利用小鼠D-半乳糖衰老模型
结合基因芯片和生物信息学工具构建D-半乳糖致衰老小鼠模型的分子
ＤＯＩ ：１ ０ ． １ ６ ７ ８ ３ ／ ｊ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． ｎ ｗｎ ｕ ｚ ． ２ ０ １ ６ ． ０ ６ ． ０ １ ７
结合 基 因芯 片 和生 物信 息学 工 具构 建 Ｄ 一 半乳糖致衰老小 鼠模 型的分子调控 网络
王 晶 。 ，赵 翊 ，王 勇 ， 陈 彻 ，李 海龙 。
减 少 ；差 异 表 达 的 基 因有 ２ ３ ２个 （ 变化 倍 数 ≥ ２ ） ；Ｇ Ｏ 和 信 号 通路 分析 显 示 差异 表 达 基 因主 要 参 与 生 物 节律 、药 物代 谢 和Ｐ Ｐ ＡＲ信 号 通路 等 ，其 构 成 的 分 子 调 控 网 络 ， 主要 有 四 个 核 心 调 控 分 子 ， 即 Ａｒ ｎ ｔ ｌ 、Ｃ ｉ ｄ ｅ ａ 、Ｈｓ ｐ ａ ｌ ｂ和 Ａ彻： 口 １ ３ ．
西
９ ２
北
师 范 大 学 学
报 （ 自然 科 学 版 ）
第５ ２卷 ２ ０ １ ６年 第 ６期
Ｖ ｏ１ ． ５２ ２ ０１ ６ Ｎｏ． ６
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｎｏ ｒ ｔ ｈ ｗｅ ｓ ｔ Ｎｏｒ ｍａ ｌ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ （ Ｎａ ｔ ｕ ｒ ａ １ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ）
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黄芪对D-半乳糖致小鼠衰老模型作用的实验研究
黄芪对D-半乳糖致小鼠衰老模型作用的实验研究郭丽红; 吴景东; 魏锦富【期刊名称】《中国美容医学》【年(卷),期】2012(021)012【摘要】目的:观察黄芪对D-半乳糖致衰老小鼠超氧化物歧化酶(SOD)的活性及羟脯氨酸(HYP)含量的影响,以探讨其延缓衰老的机理。
方法:将小鼠分为4组,分别为空白对照组、衰老模型组、黄芪低剂量组和黄芪高剂量组。
除空白对照组外其余各组采用皮下连续注射D-半乳糖40天建立小鼠衰老模型,各用药组在造模同时给予相应记录剂量的药物,并测定皮肤组织中SOD、HYP的变化。
结果:与空白对照组比较,衰老模型组皮肤组织中SOD活性降低(P<0.05),HYP含量减少(P<0.05);黄芪组皮肤组织中SOD活性明显增强(P<0.05),HYP含量增多(P<0.05)。
结论:黄芪具有抗衰老作用。
【总页数】2页(P2313-2314)【作者】郭丽红; 吴景东; 魏锦富【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】Q591.3【相关文献】1.大豆异黄酮对D-半乳糖致衰老模型小鼠抗氧化系统作用的实验研究 [J], 梁纪伟;田庆伟;王永明;马超;代汉慧2.黄芪对D-半乳糖致小鼠衰老模型作用的实验研究 [J], 郭丽红;吴景东;魏锦富3.赖氨大黄酸对D-半乳糖致衰老模型小鼠的肾脏保护作用及其作用机制 [J], 魏洁;李开济;赵毓芳;骆广玲;魏静波;闫丰;吕翠平;甄永占4.金水六君煎对D-半乳糖致小鼠皮肤衰老模型作用的实验研究 [J], 彭圆;王平;富青;田代志;杨莉;严进5.二至丸对D-半乳糖致衰老模型小鼠NO、SOD影响的实验研究 [J], 王明娟;任慧玲;任汉阳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
罗汉果甜苷对D-半乳糖衰老模型小鼠作用的实验研究
罗汉果甜苷对D-半乳糖衰老模型小鼠作用的实验研究摘要】目的：通过罗汉果甜苷（Mog）对D-半乳糖衰老模型小鼠作用的实验研究，探讨其延缓衰老作用可能的作用机理。
方法：60只小鼠随机平均分成6组：正常对照组、模型对照组、阳性对照组、Mog高、中、低三个剂量组，除正常对照组外，其余小鼠采用D-半乳糖（0.05g/kg）造模。
各给药组连续给药6周后测定小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和脑组织中SOD、MDA的含量。
结果：与正常组比较，模型组小鼠SOD的含量降低，MDA的含量升高，差异具有显著性（P﹤0.01）；与模型组比较，Mog各剂量组小鼠脑组织和血清中SOD含量升高，MDA含量降低，差异均具有显著性（P﹤0.01或P﹤0.05）。
结论：罗汉果甜苷对D-半乳糖衰老模型小鼠有延缓其衰老的作用。
【关键词】罗汉果甜苷 D-半乳糖抗衰老 SOD MDA【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）10-0028-02目前，我国已经进入老年化社会，老年人已达到1亿3千万人，专家预测到2015年，我国60岁以上的人口将达到2.8亿。
人口衰老与老年疾病发生有直接相关性，大多数老年人同时患有一种以上的疾病，由于老年病的迁延性和难愈性，使其对医学资源连续消耗，庞大的医疗费用已经成为国家、社会和家庭的沉重负担[1]。
如何解决这些老年人包括一部分中老年人受衰老的困扰，是一个摆在我们面前的十分严峻的课题。
一直以来，寻找延缓衰老的方法和药物，具有极其重要的意义。
罗汉果是广西特产中药，性凉、味甘、无毒，归肺、大肠经，有润肺止咳、凉血滑肠之功效，常用于治疗肺火燥咳、咽痛失音、肠燥便秘等。
现代药学研究发现其有止咳祛痰、保肝、降血糖、增强免疫、抗癌等多种药理作用[2]。
但罗汉果抗衰老的作用还未见有报道，本实验开展对罗汉果甜苷抗衰老的研究可望提高罗汉果的综合利用价值。
1 材料与方法1.1试剂超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒，南京建成生物工程研究所，批号：20080708；丙二醛（MDA）测定试剂盒，南京建成生物工程研究所，批号：20080708。
D-半乳糖诱导衰老小鼠模型的建立与评价
Qin HB, Yang ZY, Fan YJ, Zhu Q. Establishment and evaluation of aging models induced by D-galactose in mice.Zhongguo
Zuzhi Gongcheng Yanjiu yu Linchuang Kangfu 2009;13(7): 1275-1278(China)
中国组织工程研究与临床康复 第 13 卷 第 7 期 2009–02–12 出版 Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research February 12, 2009 Vol.13, No.7
基础医学
D-半乳糖诱导衰老小鼠模型的建立与评价
通讯作者：朱 清，博士，讲师， 南通大学医学院 药理学教研室，江 苏省南通市 226001 zhuqing7883@
中图分类号:R332 文献标识码:B 文章编号:1673-8225 (2009)07-01275-04
收稿日期：2008-09-20 修回日期：2008-12-06 (54200809190025/ W·Z)
ISSN 1673-8225 CN 21-1539/R CODEN: ZLKHAH
1275
秦红兵，等. D-半乳糖诱导衰老小鼠模型的建立与评价
0 引言
D-半乳糖衰老动物模型是由国内学者龚国清等在 1991年根据衰老的代谢紊乱学说而构建的。与其他几种 衰老动物模型如SAMP系小鼠衰老模型、臭氧损伤衰老 模型、去胸腺衰老模型、自然衰老模型等相比，该模型 简便易行，价格低廉，结果稳定，因而广泛应用于药物 抗衰老的研究之中[1-2]。但是D-半乳糖诱导衰老模型在 行为、免疫等方面的衰老研究中的应用，文献相关报道 并不完全一致[3-5]。实验使用D-半乳糖建立亚急性衰老 小ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ模型，并对其进行行为学、生化以及免疫等方面的 评价。
基于D-半乳糖致衰老鼠模型的抗衰老药物研究进展
基于D-半乳糖致衰老鼠模型的抗衰老药物研究进展
曾立;向荣
【期刊名称】《邵阳学院学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2018(015)006
【摘要】随着人口老龄化以及日益增长的社会竞争带来的压力,与机体功能衰退相关的衰老性疾病越来越严重地影响人们的生活质量.D-半乳糖致衰老鼠模型的生化指标和生理指标均与自然衰老相似,在国内外抗衰老研究中的使用频率逐渐增加.文中介绍了D-半乳糖致老鼠衰老的机制,总结了基于该模型的相关抗衰老药物研究成果,展望了抗衰老研究的发展方向,为防治衰老,实现全民健康衰老提供参考.
【总页数】9页(P108-116)
【作者】曾立;向荣
【作者单位】邵阳学院药学院,湖南邵阳,422000;邵阳学院附属第二医院放射科,湖南邵阳,422000
【正文语种】中文
【中图分类】R285;TS202.3
【相关文献】
1.马齿苋水提液对D-半乳糖致衰模型小鼠心肌线粒体的保护作用 [J], 王丹;魏晓东;欧芹;杨晶;白大芳
2.神健胶囊对D-半乳糖致衰模型小鼠的作用 [J], 刘汇波;李斌;丰艳
3.左归饮中总多糖对D-半乳糖致衰模型小鼠体内自由基代谢的影响 [J], 杨书彬; 裴晨晨; 周寅; 祁煊
4.益智合剂对D-半乳糖致衰模型大鼠学习记忆作用实验研究 [J], 邱南;朱振铎;田梅;崔云竹;许会彬;于丽华;赵书平
5.山茱萸提取部位对D-半乳糖致衰模型小鼠骨髓细胞脱氧核糖核酸的影响 [J], 王明艳;江励华;董菊;许冬青;杜逸芳;俞晓忆;杜伟锋;蔡宝昌
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2024年注射D―半乳糖致大鼠衰老效应的评价
2024年注射D―半乳糖致大鼠衰老效应的评价D-半乳糖是一种广泛应用于动物衰老研究的试剂，通过注射D-半乳糖可以诱导实验动物产生类似自然衰老的生理和生化变化。
在本研究中，我们采用了连续注射D-半乳糖的方法，以制造大鼠衰老模型。
具体方法如下：首先，选择健康成年大鼠作为实验对象，并将其随机分为实验组和对照组。
实验组大鼠每天接受一定量的D-半乳糖溶液注射，而对照组则注射等量的生理盐水。
注射时间持续数周至数月不等，以便充分诱导衰老效应。
在注射过程中，我们严格控制了注射剂量和频率，以确保实验结果的可靠性和可重复性。
同时，我们还密切观察了大鼠的生长状况、体重变化以及行为表现，以便及时发现并处理可能出现的异常情况。
二、大鼠衰老指标评估为了评估D-半乳糖注射对大鼠衰老的影响，我们选取了一系列衰老指标进行测定。
这些指标包括体重、毛发状况、皮肤弹性、肌肉力量、运动能力、记忆力和学习能力等。
通过定期测量大鼠的体重，我们发现实验组大鼠的体重增长速度明显减缓，甚至出现了体重下降的情况。
此外，实验组大鼠的毛发变得稀疏、干燥且失去光泽，皮肤弹性也显著下降。
这些外观上的变化表明D-半乳糖注射对大鼠的衰老产生了明显的影响。
在评估肌肉力量和运动能力方面，我们采用了抓握力测试和跑步机测试等方法。
结果显示，实验组大鼠的抓握力和运动能力均较对照组明显降低，表明其肌肉力量和运动能力受到了损害。
在记忆力和学习能力方面，我们使用了迷宫测试和条件性反射等方法进行测定。
实验组大鼠在迷宫测试中的表现较差，需要更长的时间才能完成任务；而在条件性反射测试中，实验组大鼠的反应速度和准确性也低于对照组。
这些结果表明D-半乳糖注射对大鼠的神经系统功能产生了负面影响。
三、组织病理学检查为了更深入地了解D-半乳糖注射对大鼠衰老的影响，我们进行了组织病理学检查。
通过采集大鼠的肝脏、肾脏、心脏和脑组织等样本，我们观察了这些器官的组织结构和细胞形态变化。
结果显示，实验组大鼠的肝脏和肾脏出现了明显的病理变化，如肝细胞脂肪变性、肾小球硬化等。
D-半乳糖致衰老小鼠模型的实验研究
D-半乳糖致衰老小鼠模型的实验研究鞠文博1，于春艳1，陈建光2【摘要】摘要：目的探讨应用D-半乳糖制作小鼠衰老模型，并进行指标检测.方法D-半乳糖连续皮下注射42 d制作小鼠衰老模型，同时进行体质量变化测量、行为学测试和形态学衰老指标的测定.结果与正常对照组相比，造模4周后，D-半乳糖致衰老小鼠体质量显著降低(P<0.01)；D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力减弱，水迷宫探索路径长度、搜台潜伏期均显著延长(P<0.01)；形态学观察显示各器官组织结构出现衰老改变.结论D-半乳糖可以成功制作小鼠衰老模型.【期刊名称】北华大学学报（自然科学版）【年(卷),期】2015(000)002【总页数】4【关键词】D-半乳糖；衰老；行为学检测；形态学检测老龄人口的增多促使人们更加关注衰老的研究，脑衰老是人衰老的最明显表现.脑衰老是一个非常复杂的过程，导致脑结构与功能的改变，是由多种因素引起的，学习和记忆能力的减退是其最重要的表现之一[1].D-半乳糖是一种机体内正常的营养成分，能够在正常机体代谢中转变为葡萄糖，从而参与葡萄糖代谢，如果摄入过量则会导致代谢紊乱.在半乳糖氧化酶作用下，D-半乳糖转化成醛糖和过氧化氢，从而产生大量的超氧化阴离子自由基，使多种生物大分子氧化损伤，对基因的表达和调节系统产生影响，导致细胞转录水平降低而引起衰老改变[2].研究显示：连续在大鼠和小鼠等哺乳动物身上注射D-半乳糖(D-gal)1个月即可造成动物体内糖代谢发生紊乱，导致多种组织细胞出现类似衰老的变化[3-4].因此，应用D-半乳糖建立动物的衰老模型可广泛地应用在衰老机制的研究和抗衰老药物的筛选中.本课题组应用D-半乳糖连续给药6周，造成小鼠衰老模型，通过小鼠体质量的变化、行为学的观测以及组织形态学改变等方面来系统地研究D-半乳糖衰老模型，从而为科学、合理地使用动物衰老模型进行药物抗衰老实验提供依据.1 材料与方法昆明小鼠购自吉林大学实验动物中心，许可证号：SCXK-(吉)2008-005.小鼠适应性饲养1周，按体质量随机分为两组：D-半乳糖模型组和正常对照组，每组12只，雌雄各半，按6只/笼饲养，自由饮食.D-半乳糖模型组小鼠应用5%的D-半乳糖100 mg/(kg·d)从小鼠颈背部皮下注射；正常对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水，给药1次/d，共给药6周.2 观察指标2.1 体质量变化测量实验开始、实验中和实验结束前分别称量每只小鼠的体质量，观察实验小鼠体质量的变化及小鼠外观的变化.2.2 行为学测试第6周造模结束后对各组小鼠进行行为学测试[6-8]，包括Morris水迷宫法记忆能力测试和穿梭箱法学习记忆能力测试.2.2.1 水迷宫法测试小鼠的学习记忆能力实验第6周进行记忆能力测试[9-10]，水迷宫水池高60 cm，直径110 cm，站台直径8.0 cm，将水迷宫等分成4个分区，每个分区壁上标有东、南、西、北四个入水点.迷宫上方有一摄像机，与计算机相连接，可利用计算机软件对实验小鼠活动进行全程跟踪摄录，能够显示整个活动轨迹，记录小鼠找到站台所需的时间表示小鼠的学习记忆能力.每日将动物头朝池壁按东、南、西、北4个入水点分别放入水池，将站台置于某一分区的中央，实验过程站台位置保持不变.电脑系统自动记录小鼠从入水点到达站台所需时间和摄录在这段时间内的游泳路程，以小鼠找到平台所需时间作为学习和记忆成绩.若在设定时间内小鼠未找到站台，计算机停止跟踪，每次实验以120 s为限.训练中如果小鼠在极限时间120 s内找到站台，允许小鼠在站台上停留20 s，若小鼠未找到站台，实验人员将小鼠放在站台上停留20 s.20 s后将其从平台上拿下，休息1 min后再次开始训练.一般正常动物经5～6个训练日可学会以最快、最佳的轨迹找到平台的正确位置.实验在隔音安静的房间内进行，水温控制在(22±0.5)℃.2.2.2 穿梭箱法测试小鼠的学习记忆能力BA-200避暗仪是利用鼠类的嗜暗习性而设计的，以光、电击的联合刺激使实验动物产生由被动回避转为主动回避的条件反射[11].记录此条件反射建立过程中的主动回避反应指标，从而反映实验小鼠的学习能力、记忆时间的变化.实验第42天开始，每天练习1次，共连续练习3 d，在第4天进行正式测试，记录数据包括小鼠遭受电击次数，遭受电击的总时间和逃避潜伏时间.系统参数设为20次为一个循环次数，间隔时间5 s，电击时间10 s，暗示时间5 s.2.3 病理切片观察在完成MT-200水迷宫和穿梭箱法学习记忆能力测试后，应用2%戊巴比妥钠溶液40 mg/kg腹腔注射麻醉小鼠后，取脑组织、肝脏等重要器官，10%甲醛固定，常规脱水包埋，制作石蜡切片，HE染色.3 结果3.1 体质量变化与正常对照组比，D-半乳糖致衰老小鼠体质量在造模4周后显著降低(P<0.01)，并随着造模时间的推移体质量进一步减少(P<0.01).小鼠外观特征为毛色枯黄、行动迟缓、精神萎靡等.见表1.表1 造模前后小鼠体质量的变化Tab.1 Changes in body weight of mice before and after model establishment*：和空白对照组比较，P<0.01.3.2 行为学测试与正常对照组比较，水迷宫实验和穿梭箱法学习记忆能力测试显示：模型组衰老小鼠水迷宫探索路径长度和搜台潜伏期时间均显著延长(P<0.01).见表2.表2 水迷宫实验和穿梭箱法小鼠学习记忆时间Tab.2 The time of learning and memory of mice in water maze and shuttle box experiment#：和空白对照组比较，P<0.01，##：和空白对照组比较，P<0.01.3.3 病理切片观察肝脏组织切片显示：衰老模型组小鼠肝小叶不规整，可见点状或灶性坏死，肝细胞排列紊乱，脂肪样变性较广泛，胞质可见明显疏松、肿胀，门管区紊乱，结缔组织增多，可见炎性细胞浸润.正常组肝小叶结构完整、规则，呈多边形肝细胞排列整齐，胞质丰富，清亮透明，核大，核仁明显，门管区无炎性细胞浸润[12].见图1，2.光镜下可见：模型组轮廓模糊，神经元细胞减少，颜色较浅，模型组可见大量肿胀变性的神经元细胞，分支明显减少，核仁浓缩变小，分叶不清，部分断离，细胞间排列松散，界限模糊[13].正常组小鼠脑组织轮廓清晰，神经元细胞密集，颜色深染，核仁分叶清晰，细胞间排列整齐，界限清楚.见图3，4.4 讨论衰老是一种正常的生理现象，机体发育成熟后，组织器官也逐步发生退行性改变，主要表现为机体功能的下降和紊乱、免疫功能下降、糖脂代谢紊乱和肝肾功能的异常，尤以记忆力减退为主[14].本课题组利用D-半乳糖诱导了亚急性衰老动物模型，模型组小鼠较正常对照组小鼠体质量减轻较多，毛色枯黄，行动迟缓，精神萎靡；光镜下显示多个器官结构均有不同程度的病理损伤变化.本实验研究的结果发现：D-半乳糖诱导衰老小鼠模型表现为小鼠活动次数明显减少，学习记忆力显著下降，体力和耐力等能力降低，并随着时间的推移衰老症状逐渐加重，与人类的自然衰老症状和衰老进程比较类似，这个实验结果可为人类衰老机制研究以及抗衰老药物的筛选提供参考[15-19].参考文献：[1] Finkel T，Holbrook N J.Oxidants，oxidative stress and the biology of ageing[J].Nature，2000，408：239-247.[2] Cui X，Zuo P，Zhang Q，et al.Chronic systemic D-galactose exposure induces memory loss，neurodegeneration，and oxidative damage in mice：protective effects of R-alpha-lipoic acid [J].J Neurosci Res，2006，83：1584-1590.[3] 张熙，李文彬，张炳烈.D-半乳糖亚急性中毒大鼠拟衰老生化改变[J].中国药理学与毒理学杂志，1990，4(4)：309-310.[4] 梁纪伟，田庆伟，王永明，等.大豆异黄酮对D-半乳糖致衰老模型小鼠抗氧化系统作用的实验研究[J].中国老年学杂志，2004，24(1)：42-43.[5] Song X，Bao M，Li D，et al.Advanced glycation in D-galactose induced mouse aging model [J].Mech Ageing Dev，1999，108：239-251.[6] Li Y，Qin H Q，Chen Q S，et al.Neurochemical and behavioral effects of the intrahippocampal coinjection of betaamyloid protein 1-40 and ibotenic acid in rats[J].Life Sci，2005，76：1189-1197.[7] Hua X，Lei M，Zhang Y，et al.Long-term D-galactose injection combined with ovariectomy serves as a new rodent model for Alzheimer’s disease [J].Life Sci，2007，80：1897-1905.[8] Lei H，Wang B，Li W P，et al.Anti-aging effect of astragalosides and its mechanism of action[J].Acta Pharmacol Sin，2003，24：230-234. 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D-半乳糖致衰老小鼠模型的实验研究
D-半乳糖致衰老小鼠模型的实验研究鞠文博;于春艳;陈建光【期刊名称】《北华大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(000)002【摘要】Objective To explore the application of D-galactose in establishing aging mice model,and to detect the related indexes. MethodD-galactose was given to the mice continuously by subcutaneous injection for 42 days to make aging model. During this period,their changes in weight,behavior and senescence indications were measured as well. Results Compared to the control group, the body weight of the aging mice decreased significantly after 4 weeks modeling (P<0. 01). Besides,both exploration path length and escape latency were seriously prolonged inthe water maze experiment (P<0. 01),indicating that the ability of learning and memory retarded in the aging mice. Morphological observations showed aging changes in the structures of several organs and tissues. Conclusion D-galactose can successfully establish aging mice model.%目的：探讨应用D-半乳糖制作小鼠衰老模型,并进行指标检测.方法 D-半乳糖连续皮下注射42 d制作小鼠衰老模型,同时进行体质量变化测量、行为学测试和形态学衰老指标的测定.结果与正常对照组相比,造模4周后,D-半乳糖致衰老小鼠体质量显著降低(P<0.01)；D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力减弱,水迷宫探索路径长度、搜台潜伏期均显著延长(P<0.01)；形态学观察显示各器官组织结构出现衰老改变.结论D-半乳糖可以成功制作小鼠衰老模型.【总页数】4页(P199-202)【作者】鞠文博;于春艳;陈建光【作者单位】北华大学基础医学院，吉林吉林 132013;北华大学基础医学院，吉林吉林 132013;北华大学药学院，吉林吉林 132013【正文语种】中文【中图分类】R32【相关文献】1.槲皮素对D-半乳糖致衰老小鼠模型学习记忆及脑内炎症的影响 [J], 王德杰;郑傲2.补骨脂提取物对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型血清SOD、MDA的实验研究[J], 林昶;杨长福;吴大梅3.结合基因芯片和生物信息学工具构建D-半乳糖致衰老小鼠模型的分子调控网络[J], 王晶;赵翊;王勇;陈彻;李海龙4.维药高孜班提取物对D-半乳糖致衰老小鼠模型的作用 [J], 阿娜古丽·马合木提;热比姑丽·伊斯拉木;曼尔丹·尼牙孜5.基于高通量测序分析黄酒对D-半乳糖致衰老小鼠模型肠道微生物菌群的影响 [J], 刘蓉; 栾春光; 王德良; 覃思; 郝飞克因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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溶液，混匀，静置5 min后，于波长412nm处测定 吸光．计算每毫克蛋白质中GSH的含量．
4.脑组织中羟自由基(OH-)的测定
• 通过比色法检测抗氧化物质总抗氧化以及清除活性氧 能力．
• Fenton反应产生的OH-量与H202的量成正比，当用 Gress试剂显色时，形成红色物质，其呈色与OH-的多 少成正比关系．利用这一原理，进行清除活性氧能力 的测定．
慢性槲皮素增强小鼠空间学习记忆
摘要
•
以往研究发现，引起脑老化的神经系
统增龄性退行性变化与学习记忆能力衰退
存在一致性．老龄动物的学习记忆能力下
降，探究用小鼠D-半乳糖衰老模型，通过
Morris水迷宫动物行为实验和小鼠皮层与
海马组织还原型谷胱甘肽和羟自由基含量
测定等生化指标实验，对槲皮素延缓脑衰
• 置于玻璃匀浆器中，加入脑组织重量9 倍的冷生理盐水，在冰水浴中匀浆， 充分研磨，使组织块匀浆化．
3.脑组织中还原型谷胱甘肽(GSH)的测定
• 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量： • 取脑组织匀浆1mL，加入0.25mol／L pH8.0的
Tris-HCl 缓冲液3mL，再加入1mL 3％甲醛，混匀， 室温下分别准确静置60min
讨论
• 1.槲皮素的抗氧化机制 • 槲皮素是有效的自由基捕获剂和抗氧剂。 • 有实验表明黄酮类化合物对超氧阴离子、羟自由
• 羟自由基测试盒为活性氧试剂盒，使样本产生羟自由 基，其测试结果显示组织抗氧化能力的大小．
• 计算公式:总抗氧化能力=(测定管A-对照管A)×反应 液(mL)×样品测试前稀释倍数÷0.01÷30÷取样量 (mL)．
数据统计处理
• 所有实验数据均经一元方差分析过程进行 单变量方差分析．
实验结果
1.槲皮素对D-半乳糖处理小鼠Morris水迷宫 实验的影响
小鼠水迷宫第六轮实验时游泳平均速度的变化
• 数值示每组鼠从4个入水点到达平台的平均值 • 与Dgal组比较：* 表示P<0.05 **表示P<0．01 • 与Young组相比较：﹟表示P<0.05,﹟﹟表示 P<0.01,﹟﹟﹟表示P<0.001
• 在第五轮和第六轮训练中
• 青年组小鼠
70％可找到平台
• 小鼠水迷宫为直径120cm， 高50cm的圆形水池，周围 放有视觉提示物体．
• 水迷宫分为东南、西南、 东北、西北4个象限，其中 一个象限之中置一平台， 平台高15cm，表面直径为 6cm，水面高出平台1cm
• 水中加入黑色食用色素， 使动物在水面不能看见水 下平台．
• 实验时将小鼠随机从一个象限面向池壁放入水迷 宫，通过迷宫上方的摄像头和图像采集系统记录 小鼠找到平台休息的运动轨迹．
• 每天进行4次游泳训练，每次令动物从不同的象限 入水．对第1天在60s内未找到平台的小鼠，人为 引导其找到平台，以后几天记录的最长时间为60s， 持续实验6天.
• 第7天，去掉平台，将小鼠随机从一个象限面向池 壁放入迷宫，记录小鼠90s内穿越原平台位置的次 数．
2.小鼠脑组织匀浆的制备
• 取小鼠，迅速断头，在冰块上分离出 新皮层和海马，用4℃生理盐水冲洗干 净
• 3.化学结构
• 槲皮素的化学名为 3,5,7,3’,4’-五羟基黄 酮，多酚类化合物，化学 式C15H10O7，分子量 302.24
• 槲皮素具有很强的抗氧化 和清除自由基的能力
• 槲皮素及其衍生物具有亲 水性和亲脂性，其主要的 抗氧化活性基团是酚羟基
人体内槲皮素抑制细胞膜脂质的过氧化过程，增强机 体抗活性氧防御系统的能力，保护细胞不受过氧化作 用破坏
老作用进行了研究．
槲皮素
• 1.分布 槲皮素是一种在植物界分布很广的具有多
种生物活性的黄酮类化合物． 广泛存在于蔬菜和水果之中，如洋葱、马
铃薯、卷心菜、生菜、苹果、芒果和黑加仑 等
多种中草药中也含有槲皮素． 2.功能
扩张冠状血管，降低血脂，抗血小板聚集， 抗炎、抗过敏，抗糖尿病并发症，防止冠心 病、心率失常，抗氧化、清除自由基，以及 抗癌、抗肿瘤等药理作用．
2.槲皮素对D-半乳糖处理小鼠皮层和海马组织中GSH的影响
• 数值示平均值±标准误 • 与Dgal组比较:**示P<0.01 ***示P<0．001 • 与Young组相比较:###示P<0.001
3.槲皮素对D-半乳糖处理小鼠皮层和海马组织中 羟自由基的影响
• 数值示平均值±标准误 • 与Dgal组比较:**示P<0.01 ***示P<0．001 • 与Young组相比较:###示P<0.001
1
组 Dgal 别
2 Dq50
3 Dq75
4 Dq100
5 对照组
试
D-半乳糖50 mg/kg
剂
生理
试 生理盐水 槲皮素 槲皮素 槲皮素 盐水
剂
50mg/kg 75mg/kg 100mg/kg
• 实验时将其中4组小鼠每天颈后皮下注射
• 用药8周后，将5组小鼠分别进行行为测试和生化指标 测试．
1.Morris水迷宫实验
入水后到达平台的潜伏期随时间的变化
游泳速度随时间的变化
到达平台路程长度随时间的变化
小鼠水迷宫第六轮试验时小鼠潜伏期的变化
数值示每组鼠从4个入水点到达平台的平均值 与Dgal组比较：*表示P<0.05 **表示P<0．01 与Young组相比较：﹟表示P<0.05,﹟﹟表示 P<0.01,﹟﹟﹟表示P<0.001
实验材料
• 槲皮素、D-半乳糖，甘露醇、蔗糖和EDTA， 还原型谷胱甘肽试剂、羟自由基试剂
• 雄性小鼠50只随机分笼饲养，每笼10只小 鼠，室温控制在(22±1)℃，在12h明暗环 境条件下饲养，自由喂食、饮水．
实验方法
1. Morris水迷宫实验 2. 小鼠脑组织匀浆的制备 3. 脑组织中还原型谷胱甘肽(GSH)的测定 4. 脑组织中羟自由基(OH-)的测定
• 灌喂槲皮素100 mg／kg 41.32％
• 灌喂槲皮素75
45.45％
• 灌喂槲皮素50
18.18％
• D-半乳糖衰老组
8.33％
除平台后小鼠在原平台所在象限游泳时间占 总游泳时间的百分比
• 数值示平均值±标准误 • 与Dgal组比较:**示P<0.01 ***示P<0．001 • 与Young组相比较:###示P<0.001