CD4T磁珠分选

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NDV7793促进人CD4+T细胞表达TRAIL的实验研究

NDV7793促进人CD4+T细胞表达TRAIL的实验研究

NDV7793促进人CD4+T细胞表达TRAIL的实验研究目的:研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)弱毒株NDV7793能否促进人CD4+ T细胞表达肿瘤坏死因子相关凋亡因子诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)。

方法:首先用免疫磁珠分选法(magnetic activated cell sorting,MACS)分选外周血静止CD4+ T细胞,然后加抗CD3抗体、抗CD28抗体和白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)使之成为能被NDV激活的CD4+ T细胞。

用流式细胞技术(flow cytometry,FCM)检测NDV刺激的CD4+ T细胞的TRAIL的表达水平。

结果:MACS法分选外周血得到的CD4+ T 细胞纯度达到(97.38±0.28)%;能被NDV激活的CD4+ T细胞表面分子CD25和CD69双阳性表达率可达(29.30±1.08)%,与PBS阴性对照组(2.40±1.30)%相比,差异有统计学意义(P<0.05);FCM检测结果显示,与对照组比较,NDV7793刺激的CD4+ T细胞TRAIL表达水平均有显著升高,且在NDV7793效价为25 HU时达到最大值。

结论:NDV7793可刺激CD3抗体、CD28抗体和IL-2预先活化的CD4+ T细胞表达TRAIL。

标签:新城疫病毒;CD4+ T细胞;TNF相关凋亡诱导配体NDV是经过临床评估后可以作为载体用于溶瘤治疗、基因治疗和免疫激活的五种病毒之一[1-3]。

全身治疗时,只有少部分NDV能到达肿瘤组织,其发挥直接的溶瘤作用十分有限[4]。

然而NDV在抗肿瘤中却仍能发挥重要作用,这与NDV刺激免疫细胞而发挥抗肿瘤效应有关,这些细胞包括NK细胞、巨噬细胞、树突状细胞以及T细胞等[5-8]。

已有实验证明,NDV可刺激NK细胞和巨噬细胞诱导TRAIL的产生而杀伤肿瘤[5-6]。

阿托伐他汀对人CD4+T淋巴细胞microRNA-21表达的影响

阿托伐他汀对人CD4+T淋巴细胞microRNA-21表达的影响

阿托伐他汀对人CD4+T淋巴细胞microRNA-21表达的影响刘洋;李浪;周游;王江友;苏强;孙羽涵【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2013(33)9【摘要】目的研究阿托伐他汀在体外对人CD4+T淋巴细胞miRNA-21表达的影响.方法取12例健康志愿者的新鲜外周血,免疫磁珠分选出CD4+T淋巴细胞,分为空白组、PHA+(0、1、5、10 μmol/L)阿托伐他汀组,体外培养48 h后收集各组细胞及培养基上清液,荧光定量PCR检测miRNA-21及PDCD4mRNA表达水平,Western印迹检测PDCD4蛋白表达,ELISA检测培养基上清液TNF-α及IL-10浓度.结果①与空白组比较:PHA刺激后,CD4+T淋巴细胞miRNA-21 、PDCD4 mRNA、PDCD4蛋白表达及上清液TNF-α浓度均升高(均P<0.05).②与PHA+0μmol/L他汀组比较:加入不同浓度阿托伐他汀后,CD4+T淋巴细胞miRNA-21相对表达量和上清液IL-10浓度增加(P<0.05),而PDCD4蛋白表达和上清液TNF-α浓度明显降低(P<0.05).结论阿托伐他汀能促进PHA刺激的人CD4+T淋巴细胞miRNA-21的表达增加,从而抑制靶蛋白PDCD4,促进抗炎因子IL-10分泌和抑制促炎因子TNF-α.【总页数】4页(P2056-2059)【作者】刘洋;李浪;周游;王江友;苏强;孙羽涵【作者单位】广西医科大学第一附属医院心内科,广西南宁 530021;广西医科大学第一附属医院心内科,广西南宁 530021;广西医科大学第一附属医院心内科,广西南宁 530021;广西医科大学第一附属医院心内科,广西南宁 530021;广西医科大学第一附属医院心内科,广西南宁 530021;广西医科大学第一附属医院心内科,广西南宁 530021【正文语种】中文【中图分类】R966【相关文献】1.强化阿托伐他汀对不稳定性心绞痛患者冠状动脉介入治疗术后CD4+T淋巴细胞微小核糖核酸-21表达的影响 [J], 刘洋;李浪;苏强;周游;王江友;孙羽涵;杨栋2.阿托伐他汀对人CD4+T淋巴细胞程序性细胞死亡因子4基因表达的影响 [J], 王江友;李浪;周游;苏强;刘洋3.阿托伐他汀对人CD4+T淋巴细胞Sprouty2基因表达的影响 [J], 王江友;李浪;苏强;周游;刘洋;黄伟强4.阿托伐他汀对脑血管疾病介入治疗围手术期患者CD4+T淋巴细胞PTEN表达的影响 [J], 张贺;初照成5.阿托伐他汀对人CD4+T淋巴细胞张力蛋白同源第10染色体丢失的磷酸酶基因表达的影响 [J], 王江友;李浪;苏强;周游;刘洋;黄伟强因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

磁珠分选说明书

磁珠分选说明书

磁珠分选说明书磁珠分选是一种利用磁性原理进行分选的方法,通常用于分离微小颗粒或细胞等。

下面是一份磁珠分选的简单说明书:一、原理磁珠分选基于磁性原理,通过磁场作用将磁珠与目标颗粒或细胞结合,再利用磁力的差异将磁珠与目标物分离,从而实现分选。

二、操作步骤1. 准备所需试剂和磁珠:根据实验需求准备相应的缓冲液、抗体或特异性配体,以及磁珠。

确保磁珠经过充分混匀。

2. 磁珠与目标物的结合:将磁珠与目标物(如抗体、核酸或其他配体)混合,使其充分结合。

通常需要在适当的缓冲液中进行孵育。

3. 磁力分选:将结合了目标物的磁珠转移到磁场中进行分离。

通常需要将磁珠与目标物混合物加入到特制的分离柱或管中,然后施加磁场。

4. 洗涤:为了去除未结合的目标物和其他杂质,进行洗涤操作。

将磁珠从磁场中取出,用缓冲液冲洗。

5. 洗脱和收集:最后,通过改变磁场或加入特定的洗脱液,将目标物从磁珠上洗脱下来并收集。

三、注意事项1. 确保所有操作在适当的缓冲液中进行,以维持磁珠和目标物的稳定性。

2. 根据实验需求选择合适的磁珠和特异性配体,以确保最佳的结合效果。

3. 注意磁力分选时的操作,避免磁珠吸附到容器壁或其他杂质上。

4. 在进行洗涤和洗脱时,要确保操作步骤准确,避免损失目标物。

5. 保持操作环境的清洁,避免污染。

四、应用领域磁珠分选广泛应用于生物医学研究、药物筛选、基因测序等领域,尤其在单细胞分析、蛋白质组学和核酸研究中发挥着重要作用。

以上是一份简单的磁珠分选说明书,具体操作步骤和细节可能因实验需求和试剂而有所不同。

在进行实验前,建议仔细阅读相关文献和试剂说明书,并遵循实验室安全规范。

肠道t细胞研究方法

肠道t细胞研究方法

肠道t细胞研究方法全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:肠道T细胞是一类在肠道内发挥重要免疫功能的T淋巴细胞。

它们在肠道粘膜上形成一个密集的网络,与肠道菌群和外界环境相互作用,为维持肠道免疫平衡和抵御病原微生物起着至关重要的作用。

肠道T细胞的研究对于理解肠道免疫系统的调控机制、疾病发生发展以及开发相关药物具有重要意义。

肠道T细胞的研究方法主要包括以下几个方面:1. 流式细胞术(flow cytometry):流式细胞仪是一种用来精确测定细胞表面抗原和细胞内分子的工具。

通过流式细胞术可以对肠道T 细胞的表型进行详细分析,如CD4、CD8、CD3等受体的表达情况、细胞的活化状态等。

流式细胞术还可以用来筛选和鉴定特定功能的肠道T细胞亚群。

2. 细胞培养技术:肠道T细胞通常以组织标本或者外周血中获得,需要进行细胞培养以扩增细胞数量。

通过细胞培养技术可以模拟体内肠道环境,研究肠道T细胞在不同刺激条件下的功能和分化情况。

3. 免疫组化技术(immunohistochemistry):免疫组化技术用于检测组织切片中的特定抗原。

通过免疫组化技术可以在肠道组织切片中定位和分析肠道T细胞的分布和数量,了解它们在肠道内的作用和相互关系。

4. 基因敲除和转基因动物模型:通过基因敲除和转基因技术可以构建特定基因表达缺陷或过表达的动物模型,研究这些基因对肠道T细胞功能和免疫相互作用的影响。

这种方法对于揭示肠道T细胞在肠道疾病发生发展中的作用至关重要。

5.深度测序技术(next-generation sequencing):深度测序技术可以对肠道T细胞中的基因组、转录组和表观遗传组进行高通量测序分析,揭示肠道T细胞的遗传变异和转录调控机制,从而为研究肠道T细胞的功能提供全面的信息。

肠道T细胞研究方法涉及到多个层面的技术手段和方法,通过这些方法的综合应用可以全面、深入地研究肠道T细胞的功能、机制以及在疾病中的作用,为开发新的治疗手段和药物提供重要的参考和指导。

t细胞分选和流式鉴定

t细胞分选和流式鉴定

t细胞分选和流式鉴定T 细胞分选和流式鉴定T 细胞是免疫系统中非常关键的一部分,它们在抵御病原体、监控自身细胞以及调节免疫反应等方面发挥着至关重要的作用。

为了更深入地研究T 细胞的功能和特性,T 细胞分选和流式鉴定技术应运而生。

T 细胞分选是将特定类型的 T 细胞从复杂的细胞混合物中分离出来的过程。

这一过程的实现依赖于多种方法和技术。

其中一种常见的方法是基于细胞表面标志物的特异性抗体进行分选。

这些标志物就像是T 细胞的“身份证”,通过识别这些标志物,我们能够将目标 T 细胞挑选出来。

例如,CD4 和 CD8 是常见的 T 细胞表面标志物。

CD4+T 细胞在辅助免疫反应方面发挥重要作用,而 CD8+T 细胞则主要负责细胞毒性功能。

利用针对这些标志物的抗体,结合特定的分选技术,如磁珠分选或流式细胞分选,可以有效地分离出我们所需要的 T 细胞群体。

磁珠分选的原理相对简单易懂。

首先,将与特定标志物结合的磁珠与细胞混合物孵育,使磁珠与目标细胞结合。

然后,通过磁场将结合了磁珠的细胞分离出来,从而实现分选的目的。

这种方法操作相对简便,成本也较低,但分选的纯度可能会受到一定的影响。

流式细胞分选则是一种更为精确和灵活的方法。

在流式细胞仪中,细胞会逐个通过一个狭窄的通道,同时受到激光的照射。

激光会激发细胞上结合的荧光染料,产生特定的荧光信号。

根据这些荧光信号的强弱和组合,我们可以准确地识别出目标 T 细胞,并通过电子控制系统将其分选到不同的收集容器中。

接下来,让我们来了解一下流式鉴定。

流式鉴定是一种用于分析细胞特性的强大技术。

在 T 细胞的研究中,它可以帮助我们了解 T 细胞的表型、活化状态、细胞周期等多个方面的信息。

在进行流式鉴定时,首先需要对 T 细胞进行荧光标记。

这通常通过将特异性抗体与荧光染料偶联来实现。

这些抗体可以识别 T 细胞表面的各种标志物,如 CD3、CD4、CD8、CD25、CD69 等。

当抗体与细胞表面的标志物结合后,荧光染料会发出相应的荧光信号。

原代SD大鼠CD4+T细胞的分离纯化及鉴定

原代SD大鼠CD4+T细胞的分离纯化及鉴定

原代SD大鼠CD4+T细胞的分离纯化及鉴定杨艳华;戴迟兵【摘要】目的:建立一种获得高质量、数量多的原代CD4+T细胞的有效可靠的方法.方法:依次采用密度梯度离心(procell density Centrifugation)和免疫磁珠分选法从SD大鼠新鲜脾脏中分选出CD4+T细胞,CD4+T细胞生长状况及特点采用倒置相差显微镜观察、提取细胞的纯度以流式细胞术鉴定.结果:流式细胞术鉴别CD4+T细胞纯度为96%,其中(CD4+T+CD62 L双标)初始CD4+T细胞纯度为60.7%,与密度梯度离心收集的单核细胞(CD4+T细胞纯度为0.2%)比较,差异均有统计学意义(P<0.01).通过形态学观察从原代SD大鼠脾脏中分离的CD4+T细胞,表现为透明圆颗粒状悬浮生长,48h内活性最高.结论:采用密度梯度离心分离,免疫磁珠分选纯化原代大鼠初始CD4+T细胞具有数量多、活性好、纯度高、生物学特性稳定的优点,可用于相关研究.【期刊名称】《医学理论与实践》【年(卷),期】2018(031)021【总页数】4页(P3161-3164)【关键词】原代初始CD4+T细胞;CD4+T细胞;细胞分选;密度梯度离心;免疫磁珠分选纯化【作者】杨艳华;戴迟兵【作者单位】恩施土家族苗族自治州中心医院消化内科,湖北省恩施市 445000;三峡大学仁和医院消化内科【正文语种】中文【中图分类】R310.14+34CD4+T细胞是人体免疫系统中重要的免疫细胞,在差异的细胞因子及环境作用下初始CD4+T细胞可分化成功能各异的亚型:Th1、Th2、Th17、Treg。

在免疫学相关研究中CD4+T细胞有着显著的研究价值,但CD4+T细胞原代提取以及体外培养存活难度较大,因此需建立一套快捷、高效的体外分离,培养,纯化方法。

本研究在常规提取T细胞的基础上,提出一套高效率的提取CD4+T细胞的方法,得到纯度高、细胞数多、生物活性稳定的CD4+T细胞,为进一步深入相关研究提供稳定的初始细胞。

【国家自然科学基金】_cd4 t细胞_期刊发文热词逐年推荐_20140729

【国家自然科学基金】_cd4 t细胞_期刊发文热词逐年推荐_20140729

盲肠扁桃体 1 53 白细胞介素17 1 54 白细胞介素-2 1 55 痣,色素 1 56 环孢菌素a 1 57 炎症 1 58 活化 1 59 树突细胞,未成熟 1 60 来氟米特 1 61 抗肿瘤免疫 1 62 抗原,cd 1 63 抗体生成细胞 1 64 心肌疾病 1 65 幽门螺杆菌 1 66 大鼠 1 67 大肠癌 1 68 壳聚糖 1 69 基因疗法 1 70 垂直传播 1 71 吲哚胺2,3-双加氧酶 1 72 变应性 1 73 受体,烟碱 1 74 发育 1 75 卵巢浆液性癌 1 76 凋亡 1 77 六味地黄汤生物制剂 1 78 免疫逃逸 1 79 免疫赦免 1 80 免疫磁珠分选 1 81 克隆清除 1 82 信号转导 1 83 体外扩增 1 84 他克莫司 1 85 人类白细胞抗原a2 1 86 亚群 1 87 t细胞免疫球蚩白功能区和黏液素样功能区-1(tim-1) 1 88 t细胞,调节性 1 89 stgf-β rⅱ基因 1 90 rna干扰 1 91 rapamycin 1 92 neuropilin-1 1 93 icos 1 94 cxcr4 1 95 cin阳性t淋巴细胞 1 96 cim 1 97 cd8+t细胞 1 98 cd4阳性t淋巴细胞 1 99 cd4+cd25+treg 1 100 cd28 1 101 cd152 1 102 ccr5 1 103 6-羟基多巴胺 1 104 105 106
107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160

磁珠分选t细胞

磁珠分选t细胞

磁珠分选t细胞1. 磁珠分选t细胞的原理和方法磁珠分选是一种常见的细胞分选技术,通过利用磁性的珠子特异性地结合到特定的细胞表面标记物上,然后通过磁力的作用将目标细胞分离出来。

在T细胞分选中,可以利用特殊的抗体来标记T细胞表面上的CD3、CD4、CD8等抗原,然后再使用特定的磁珠将标记物和目标细胞结合。

最后,利用磁力分离,就可以获得高纯度的T细胞。

2. T细胞分选的研究进展随着近年来免疫治疗和细胞治疗的兴起,T细胞分选技术也得到了广泛应用。

特别是在肿瘤免疫治疗中,利用CAR-T细胞和TCR-T细胞等细胞治疗手段,可以得到很好的临床疗效。

因此,T细胞分选技术的研究也变得越来越重要。

目前,针对T细胞的分选技术已经有了很多进展,如流式细胞仪、磁珠分选、微流控芯片、光学分选等。

其中,磁珠分选技术在T细胞体外扩增和临床治疗等领域得到了广泛应用。

3. 磁珠分选在T细胞治疗中的应用磁珠分选技术在T细胞治疗中的应用主要包括两个方面:一是体外扩增中的分选,二是治疗细胞产品的分选。

体外扩增中的分选:在体外扩增T细胞时,需要从淋巴细胞中选择和分离出T细胞,同时排除其他免疫细胞。

磁珠分选技术可以帮助实现高效分选,并获得高纯度的T细胞,从而提高体外扩增的效率和规模。

治疗细胞产品的分选:在CAR-T细胞和TCR-T细胞等治疗细胞产品中,需要分离出目标T细胞并通过磁珠分选获得高纯度的治疗细胞。

此外,治疗细胞产品的分选也可以用于排除其他污染物,如病毒、细菌等。

4. 磁珠分选T细胞的优缺点优点:1.高效、快速:磁珠分选技术可以非常迅速地获得纯度较高的目标细胞,从而节省时间和成本。

2.高纯度:使用磁珠分选技术可以获得高度纯化的细胞,从而提高了治疗效果和安全性。

3.对细胞活性无影响:分选过程中不需要进行细胞培养等处理,从而保证了目标细胞的活性和功能。

缺点:1.标记物有限:目前可以使用的标记物数量有限,不能针对所有细胞进行磁珠分选。

2.影响细胞表面:磁珠分选的过程可能会对细胞表面结构产生不良影响,从而影响细胞的功能。

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