CAR-T细胞在肿瘤免疫治疗的研究进展和展望文献综述
肺癌的免疫治疗进展与展望
肺癌的免疫治疗进展与展望肺癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，也是导致人们死亡的主要原因。
传统的治疗方法如手术切除、化疗和放疗在控制肿瘤生长方面取得了一定效果，但对于晚期肺癌患者或复发转移的患者来说，治愈率仍然较低。
随着免疫治疗的不断发展，越来越多的希望被寄托在这一领域上。
一、免疫治疗的原理和方法免疫治疗是通过调节机体免疫系统增强对癌细胞的识别和杀伤能力，达到抑制肿瘤生长和转移的目的。
其主要方法包括检查肿瘤表面抗原、提取和扩增患者自身T细胞、利用重组技术制备嵌合抗原受体（CAR-T）等。
1. 肿瘤相关抗原检测免疫细胞通过特异性膜分子与肿瘤细胞表面的抗原结合，从而识别并杀伤肿瘤细胞。
通过检测肿瘤细胞表面的抗原，可以确定免疫治疗的靶点，制定个体化精准化的治疗方案。
2. T细胞移植T细胞是一类具有特异性杀伤能力的免疫细胞，对于肿瘤环境中滋生的癌细胞具有较强的杀伤作用。
提取和扩增患者自身T细胞，并重新注入患者体内，可以增强免疫系统对癌细胞的攻击能力。
3. CAR-T技术CAR-T技术是近年来发展起来的一种重要免疫治疗方法。
通过利用重组基因工程技术将与特定肿瘤相关抗原结合能力较强的单链抗体插入到T细胞中，使其具备针对该抗原产生反应和扩增功能。
CAR-T细胞在体内不断增殖并杀伤肿瘤细胞，从而达到治愈或控制肿瘤发展的效果。
二、免疫治疗在肺癌中的应用免疫治疗在肺癌中的应用主要是针对非小细胞肺癌（NSCLC），这是最常见的肺癌类型，约占所有肺癌的85%。
目前，已经有几种免疫治疗药物被批准用于NSCLC的一线及二线治疗，包括PD-1抑制剂和PD-L1抑制剂等。
1. PD-1抑制剂PD-1是T细胞表面上的一种受体，与其结合的配体PD-L1广泛存在于肿瘤微环境中。
当PD-1与PD-L1结合时，会抑制T细胞活化和功能，从而使肿瘤逃避免疫攻击。
PD-1抑制剂可以阻断PD-1和PD-L1之间的结合，恢复T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。
CART细胞在肿瘤免疫治疗的研究进展和展望文献综述
CART细胞在肿瘤免疫治疗的研究进展和展望文献综述CART细胞是通过基因工程的方法，将特异性肿瘤抗原受体引入到T 细胞中，使其获得对肿瘤细胞的识别和杀伤能力。
目前，CART细胞主要分为第一代、第二代和第三代三个世代，其中第二代和第三代CART细胞具有更高的活性和持久的治疗效果。
在临床应用方面，CART细胞疗法已经在多种恶性肿瘤的治疗中取得了成功。
例如，已经获得FDA批准的CD19CART细胞疗法在治疗B细胞恶性淋巴瘤和急性淋巴细胞白血病方面取得了突破性的疗效。
此外，CART 细胞还显示出对固体肿瘤的治疗潜力，如治疗非小细胞肺癌、乳腺癌和胃癌等。
然而，CART细胞治疗仍面临一些挑战和限制。
首先，临床应用中可能出现严重的副作用，如细胞因子释放综合征和神经系统毒性。
其次，治疗效果的持久性仍存在问题，部分患者可能会出现复发。
此外，CART细胞的制备和质量控制也是一个重要的问题，需要进一步完善。
此外，CART细胞治疗还需要进一步研究其机制和药物动力学特性。
目前，单克隆抗体和新型载体系统的开发已经取得了进展，可以更好地监测CART细胞的扩增和杀伤能力。
综上所述，CART细胞治疗作为肿瘤免疫治疗的重要手段，已经取得了显著的研究进展。
未来，通过进一步改进CART细胞的设计、增强其识别和杀伤能力，以及加强与其他治疗方法的联合应用，有望为肿瘤治疗带来更好的疗效。
肿瘤免疫治疗的研究进展与应用前景
肿瘤免疫治疗的研究进展与应用前景近年来，肿瘤免疫治疗受到越来越多的研究关注，成为肿瘤治疗领域的一大热门话题。
肿瘤免疫治疗是指通过激活或增强宿主的免疫系统，以达到对抗肿瘤的治疗方法。
与传统的化疗、手术和放疗相比，肿瘤免疫治疗具有独特的优势，如副作用小、持续时间长等。
本文将探讨肿瘤免疫治疗的研究进展和应用前景。
一、肿瘤免疫治疗的历史与发展早在19世纪末，人们就意识到免疫系统对肿瘤的作用。
20世纪初，人们开始使用动物模型探索免疫系统对肿瘤的作用。
随着分子生物学和免疫学研究的进展，人们发现肿瘤细胞可以通过多种途径逃避宿主的免疫攻击，如抑制T细胞的活性、产生免疫抑制因子等。
为了克服这些问题，研究者开始探索激活和增强免疫系统来对抗肿瘤的方法，肿瘤免疫治疗应运而生。
二、肿瘤免疫治疗的研究进展目前，肿瘤免疫治疗主要分为被动免疫疗法和主动免疫疗法两种。
被动免疫疗法是指直接应用具有抗体活性的制剂或利用转录因子或基因操纵技术将具有特异性的结构域引导到DNA中，使其产生合成抗体。
主动免疫疗法是指利用宿主自身的免疫系统，通过激活或增强特定免疫细胞来对抗肿瘤。
一种主动免疫疗法是T细胞治疗，即将自体T细胞从患者提取出来，经过外界处理后重注入患者体内，以达到识别和杀灭肿瘤细胞的目的。
另一种主动免疫疗法是肿瘤疫苗，即使用一种或多种肿瘤特异性抗原来激发机体免疫系统产生肿瘤特异性T细胞反应，继而杀死肿瘤细胞。
除此之外，近年来CAR-T细胞疗法备受关注，这是一种将T 细胞改造成具有特异性杀伤能力的疗法。
它通过将受体的单链变量区域与信号传导模块和共刺激模块耦合成一种模块化推进的受体，使T细胞具有更强的背景杀伤能力，从而得到更好的治疗效果。
三、肿瘤免疫治疗的应用前景肿瘤免疫治疗的应用前景非常广阔。
随着科技的不断发展，临床上越来越多的肿瘤类型可以采用肿瘤免疫治疗。
例如，良性肿瘤的治疗中，肿瘤疫苗可以预防肿瘤复发和转移。
在恶性肿瘤的治疗中，T细胞治疗和CAR-T细胞疗法可以实现良好的治疗效果。
CAR_T细胞在肿瘤免疫治疗的研究进展和展望文献综述
CAR_T细胞在肿瘤免疫治疗的研究进展和展望文献综述CAR_T细胞（Chimeric Antigen Receptor T cells）是一种新型的免疫细胞治疗方法，其具有很高的疗效和广泛的适用性，已被广泛应用于肿瘤免疫治疗研究中。
本文将综述CAR_T细胞在肿瘤免疫治疗的研究进展和展望的相关文献。
首先，CAR_T细胞疗法的原理是通过基因工程将T细胞表面的抗原识别结构体（抗原受体）改造成具有高度亲和力的肿瘤特异性受体，以增强T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。
CAR_T细胞疗法的优势在于其能够针对特定抗原，避免了免疫耐受和免疫逃逸问题，并且具有可调节的体外扩增和持久性存活的特点。
近年来，已有多项研究报道了CAR_T细胞在肿瘤治疗中的成功应用。
例如，Yescarta是美国FDA批准上市的一种CD19靶向的CAR_T细胞疗法，已在治疗复发性或难治性B细胞淋巴瘤中显示出令人瞩目的疗效。
此外，针对其他肿瘤抗原的CAR_T细胞疗法也在临床试验中取得了初步的成功，如针对BCMA的CAR-T细胞治疗在多发性骨髓瘤中显示出显著的治疗效果。
然而，CAR_T细胞疗法目前还存在一些问题和挑战。
首先，由于CAR_T细胞的攻击不仅局限于肿瘤细胞，还包括正常细胞，因此可能会出现严重的副作用，如细胞因子释放综合征和神经毒性。
其次，CAR_T细胞治疗中一些病人可能会在短时间内复发，这可能与抗原丢失、免疫选择和肿瘤异质性等因素有关。
为了克服上述问题，研究者们正在努力寻找新的CAR设计和改进的治疗策略。
一方面，研究人员正在探索多个抗原的双重或多重靶向CAR-T细胞疗法，以增加治疗覆盖范围和避免抗原丢失的问题。
另一方面，通过引入自杀基因、抑制因子或合并放疗、化疗等传统治疗手段，可以增强CAR-T细胞的疗效和持久性。
综上所述，CAR_T细胞作为一种新型的肿瘤免疫治疗手段，已显示出令人瞩目的疗效和广阔的应用前景。
随着对CAR_T细胞疗法机制和治疗策略的深入研究，相信未来CAR_T细胞疗法将在临床应用中取得更大的突破，并为肿瘤患者带来更好的治疗效果。
最新 CART的治疗进展和发展趋势
• 1989年首次提出和设计通过将识别肿瘤相 关抗原(tumor associated antigen,TAA)的 scFv和胞内信号域“免疫受体酪氨酸活化 基序(immunoreceptor tyrosine-based activation motifs, ITAM, 通常为CD3ζ或 FcεRIγ)”在体外进行基因重组, 生成重组质 粒, 再在体外通过转染技术转染到患者的T 细胞, 使患者T细胞表达肿瘤抗原受体,转染 后经过纯化和大规模扩增后的T细胞, 称之 为嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)。
CAR-T治疗进展和发展趋势
《2012中国肿瘤登记年报》
• 恶性肿瘤已成为严重威胁生命安全和身体 健康的重要杀手。 • 全国每6分钟就有一人被确诊为癌症，每天 有8550人成为癌症患者，每七到八人中就 有一人死于癌症。 • 未来10年，中国的癌症发病率与死亡率仍 将继续攀升。预计到2020年，中国每年的 癌症死亡总数将达300万左右，患病总数将 达660万。
CART19
CAR-T 技术原理
• CAR是将识别肿瘤相关抗原(TAA)的单链抗体 (scFv)和T细胞的活化序列在体外进行基因重组， 形成重组质粒，在体外通过转染技术，转染经纯 化与大规模扩增后的T细胞，称之为CAR-T细胞。 • CART技术应用范围广泛，针对某种或数种肿瘤 相关抗原阳性的肺癌、乳腺癌、大肠癌、前列腺 癌、宫颈癌、卵巢癌、鼻咽癌、食道癌、肾癌、 膀胱癌、胃癌、黑色素瘤、淋巴瘤等恶性肿瘤均 可治疗。
CAR-T细胞治疗的优势
• 降低排异反应风险。使用患者自体细胞。 • 治疗更精准。由于 CAR-T 细胞是应用基因修饰病人自体 的 T 细胞，利用抗 原抗体结合的机制，能克服肿瘤细胞 通过下调 MHC 分子表达以及降低抗原递呈等免疫逃逸， 让肿瘤细胞无所逃遁。 • 杀瘤范围更广。鉴于很多肿瘤细胞表达相同的肿瘤抗原， 针对某一种肿瘤抗原的CAR基因构建一旦完成，便可以被 广泛利用。 • 多靶向更精准。CAR-T既可以利用肿瘤蛋白质抗原，又可 利用糖脂类非蛋白质抗原，扩大了肿瘤抗原靶点范围， CAR-T细胞作用过程不受MHC的限制。 • 杀瘤效果更持久。新一代 CAR 结构中加入了促进 T 细胞 增殖与活化的基因序列，能保证 T 细胞进入体内后可以增 殖，CAR-T 细胞具有免疫记忆功能，可以长期在体内存 活。 • 低剂量。少量的细胞（ 1.5×10 5 个/公斤体重）的CAR-T 可以是病情完全缓解。
肿瘤免疫治疗的研究进展
肿瘤免疫治疗的研究进展随着科技的发展和医学的进步，肿瘤治疗方法和手段不断更新和完善。
其中，肿瘤免疫治疗已成为新兴领域，备受关注。
肿瘤免疫治疗的核心是通过激活人体自身免疫系统，利用免疫细胞的功能，从而攻击、杀死肿瘤细胞。
肿瘤免疫治疗涉及诸多技术和方法，包括某些药物、基因治疗、细胞治疗等。
但是，最引人注目的是免疫检查点抑制剂的研究和应用。
免疫检查点抑制剂是目前欣欣向荣的肿瘤免疫治疗新药。
这类药物作用于免疫检查点，从而抑制体内抗肿瘤细胞免疫反应中免疫抑制途径的多种细胞表面蛋白分子，加强人体免疫系统对癌细胞的攻击能力。
目前，已经有多种免疫检查点抑制剂被批准用于治疗肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、淋巴瘤等多种癌症。
然而，免疫检查点抑制剂的应用也存在一些问题。
首先，免疫检查点抑制剂并非是对所有类型的癌症都有效。
其次，尽管免疫检查点抑制剂对许多癌症都有治疗效果，但该药物也会带来很多的不良反应，如肝毒性、免疫介导性肺炎、免疫相关性胰腺炎、免疫介导性甲状腺炎、肌病等等。
因此，临床治疗中需谨慎使用。
针对上述问题，一些研究人员不满足于目前的疗效水平，并不断尝试创新方法，提高肿瘤免疫治疗的成功率。
目前一些进展值得关注：一、CAR-T细胞免疫疗法：CAR-T细胞疗法通过改变体内T 细胞对肿瘤细胞的识别和攻击特性，以增强T细胞与癌细胞的互动。
研究显示，CAR-T细胞疗法对淋巴瘤、白血病等血液肿瘤效果突出，已经被FDA批准上市。
二、肿瘤疫苗：肿瘤疫苗是一种用来触发人体免疫系统对肿瘤细胞进行攻击的疫苗。
相比于其他治疗方法，肿瘤疫苗具有良好的毒性和副作用控制，而且不会破坏健康细胞。
但是目前，肿瘤疫苗还没有被FDA批准上市。
三、基因编辑技术：这是目前普及较少的肿瘤免疫治疗方法。
基因编辑技术是通过对人体免疫系统的基因进行修饰，以增强其对肿瘤细胞的攻击力。
与其他治疗方法相比，基因编辑技术所需时间和成本更高，但可能是未来肿瘤免疫治疗的首选方法之一。
肿瘤免疫治疗研究综述
肿瘤免疫治疗研究综述肿瘤是一种严重的疾病，常常导致患者死亡。
治疗肿瘤的传统方法包括手术、放疗和化疗。
然而，这些方法有时会削弱患者的免疫系统，反而加重了疾病的发展。
因此，研究人员开始探索一种新的治疗方法——肿瘤免疫治疗。
免疫治疗的概念最早在19世纪末就出现了。
然而，由于缺乏关于免疫系统和免疫治疗的全面了解，一直无法开展系统的研究。
随着科技和医学的进步，免疫治疗逐渐走进人们的视野，并被证明是一种有效的治疗方法。
免疫治疗的理论基础是激活患者自身的免疫系统，通过加强免疫系统的功能抵抗肿瘤细胞。
这种治疗方法可以针对肿瘤的生长过程做出反应，并且适用于各种肿瘤类型——包括固体瘤、白血病和淋巴瘤等。
目前，市场上已有一些免疫治疗药物。
其中最著名的是美国默沙东制药公司的Keytruda和BMS公司的Opdivo。
这些药物主要阻断肿瘤细胞表面的PD-L1和PD-1，激活免疫系统对肿瘤进行攻击。
这些药物的使用已经在多种肿瘤类型的治疗中得到证实，并且已被证明是一种相对安全的治疗方法。
肿瘤免疫治疗的优点在于它具有持久的治疗效果。
一些病例显示，通过免疫治疗可以产生长期的肿瘤控制，甚至有可能实现肿瘤彻底治愈。
与化疗和放疗相比，免疫治疗的不良反应要少得多，且对患者的身体系统造成的影响更小。
然而，肿瘤免疫治疗依然存在一些挑战和不足。
首先，一些肿瘤的细胞表面没有PD-L1、PD-1，因而这些药物对这些肿瘤没有作用。
其次，一些患者可能会对这些药物产生免疫性反应，影响药物的治疗效果。
此外，免疫治疗的疗效难以预测，因人而异。
针对这些挑战和不足，研究人员正在不断探索新的肿瘤免疫治疗方法。
例如CAR-T细胞疗法。
CAR-T细胞疗法是一种核心技术是将T细胞与免疫受体设计成一个融合的蛋白，结合肿瘤特异性抗原，最终实现特异性识别肿瘤细胞并杀灭肿瘤的方法。
虽然这种方法仍处于研究阶段，但是已经取得了一些显著的疗效。
如美国FDA批准上市的Kymriah（卡美依）和Yescarta（耶斯卡达）等药物即是典型代表。
肿瘤免疫治疗的发展趋势及应用前景
肿瘤免疫治疗的发展趋势及应用前景肿瘤免疫治疗是一种前景广阔的治疗方法，它的基本理念是利用人体自身免疫系统的力量来攻击癌细胞。
在过去几十年里，肿瘤免疫治疗取得了巨大的进展，成为当今最热门的研究领域之一。
本文将探讨肿瘤免疫治疗的发展趋势及应用前景。
一、肿瘤免疫治疗的现状目前，肿瘤免疫治疗已经成为肿瘤治疗的一个重要领域。
其中最典型的治疗手段是肿瘤免疫检查点抑制剂。
它们属于一类药物，用于解除免疫系统对肿瘤细胞的抑制作用，帮助免疫系统更有效地攻击癌细胞。
此外，还有一种叫做CAR-T细胞治疗的方法。
这是一种采用改变免疫细胞的基因来增强其攻击癌细胞的能力的治疗手段。
目前，美国FDA已经批准了多种CAR-T细胞治疗用于治疗多种癌症。
然而，肿瘤免疫治疗也存在着一些问题。
首先，这种方法不一定适用于所有的患者和所有类型的肿瘤。
其次，这种治疗方法的费用也非常高昂。
最后，由于肿瘤细胞的变异性，免疫系统并不能始终有效攻击癌细胞。
二、肿瘤免疫治疗的发展趋势1. 个性化治疗未来肿瘤免疫治疗的发展趋势将是向个性化治疗方向发展。
个性化治疗的基本思路是根据患者的基因信息和病理资料，为患者提供最适合他们的治疗方案。
这种方法可以增加治疗的成功率，同时也可以减少治疗的副作用。
2. 组合治疗除了个性化治疗外，未来的肿瘤免疫治疗还将趋向于组合治疗。
组合治疗是指将多种治疗手段结合在一起，以期有更好的治疗效果。
例如，将肿瘤免疫检查点抑制剂和CAR-T细胞治疗结合起来，可能会有更好的治疗效果。
3. 新药研发此外，未来肿瘤免疫治疗的发展也需要新药的研发。
目前，肿瘤免疫检查点抑制剂是最流行的肿瘤免疫治疗方法，但是它们并不适用于所有患者。
因此，我们需要更多的新药物来填补这一空缺。
3. 可持续性发展最后，未来肿瘤免疫治疗的发展也需要可持续性发展。
肿瘤免疫治疗本身并不便宜，然而，它是未来医学治疗的前沿。
我们需要通过不断研发新技术和药物，来降低治疗的成本，让更多人受益于肿瘤免疫治疗。
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中国药科大学生物工程文献综述综述题目CAR-T细胞在肿瘤免疫治疗的研究进展和展望英文题目Current situation and development trend of CAR- T cell for tumor immunotheraphy专业生物制药（卓越工程师）院部生命科学与技术学院学号14404806姓名龙益如CAR-T细胞在肿瘤免疫治疗的研究进展和展望14404806 龙益如摘要：嵌合抗原受体修饰的Ｔ细胞（CAR-T）治疗是一种新型的肿瘤免疫治疗方法。
在多种血液肿瘤的临床试验中，CAR-T细胞疗法取得重大突破，在实体瘤的临床试验中也初见成效。
但在获得显著疗效的同时, CAR-T也存在持久性、归巢、脱靶效应、神经毒性、细胞因子风暴、插入突变、对实体肿瘤疗效有限等问题。
现就CAR-T技术的最新进展及该领域有待解决的问题进行综述，以期初步了解该技术的发展前景及问题分析。
关键词：嵌合抗原受体修饰的T细胞；肿瘤；免疫治疗Current situation and development trend of CAR-Tcell for tumor immunotheraphyAbstract：A lot of remarkable results suggested that the modification of T-cells with CARs could be a powerful approach for developing safe and effective cancer therapeutics .A novel breakthrough has been made in CAR-T treatment of hematologic tumors and therapeutic potential in clinical studies of solid tumors has been achieved , although there are still many problem for CAR-T on the clinical application such as off-target effect, cytokine storm ,insertion mutagenesis, limited effects for solid tumors. Here, we reviewed the recent advances of CAR-T and problems that need to be solved in this flied.Keyword: Chimeric antigen receptor T cells ; Tumor ;Immunotheraphy前言现当代社会，癌症是世界四大致死率最高的非传染性疾病（心血管疾病、癌症、糖尿病和慢性肺疾病）之一。
据世界卫生组织统计，每年约880万人死于癌症。
人类抗肿瘤历史已经100多年，取得了显著的成就，然而离攻克肿瘤难题仍然任重道远。
免疫学研究的蓬勃发展为肿瘤诊疗策略的革新带来了许多振奋人心的突破。
免疫疗法成为国际公认的继外科手术、放疗、化疗之后的第四种肿瘤治疗模式，被成功用于多种肿瘤的治疗。
自1985年来，美国国立卫生研究院（National Institutes of Heath,NIH）就把肿瘤的生物治疗列为肿瘤综合治疗第四大方式。
2000年举行的国际肿瘤生物基因治疗年会也指出：“生物治疗是目前知道的唯一有望完全消灭癌细胞的治疗手段，21世纪是肿瘤生物治疗的世纪”。
2011年国际权威杂志《自然》及《临床肿瘤学》分别发表题为“肿瘤免疫治疗的时代已经来临”的评论文章，指出未来免疫细胞治疗可能在肿瘤综合治疗中占据非常重要的位置。
美国《科学》杂志更是将肿瘤免疫治疗列在2013年度突破性研究进展第一位，认为其是肿瘤治疗的重大转折点。
2015年美国临床肿瘤学会年会发布的《ASCO年度报告：2015临床肿瘤学进展》中，将嵌合抗原受体基因修饰T细胞治疗技术作为实现复发性白血病治疗突破的前兆。
近期，麻省理工科技评论公布了“2016年十大突破技术”，这些技术代表了当前世界科技的发展前沿和未来发展方向，反映了近年来世界科技发展的新特点和新趋势；而“免疫工程-杀伤性T细胞”位居榜首。
本文将以介绍CAR-T细胞疗法的发展现状为基础，并分析CAR-T细胞疗法所存在的问题、可能的解决方法及机遇展望。
1CAR-T细胞的概念和发展历程1.1CAR-T细胞的概念嵌合抗原受体修饰的T细胞（Chimeric antigen receptor for T cells , CAR-T）疗法是将抗体对抗原的高度特异性和T细胞对靶细胞的细胞毒活性相结合的一种方法：通过基因重组获得表达嵌合抗原受体的T细胞，经过纯化、体外扩增和活化，输注回患者体内行使杀灭肿瘤细胞的功能。
CAR-T细胞通过其表达的CAR能特异性地识别并杀伤肿瘤细胞，属于精准肿瘤免疫细胞治疗。
目前已有大量研究针对不同肿瘤靶点设计出相应的CAR-T，在临床研究中验证其可行性，取得了显著疗效。
CAR的基础设计中包括一个胞外的肿瘤相关抗原（Tumor-associated antigen , TAA）结合区，通常来源于多克隆抗体抗原结合区域的scFv（Single-chain variable fragment），一个穿膜区和一个胞内信号区，将其有序地结合在一起，并组装在T细胞上。
当CAR受到特异性抗原识别后可为T细胞提供活化信号并通过胞内结构域转导该信号，引起T细胞的活化，从而发挥T细胞杀伤作用，并释放大量细胞因子对肿瘤细胞进行攻击。
1.2CAR-T细胞治疗的抗肿瘤机制和发展历程1.2.1CAR-T细胞治疗技术的发展历程目前针对T细胞的肿瘤免疫治疗主要包括免疫检查点抑制剂疗法和T细胞过继疗法两大类，CAR-T细胞疗法属于后者。
传统的过继免疫治疗主要采用肿瘤浸润淋巴细胞（tumor-infiltrating lymphocytes ,TIL）。
这种免疫治疗策略有一定的疗效，但是获得新鲜的肿瘤组织并分离和扩增TIL具有难度，回输的TIL细胞功能受损，在体内往往不能有效识别肿瘤细胞；同时，肿瘤中强大的免疫抑制微环境降低回输细胞的杀伤能力，这些问题限制了TIL疗法的广泛应用，仅对黑色素瘤等少数肿瘤有一定疗效，对大多数肿瘤疗效欠佳。
随着T细胞过继疗法的发展，具有高效特异性、杀伤活性和持久性的CAR-T 细胞疗法应运而生，成为肿瘤免疫治疗的新星.目前，CAR-T细胞治疗技术可分为四代，主要是依据其胞内信号结构域的差异来划分，我们将在下文中提及。
1.2.2CAR-T细胞治疗的抗肿瘤机制理解CAR-T的抗肿瘤机制，首先需了解T细胞是如何活化并杀伤肿瘤细胞的。
T细胞的活化需要双信号途径。
第一信号为Ｔ细胞表面受体（T cell receptor , TCRs）与抗原递呈细胞上的主要组织相容性复合物（MHC）结合，第二信号为抗原递呈细胞上的共刺激分子B7家族分子与T细胞上的配体CD28分子结合，产生协同刺激信号。
在双信号共同刺激下，T细胞活化增殖为细胞毒Ｔ细（cytotoxicT cell，CTL）。
当CTL再次遇到携带相同ＭＨＣ抗原肽复合体的肿瘤细胞时，就会与之结合，并分泌穿孔素、颗粒酶，直接介导肿瘤细胞溶解，也可诱导巨噬细胞分泌促炎因子IL-12等，间接影响肿瘤细胞的生长。
CAR-T细胞免疫治疗是利用基因工程的方法，将识别目标抗原的单链抗体与间隔区、跨膜基序和T细胞活化基序等结合为一体，利用融合基因修饰的T细胞特异性杀伤肿瘤细胞。
1.2.3CAR-T的结构CARs是靶向目标表面分子的重组受体，其结构主要包括胞外抗原结合域、跨膜区和胞内信号区三部分,如下图所示：胞外抗原结合域为单克隆抗体的单链可变区，负责识别抗原。
不同于生理性的TCR，重组CARs与抗原的结合不需要依赖于MHC的递呈，有效避免了肿瘤细胞MHC表达下调这一免疫逃逸机制；同时，CARs不仅能够与蛋白质结合，还能识别糖类、神经节苷脂、蛋白多糖、高度糖基化的蛋白，更加广谱地杀伤肿瘤细胞。
跨膜区连接胞外抗原结合域和胞内信号域，一般由二聚体膜蛋白组成，主要包括CD3ζ、CD4、CD8、CD28等，能将CARs结构锚定于T细胞膜上。
跨膜区不同的设计能影响导入的CAR基因的表达。
有研究发现，CD28的跨膜区较CD3ζ的跨膜区能更多地表达CAR基因。
胞内信号域采用免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM），通常是TCR/CD3ζFcεRIγ，当胞外区与其识别的抗原结合时，就会向胞内传导TCR 样信号。
根据胞内信号域结构的差异，CAR可划分为四代。
第一代CAR结构只有一个胞内信号组分（TCR/CD3ζ链和FcεRIγ链），能够识别靶抗原并激活Ｔ细胞，无共刺激分子，不能转导增殖信号和诱导细胞因子产生，T细胞无法增殖，因而杀伤肿瘤效果甚微。
第二代CAR细胞内增加了一个共刺激分子，如CD28、CD27、41BB（CD137）、OX40（CD134）或者可诱导共刺激分子，即便没有外源性共刺激分子T细胞也能持续增殖并释放细胞因子。
虽然二代CAR大大提高了T细胞抗肿瘤疗效，但仍未全面开启T细胞的杀伤能力，于是诞生了包含两个共刺激分子（CD28、41BB和CD3ζ）的第三代CAR。
小鼠实验表明三代CAR能够增强细胞因子的分泌、抑制肿瘤生长。
最近出现的第四代CAR又称TRUCKs，结构与前三代不同，引入促炎症细胞因子（目前主要是IL-12）和共刺激配体（41BBL和CD40L），可以在具有免疫抑制性的肿瘤微环境中通过释放促炎性因子，招募并活化更多的免疫细胞而引起更为广泛的抗肿瘤免疫效应。
并且，第四代CAR的出现可使患者免受回输前预处理治疗（全身照射或大剂量化疗）的不良反应，减少回输细胞总量，拓宽了CAR-T细胞的临床应用范围。
2CAR-T的基因转导稳定转染是效应Ｔ细胞稳定表达CAR的前提。
目前用于CAR-T的基因转导载体主要有逆转录病毒和慢病毒。
如需获得短暂存在的CAR-T细胞，则用mRNA转染。
不同于病毒载体长久地插入基因组，RNA转染是一种快速高效的转染方式。
但由于Ｔ细胞不能稳定持久存在，往往需要输注大量的T细胞以保证疗效。
此类mRNA转染的CAR-T目前还处于早期临床试验中。
3CAR-T的生产培养患者或捐赠者的外周血是Ｔ细胞的主要来源。
一般而言，T细胞是在CD3和CD28的刺激下，或与外周血单个核细胞共培养，经过10d至3周的体外培养获得。
IL-2是体外扩增中最常用的细胞因子。
有研究显示，IL-7联合IL-15能扩增出干细胞样的记忆性T细胞，能在体内更好存活，具有更强的抗肿瘤效应。