小鼠主动脉内皮细胞C57
小鼠血管内皮细胞的培养、鉴定及巨噬细胞移动抑制因子对其促增殖作用的研究
作 用 。方 法 取 小 鼠主 动 脉 ， 去 除周 围 的 脂 肪 和结 缔 组 织 ， 将动脉环剪成 ０ ． ５ ｎ ｌ ｍ大小 ， 放入基质胶 处理 的 １ ２孔 培 养 板 内， 待 细 胞 长满 ， 用胰酶消化后 ， 取单细胞悬液用抗 Ｃ Ｄ １ ４ ６免 疫 磁 珠 纯 化 ， 再用 Ｃ Ｄ ３ １抗 体 鉴 定 细 胞 纯 度 ， 按 ｌ ０ 个 细胞／ ｆ － Ｌ 加入 ９ ６孔 板 培 养 ， 细胞 ７ ０ ％ ～８ ０ ％ 融 合 时 用 不 同 浓 度 Ｍ１ Ｆ或 ＭＩ Ｆ抑 制 剂 处 理 细 胞 ， ４ ８ ｈ后 用 甲 基 噻 唑 基 四 唑（ Ｍ Ｔ Ｔ ） 检 测 细 胞 增 殖 程 度 。结 果 经Ｃ Ｄ １ ４ ６磁 珠 纯 化 后 细 胞 纯 度 为 ９ ５ ％ 以上 ， ＭＴ Ｔ检 测 结 果 显 示 低 剂 量 ＭＩ Ｆ能
ｃ ｏ ｍ ｍ ｏ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｎ ｐ ｒ ｏ ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｂ ｙ ｍａ ｃ ｒ ｏ ｐ ｈ ａ ｇ ｅ ｍ ｉ ｇ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ ｙ ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ（ ＭＩ Ｆ ） ．Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｍｕ ｒ ｉ ｎ ｅ ａ ｏ ｒ ｔ ａ Ｖ Ｅ Ｃ ｗ ｅ ｒ ｅ ｇ ｏ ｔ ｉ ｒ ｄ ｏ ｆ
的增 殖 ， 说明 Ｍ Ｉ Ｆ在 血 管 内皮 细胞 的 多 种病 理 生 理 反 应 中 起 重 要 作 用 。 ［ 关键词 ］ 巨噬细胞移动抑制因子 ； 血 管 内皮 细 胞 ； 细胞培养技术 ； 剂量效应关 系； 小 鼠 ［ 中国 图书 资 料 分 类 号 ］ Ｒ 一 ３ ２ ２ ； Ｒ ３ ２ ９ ． ５ ［ 文 献 标 志码 ］ Ａ ［ 文章编号 ］ ２ ０ ９ ５ — １ ４ ０ Ｘ（ ２ ０ １ ３ ） ０ １ — ０ ０ １ ０ － ０ ４
GDF11改善老龄鼠内皮依赖性血管舒张功能的实验研究
GDF11改善老龄鼠内皮依赖性血管舒张功能的实验研究刘婷;张承英;苏静克;韩宁;朱彪【摘要】目的探讨生长分化因子11(growth differentiation factor 11,GDF11)对老龄小鼠内皮依赖性血管舒张功能的影响.方法选择20只18个月龄C57小鼠随机分为实验组(GDF11组,n=10)和对照组(Vehi组,n=10),GDF11组按0.3mg/(kg·d)的剂量腹腔注射重组GDF11,Vehi组注射等量生理盐水.4周后取材,检测脂代谢相关的血液学指标,分离小鼠的胸主动脉,测定血管舒张功能和主动脉Samd2/3的磷酸化水平.结果与Vehi组比较,GDF11干预显著增强乙酰胆碱(Ach)诱导的内皮依赖性血管舒张功能[10-6 mol/L Ach:(37.1±5.2)％vs(59.7±4.3)％;10-5 mol/L Ach:(48.2±4.0)％vs (78.4±5.6)％;10-4 mol/L Ach.(61.1±4.7)％vs (90.2±7.4)％],降低血清中三酰甘油的水平[(76.6±11.2) vs (64.5±10.4) mg/dl],升高脂联素的浓度[(11.9±1.1)vs(14.2±1.7) μg/ml],并能提高主动脉Samd2/3的磷酸化水平[Smad2:(1.00±0.05) vs (1.78±0.10)]、Smad3 [(1.00±0.09) vs (1.57±0.12)].结论 GDF11对血管内皮细胞有保护作用.【期刊名称】《武警医学》【年(卷),期】2018(029)007【总页数】4页(P702-705)【关键词】GDF11;内皮依赖性血管舒张功能;老龄鼠【作者】刘婷;张承英;苏静克;韩宁;朱彪【作者单位】102413,北京核工业医院心电图室;100039 北京,武警总医院肾内科;100039 北京,武警总医院肾内科;100039 北京,武警总医院肾内科;071000 保定,河北大学附属医院口腔科【正文语种】中文【中图分类】R543.1动脉硬化是一类以血管管壁增厚变硬、弹性减弱和管腔缩小为特征的疾病，它严重威胁着人类的健康。
C57L小鼠的特点是什么？
C57L小鼠的特点是什么？
棕色系C57BR中诞生的铅色系的C57L（L=leaden）
C57L 小鼠（C57L）的诞生
1933年，Murray（J Murray）在杰克逊实验室（Jackson Laboratory）对近交系C57BR小鼠第22代（F22）进行近交筛选获得。
因此，C57L小鼠属于C57BR的一个亚系。
由于是在杰克逊实验室诞生，称为C57L/J。
C57L小鼠的特点：
•可以自发产生霍奇金氏B淋巴瘤（Hodgkin's-like Type B neoplasms），在20月龄时发生率可达25%。
•对于实验性变态反应性脑脊髓炎（allergic encephalomyelitis，EAE）高度敏感。
•多产的雌性小鼠老年时可发生垂体瘤。
•对植物凝集素（allergic encephalomyelitis）具有高反应性。
•高脂高胆固醇模型饲料可以诱导动脉粥样硬化。
•对高胆固醇饲料反应性很高，容易形成胆固醇性胆结石，特别适用于胆结石造模。
•具有年龄相关性听觉丧失。
可以作老年性耳聋的模型。
•肺对放射性高度敏感，与C57BL/6J小鼠、C3H小鼠、CBA小鼠等小鼠比较，放射性肺损伤速度快，3-4个月内引起肺炎，可能容易继发肺纤维化。
小鼠主动脉环血管新生实验模型的优化
小鼠主动脉环血管新生实验模型的优化翁嘉懿;严金川;陈瑶;李波;李晓阳;徐源;刘俊【摘要】Objective:To optimize the method of the mouse aortic ring angiogenesis assay.Methods:The thoracic aorta of C57BL/6 mice were separated and all extraneous fat and connective tissues were re-moved.To remove the vascular adventitia,the aorta was digested with collagenase Ⅱ.The aorta were cut into rings~0.5 mm in width and the rings were embeded in the wells of a 96-well plate coated with type Ⅰcollagen.The embedded rings were fed with 100 μL of DMEM culture mediu m supplemented with 10%FBS or 2.5%FBS and VEGF to attain a final concentration of 50 ng/mL.Inverted microscope was used to observe microvessel outgrowth of the aortic rings.The endothelial cells were assayed by BS1 lectin-FITC im-munofluorescence.Results:The number of microvessels of the aortic rings in the 96-well plate was more than those in 24-well plate(t=-6.000,P<0.05).The number of microvessels of the aortic rings cultured with DMEM+10%fatal bovine serum was more than those cultured with DMEM+2.5%fatal bovine serum or DMEM+2.5% fatal bovine serum+VEGF.Microvessel outgrowth of the aortic rings started at 2 to 4 days and reached the peak at day 6 to 8 using the modifiedmethod.Conclusion:A great quantity,purity and high survival rate of the mouse aortic ring model of angiogenesis can be effectively obtained by coating plates with type Ⅰ collagen and enhancing the concentration of FBS.%目的：建立优化体外培养小鼠主动脉环血管新生实验模型的条件和方法。
小鼠主动脉内皮细胞使用说明
小鼠主动脉内皮细胞小鼠主动脉内皮细胞产品说明：为使能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的小鼠主动脉内皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。
研发的小鼠主动脉内皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
注意事项：1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。
培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。
4. 建议收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。
5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
小鼠主动脉内皮细胞产品简介：1、产品名称：C57小鼠主动脉内皮细胞（Mouse Aortic Endothelial Cells）2、组织来源：C57小鼠心肌主动脉3、产品规格：5×105cells / 25cm2培养瓶小鼠主动脉内皮细胞简介：心肌主动脉是供给心脏血液的动脉。
主动脉内皮细胞分离自正常C57小鼠心肌主动脉，呈单层扁平分布。
内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞，由一层扁平细胞所组成。
它形成血管的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。
内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至最少的微血管。
本公司生产的C57小鼠主动脉内皮细胞采用混合酶消化而来，细胞总量约为5×105cells/瓶，CK-18免疫荧光鉴定细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
SASP与细胞衰老的研究进展
SASP与细胞衰老的研究进展作者：杨丽华来源：《科技风》2021年第15期关键词：细胞衰老;衰老相关分泌表型;干细胞;成纤维细胞细胞衰老是生物体在性成熟后出现的细胞生理功能进行性减退，是一种细胞状态，与多种生理过程和衰老相关疾病密切相关。
细胞衰老和衰老相关分泌表型（senescence-as-sociated secretory phenotype，SASP）已经成为衰老和很多慢性疾病的主要驱动因素，包括癌症、神经退行性变、心脏病和骨关节炎。
近几年研究发现，SASP与干细胞衰老、成纤维细胞衰老、上皮细胞衰老、内皮细胞衰老及平滑肌细胞衰老有关。
本文对SASP与细胞衰老的研究进行综述，旨在为细胞衰老多种生理过程的研究及衰老相关疾病治疗策略提供一定理论基础。
1 SASP的概述2008年，Coppe J P等首次提出SASP这个概念。
SASP是细胞衰老后分泌的一系列炎症细胞因子、趋化因子、生长因子和蛋白酶。
SASP是细胞衰老的表现特征，影响细胞的微环境，与细胞衰老、个体老化和衰老相关的疾病有密切联系。
2 SASP与细胞衰老2.1 SASP与干细胞衰老成体干细胞/祖细胞是存在于组织中的一小群细胞，在其运作的器官的所有细胞类型中，具有分化的潜力，干细胞/祖细胞衰老与生理和病理过程密切相关。
SASP能够将衰老扩散到附近和远处的非衰老细胞。
用去卵巢（OVX）小鼠作为雌激素缺乏模型，研究发现OVX小鼠的骨髓问充质干细胞（BMSCs）在体内外都表现衰老表型，且JAK2/STAT3信号通路激活，SASP因子分泌上调。
添加雌激素后，可以抑制JAK2/STAT3信号通路，降低SASP因子表达，缓解衰老，增强成骨分化。
用辐射诱导BMSCs衰老模型，研究发现BMSCs的JAKl/STAT3通路被激活，并伴有IL-6、IL-8、基质金属蛋白酶一9（MMP9）等SASP因子分泌增加。
使用JAKl抑制剂（JAKi），可有效抑制BMSCs的JAKl/STAT3通路，同时SASP的分泌下调。
动脉粥样硬化高脂饲料对小鼠糖脂水平的作用研究
· 论著 ·动脉粥样硬化高脂饲料对小鼠糖脂水平的作用研究王 品，齐 齐，郑斯莉，徐浩展，缪朝玉（海军军医大学药理学教研室，上海 200433）［摘要］ 目的 研究动脉粥样硬化高脂饲料对小鼠体重、血糖血脂水平及动脉粥样硬化斑块形成的作用，并且明确禁食时间对血脂检测结果的影响。
方法 对10周龄雄性ApoE基因敲除（ApoE-/-）小鼠分别给予高脂饲料及普通饲料，4个月后观察动脉粥样硬化斑块情况；对10周龄雄性C57BL/6J小鼠分别给予普通饲料4周、普通饲料2周+高脂饲料2周、高脂饲料4周，考察动物的体重、肝脏、血糖、血脂水平，并分析正常饮食条件下取材前禁食12、6 h及不禁食条件下对血脂检测结果的影响。
结果 给予高脂饲料的ApoE-/-小鼠动脉斑块面积显著增加（P<0.01）；给予高脂饲料的C57BL/6J小鼠的体重增加（P<0.01），肝脏脂肪样变；血糖、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）水平显著升高（P<0.01），而三酰甘油(TG)水平明显下降（P<0.01）。
相比于禁食12 h，禁食6 h及不禁食条件下检测到的三酰甘油水平明显升高（P<0.01）。
结论 动脉粥样硬化高脂饲料可加速ApoE-/-小鼠形成动脉粥样硬化斑块，显著升高血糖、TC及LDL-c水平，但明显降低TG值。
禁食时间可影响血清TG的检测结果。
［关键词］ 高脂饲料；动脉粥样硬化；血糖；三酰甘油；胆固醇［中图分类号］ R965 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1006-0111（2021）02-0121-05［DOI］ 10.12206/j.issn.1006-0111.202012002Effect of atherosclerotic high-fat diet on the level of glucose and lipid in mice WANG Pin，QI Qi，ZHENG Sili，XU Haozhan，MIAO Chaoyu（Department of Pharmacology, Naval Medical University, Shanghai 200433, China）［Abstract］ Objective To study the effects of atherosclerotic high-fat diet on body weight, blood glucose, blood lipid levels and atherosclerotic plaque formation in mice, and to determine the effect of fasting time on the results of blood lipid testing. Methods 10-week-old male ApoE knockout (ApoE-/-) mice were given high-fat diet and normal diet. The atherosclerotic plaques were observed four months later. 10 week old C57BL/6J male mice were given regular diet for 4 weeks, regular diet for 2 weeks + high-fat diet for two or four weeks. Body weight、liver、glucose, and the serum lipid levels were examined. The influence of fasting for 12 h, 6 h or no fasting on blood lipid detection results before sacrificing were studied. Results The atherosclerotic plaque area of ApoE-/- mice given high-fat diet increased significantly (P<0.01). C57BL/6J mice given high-fat diet gained weight (P<0.01). The glucose, TC, LDL-c and HDL-c were also increased in C57BL/6J mice with liver fat accumulation while the level of TG was significantly decreased(P<0.01). Compared with the fasting 12 h group, serum triglyceride (TG) was significantly increased (P<0.01）in fasting 6 h and no fasting groups. Conclusion The atherosclerotic high-fat diet can accelerate the formation of atherosclerotic plaques in ApoE-/-mice, significantly increase blood sugar, TC and LDL-c levels, but significantly reduce TG values.. The fasting time can affect serum triglyceride (TG) level.［Key words］ high fat diet；atherosclerosis；glucose；triglyceride；cholesterol动脉粥样硬化以慢性血管炎症及大中动脉内皮下脂质斑块形成为主要特征，内皮细胞、平滑肌细胞、免疫细胞等均参与动脉粥样硬化的过程，随着斑块的积累，累及多种器官导致其病变[1]。
体内成血管实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解血管生成的基本原理和过程。
2. 掌握体内成血管实验的方法和步骤。
3. 分析实验结果，探讨血管生成过程中的关键因素。
二、实验原理血管生成是指血管新生的过程，包括血管形成和血管再生两个阶段。
血管生成在生理和病理过程中都具有重要意义，如组织修复、肿瘤生长等。
本实验采用体内成血管实验，通过构建一个模拟血管生成的模型，观察血管生成的过程，分析影响血管生成的因素。
三、实验材料1. 实验动物：C57BL/6小鼠，雌雄各5只，体重20-25g。
2. 实验试剂：血管内皮生长因子（VEGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）、肝素钠、透明质酸酶等。
3. 实验仪器：显微镜、手术器械、组织切片机、凝胶成像系统等。
四、实验方法1. 术前准备：实验动物术前禁食12小时，自由饮水。
实验前1小时给予肝素钠0.5ml静脉注射，以防止血栓形成。
2. 手术操作：（1）将小鼠麻醉，消毒腹部皮肤。
（2）沿腹部正中线切开皮肤，暴露腹壁。
（3）将腹壁两侧的肌肉组织分离，暴露腹主动脉。
（4）在腹主动脉下端用细线结扎，形成一段无血管区域。
（5）将VEGF、PDGF、肝素钠和透明质酸酶混合均匀，注入无血管区域。
（6）缝合腹壁，无菌敷料包扎。
3. 观察与记录：（1）术后第3天、第7天、第14天，观察小鼠腹部皮肤颜色、质地及血管生成情况。
（2）取小鼠腹主动脉、肝、脾、肾等组织，进行组织切片。
（3）用显微镜观察组织切片，记录血管生成情况。
五、实验结果1. 术后第3天，观察小鼠腹部皮肤颜色正常，质地柔软，无异常。
2. 术后第7天，观察小鼠腹部皮肤颜色开始变红，质地变硬，血管生成明显。
3. 术后第14天，观察小鼠腹部皮肤颜色红润，质地柔软，血管生成更为明显。
4. 组织切片观察结果显示，实验组小鼠腹主动脉、肝、脾、肾等组织均出现血管生成现象，与对照组相比，血管密度明显增加。
六、实验讨论1. 体内成血管实验结果表明，VEGF、PDGF、肝素钠和透明质酸酶等试剂能够促进血管生成。
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/ 产品说明
细胞名称：小鼠主动脉内皮细胞C57 货号：CRC57
物种来源：小鼠数量：1X10^6
传代次数：2~3是否肿瘤：否
培养条件:90%DMEM高糖培养基+10%胎牛血清培养温度温度：37℃
注意事项：
1、收到细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。
2、收到细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。
,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。
如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。
若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。
弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清. 刚接到细胞，若细胞不多时血清浓度可以加到15％去培养。
若细胞迏到80%左右，血清浓度还是在10％。
4、收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML培养基继续培养：超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。
如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心3分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。
吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于4℃冰箱，以备不时之需。
6、24小时后，细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。
（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS或Hanks’液洗涤后弃去。
加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般1-3分钟，不超过5分钟。
可以放入37℃培养箱消化。
轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入3-5ml培养基终止消化。
用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。
弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。
（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞，悬浮细胞。
严格无菌操作。
换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。