经典瞬时受体电位通道蛋白在人非小细胞肺癌组织中的表达
非小细胞肺癌组织中表皮生长因子受体和血管内皮生长因子的表达及临床意义
非小细胞肺癌组织中表皮生长因子受体和血管内皮生长因子的表达及临床意义赵学维;孙光远;李兵;徐志飞;何金;刘惠敏【期刊名称】《第二军医大学学报》【年(卷),期】2008(29)1【摘要】目的:观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表皮生长因子受体(EGFR)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达,并探讨二者可能的临床意义。
方法:免疫组织化学染色比较82例NSCLC和20例非恶性肺组织中EGFR和VEGF的表达;观察NSCLC 患者不同临床病理特征下EGFR和VEGF蛋白的表达情况,并分析二者表达的相关性。
结果:NSCLC组织中EGFR、VEGF阳性表达率明显高于非恶性肺组织(53.66%vs0,62.20%vs25%,P<0.05)。
EGFR表达在不同性别、不同病理类型(鳞癌vs腺癌)、有无淋巴结转移及不同TNM分期的NSCLC患者之间有统计学差异(P<0.05);VEGF表达在有无淋巴结转移及不同TNM分期的NSCLC患者之间有统计学差异(P=0.0001)。
EGFR、VEGF高表达患者生存期短于各自的低表达患者(P<0.05)。
NSCLC组织中EGFR和VEGF的表达具有相关性(rs=0.314,P<0.05)。
结论:NSCLC组织中EGFR和VEGF存在过度表达,二者表达具有相关性,可作为判断NSCLC患者病情及预后的参考指标和靶向治疗靶点。
【总页数】5页(P72-76)【关键词】表皮生长因子受体;血管内皮生长因子;非小细胞肺癌【作者】赵学维;孙光远;李兵;徐志飞;何金;刘惠敏【作者单位】第二军医大学长征医院胸心外科,上海200003;第二军医大学长征医院呼吸内科,上海200003;第二军医大学长征医院病理科,上海200003【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.表皮生长因子受体、血管内皮生长因子受体和BAD在非小细胞肺癌中的表达[J], Zhaolin Xu;Drew Bethune;Sen Rong Yan;Neale Ridgway;罗晓阳2.血管内皮生长因子表皮生长因子受体和人表皮生长因子受体-2在结直肠癌中的表达及其临床意义 [J], 靳英;苏馨;付小霞;李建民;王素莲;史增祥3.人表皮生长因子受体2、核因子-κB及血管内皮生长因子在胃癌组织中的表达及其临床意义 [J], 文亦磊;欧海玲;赖燕燕;崔锦珠4.金属蛋白酶、表皮生长因子受体、血管内皮生长因子在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 [J], 尹志永;王兴波;陈丽娜;任士俊;赵金;杨大勇5.表皮生长因子受体及血管内皮生长因子在非小细胞肺癌组织中的表达 [J], 代先慧;蒋捍东因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
CCL20及其受体CCR6在非小细胞肺癌组织的表达及意义的开题报告
CCL20及其受体CCR6在非小细胞肺癌组织的表达及意义的开题报告一、研究背景与意义非小细胞肺癌（NSCLC）是一种高度恶性的肺癌，占据肺癌的80%~85%。
NSCLC的治疗一直是一个难点，临床治疗效果不尽如人意。
因此，研究NSCLC的发病机制，探寻新的治疗手段具有重要的意义。
CCL20（细胞因子趋化素20）是一种趋化蛋白，可以通过与其受体CCR6结合，参与多种生理和病理过程。
研究发现，CCL20/CCR6通路在多种人类癌症中都具有异常表达。
近年来，越来越多的研究表明CCL20/CCR6通路在NSCLC中也有重要的作用，但目前还没有形成统一的研究结论。
本研究旨在探讨CCL20及其受体CCR6在NSCLC组织中的表达及意义，为NSCLC的临床治疗提供新的思路和方法。
二、研究内容与研究方法1.研究内容（1）NSCLC组织中CCL20/CCR6的表达情况。
（2）研究CCL20/CCR6与NSCLC患者的临床特征之间的关系。
（3）通过体外实验验证CCL20/CCR6通路在NSCLC发生和发展过程中的作用。
2.研究方法（1）采用免疫组织化学（IHC）技术检测NSCLC组织中CCL20/CCR6的表达情况，并通过分析临床资料，探讨CCL20/CCR6与NSCLC患者的临床特征之间的关系。
（2）通过RT-PCR和Western blot方法检测NSCLC细胞系中CCL20/CCR6的表达情况，进一步探究CCL20/CCR6通路对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。
三、研究预期结果及意义预期结果：（1）CCL20/CCR6在NSCLC组织中的表达水平较高。
（2）CCL20/CCR6的表达水平与NSCLC患者的临床特征有关。
（3）CCL20/CCR6通路在NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭过程中起到关键作用。
研究意义：（1）为NSCLC的治疗提供新的思路和方法。
（2）为CCL20/CCR6通路在癌症中的作用机制提供新的证据和启示。
瞬时感受器电位通道在肿瘤增殖与迁移中的作用
中国药理学通报 ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ ２０１６Ｎｏｖ；３２（１１）
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ｃｈａｎｎｅｌｓ，ＳＯＣＣ）的分子基础；② ＴＲＰＣ３／ＴＲＰＣ６／ＴＲＰＣ７是构 成受体操纵性 Ｃａ２＋通道（ｒｅｃｅｐｔｏｒｏｐｅｒａｔｅｄｃａｌｃｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌｓ， ＲＯＣＣ）的分子基础。ＲＯＣＣ和 ＳＯＣＣ具有不同的激活机制。 细胞因子或活性物质作用于胞膜上相应的受体，引起 Ｇ蛋 白偶联的磷脂酶 Ｃ（ＰＬＣ）激活，ＰＬＣ可将磷酯酰肌醇二磷酸 （ＰＩＰ２）分解为三磷酸肌醇（ＩＰ３）和二酰甘油 （ＤＡＧ）。ＤＡＧ 诱发开放的非选择性阳离子通道被命名为 ＲＯＣＣ，其介导的 Ｃａ２＋内流 称 为 ＲＯＣＥ（ｒｅｃｅｐｔｏｒｏｐｅｒａｔｅｄｃａｌｃｉｕｍ ｅｎｔｒｙ）。ＩＰ３ 可触发胞内 Ｃａ２＋池的耗竭，开放的另一种非选择性阳离子 通道被命名为 ＳＯＣＣ，其介导的 Ｃａ２＋内流称为 ＳＯＣＥ（ｓｔｏｒｅ ｏｐｅｒａｔｅｄｃａｌｃｉｕｍ ｅｎｔｒｙ）［３］。ＳＯＣＥ的 启 动 与 内 质 网 上 的 基 质 相互作用分子 １（ｓｔｒｏｍａｌｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇｍｏｌｅｃｕｌｅ，ＳＴＩＭ１）和胞膜 上的 Ｏｒａｉ蛋白 （第一种被发现介导 ＳＯＣＣ的蛋白）密切相 关，过程如下：肌浆网 ／内质网上的 ＳＴＩＭ１可以感受 ＩＰ３ 等引 起的 Ｃａ２＋池耗竭的信号而活化，活化的 ＳＴＩＭ１在肌浆网 ／内 质网膜上移位、聚集，通过静电作用与胞膜上 Ｏｒａｉ通道耦合 形成高分子复合体通道，介导 ＳＯＣＥ；此外，ＴＲＰＣ１／ＴＲＰＣ４／ ＴＲＰＣ５等也参与介导 ＳＯＣＥ［４］，它们与 ＳＴＩＭ、Ｏｒａｉ蛋白一起 被称为 Ｃａ２＋池操纵 Ｃａ２＋内流复合体（ｓｔｏｒｅｏｐｅｒａｔｅｄｃａｌｃｉｕｍ ｉｎｆｌｕｘｃｏｍｐｌｅｘ）［５］。 １．１ ＳＴＩＭ／Ｏｒａｉ和 ＴＲＰＣ１／ＴＲＰＣ４／ＴＲＰＣ５ ＳＯＣＥ分子 组成（如 ＳＴＩＭ、Ｏｒａｉ和 ＴＲＰＣ１／ＴＲＰＣ４／ＴＲＰＣ５）的表 达 水 平 在不同类型肿瘤上存在差异，大量证据支持 ＳＯＣＥ参与肿瘤 细胞的细胞周期进程、增殖、迁移、转移和逃避细胞凋亡，以 及 ＳＴＩＭ和 ＳＯＣＣ可作为肿瘤预后或治疗策略合适的候选目 标。 １．１．１ ＳＴＩＭ／Ｏｒａｉ 研究发现，耐药卵巢癌细 胞 中 Ｏｒａｉ１、 ＳＴＩＭ１和 ＳＯＣＥ表达增强［６］。此外，相比结直肠癌、宫颈癌、 肝癌、肺癌和肾透明细胞癌患者的癌前病变组织，也发现肿 瘤组织 中 ＳＴＩＭ１或 Ｏｒａｉ１过 表 达［７］。敲 除 或 用 药 物 抑 制 ＳＴＩＭ１Ｏｒａｉ１能有效地抑制乳腺癌、结直肠癌、宫颈癌、肝癌、 鼻咽癌、表皮样囊肿、胶质瘤、黑色素瘤和肾透明细胞癌细 胞的增殖和转移［８］。提示 ＳＴＩＭ／Ｏｒａｉ１介导的 ＳＯＣＥ通路的 靶向治疗有潜在的抗癌和治疗价值。 ＳＯＣＥ调控肿 瘤 细 胞 增 殖 和 迁 移 的 分 子 机 制 ［９］可 以 概 括如下：① 敲低 ＳＴＩＭ１抑制 ＳＯＣＥ将导致 ｐ２１上调，细胞周 期因子 Ｃｄｃ２５Ｃ、ｃｙｃｌｉｎＥ、ｃｙｃｌｉｎＤ、ＣＤＣＫ２和 ＣＤＣＫ４等下调， 引起细胞周期阻滞；② 敲低 ＳＴＩＭ１或 Ｏｒａｉ１，抑制 ＳＯＣＥ会损 伤黏着斑翻转，导致细胞迁移。其可能的调节过程：钙调节 蛋白酶、胞质激酶 Ｐｙｋ２、小 ＧＴＰ酶 Ｒａｓ和 Ｒａｃ都是黏着斑调 节剂，ＳＯＣＥ表达异常导致钙调节蛋白酶和胞质激酶 Ｐｙｋ２激 活，调节迁移性宫颈癌细胞的黏着斑动态。Ｒａｓ和 Ｒａｃ组成 性表达激活可以挽救黏着斑翻转以及由于抑制 ＳＯＣＥ而导 致乳腺癌细胞迁移的缺陷；③ 增强环氧合酶２（ＣＯＸ２）的表 达和前列腺素 Ｅ２（ＰＧＥ２）的分泌，会使 ＳＴＩＭ１过表达，导致 ＳＯＣＥ增强，进而促进结肠癌细胞迁移。钙依赖性转录因子 ＮＦＡＴ在这一过程中也发挥重要作用。 １．１．２ ＴＲＰＣ１／ＴＲＰＣ４／ＴＲＰＣ５ ＴＲＰＣ１介导的 Ｃａ２＋内流可
非小细胞肺癌中pmTOR、Beclin1及LC3蛋白的表达及意义
广东医学 2019 年4 月第 40 卷第 7 期 Guangdong Medical Journal Apr. 2019, Vol. 40. No. 7• 895 •非小细胞肺癌中p - mTOR.Beclinl 及LC3蛋白的 表达及意义**承德市科学技术研究与发展计划项目(编号:201801 A0I0)△通信作者一 E - mail : xuhaoran 1981 @ 163. com张秀义，许浩然人，景卫革，孙亚东，孙秀娟，何士杰承德市中心医院呼吸内科(河北承德067000)【摘要】 目的 检测自噬相关蛋白磷酸化的雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR) s Beclinl 及微管相关蛋白1轻 链3(LC3)在非小细胞肺癌及正常肺组织中表达水平，探讨细胞自噬在肺癌演变中的作用机制方法应用免疫组织化学法测定96例非小细胞肺癌、64例正常肺泡、60例正常支气管断端黏膜组织p -mTOR 、Beclinl 及LC3蛋白表达水平，分析其表达差异与临床病理特征相关性 结果 Beelinl S LC3蛋白在非小细胞肺癌中表达下降，二者表达水平呈正相关，p-mT()R 蛋白表达升高。
随肿瘤增大、分化程度下降及淋巴结转移，Bee uni 蛋白表达下降 随肿瘤分化程度下降及淋巴结转移,LC3蛋白表达下降 随肿瘤分化程度下降及淋巴结转移』-mTOR 蛋白表达升高P-mTOR 与Beclinl 、LC3表达均呈负相关结论 自噬在非小细胞肺癌发病中起重要作用，自噬相关蛋白Beelinl 、LC3起协同抑癌作用，p-mT()R 蛋白促进非小细胞肺癌发生、发展'【关键词】 非小细胞肺癌；肺泡；支气管；Beelinl ； LC3; p-mTOR【中图分类号】R734.2；R329.2*5【文献标志码】ADOI : 10. 13820/j. enki. gdyx. 20183976Expression and clinical significance of p - mTOR , Beelinl and LC3 proteins in non - small cell lung cancer.ZHANG Xiu 一 yi , XU Hao - ran, J/NG Wei - ge 、SUN Ya - dong , SUN Xiu -juan , HE Sh - ijie. Chengde Central Hospi tal respiratory medicine department , Chengde 067000, Hebei , China Corresponding author -XU Hao - ran. E - mail : xuhaoran 1981 @ 163. coni[Abstract ] Objective To investigate the autophagy related proteins p - mTOR , Beelinl and LC3 in non - smallcell lung cancer and normal lung tissues , thus to explore the mechanism of aulophag) in the evolution of lung cancer.Methods Immunohistochemistiy was used to determine the expression levels of p - mTOR , Beelinl and LC3 protein in96 cases of non - small cell lung cancer ( NSCLC) , 64 cases of normal alveolar tissue and 60 cases of normal bronchial cluodenal tissue. The conelation between the expression differences and clinicopathological features were analyzed. Re sults Beelinl and LC3 proteins were significantly down - regulated in NSCLC tissues , and their expression levels werepositively correlated, p — mTOR protein expression was significantly increased. Beelinl protein expression was significantly down - regulated as tumor enlargement , decrease of wdifferentiation and lymph node metastasis. LC3 protein expressionwas significantly down - regulated as the decrease of tumor differentiation and lymph node metastasis. The expression of p - mTOR protein was significantly increased with the decrease of tumor differentiation and lymph node metastasis. And p - mTOR was negatively correlated with Beelinl and LC3 expression. Conclusion Autophagy plays an important role inthe pathogenesis of NSCLC. Beelinl and LC3 , the autophagy related proteins , play synergistic role in tumor inhibition ,and p - mTOR protein promotes the occurrence and development of NSCLC.[Key words ] non small - cell lung cancer ； alveolus ； bronchus ； Beelinl ； LC3 ； p - mTOR细胞周期调控基因突变导致细胞正常增殖调节 失控及抗凋亡功能异常亢进是发生肿瘤的重要原 因，细胞自噬(autophagy )是与细胞凋亡相似的生物学过程，是细胞内折叠错误、老化的蛋白质及受损、 失去作用的细胞器在溶酶体内降解的过程⑴。
瞬时感受器电位香草酸受体3促进胶质瘤U251细胞系增殖和侵袭
瞬时感受器电位香草酸受体3促进胶质瘤U251细胞系增殖和侵袭李忠华;李慧峰;李晓蕾【摘要】目的研究瞬时感受器电位香草酸受体3 (TRPV3)通道蛋白对胶质瘤U251细胞系增殖和侵袭的影响及分子机制.方法应用siRNA技术敲除U251细胞中TRPV3的表达,MTT方法检测细胞的增殖能力,Western blotting检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)的表达.结果敲除TRPV3表达后U251细胞增殖和侵袭能力下降,磷酸化的CaMKⅡ和cyclin D1的表达也受到抑制.结论 TRPV3通道蛋白能够促进胶质瘤U251细胞的增殖和侵袭能力.其机制是TRPV3通道开放,细胞外Ca2+内流,cyclin D1过表达促进细胞的增殖.【期刊名称】《中国医科大学学报》【年(卷),期】2018(047)005【总页数】4页(P394-397)【关键词】瞬时感受器电位香草酸受体3;胶质瘤;增殖;侵袭;细胞周期蛋白D1【作者】李忠华;李慧峰;李晓蕾【作者单位】贵州医科大学第三附属医院神经外科,贵州都匀558000;大庆油田总医院病理科,黑龙江大庆163001;贵州医科大学第三附属医院实验中心,贵州都匀558000【正文语种】中文【中图分类】R730.231神经胶质瘤是起源于神经外胚层的颅内常见肿瘤，占颅内肿瘤的50%以上，具有高发病率、高复发率、高病死率和低治愈率的特点。
虽然临床上应用手术、化疗、放疗等综合治疗方法，但是中低分化星形细胞瘤和胶质母细胞瘤的治疗效果仍无明显改善，肿瘤多在术后7～10个月内复发[1]。
因此，针对调控胶质瘤增殖、分化的表面分子以及信号通路等新治疗靶点的研究非常必要。
瞬时感受器电位香草酸受体3 （transient receptor potential vanilloid 3，TRPV3）是瞬时感受器电位通道蛋白的家族成员，被认为是一种钙离子通道蛋白，在皮肤、角化细胞、脑、脊髓、背根神经节等多种组织中都有表达，并通过接受细胞外信号发挥其生理功能，对机体产生影响[2-3]。
miRNA-155在非小细胞肺癌中的作用机制
miRNA-155在非小细胞肺癌中的作用机制发布时间：2022-08-24T03:37:39.418Z 来源：《医师在线》2022年4月8期作者：王巧刘璐璐谢冀周熊建军* [导读]miRNA-155在非小细胞肺癌中的作用机制王巧刘璐璐谢冀周熊建军*（九江学院；江西九江332000）摘要近年研究发现，miR-155在肺癌等肿瘤组织中异常表达，且其高表达提示非小细胞肺癌（Non-Small Cell Lung Cancer, NSCLC）患者不良生存预后，故miR-155有可能成为肺癌治疗的靶向基因。
经文献查阅发现，程序性细胞死亡因子PDCD4、RASSF4、Apaf-1、SOCS1、FGF9以及Smad 2/3等6种不同功能基因受miR-155的调控。
文章主要对miR-155通过这6种因子在非小细胞肺癌发病、进展中作用的机制进行综述，为推动肺癌治疗的发展提供参考。
关键词非小细胞肺癌；miR-155; Mechanism of miRNA-155 in non-small cell lung cancer Wang Qiao, Liu Lulu, Xie JiZhou,Xiong Jianjun*(Jiujiang College, Jiujiang, Jiangxi 332000) Abstract In recent years, it has been found that miR-155 is abnormally expressed in tumor tissues such as lung cancer, and its high expression indicates that patients with non-small cell Lung Cancer (NSCLC) have an adverse survival prognosis, so miR-155 may become Targeted gene for lung cancer treatment. According to the literature, six different functional genes such as programmed cytodeath factor PDCD4, RASSF4, Apaf-1, SOCS1, FGF9 and Smad 2/3 are regulated by miR-155. This article mainly reviews the mechanism of the role of miR-155 in the pathogenesis and progression of non-small cell lung cancer through these six factors, so as to provide reference for promoting the development of lung cancer treatment. Keywords Non-small cell lung cancer; miR-155;微小RNA(miRNA)是非编码RNA调控因子，长度为18～25个核苷酸，参与多种细胞信号传导通路的调控，在炎症、肿瘤、自身免疫性疾病中发挥重要的生物学作用[1]。
瞬时感受器电位通道在肿瘤增殖与迁移中的作用
瞬时感受器电位通道在肿瘤增殖与迁移中的作用林达岑;林默君;周瑞祥【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2016(032)011【摘要】瞬时感受器电位( transient receptor potential, TRP)超家族成员是位于细胞膜上的一类广泛分布的非选择性阳离子通道,激活TRP通道多可引起胞质游离Ca2+浓度升高,调节细胞增殖、迁移和转移。
目前研究表明, TRP通道与多种肿瘤的发生和发展密切相关。
该文对目前 TRPC、TRPV和TRPM通道在肿瘤增殖与迁移中的作用进行综述。
%The transient receptor potential( TRP) subfamilies be-long to the non-selective cation channels located at cell mem-branes. Calcium across the plasma membrane into the cell via most TRP channels may result in localized Ca2+ signals that con-tribute to cell proliferation, migration and metastasis. In recent years, many studies have focused on the role of TRP in cancer. This review intends to gather the latest progress concerning TRP channels on proliferation and migration of cancer.【总页数】6页(P1500-1504,1505)【作者】林达岑;林默君;周瑞祥【作者单位】福建医科大学基础医学院解剖学与组织胚胎学系，福建福州350108;福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系，福建福州 350108;福建医科大学基础医学院解剖学与组织胚胎学系，福建福州 350108【正文语种】中文【中图分类】R329.24;R348.1;R73-35;R73-37【相关文献】1.瞬时感受器电位离子通道4在大鼠背根神经节持续受压后异位放电中的作用 [J], 范真真;曲玉娟;魏慧;王永慧;马剑锋;岳寿伟2.瞬时感受器电位M与V通道蛋白在血管功能调控中的作用 [J], 杨娜;林默君3.模拟腰椎旋转手法抑制瞬时感受器电位离子通道香草素受体4/一氧化氮疼痛转导通路的作用研究 [J], 韩磊; 李艺; 郭广进; 赵平4.抑制瞬时感受器电位香草素受体亚家族Ⅳ型通道对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤后细胞凋亡与新生血管生成的作用 [J], 齐新刚;顾永欣;肖云;杜雷5.瞬时感受器电位离子通道蛋白V4在肝脏疾病中的作用机制 [J], 张腊英;陈明锴因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
非小细胞肺癌中雌激素受体α与β的表达及临床意义
非小细胞肺癌中雌激素受体α与β的表达及临床意义井晓婷;何芳;钱盼盼;张培蓓;叶贤伟;余红;张湘燕【期刊名称】《中国现代医生》【年(卷),期】2018(056)016【摘要】目的探析非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)、雌激素受体β(estrogen receptor beta,ERβ)的表达及临床意义.方法采用免疫组织化学SP法检测144个非小细胞肺癌组织标本、32个癌旁正常肺组织标本(距肿块5 cm以上)及17个肺良性病变组织标本中ERα、ERβ的表达.结果ERα和ERβ在肺良性病变组织、癌旁肺组织、NSCLC组织中表达率分别为82.23%、84.38%、87.50%和47.06%、53.13%、66.67%,两者组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);NSCLC组织中ERα、ERβ阳性表达与患者性别、癌细胞分化程度、病理类型、淋巴结转移、TNM分期等因素无相关(P>0.05),NSCLC患者年龄≥60岁的癌组织中ERβ阳性表达率77.27%高于年龄<60岁患者50.00%,差异有统计学意义(P<0.01),然而NSCLC组织中ERα阳性表达率在年龄方面比较差异无统计学意义(P>0.05).结论ERα、ERβ在NSCLC 组织中阳性表达与患者性别、癌细胞分化程度、病理类型、淋巴结转移、TNM分期等因素均无明显相关,ERβ在NSCLC组织中阳性表达可能与年龄相关.【总页数】4页(P1-4)【作者】井晓婷;何芳;钱盼盼;张培蓓;叶贤伟;余红;张湘燕【作者单位】贵阳市公共卫生救治中心,贵州贵阳 550003;遵义医学院,贵州遵义563003;遵义医学院,贵州遵义 563003;贵州医科大学,贵州贵阳 550000;贵州省人民医院呼吸与危重症医学科-贵州省呼吸疾病研究所,贵州贵阳 550002;贵州省人民医院呼吸与危重症医学科-贵州省呼吸疾病研究所,贵州贵阳 550002;贵州省人民医院呼吸与危重症医学科-贵州省呼吸疾病研究所,贵州贵阳 550002【正文语种】中文【中图分类】R734.2【相关文献】1.雌激素受体在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义 [J], 王瑞娟;张建中;王萍2.p53蛋白、雌激素受体、孕激素受体在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 [J], 张海青;吕福东;邓立宏;王术增;严红3.雌激素受体相关受体α和雌激素受体α在子宫内膜癌中的表达及临床意义 [J], 高敏;魏丽惠;孙蓬明;赵丹;李小平4.非小细胞肺癌组织中p53和雌激素受体的表达及其临床意义与相关性 [J], 杨琴;吴翠环5.雌激素受体在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 [J], 邵东晖;王秀问因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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Qi ZHANG, Jianxing HE, Wenju LU, Weiqiang YIN, Haihong YANG, Xiaoming XU, Daoyuan WANG State Key Lab of Respiratory Diseases, the first affiliated hospital of Guangzhou Medical College, Guangzhou Medical College, Guangzhou 510120, China; Department of Thoracic Surgery, the First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College, Guangzhou
万方数据
中 国 肺 癌 杂 志 2 0 1 0 年 6 月 第 1 3 卷 第 6 期 Chin J Lung Cancer, June 2010, Vol.13, No.6
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钙离子（Ca2+）作为细胞内第二信使，广泛参与细 胞各种生命活动。细胞内Ca2+浓度（[Ca2+]i）调节主要依 靠：肌浆内质网（ER/SR）钙池系统中Ca2+释放以及胞外 Ca2+通过离子通道如电压依赖性钙通道（voltage dependent ca lcium channels, V DCC）、钙池操纵性钙通道（storeoperated calcium channels, SOCC）或受体操纵性钙通道 （receptor-operated calcium channels, ROCC）内流[1]。质膜 系统钙离子泵和离子交换蛋白同时参与细胞内Ca2+的调 节，从而平衡着胞浆与细胞器之间的钙水平。经典瞬时 受体电位（transient receptor potential canonical, TRPC）通 道蛋白为非选择性阳离子通道家族，包括7个成员，即 TRPC1-7。研究表明，TRPC中的部分成员可能参与构成 钙池操纵性钙通道SOCC，并介导产生钙池操纵性钙内 流（Store-operated calcium entry，SOCE，过去称CCE）； TRPC介导的SOCE在细胞增殖、迁移和基因转录等细胞 活动中发挥重要作用[2]。本研究应用实时荧光定量PCR （Real-time fluorescence quantitative PCR, RT-qPCR）和蛋白 质免疫印迹技术首次检测了TRPC mRNA和蛋白质在非小 细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）组织中的表 达情况，并初步分析了TRPC与NSCLC细胞中SOCE的形 成可能存在的关系，为进一步开展TRPC的功能研究奠定 了分子基础。
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中 国 肺 癌 杂 志 2 0 1 0 年 6 月 第 1 3 卷 第 6 期 Chin J Lung Cancer, June 2010, Vol.13, No.6
·临 床 研 究·
经典瞬时受体电位通道蛋白 在人非小细胞肺癌组织中的表达
张奇 何建行 卢文菊 殷伟强 杨海虹 徐小明 汪道远
cruz公司（美国）。聚偏二氟乙烯膜（PVDF膜）、分子 量标准Precision Plus和ECL发光液采用Bio-Rad公司产品。 RIPA组织裂解液购自上海博彩生物公司。Tris、甘氨 酸、Tween-20、DTT、BSA等购自Sigma公司（美国）。 1.2 方法 1.2.1 总RNA抽提 应用Trizol试剂，按公司产品说明书提 取总RNA。用TURBO DNA-free 试剂（Ambion公司）除去 总RNA样品中残留的DNA。紫外分光光度法测定A260 nm、 A280 nm光密度，按公式[RNA]（µg/mL）= 40×稀释倍数× A260 nm计算RNA浓度；用于本研究的RNA样品质量要求 是，A260与A280比值>1.8，甲醛变性琼脂糖凝胶电泳清晰 可见28s和18s两条区带，带型无弥散。 1.2.2 RNA逆转录 反应体系体积为20 μL，其中含RNA 1 μg，按iScript逆转录试剂盒的说明配制反应体系。逆转录 条件为：25 oC、5 min；42 oC、30 min；85 oC、5 min。产 物在-80 oC保存。 1.2.3 荧光实时定量PCR 按QuantiTect SYBR Green PCR试 剂盒要求配制反应体系：PCR反应总体系25 μL，其中 含cDNA 1 μL。引物设计采用Primer 3软件（http://frodo. /cgi-bin/primer3/primer3_www.cgi），序列见表 1，其中Importin（IPO8）[3]为内参基因，用以排除样本 间上样量的差异。各样本设置3个复孔，以无模板反应 孔为阴性对照，人脑组织cDNA为阳性对照[4]。PCR扩增 条件参照文献[5]：①预变性95 oC、15 min；②94 oC、15 s，57.5 oC、20 s，72 oC、20 s，共45个循环；③95 oC、1 min；④55 oC、1 min；⑤55 oC→95 oC ∆t0.5 oC、10 s。反应 产物行1.5%琼脂糖凝胶电泳，并送TAKARA公司测序， 以验证扩增产物的长度和序列，以及扩增的特异性。采 用阳性对照（人脑组织）CDNA，进行5个梯度的等比稀 释，荧光定量PCR检测得到各基因引物的标准曲线和扩 增效率。 1.2.4 蛋白质免疫印迹分析 ①组织总蛋白的提取：从 -196 oC冰箱取出非小细胞肺癌组织及正常肺组织，在冰 上迅速研磨成粉末，按每100 mg组织加入1 mL RIPA组织 裂解液，冰上孵育30 min；于4 oC、12 000 g离心30 min， 收集上清液，为提取的总蛋白；②组织总蛋白定量：采 用Bradford方法检测蛋白浓度；③10%SDS-聚丙烯酰胺凝 胶电泳：蛋白质于100 oC加热5 min进行热变性，上样量 为30 μg；④免疫印迹：采用湿法转膜、5%脱脂奶粉4 oC 封闭过夜。TRPC一抗进行1:1 000稀释后孵育膜2 h，二 抗按1:5 000稀释后孵育膜1 h。用ECL发光液对信号进行 检测。X光片曝光、显影、定影。实验以β-actin为上样内
【关键词】 肺肿瘤；经典瞬时受体电位通道蛋白；钙池操纵性钙内流 【中图分类号】 R734.2 DOI: 10.3779/j.issn.1009-3419.2010.06.009
Expression of Transient Receptor Potential Canonical Channel Proteins in Human Non-small Cell Lung Cancer
510120, China Corresponding author: Wenju LU, E-mail: wlu92@;
Jianxing HE, E-mail: hejx@ 【Abstract】 Background and objective Transient receptor potential canonical (TRPC) proteins, a group of Ca2+ permeable nonselective cation channels, are thought to constitute store-operated calcium channels (SOCC) and mediate store-operated calcium entry (SOCE) in various cell types. Members of TRPC have been found to be involved in abnormal proliferation, differentiation, and growth of cancer cells. The aim of this study is to detect the mRNA and protein expression of TRPC in non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods Real-time quantitative PCR was performed to screen the expression of TRPC mRNA in NSCLC tissue. Protein expression of TRPC was detected by Western blot. Results Among the seven family members of TRPC so far identified (TRPC1-7), we detected the expression of TRPC1, TRPC3, TRPC4, TRPC6 mRNA in 24 cases of NSCLC tissue; TRPC2, TRPC5 and TRPC7 mRNA were not detectable. The relative abundance of the expressed TRPC was TRPC1≈TRPC6>TRPC3>TRPC4. Western blot confirmed the protein expression of TRPC1, TRPC3, TRPC4 and TRPC6 in NSCLC tissue. Conclusion Out of the seven members of TRPC, we found TRPC1, TRPC3, TRPC4, TRPC6 mRNA and protein were selectively expressed in human NSCLC tissue. This study could provide a basis for future exploration of the individual role of these TRPC proteins in mediating SOCE and in the progression of lung cancer. 【Key words】 Lung neoplasms; Transient receptor potential canonical proteins; Store-operated calcium entry This study was supported by a start funding granted by Guangzhou Medical College (to Wenju LU)(No.095016).