磁珠分选原理及应用.

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磁珠分选法

磁珠分选法

磁珠分选法磁珠分选法是一种利用磁性珠子对混合物中的目标物进行选择性分离的方法。

这种方法广泛应用于生物医学研究、医学诊断、生物制药等领域。

磁珠分选法的原理是利用磁性珠子的特殊性质,通过调节磁场的强弱和方向,使得目标物与磁珠相结合,从而实现目标物的分离。

磁性珠子可以是金属磁珠、磁性聚合物球等,其表面通常修饰有特定的功能基团,能够与目标物发生特异性的结合。

磁珠分选法的步骤主要包括样品处理、靶向修饰、磁性珠结合、磁珠分离和洗涤等过程。

首先,将待分离的混合物样品进行预处理,去除杂质和干扰物。

然后,利用特定的化学反应或生物分子识别技术,对磁性珠子进行靶向修饰,使其能够与目标物具有高度的亲和性。

接下来,将修饰后的磁性珠子加入样品中,经过一定的时间和温度条件,目标物与磁珠发生特异性结合。

然后,借助外加磁场的作用,将磁珠与非结合的杂质分离开来。

最后,通过洗涤等操作,去除残留的杂质,得到纯净的目标物。

磁珠分选法具有许多优点。

首先,由于磁珠具有较大的比表面积和较强的磁性,可以实现高效的目标物分离。

其次,磁珠分选法操作简便,不需要复杂的仪器设备,易于操作和控制。

此外,磁珠可以反复使用,具有较好的再生性和稳定性。

最重要的是,磁珠分选法可以实现对混合物中目标物的高度选择性分离,避免了传统方法中的一些困难和限制。

磁珠分选法在生物医学研究和临床应用中具有广阔的前景。

例如,在肿瘤诊断中,可以利用磁珠分选法对血液中的循环肿瘤细胞进行捕获和分离,实现早期肿瘤的诊断和监测。

在生物制药领域,磁珠分选法可以用于纯化和富集重组蛋白,提高产品纯度和产量。

此外,磁珠分选法还可以应用于病原体检测、基因分离、酶学研究等领域。

磁珠分选法作为一种高效、简便、选择性强的分离方法,在生物医学研究和临床应用中具有重要意义。

随着磁性材料和生物分子识别技术的不断发展,磁珠分选法将会得到更广泛的应用和进一步的改进,为科学研究和医学诊断提供更多的可能性。

磁珠分选细胞提蛋白

磁珠分选细胞提蛋白

磁珠分选细胞提蛋白磁珠分选是一种常用的细胞分离和蛋白提取技术。

它利用特殊表面涂覆有磁性材料的磁珠,通过特定的亲和性纯化步骤,实现对特定细胞群体或蛋白质的高效分离和提纯。

本文将详细介绍磁珠分选细胞提蛋白的原理、方法和应用。

磁珠分选细胞提蛋白的基本原理是在合适的条件下,利用磁性磁珠与目标分子之间的亲和力,将目标分子从复杂的混合物中分离出来。

这些磁珠通常具有表面结合有特定配体(如抗体、染料、亲和剂)的功能化化学团。

当这些磁珠与目标分子结合后,可以通过外部的磁场将其从混合物中分离出来。

这种分离和提取过程通常在离心管、磁力架或自动化设备中进行。

磁珠分选细胞提蛋白的方法可以根据实验需要调整,但基本步骤包括细胞准备、磁珠结合、洗涤、洗脱和蛋白质分析。

首先,需要准备要分离的细胞或组织样品。

样品可以是培养的细胞、动物组织或临床样本。

对于细胞的处理通常包括细胞培养、细胞去除和裂解。

对于组织样品,可以通过切片、均质化或离心分离细胞来获得单个细胞。

其次,磁珠需要与特异性配体结合。

具体来说,可以将抗体磁珠用于特定细胞表面标记物的识别和捕获,也可以使用染色剂磁珠、亲和剂磁珠等。

将磁珠与样品混合,在适当的条件下,使配体与目标分子结合。

然后,进行洗涤步骤以去除非特异性结合的物质。

通常使用含有缓冲盐、洗涤剂和蛋白酶抑制剂的洗涤缓冲液,在尽量保留目标分子的前提下去除其他蛋白质和污染物。

接下来,进行洗脱步骤以释放目标分子。

根据磁珠与目标分子结合的强度和条件,在适当的缓冲液中进行洗脱。

洗脱条件可以包括改变pH、离子浓度或添加竞争性结合物。

最后,通过蛋白质分析或进一步实验来验证提取的目标分子。

常见的蛋白质分析方法包括SDS-PAGE凝胶电泳、Western blotting、质谱分析等。

磁珠分选细胞提蛋白具有许多优点,如高效、快速、可重复使用等。

它在细胞生物学、免疫学、药物发现等领域得到广泛应用。

例如,科研人员可以利用磁珠分选技术从复杂的细胞混合物中纯化感兴趣的细胞亚群,进一步研究其功能和生物学特性。

免疫磁珠分离法原理与应用

免疫磁珠分离法原理与应用

免疫磁珠分离法原理与应用标题:免疫磁珠分离法:原理与应用引言:随着生物技术的快速发展,分离和纯化靶标蛋白成为许多研究人员和生物制药公司关注的重要领域。

在过去的几十年里,形形色色的方法被开发用于从复杂的混合物中纯化特定蛋白质。

其中一种高效且广泛应用的方法是免疫磁珠分离法。

本文将深入探讨免疫磁珠分离法的原理、优点、应用领域以及未来的发展趋势。

一、原理:免疫磁珠分离法是一种基于抗原-抗体相互作用的技术,通过免疫磁珠与靶标蛋白质之间的特异性结合,实现目标蛋白的高效分离和纯化。

其基本原理可以概括为以下几个步骤:1. 免疫反应:免疫磁珠是一种通过磁力控制的微米级磁性颗粒,表面覆盖着特异性抗体。

当样品与免疫磁珠混合时,抗体会与目标蛋白发生特异性结合,形成免疫复合物。

2. 磁珠分离:通过外加磁场,免疫磁珠可以被快速沉降到离心管底部,而其它非特异性成分则会在上清中保持。

这种磁珠分离的特异性和高效性使得目标蛋白质能够被有效地分离和纯化。

3. 洗脱:经过磁珠分离后,目标蛋白质与非特异性成分被分离,而磁珠上的目标蛋白则需要被洗脱下来。

这可以通过改变洗脱缓冲液的pH 值、离子浓度或添加特定的解离剂来实现。

二、优点:免疫磁珠分离法具有许多优点,使其成为生物制药和生物研究领域的重要工具。

以下是一些主要的优点:1. 高度特异性:由于抗体的特异性,免疫磁珠分离法可以实现对目标蛋白的高度特异性结合,从而减少非特异性结合的可能性。

2. 高效性:免疫磁珠分离法可以在短时间内实现目标蛋白的高效分离和纯化。

3. 可逆性:与其他分离方法不同,免疫磁珠分离法可以通过简单地改变外部条件来逆转目标蛋白与磁珠的结合,实现目标蛋白的洗脱和回收。

4. 可扩展性:免疫磁珠分离法可适用于从微量到大规模的样品处理。

三、应用领域:免疫磁珠分离法在多个研究领域和应用中发挥着重要作用。

以下是一些主要的应用领域:1. 生物制药:免疫磁珠分离法已被广泛应用于生物制药领域,用于纯化重组蛋白和单抗等生物药物。

磁珠的原理与选择及应用

磁珠的原理与选择及应用

磁珠的原理与选择及应用1. 磁珠的原理磁珠是一种由磁性材料制成的微小颗粒,具有磁性的特性。

磁珠的磁性来源于其材料内部的微小磁性结构,例如磁性晶粒或者磁性层。

磁珠的原理可以归纳为以下几点:- 磁性颗粒的存在:磁珠内部含有磁性颗粒,使其具有磁性。

- 磁性结构的有序排列:磁珠的磁性颗粒经过处理和烧结等工艺,使其磁性结构有序排列,从而增强其磁性能。

- 外部磁场的作用:当外部磁场作用于磁珠时,磁珠内部的磁性颗粒会受到磁场力的作用,发生磁性矩的取向变化,从而表现出磁性。

2. 磁珠的选择选择适合的磁珠是实现特定应用需求的关键。

根据不同的应用需求,可以考虑以下几个方面: - 磁性强度:磁珠的磁性强度是评估其性能的一个重要指标。

通常用磁能积或剩磁来衡量磁珠的磁性强度,磁能积高或剩磁大的磁珠具有更强的磁性。

- 粒度大小:磁珠的粒度大小直接影响其分散性和应用效果。

通常情况下,细粒度的磁珠具有更好的分散性和更大的比表面积。

- 化学稳定性:根据应用需求,需要选择具有良好化学稳定性的磁珠,以避免在特殊环境条件下发生退化或氧化等现象。

- 表面功能化处理:为了满足特定应用需求,可以进行表面功能化处理,例如引入化学官能团以便于与其他物质的结合。

3. 磁珠的应用磁珠由于其独特的磁性特性在各个领域得到了广泛的应用。

下面列举几个常见的应用领域: - 生物医学:磁珠在生物医学中具有广泛的应用,例如生物分离、疾病诊断、靶向药物递送等方面。

通过特定的功能化处理,可以在生物体内实现对特定细胞或分子的选择性捕捉和识别。

- 环境监测:磁珠在环境监测领域起到了重要的作用。

通过与特定污染物相互作用,磁珠可以用于污染物的吸附、检测和去除等环境治理方面。

- 工业应用:磁珠在工业领域中被广泛用于催化剂、媒体过滤、磁性粉体等方面。

磁珠的磁性可以使其在工业生产过程中实现快速分离和回收。

- 信息储存:磁珠也可以应用于信息存储领域。

通过将磁珠制成微小磁性颗粒,可以实现高密度的磁性存储和读取。

磁珠分选t细胞

磁珠分选t细胞

磁珠分选t细胞1. 磁珠分选t细胞的原理和方法磁珠分选是一种常见的细胞分选技术,通过利用磁性的珠子特异性地结合到特定的细胞表面标记物上,然后通过磁力的作用将目标细胞分离出来。

在T细胞分选中,可以利用特殊的抗体来标记T细胞表面上的CD3、CD4、CD8等抗原,然后再使用特定的磁珠将标记物和目标细胞结合。

最后,利用磁力分离,就可以获得高纯度的T细胞。

2. T细胞分选的研究进展随着近年来免疫治疗和细胞治疗的兴起,T细胞分选技术也得到了广泛应用。

特别是在肿瘤免疫治疗中,利用CAR-T细胞和TCR-T细胞等细胞治疗手段,可以得到很好的临床疗效。

因此,T细胞分选技术的研究也变得越来越重要。

目前,针对T细胞的分选技术已经有了很多进展,如流式细胞仪、磁珠分选、微流控芯片、光学分选等。

其中,磁珠分选技术在T细胞体外扩增和临床治疗等领域得到了广泛应用。

3. 磁珠分选在T细胞治疗中的应用磁珠分选技术在T细胞治疗中的应用主要包括两个方面:一是体外扩增中的分选,二是治疗细胞产品的分选。

体外扩增中的分选:在体外扩增T细胞时,需要从淋巴细胞中选择和分离出T细胞,同时排除其他免疫细胞。

磁珠分选技术可以帮助实现高效分选,并获得高纯度的T细胞,从而提高体外扩增的效率和规模。

治疗细胞产品的分选:在CAR-T细胞和TCR-T细胞等治疗细胞产品中,需要分离出目标T细胞并通过磁珠分选获得高纯度的治疗细胞。

此外,治疗细胞产品的分选也可以用于排除其他污染物,如病毒、细菌等。

4. 磁珠分选T细胞的优缺点优点:1.高效、快速:磁珠分选技术可以非常迅速地获得纯度较高的目标细胞,从而节省时间和成本。

2.高纯度:使用磁珠分选技术可以获得高度纯化的细胞,从而提高了治疗效果和安全性。

3.对细胞活性无影响:分选过程中不需要进行细胞培养等处理,从而保证了目标细胞的活性和功能。

缺点:1.标记物有限:目前可以使用的标记物数量有限,不能针对所有细胞进行磁珠分选。

2.影响细胞表面:磁珠分选的过程可能会对细胞表面结构产生不良影响,从而影响细胞的功能。

MACS磁珠分选

MACS磁珠分选

MACS磁珠分选阳性分选和去除分选。

复合分选策略是将两种基本分选策略相结合或者联合使用多选微珠,从而实现细胞亚群的分选。

1、阳性分选策略(Positive selection strategy)阳性分选中,目的细胞被磁性标记后,作为阳性标记组分直接分选出来。

分选后的细胞不必去除MACS微珠,可立即用于培养或者后续操作。

该方法可以将磁性标记的靶细胞富集10000倍。

阳性分选策略优点:纯度高,回收率高,操作迅速、简便。

2、去除分选策略(Depletion strategy)去除分选是把非目的细胞磁性标记后从细胞混合物中去除的方法,即未磁性标记的细胞为目的细胞。

MACS分选柱技术加上强磁性标记可以去除高达4个对数级的细胞。

去除分选策略适用范围:去除不需要的细胞;缺乏针对目的细胞的特异性抗体(如肿瘤细胞);不需要抗体和目的细胞结合,即细胞不被激惹(如T细胞、B细胞、NK细胞功能分析);复合分选的一部分。

3、复合分选策略联合使用两种以上分选策略,主要用于细胞亚群的分选或者得到高纯度非常稀有的细胞。

(1)去除后再阳性分选(Depletion followed by positive selection)细胞亚群的分选,可以先磁性标记非目的细胞,去除分选后对阴性组分再行磁性标记和阳性分选。

适用范围:在细胞悬液中,非目的细胞也表达用来阳性选择目的细胞的抗原,就需要先去除这群非目的细胞;如果要分选非常稀有细胞,先从细胞悬液中去除非目的细胞,在富集细胞的基础上,进行阳性分选,可获得高纯度目的细胞。

(2)多重分选策略(MultiSort Strategy)MACS多重分选是一种根据多种表面标志磁性分选细胞的技术。

多重分选中,首先用MACS多选微珠标记目的细胞,进行第一参数阳性分选。

然后细胞与多选解离试剂共同孵育,后者可以将微珠从抗体上酶性解离下来。

接着使用针对另一细胞表面标志的抗体-微珠复合物磁性标记阳性分选细胞。

二次标记的细胞可以再次进行阳性分选或者去除分选。

免疫磁珠分选法

免疫磁珠分选法免疫磁珠分选法是一种常用的实验方法,用于寻找或分离特定的细胞、蛋白或其他分子。

它利用可在磁场中负性反应的小磁珠,将两种分子结合在一起,然后将其分离出来。

这是一种非常有用的技术,因为它可以高度选择性地寻找或净化分子。

在本文中,我们将分步骤地介绍免疫磁珠分选法的原理和应用。

1. 原理免疫磁珠分选法的基本原理是利用特异性抗体与目标分子结合,然后将磁珠与抗体-抗原复合物结合在一起。

当磁珠的磁场被施加时,它们将吸附在磁板或磁架上,然后将剩余的液体通过离心或其他分离技术移除。

这种方法可以用于寻找或净化细胞、蛋白或其他分子。

2. 步骤(1)准备反应物质。

首先需要准备磁珠、抗体和目标分子。

可以选择将抗体共价结合到磁珠表面上,也可以选择先将抗体与目标分子结合,然后将其与磁珠结合。

(2)结合抗体-抗原复合物与磁珠。

将抗体-抗原复合物添加到磁珠中,使其结合在一起。

可以通过简单的振荡来促进结合。

(3)加入混合溶液。

将准备好的混合物加入磁珠中,让它们结合在一起。

在这个过程中,可以通过调整运动和分离速度来提高结合效率。

(4)使用磁场分离复合物。

当磁场被施加时,磁珠会被吸附在磁板或磁架上,使复合物分离出来。

可以使用离心或其他分离技术来分离剩余的液体。

(5)洗涤。

洗涤是为了去除非特异性的物质,提高纯度。

用化合物在磁性键合,滴加洗涤缓冲液在沉淀过程中进行洗涤与重复两次,大多数洗涤缓冲液中都含有盐或内源污染物淡化液。

(6)洗涤盘。

培养基作为洗涤和生物反应器,因此需要将挂在磁带上的松散浮游细胞从培养基中分离出来,并将其带到物质上。

(7)定量检测。

检测单个细胞或蛋白的浓度,确定其质量并确定其目标。

应用比色法、荧光法等确定各种条件。

3. 应用免疫磁珠分选法广泛应用于许多分子分析研究领域。

例如,它可以用于取样生物液体、寻找并纯化特定的蛋白、寻找和净化细胞、纯化核酸等。

它还可以与其他技术结合使用,例如PCR、微流控和质谱法等。

细胞 磁珠分选

细胞磁珠分选细胞磁珠分选细胞磁珠分选是一种基于细胞表面标记物的分选技术,利用磁珠的特殊性质实现对目标细胞的精确分离和富集。

该技术在生物医学研究和临床诊断中具有广泛的应用前景。

一、细胞磁珠分选的原理细胞磁珠分选技术的核心是利用磁珠与目标细胞表面特异性标记物的结合,通过磁力的作用将目标细胞与其他非目标细胞分离。

通常,磁珠表面会修饰有与目标细胞表面标记物相互作用的抗体、配体或其他亲和分子。

当这些磁珠与细胞悬液混合时,目标细胞会与磁珠发生特异性结合,形成复合物。

通过外加磁场,可以将带有目标细胞的磁珠复合物分离出来,从而实现对目标细胞的富集和分离。

二、细胞磁珠分选的优势相比传统的细胞分选方法,细胞磁珠分选具有以下几个显著优势:1. 高纯度:由于细胞磁珠分选是基于目标细胞表面标记物的特异性结合,可以实现对目标细胞的高度纯化。

与传统方法相比,磁珠分选可以有效地去除非目标细胞,提高纯度。

2. 高通量:细胞磁珠分选技术可以实现对大量样本的快速处理。

通过自动化设备的使用,可以同时处理多个样本,提高实验效率。

3. 无损伤:细胞磁珠分选技术基于细胞表面标记物的识别,不需要对细胞进行染色或荧光标记,避免了对细胞的损伤。

4. 多样性:细胞磁珠分选技术可以根据不同的研究目的选择不同的磁珠,并与其他技术相结合,实现对不同类型细胞的分选。

三、细胞磁珠分选的应用领域细胞磁珠分选技术在生物医学研究和临床诊断中具有广泛的应用前景。

以下是该技术在不同领域的应用示例:1. 癌症研究:细胞磁珠分选可以用于从癌症组织中富集和分离肿瘤细胞,进一步研究其生物学特性和致病机制,为癌症的诊断和治疗提供依据。

2. 免疫学研究:细胞磁珠分选可用于分离和纯化免疫细胞亚群,如淋巴细胞、单核细胞等,进一步研究其功能和相互作用机制。

3. 干细胞研究:细胞磁珠分选可以用于从组织中富集和分离干细胞,进一步研究其分化潜能和应用前景。

4. 微生物学研究:细胞磁珠分选可用于富集和分离微生物,如细菌、病毒等,研究其生物学特性和致病机制。

免疫磁珠方法分选细胞

免疫磁珠方法分选细胞免疫磁珠(immunomagnetic beads)是一种通过特异性抗体与目标细胞表面的抗原结合来实现细胞分选的方法。

该方法结合了磁珠与免疫学相结合的优势,可以高效、精确地进行细胞的筛选和分离,广泛应用于细胞学研究、细胞工程和临床诊断等领域。

免疫磁珠法的原理是利用特定的抗体偶联在磁珠表面,通过与目标细胞表面的抗原结合实现细胞的识别和捕获。

首先,将免疫磁珠与样品中的混合细胞进行接触,磁珠上的抗体与目标细胞表面的抗原结合,从而实现细胞的选择性捕获。

随后,采用外部磁场将带有目标细胞的磁珠聚集在一起,将其与其他细胞分离。

分离后的目标细胞可以通过去除外部磁场或磁力悬浮的方法进行后续的研究或应用。

1.高选择性:不同细胞表面的抗原结构具有明显的差异,使得通过不同的抗体可以实现对目标细胞的高选择性捕获。

2.高灵敏度:由于免疫磁珠具有高亲和力的抗体,可以实现对低表达或稀有细胞的高灵敏度分选。

3.高纯度:通过采用特异性抗体和外部磁场的分离作用,可以将目标细胞与其他非目标细胞迅速、高效地分离,获得高纯度的目标细胞。

4.无毒性:相比其他分选方法(如流式细胞术),免疫磁珠方法对细胞的毒性极小,不会对细胞的功能和生理状态产生较大影响。

5.可应用范围广:免疫磁珠方法适用于各种不同类型的细胞,可以用于细胞学研究、细胞工程和临床诊断等领域。

1.抗体的选择性受限:免疫磁珠方法的分选效果高度依赖于抗体的选择性,抗体的亲和力和特异性都会影响分选的准确性和效率。

2.特异性抗体的获取困难:一些特定的抗原可能缺乏高亲和力和特异性的抗体,限制了免疫磁珠方法在一些特定领域的应用。

3.分选过程中细胞受到的机械刺激:外部磁场对细胞的施加可能会对细胞的形态、功能产生一定的影响,需要注意对分选细胞进行合适的处理以避免这种影响。

免疫磁珠方法在科研领域和临床应用中取得了显著的成果。

在细胞学研究中,免疫磁珠方法被广泛用于分离和纯化各类细胞亚群,并且可用于分析细胞表面标志物的表达和功能。

磁珠分选细胞

磁珠分选细胞磁珠分选细胞是分离和分选细胞的一种新颖技术,它可以根据细胞表面的特定分子进行分离和分选,从而提高细胞的纯度和活性。

近年来,随着生物医学领域的不断发展和进步,磁珠分选细胞逐渐成为细胞学研究和临床治疗的重要手段之一。

一、磁珠分选细胞的原理磁珠分选细胞的原理是利用特定的抗体或配体将磁珠表面的磁性纳米颗粒与细胞表面的特异性分子结合,形成一个“磁珠-细胞”结合体;然后利用外部磁场的作用,将这些结合体郑重地抽出,从而实现细胞的选择性分离和纯化。

其中,特异性分子既可以是细胞表面的蛋白质,也可以是糖类,核酸等,这些特异性分子对于不同细胞类型具有独特的表达模式。

二、磁珠分选细胞的优点磁珠分选细胞具有许多优点。

首先,该技术具有较高的分选纯度,可以有效地将目标细胞从混合细胞中快速、准确地分选出来。

其次,这种技术适用于各种不同细胞类型,不受细胞形态、大小和生理状态的影响。

此外,磁珠分选细胞的操作简单、实用、安全,不会对细胞造成损伤,也不需要使用化学药剂和放射线等有害因子。

三、磁珠分选细胞的应用磁珠分选细胞的应用之广泛,可以归纳为以下三个方面:(一)、科学研究领域磁珠分选细胞在科学研究领域中的应用主要有两个方面:一方面是用于细胞纯化和鉴定,例如可以从肝脏中提取Kupffer细胞或肝星形细胞;另一方面是用于分选散质DNA或RNA,可以采集单一细胞内的所有DNA或RNA,且不受细胞数量、类型的限制。

另外,磁珠分选细胞还广泛应用于肿瘤分子标靶药物研究、免疫学、干细胞研究等领域。

(二)、临床医学领域在临床医学领域中,磁珠分选细胞主要应用于体内外免疫治疗,可用于治疗各种免疫缺陷、自身免疫疾病和癌症等疾病。

例如,利用磁珠分选细胞可以从患者的体内采集自身免疫细胞,经过增殖、激活、培养等处理后,再重新注入患者体内,以达到治疗目的。

(三)、生物制药领域在生物制药领域中磁珠分选细胞同样具有广泛应用。

首先,磁珠分选技术可以用于蛋白分离和纯化,例如可将可溶性蛋白或酶挂载到磁珠上,从而实现蛋白的高通量分离和纯化。

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MD0044.02
阳性分选策略
MACS® 微珠磁性 标记
将分选柱移 出磁场,洗 脱阳性分选 细胞
未标记细胞先行流出
MD016102
MACS细胞分选策略
2、去除分选:
• 去除分选是磁性标记非目的细胞,并将其从细胞混合物中去
除,即未磁性标记的细胞为目的细胞。
• 去除分选策略适用范围:
》去除不需要的细胞 》缺乏针对目的细胞的特异性抗体(如肿瘤细胞) 》不需要抗体和目的细胞结合 》需进一步通过阳性选择分选细胞亚群
MD0043.02
MACS® 细胞分选策略
• 阳性分选
• 去除分选 • 去除分选后再阳性分选
• 多重分选
MD0044.02
MACS细胞分选策略
1、阳性分选:
• 根据特异性标志分选细胞: 阳性分选是指目的细胞磁性标记
后,作为阳性的标记组分直接分选出来。
• 优点:
》高纯度,尤其是富集稀有的细胞 》高回收率 》操作简便、迅速
• 专利产品 • 将磁场扩大1000-10000倍— —高纯度,高回收率
在MS柱中产生的强大磁场
MD0061.02
MACS技术
设备与试剂
• MACS分选柱:
MACS技术
设备与试剂
• MACS分选器:从手动到自动,从实验室到临床
MACS技术
设备与试剂
• MACS分选器
autoMACS分选仪
• 9种程序,一机完成所有细胞分选 • 成本低,两个可重复使用的分选 柱(2周内100次) • 快速(3-10分钟) •重复性好 • 全自动分选,仪器操作简单 • 适用范围广:从少量标本(105) 到大量标本(4X109),进样量 0.5ml-50ml • 8种全血微珠,可以做常见细胞的 全血分选,省去了费时的提取单个 核细胞过程
MACS技术主要优势
• 小磁珠: 50 nm(快速、不活化细胞、不沉淀)
• 保留细胞功能(直接进行后续实验;无毒性;氧化 铁和多聚糖组成,可生物降解)
• 与流式细胞仪兼容(不影响细胞光学特性、不影响荧 光抗体标记、与流式细胞仪分选联合使用可以缩短流 式分选时间) • 快速、简便、无菌
• 适用范围广(磁珠种类多、从少量到大量、适用于分 选各种细胞、亚细胞物质)
MD0197.02
MACS技术原理
MACS(Magnetic Activated Cell Sorting): =免疫学+细胞生物学+磁力学
• 基于抗体对抗原的特异性识别 • 磁性微珠直接或者间接偶联在抗体上,从而与细胞相连 • 在高强度、梯度磁场中达到细胞磁性分离的目的
MD0347.01
MACS® 磁性分选
MACS细胞分选策略
4、多选微珠:
多选微珠标记 终止解离反应
MACS 分选
根据第二标志 进行磁珠标记
磁性颗粒的酶解离
MACS 分选
MD0652.01
MACS畅销机器与分选柱
• MiniMACS starting kit:1个分选架、1个MiniMACS分选器、1盒MS 分选柱、1支价值7500元试剂(15088元):可做阳性分选、小量标本、间标去 除分选、分子生物学分选 • Mini&MidiMACS starting kit:1个分选架、1个MiniMACS分选器、 1 个MidiMACS分选器、1盒MS分选柱、 1盒LS/LD分选柱、1支价值7500元试剂 (27838元):可做阳性分选和去除分选 • MS分选柱:1盒25个,2763元 • LS分选柱:1盒25个,4356元 • LD分选柱:1盒25个,5100元
MD0044.02
去除后再阳性分选CD4+CD25+双阳性细胞
1. 去除非CD4+ T 细胞。 用生物素化抗体混合物和抗生物素微珠间接磁性标 记非CD4+ T 细胞 磁性分选去除标记细胞
先行流出为 CD4+ T 细胞
2. CD25微珠直接磁性标记CD25+细胞
阳性分选靶细胞
CD4+ CD25+ 调节性T滞留在分选柱上,离开磁场后 洗脱下来
MD0044.02
去除分选
磁性标记
分选未磁性标记细胞
MD0160.02
MACS细胞分选策略
3、去除分选后再阳性分选:
• 即先去除非目的细胞,再进行阳性分选。
• 适用范围:
》非目的细胞也表达用来阳性选择目的细胞的抗原。 》要分选非常稀有细胞,先去除非目的细胞再行阳性分选, 可获得高纯度的目的细胞。
• uMACS与u或者M分选柱:分子生物学分选
• VarioMACS分选仪
• autoMACS自动分选仪、CliniMACS分选仪
MD0044.02
MACS几种畅销磁珠与抗体
• 专利产品:CD133、CD303、CD304 • 特殊产品:人类DC系列:BDCA-1(CD1c)、BDCA-2(CD303)、 BDCA-3(CD141)、BDCA-4(CD304) 小鼠DC系列:mPDCA微珠与抗体 干细胞产品: CD133、CD271微珠与抗体 细胞因子分泌细胞:CSA分选与分析 TH2细胞: CD294(CRTH)微珠与抗体 分选人类肿瘤细胞:上皮肿瘤:CK、HEA 非血液肿瘤:CD45去除 死亡细胞去除试剂盒 分选转染细胞 分选HIV病毒、mRNA、cDNA • top ten:CD133、CD34、人CD4+CD25+、小鼠CD4+CD25+ CD303/CD304、人类NK、小鼠CD11c、anti-PE 微珠 小鼠干细胞试剂盒(系别阴性+CD117)、CD4/CD8
Miltenyi Biotec: 免疫磁珠分选技术及应用
德国美天旎生物技术有限公司
1/1 MD0xxx.01
内容
• MACS技术原理 • MACS技术设备及分选策略 • 几种特殊的MACS分选
分选和分析DC细胞 分选各种T细胞 分选和分析细胞因子分泌细胞 分选造血干细胞 分选人类肿瘤细胞 分选和分析凋亡和死亡细胞 分选转染细胞 分子生物学和蛋白生化的分选
MACS 微珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺 磁化微粒,可用于目的细胞的磁性标记。
• 特性:
50nm大小 对细胞没有毒性 可生物降解 不影响细胞特性
MACS技术分选的CD8+ T 细胞
微珠
MD0057.03
MACS微珠
直标微珠
多选微珠
间标微珠
MACS技术
设备与试剂
• MACS分选柱:
》填充有不同规格的铁珠。 》铁珠表面有亲水包被,不损伤细胞。 》无菌包装。 》可用于分选多种细胞及亚细胞物质、 细菌、病毒、mRNA和蛋白质。
MACS微珠进行 磁性标记
洗脱阳性分 选的细胞
未标记的细胞 先行流出
MD0651.01
分选前标本制备:过滤
MACS预选滤器: 30m
197.02
MACS 技术
设备与试剂
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MD0197.02
MACS技术
设备与试剂
• MACS微珠:
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