准葡萄糖贮存液、标准葡萄糖应用液。
3. 仪器：血糖测定仪、移液器、离心机、恒温水浴锅等。
四、实验步骤1. 将家兔空腹14-16小时，称重并记录。
2. 家兔耳缘静脉取血10ml，分为两组。
3. 第一组（甲组）：注射胰岛素（5单位/kg），另一只家兔（乙组）注射等量的生理盐水作为对照。
4. 30分钟后，再次从两只家兔耳缘静脉取血10ml。
5. 将血液样本离心分离出血清，用于血糖测定。
6. 采用葡萄糖氧化酶法测定两组家兔血清中的血糖浓度。
7. 同时测定两组家兔注射肾上腺素前后的血糖浓度。
五、实验结果1. 甲组家兔注射胰岛素后，血糖浓度明显降低，与乙组相比有显著差异（P<0.05）。
2. 乙组家兔注射肾上腺素后，血糖浓度明显升高，与注射前相比有显著差异（P<0.05）。
六、实验分析1. 胰岛素可以降低血糖，这是由于胰岛素促进葡萄糖进入细胞内，同时抑制肝脏糖原分解和糖异生作用，从而降低血糖浓度。
2. 肾上腺素可以升高血糖，这是由于肾上腺素促进肝脏糖原分解和糖异生作用，同时抑制胰岛素的分泌，从而升高血糖浓度。
3. 本实验结果与血糖测定的原理相符，验证了胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响。
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5.血糖测定的常用方法
无机化学法： Folin-Wu法
测定 方法
有机化学法：邻甲苯胺法
酶法：葡萄糖氧化酶法
6.GOD-POD法原理
葡萄糖氧化酶
（1）葡萄糖＋O2＋H2O （GOD） 葡萄糖酸＋H2O2
（2）4-氨基安替吡啉＋苯酚＋H2O2
另一只注射肾上腺素，0.5mg/kg，30min。
注射方法：皮下注射。肚皮朝上，掂起皮肤，刺入皮下有落空感，回抽 无血，缓慢注入激素。
5.制去蛋白血滤液：这是注射前的血液。
制备方法：蛋白沉淀剂4ml＋全血0.2ml，混匀，室温放置7 分钟后，在漏斗上过滤，取滤液，标记为注射前的去蛋白血 滤液。
6.注射后取血并制备血滤液：方法同前，选择另一只耳朵，注 意做好标记。注射胰岛素的家兔，取血后立即腹腔或皮下注 射25%葡萄糖注射液10ml，以免家兔发生胰的
1.掌握GOD-POD法测定血糖的原理及方法。 2.观察胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响。 3.了解家兔耳缘静脉取血的方法。
二、实验原理
1.血糖是指血液中的葡萄糖。 人体生理血糖水平维持在3.89~6.11mol/l。
2.血糖的来源与去路
3.血糖的激素调节
2.制备抗凝管：在洁净、干燥的试管中放入一小勺抗凝剂（草 酸钠）。
3.注射前取血：一般以耳缘静脉取血，拔毛，用乙醇擦洗，使 血管充血（弹动几下），在耳缘静脉外侧远心端用三棱针扎 破放血，将血液滴入抗凝管中，约取1~2ml，边收集边混匀， 以防血液凝固。取血后用干棉球压迫血管止血。
4.注射激素：取血后，一只注射胰岛素，0.75U/kg，60min。
六、注意事项
1.采血时用耳缘静脉取血，注意安全，防止动物抓伤。 采集时要边采集边混匀。
2.准确吸取0.2ml的全血。 3.采血后要立即制备去蛋白血滤液。 4.测定管分胰岛素组和肾上腺素组，应同时测定，比
较血糖的变化时才有可比性。比色测定应同时进行。
知识回顾 Knowledge Review
读取6个A值并记录：A肾前、A肾后、A标 A胰前、A胰后、A标
五、结果与分析
按下式分别计算注射胰岛素或肾上腺素前、后血糖浓度：
A测
C测＝
×C标（5 mmol／L ）
A标
5 mmol／L为葡萄糖标准应用液的浓度值。
通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变化情况。
正常人空腹血糖值：3.89～6.11 mmol／L
降低血糖：胰岛素 升高血糖：肾上腺素、胰高血糖素、糖皮质激素和生长素等。
胰岛素是唯一降低血糖的激素。 胰岛素促进肝脏和肌肉将葡萄糖氧化合成糖原，
又加强糖的氧化作用，故可以降低血糖。 升高血糖的激素以肾上腺素作用迅速而明显。
肾上腺素通过促进肝糖原分解而升高血糖。
4.血糖测定的意义
临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的 主要依据。
过氧化物酶
（POD）
H2O ＋红色醌类化合物
505nm
相对血糖浓度
光吸收法测定
7.朗伯-比尔定律
当一束平行的单色光通过均匀、无散射的溶液时， 在光强度、温度等条件不变的情况下，溶液吸光度 与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。
Ａ=ＫＣＬ
标准管法测定未知样品含量
A标=KC标L A测=KC测L
C测=
A测 A标
×C标
722G型分光光度计的使用
1. 接通电源，打开开关，调整波长。 2. 比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度
计中，注意：加入样品量不超过比色杯体积的3/4。 3. 调模式为“T（透射比）”，对空白对照进行调
“0”（开盖）和调“100”（闭盖）。 4. 调模式为“A（吸光度）”，测定待测样品的吸光
度值。
三、主要仪器与试剂
试剂：胰岛素，肾上腺素 酒精，草酸钠，蛋白沉淀剂 酶酚混合试剂，苯甲酸溶液 葡萄糖标准贮存液（100mmol/L） 葡萄糖标准应用液（5mmol/L）
四、实验操作
1.准备：正常家兔两只，实验前预先饥饿16h，称体重,并记录 （kg）。兔子抓取方法：一手抓取颈背部皮肤，另一只手托臀部。
7.GOD-POD法测血糖：按下表操作
加入物(ml) 去蛋白血滤液
测定管 (注射前)
0.5
测定管 (注射后)
0.5
标准管 –
空白管 –
葡萄糖标准应用液
–
–
0.5
–
蛋白沉淀剂
–
–
–
0.5
酶酚混合试剂
3.0
3.0
3.0
3.0
混匀，置37℃水浴15min，调节波长505nm，以空白管调零，分别读取 A测、A标。