脾气虚动物模型
脾虚证动物模型的实验研究进展
专家笔谈脾虚证动物模型的实验研究进展金敬善北京市中医研究所,北京 100010 〔作者简介〕 金敬善,浙江省临海市人。
研究员、硕士生导师。
1962年毕业于南京大学生物系生化专业,并分配到北京市中医研究所生化室从事中西医结合和中医基础理论研究。
对脾虚证的实质进行了长期而深入的研究,取得省、部级成果奖15项,发表论文100余篇。
现任北京市中医研究所生化室主任,北京市中西医结合学会理事,基础理论专业委员会副主任委员,北京市生化学会医用生化专业委员会副主任委员,全国中西医结合学会基础理论专业委员会委员,消化疾病专业委员会委员等职。
1988年北京市人民政府授予有突出贡献的专家,享受国务院政府特殊津贴。
关键词 脾虚证; 动物,实验; 模型 从事脾虚证动物模型的实验研究已有20多年,从最早的大黄致慢性腹泻模型,到最近常用的病证结合模型,虽然思路不同,方法各异,但有一点应该肯定,各种模型在脾虚证实质研究的不同时期都起到了一定的推动作用。
本文简要介绍各类脾虚证动物模型造模方法,以供同道们参考。
1 根据中医理论复制动物模型111 泻下法制脾虚证动物模型用泻下法致脾虚是脾虚证模型最常用的造型方法,其中,绝大多数为苦寒泻下法。
苦寒泻下法中最常用药物为大黄、芒硝、番泻叶、大承气汤、蓖麻油、玄明粉等。
大黄脾虚模型是我国最早的脾虚模型之一,应用时间长,比较普及,并积累了较多的实验研究资料。
常用造模动物有昆明种小鼠、W istar大鼠、叙利亚种金黄地鼠、兔、驴等。
大黄、芒硝等中药以水煎剂灌服,用药量16～52g (kg.d),造模时间一般为5～40d。
造模后的动物常表现便溏、脱肛、肛门红肿、纳呆、腹胀、消瘦、四肢不收、毛枯槁、畏寒、活动频度下降、耐寒力降低、游泳时间减少、萎靡、倦卧、体重降低。
有称应用玄明粉者体重升高,体温降低,或有死亡。
此外,双耳发光强度下降,百会穴、双耳、双腋下、双天枢穴、双足三里穴体表温度下降,经穴体表电阻值下降,耳部发光强度失衡,这些变化与脾虚状态密切相关。
脾气虚证动物模型造模方法综述
脾气虚证动物模型造模方法综述季婧２００２２０７１３７上海中医药大学摘要：脾气虚证动物模型是重要的动物模型之一，其主要的造模方法有泻下法、偏食法（偏食醋法、偏食酒加醋法、偏食苦味法）、饮食失节法（限制饮食法、肥甘过度法、饥饱失常法）、耗气破气法、现代医学造模法（利血平法、秋水仙碱法、环磷酰胺法、Ｘ射线法）、综合法（耗气破气加苦寒泻下法、耗气破气加饮食失节法、劳倦过渡加苦寒泻下法、劳倦过度加饮食失节法、劳倦过度加饮食失节加苦寒泻下法、病证结合造模法）等。
本文对这几种方法作了介绍，并讨论了现存的一些问题。
关键词：脾气虚动物模型综述中医的现代研究离不开动物实验，而辩证是中医的特点之一，因此中医证动物模型的应用已成为中医科研方法体系的一个重要组成部分，是开展中医证候及中药新药实验研究的一个重要方法。
脾气虚证模型是重要的动物模型之一，近几年来不断发展和规范，现将目前主要的脾气虚证模型的造模方法作一综述。
１．泻下法李东垣在《脾胃论》中有苦寒之药损其脾胃，泄泻致虚的论述。
根据这一理论，采用苦寒泻下法来制造脾气虚证模型。
常用药物为大黄、番泻叶等。
例如有学者给ｌ８～２０ｇ的雌雄昆明种小鼠喂饲大黄水煎剂，剂量为１．２ｇ／ｋｇ，连续用药１Ｏ天①；给２００～３００ｇ的ＳＤ大鼠灌服１ｇ／ｍＬ的生大黄煎剂，剂量为２０ｍｌ／ｋｇ，每天２次，连续用药１８天②；给２２０～２５Ｏｇ的雄性ｗｉｓｔａｒ大鼠灌服１０～２０％的番泻叶水浸剂３～４ｍｌ／ｄ，连续用药１２天③；给１８０ｇ的雄性Ｗｓｉｔａｒ大鼠喂饲药物饲料（大黄：芒硝：普通饲料＝０．８５：０．１５：９．００），连续用药２２天④等来复制脾气虚证动物模型。
２．偏食法中医理论认为，五味入五脏，偏嗜五味，损伤五脏。
据此产生了不少偏食法塑造脾虚证动物模型的方法。
比较成功的有偏食醋法、偏食酒加醋法、以及偏食苦味法。
《素问生气通天论》中有云：味过于酸，肝气以津，脾气乃绝。
因此有用食醋法制造脾气虚证动物模型。
脾气虚证动物模型造模方法与模型评价的研究概述
脾气虚证动物模型造模方法与模型评价的研究概述曾梅艳;陈雪莲;宋厚盼;陈小娟;陈新怡;赵沅;蔡雄;喻嵘;谢梦洲【摘要】脾气虚证为临床常见的病证之一,证候动物模型是中医临床研究病因病机与疾病发展的基础,其中脾气虚证动物模型的建立对于脾胃病证的研究意义重大.在三十余年来的研究发展进程中,脾气虚证动物模型的构建经历了从单因素造模方法到复合因素造模方法的发展过程,研究取得一定成果的同时也暴露了一些问题.本文整理了脾气虚证动物模型的构建方法及模型评价方法,对其存在的问题进行探讨,以期为今后脾胃病的基础与临床研究提供参考.【期刊名称】《湖南中医药大学学报》【年(卷),期】2019(039)002【总页数】6页(P284-289)【关键词】脾气虚证;动物模型;模型评价【作者】曾梅艳;陈雪莲;宋厚盼;陈小娟;陈新怡;赵沅;蔡雄;喻嵘;谢梦洲【作者单位】湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,湖南长沙 410208;湖南中医药大学数字中医药协同创新中心,湖南长沙410208;湖南中医药大学中医学院,湖南长沙 410208;湖南中医药大学医学院,湖南长沙 410208;湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,湖南长沙 410208;湖南中医药大学数字中医药协同创新中心,湖南长沙410208;湖南中医药大学中医学院,湖南长沙 410208;湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,湖南长沙 410208;湖南中医药大学数字中医药协同创新中心,湖南长沙410208;湖南中医药大学中医学院,湖南长沙 410208;湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,湖南长沙 410208;湖南中医药大学数字中医药协同创新中心,湖南长沙410208;湖南中医药大学中医学院,湖南长沙410208;湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,湖南长沙 410208;湖南中医药大学数字中医药协同创新中心,湖南长沙410208;湖南中医药大学中医学院,湖南长沙 410208;湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,湖南长沙 410208;湖南中医药大学数字中医药协同创新中心,湖南长沙410208;湖南中医药大学中医学院,湖南长沙 410208;湖南中医药大学中医学院,湖南长沙 410208;湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,湖南长沙 410208;湖南中医药大学数字中医药协同创新中心,湖南长沙410208【正文语种】中文【中图分类】R223.1脾气虚证是由于脾的运化统血功能失常，导致脾不能正常地将水谷转化为精微物质，并输运到全身各个组织，引起消化、免疫等多系统和器官功能紊乱，从而导致一系列证候，临床以纳少、腹胀、便溏、疲乏为主要表现。
肺脾气虚动物模型造模方法
一、肺脾气虚动物模型的复制方法：模型的建立方法：模型组采用<实用中医证侯动物模型学》之"烟熏法肺气虚证动物模型"复制法，并复合木瓜蛋白酶雾化吸人法复制SD大鼠"肺气虚证"模型。
番泻叶冷服泻下法复制"脾气虚证"模型。
具体方法如下：将以上3组大鼠分别置于特制的lm3烟室中。
用刨花、锯末、烟叶各30-50g，另加硫磺5-10g，点燃烟熏，每日2次，每次30分钟，注意适当通风，以防大鼠窒息。
造模期6o天。
并于造模开始后第3o、32、34、36天给以上各组大鼠木瓜蛋白酶雾化吸人，具体方法如下：在大鼠清醒状态下，每次将5只大鼠放入一40×40×40cm的与超声波雾化器相连的透明雾化箱中，通过雾化管向箱中喷入用0．9％Nacl液稀释为3g的木瓜蛋白酶，每次雾化量2ml。
造模第20天开始，以浓度为lg／ml冰冷的番泻叶浸液，按lml／100g体重的剂量给大鼠灌胃，每日1次，持续3o天。
正常对照组，分室常规喂养，不做任何处理。
参考文献：李亚光，曹柏龙，贾东岩.慢性阻塞性肺疾病"肺脾气虚证"复合证型动物模型的研究.内蒙古中医药,2005年第5期：18-19.二、肺气虚动物模型的复制方法：1. 造模方法：气管内注入脂多糖(LPS)并烟熏方法复制肺气肿/COPD肺气虚证大鼠模型。
(此法最常用)具体方法：于模型复制的第1和14天用10％水合氯醛腹腔麻醉后，行气管内注入LPS200ug ／200ul，庆大霉素局部抗炎，缝合皮肤并消毒。
术后第2～13、15～28天，置于1 m×1 m ×1 m的烟室中，香烟(焦油量为12 mg，烟气烟碱量为1．1 mg)烟熏，每日30 min；自由进食、饮水。
对照组：将每只大鼠于第1、14天气管内注入0．9％氯化钠注射液200 u1；于第2～13、15-28天，置于无烟熏同样环境中饲养，余法同模型组。
脾虚证动物模型的研究进展及不足_刘越洋
・研究生论坛・脾虚证动物模型的研究进展及不足浙江中医学院2000级研究生(310053) 刘越洋 指导:周亨德 摘 要:分别从中医、西医、中西医结合3个不同的方面总结脾虚证动物模型的造模方法,并对其进行评价,提出脾虚证动物模型造模方法的不足及今后的发展趋势。
从1977年以来,脾虚证动物模型的研制已获得许多成功的经验,同时也存在一些不足之处。
本文将总结二十多年的研究进展,希望对今后的工作有所促进。
1 脾虚证动物模型的造模方法 1.1模拟中医传统病因建立脾虚证动物模型:此方法依据中医传统理论研制开发“纯”中医病证动物模型。
例如:最早问世的苦寒泻下法,以李时珍对大黄“其性苦寒,能伤元气耗阴血”及李杲“大忌苦寒之药损其脾胃”的论述为依据,运用大黄水浸煎剂[1]、大黄粉悬液[2]、大黄加蕃泻液或大黄加玄明粉水浸煎液[3]等苦寒泻下方药喂饲动物造成脾虚证动物模型。
与此同时根据“谷不入,半日则气虚,一日则气少”、“饥则损气”、“饮食自倍,肠胃乃伤”为依据,采用限量营养[4](饮食失节法和饥饱失节法)建立脾虚证动物模型。
随后,在苦寒泻下法基础上,进一步衍生了以《本草经疏》“脾虚忌下、降泄、破气"为根据的耗气破气法[5],避免苦寒泻下法伤阴亡阳之不足。
与上述方法类似,之后又相继出现根据《景岳全书》:“脾胃之伤于外者,惟劳倦最能伤脾”为依据的劳倦过度法[6]和根据脾喜燥恶湿为依据的伤湿法[7]建立脾虚证动物模型。
所有这些方法均为单因素造模,而复杂的病因是中医临床症候的一个特点,因此为弥补单因素造摸的不足又创建了劳倦过度加饮食失节法[8]、劳倦过度加饥饱失节法[9]、耗气破气加饥饱失节法[10]、苦寒泻下加饥饱失节法、苦寒泻下加劳卷过渡法、劳倦过度加饮食失节加苦寒泻下法[11]等复合因素造模法。
模拟中医传统病因建立动物模型是建立脾虚证动物模型最主要的方法,建立的模型病因、症状、客观指标和药物反应比较一致,其实验结果与中医理论较易吻合,较好体现中医辨证论治的理论。
脾虚模型的制作以及评价
脾虚模型的制作以及评价为了探讨动物脾虚的临床症状、病理变化以及通过对脾虚动物进行相关研究来评价脾虚模型的制作是否成功，我们进行了此次综合大实验。
脾位于腹内，其主要功能为主运化，统血，主肌肉四肢。
脾开窍于口，在液为涎。
脾的经脉络于胃，与胃相表里。
脾主运化，运指运输，化，即消化吸收，或者指转化，主要是指它有消化、吸收、运输营养物质及水湿的功能；脾主统血，是指脾有统摄血液在脉中正常运行，不致溢出脉外的功能；脾主肌肉四肢指脾可为肌肉四肢提供营养，肌肉四肢的生长发育及丰满有力，主要依赖脾所运化水谷精微的濡养。
脾气通于口，脾和则能知五谷，若脾失键运，则动物食欲减退。
若脾虚则运化功能失调，食欲不振，贫血，四肢无力，精神不振，脾虚泄泻，因此可以得知长时间的腹泻必然引起脾的虚弱。
大承气汤的组成是大黄、芒硝、枳实、厚朴，大黄是攻下药，芒硝是泻下药，枳实、厚朴都是理气药，其中芒硝药效更强为破气药，可以导致腹泻；番泻叶也是一种泻下药但效力于大承气汤不同，因此试验中决定设立两组实验组，一组小鼠灌服大承气汤，另一组小鼠灌服番泻叶，为了增加实验结果的可靠性，还要设立一个空白对照组，灌服生理盐水。
每组有五只小鼠。
作为一个综合大实验，实验过程所需时间长，而且是脾虚病理模型的制作，要导致脾虚也需要时间。
因此决定试验时间设定为五天，第一组小鼠每天灌服生理盐水1ml，第二组小鼠每天灌服大承气汤0.5ml，第三组小鼠每只灌服番泻叶浸出液1ml，每天观察小鼠的体温，精神状态，背毛的状况，食欲，饮水，粪便情况。
等到第五天灌药之后可以简单的通过一些实验来评价模型的制作是否成功。
脾虚之后会影响到小鼠的体力、抵抗力、免疫力。
考虑到现有的实验条件决定用耐疲劳试验（游泳试验）、耐缺氧试验（在密闭空间存活时间）、耐寒冷试验（环境低温存活时间）三个实验来评价脾虚模型是否成功。
一、药液的制备1、大承气汤的制备：其中大黄、芒硝、枳实、厚朴的成分比例为1；2；1：1，生药的含量要求是1g/ml，根据实验要求，以及实验过程中所需要的用量，称取大黄、枳实、厚朴各40g，芒硝80g，加入五倍量的水煎熬45分钟后将药液过滤进烧杯中，再加入适量的水在药渣中加热煮沸30分钟，将两次的药液混合在一起，过滤。
脾虚模型大鼠肠道菌群分布及时效性研究
脾虚模型大鼠肠道菌群分布及时效性研究一、研究背景随着人们对健康的关注度不断提高，肠道健康逐渐成为研究的热点。
肠道菌群作为肠道生态系统的重要组成部分，其平衡与否直接影响着人体的健康状况。
近年来越来越多的研究发现肠道菌群与多种疾病的发生密切相关，如肥胖、炎症性肠病、自身免疫性疾病等。
因此探讨肠道菌群在疾病发生发展中的作用，对于提高人们的健康水平具有重要意义。
脾虚是中医常见的一种病理状态，表现为脾气虚弱，运化失常导致机体各系统功能失调。
脾虚模型大鼠是一种常用的实验动物模型，用于研究脾虚证候的机制。
然而目前关于脾虚模型大鼠肠道菌群的研究较少，且多为定性研究，缺乏系统性和时效性的分析。
因此本研究旨在通过对脾虚模型大鼠肠道菌群的分布进行动态观察，探讨脾虚证候的发生机制及其与肠道菌群的关系，为进一步揭示脾虚证候的本质提供理论依据和实验支持。
1.脾虚模型大鼠的定义和特点脾虚模型大鼠是一种常见的实验动物模型，主要用于研究脾虚证候的发病机制、病理生理过程以及药物防治等方面。
脾虚模型大鼠的定义主要包括两个方面：一是具有典型的脾虚证候特征，如食欲不振、便溏、乏力等；二是在实验室条件下，通过一系列操作手段模拟脾虚状态，使大鼠出现类似人类脾虚的症状。
脾虚模型大鼠作为一种常用的实验动物模型，具有明确的定义和特点，为研究脾虚证候提供了有力支持。
在未来的研究中，可以通过对脾虚模型大鼠进行深入探讨，揭示脾虚证候的病理生理机制，为临床治疗提供理论依据。
2.肠道菌群与健康的关系肠道菌群是指生活在人体肠道内的微生物群落，包括细菌、真菌、病毒等多种生物。
近年来越来越多的研究发现肠道菌群与人类的健康密切相关，研究表明肠道菌群失调可能导致多种疾病，如肥胖、炎症性肠病、自身免疫性疾病等。
因此维护肠道菌群的平衡对于人类健康具有重要意义。
在脾虚模型大鼠的研究中，肠道菌群的分布和变化也受到了关注。
脾虚模型大鼠是指通过喂养特定食物或药物导致脾脏功能减弱的实验动物。
多因素复合建立脾气虚证大鼠模型及以方测证研究
多因素复合建立脾气虚证大鼠模型及以方测证研究摘要目的：以大黄法、游泳力竭法、饥饿法多因素复合建立一种新的脾气虚证大鼠模型。
方法：动物随机分为对照组、模型组及中药组，以多因素复合法对模型组及中药组大鼠进行造模，21天后处理部分大鼠，检测指标。
其余大鼠继续实验，以黄芪建中汤灌服中药组，生理盐水灌服对照组及模型组，21天后处理大鼠，检测指标。
结果：造模大鼠血清木糖浓度、血清肌酸磷酸激酶活性、血清胃泌素水平下降，胃窦G细胞数减少，与对照组比较差异有统计学意义(P0．05)。
结论：多因素复合复制的脾气虚证大鼠模型稳定性良好，克服了单因素造模持续时间短、自愈性强的缺点，经得起药物反证，是一种可行而稳定的脾气虚证造模方法。
关键词多因素脾气虚证大鼠模型以方测证脾气虚证的造模方法虽多，但较多存在稳定性、重复性差等不足。
本实验尝试采用大黄法、游泳力竭法、饥饿法多因素复合的方法制作脾气虚证大鼠模型，并以健脾中药反证，以期找寻一种稳定、可靠的脾气虚造模方法。
1 材料与方法1．1 动物与分组：清洁级Wistar大鼠48只，由浙江中医药大学实验动物中心提供，雌雄各半，体重180±20g。
动物随机分为对照组、模型组、中药组，各组16只。
1．2 药物与试剂：大黄制剂液：将生大黄饮片碎成粉，用蒸馏水浸泡，置于50℃水浴6h，去渣取汁。
黄芪建中汤(黄芪、桂枝、生姜各9g，炙甘草6g，白芍18g，大枣12g，饴糖30g)水煎剂：常规煎煮，浓缩为含生药6kg／L。
D—木糖试剂盒，南京建成生物工程研究所；胃泌素放免试剂盒，北京北方生物技术研究所；兔抗大鼠胃泌素抗，北京北方生物技术研究所；酶标记HRP二抗，美国DAKO公司；二氨基联苯胺(DAB)，北京中山生物技术公司。
1．3 主要仪器：SN-695型智能放免γ测量仪、LX-20型Beckman全自动生化分析仪、722型光栅分光光度计、石蜡包埋机、Leitz1512型组织切片机、OLYMPUS双目显微镜、LEICADMLB偏光摄像显微镜。
脾虚证动物模型的研究进展
脾虚证动物模型的研究进展蒋琦彭怡雯沈淑怡黄越燕*（嘉兴学院医学院，浙江嘉兴314001）【摘要】脾虚证是临床常见证型，在脾虚证模型基础上复制病证结合动物模型，可以为中医药实验研究提供中医理论基础及新的研究方案和手段。
本文对近年来脾虚证动物模型的研究现状进行了综述。
【关键词】脾虚证动物模型研究现状综述Research progress on animal medels of spleen deficiency syndromeJiang Qi，Peng Yiwen，Shen Shuyi.The Medical School of Jiaxing University，Jiaxiang，Zhejiang314001【Abstract】Spleen deficiency syndrome is a common clinical syndrome.It can provide a theoretical basis of traditional Chinese medicine and a new research program and means for experimental research of traditional Chinese medicine.This paper reviews the research status of animal models of spleen deficiency syndrome in recent years.【Key Words】Spleen deficiency syndrome Animal medels Research siatus Revlew中图分类号：R4文献标识码：B文章编号：1672-1721（2021）13-1903-03DOI：10.19435/j.1672-1721.2021.13.064以动物证候实验为科研先导，弥补临床研究的不足，揭示中医理论本质，科学评价中药新药，对推动中药现代化发展具有重要的促进作用。
近10年脾肾阳虚证动物模型研究述评
近10年脾肾阳虚证动物模型研究述评标签：动物模型；脾肾阳虚证；综述中医动物模型主要包括依据中医传统病因制备的动物模型和模拟西医病因病理制备的动物模型。
近年来，随着中医研究的具体化和规范化，研究人员越来越清楚地认识到中医“证”本质研究大多停留于临床而未能进一步深入，制约了中医研究的发展。
为此，中医“证”本质的研究已逐渐成为热点，而中医“证”的动物模型制备也因此受到越来越广泛的关注。
目前，“病”的动物模型制备有较明确的方法、验证模型的制备是否成功也有特异的理化指标。
而中医证候是指疾病发展到一定阶段时对病性、病势的概括，是机体内因和环境外因综合作用的机体反应状态。
证候的存在并非固定，会随着病情发生变化；而实验动物与人类在生理结构、组织功能等方面存在巨大差异，所以，中医“证”的动物模型制备迄今尚无明确的方法，也没有特异性理化指标和明确的判定标准。
为此，笔者以脾肾阳虚证动物模型为例，将近10年来相关制备方法进行归纳、分析和总结，以期对今后的研究有所启迪。
1 造模方法1.1 药物诱导造模法1.1.1 中药中医认为，寒为阴邪，易伤阳气。
据此，造模过程中长期给予实验动物苦寒泻下中药，使之日久伤阳，最终出现脾肾阳虚证的症状。
孙氏等[1]予大鼠15%大黄粉悬液灌胃，给药量8.9 g/（kg·d），连服9 d。
结果大鼠出现精神萎靡、倦卧、畏寒、活动频度下降、皮毛枯槁、纳呆、消瘦、便溏、脱肛及肛门红肿等脾肾阳虚证的表现。
1.1.2 中西药混合本法主要利用苦寒泻下中药和对机体（主要是肾脏）有毒副作用的西药，分别制备脾阳虚模型和肾阳虚模型，二者合而为一，共同完成脾肾阳虚证动物模型的制备。
黄氏等[2]给予雄性大鼠腺嘌呤350 mg/（kg·d）、苦寒中药（龙胆、番泻叶、栀子）煎剂4 mL/（kg·d）混合灌胃，连续2周。
结果大鼠出现精神不振、蜷缩、摄食减少、身体消瘦、尿量减少、体毛无光泽、大便稀烂等脾肾阳虚证候。
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脾气虚证动物模型
脾主运化，为后天之本。在脾脏证
候中，多以脾气虚为病理基础，脾 气虚证模型在中医证候模型中占有 重要地位。
目前脾气虚证模型生物学特性与临
床的差异,包括功能和精气夺(能量) 两个方面，主要表现在“精气夺”。
脾气虚模型诊断标准
1.慢性形成。 2.症状体征:精神倦怠。嗜卧,懒动,拱背,扎堆,眼咪。 毛色枯黄,甚至稀少。耳尾色白。严重时出现受惊动时 无神,抓取时挣扎无力,腹面被毛憔悴。软便、便溏、泄 泻。受激排便率增高。舌淡苔少。体重增长减慢或体重 下降。造模时间较长体长可减少(参考)。体温不变或略 有降低(如体温明显降低则为脾阳虚证)。食量减少。游 泳时间缩短。 3.部分指标在负荷条件下检测。 4.自然恢复期长。
3.在耗气破气法的基础上运用降气法
厚朴:积实:生大黄按3:3:2比例,200%浓度煎剂。
煎药法:生大黄、厚朴、积实先浸泡40分钟,
然后煎沸20分钟,煎液两层纱布过滤。二煎煎
沸10分钟,过滤方法同上。合并二次煎液,于60℃ 水浴浓缩成200%浓度煎液,4℃保存。
给药方法:室温下灌胃,6ml/只/天,每天灌胃1次，造模12天。
劳倦耗气、饮食不节伤脾的理论模拟出脾气虚证动物模型
并在脾气虚的基础上，加用苦寒泻下药复制出脾阳虚模型 用大辛大热药复制出脾阴虚模型
根据气血津液学说理论模拟病机模型：
根据“劳则气耗”的病机理论，可使大鼠或小鼠游泳至 耐力极限，造成“气虚”动物模型。 根据“气为血之帅，血为气之母”
以及“气随血脱”的理论
思考：实验用什么方法可造“过思伤脾”模型？？？
（4）以整体观念为指导，完善动物模型
心
合小肠、 主血脉、
肺
与大肠相表里
开窍于舌
脾
主运化五谷、水湿 主生血统血 主升清
（5）制做中医病证结合动物模型 病---疾病单元 证---症状群类型
脾虚证
几乎所有疾病某一病理阶段
寻找异同点
共同点 ---脾虚证实质
不同点 ---辨病依据
实验结果
差距
不能全面阐明中医药作用机理
（高血压 痴呆 四氯化碳 胃溃疡 哮喘 肾上腺）
临床疗效
创造建立 证候模型
脏腑辨证 病因辨证
寒凉药→寒证 温热药→热证 伤阴药→阴虚证 伤阳药→阳虚证
（2）根据脏象学说理论模拟病机模型
根据“饮食劳倦则伤脾”的理论， 采用劳倦过度、饥饱失常模拟大鼠“脾气虚”证模型。 根据苦寒泄下药“误下”可致脾失健运， 中药大黄、或番泻叶、或厚朴三物汤水浸剂造成“脾虚”证模 型 并用四君子汤反证模型成功 本研究组用复合因素：
一日而遇七十毒
水银中毒 口舌糜烂
《备急千金要方》
臣为君尝药 子为父尝药
春秋时期
尝试曼罗花毒性 李时珍
近年来误服大青龙汤致死
误服大承气汤致死
葛根汤、十味败毒散、 八味地黄丸、柴胡加龙骨牡蛎汤、 苍耳子中毒致死 乌头中毒致死 半夏泻心汤等36种方剂有副作用
《日本医药品副作用文献抄录》
究竟有毒副作用的药物安全量是多大？
湿邪
过食酸味 激怒
肝气郁结证
风、寒、湿
痹证
七情致病模型：
五志过极，损伤相应的脏腑。
根据大怒伤肝，过喜伤心，过度悲哀伤肺， 极度思虑伤脾，过度惊恐伤肾的理论
用激怒大鼠的方法——“怒伤肝”大鼠模型
用“猫吓鼠”或“人吓猫”或“爆竹吓狗” ——“ 恐伤 肾”模型 用纱布包裹尖端止血钳夹鼠尾
“肝气郁” “肝气逆” 电刺激加噪音干扰 绷带细条束缚四肢
1.体质筛选法
根据中医证候和体质的联系,在体质选择的 基础上建立脾气虚证模型是值得考虑的方法
根据其游泳时间的长短,将游泳时间较短、具
有(脾)气虚潜质的动物分在脾气虚模型组。
2.服用苦寒药模型
生大黄:厚朴:积实按2:l:l比例, 200%浓度煎剂。 煎药法:厚朴、积实先浸泡40分钟,生大黄浸泡20 分钟。然后厚朴、积实先煎沸10分钟,再下大 黄共煎10分钟,煎液二层纱布过滤。二煎煎沸 10分钟,过滤方法同上。合并二次煎液,于60℃ 水浴浓缩成200%浓度煎液,4℃保存。 给药方法：灌胃,4ml/只/次, 造模前18天3次/天, 后12天4次/天，每两次灌胃间隔3.5小时。
织形态学观察。
模拟动物模型是医学动物实验中重要的方法 在人为因素的作用下，使实验动物接受一定的损伤， 如机械、物理、化学、生物等因素，造成实验动物组 织器官或全身一定的损害，出现类似于人类疾病状态 下的机能、代谢或形态结构等方面的变化。
从而观察 人类特定病理状态的发生、发展和结局等规律 实验依据 疾病的预防、治疗，以及药物筛选、新药开发等
中医脾气虚证动物模型
中医动物实验
用现代实验的方法和手段研究中医基础 理论，以验证和发展中医理论。
医学动物实验
观察 揭示生命和疾病规律
实验动物
模拟
生理、病理特征
推广
探索生命奥秘 控制疾病 延缓衰老
中医动物模型的研究
医学理论研究,在临床上受到许多限制 如临床病例数量有限，所检查的指标不可能
很多，人体不宜进行损伤性检查，尤其是组
笼统、抽象、 模糊的概念
动物实验
内部更深层次、微观
具体、确切规律
（4）缩短研究周期，加快中医发展步伐
如：十八反中有几对相反药 恪守？修改？
动物实验 仅几个月 证明
漫长的经验积累
两种药物用量不同产生的毒性大小不同
中医动物实验研究的思路
1．复制中医动物模型的指导思想
简单挪用 西医病理模型
（1）以辨证论治为基础，复制中医“证”的动物模 型
用小量多次放血造成“血虚”模型，以至“气血两虚”模型 跌打损伤 → 血瘀证：采用外伤法造成“外伤大鼠血瘀模型”， 可出现血液流变学等的改变
（3）以病因病机理论为准则，采用多种方法 复制动物模型
病因
证候的基础
六淫 疠气 七情 饮食不节 劳逸过度
增加湿度、 浸水、 淋水 垫料潮湿
“辨证求因” “审因论治”
中毒致死量是多少？ 服用后会出现哪些不良反应？ 哪些药物在什么情况下有毒副作用？
以及发生毒副反应后如何救治？
（2）在严格控制实验条件下取得可靠的结论
病人服药时： 气候变化 地理环境 精神情绪 饮食劳逸 社会变动
“假阳性” “假阴性”
（3）为中医理论提供实验科学依据
缺乏科学实验 和其它科学手段 中医理论难以深入 揭示更为具体规律
6.利血平模型
造模方法：利血平注射液,生理盐水
稀释成0.5mg/ml,0.15mg/kghw/天 (0.1ml/只/天),1次/天,腹侧皮下注射, 造模12天。
5.劳倦过度模型
劳倦饥饱法
劳倦法是用托盘将实验组鼠笼固定一 震荡器上用继电器控制其震荡,每日 震荡10小时左右,共震荡33天。其饥 饱法是在震荡的同时,用普通的混合 饲料喂养隔日给食,定量给食。
5.劳倦过度模型
劳倦伤脾法
建模方法：游泳消耗体力法22℃水 温,动物游泳至连续“冒泡”5次终止。 一2次/日,两次间间隔5小时,造模12天。
4.饮食失节模型
伤湿法
根据脾喜燥恶湿,将铺设潮湿碎创花的鼠笼置
于造型箱的隔板上,箱底部的磁盘中盛满水,箱
顶部有通气孔,隔板周边放置冰块,顶部两边有
通气窗户。造型箱温度为(16±1) ℃,湿度是 (95±3)%,持续9天。
4.饮食失节模型
饮食偏嗜法
造模方法：日龄为20日左右造模组小鼠 20只,在18~22℃室温下喂养, 给与喂饲 甘兰,每二天加喂猪脂一次,数量不限,每 批喂养九天。 实验结果：模型组小鼠不同程度出现体 重减轻，体温下降，纳呆、泄泻、脱肛、 消瘦，畏寒蜷缩、四肢不收、萎靡不振、 毛色枯稿、耐寒力低现象。
现代医学 动物模型
以“病”的生理病理变化为中心 包括急性动物实验和慢性动物实验
中医 动物模 型
以“证”的变化为中心， 包括中医证候模型和病证结合模型 慢性动物试验
中医动物实验研究的意义
克服传统中医学认识问题的笼统性、模糊性和经验性 标志着中医学从经验医学步入了实验医学的新时代
（1）实验动物做人类的替身以研究中药的毒副作用