色氨酸残基荧光猝灭法
色氨酸荧光猝灭法测定海带中碘离子

色氨酸荧光猝灭法测定海带中碘离子闫爽;王黎颖;王聪;芦尚德;杨佳丽;徐仰仓【摘要】研究碘离子对色氨酸的荧光猝灭效应,旨在建立色氨酸荧光猝灭法测定海带中碘离子.在pH=6.0的磷酸缓冲液中,加入不同浓度的碘离子,测定色氨酸溶液的荧光光谱及强度的变化.试验表明,色氨酸具有释放荧光的特性,最佳激发和发射波长分别为223 nm和352 nm.碘离子对色氨酸的荧光具有猝灭作用.色氨酸浓度为10 μmol/L时,碘离子对色氨酸的荧光猝灭呈线性关系,根据猝灭程度可计算出碘离子的浓度,该方法的检测限为1.64 μmol/L.根据该方法检测了两种海带样品中的碘离子,其浓度为637μg/g干重(LaminariajaponicaA resch和621 μg/g干重(Saccharinajaponica.%The novelmethod of determining iodide ion content in kelp was established by the reaction of iodide ionquenchingtryptophan fluorescenceintensity.Under phosphate buffer medium at pH =6.0,adding different concentrations of iodide into fluorophore solutions with given concentrations,fluorescence intensives were measured,tried several type of fluorophores,found tryptophan hadcharacteristics of fluorescence releasing.Experiments showedthat the fluorescence optimum excitation spectra of tryptophan and its emission spectra were 223 nm and 352 nm.When the concentration of tryptophan was 10 μmol/L,the iodide ionhad a liner relation of tryptophan fluorescence quenching.According to the degree of quenching couldcalculate the concentration of the iodide ion,the detection limit was 1.64 μmol/L.Two kinds of kelp was tested according to the method.In Laminaria japonica A resch the concentration of the iodide ion was 637 μg/g,and it was 621 μg/g in Saccharinajaponica.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2017(038)003【总页数】4页(P139-142)【关键词】荧光猝灭;色氨酸;碘离子【作者】闫爽;王黎颖;王聪;芦尚德;杨佳丽;徐仰仓【作者单位】天津科技大学海洋与环境学院,天津300457;天津科技大学海洋与环境学院,天津300457;天津科技大学海洋与环境学院,天津300457;天津科技大学海洋与环境学院,天津300457;天津科技大学海洋与环境学院,天津300457;天津科技大学海洋与环境学院,天津300457;天津科技大学天津市海洋资源与化学重点实验室,天津300457【正文语种】中文目前,有很多测定碘离子的方法,如离子选择电极法[1-3]、火焰原子吸收法、分光光度法[4-5]、容量法等[6]。
色氨酸残基荧光猝灭法

色氨酸残基荧光猝灭法以色氨酸残基荧光猝灭法是一种常用的生物分析技术,它利用色氨酸残基的荧光特性来研究蛋白质的结构和功能。
本文将从荧光猝灭的原理、应用和优缺点等方面进行介绍。
荧光猝灭是指某些物质能够抑制荧光分子的荧光发射,从而降低荧光强度的现象。
在以色氨酸残基荧光猝灭法中,荧光猝灭剂与色氨酸残基相互作用,使得色氨酸残基的荧光发射受到抑制。
这种现象可以用斯特恩-沃尔默方程来描述,即F0/F = 1 + Ksv[Q],其中F0和F分别表示荧光猝灭前后的荧光强度,Ksv为荧光猝灭常数,[Q]为荧光猝灭剂的浓度。
以色氨酸残基荧光猝灭法在生物分析中有广泛的应用。
首先,它可以用来研究蛋白质的结构和构象变化。
由于色氨酸残基在蛋白质中的位置和环境不同,其荧光特性也会有所不同。
因此,通过测量荧光猝灭的程度,可以推断出色氨酸残基的位置和构象变化。
其次,它还可以用来研究蛋白质的相互作用。
当两个蛋白质相互作用时,它们之间的距离和环境也会发生变化,从而影响色氨酸残基的荧光发射。
因此,通过测量荧光猝灭的程度,可以推断出蛋白质之间的相互作用。
然而,以色氨酸残基荧光猝灭法也存在一些缺点。
首先,荧光猝灭剂的选择和浓度需要仔细控制,否则会影响实验结果。
其次,荧光猝灭法只能研究色氨酸残基的荧光特性,而不能研究其他氨基酸残基的特性。
最后,荧光猝灭法需要使用荧光光谱仪等专业设备,成本较高。
以色氨酸残基荧光猝灭法是一种常用的生物分析技术,它可以用来研究蛋白质的结构和功能。
但是,它也存在一些缺点,需要仔细控制实验条件和设备选择。
未来,随着技术的不断发展,相信以色氨酸残基荧光猝灭法会有更广泛的应用和更高的精度。
色氨酸荧光猝灭法测定海带中碘离子

液 中, 加入不同浓度的碘 离子 , 测定色氨酸溶液的荧光光谱及强度的变化 。 试验表 明, 色氨酸具有释放荧光的特性 , 最佳
激发和发射波长分别为 2 2 3 n m和 3 5 2n m。 碘 离子对 色氨酸的荧光具有猝灭作用。 色氨酸浓度 为 1 0 p  ̄ m o l / L时, 碘 离子对 色氨酸的荧光猝灭呈线性关 系, 根据猝灭程度可计 算出碘离子的浓度 , 该方法的检测限为 1 . 6 4 p  ̄ mo l / L 。 根据该方法检测
标 准 与检 测
D OI : 1 0 . 3 9 6 9  ̄ . i s s n . 1 0 0 5 - 6 5 2 1 .Байду номын сангаас2 0 1 7 . 0 3 . 0 3 0
食品研究与拜发
F o o d Re s e a r c h An d De v e l o
2 0 1 7年 2月
c o n c e n t r a t i o n s o f i o d i d e i n t o l f u o r o p h o r e s o l u t i o n s wi t h g i v e n c o n c e n t r a t i o n s, l f u o r e s c e n c e i n t e n s i v e s we r e me a —
第 3 8卷第 3期
色氨酸荧光猝灭法测定海带中碘离子
闫爽 , , 王黎颖 , 王聪 , 芦 尚德 , 杨佳 丽 , 徐仰仓 - ‘
( 1 . 天津科技 大学 海洋与环境学 院 , 天津 3 0 0 4 5 7 ; 2 . 天津科技大学 天津市海洋资源与化学重点实验室 ,
β-环糊精增敏荧光猝灭法对粮食样品中L-色氨酸的分析研究

β-环糊精增敏荧光猝灭法对粮食样品中L-色氨酸的分析研究陈莹洁;徐素琴;朱霞石;姜婕【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2009(28)9【摘要】研究了Se(Ⅳ)-丁基罗丹明B与L-色氨酸结合物在β-环糊精(β-CD)介质中的荧光光谱行为.加入L-色氨酸可使Se(Ⅳ)-丁基罗丹明B体系发生荧光猝灭,β-CD的加入导致溶液中荧光猝灭值ΔIF增加,且L-色氨酸的质量浓度与ΔIF呈良好的线性关系,据此建立了荧光猝灭测定L-色氨酸的新方法.优化了实验条件,结果表明:β-CD对测定具有增敏作用,色氨酸的质量浓度在1.0 ~30.0 mg/L范围内与荧光强度呈线性关系,回归方程为ΔIF =399.1ρ(mg/L)+258.9,相关系数r=0.999 3,检出限为0.21 mg/L.将方法用于粮食样品中L-色氨酸的测定,结果令人满意.【总页数】4页(P1062-1065)【作者】陈莹洁;徐素琴;朱霞石;姜婕【作者单位】扬州市药检所,江苏,扬州,225002;扬州大学,化学化工学院,江苏,扬州,225002;扬州大学,化学化工学院,江苏,扬州,225002;扬州大学,化学化工学院,江苏,扬州,225002【正文语种】中文【中图分类】TL271.5;R977.4【相关文献】1.离子液体-微乳液协同增敏荧光猝灭法测定L-色氨酸的研究 [J], 徐素琴;孙园园;朱霞石2.离子液体-微乳液协同增敏荧光猝灭法测定L-色氨酸的研究 [J], 徐素琴;孙园园;朱霞石3.环糊精超分子体系的手性识别研究——D,L-色氨酸对映体的手性识别荧光分析法 [J], 谢剑炜4.β-环糊精增敏荧光猝灭法测定水中微量银离子 [J], 翁文婷5.白杨素增敏荧光法测定粮食样品中的痕量锰 [J], 姚俊丽;滕秀兰;马永钧;周敏;潘玉莹;杨海青因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
1,3,5-三羟基苯与BSA相互作用的荧光光谱研究

1,3,5-三羟基苯与BSA相互作用的荧光光谱研究冯建华;吴刚;汪丽;徐婷婷【摘要】在模拟生理条件下,运用荧光光谱法研究了1,3,5‐三羟基苯与牛血清蛋白(BSA )分子间的相互作用,确定了二者之间的结合常数、结合位点数及其猝灭常数。
二者之间相互作用导致的荧光猝灭是一种动态猝灭机理,与BSA的结合位点数近似等于0.6。
利用同步荧光光谱研究了1,3,5‐三羟基苯与BSA作用产生的蛋白质构象,结果表明,二者之间的相互作用导致了在白蛋白内部产生了局部结构的伸展,同时在色氨酸和酪氨酸残基的局部两极方向上产生了结构的变化。
%The interactions between bovine serum albumin (BSA) and 1 ,3 ,5‐Trihydroxybenzene under simulated physiological conditions were experimented by fluorescence spectroscopy . The binding parameters (binding constants and number of binding sites) and quenching constants were determined . The quenching mechanism was assigned to a dynamic quenching interaction .Number of binding is approximately about 0 .6 for BSA .The effect of 1 ,3 ,5‐Trihydroxybenzene on the protein conformation was investigated by using synchronous fluorescence spectroscopy .The results revealed partial unfolding in the albumins upon interaction ,as well as changes in the local polarity around the tryptophan (Trp) and tyrosine(Tyr) residues .【期刊名称】《滁州学院学报》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】5页(P52-56)【关键词】1 ,3 ,5-三羟基苯;牛血清蛋白(BSA);相互作用;荧光光谱;猝灭【作者】冯建华;吴刚;汪丽;徐婷婷【作者单位】滁州学院材料与化学工程学院安徽滁州239000;滁州学院材料与化学工程学院安徽滁州239000;滁州学院材料与化学工程学院安徽滁州239000;滁州学院材料与化学工程学院安徽滁州239000【正文语种】中文【中图分类】O657.3蛋白质就像由分子组成的机器,它是细胞的基本组成模块和生命控制中心,蛋白质所具有的功能是非常多样化的,如物质酶的活性和输送就是在相关蛋白质的控制作用下基于对目标分子的高度特定的一种识别。
菊粉酶中色氨酸残基的化学修饰及其荧光光谱

根据 。 船 的下降数值计算被氧化修饰 的 Tp r 残基数. 当加入 8 N S :达到最低值 , 5 B 时, 8 o 再加入 N S As B , 2有所 回升 , o 说明 Tp残基已全部被修饰. r 经计算 , B N S共修饰 了 1 个 T 残基 ,由于酶变性后分子 内部氨基酸完全暴露 , 7 p i 可全部被修饰 , 所以
L, ) 测定 20n 8 m处的吸光值 , 按照 Sad 方法计算修饰的 Tp pne r 残基数.当加入 5 LN S时 , 2达 0 B A8 0 到最低值 , 此时修饰 了约 5 Tp 个 r 残基 , 而酶分子 中共有 1 7个 Tp r 残基 , 说明在天然条件下 , 菊粉酶
分子表面或临近分子表面可能有 5 Tp残基 , 个 r 而分子 内部可能有 1 个 Tp 2 r 残基.
的尿素 , 加热煮沸 5rn 置于透析袋 中, i, a 除去尿素. Fl 酚法测定酶 的质量浓度为 0 18m / L 用 on i .0 gm ,
此时酶活力为 0 说明酶已完全变性 . , 再用不同量 的 N S 4m o L 修饰 , B ( m l ) / 测其 20n 8 m处的吸光值 ,
R -3 1C型荧光分光光度计 ( 本岛津制作所) F 0P 5 日 .
12 菊粉酶的活力测定 .
取 0 1m 0 gm 菊粉酶液( 00 o L p 45醋酸盐缓冲液配 . L0 2m / L . 用 .2m l , H= . /
制) 19m m / L菊粉溶液 ( 与 . L5 s m 用上述缓冲液配制) 混合 , 5 于 5℃反应 3 i, 0r n 然后用 35二硝基 a ,一
的色氨酸残基数 :
= 1 3  ̄l M . 1V × ×W ( 5 0 ) 牲 × 5 0
研究方法荧光光谱法荧光猝灭过程可...

::.,.浙江工业大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的研究成果。
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作者签名:王婧日期珈侈年月矽日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。
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、不保密口。
请在以上相应方框内打“√”作者签名:工靖日期:≯了年月为日日期:必,;年‘月, 日导师签名:毛麦屯岳浙江工业大学硕士论文多酚类化合物与牛血清蛋白相互作用的研究摘要本论文采用光谱技术包括荧光光谱法、同步荧光法、圆二色谱法和紫外.可见光谱法和分子模拟技术相结合的方法,研究了多酚类化合物与牛血清白蛋白的相互作用。
实验结果表明,矢车菊素..葡萄糖苷..及异甘草素对的猝灭类型均为静态猝灭。
.及与的结合位点数约为,形成: 结合物。
时,与..和的结合常数分别为.×和.×。
由与.和结合过程中热力学参数测定结果表明,与、的结合过程是一个自发过程。
而且,焓变△和熵变均为负值,表明了与.及结合过程中的主要作用力是氢键和范德华力。
从圆二色谱及同步荧光结果可知,..与结合后,对的二级结构影响较小。
而与结合后,二级结构及色氨酸和酪氨酸附近的微环境可能发生了改变。
分子模拟结果表明,一结合在的’位上,且.与上的,,,残基形成了氢键。
而结合在的位上,与上的,,,残基形成了氢键。
L-瓜氨酸与牛血清白蛋白相互作用的研究

L-瓜氨酸与牛血清白蛋白相互作用的研究屈冉;张骁;张鹏【摘要】采用荧光猝灭法以及紫外吸收差谱法研究了L-瓜氨酸与牛血清白蛋白在不同pH值下的相互作用机制,初步了解到L-瓜氨酸对牛血清白蛋白有猝灭作用,其猝灭机制为静态猝灭.利用Stern-Volmer方程求解出的各种参数表明pH值对两者的结合能力影响较大.同步荧光分析发现L-瓜氨酸的存在没有改变牛血清白蛋白的分子构象,依据F(o)rster非辐射能量转移理论,确定了给体-受体间的结合距离和能量转移效率.%Fluorescence quenching and ultraviolet absorption subtraction have been employed to study the mechanism of interaction between L-citrulline and bovine serum albumin (BSA) at different pH. The preliminary results show that L-citrulline has the function of quenching BSA, and the quenching mechanism is static. Relevant parameters were obtained using the Stern-Volmer equation. The results showed that pH has a large impact on the binding ability of L-citrulline and BSA. Synchronous fluorescence analysis showed that the conformation of BSA was not changed in the presence of L-citrulline. The combination distance and the efficiency of energy transfer in the donor-acceptor pair were obtained using the non-radiative energy transfer theory of F(o)rster.【期刊名称】《北京化工大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2012(039)001【总页数】6页(P77-82)【关键词】L-瓜氨酸;牛血清白蛋白;相互作用;紫外光谱;荧光猝灭【作者】屈冉;张骁;张鹏【作者单位】北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029;北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029;北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029【正文语种】中文【中图分类】O657.3L-瓜氨酸是一种非蛋白质氨基酸,具有很多重要的生理功能。
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色氨酸残基荧光猝灭法
色氨酸残基荧光猝灭法(Trp fluorescence quenching)是一种用于研究生物大分子的结构和功能的方法,尤其适用于蛋白质的研究。
在这种方法中,以色氨酸残基为荧光探针,探究蛋白质的结构和环境对其荧光强度的影响,进而探讨蛋白质的性质和功能。
在Trp fluorescence quenching方法中,荧光信号的猝灭是通过某些分子与色氨酸残基之间的电子转移过程实现的。
这些分子可能是溶液中存在的分子,如氧分子、甲醇分子等,也可能是蛋白质分子中的某些残基,如半胱氨酸、酪氨酸等。
这些分子与色氨酸残基之间的相互作用产生的荧光猝灭效应可以用来测量蛋白质的结构和环境等参数。
Trp fluorescence quenching的应用范围十分广泛,既可以应用于生物大分子的研究,也可以用于药物分子的筛选和研究。
在生物大分子的研究中,Trp fluorescence quenching可以用来研究蛋白质的构象和某些特定位点的环境。
同时,它还可以用来研究蛋白质与其他分子之间的相互作用,如蛋白质和DNA、 RNA之间的相互作用等。
在药物分子研究方面,Trp fluorescence quenching可以用来筛选和研究潜在的药物分子。
这是因为药物分子可能会与蛋白质中的某些残基发生特定的相互作用,从而导致荧光强度的变化。
利用这种现象,
可以用Trp fluorescence quenching来筛选出对某种蛋白质具有特异性的药物分子。
总之,Trp fluorescence quenching是一种非常重要的生物物理学方法。
它不仅可以用来探究生物大分子的结构和性质,也可以用来筛选和研究潜在的药物分子。
在未来的研究中,Trp fluorescence quenching还有广阔的应用前景,有望为生物医学研究和药物开发提供更多有用的信息。