脂质过氧化及抗氧化剂抗氧化活性检测方法
抗氧化物活性测定方法总结
抗氧化物活性测定方法总结抗氧化物活性 (antioxidant activity)描述了化学物质在抑制或减少氧化反应中所起的作用。
抗氧化物是一类具有亲电子的分子，它们容易被氧化，从而中和自由基。
抗氧化物具有重要的生物学和医学意义，因为氧化损害是许多疾病和老化的主要原因。
因此，抗氧化物活性测定方法是目前研究的热点之一，现将抗氧化物活性测定方法进行总结:1. DPPH法：该方法是一种常用的体外抗氧化测定方法。
含有DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）的溶液表现为紫色，DPPH自由基上的氢原子被抗氧化物夺取后，DPPH自由基变成无色，从而可以通过紫外可见光谱测定其吸光度的降低来表示抗氧化物活性。
2. ABTS法：该法通过测定2,2’-联氮双(3-乙基苯并咪唑啉硫酸铵) (ABTS)自由基的消除能力来测定抗氧化活性。
该法也是一种体外抗氧化测定方法，溶液发生颜色变化，从而通过紫外可见光谱测定其吸光度的降低来表示抗氧化物活性。
3. ORAC法：ORAC（氧化还原能力值）法对不同化学物质的体内抗氧化活性进行定量测定，其原理是将抗氧化剂加入与有氧气气氛接触的荧光染料溶液中，由于受到氧自由基的攻击，染料随着时间流逝会逐渐减少。
为了确定不同化学物质的抗氧化活性，十分重要的是应该不断输入氧自由基。
4. FRAP法：铁还原能力 (FRAP) 方法测量样品对Fe3+的还原能力，其原理是将含有Fe3+的试液与抗氧化剂反应后，Fe3+被还原为Fe2+，测试Fe2+的含量即可评估抗氧化剂的抗氧化性能。
5. TBARS法：该方法是用于评估脂质过氧化物含量，从而推断抗氧化剂的能力。
该评估方法是通过测定细胞膜上的脂质过氧化产物（丙二醛）来分析抗氧化剂活性。
6. Total Phenolic Content (TPC)法：该方法最初是用来测定葡萄酒和咖啡中酚类化合物含量的。
后来发现大多数植物成分含有大量的酚类化合物，故也用于测定植物中的酚类含量。
3种抗氧化活性测定方法
3种抗氧化活性测定方法抗氧化活性测定是评估物质抗氧化能力的重要方法，常用于食品、药物和化妆品等领域。
下面将介绍三种常用的抗氧化活性测定方法。
一、DPPH自由基清除法DPPH(2,2-二苯基-1-苦味肼)是一种常用的抗氧化剂，它能采用紫色的自由基形式存在，并且在反应中会转变为无色的稳定形式。
DPPH自由基清除法是一种简单而直观的测定方法。
该方法的基本原理是将待测物添加到预先溶解的DPPH中，反应一段时间后，根据颜色变化程度来评估抗氧化活性。
通过测量样品溶液吸光度的降低来计算其清除率，清除率越高，抗氧化能力越强。
二、FRAP法FRAP(铁还原能力)法是一种评估抗氧化物质电子给予能力的方法。
抗氧化物质能够通过给予电子来中和自由基的电子，从而保护细胞免受氧化损伤。
FRAP法通过反应产生的铁（II）络合物的吸光度变化来评估样品的抗氧化能力。
具体操作中，将待测物加入到铁（III）试剂（通常为铁(III)氯化物）中，待反应一定时间后，读取吸光度。
样品的抗氧化能力可以通过吸光度的变化来计算。
三、TBARS法TBARS(硫代巴比妥酸反应物)法是一种评估脂质过氧化的方法。
脂质过氧化是一种自由基引起的反应，会导致脂质的氧化和脂质分解产生不稳定化合物。
TBARS法主要用于评估食品和药物等样品中脂质过氧化的程度。
该方法通过将待测样品与反应试剂（如硫代巴比妥酸）反应生成稳定的色素产物，然后测量这种产物的吸光度来评估脂质过氧化的程度。
吸光度越高，脂质过氧化程度越高。
综上所述，DPPH自由基清除法、FRAP法和TBARS法是常用的抗氧化活性测定方法。
每种方法都有其独特的原理和应用范围，选择适合的方法可以准确评估样品的抗氧化能力。
在实际应用中，可以根据实验需求选择合适的方法，或结合多种方法综合评估抗氧化活性。
过氧化值检测方法
过氧化值检测方法
过氧化值是食品中脂肪氧化程度的指标之一，也是评价食品质量的重要指标之一。
因此，准确测定食品中的过氧化值对于保障食品质量和食品安全具有重要意义。
下面将介绍几种常见的过氧化值检测方法。
一、蒸馏法。
蒸馏法是一种常用的过氧化值检测方法，操作简便，结果准确可靠。
具体操作步骤如下，首先将食品样品加入适量的溶剂中，然后进行蒸馏，将挥发出的过氧化物收集并用碘滴定法测定其含量，最终计算出过氧化值。
二、紫外光度法。
紫外光度法是一种利用食品中过氧化物在紫外光下吸收特定波长的光线来测定过氧化值的方法。
该方法操作简便，且对样品的要求较低，适用于多种类型的食品样品。
三、氧化还原电位法。
氧化还原电位法是一种利用电化学原理来测定食品过氧化值的
方法。
通过测定食品样品溶液的氧化还原电位变化，可以准确地计
算出样品中的过氧化值。
这种方法对于液体食品和溶液样品特别适用，且结果准确可靠。
四、傅里叶变换红外光谱法。
傅里叶变换红外光谱法是一种利用食品中过氧化物在红外光谱
下的吸收特性来测定过氧化值的方法。
该方法操作简便，对样品的
要求较低，且可以同时测定多种食品中的过氧化值，适用范围广泛。
总结，以上介绍了几种常见的过氧化值检测方法，每种方法都
有其适用的食品类型和特点，选择合适的方法进行过氧化值检测对
于保障食品质量和食品安全至关重要。
在实际操作中，应根据食品
类型和实验条件选择合适的方法，并严格按照操作规程进行操作，
以确保检测结果的准确性和可靠性。
希望以上内容对您有所帮助。
脂质氧化的标准测定法
亚油酸脂质氧化的抑制-硫氰酸铵比色法实验原理用氯化亚铁和硫氰酸铵混合物与氧化油脂中的氢过氧化物反应, 形成有颜色的物质，通过比色来检测抗氧化剂对脂质氧化的抑制作用。
主要原料和设备具塞试管（胶塞）或旋盖试管分光光度计或酶标仪试剂亚油酸（LINOLEIC ACID，L1376-5G,Sgima）……(分子量：280.45，-20℃保存) 硫氰酸铵…………………………………………………(分子量：76.12，分析纯) 氯化亚铁●4H2O………………………………………….(分子量：198.81，分析纯) 试剂的配置● 0.05 mol/L pH 7.0磷酸盐缓冲液（1L）：称取磷酸二氢钠3.9001g，用950mL 的蒸馏水磁力搅拌溶解，然后用3M的氢氧化钠调pH到7.0。
●50 mmol/L亚油酸（50mL）：称取亚油酸0.7011g，然后用95%乙醇定容。
实验步骤将蛋白或肽样品（1mg/mL）溶于2.0ml 0.05 mol/L pH 7.0磷酸盐缓冲液中，加入到10ml的具塞试管，然后加入50 mmol/L 2.0ml亚油酸（溶于95%的乙醇）溶液，混匀，再加入1.0ml的蒸馏水，将反应液置于45℃的生化培养箱中，每48小时测定亚油酸的氧化程度。
取0.1ml反应液，加0.1ml 的30%的硫氰酸铵，再加入4.7ml 的75%的乙醇溶液，最后加入0.1ml的0.02 mol/L 氯化亚铁（内含3.5%的盐酸）溶液中，振荡，并使其反应3min，在波长500nm处比色，以蒸馏水作为空白。
如采用酶标仪要根据酶板的容积按比例调整。
注意事项1、要设定合理的抗氧化剂的浓度。
否则所需贮藏的时间太长，必要时首先要对样品的量效进行测定。
2、无论选用胶塞试管，还是旋盖试管，都要求其密封性要好。
3、氯化亚铁应呈蓝绿色，它易吸湿，在空气中易被氧化成碱式氯化高铁（变黄），因此要密闭保存。
抗氧化物活性测定方法总结
抗氧化物活性测定方法总结引言：抗氧化物活性测定在食品、医药、化妆品以及生命科学等领域具有重要应用。
目前，常用的抗氧化物活性测定方法主要包括化学法、生物法和物理法。
本文将对这几种方法进行总结。
一、化学法1.1.DPPH自由基法该方法是目前应用最广泛的抗氧化活性测定方法之一、通过DPPH自由基与抗氧化物发生反应，使DPPH自由基得以还原为无色溶液，测定溶液的吸光度来评估抗氧化活性。
1.2.ABTS自由基法该方法通过生成具有特定吸光度的ABTS自由基，评估抗氧化物对自由基的清除能力。
与DPPH自由基法相比，ABTS自由基法具有更高的灵敏度和稳定性。
1.3.羟自由基清除法该方法利用特定的化学反应，测定样品对羟自由基的清除能力，评估其抗氧化活性。
该方法适用于抗氧化物活性测定和体外抗氧化活性评价。
1.4.过氧化物清除法该方法测定样品对过氧化物的清除能力，通过测定生成的不稳定的自由基产物的分解速率，评估抗氧化活性。
该方法适用于测定生物样品的抗氧化活性。
二、生物法2.1.脂质过氧化抑制能力测定法该方法通过测定样品对脂质过氧化的抑制能力，评估其抗氧化活性。
常用的指标包括丙二醛生成量、硫代巴比妥酸反应物（TBA）生成量等。
2.2.DNA损伤保护能力测定法该方法通过测定样品对DNA损伤的保护能力，评估其抗氧化活性。
常用的指标包括DNA链断裂率、碱基损伤率等。
2.3.超氧化物歧化酶（SOD）活性测定法该方法测定样品中SOD的活性，评估其清除超氧自由基的能力。
常用的指标包括抑制率、相对酶活等。
2.4.过氧化氢酶（CAT）活性测定法该方法测定样品中CAT的活性，评估其清除过氧化氢的能力。
常用的指标包括催化剂浓度、酶单位等。
三、物理法3.1.相对电子自旋共振法该方法通过测定样品中的自由基产物的电子自旋共振信号的强度，评估抗氧化物的活性。
常用的指标包括g值、线宽等。
3.2.高温氧化法该方法利用样品在高温条件下的氧化反应，评估其抗氧化活性。
食品抗氧化剂
正常剂量对人体无毒性。美国食品和药品管理局将
其列为一般公认安全物质。
(5)应用 本品可应用于许多食品，包括水果、 蔬菜、肉、鱼、干果、饮料及果汁。
L-抗坏血酸为非脂溶性，不能直接作为油脂食品的 抗氧化剂，一般使用脂溶性的α-生育酚的增效剂作用 于油脂食品。L-抗坏血酸在油脂食品中的使用量为α －生育酚的1/4 ~ 1/2。
(4)应用 BHT的使用范围和最大使用量与 BHA相同。
三、特丁基对苯二酚（TBHQ）
别名叔丁基对苯二酚、叔丁基氢醌，分 子式为C10H14O2，相对分子质量166.22，结构式 如下：
(1)性质 白色至黄白色结晶性粉末， 有特殊气味。熔点126.5~128.5℃，沸点300℃， 微溶于水，在许多油和溶剂中它都有足够的溶 解性。TBHQ在油、水中溶解度随温度升高而 增大。对热稳定，不与铁、铜等形成络合物， 但在见光或碱性条件下可呈粉红色。
(1)性质 白色至微黄色蜡状结晶性粉末，略带 酚类的特异臭味或刺激性气味。随BHA混合物中两 种异构体的比例不同其熔点和沸点也不同，不溶于水， 易溶于乙醇、丙二醇及各种油脂，对热稳定，在弱碱 性条件下也不易被破坏。具有单酚型特征的挥发性， 在猪脂肪中保持在61℃时稍有挥发。几乎没有吸湿性， 在直射光线长期照射下，色泽会变深。
L－抗坏血酸钠分子式C6H7O7Na，相对分子质量 198.11，结构式如下：
(1)性质 白色至浅黄色结晶或结晶性粉末，无 臭，略带皂味。熔点为200℃左右，在218℃时产生分 解，干燥状态下稳定，吸湿性大。较L－抗坏血酸易 溶于水，其溶解度为：62％(25℃），78％(75℃）。 在水溶液中缓慢氧化分解。2％的水溶液pH值为 6.5~8.0。极难溶于植物油和乙醇，遇光颜色渐变深。
抗氧化酶活性测定方法
抗氧化酶活性测定方法抗氧化酶是一类对抗氧化反应具有重要作用的酶。
其主要功能是清除体内的自由基，抑制过氧化物形成和脂质氧化反应，从而保护细胞免受氧化应激的伤害。
测定抗氧化酶活性有助于评估生物体内的氧化应激水平，为疾病的诊断和治疗提供重要的指导。
本文将介绍几种常见的抗氧化酶活性测定方法。
1.超氧化物歧化酶（SOD）活性测定方法：SOD能够催化超氧阴离子（O2-）的还原反应，将其转化为较为稳定的氧气和过氧化氢。
常见的SOD活性测定方法有：-标准醛缩法：根据SOD催化的还原反应，利用NBT（硝基蓝盐）和醛缩剂的变色反应来测定SOD活性。
-自动化测定法：利用包含其中一种还原物质和pH染料的较为稳定的底物，通过测定底物的氧化程度来确定SOD活性。
-XTT法和WST-1法：由于SOD具有还原型的性质，可以通过测定细胞培养基中的还原型琼脂糖（XTT）或水溶性四硝基噻唑盐（WST-1）的还原动力学来测定其活性。
2.过氧化氢酶（CAT）活性测定方法：CAT主要参与还原过氧化氢（H2O2），将其转化为氧和水。
常见的CAT活性测定方法有：-色素法：利用黄曲霉素作为还原剂，观察黄曲霉素的消费量来测定CAT活性。
-光度法：通过测定样品中H2O2浓度的下降程度来间接测定CAT活性。
-氧化还原电极法：通过测定样品中H2O2浓度的下降速度来测定CAT活性。
3.过氧化物酶（POD）活性测定方法：POD主要参与氧气与还原型供体之间的氧化还原反应，转化为过氧化物（ROO-）。
常见的POD活性测定方法有：-色谱法：利用酚类底物的氧化反应，测定产生的醌类产物的含量来测定POD活性。
-酶标法：POD催化氧化反应会形成有色产物，通过测定产物的吸光度来测定POD活性。
4.谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性测定方法：GPx主要参与还原过氧化物，将其转化为相对稳定的醇和水。
常见的GPx活性测定方法有：-碳酸盐法：根据GPx还原底物中的碳酸盐，观察样品溶液pH值的变化来测定GPx活性。
抗氧化剂测定
抗氧化剂的测定摘要：综述了抗氧化剂抑制脂质氧化、清除自由基、抑制自由基对底物的氧化降解以及还原能力4类测定抗氧化活性的方法，并讨论了评价或表征测定结果的方法和参数以及对测定方法的要求。
关键词：抗氧化剂，抗氛化活性，测定方法。
测量脂质氧化的方法很多，以过氧化值、共扼二烯、TBARS法和气相色谱法最为常用。
各种方法都有优缺点，实际测定中将各种方法结合使用。
1.ABTS法ABTS法最初是Marklund根据含有蛋白质的血红素过氧化物酶能使无色的ABTS[2,2'-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid ) d iammoniumsalt,2,2-连氮-(3-乙基苯并唾哇琳-6-磺酸)二按盐]变成蓝绿色的ABTS·十，用于测定组织样品中血红蛋白的含量[1]。
后来这个方法被Miller等人加以改进，用于测定生物样品的抗氧化活性[2]，然后广泛应用于食品和天然水溶性酚类物质抗氧化活性的测定.ABTS法广泛用于评价抗氧化剂清除自由基的能力。
此法快速简单.可用于常规测定。
但对于同一物质，测得的TEAC值往往不同，例如，在不同的研究中，栋精的TEAC值分别为3.1和6.4。
这不仅与具体的测试方法有关，即使同一方法，TEAC值也有可能不同，例如，用同样的方法，栋精浓度为1.5和1.0μmol/L时的TEAC分别为5.6和6.4。
ABTS·十在与氢原子供体的反应中选择性差是此法又一个不足，它可与任何羟基化的芳香族化合物反应，这与它们实际抗氧化能力无关，TEAC值也包括对抗氧化不起作用的羟基。
2.DMPD +法Fogliano等人提出的清除自由基的方法与ABTS法类似:在酸性条件下，DMPD (N, N-dimethyl-pphenylenediamine)可被ABAP,Fe C13,CU C12,H202氧化，生成稳定的DMPD·+，它在505nm处有最大吸收峰。
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脂质过氧化及抗氧化剂抗氧化活性检测方法左 玉（太原师范学院， 山西太原 030031）摘 要：越来越多研究表明，很多疾病和衰老现象都与脂质过氧化有关。
该文对近年脂质过氧化及抗氧化剂抗氧化活性检测方法作简单综述，包括气相色谱、液相色谱、质谱、化学发光法等，并对不同方法进行综合比较与评价。
因各种检测技术对象各有不同，且各自各有优缺点，因此，要针对不同实验目的及条件以选择不同检测方法。
关键词：脂质过氧化；抗氧化剂；抗氧化活性The Detection methods of antioxidant activities of antioxidantsand lipids peroxidationZUO Yu 1(Taiyuan Normal University, Taiyuan 030031, China)Abstract ：Lipid peroxidation has received considerable attention because of its possible contribution to the potential damage of biological systems. The study on the mechanism and the protection of lipid peroxidation are concerned to our living and health. Lipids peroxidation and the methods of determination of peroxidation and antioxidant activities in biological systems were reviewed, including Gas chromatography, Liquid Chromatography, MS, Chemiluminescence and so on. Different methods are compared comprehensively and evaluated. A variety of detection technologies have different target clientele, but also have their own advantages and disadvantages. Therefore, it is necessary for different experimental purposes and conditions to choose a different detection method.Key word ：lipid peroxidation ；antioxidant ；antioxidant activity中图分类号：TS201.2＋2 文献标识码：A 文章编号：1008―9578（2009）02―0039―04收稿日期：2009–01–08在生物体内，很多脂类含有多不饱和脂肪酸，特别在生物膜的磷脂中，多不饱和脂肪酸含量极高。
由于不饱和脂肪酸双键电子云密度大，化学性质很不稳定，很易受到过氧化作用损伤，产生有细胞毒性的脂质过氧化物。
这些化合物能破坏人体细胞正常生理功能，促使人体衰老和诱发癌症。
目前国内外关于氧化应激、自由基损伤和生物抗氧化研究主要集中在食品、化妆品、及生理学、流行病学等领域，但从分子水平研究其作用机理、基元反应和结构/活性关系的工作尚不多见，许多基础理论问题尚待解决。
因此，脂质过氧化检测方法在反应机理研究中就显得尤为重要。
各种抗氧化物质作用强弱，取决于其抗氧化能力（或称抗氧化活性，Antioxidant Activity）。
抗氧化测定方法有许多种，有直接的，也有间接的，还有简便总抗氧化能力（TAC）试剂盒等。
这些方法都有一定优缺点或局限性（或专用性），测定原理各不相同；因此，为能得出准确评价结论，还需综合评估各种方法，以获得满意结果〔1〕。
1 脂质过氧化反应机理脂质过氧化作用（Lipid Peroxidation）是自由基生物学一个分支，系指脂类（RH）多不饱和脂肪酸（PUFA）与自由基反应，形成中间体自由基，再与分子氧化反应形成脂质过氧化自由基，引起酸败作用〔2〕。
生物膜脂质中含有较多多不饱和脂肪酸，易发生脂质过氧化而损伤膜的功能与结构。
正常生命过程产生自由基为维持生命所必须，但若浓度过高则对机体有害。
体内自由基产生与清除处于动态平衡中，一旦平衡破坏就会危害机体。
环境中有多种因素促使自由基产生，引起脂质过氧化，例如电离辐射、紫外线、臭氧、废气、杀虫剂、除草剂、光敏剂及金属离子等〔3〕。
自由基是指一类可独立存在含有未配对电子物质，包括分子、原子、原子团或离子。
若这类物质含有不配对电子的含氧基团称为氧自由基（OFR），主要包括超氧阴离子自由基（O 2–）、过氧化氢（H 2O 2）、羟自由基（HO·）、单线态氧（1O 2）等。
这些不成对电子使OFR 具有不稳定性和高反应活性〔4~5〕。
脂质过氧化是一个产生自由基和自由基参于链式反应过程，可分为三个阶段：（1）诱导阶段：RH →R·＋H·（2）传导阶段：R·＋O 2→ROO·ROO·＋RH →ROOH ＋R·生成ROOH 很容易发生各式各样分解反应，例如：ROOH →RO·＋HO·RO·和HO·都是非常活泼自由基，与RH 反应均能生成R·：RO·＋RH →ROH ＋R·RH ＋HO·→H 2O ＋R·（3）终止阶段：各种自由基在量增加后相互结合，链式反应终止：R·＋R·→RRROO·＋R·→ROORROO·＋ROO·→ROOR＋O2式中RH为参加反应油脂中不饱和底物，H是邻近双键两旁亚甲基上氢原子。
反应过程中产生的R·、ROO·、RO·及HO·等自由基均可由自旋共振仪测定。
2 脂质过氧化检测2.1 脂质过氧化底物检测2.1.1 氧耗不饱和脂肪酸发生脂质过氧化过程将伴随氧气消耗，因此氧耗也成为检测脂质过氧化指标之一。
氧耗测定可采用Wills测压法及氧电极法，后者较为常用。
且此法只需一个氧电极即可，利用氧电极能很方便测量溶液中氧浓度，因此，可用它检测一个反应体系中氧消耗，以研究自由基产生动力学过程。
氧气吸收量用电子电位差计纪录，它还可连续检测脂质过氧化进程，但体系必须封闭。
最近，又发展一种自旋探针测氧法，系利用自旋探针ESR波谱超精细结构随氧浓度改变以测量一个反应体系氧浓度方法。
氧气是一个顺磁性三重态分子，可与自旋探针未成对电子产生自旋相互作用，使自旋探针ESR波谱产生自旋―自旋增宽，使本来存在一些超精细结构无法分辨。
利用超精细结构随氧气浓度改变就可测量该体系中浓度和氧消耗；但利用该法测量生物体系氧消耗时间不能太长，也不能有氧化还原反应。
2.1.2 增重法脂质过氧化过程中必定要吸收一定的氧，底物吸氧后形成过氧化物增重。
通过对氧化混合物作NMR 分析，由乙烯基质子峰面积可得出不饱和脂肪酸氧化随时间变化情况。
此法只适于常温下反应，且底物体系中无易挥发物质。
2.2 脂质过氧化产物检测2.2.1 脂自由基在脂质过氧化进程中会产生许多自由基，如R·、ROO·、RO·、HO·等，这些自由基含有一个未成对电子，这就决定具有顺磁性和很高反应活性。
所有检测自由基方法都根据自由基这两个特性发展起来的，这些方法可分为物理方法和化学方法两大类。
所有检测自由基方法原则上都可检测氧自由基；但氧自由基具有其自己特性，所以还有一些检测氧自由基特殊方法。
电子自旋共振（electron spin resonance，ESR）又称电子顺磁共振（electron paramagneticreonance，EPR），是检测自由基最直接、最有效方法。
根据共振条件hv=gβH，一个ESR波谱仪就是一套用来测量自由基时要满足这个共振条件设备。
一般ESR波谱仪都是固定频率，改变磁场以满足共振条件，因此称为扫场式。
由于高频微波热效应很大，特别对含水样品，水对微波吸收很厉害，所以，一般高频ESR波谱仪不能测量活体中自由基。
最近发展低频L波段ESR波谱仪解决这一问题，一是热效应低，二是样品腔大，可容纳大体积样品，甚至活体动物。
近年发展自旋捕集技术具有更广应用空间。
所谓自旋捕集技术就是为检测和辨认短寿命自由基，将一种不饱和抗磁性物质（称自旋捕集剂，一般为氨酮和亚硝基化合物）加入要研究反应体系，生成寿命较长自旋加合物，可用ESR检测：自旋捕集剂＋R·→自旋加合物最常用自旋捕集剂tNB（nitrosotert–butane），DMPO （5，5–dimethyl–pyrroline–1–oxide），PBN（phenyl–tert–butynitrone），它们与自由基反应都可生成氮氧自由基，所得ESR波谱一级分裂都是氮原子引起三重分裂，这一点和自旋标记所得到ESR波谱很类似。
但自旋加合物ESR波谱常常被分裂为二、三级更复杂图谱，由二、三级分裂峰制得数目和强度可推导出捕捉到自由基结构和性质。
2.2.2 共轭二烯氢过氧化物（CDHP）不饱和脂肪酸侧链氧化过程中伴随有CDHP生成，该共轭二烯结构在紫外区234 nm附近具有很强特征吸收，因此可利用这一特征对脂质过氧化进行检测。
该法操作简单，一个简单紫外分光光度计即可。
该法适于检测纯度较高脂质过氧化反应，因反应体系中其它底物也可能在这个波长范围内有吸收；另一个误差来源于脂肪酸本身在紫外区（210 nm）吸收和CDHP（234 nm）吸收只差20 nm；且CDHP本身也是一个不稳定化合物。
因此，CDHP含量多少不能准确反映脂质过氧化程度，它只能部分反映氧化初始阶段脂质过氧化程度。
2.3 脂质过氧化降解产物检测脂质过氧化物很不稳定，可自发降解成小分子复杂产物，如醛、酮、烷烃、烯烃、酸及聚合物等。
对这些降解产物检测被认为是最能有效反映脂质过氧化水平，其中丙二醛（MDA）是脂质过氧化最典型终产物。
2.3.1 化学发光（CL）法发光是处于高能激发态分子或原子向基态跃迁时发射光子现象。
化学发光法是由化学反应所引发，发射光可以是紫光，可见光或近红外光。
能产生发光反应化合物（有机物或无机物）很多，典型反应可表示为：（*表示激发态）A＋B —→C*＋DC* —→C＋光化学发光法中，常用一些发光增强剂以提高检测灵敏度，常用试剂有鲁米诺（luminal）、洛粉碱（luphine）、光泽精（lucigenin）和过氧物（peroxyoxadate）等。