斑马鱼的产卵准备
斑马鱼繁殖
斑马鱼繁殖
斑马鱼的繁殖比较容易。
繁殖用水要求pH6.5-7.5,硬度6-8，水温25-26摄氏度。
斑马鱼最喜欢自食其卵，因此繁殖缸内铺小石头及水草，便于落卵附着。
繁殖时可按雌雄鱼1：2的比例防入繁殖缸内，一般头天晚上防入，第二天上午或中午就可以产卵受精。
排完卵要将种鱼捞出另养。
一条雌鱼每次可排卵300-1000粒不等。
受精卵经2-3天可孵出仔鱼，再经2天仔鱼开始游动觅食，开始先以“洄水”喂之，10天后可改喂其他小型鱼虫。
斑马鱼的繁殖周期约7天左右，一年可连续繁殖6-7次，而且产卵量高。
斑马雄鱼体狭长，活泼好动，体色较深；雌鱼腹部膨大，活动摇摇摆摆，体色较淡。
较易繁殖，喜在水族箱底部产卵，一般可选6月龄的亲鱼。
在25厘米×25厘米×25厘米的方形缸底铺一层尼龙网板，或铺些鹅卵石，当鱼卵产出后即落入网板下面或散落在小卵石的空隙中。
选取2～3对亲鱼，同时放入繁殖缸中，一般在黎明到第二天上午10时左右产卵结束，将亲鱼捞出。
其卵无粘性，直接落入缸底，到晚上10时左右，没有受精的鱼卵发白，可用吸管吸出。
繁殖水温24℃时，受精卵经2～3天孵出仔鱼；水温28℃时，受精卵经36小时孵出仔鱼。
雌鱼每次产卵300余枚，最多可达上千枚。
水温25℃时，7～8天的仔鱼开食，此时投喂蛋黄灰水，以后再投喂小鱼虫。
斑马鱼繁殖力很强，是初学饲养热带鱼的首选品种。
为什么养的斑马鱼从来不繁殖
为什么养的斑马鱼从来不繁殖
环境不适：饲养的斑马鱼一直不繁殖，可能是饲养的环境太差导致。
它们在繁殖的时候需要25-26℃之间的水温，还要
将PH值保持在6.5-7.5之间。
未到繁殖的年纪：也有可能是
因为没有到繁殖的年纪，它们需要发育3-4个月才能进行繁殖。
没有异性鱼：还有可能是因为没有异性的鱼，饲养者需要添加异性鱼。
1、原因：斑马鱼一直不繁殖可能是饲养的环境不适宜，
它们虽然适应能力比较强，但是对繁殖的环境要求还是比较高的，饲养者如果不给它们准备一个合适的繁殖环境，它们也有可能会一直不繁殖。
2、解决办法：饲养者需要将水温保持在25-26℃之间，
还要将PH值保持在6.5-7.5之间，水的硬度控制在6-8之间。
斑马鱼有食卵的习惯，饲养者需要提前准备一个隔离的网。
二、未到繁殖的年纪
1、原因：斑马鱼从来不繁殖可能是还没有发育成熟，而
且它们的发育和环境有很大的关系，如果环境适宜，它们发育的速度就会快一些。
2、解决办法：斑马鱼从出生到发育成熟，需要3-4个月
的时间，饲养者在它们发育的期间，要保持环境稳定，这样它们才能更好地发育。
三、没有异性鱼
1、原因：斑马鱼从来不繁殖可能是鱼缸内没有异性的鱼，比如鱼缸内只有公鱼没有母鱼，或者只有母鱼没有公鱼等。
这种情况也是不会繁殖的。
2、解决办法：饲养者需要观察鱼缸内斑马鱼的性别，然
后添加不同性别的斑马鱼，等它们发情后，可以捞出单独繁殖。
斑马鱼的繁殖与胚胎观察
斑马鱼的繁殖与胚胎观察一、实验目的学会根据实验目的查阅相关文献和资料，独立设计实验方案并完成实验操作、数据记录和结果总结全过程。
二、实验原理斑马鱼为小型热带鱼，成鱼体长4公分左右，鱼体分布有头尾方向的蓝色条纹。
斑马鱼的饲养对水质要求不高，孵出后约3天达到性成熟，成熟鱼每隔几天可产卵一次。
卵子体外受精，体外发育，胚胎发育同步且速度快，胚体透明。
发育温度要求在25-31℃之间。
斑马鱼的繁殖周期约7天左右，受精卵经2-3天可孵出仔鱼，一年可连续繁殖6-7次，而且产卵量高。
三、实验内容1、斑马鱼的人工繁殖观察2、斑马鱼胚胎发育观察四、器材材料饲养箱鱼箱恒温培养箱电子显微镜饲料细网五、实验步骤1、亲鱼的选取与喂养从水产基地里挑选15到20尾亲鱼，并根据皮肤、外形等使选出的雌雄比例接近1.5:1，并分开放入饲养箱中，饲喂3～4天。
饲喂饲料为活性饲料与配合饲料结合，每天饲喂2～3次。
2 、亲鱼的受精与孵化4天后，将所选出的雌雄亲鱼一并放入同一鱼箱中，控制水温25～28℃。
为防止亲鱼吞噬鱼卵，可用网孔2～3mm的网将亲鱼限制在产卵池的上半部活动。
将受精结束后获得的受精卵捞出，剔除异物，将眼观有白色小斑点、畸形异常卵去除。
然后将受精卵移入培养箱中进行孵化，温度为25～28℃，温差不能够超过0.5℃。
3、胚胎发育的观察斑马鱼的胚胎发育分为7个阶段：合子期、分裂期、囊胚期、原肠胚期、体节期、咽囊期、孵化期。
合子期：合子是一个包括卵黄和细胞质的半透明混合物，在动物极存在一个小的清晰的细胞质断层，即细胞泡的残余。
卵裂期:该时期的特点是细胞分裂间期短；细胞变小；不等裂。
斑马鱼的受精卵为端黄卵，卵裂局限于胚盘部分，为不完全卵裂。
斑马鱼受精后40分左右卵裂开始，平均约每隔15分卵裂一次。
囊胚期：从第八次卵裂开始，就进入囊胚期，与其他真骨鱼不同的是，斑马鱼的囊胚期不形成囊胚期腔，只在胚盘的下层细胞的一些小的细胞形成一些细胞外间隙；同时细胞分裂周期开始延长，标志着中胚囊转换开始。
斑马鱼产子全过程
斑马鱼产子全过程斑马鱼，学名丹尼奥鱼，也称剑尾斑马鱼，是热带淡水鱼类中的一种。
它们的繁殖过程相对独特，下面将详细介绍斑马鱼的产子全过程。
斑马鱼的产卵过程包括交配、卵的产出和受精、卵的孵化。
首先是交配过程。
斑马鱼一般在雌鱼8个月大、雄鱼10个月大时性成熟。
成熟的雄鱼拥有鲜艳的颜色和长尾巴，而雌鱼则较为沉闷。
斑马鱼是颗粒卵，雄鱼通过颜色和尾巴晃动来吸引雌鱼的注意。
在发现对方后，雄鱼会追逐雌鱼，然后两条鱼靠近并同时向上突然弯曲身体，交配就发生在这个瞬间。
交配一般持续几秒到几分钟不等。
完成交配后，雌鱼将会开始下卵，此时雄鱼会紧紧地跟着雌鱼。
雌鱼挤压体内的卵巢，将一片片成熟的卵直接释放到水中。
由于斑马鱼卵一般较小，直径在1-2毫米之间，所以每次产出的卵大约有几十枚到几百枚不等。
卵的颜色一般为无色或者浅黄色。
在产卵期间，雄鱼会继续追逐雌鱼，并冲向雌鱼的尾部，激起雌鱼尽量释放更多的卵。
整个产卵过程大约持续几分钟到几小时不等。
完成产卵后，卵需要受精才能继续孵化成小鱼。
雄鱼会释放精子，它会通过水流迅速到达卵子旁边，进行受精作用。
斑马鱼的受精方式是在水中受精，而不是体内受精。
精子直接游到卵子表面与之结合，形成受精卵。
受精完成后，卵子表面会有一层黏液保护受精卵不受伤害。
经过受精后，卵开始孵化。
卵的孵化时间与水温有关，一般在24-36小时之间。
斑马鱼的卵孵化过程相对简短。
在孵化期间，卵会逐渐变成灰色，并且会有卵黄充当营养源供小鱼孵化后使用。
当卵孵化后，幼鱼会开始出壳，它们会成群地挤在卵壳下面。
很快，小鱼身体上的鳞片就会开始展开，并且迅速游动。
幼鱼身体上的颜色会比较淡。
综上所述，斑马鱼的产子全过程大致包括交配、卵的产出和受精、卵的孵化。
斑马鱼的繁殖过程相对快速，需要适应合适的水温和环境才能保证卵的顺利孵化。
斑马鱼相关实验操作
斑马鱼相关实验操作斑马鱼⼈⼯繁殖、受精和胚胎发育⼀、实验⽬的了解斑马鱼的⽣活和繁殖习性，掌握斑马鱼⼈⼯繁殖技术，了解斑马鱼受精、胚胎发育过程和形态模式形成的特点。
⼆、斑马鱼的⽣活和繁殖习性斑马鱼（Danio rerio）为热带鱼类，可在⼀年内多次产卵。
在合适的养殖条件下，4⽉龄的斑马鱼即性成熟；性成熟后每1-2周可以产卵⼀次，⼀条雌鱼⼀次可以产出数百颗卵⼦。
斑马鱼产卵受温度和光照长度的调节。
最适产卵⽔温为28.5℃，产卵的光调节周期为光照14⼩时，⿊暗10⼩时。
为防⽌⾃然产卵，性成熟的雌、雄斑马鱼必须分开养殖。
斑马鱼具有下列特点：1、繁殖周期短，不受季节限制，容易获得所需要的精⼦、卵⼦和胚胎材料。
2、⼩型鱼类，可在实验室⾼密度养殖，饲养成本低。
3、是脊椎动物，具有和⼈类相似的器官和组织。
4、体外受精、体外发育，胚胎培养条件简单。
5、胚胎透明，可以在活体上直接观察器官的发育。
6、发育周期短，在28.5℃温度下培养，受精后24⼩时即可以形成个体的基本结构。
因此，斑马鱼现在选择作为发育⽣物学研究的模式动物。
三、实验器材和材料斑马鱼养殖系统，⼤塑料盆（直径约58cm）两个，塑料筛框（直径约36cm）⼀个，中号塑料盆（直径约36cm）1个，加热棒，加⽓泵，12cm培养⽫若⼲，9cm培养⽫若⼲，数个胶头滴管。
曝⽓⽔10L。
性成熟雌、雄性斑马鱼。
四、实验内容和程序实验前⼀天的准备：1、在实验前⼀天的早上向2个⼤塑料盆中放⼤半盆⼲净的⾃来⽔，放⼊⽓泵和加热棒，将加热棒温度调整⾄28℃（每个加热棒都有差异，需要放⼊温度计，根据温度计指⽰的实际温度调节和校准温度计），以供斑马鱼催产繁殖时使⽤。
2、曝⽓⽔将⼲净的⾃来⽔烧开后冷却，将⽓泵放⼊其中进⾏曝⽓，以为培养胚胎之⽤。
3、斑马鱼的选取和催产雌雄鱼的鉴别：性成熟的雄鱼体型修长，腹部较⼩，⽽雌鱼腹部较⼤。
选鱼的时间在实验前⼀天的晚上，在选取斑马鱼之前需要喂⾷红⾍，喂⾷后1⼩时才开始选鱼。
斑马鱼繁殖方法和注意事项
斑马鱼繁殖方法和注意事项斑马鱼是一种常见的观赏鱼类，品种丰富，性格温顺，适应力强。
繁殖斑马鱼可以通过自然繁殖和人工繁殖两种方式进行。
下面将分别介绍这两种繁殖方法以及注意事项。
自然繁殖方法：1. 提供合适的水质：斑马鱼是热带鱼，喜欢水温在24-26之间，酸碱度在PH6.5-7之间。
因此在斑马鱼繁殖期间要维持适宜的水温和水质。
可以使用加热器来调节水温，使用温度计监测水温，同时可根据需要添加适量的温度稳定剂和水质稳定剂。
2. 提供合适的鱼缸环境：在斑马鱼繁殖期间，需要提供一个合适的鱼缸环境。
鱼缸应该比较宽敞，可以考虑使用30升以上的鱼缸，让斑马鱼有足够的空间进行繁殖。
鱼缸底部可以垫上一层干净的沙子，提供几个瓶子或石块作为产卵的场所。
3. 提供适宜的饵料：在斑马鱼繁殖期间，要提供适宜的饵料。
可以使用磨碎的虫子、片状鱼食和冻干鱼食等。
每天喂食一次，每次喂食的量应适中，避免过度喂食。
4. 繁殖行为观察：斑马鱼在繁殖期间通常表现出交配行为。
雄性斑马鱼会追逐雌性斑马鱼，并在繁殖场所进行产卵。
可以通过观察繁殖行为来判断斑马鱼是否已经开始繁殖。
5. 孵化期观察：斑马鱼的卵通常在一到两天后孵化出苗鱼。
在孵化期间要保持水质的稳定，并观察孵化情况。
若发现卵壳有裂缝或苗鱼出现，可以将其转移到孵化箱或浮游槽中。
人工繁殖方法：1. 选育适宜的亲本：想要获得优良的斑马鱼品种，可以选择具有优良性状的亲本进行配对繁殖。
例如，选择色彩鲜艳、健康活泼的斑马鱼作为亲本。
2. 配对和产卵环境准备：选定配对的雄性和雌性斑马鱼，将它们放入一个准备好的产卵箱中。
产卵箱可以是一个透明的玻璃或塑料箱，底部可以垫上沙子或石块。
在箱底放上鱼卵收集网，以便收集产卵。
3. 促进交配行为：为了促进斑马鱼的交配行为，可以提高水温至28以上，并增加饵料的供给。
适当的水温和充足的食物可以刺激斑马鱼的繁殖行为。
4. 收集和孵化卵：斑马鱼产卵后，卵会附着在产卵箱的鱼卵收集网上，可以用眉笔或小刷子轻轻将卵收集到另一个容器中。
斑马鱼饲养
斑马鱼饲养
日常管理
1.将饲养容器中的粪便、残饵吸出，每天两次。
2.视水质情况进行适量换水（注：小鱼每天换水两次）；养殖用水使用经过曝气的自来水。
3.吸除残饵、粪便及换水之后，进行定时投喂。
4.投喂之后放回原环境之中。
5.盛水容器及时添加并保证曝气。
繁殖管理
1.准备产卵容器。
2.在晚上对亲鱼进行投喂之后。
将亲鱼转移到产卵容器中，雌雄分开。
3.第二天早上将产卵容器的挡板抽开。
4.经过一段时间，发现鱼卵且鱼卵数量没有明显变化时，将亲鱼移出。
5.收集鱼卵。
6.记录亲鱼配比、产卵日期。
孵化及小鱼饲养
1.观察并记录胚胎发育过程。
2.小鱼孵化之后，分开饲养（每个200ML烧杯中饲养25条左右）。
3.小鱼开口（或开始游动时）及时投喂草履虫。
4.两周龄左右开始投喂卤虫。
5.小鱼饲养过程中每日吸污、换水、投喂早晚各一次。
保证水质清新、饵料充足。
6.草履虫培养。
每天搅动草履虫液至少两次，并且每天将一缸草履虫倒出一部分，清洗烧
杯，将倒出的草履虫加入的烧杯中，并加入一部分清水和干酵母，并搅动使干酵母充分溶于水中。
转基因斑马鱼实验
转基因动物（transgenic animal）是指基因组中整合有外源基因的一类动物，整入动物基因的外源基因被称为转基因（transgene）。
嵌合体动物（chimera mosaic animal）是只有部分组织细胞的基因组中整合有外源基因的动物，称为嵌合体动物（chimera mosaic animal）。
这类动物只有当外源基因整合入的“部分组织细胞”恰为生殖细胞时，才能将其携带的外源基因遗传给子代，一般用胚胎干细胞法或逆转录病毒载体法制备的第一代转基因动物均为嵌合体动物，而显微注射法得到的第一代转基因动物中，也有20％为嵌合体动物。
转基因动物是指动物所有细胞均整合有外源基因，则具有将外源基因遗传给子代的能力，通常被称为转基因动物。
转基因动物技术是常规分子生物学技术的延伸和拓展，它不仅为人们研究生命科学提供了一个更有效的工具，而且随着转基因动物技术的发展，转基因产品将会广泛渗透到医疗、卫生、农产品和食品中。
转基因技术是生物学领域最新重大进展之一，已能渗透到生物学、医学、畜牧学等学科的广泛领域。
转基因动物已成为探讨基因调控机理、致癌基因作用和免疫系统反应的有力工具。
同时人类遗传病的转基因动物模型的建立，为遗传病的基因治疗打下坚实的理论和实验基础。
转基因技术涉及外源基因的组建、载体、受体、基因导入技术、供转基因胚胎发育的体外培养系统和宿主动物等方面的内容。
鱼类是脊椎动物中最丰富多样性的类群，估计达30000 种。
这种多样性反映在诸如形态、行为、生殖、发育、世代时间和对环境的耐受等各种特征的广泛差异，从而使各种转基因鱼模型的常规制作既是挑战，又是机遇。
有的鱼类的卵是透明的，能直接对发育进行监察，有的情况下对活体内报告基因的表达进行判断。
有些鱼的种类还可能进行其他的遗传操作来诱导单倍体、三倍体和纯合子产雌品系。
尽管鱼的种类很多，但作研究用的却要少的多。
因为野生种群的持续减少，为帮助满足高质量蛋白质需要，水产养殖较常用鱼是鲶鱼、虹鳟鱼、罗非鱼、大西洋鲑和鲤鱼。
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注意事項（1）
• 母魚體內的卵，如果太長時間沒有交配， 或是沒有完全排完，卵會留在體內，並不 會重新被吸收回去，如果超過太久沒有排 卵，母魚腹部中的卵會死亡，並且造成母 魚腹部類似囊腫的殘留物，這種囊腫會讓 母魚下次排卵不順，甚至無法排卵而被公 魚激烈的追求之後而難產死亡，目前也沒 有較好的方式改善這種情況。一般認為， 固定一段時間就讓公魚跟母魚進行交配， 讓母魚把卵排出，是較好的方式。
• 母魚：性成熟後肚子開始膨大，裡面卵囊 形成卵，臀鰭較公魚來得小、短且 較圓，魚鰭末端有時也有黃色出 現，但相對於公魚出現的時間比較 少。
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步驟一、布置環境
※光週期調控：斑馬魚需要在約14:10光照週 期下，才會產生交配產卵的 行為。 ※水溫：需在24~28.5℃。 • 在適當的水溫下，將公魚和母魚分缸進行 飼養約5-7天後，即可在光週期天亮後1小 時內，看到斑馬魚進行交配行為。
活動目的
• 為順利獲得斑馬魚受精卵，需調控其光週 期並布置產卵環境。 • 本活動目的主要為產卵準備，以獲得實驗 所需之魚卵。
分辨斑馬魚雌雄
• 公魚：與性成熟前體態相似，保持原本的 流線型，臀鰭較母魚長。在身上各 個魚鰭末端，時常可看到有明顯的 黃色出現。
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分辨斑馬魚雌雄
交配中
• 公魚在交配的過程中，採絕對主動方式， 會先以眼睛觀察並決定要向哪一隻母魚進 行攻勢。其次會進行求偶舞蹈，在想要交 配的母魚周圍繞圈圈或是８字型，游向母 魚後，利用腹部側面摩擦母魚，刺激母魚 排卵，公魚便會同時射精。
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產卵
• 母魚會一次把全部腹中的卵包括卵囊全部 排出，一胎約會生出200-500顆卵。排出後 母魚會重新產生新的卵，約3-5天就可以再 生下一次卵。 • 伴隨著卵的釋放，會有其他激素一起排出， 這種激素可以讓母魚順利把卵排放出來， 另外一個功能則是讓其他還產生卵的母魚， 停止排卵的行為，這在演化上算是一種競 爭的結果。
步驟二、交配前準備
• 產卵前一天的準備：
1. 挑選出適當的公魚跟母魚，體長要盡量一樣， 母魚可以略大一些。 2. 將公魚與母魚分別放置產卵缸的兩側，中間 設置隔板將其隔開。 3. 產卵房的準備
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步驟三、交配當天
• 光週期控制的隔天清晨，當天亮後約十分 鐘，公魚和母魚會恢復清醒。 • 當母魚發現公魚時，由於前一天的費洛蒙 影響，母魚在天亮後也釋放另一種費洛蒙， 使公魚往母魚方向前去的行為更加明顯及 強烈。 • 此時就可以準備打開隔板，讓公魚跟母魚 進行交配。
注意事項（2）
• 斑馬魚的卵在受精後，約72小時即可孵化， 在這段期間內，不需要給予打氣，只要放 在乾淨的水中即可孵化。放在解剖顯微鏡 下，即可清楚的看到斑馬魚胚胎發育的整 個經過。
診斷 斑馬魚的產卵準備
前言
• 斑馬魚為研究脊椎動物胚胎發育的理想模式生物。
【補充：斑馬魚胚胎發育影片觀賞(1)(2)(3)】
• 優點:
–子代數多 –可以光週期誘發產卵 –體外受精，胚體透明，胚胎發育快 –可以誘發產生突變種 –可以分子生物技術控制特定基因表現或產生基因轉殖魚 –在胚胎發育時期的訊號傳遞路徑和哺乳動物有很高的同 源性