荧光显微镜操作手册
荧光显微镜操作手册
Olympus BX51
物镜： 4 ×0.16 （无DIC）
10×0.40
20×0.75
40×1.00 oil
100×1.40 oil
荧光滤色块转盘： 1. WU 蓝
2. WIB 绿（长通）
3. WIBA 绿（带通）
4. WIG 红
5. CFP 青
6. YFP 黄
操作步骤：（注意：样品须在低倍镜下放置和取下）
DIC观察：
1.打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关）
2.将样品置于载物台上，用样品夹夹好
3.将起偏器、检偏器、DIC棱镜推入光路，荧光滤块转盘拨到“1”位置，DIC棱镜应
与相应的物镜倍数相匹配
4.先选用低倍物镜（“10×”）
5.调节透射光的强度，调节焦距，找到视野
6.换到高倍镜头，观察样品
7.DIC观察时，光路选择拉杆拉到中间位置，既可观察，也可拍照
荧光观察：
1.打开明场电源开关
2.打开汞灯电源开关
3.将样品置于载物台上，用样品夹夹好
4.检偏器、DIC棱镜在光路外
5.将荧光光路shutter打开（“○”为开，“●”为关），需保护样品时关闭shutter
6.光路选择拉杆推至最里边
7.根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置
8.通过两组减光滤片调节激发光强度
9.从低倍镜开始观察，调焦，找到预观察视野，
10.依次换到高倍镜头，观察样品
11.拍照时光路选择拉杆完全拉出
普通明场观察：
1.打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关）
2.将样品置于载物台上，用样品夹夹好
3.起偏器、检偏器、DIC棱镜在光路外，荧光滤块转盘拨到“1”位置，DIC棱镜拨到
明场（BF）位置
4.先选用低倍物镜（“4×”）
5.调节透射光的强度，调节焦距，找到视野
6.依次换到高倍镜头，观察样品
7.光路选择拉杆拉到中间位置既可观察，也可拍照
关机：
1.关闭汞灯电源（注意：汞灯需使用半小时以上方可关闭，关闭半小时以后方可再次
开启）
2.将透射光调到最小，关闭明场电源开关
3.将镜头转到低倍镜，取出样品，若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头
4.确认数据已经保存，关闭软件
5.使用光盘拷贝数据（禁止使用移动储存设备拷贝数据）
6.关闭电脑，登记使用时间、荧光数字等使用情况
Olympus IX71
物镜：物镜倍数相差环
4 ×0.13 PHL
10×0.30 PH1 20×0.45 PH1 40×0.60 PH2 60×1.35 oil （无相差）
荧光滤色块转盘： 1. WU 蓝
2. WIB 绿（长通）
3. WIBA 绿（带通）
4. WIGA 红
5. CFP
6. YFP
操作步骤：
相差观察：
1.打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关）
2.将样品置于载物台上
3.将光路选择旋钮调至观察位置
4.从低倍镜开始观察，调节到与镜头相匹配的相差环，荧光滤块转盘拨到“1”的位
置
5.调节透射光光强，调节焦距，找到预观察视野
6.依次换到高倍镜，（注意调节相差环）观察样品
7.拍照时将光路选择旋钮调至相机位置
荧光观察：
1.打开明场电源开关
2.打开汞灯开关
3.将样品置于载物台上
4.将荧光光路shutter打开（“○”为开，“●”为关），需保护样品时关闭shutter
5.将光路选择旋钮调至观察位置
6.根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置
7.通过两组减光滤片调节激发光强度
8.从低倍镜开始观察，调焦，找到预观察视野，
9.依次换到高倍镜头，观察样品
10.拍照时将光路选择旋钮调至相机位置
普通明场观察：
1.打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关）
2.将样品置于载物台上
3.将光路选择旋钮调至观察位置
4.从低倍镜开始观察，相差环拨到明场（BF）位置，荧光滤色块转盘拨到“1”的位
置
5.调节透射光光强，调焦，找到预观察视野
6.依次换到高倍镜，观察样品
7.拍照时将光路选择旋钮调至相机位置
关机：
1. 关闭汞灯电源（注意：汞灯需使用半小时以上方可关闭，关闭半小时以后方可再次
开启）
2. 将透射光强调到最小，透射光选择按钮按出
3. 关闭明场电源开关
4. 将镜头转到低倍镜，取出样品，若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头
5. 确认数据已经保存，关闭软件
6. 使用光盘拷贝数据（禁止使用移动储存设备拷贝数据）
7. 关闭电脑，登记使用时间、荧光数字等使用情况
Olympus SZX16
物镜：1×
变倍：0.7~11.5
荧光滤色块转盘：UV 蓝
GFPHQ 绿
RFP2 红
操作步骤：
明场观察：
1.将样品置于载物台上
2.推入光路选择拉杆，荧光滤块转盘拨到空位
3.选择合适的光源
⑴冷光源观察
使用不透明的底板（黑或白），打开环形光电源开关（“︱”为开，“○”为
关），调节光强度，找到预观察视野，调节变倍比，观察样品
⑵底光源观察
使用透明玻璃底板，打开底座电源开关（“︱”为开，“○”为关），将LBD
滤片推入光路，调节反光镜方向、对比度和光强度，找到预观察视野，调
节变倍比，观察样品
4.拍照时将光路选择拉杆拉出
荧光观察：
1.将样品置于载物台上
2.一般选择黑色不透明底板
3.打开汞灯电源开关
4.荧光光路挡板推出
5.根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置
6.找到预观察视野，调节变倍比
7.观察样品
8.拍照时将光路选择拉杆拉出
关机：
1.关闭汞灯电源（注意：汞灯需使用半小时以上方可关闭，关闭半小时以后方可再次
开启）
2.将明场光强调到最小，关闭明场电源开关
3.取出样品，将变倍比调到最小
4.确认数据已经保存，关闭软件
5.使用光盘拷贝数据（禁止使用移动储存设备拷贝数据）
6.关闭电脑，登记使用时间、荧光数字等使用情况
软件应用
1.双击打开DP Controller软件
2.点击预览键，选择image size(一般1360 X 1024)、objective、ISO sensitivity(明
场拍照选择ISO200，荧光拍照选择ISO400)、exposure mode(一般选择manual)，调节exposure time
3.调节黑/白平衡（明场拍照用白平衡，荧光拍照用黑平衡）。点击color面板，点击one
touch 在图片背景位置选个小框，软件自动做好平衡
4.若需添加标尺，点击scale面板，选中show scale，选择标尺显示模式和长度，选中
free size，改变标尺长度
5.若需调整图象色阶，点击level面板，拖动小滑块调整色阶，可以改变图象对比度
6.点击capture面板，还可再次调节曝光时间、图象亮度及对比度。点击拍照键，获取图
象
7.此时弹出DP manager软件，选择保存图象格式保存图象到硬盘上
8.若需将不同通道图象合成，可点击DP manager软件中image→image composition，选
择需合成图片的名称，点击apply，merging image生成，保存合成图象
9.若需拍摄Timelapse,点击Timelapse/Movie面板，选择拍摄模式，选择拍摄时间、间隔
时间等参数，再点击capture面板点击拍摄键，即可拍摄连续图片
注意事项
1.工作日使用仪器,开关机器、汞灯由工作人员负责，操作者不
得自行开关！
2.若使用油镜，使用完毕后，镜头的檫拭也由工作人员负责。
3.中午、晚上及双休日为经过培训后具有完全独立操作资格使用
者的使用时间，需本平台特批，课题组长签字同意并担保
仪器的使用安全。
Nikon ECLIPSE Ti倒置荧光显微镜使用说明
Nikon ECLIPSE Ti倒置荧光显微镜使用说明 操作步骤： 本显微镜的荧光光路与明视场（相差、DIC也属明视场）光路相对独立。当使用明视场时，无需打开荧光光源，进打开总电源即可。当使用荧光观察时，可同时打开总电源和荧光电源。 明视场观察： 1.开机：按动总电源开关“1”处接通电源，此时开关和指示灯点亮，打开显微镜底座左侧的透射照明器开关，从小到大调节照明器开关下方的亮度调节旋钮，使照明亮度适当。 2.首先将聚光器模板A放入光路，用10×物镜对样品进行对焦，调节目镜的屈光度调节环，然后换用40×物镜观察样品。 3.关机：将亮度调节旋钮旋至亮度最暗位置，关掉显微镜底座左侧的透射照明器开关，然后按动总电源开关“0”处关闭电源。 DIC微分干涉观察： 开机、关机等与明视场观察相同，区别是要使用聚光器相对应的DIC模板N1及起偏器、检偏器，将其放入光路后，再使用专用的银白色DIC物镜对焦观察。在观察过程中可旋转起偏器，达到最佳的观察效果。 相差观察： 开机、关机等与明视场观察相同，区别是要使用聚光器相对应的相差模板PH1。 荧光观察： 1.开机：先打开荧光灯电源开关，然后按住电源开关上方的荧光灯激发按钮3秒钟后松开，即可见荧光灯点亮。 2.打开荧光转盘上的荧光拨杆至“0”位置，此时荧光光路打开。旋转荧光转盘，转入所对应的滤光片位置即可进行荧光观察；在观察过程中可插入位于荧光灯源前方的减光片，以改变荧光强度，减弱对活细胞样品的损伤。 3.关机：直接关掉荧光灯电源开关即可。 注意事项： 1.短时间内频繁开关荧光灯电源，将极大的缩短荧光灯寿命。 2.荧光光源打开后即可使用，但必须使用20分钟才可以关闭；关闭30分钟以后才可以再次打开，否则会导致荧光灯损坏。 3.不要同时反方向转动显微镜左右两侧的调焦钮，否则会导致显微镜损坏。 4.粗动调焦钮达到限定位置后，如果继续向同一方向旋转会引起显微镜故障。请不要旋转过度。 5.显微镜光源在工作时会产生高温，因此小心不要接触光源以防烫伤，也不要将易燃品如纸张、布、塑料和酒精等放置于光源附近。
显微镜测量使用说明
WT-1000GM操作手册 上海微图仪器科技发展有限公司上海巍途光电技术有限公司
相机及操作软件介绍 上海微图仪器科技发展有限公司上海巍途光电技术有限公司专业开发显微镜数字相机CMOS系列(TCA-1.3C,TCA-1.3B/W,TCA-3.0C,TCA-5.0)及CCD 系列(TCC3.3MP、TCC-1.4HICE）广泛应用于显微镜成像、凝胶成像、化学发光成像等众多科研质检生产领域。 WT-1000GM 为通用相机操作、图像处理、图像测量软件，该软件操作方便，功能专业，性能稳定，界面友好，是您工作科研的得力助手。
相机安装及软件操作介绍 1.1 操作系统要求 本公司相机及软件支持windows XP, vista, 2000, 操作系统，但要求系统安装Directshow 9.0 components. 1.2Hardware requirement 1.2.1电脑要求配置 CPU: Intel Pentium 4－2.6G； 内存RAM: 512 MB 硬盘HDD: 10GB USB: USB2.0 interface 安装相机驱动 2.1安装相机 2.1.1. 自动安装 1．打开光盘内TCA-1.3驱动Driver文件夹，运行安装程序 。 2．出现下面窗口，选择下一步。
3．出现该窗口选择，仍然继续4．TCA-1.3已经成功安装到计算机内
5. 安装完毕右下角任务栏会提示硬件安装完成，选择设备管理器可以看到如下 位置有该相机的属性显示。 2.1. 3. 安装软件 直接运行WT-1000GM文件夹里的Sutup.exe文件就可以将软件安装到指定的位置了 1. 双击“setup.exe”
微生物检验实验室分枝杆菌属检验标准操作规程
微生物检验实验室分枝杆菌属检验标准操作规程 1. 概述 分枝杆菌属是一类细长的、具有分枝生长趋势的需氧杆菌，因具有耐受或抵抗酸和乙醇脱色的特点，又称为耐酸或抗酸菌。分枝杆菌属至今已发现80多个种，除结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌外，其他分枝杆菌，如堪萨斯分枝杆菌、耻垢分枝杆菌等，统称为非结核分枝杆菌。 2. 标本类型 痰液、体液（包括脑脊液、腹水、胸水）组织，粪便等标本。 3. 鉴定 3.1 形态与染色：菌体细长，或稍弯曲，两端钝圆，大小为（0.2~0.5um） ×（1~5um）。革兰染色不易着色，抗酸染色呈红色。以痰液直接涂片，结核分枝杆菌多为单个存在，有时呈V、Y、人字形排列，痰菌量多时可排列为束状或集聚成团。荧光染料金胺“O”染色，在荧光显微镜下观察呈金黄色荧光。 3.2 培养特性：结核分枝杆菌生长缓慢，繁殖一代约需18h，因此在罗氏固 体培养基上需要培养2~6星期方可见到菌落。菌落多为粗糙型，不透明，乳白为米黄色，呈干燥颗粒状，形似菜花。液体培养基中结核分枝杆菌生长较快，可形成表面菌膜或沉
于管底。 3.3 生化反应：不发酵糖类，耐热触酶、耐热磷酸酶和吐温80水解试验均 阴性，尿素酶、中性红、结核分枝杆菌烟酸、烟酰胺酶和硝酸盐还原试验均阳性。 3.4鉴别要点： 3.4.1 本菌特征：菌体细长，抗酸染色呈红色；生长缓慢，菌落乳白或米黄 色，呈干燥颗粒状，形似菜花状；不发酵糖类，尿素酶、中性红试验阳性。 3.4.2 与牛分枝杆菌的鉴别：结核分枝杆菌菌体细长，烟酸、烟酰胺酶、硝酸盐还原试验均为阳性；牛分枝杆菌菌体较短、较粗，烟酸、烟酰胺酶、硝酸盐还原试验均为阴性。 3.5 操作步骤 3.5.1 中性培养基 3.5.1.1 标本的处理 痰液：挑取约5ml痰液至已标记的50ml离心试管中，加等量的2%N-乙酰 半胱胺-氢氧化钠前处理液（去污染）；漩涡振荡20秒；静置15分钟，勿超过20分钟；加无菌PBS（pH6.8）至约50ml,盖紧盖子；离心3000r/min，15分钟；倒掉上清液；添加1-3mlPBS(pH6.8)以中和pH至6.8.
Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜 操作手册
Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜操作手册 目录: 1 系统得组成 系统组成及光路示意图 实物照片说明 2 系统得使用 2、1 开机顺序 2、2 软件得快速使用说明 2、3 显微镜得触摸屏控制 2、4 关机顺序 3 系统得维护 1 系统得组成 激光扫描共聚焦显微镜系统主要由:电动荧光显微镜、扫描检测单元、激光器、电脑工作站及各相关附件组成。 系统组成及光路示意图: 电脑工作站 激光器 电动荧光显微镜扫描检测单元 实物照片说明: 电动荧光显微镜 扫描检测单元 CO2 培养系统控制器 激光器 电脑工作站 2 系统得使用 2、1 开机顺序 (1)打开稳压电源(绿色按钮) 等待2 分钟(电压稳定)后,再开其它开关 (2)主开关[ MAIN SWITCH ]“ON” 电脑系统[ SYSTEMS/PC ]“ON” 扫描硬件系统[ PONENTS ]“ON” (3)打开[ 电动显微镜开关] 打开[ 荧光灯开关] (注:具有5 档光强调节旋钮) (4)Ar 离子激光器主开关“ON” 顺时针旋转钥匙至“—” 预热等待约15分钟, 将激光器[ 扳钮] 由“Standby”扳至 “Laser run”状态,即可正常使用 (5)打开[ 电脑开关],进入操作系统
注:键盘上也具有[ 电脑开关] 2、2 软件得快速使用说明 (1)电脑开机进入操作系统界面后,双击桌面共聚焦软件ZEN 图标 (2)进入ZEN 界面,弹出对话框: “Start System”——初始化整个系统,用于激光扫描取图、 分析等。 “Image Processing”——不启动共聚焦扫描硬件,用于已 存图像数据得处理、分析。 (3)软件界面: 1 功能界面切换:扫描取图(Acquisition)、图像处理(Processing)、维护(Maintain) (注:Maintain仅供Zeiss专业工程师使用) 2 动作按钮; 3 工具组(多维扫描控制); 4 工具详细界面; 5 状态栏; 6 视窗切换按钮; 7 图像切换按钮;8 图像浏览/预扫描窗口;9 文档浏览/处理区域;10 视窗中图像处理模块 动作按钮: Single ——扫描单张图片、并在图像预览窗口显示。 Start ——开始扫描单张图片或一个实验流程(1组图片,如XYZ、XYT 等)。 Stop ——暂停/结束扫描。 New ——建立一个新图像扫描窗口/文档。 激光连接状况检查 眼睛观察/相机/共聚焦LSM 光路切换(ZEN软件界面右上角): Ocular ——通过观察筒用眼睛观察。(激光安全保护装置自动阻断激光、保护眼睛。) Camera ——光路切换至相机。 LSM ——共聚焦扫描成像光路。 显微镜设置: “Ocular”——> “Light Path”——> 点击物镜图标,选择物镜——> 样品聚焦。 透射光控制(Transmitted Light Control) 反射光光闸控制(Reflected Light Shutter) 荧光激发块选择(Reflector) 共聚焦LSM 扫描设置 点击“LSM”(ZEN软件界面右上角),系统切换至共聚焦扫描光路: 光路设置: Smart Setup ——自动预设光路 选取“荧光探针”、“颜色”、扫描方法, 应用“Apply”。 (注:Fastest 为最快速扫描,多条激光谱线同时扫 描。Best signal 为最佳信号扫描,多条激光谱线顺 序扫描。Best promise 为兼顾速度与信号得折
Nikon 80i荧光显微镜使用说明
Nikon 80i荧光显微镜使用说明 △荧光显微镜属贵重仪器，未经保管人员同意请勿擅自使用。 △严格按照操作步骤进行，在使用过程中如发现问题应及时向保管人员反映。 △因违反操作规程，而导致仪器损坏，根据本中心《损坏仪器赔偿制度》进行赔偿。 △使用者在使用完毕后应进行登记. 维护和保养 本仪器应定期进行维护和保养。 ●防止镜头霉变，定期除湿。 ●为防止损坏荧光灯泡，荧光光源关闭后，15分钟内不得再重新开启。 ●荧光灯泡的最佳使用期限是200小时，如发现荧光强度明显降低应更换荧光灯泡。 荧光显微镜操作步骤 △显微镜系精密仪器，务请不要碰击，要仔细耐心使用。 △荧光光源关闭后，15分钟内不得再开启。 △荧光灯泡的最佳使用期限是200小时，因此每次使用时请尽量缩短时间。 1.插上电源插座，打开主机电源开关。 2. 将待检标本置于载物台上。 3. 用10×物镜对焦点，根据使用者的眼间距调节双目镜筒的间距。 4. 调节光圈及灯光强度至合适位置。 5. 调节粗调和微调使标本至最清晰。 6. 拔出活动杆，使光路通过CCD至显示器。 7.保存图象至电脑中。 8. 使用完毕后关掉电源，如镜头上有指纹或污迹用擦镜纸将其擦除。 ●荧光光源操作 1.插上荧光光源电源插座，打开荧光光源电源开关。 2. 打开光栅。 3. 根据使用荧光素的不同选择不同的荧光滤光片。 4. 将待检标本置于载物台上。 5. 用10×物镜对焦点，根据使用者的眼间距调节双目镜筒的间距。 6. 调节粗调和微调使标本至最清晰。 7. 拔出活动杆，使光路通过CCD至显示器。 8. 保存图象至电脑中。 9. 使用完毕后关掉电源，如镜头上有指纹或污迹用擦镜纸将其擦除。 10. 登记使用情况。 Nikon 80i主要技术参数：放大倍数40-1000，CFI60无限远光学系统，内置滤色镜，数字成像头。明场、暗场、简单偏光、荧光/明场、荧光/暗场。波长：330-380，450-490，510-560。主电压90~250V。频率：50~60HZ。功率消耗：最大160W。周围环境温度：10~36℃。相对湿度：0~80%。污染级别：2。 应用范围：正置明场、相差及荧光，主要用于细胞及细菌等的观察及荧光摄影。
荧光显微镜操作手册簿
荧光显微镜操作手册 Olympus BX51 物镜： 4 ×0.16 （无DIC） 10×0.40 20×0.75 40×1.00 oil 100×1.40 oil 荧光滤色块转盘： 1. WU 蓝 2. WIB 绿（长通） 3. WIBA 绿（带通） 4. WIG 红 5. CFP 青 6. YFP 黄 操作步骤：（注意：样品须在低倍镜下放置和取下） DIC观察：
1.打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关） 2.将样品置于载物台上，用样品夹夹好 3.将起偏器、检偏器、DIC棱镜推入光路，荧光滤块转盘拨到“1”位置，DIC棱镜应 与相应的物镜倍数相匹配 4.先选用低倍物镜（“10×”） 5.调节透射光的强度，调节焦距，找到视野 6.换到高倍镜头，观察样品 7.DIC观察时，光路选择拉杆拉到中间位置，既可观察，也可拍照 荧光观察： 1.打开明场电源开关 2.打开汞灯电源开关 3.将样品置于载物台上，用样品夹夹好 4.检偏器、DIC棱镜在光路外 5.将荧光光路shutter打开（“○”为开，“●”为关），需保护样品时关闭shutter 6.光路选择拉杆推至最里边 7.根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置 8.通过两组减光滤片调节激发光强度 9.从低倍镜开始观察，调焦，找到预观察视野， 10.依次换到高倍镜头，观察样品 11.拍照时光路选择拉杆完全拉出 普通明场观察： 1.打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关） 2.将样品置于载物台上，用样品夹夹好 3.起偏器、检偏器、DIC棱镜在光路外，荧光滤块转盘拨到“1”位置，DIC棱镜拨到 明场（BF）位置 4.先选用低倍物镜（“4×”） 5.调节透射光的强度，调节焦距，找到视野 6.依次换到高倍镜头，观察样品 7.光路选择拉杆拉到中间位置既可观察，也可拍照 关机： 1.关闭汞灯电源（注意：汞灯需使用半小时以上方可关闭，关闭半小时以后方可再次 开启） 2.将透射光调到最小，关闭明场电源开关 3.将镜头转到低倍镜，取出样品，若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头 4.确认数据已经保存，关闭软件 5.使用光盘拷贝数据（禁止使用移动储存设备拷贝数据） 6.关闭电脑，登记使用时间、荧光数字等使用情况
显微镜简易使用手册.
显微镜使用说明 1，显微镜开关时卤素灯电压一般应调至最低。 2，转换物镜时，应旋转物镜架，不要用手直接转物镜。 3，荧光光源汞灯由于使用寿命短,为保证尽可能的延长使用时间和安全，汞灯电源开/关间隔时间必须大于三十分钟。 4，显微镜的各光学部件应调节到位（如，DIC 插件，荧光滤片，物镜等），以免影响显微镜的正常工作。如果不到位,那么观察时 通常会看到月牙形阴影. 5，使用油镜时应使用专业用油，不要用其它介质（如香柏油），以免损伤镜头。每次使用完油镜后，需将油镜擦拭干净（物镜及 玻片）。（正置显微镜，油滴在样品上。倒置显微镜，油直接滴 在物镜上。） 6，不要用手直接触摸光学部件的表面（如物镜，荧光模块，目镜等），以免留下手指印在上面，影响观察效果。 7，在拆卸全自动显微镜的聚光镜，荧光滤片盒（倒置显微镜）等部件时，应在断电的情况下进行操作。 8，因为各款显微镜的有效工作距离/特性等各有不同，使用前应充分了解所用仪器的特性及观测范围，以免因不恰当的操作，对 显微镜及其配件造成损害。 提示：1，观测样品时（特别是金相样品），切不可将物镜撞及样品，以免将物镜镜头压碎。 2，移动显微镜时，应做到小心轻放，以免因震动而对光学部件及光路造成损害，影响显微镜的使用。（建议移动显微镜时，先将各光学部件拆 除，移位后，再重新安装。） 二一般观察方式的调节 为了观察和拍摄好图像，需要对显微镜和CCD以及CCD软件都要求进行调节。 在进行显微观察和摄影前，首先要做的就是对显微镜进行调节。调节项目包括柯勒照明、相差环调节、荧光中心调节等。其中后两项一般在安装是已经调节好，以后一般情况下就不需要再调节了。 柯勒照明调节方法如下：
倒置荧光显微镜操作说明
显微镜及数码成像系统操作简要 第一部分观察方法步骤 1、明场观察方法步骤 2、相差观察方法步骤 3、荧光观察方法步骤 第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)
1、明场观察方法步骤 步骤 涉及部件 主开关拨到“I ” 准备工作：柯勒照明光轴中心调节 第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。 ① 聚光镜升高到最高位置 聚光镜高度升降旋钮 ② 用10X 物镜聚焦至清晰 ③ 视场光阑打至最小 视场光阑 ④ 逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像 聚光镜升降旋钮 ⑤ 调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心 聚光镜中心调节旋钮 ⑥ 逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切 视场光阑 ⑦ 稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可 视场光阑
步骤 涉及部件 I ” 载物台、标本夹 3、荧光观察方法步骤 准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯） 步骤 涉及部件 主开关拨到“I ” CD+或CD-钮
主开关拨到“I ” ND 片插槽 /孔径光阑 准备工作： 高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯） 调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。 ，待弧 载物台
观察筒 视场光阑中心调节钮 第二部分使用IPP 拍摄图像流程 1. 在桌面点击以下图标打开IPP。 2. 在菜单栏中，（采集）Acquire 菜单下点击（视频/数字图像采集）Video/Digital Capture，或点击工具栏中，即出现控制CCD 拍照的对话框。
OLYMPUSIX51倒置显微镜操作规程-厦门大学医学院中心试验室
倒置荧光显微镜 操作规程 Olympus IX5 厦门大学医学院中心实验室 黄静茹 2017年3月
说明： ①透射光主开关；②汞灯高压电源开关；③透射光光强控制钮；④滤色片架； ⑤光路选择杆；⑥X轴和Y轴调节钮；⑦物镜转盘；⑧粗/微调焦旋钮； ⑨双目观察筒；⑩屈光度调节环；?聚光镜高度调节钮；?聚光镜对中旋钮；?视场光阑调节杆；?孔径光阑调节杆；?聚光镜转盘；?荧光光闸（SHUTTER）；?荧光激发块转盘；?荧光减光阀
正式操作仪器之前请注意如下事项： 首先要在仪器预约保护时间内及时使用本人注册的校园卡刷卡开始实验。 1.查看仪器使用记录本，如之前使用者有记录仪器异常情况，请不要开机使用。 2.查看仪器整体有无异常，周围环境是否正常，需要时要开启室内空调，检查 并清空除湿机水箱。 3.查看仪器使用记录本及刷卡机“日历”，如之前使用者刚刚关机，请等候30 分钟以上再开机使用。 一、开机 1、打开透射光源（白光）主开关①； 2、打开荧光光源（汞灯高压电源）②； 3、打开电脑，进入cellSens Standard工作站； 备注：标本为HE染色、免疫组化时，不需要打开荧光光源；标本为荧光染料染色时，一般也不需要打开白光光源。 二、明场观察（Bright Field BF） 1、正确放置标本，BF主要用于HE染色、免疫组化标本； 2、转动荧光激发块转盘?到“6”的位置； 3、转动聚光镜转盘?到“BF”位置，直到听到咔嗒声； 4、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）； 5、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜，调节白光光强控制钮③至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧聚焦观察,根据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩； 三、相衬观察（Phase contrast PH) 1、正确放置标本，PH主要用于没有任何染色的、较透明的标本； 2、转动荧光激发块转盘?到“6”的位置； 3、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜； 4、转动聚光镜转盘?，使相衬光学元件与所用物镜相匹配（见表1）； 5、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）； 6、调节光强控制钮③直至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧进行聚焦观察,根
荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程
荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程 荧光显微镜是中的一种。 关键字： 荧光显微镜使用方法 荧光显微镜操作规程 荧光显微镜使用 使用方法和荧光显微镜操作规程 1. 用窗帘遮蔽光线，关闭房间内的灯光，除去显微镜的防尘罩，确保显微镜灯室通风良好、无遮盖。装上汞灯灯箱，并转动灯箱卡圈上的拨杆，将灯箱与镜臂连接。 2. 将汞灯灯箱的电源插头插入荧光电源箱后的插座，再将荧光电源箱的插头插入220V外接电源。 3. 打开电源开关，电压表显示出电源电压，如电源电压波动不大于额定电压值的±5%，即可按下启动开关点燃汞灯，如因天气太冷或电压不稳定等原因，一次启动未点燃汞灯，可以多揿动几次。待超高压汞灯弧光达到稳定状态并达到最大发光效率，即可开始工作。 4. 灯泡的调中： （1）任选一块标本放在载物台上. （2）转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移出光路，转动滤色片组转换手轮，将紫光（Ｖ）或蓝光（Ｂ）或绿光（Ｇ）激发滤色片组转入光路，并将10×荧光物镜转入光路。
（3）调节粗微调手轮，将标本像调焦清晰。 （4）前后推动垂直照明器右边的聚光镜调焦推杆，使视场光栏成像清晰，转动视场光栏拨杆将视场光栏收小，调节视场光栏调中螺钉使视场光栏居中，然后再将视场光栏开至最大。 （5）转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移入光路，前后调节灯箱上的聚光镜拨杆，使汞灯的弧光在视场内成像清晰。 （6）调整灯箱上的灯泡水平调节螺钉和垂直调节螺钉，使汞灯的弧光居中。 （7）调整反光镜水平调节螺钉和垂直调节螺钉，使光源的反射像与汞灯的弧光分开。 （8）转动聚光镜旋钮把聚光镜移出光路，此时视场照明均匀。 5. 荧光观察： （1）将荧光染色标本放到载物台上。 （2）将10×平场物镜或40×荧光物镜转入光路，调节载物台纵横移动手轮，将标本移入光路。 （3）转动滤光片转换拨轮，将荧光染色标本所需要的激发滤光片组转入光路。激发滤光片组编号刻在滤片组转换拨轮上。 滤光片选择正确与否，是荧光显微镜能否得到正确应用的关键。选用滤光片时，必须遵守斯托克斯定律：激发滤光片的透射波长＜双色束分离器的透射波长＜阻断滤光片的透射波长。 由于激发滤光片、双色束分离器和阻断滤光片，出厂时已按其用途和本身的光学特性进行了严格的组合匹配，在观察和摄影时，只需选择滤光片组即可。 （4）调节粗调手轮，当看清荧光图像轮廓后，再用微调手轮调焦，直至看到清晰的荧光图像。 （5）当需要得到较强的荧光图像时，可转动聚光镜旋钮把聚光镜移入光路，可获得较明亮的荧光图像。
德国Zeiss激光扫描共聚焦显微镜快速操作手册
德国Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜 快速操作手册 制作制作：：Zeiss 光学仪器光学仪器（（上海上海））国际贸易有限公司 孙 凯 2009年6月
目录目录：： 1 系统的组成 系统组成及光路示意图 实物照片实物照片说明说明 2 系统的使用 2.1 开机顺序 2.2 软件的软件的快速快速快速使用使用使用说明说明 2.3 显微镜显微镜的的触摸屏控制 2.4 关机顺序 3 系统的维护
1 系统的组成 激光扫描共聚焦显微镜系统主要由激光扫描共聚焦显微镜系统主要由：：电动荧光显微镜电动荧光显微镜、、扫描检测单元扫描检测单元、、激光器激光器、、电脑工作站及各相关附件组成电脑工作站及各相关附件组成。。 系统系统组成及光路组成及光路组成及光路示意图示意图示意图：： 电脑工作站 激光器 扫描检测单元 电动荧光显微镜
实物照片说明实物照片说明：： 电动荧光显微镜 扫描检测单元 CO 2培养系统控制器 激光器 电脑工作站
2 系统的使用 2.1 开机顺序 （1）打开稳压电源打开稳压电源（（绿色按钮绿色按钮）） 等待2分钟（电压稳定）后，再开其它开关 （2）主开关 [ MAIN SWITCH ]“ON ” 电脑系统 [ SYSTEMS/PC ]“ON ” 扫描硬件系统 [ COMPONENTS ]“ON ” （3）打开 [ 电动显微镜开关 ] 打开 [ 荧光灯开关 ] （注：具有5档光强调节旋钮） （4）Ar 离子激光器离子激光器主开关主开关 “ON ” 顺时针旋转钥匙 至 “—” 预热预热等待约等待约15分钟分钟，， 将激光器 [ 扳钮 ] 由“Standby ”扳至 “Laser run ”状态状态，，即可正常使用 （5）打开 [ 电脑开关 ]，进入操作系统 注：键盘上也具有 [ 电脑开关 ]
参考答案_《检验仪器学》作业一
《检验仪器学》作业 第二章 显微镜技术和显微镜 （1）简述光学显微镜的一般操作规程。 （2）荧光显微镜使用过程中的注意事项。 第四章 光谱分析技术机相关仪器 （1）试计算说明单色性不纯对分光光度法准确性的影响？ （2）某溶液用2cm 吸收池测量时，透射率为60%，其他条件不变，若改用0.5cm 和3.5cm 吸收池对此溶液进行测量，透射率和吸光度值分别为多少？（88%，0.055；40.8%，0.389） （3）在光度分析中，某溶液浓度为C 0，以1cm 吸收池测得透光度为T 0，若溶液浓度增加1倍，则透光度是多少？（T 02 ） （4）某溶液测得其吸光度为A 0，稀释后测得其吸光度为A 1，已知A 0－A 1＝0.477，稀释后的透射比T 1应为多少？（T 1=3T 0） （5）浓度为0.51mg/ml 的Cu 2+溶液，用环己酮草酰二腙显色后，于波长600nm 处用2cm 吸收池测量，测得透射率为50.5%，求摩尔吸光系数ε和比吸收系数a 。 （a=0.29L/(g*cm)；ε=18.64L/(mol*cm)） （6）将蛋白质溶液配制成下列标准浓度的溶液，加碱性硫酸铜显色后，在540nm 波长处测得透射率如下： 根据以上数据绘制标准曲线并使用最小二乘法给出标准曲线的表达式。另取未知蛋白质溶液，经同样操作测得吸光度值为0.306，求该蛋白质溶液的浓度。 21()010210102 [10] lg bc k k I I A k bc I I --+=++
（0.49g/L） （7）某种酶和一磷酸腺苷的混合物样品，在吸收峰处两组分相互干扰。如在波长280nm处测定时，总吸光度为0.460；在260nm处测定时，总吸光度为0.580。试计算各成分的浓度。吸收池厚度为1cm，摩尔吸光系数为： 酶：ε280=2.96ⅹ104/L mol cm 、ε260=1.52ⅹ104/L mol cm ，一磷酸腺苷：ε280=2.40ⅹ103/L mol cm 。 、ε260=1.50ⅹ104/L mol cm （酶：1.35*10-5mol/L；一磷酸腺苷：2.52*10-5mol/L） （8）下图为a、b两种物质的吸收光谱，如要使用等吸收双波长法分别测定两物质的含量，试作图选择测定波长和参比波长，并给出相应说明。 （9）用普通光度法测定铜，在相同条件下测得1.00×10-2 mol·L-1标准铜溶液和含铜试液的吸光度分别为0.699和1.00，如光度计透光度读数的相对误差为0.5％。测试液浓度测定的相对误差为多少？（-0.217%）
病毒的分离培养标准操作规程
病毒的分离培养标准操作规程 1．目的：规范病毒分离及鉴定培养操作流程，保证试验结果的重复性和稳定性。 2．术语：EID50/0.1ml，ELD50/0.1ml，TCID50/0.1ml，CPE 3．操作程序与方法： 3.1 采样：对于病死或剖杀动物，采集病毒主要聚集组织部位，一般为淋巴结、脾脏、肺脏、血液等；对于活体动物，可用无菌棉拭子采集含病毒量最多部位（口腔、鼻腔、生殖道、肛门等）的分泌液。采集样品如不能立即处理，应冻存与-20℃备用。长 途运输应用冰盒或4℃低温保存。 3.2 样品处理：组织块可用剪刀剪碎并研磨，加入10倍体积含300-500UI/ml青、 链霉素的生理盐水（PBS），反复冻融2-3次。棉拭子可直接混于3-5倍体积含300-500UI/ml 青、链霉素的生理盐水（PBS），反复冻融2-3次。8000rpm离心15min，取上清液用0.22μm滤膜过滤，透过液即为病毒原液，收集保存，短期保存4℃，长期保存用液氮。 3.3接种培养：将病毒原液接种与特定细胞单层中，连续盲传4-6代，观察细胞是 否产生特异性CPE，并计算及TCID50/0.1ml。禽源类病毒可接适当日龄鸡胚或鸡胚成纤维细胞进行扩增和鉴定，并计算及EID50/0.1ml和ELD50/0.1ml。 3.4 病毒纯化：采用“有限梯度稀释法”结合“噬斑纯化法”对病毒进行纯化； 3.5 动物回归实验：分离培养并纯化好的病毒回归接种动物，观察动物病变是否为该病毒引起及病变特征是否典型。 3.6分子生物学鉴定：基因组提取并设计特异性引物，对分离病毒保守区基因片段 进行特异性扩增，并测序，从分子水平对其进行鉴定。 3.7血清学鉴定：用标准阳性血清与分离病毒作用一段时间后再次接种特异性细胞 或鸡胚验证病毒特异性。或者用荧光标记抗体与病毒作用后荧光显微镜下观察其特异性。 4.注意事项 4.1采样过程应做好自身防护，烈性病不得随意分离。 4.2 实验动物应及时焚烧或深埋等处理，避免病毒扩散到环境中。 4.3 纯化好毒种应及时做好扩毒并建立毒种库。 1
荧光显微镜及其操作
荧光显微镜(Fluorescence microscope)及其操作 某些物质经一定波长的光（如紫外光）照射后，物质中的分子被激活，吸收能量后跃迁至激发态；当其从激发态返回到基态时，所吸收的能量除部分转化为热量或用于光化学反应外，其余较大部分则以光能形式辐射出来，由于能量没能全以光的形式辐射出来，故所辐射出的光的波长比激发光的要长，这种波长长于激发光的可见光部就是荧光(fluorescence)。所谓荧光就是某些物质在一定波长光（如紫外光）的照射下、在极短时间内所发出的比照射光波长更长的可见光。由此可见，被照射物质产生荧光必须具备以下两个条件：①物质分子（或所特异性结合的荧光染料）必须具有可吸收能量的生色团；②该物质还必须具有一定的量子产率和适宜的环境（如溶剂、pH、温度等）。荧光显微术是利用荧光显微镜结可发荧光的物质进行观测的一种实验技术。某些物质在一定短波长的光(如紫外光)的照射下吸收光能进入激发态，从激发态回到基态时, 就能在极短的时间内放射出比照射光波长更长的光(如见光)，这种光就称为荧光。有些生物体内的物质受激发光照射后可直接产生荧光, 称为自发荧光(或直接荧光)，如叶绿素的火红色荧光和木质素的黄色荧光等。有的生物材料本身不能产生荧光，但它吸收荧光染料后同样却能发出荧光，这种荧光称为次生荧光(或间接荧光)，如叶绿体吸附吖啶橙后便可发出桔红色荧光。荧光显微镜具特殊光源（多为紫外光光源），提供足够强度和波长的激发光，诱发荧光物质发出荧光。在视场中所所观察到的图像，主要是样品的荧光映像。 （一）光源 现在多采用200W的超高压汞灯作光源，它是用石英玻璃制作，中间呈球形，内充一定数量的汞，工作时由两个电极间放电，引起水银蒸发，球内气压迅速升高，当水银完全蒸发时，可达50～70个标准大气压力，这一过程一般约需5～15min。超高压汞灯的发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发射光量子的结果。它发射很强的紫外和蓝紫光，足以激发各类荧光物质，因此，为荧光显微镜普遍采用。 超高压汞灯也散发大量热能。因此，灯室必须有良好的散热条件，工作环境温度不宜太高。 新型超高压汞灯在使用初期不需高电压即可引燃，使用一些时间后，则需要高压启动（约为15000V），启动后，维持工作电压一般为50～60V，工作电流约4A左右。200W超高压汞灯的平均寿命，在每次使用2h 的情况下约为200h，开动一次工作时间愈短，则寿命愈短，如开一次只工作20min，则寿命降低50%。因此，使用时尽量减少启动次数。灯泡在使用过程中，其光效是逐渐降低的。灯熄灭后要等待冷却才能重新启动。点燃灯泡后不可立即关闭，以免水银蒸发不完全而损坏电极，一般需要等15min。由于超高压汞灯压力很高，紫外线强烈，因此灯泡必须置灯室中方可点燃，以免伤害眼睛和发生爆炸时造成操作。 超高压汞灯（100W或200W）光源的电路和包括变压、镇流、启动几个部分。在灯室上有调节灯泡发光中心的系统，灯泡球部后面安装有镀铝的凹面反射镜，前面安装有集光透镜。 国产超高压汞灯GCQ-200型性能良好，可以代替HBO-200等型的进口灯泡，平均寿命在200h以上，价格也比较低。 我国研制的一种简易轻便型高色温溴钨荧光光源装置，体积小，重量轻，功率小，交、直流两用（自带直流电源），易于携带，使用方便，已推广应用。
显微镜使用调节说明书
显微镜结构示意图
显微镜使用说明 您现在使用的是1600倍生物显微镜，配有三个目镜（5X、10X、16X）和三个物镜（10X、40X、100X） 1．低倍目镜和低倍物镜的使用（低倍镜容易找到目标）：（1）准备：将显微镜取出，平放于桌面上，转动粗调焦旋钮，将镜筒略升高使物镜转换器与载物台距离拉开，以便安装物镜，按任意顺序装上三个物镜（物镜转换器有一个孔上有防尘盖，装物镜时需取下），物镜需顺着螺纹方向旋到底；取下目镜筒上的防尘盖并插上一个低倍的目镜，安装完毕将显微镜置于前方略偏左侧，必要时使镜臂倾斜以便观察。再旋转物镜转换器，将低倍物镜对准载物台中央的通光孔（可听到“咔哒”声）。 （2）对光：打开光圈，转动聚光镜使其上升(其作用是把光线集中到所要观察的标本上)，双眼同时睁开，以左眼向目镜内观察，同时调节反光镜的方向，直到视野内光线明亮均匀为止。反光镜的平面镜易把其他景物映入视野，一般用凹面镜对光,光线不足时,可使用电光源（电光源的安装见下文）。 （3）放标本片：标本片朝上放到载物台上用移动尺的两个夹子夹住标本片（640倍的显微镜是用压片压住标本），调节移动尺的两个旋钮把要观察的部分移到通光孔的正中央。 （4）调节焦距：从显微镜侧面注视物镜镜头，同时旋转粗调焦旋钮，使镜筒缓慢下降，大约低倍镜头与玻片间的距离约5mm时，再用左眼从目镜里观察视野，左手慢慢转动粗调焦旋钮，使镜筒缓缓上升，直至视野中出现物像为止。如物像不太清晰，可转动细调焦旋钮，使物像更加清晰。
如果按上述操作步骤仍看不到物像时，可能由以下原因造成： ①转动调焦旋钮太快，超过焦点。应按上述步骤重新调节焦距． ②物镜没有对正，应对正后再观察。 ③标本没有放到视野内，应移动标本片寻找观察对象。 ④光线太强，尤其观察比较透明的标本片或没有染色的标本时，易出现这种现象，应将光线调暗一些后，再观察。 2．低倍物镜转高倍物镜（40倍物镜）的使用 （1）依照上述操作步骤，先用低倍镜找到清晰物像。 （2）眼睛从侧面注视物镜，用手转动物镜转换器，换高倍镜（40倍）。注意，此时不需要调节粗调焦旋钮。 （3）眼睛向目镜内观察，同时微微上下转动细调焦旋钮，直至视野内看到清晰的物像为止。 如按上述操作仍看不到物像时，可能由下列原因造成： ①观察的部分不在视野内，应在低倍镜下寻找到后，移到视野中央，再换高倍镜观察。 ②标本片放反了，应把标本片放正之后，再按上述步骤操作。 ③焦距没调好，应仔细调节焦距。 如需要更换标本片时，应该先把镜筒升高，然后把标本片取下再换上。 3．油镜的使用（100倍的物镜称为油镜） 应先按上述步骤用低倍镜、高倍镜找到要观察的物像，然后再用油镜观察，操作如下： （1）先用10倍物镜观察标本的概况； （2）更换40倍物镜，把所要观察的部分移到视野中央； （3）把镜筒上升约厘米，再把油镜转到工作位置；
显微镜使用调节说明书样本
资料内容仅供您学习参考，如有 不当或者侵权，请联系改正或者 删除。 显微镜结构示意图 光阑调节杆 截物台 移动尺 聚光撓调节器 遞色片托架 底座 —反光镜
删除。 显微镜使用说明 您现在使用的是1600 倍生物显微镜, 配有三个目镜（ 5X、10X 、16X）和三个物镜（ 10X、 40X 、100X） 1．低倍目镜和低倍物镜的使用（低倍镜容易找到目标） : （ 1）准备: 将显微镜取出, 平放于桌面上, 转动粗调焦旋钮, 将镜筒略升高使物镜转换器与载物台距离拉开, 以便安装物镜, 按任意顺序装上三个物镜（物镜转换器有一个孔上有防尘盖, 装物镜时需取下） , 物镜需顺着螺纹方向旋到底; 取下目镜筒上的防尘盖并插上一个低倍的目镜, 安装完毕将显微镜置于前方略偏左侧, 必要时使镜臂倾斜以便观察。再旋转物镜转换器, 将低倍物镜对准载物台中央的通光孔（可听到”咔哒”
删除。 声）。 （ 2）对光: 打开光圈, 转动聚光镜使其上升（其作用是把光线集中到所要观察的标本上）,双眼同时睁开, 以左眼向目镜内观察, 同时调节反光镜的方向, 直到视野内光线明亮均匀为止。反光镜的平面镜易把其它景物映入视野, 一般用凹面镜对光,光线不足时, 可使用电光源（电光源的安装见下文）。 （ 3）放标本片: 标本片朝上放到载物台上用移动尺的两个夹子夹住标本片（ 640 倍的显微镜是用压片压住标本） , 调节移动尺的两个旋钮把要观察的部分移到通光孔的正中央。 （ 4）调节焦距: 从显微镜侧面注视物镜镜头, 同时旋转粗调焦旋钮, 使镜筒缓慢下降, 大约低倍镜头与玻片间的距离约5mm时,再用左眼从目镜里观察
荧光共定位的标准操作规程
荧光共定位的标准操作规程（编号：058） 1、目的及适用范围 该SOP用来规范荧光共定位操作。 2、主要仪器 摇床、细胞培养箱、激光共聚焦显微镜 3、试剂及配制方法 DMEM （配方参考培养基）过滤灭菌、PBS pH7.2、PBST （PBS中加入0.5%TritonX100）、4%BSA （PBST配置）、一抗和相应的二抗、DAPI（1：5000 PBS配置）、4%多聚甲醛（PBS配置）、封片液（50%甘油，PBS配制） 4、操作步骤 4.1将灭菌后的盖玻片放入24孔板，每孔放一片，每孔加入0.5mL培养于含10%FCS的DMEM培养液中的293T细胞，37℃5%CO2孵箱孵育，待细胞长至合适密度，进行相关的实验。 4.2在相应的实验进行后，取出37℃5%CO2孵箱中培养的24孔板，吸去24孔板中的培养液，用PBS 洗一次。 4.3用含4%多聚甲醛的PBS室温固定细胞30min以上（可4℃固定过夜）。 4.4弃去多聚甲醛固定液，用PBST洗3次。时间保持在15min以上。 4.5用PBST配4%BSA 4℃封闭过夜或37℃1h，500μL/孔。 4.6取出4℃封闭过夜的24孔板，加入一定浓度用BSA稀释的一抗。37℃1h。 4.7 PBST洗5次，500μL /孔，10min/次，慢摇。 4.8选用相应的二抗荧光抗体，室温或37℃孵育1h，500μL/孔。 4.9 PBST洗5次，500μL /孔，10min/次，慢摇。 4.10 加入DAPI室温染色2~5min。PBST洗3次。 4.11 在盖片上滴一滴封片液，将盖片扣在载片上，以指甲油封闭四周。在避光4℃环境中可保存一周左右。激光共聚焦荧光显微镜观察。 5、注意事项 5.1本实验的最终细胞密度不能超过80%，在固定细胞时，尽量使细胞密度处于合适的状态，这样荧光照片的效果才比较好。 118
显微镜DMS中文说明书
数码液晶生物显微镜 使用说明书
使用前须知 简介： 数码生物显微镜是显微镜、数字液晶屏、高清晰专业数码相机及大容量存储卡科学地融为一体高科技产品。数码显微镜具有视觉舒适，操作简便直观等特点。数码图像与观察同步，可方便地观察生物图像，明显降低视觉压力，减少头晕、目眩等生理反应；很适合长时间的观察操作。同时强大的图像处理技术，为您的实时拍照、存储、输出、打印提供最优化。 一、安全注意事项 1.开箱时应小心，防止镜头等附件跌落损坏。 2.避免将显微镜放置在有阳光直射、高温或高湿、多尘、以及容易受到强烈震动的地方，确 保载物台平坦、水平并足够坚固。 3.需要移动显微镜时，双手分别始终紧握显微镜体机架二侧。 4.工作时，显微镜体灯室附近会有些发热，应确保灯室周围有足够的散热空间。 5.使用本公司提供的专用电线。将本机接地，避免雷击。 6.为保证安全，更换卤素灯或保险丝前，一定要确保主开关已处于“O”（断开）状态，并切 断电源，同时等待灯泡及灯室完全冷却后进行。（指定灯泡：6V/20W 卤素灯泡）。 7.输入电压检查：显微镜背部标明的输入电压与供电电压一致，否则将会导致显微镜严重损 坏（注意双目液晶显示观察头的供电一定要用标配的12V电源）。 8.载物台上不得放置过重物体，以免栽物台变形甚至损坏。 二、维护和保养 1.本光学仪器所有镜头均经装校调整，请勿自行拆装。 2.物镜转换器和粗微动调焦机构，结构精密，请不要轻易拆装。 3.仪器应保持清洁，经常清除灰尘，清洁时应特别注意不要污染光学部件。 4.透镜的污迹如指纹、油脂可使用干净的软棉布、镜头纸或纱布蘸上无水（纯）酒精（乙 醇）或二甲苯轻轻拭去。（注意：乙醚和酒精都是易燃化学物品，应远离明火，勿将这些化学物品接近明火。尽量在通风良好的房间使用这些化学品。） 5.不要使用有机溶剂擦拭显微镜，特别是液晶屏等，如要清洁，请使用中性去除污剂。 6.使用时，如果显微镜被液体沾湿，应立即切断电源，并擦干。 7.仪器应放置在阴凉，干燥的地方，不使用显微镜时，应用防尘罩罩上。罩上前一定要等 灯室冷却下来。
涂片找抗酸杆菌操作规程-检验科微生物与血库作业书
涂片找抗酸杆菌操作规程 （改良碱性复红法） 1检验目的 检验样本中是否含有抗酸杆菌，为临床提供诊断依据。 2原理 结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌，因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易着色，但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予染色，然后再以酸及乙醇加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色（红色）。 3标本要求 （1）标本类型：病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等 （2）标本采集：见标本采集手册（一般须得深咳痰，其它无特殊要求。） （3）标本储存和运输：可室温保存、室温运送。病人标本须密封运送以避免污染环境。 4容器和添加剂类型 痰盒、尿杯、试管等 6试剂 试剂名称：结核菌染色液 （2）试剂生产厂家：广东省结核病研究所统一配制
（3）包装规格：3X500ML （4）试剂盒组成： 试剂1：石碳酸复红液 试剂2：酸性酒精溶液 试剂3：亚甲基蓝溶液 7仪器设备： CHKIKO320奥林巴斯双目显微镜BH-2奥林巴斯落射荧光显微镜8校准程序 送XX市计量质量检测研究所校准 9操作步骤 ⑴涂片经火焰固定，加石碳酸复红液染色5分钟或更久（需加温）。 ⑵水洗（之后尽可能将水沥干）。 ⑶加酸性酒精溶液，脱色1-2分钟。 ⑷水洗（假如标本面还可以看到残存红色时，再加酸性酒精溶液脱掉红色为止）。 ⑸加亚甲基蓝溶液染色30秒，水洗，干燥。 (6)镜检。 质量控制： 参加我科质量管理组的质量控制活动。 干扰和交叉反应 麻风菌可能对检验结果产生影响。 12生物参考区间
涂片未见抗酸杆菌 13患者检验结果的可报告区间 涂片未见抗酸杆菌/涂片见细长、红色抗酸杆菌 14临床意义： 结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素，其毒力主要是在机体中细胞内、外生长与大量繁殖的能力，细菌成分与其代谢产物引起免疫反应（Ⅳ型）导致一系列组织学上的意义。