实验六 小鼠巨噬细胞吞噬现象的观察
巨噬细胞吞噬实验报告结果分析
巨噬细胞吞噬实验报告结果分析
【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞,局域活跃的吞噬功能。
吞噬细胞受抗原刺激后活化,可使吞噬功能明显增强。
在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞,30min后处死小鼠,取出腹腔液,以冷亚甲蓝染色,显微镜下计数吞噬红细胞的百分数,及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目,以判断吞噬细胞的杀伤能力,由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。
【方法】体内法: (1)实验前3小时,小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
(2)实验时,每只小鼠注射鸡红细胞1ml,轻柔腹部,使其在腹腔中分布均匀,利于吞噬。
(3)30min后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹腔暴露肠管,用载玻片轻擦腹腔,使腹腔液均匀涂于载玻片过,再滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液,盖上盖玻片。
(4)高倍镜下进行观察,计数。
【结果分析】在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液,可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。
巨噬细胞小鼠实验报告
一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。
2. 研究巨噬细胞在小鼠非特异性免疫中的作用。
3. 探讨不同刺激条件下巨噬细胞吞噬功能的变化。
二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中的重要组成部分，具有强大的吞噬和清除病原微生物、衰老细胞和坏死组织的能力。
吞噬作用是巨噬细胞识别、结合并摄取病原微生物或异物的重要机制。
本实验通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用，评估其吞噬功能。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：6-8周龄健康小白鼠。
2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、无菌生理盐水、冷亚甲蓝染色液、甲醇、橄榄油等。
3. 实验仪器：显微镜、离心机、恒温水浴箱、计时器等。
四、实验方法1. 实验分组：将小白鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。
2. 实验操作：（1）实验组：每只小鼠腹腔注射1ml鸡红细胞悬液，对照组腹腔注射1ml无菌生理盐水。
（2）注射后30分钟，将小鼠处死，无菌操作取出腹腔液。
（3）将腹腔液离心，弃去上清液，加入适量冷亚甲蓝染色液，混匀后制片。
（4）显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况。
3. 数据统计：计算吞噬鸡红细胞的巨噬细胞百分比和吞噬指数。
五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的百分比和吞噬指数均显著高于对照组（P<0.05）。
2. 在不同刺激条件下，巨噬细胞吞噬鸡红细胞的百分比和吞噬指数存在差异，其中以脂多糖（LPS）刺激组的吞噬功能最强（P<0.05）。
六、实验分析1. 实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，且吞噬功能受到LPS等刺激因素的影响。
2. 巨噬细胞在小鼠非特异性免疫中发挥重要作用，其吞噬功能与机体抵抗力密切相关。
3. 本实验为研究巨噬细胞在免疫调节中的作用提供了实验依据。
七、实验讨论1. 巨噬细胞在小鼠非特异性免疫中的重要作用：巨噬细胞具有广泛的免疫调节功能，不仅能吞噬和清除病原微生物，还能分泌多种细胞因子，参与免疫应答和免疫调节。
巨噬细胞观察实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本形态和生物学特性。
2. 掌握巨噬细胞的分离和培养方法。
3. 观察巨噬细胞的吞噬功能，并分析其吞噬能力。
二、实验原理巨噬细胞是一种具有吞噬功能的免疫细胞，属于单核吞噬细胞系统。
在机体免疫应答中，巨噬细胞起着重要的作用。
本实验通过分离和培养小鼠腹腔巨噬细胞，观察其吞噬功能，以了解巨噬细胞在免疫应答中的作用。
三、实验材料1. 实验动物：小鼠2. 实验试剂：无菌生理盐水、台盼蓝染液、鸡红细胞悬液、小牛血清、RPMI-1640培养基等3. 实验设备：解剖显微镜、手术器械、细胞培养箱、细胞培养皿、离心机、显微镜等四、实验方法1. 巨噬细胞的分离和培养（1）无菌操作下，取小鼠腹腔液，加入等体积的生理盐水，混匀。
（2）将混合液以1 000 r/min离心5 min，弃上清液。
（3）加入适量RPMI-1640培养基，轻轻吹打，使细胞悬浮。
（4）将细胞悬液接种于培养皿中，置于细胞培养箱中培养。
2. 巨噬细胞的吞噬功能观察（1）将培养好的巨噬细胞悬液，以1 000 r/min离心5 min，弃上清液。
（2）加入台盼蓝染液，染色5 min。
（3）用生理盐水冲洗3次，弃上清液。
（4）加入鸡红细胞悬液，混匀。
（5）将细胞悬液置于细胞培养箱中培养30 min。
（6）取出细胞，以1 000 r/min离心5 min，弃上清液。
（7）加入适量RPMI-1640培养基，轻轻吹打，使细胞悬浮。
（8）将细胞悬液滴于载玻片上，置于显微镜下观察。
五、实验结果与分析1. 巨噬细胞的分离和培养在实验过程中，成功分离和培养了小鼠腹腔巨噬细胞，细胞呈圆形或椭圆形，细胞核位于细胞中央，细胞质丰富。
2. 巨噬细胞的吞噬功能观察在显微镜下观察，发现巨噬细胞对鸡红细胞具有吞噬作用。
部分巨噬细胞吞噬了鸡红细胞，细胞质内出现红色颗粒。
3. 吞噬能力分析通过观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的数量，可以评估其吞噬能力。
实验结果显示，巨噬细胞的吞噬能力较强，吞噬鸡红细胞的数量较多。
巨噬细胞吞噬现象的实验观察
巨噬细胞吞噬现象的实验观察一．实验目的：1.观察巨噬细胞吞噬全过程和意义。
2.掌握小鼠腹腔注射给药和颈椎脱臼处死方法。
二．实验原理吞噬细胞由骨髓干细胞分化生成，具有非特异性免疫功能。
当病原微生物或其他异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又有趋化性，能响应招引因子的招引，产生活跃的变形运动，主动向病原体或异物移动，在接触到病原体或异物时，即伸出伪足将之包围，并内吞入细胞，形成吞嗜体，继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合形成吞噬性溶酶体，通过其水解酶作用，将病原体杀死，消化分解，最后将不能消化的残渣排除细胞外。
三．实验用品1.器材：显微镜解剖盘剪刀镊子载玻片盖玻片注射器吸管2.试剂：A.0.85%生理盐水B.alsever溶液（葡萄糖2.05g 柠檬酸钠0.89g 柠檬酸0.05g 氯化钠0.42g 蒸馏水100ml）将alsever溶液ph调至7.2，高压灭菌10分钟，保存于4℃冰箱中。
C.0.4％台盼蓝染液D.4.0％淀粉肉汤（牛肉膏0.3g 蛋白胨1.0g 氯化钠0.5g 蒸馏水100ml 含台盼蓝染液）加热后加入可溶性淀粉6.0g，促使溶解，再煮沸灭菌，置4℃冰箱中保存，用时水浴融化，加入适量台盼蓝染液混匀，使其成蓝色。
3.材料:A.小白鼠B．1％鸡红细胞悬液（从健康鸡翼静脉采血1ml，放入盛有4mlalsever溶液瓶中，混匀置4℃冰箱中备用。
用时加0.85％生理盐水离心，洗涤两次，再用生理盐水配成1％浓度悬液。
）四．实验方法1.实验前一天给小白鼠腹腔注射6％淀粉肉汤1ml。
2.试验时，将注射过淀粉肉汤的小白鼠腹腔注射1％鸡红细胞悬液1ml，轻按小鼠腹部，使悬液分散。
3.二十分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠。
4.将小鼠置于解剖盘中，剪开腹部，把内脏推向一侧，用不装针头的注射器或吸管取腹腔液。
5.取一干净载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻片，置显微镜下观察。
五．实验结果10*100 图中椭圆形有核淡黄色细胞为鸡红细胞；较大的呈圆形或不规则细胞，内含蓝色颗粒的为巨噬细胞，仔细观察玻片，可见巨噬细胞吞噬红细胞的过程。
实验七、小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察
三、实验用品 、
1、仪器设备：显微镜、注射器、注射针头、吸管、试管架、 剪刀、解剖刀、解剖镊、载玻片、盖玻片。 2、试剂： ①0.85%生理盐水 ②4%台盼蓝染液：称0.2g台盼蓝，再加入0.85%生理盐水50 ml即可。 ③6%的淀粉肉汤（含台盼蓝染液）： 将0.3g牛肉膏、1.0g蛋白胨、0.5g氯化钠放入100 ml蒸馏 水中，加热后加入可溶性淀粉6.0g，溶解后煮沸灭菌，置 4℃冰箱保存。用时水浴融化，加入适量4%台盼蓝染液混 匀，使其呈蓝色。
④Alsever溶液： 称取2.05g葡萄糖、 0.89g柠檬酸钠 Na9C6H5O7.2H2O)、0.05g柠檬酸 （C6H6O7.H2O）和 0.42g氯化钠，用蒸馏水定 容至100ml，调PH 至7.2，过滤灭菌或高压灭菌 10min，置4℃冰箱保存。
四、实验材料： 实验材料：
1、小白鼠 2、1%鸡红细胞悬液 1%鸡红细胞悬液制备： 从集市买一只健康活鸡现杀取血5ml（防止污染），放 入盛有20ml Alsever溶液瓶中，混匀后置4℃冰箱保存备 用（2 周内使用）。使用前，取用Alsever’s 液保存的新鲜 鸡血5ml ， 加入8ml 的0.85% 的NaCl 溶液，小心混匀， 1500 r/min 离心5min，如此洗涤3 次，最后配成1%的鸡 红细胞悬液。
六、实验结果
在高倍镜下，可见到圆形或形状不规则的巨噬细胞， 其胞质中含有数量不等的蓝色颗粒（为吞入的含台盼蓝的 淀粉肉汤形成的吞噬泡），还可见少量淡黄色椭圆形有核 的鸡红细胞。慢慢移动玻片标本，仔细观察巨噬细胞吞噬 鸡红细胞的过程：有的鸡红细胞（一个至多个）紧贴于巨 噬细胞表面；有的巨噬细胞已将一至数个鸡红细胞部分吞 入；有的巨噬细胞已吞入了一个或几个红细胞，形成了椭 圆形吞噬泡；有的巨噬细胞内的吞噬泡已与溶酶体融合正 在被消化，体积缩小呈圆形。将所见到的处在不同吞噬阶 段的巨噬细胞动态地联系起来，想一想吞噬作用的全过程。
吞噬现象观察实验报告
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。
2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程，加深对吞噬作用机制的理解。
二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞，能够识别、吞噬并消化各种抗原物质，如细菌、病毒、细胞碎片等。
在本实验中，我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用，了解吞噬作用的过程和机制。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：清洁级雄性小鼠（体重20-25g）。
2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。
3. 实验仪器：超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 麻醉小鼠，打开腹腔，收集腹腔巨噬细胞。
2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次，制成细胞悬液。
3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合，置于37℃水浴中温育30分钟。
4. 取出混合液，用台盼蓝染色液染色，置于显微镜下观察。
5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。
五、实验结果在显微镜下观察到，巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。
具体表现为：1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞，表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。
2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变。
3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。
六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，这与巨噬细胞的免疫功能相一致。
2. 吞噬过程中，巨噬细胞表面出现鸡红细胞，说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。
3. 吞噬后，巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变，说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。
4. 吞噬鸡红细胞过程中，部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化，说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。
七、实验结论通过本实验，我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，加深了对吞噬作用机制的理解。
实验结果表明，巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用，具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。
巨噬细胞吞噬实验沉淀实验实验报告
巨噬细胞吞噬实验沉淀实验实验报告实验二一巨噬细胞吞噬功能实验【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞，局域活跃的吞噬功能。
吞噬细胞受抗原刺激后活化，可使吞噬功能明显增强。
在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞，30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷亚甲蓝染色，显微镜下计数吞噬红细胞的百分数，及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目，以判断吞噬细胞的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。
【方法】体内法：（1）实验前3小时，小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
（2）实验时，每只小鼠注射鸡红细胞1ml，轻柔腹部，使其在腹腔中分布均匀，利于吞噬。
（3）30min后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用载玻片轻擦腹腔，使腹腔液均匀涂于载玻片过，再滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液，盖上盖玻片。
（4）高倍镜下进行观察，计数。
【结果】【分析】在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液，可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。
二沉淀反应双向琼脂扩散实验【原理】将可溶性抗原与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内，二者均可发生扩散，并且随扩散距离的增大浓度降低，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。
本实验是定性实验，常用于分析抗原抗体的纯度关系以及相互关系。
【方法】（1）制板：将熔化的1%琼脂加在载玻片上约5ml（2）打孔：待琼脂凝固后，将载玻片置于打孔样板上，用打孔器打孔（3）加样：在中央孔内加抗体，上下两孔加抗原1，左右加抗原二，每孔加10μl（4）结果观察：将琼脂板置于湿盒，37℃一天后观察结果。
【结果】在中央孔与添加抗原1的孔之间出现沉淀线，有抗原抗体反应，为阳性反应，说明抗原1与抗体相对应。
中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线，说明抗原2与抗体之间不相对应。
【分析】抗体与抗原发生扩散时，随扩散距离的增大浓度降低，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验
首先用吸管吸取少许稀释后的单细胞悬液，从盖片 端滴一小滴（不宜过多），液体自行向内渗入，静置数 分钟后，再放在微镜下观察计数。
温育30min。
取1滴混合液置玻片上加盖玻片，在高倍镜下观察 计数。
高倍镜下观察计算： 吞噬率％=(吞噬白色念珠菌的巨噬细胞数/100个巨噬
细胞)×100％
吞噬指数％=100个巨噬细胞中吞噬白色念珠菌总数 /100个巨噬细胞
**(吞噬指数式中巨噬细胞为阳性吞噬细胞)
注意事项
1、菌与细胞混合后充分混匀非常重要。对于此实验，菌 与吞噬细胞之比10：1时吞噬作用容易观察和计数。但 是吞噬效果好，能真正反映实际情况又可被检测的比 例为1：1。
计数时，若细胞位于小方格的线上，应遵循“数上 线不数下线，数左线不数右线”的原则，以减少误差。 计数应重复3次，取其平均值。
数完毕后，依下式计算： 每1mL白细胞悬液细胞数＝（4个中方格细胞总数 /4） ×104× 稀释倍数
每1mL红细胞悬液细胞数＝（80个小方格细胞总数 /80） ×400×104× 稀释倍数
2、菌和细胞在摇床中作用的时间不超过30 min，如果在 37C 条件下作用时间过长，被吞噬的菌很快会被裂解， 也就不能计数为吞噬了菌的细胞。
3、滴片时加入的细胞数依细胞的大小而定，如果使用的 吞噬细胞是细胞系，细胞体积较大，那么加入的细胞 数就相应的少一点。
血球计数板计数法
血球计数板是由一块厚玻片特制而成，其中央有 两个计数室。每个计数室划分出9个大方格（见下图）， 每格面积1mm2，加盖玻片后的深度为0.1mm。因此， 每大方格容积为0.1mm3。
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单核细胞（上）和巨噬细胞（下）
单核巨噬细胞吞噬过程示意图
巨噬细胞正在吞噬衰老的红细胞
巨噬细胞吞噬细菌（电镜）
肺巨噬细胞吞噬大肠杆菌（电镜）
三、实验仪器、材料和试剂
1. 仪器、用具：显微镜、高压灭菌锅、解剖盘、解 剖剪、1ml注射器、吸管、载玻片、盖玻片。 2. 材料：小鼠（体重20g左右），鸡血。 3. 试剂： 4%台盼蓝染液：台盼蓝染粉 0.4克，加0.85%生 理盐水100ml。 6%淀粉肉汤（含0.3%台盼蓝）：牛肉膏 0.3克； 蛋白胨 1.0克；氯化钠0.5克；蒸馏水 100ml。加热后, 可加入6.0克可溶性淀粉，促使溶解，再煮沸灭菌， 置40C冰箱保存，用时水浴熔化，加入适量4%台盼 蓝染液混匀，使呈蓝色。
观察时，将视野光线调暗。在高倍镜下，先分辨清 鸡红细胞和巨噬细胞。鸡红细胞为淡黄色、椭圆形、 有核的细胞。而数量较多、体积较大圆形或不规则 的细胞，其表面有许多似毛刺装的小突起（伪足）， 胞质中有数量不等的蓝色颗粒（为吞入的含台盼蓝 淀粉肉汤形成的吞噬泡）即为巨噬细胞。变换视野 仔细观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程。可见有的 鸡红细胞（一至多个）紧贴附于巨噬细胞的表面； 有的巨噬细胞已将1至数个红细胞部分吞入；有的 巨噬细胞已吞入一个或几个红细胞在胞质中刚刚形 成椭圆形的吞噬泡；有的巨噬细胞内的吞噬泡体积 缩小，并呈现圆形，这是与初级溶酶体发生融合， 泡内物正在被消化分解。
四、方法与步骤
1. 实验前2d， 每天给小白鼠腹 腔注射6%淀粉 肉汤液（含台盼 蓝）1ml。 2.实验前，再向 腹腔注射1ml 1%鸡红细胞悬 液，并轻揉腹部， 使鸡红细胞悬液 分散。
3. 20-30min后，用脊椎脱臼法处死小鼠（右手抓住 鼠尾，用力向后拉，左手拇指与食指同时按著鼠头 后的颈部，使脊椎与脑髓间断开致死）。 4. 迅速剖开腹腔，用未装针头的注射器或吸管吸取 腹腔液。 5. 取一张干净载 玻片，滴一滴腹 腔液，盖上盖玻 片，放置2分钟~3 分钟后在显微镜下 镜检。
五、实验结果
六．注意事项
1、给小白鼠腹腔注射6%淀粉肉汤时要注意 进针适度，注射量要合适。 2、给小白鼠腹腔注射时，抓小鼠不要Байду номын сангаас 紧，以免小鼠死亡。 3、使用的载玻片要很干净。
七、实验讨论
1．简述细胞吞噬作用的原理。 2．实验结果的分析。
实验六 巨噬细胞吞噬现象的观察
一、 实验目的
1.通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的试 验，了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功 能。 2.了解巨噬细胞在机体非特异免疫中的重 要作用。
二、实验原理
高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细 胞，具有吞噬作用的功能。它们广泛分布在组织和 血液中，在机体的非特异免疫功能中起着重要作用。 当病原微生物或其他异物侵入机体时，能招引巨噬 细胞，而巨噬细胞又有趋化性，它通过产生活跃的 变形运动，主动向病原体和异物移行聚集，首先把 异物吸附在细胞表面，随之，吸附区域的细胞膜向 内凹陷，伸出伪足包围异物，并吞入胞质，形成吞 噬泡，继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合， 形成吞噬溶酶体，把病原体杀死，异物消化分解。 巨噬细胞吞噬异物的能力在一定程度上反映了机体 免疫水平的高低。