血清尿酸测定作业指导书
血、尿液尿素氮(BUN)测定作业指导书
血、尿液尿素氮（BUN）测定作业指导书1.实验原理Vitros BUN/UREA试剂是一种干燥，多涂层的，在透明的聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
将一滴患者样品滴于干片上，分布层会使之均匀地分布。
水和非蛋白质成份进入下面的试剂层，与尿素酶反应生成氨。
半透膜只允许氨进入呈色反应层，与指示剂发生反应。
经过一段固定的孵育时间后，通过测定呈色剂的反射强度可间接求出尿素氮的含量。
测定方式：比色法波长：670nm测试时间和温度：37℃约５分钟反应过程：尿素酶非蛋白质成份＋水—————→氨+ 二氧化碳氨＋氨指示剂—————→呈色剂2. 标本：2.1 病人准备：血清无特殊要求。
要留取24小时尿样。
2.2 样品类型：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆。
定时收集的，稀释后的尿样。
2.3 标本采集与处理：2.3.1 血清和血浆样品特别要注意的是：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆；不要用氟化钠作防腐剂，因为氟会抑制尿素酶。
样品采集后4小时内要离心标本，吸出血清。
处理样品时要将其当成生物污染品。
2.3.2 尿液样品定时或随时采集的尿液，特别要注意的是：不能使用以下防腐剂：冰醋酸，浓盐酸，硼酸，硼粉或甲酸钠硼酸，样品在测试前要冷藏。
测试前将1份样品加20 份试剂级别的水进行稀释。
将测试结果乘以21，就得到原始样品中尿素氮的浓度。
冷藏的样品不能立即测试。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3. 标本的存放：血清、血浆室温下最多1天；4～8℃冷藏最多5天；-18℃冷冻保存可长达6个月。
尿液样品在测试前要冷藏。
4. 标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
5. 标本拒收的标准：污染、抗凝剂、防腐剂不符合要求，标本放置时间过长。
6. 试验材料：6.1测试BUN所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit1；Vitros特制质控液；Vitros 7%BSA稀释液。
xx厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
尿酸(UA)检测标准操作规程
1、方法依据：
深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司尿酸测定方法
2、适用范围
适用于尿酸的测定
3、试剂仪器
试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒
未开启的试剂盒避光保存于2℃—8℃有效期一年。
试剂不可以冰冻。
4、操作程序
方法原理
抗坏血酸氧化酶
抗坏血酸 + O2————→脱氧抗坏血酸+ H2O
尿酸酶
尿酸 + O2 + 2 H2O ————→尿囊素 + CO2 + H2O2
过氧化物酶
2H2O2 + 4-AAP + TOOS+H+ —————→醌系色素 + 4 H2O
样本要求
新鲜血清或肝素血浆，样本收集后应尽快测定，必须避光保存，避免使用溶血样本。
上机操作
4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-220全自
动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”
4.3.2校准“
4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱取出，复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2校准程序：每30天需要定标一次。
当有以下情况时需重新定标： 1）换试剂批号或出现质控漂移时；
2）当仪器做完保养后；
3）仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行定标，定标通过后进行检测。
UA血清项目操作手册
SOP标准操作程序UA 尿酸（货号：OSR6198，OSR6298）一、目的：规范尿酸测定的操作程序，确保尿酸测定的结果准确二、适用范围：在Beckman Coulter AU分析仪上定量测定人血清中的尿酸（UA）三、临床意义尿酸是人体内嘌呤分解代谢的主要产物。
绝大多数尿酸在肝脏中形成，通过肾脏排泄，体内尿酸库由合成和排泄之间的平衡决定。
高尿酸血症可以分为原发性高尿酸血症和继发性高尿酸血症，包括生成过量或排泄减少。
原发性高尿酸血症也称作特发性或者家族性高尿酸血症。
在大多数病例中，肾小管分泌尿酸减少引起尿酸水平升高。
大约 1% 的原发性高尿酸血症患者在嘌呤代谢中存在酶缺陷，因而导致尿酸生成过多。
原发性高尿酸血症与痛风、Lesch-Nyhan 综合征，Kelley Seegmiller 综合征和磷酸核糖基焦磷酸盐合酶活性升高有关。
继发性高尿酸血症可能由营养型嘌呤摄取增加引起，伴有尿液中尿酸排泄增多。
继发性高尿酸血症与许多情况有关，这些情况包括肾功能不全，骨髓增生性疾病，溶血性疾病，牛皮癣、真性红细胞增多症、I 型糖原贮积病，酒精摄入过多，铅中毒，高嘌呤饮食，禁食，饥饿和化疗。
低尿酸血症可能由于尿酸产生减少引起，例如在遗传性黄嘌呤尿症，遗传性嘌呤核苷磷酸化酶缺乏和别嘌呤醇法治疗中。
低尿酸血症可能由于肾脏尿酸排泄增多引起，这种情况可能出现于恶性疾病，AIDS，Fanconi 综合征，糖尿病，严重烧伤和嗜酸性白细胞增多综合征。
此外，使用促尿酸排泄药物治疗和食入 X 光造影剂也会引发低尿酸血症。
定量测定尿酸的排泄有助于确定高尿酸血症的治疗方案，确认患者是应当使用促尿酸排泄药治疗以增加肾脏排泄，还是应当使用别嘌呤醇治疗以抑制嘌呤合成。
四、方法原理尿酸被尿酸酶转化为尿囊素和过氧化氢。
通过 Trinder 反应测定 H2O2。
在过氧化物酶 (POD) 的作用下，所形成的 H2O2 与 4-氨基比林和 N,N-二（4-磺丁基）- 3,5-二甲苯胺二钠盐 (MADB) 以及 4-氨基比林发生反应，生成发色团，该物质可通过双色分析仪在 660/800nm 处测定。
生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书
生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书1、前言试验名称：尿酸测定，英文名称：UA，方法：氧化酶法。
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室，目的是指导工作人员正确的在科华KHB-450全自动生化分析仪上测定血清、血浆、样本中的尿酸浓度，以保证测定结果的准确可靠。
尿酸是嘌呤、核酸的代谢产物，因此，尿酸水平异常可作为上述物质代谢异常的指征，高尿酸血症可见于：肾功能障碍、痛风、白血病、红细胞增多症、动肪粥样硬化、糖尿病、甲状腺机能减退、或其他遗传疾病，尿酸水平低可见于威乐逊氏病。
2、测定原理本试验采用改良的Trinder氏方法，其反应原理：尿酸+O2+H2O尿酸酶尿囊素+CO2+H2O2H2O2+AAP+TBHBA过氧化物酶醌亚胺色素+H2O上式中AAP为4-氨基安替比林TBHBA为3-羟基-2,4,6三溴甲酸在上述反应中，红色醌亚胺色素的生成量与样本中尿酸的浓度成正比，通过在520nm波长处测定吸光度的变化值，从而计算出尿酸的浓度，试剂中亚铁氰化钾可抑制样本中胆红素的干扰。
3、试剂试剂生产商：长海科华生物工程股份有限公司。
剂型：液体双试剂。
包装量：R1：4*40ml R2：4*20ml注册号：沪食药监械（准）字2010第2400028号。
生产许可证号：沪药管械生产许20030916号。
基本成份：试剂1：过氧化物酶300u/l3-羟基-2,4,6三溴甲酸 2.5mmol/l亚铁氰化钾0.05mmol/l磷酸盐缓冲液150mmol/l4-氨基安替比林0.7mmol/l含非反应性填充物及稳定剂试剂2：磷酸盐缓冲液150mmol/l尿酸酶500u/l储存条件和有效期：试剂避光储存于2―8℃可稳定12个月。
启用后2―10℃可稳定14天，若试剂混浊，或空白在520nm 下吸光度值高于0.4A时，则不能使用。
4、标准品：使用试剂盒附带标准品5、质控品：生产商：英国Randox公司。
剂型：干粉试剂，用5ml去离子水复溶，完全溶解30分钟后使用。
11血清尿酸测定
一、目的尿酸为核蛋白与核酸中嘌呤分解代谢的最终产物。
内源性尿酸由体内组织核酸分解代谢产生，外源性尿酸则来自于食物中核酸的分解。
尿酸除一小部分由肝脏分解破坏外，大部分经肾小球滤过随尿排出体外。
肾脏早期病变时，血中尿酸首先升高，有助于肾脏损伤的早期诊断。
二、测定方法尿酸酶-过氧化物酶偶联法三、原理尿酸酶氧化尿酸生成尿囊素和过氧化氢，在过氧化物酶催化下，过氧化氢使3，5-二氯二羟苯磺酸和4-氨基安替比林缩合成红色醌类化合物。
在520nm波长读取吸光度。
与尿酸浓度成比例。
四、标本1、静脉抽取病人空腹血，置于洁净干燥试管或含促凝剂的真空管内。
2、采血后应立即送到检验科生化室。
3、样品收到后立即分离血清，不能及时测定的血清应于2—8℃保存。
4、溶血或脂血的标本不能测定。
五、设备及试剂1、希迈全自动生化仪。
2、上海复星长征公司尿酸试剂。
3、尿酸试剂应贮存于2—8℃冰箱。
六、操作步骤1、样本的准备：将编好号的样品离心，取血清加入样品杯放到样品盘的规定位置，再把样品盘放到仪器中相应位置。
2、试剂的检查：每天测定前先检查各种试剂的数量、效期、定标等情况，确认无误后方可进行测定。
3、操作方法：详见希迈生化仪操作手册。
七、质量控制每天操作过程中应使用上海复星长征公司的生化质控血清至少做一次室内质控，每年定期参加海南省临检中心所组织的室间质评。
八、干扰因素遇高浓度维生素C的标本，可使测定结果偏低。
九、参考区间男性：150—420 umol/l女性：90—360 umol/l十、实验室解释1、血清尿酸测定对痛风诊断最有帮助，痛风患者血清中尿酸增高，但有时亦会出现正常尿酸值。
2、在核酸代谢增加时，如白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等尿酸也会增高。
3、肾功能减退时，尿酸也会增高。
4、在氯仿中毒、四氯化碳中毒及铅中毒、子痫、妊娠反应及食用富含核酸的食物等，均可引起尿酸增高。
十一、异常结果处理实验室结果应与临床相符，不符的应复查。
尿酸操作程序
尿酸操作程序1.目的规范尿酸（UA ）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。
2．范围本操作规程适用于生化室工作人员、实习人员、进修人员的操作前培训。
3.术语4．测定原理4．1测定方法：尿酸酶-过氧化物酶偶联（Uricse-PAP ）法。
4. 2 测定原理：尿酸酶 过氧化物酶 尿酸+O 2+H 2O 尿囊素+CO 2+H 2O 2 H 2O 2+4-AAP+ESPAS 醌亚胺(红色)+ H 2OESPAS:N-乙基-N-（3-磺丙基）-间-茴香胺5．标本5.1标本种类：新鲜无溶血血清、肝素抗凝血浆；留取24小时尿液。
血清尿酸在0～4℃下稳定3～5天，在冰冻条件下稳定6个月。
5.2标本采集：见生化标本采集程序。
6.试剂6.1试剂来源：科华试剂。
6.1.1组成包装规格：R1 70ml×2 R2 70ml×16.1.2试剂准备试剂为液体双试剂，开瓶即可使用，用后及时置于2～8℃避光保存。
6.1.3试剂稳定性原装试剂在2～8℃避光保存，稳定期12个月。
试剂开瓶载机2～8℃稳定30天。
7.仪器参数设定OLYMPUS AU2700参数设定：科华试剂仪器参数设定具体参见试剂厂家提供的相应仪器参数说明书。
8．校准：具体参见临床生化校准程序8.1 校准条件：8.1.1仪器光路系统经过光路保养或更换光源等重要部件后。
8.1.2仪器经过大保养后。
8.1.3挪动仪器的安装地点。
8.1.4更换试剂批号。
8.1.5室内质控失控。
8．2 AU2700科华试剂系统的校准：8.2.1 准备：申能生化校准物.8.2.2 保存和稳定性：原校准品在2～8℃保存一个月时间，-20℃稳定使用至有效期8.2.3保存位置：低温冰箱-20℃。
8.2.4操作步骤：蓝色样本架的1号位置放蒸馏水；黄色样本架的8号位置放申能复合多项定标液→仪器主画面[USER] →[Calibration] →[选择校准项目]→[START]→[YES]。
尿酸(UA)测定标准操作程序SOP文件
3.1血液：血清及肝素/EDTA抗凝血浆，处理方法见标本准备。
稳定性：2-8℃5天
-20℃6个月
收集后的标本应该尽快检测，或者与细胞进行分离。
3.2尿液：新鲜标本、不要冷冻、加入NaOH后可以
稳定性：20-25℃4天
4试剂
4.1试剂
来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。
贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末
S.VOLUME(DECREASE) [14/5/140]
SENSITIVITY LIMIT(LOW) [ 1 ]
S.VOLUME(INCREASE) [ 10 ]
SENSITIVITY LIMIT(HIGH) [ 1.9 ]
R.VOLUME(R1) [ 180 ]
S1 ABS(LOW) [ -32000 ]
R.VOLUME(R2) [ 0 ]
S1 ABS(HIGH) [ 32000 ]
R.VOLUME(R3) [ 36 ]
10.3溶血：溶血指数达到750时不会有明显干扰。（血红素浓度约为750mg/dl）
10.4脂血：乳糜指数达到1000明显干扰。（甘油三酯浓度约为2000mg/dl）
10.5抗坏血酸浓度低于30mg/dl时不会有明显干扰。
11临床意义
11.1血清尿酸测定对痛风诊断最有帮助，痛风患者血清中尿酸升高。
11.2在核酸代谢增加时，如白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等，血清尿酸值常升高。
7.2.2 24小时尿：200-1000mg/24h(1200-5900umol/l)
7.2.3平常饮食：250-750mg/24h
7.2.4低嘌呤饮食：
男性：<480mg/24h
检验医学SOP文件5--生化室作业指导书
生化室作业指导书文件编号：ABCD-3-SF-01~61第A版编制：审核：批准：生效日期：2015年4月8日ABCD人民医院检验科目录修订页血清总胆红素(T-BIL)测定1. 实验原理血清中的胆红素分为直接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。
大多数方法是在1883年Ehrlich提出的重氮法胆红素测量法1，一些改良的方法已被用来增进反应。
这些改良的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。
申能总胆红素试剂是改良的重氮法。
使用一种稳定的重氮盐，2,4-二氯苯胺重氮盐（DCA），与胆红素反应，形成红色偶氮化合物，它在540nm吸光度最大。
在540/600nm时的吸光度与标本中总胆红素的浓度成正比。
胆红素+DCA 红色偶氮化合物表面活性剂2. 标本：2.1 病人准备：无特殊要求。
最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。
3. 标本存放：15～25℃保存可稳定2天；2～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。
4. 标本运输：常温条件下避光保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。
6. 实验材料6.1 试剂：申能总胆红素试剂盒（141 0817170 1 试剂1＋试剂2）6.1.1 试剂组成试剂1：6×64 ml磷酸缓冲液40mmol/L氯化钠9g/L表面活性剂,稳定剂适量试剂2：6×16 ml2,4-二氯苯胺重氮盐1mmol/L盐酸30mmol/L表面活性剂适量6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为18个月。
试剂2必需避光保存。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
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血清尿酸测定作业指导书
1.实验原理
使用TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸）的酶比色测定法。
尿酸酶氧化尿酸产生过氧化氢和尿囊素。
在过氧化物酶存在下，过氧化氢氧化4-氨基安替比林和TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸），产生红色醌亚胺（Trinder 反应产物）。
尿酸酶
尿酸+ H2O + O2尿囊素+ CO2 + H2O2
过氧化物酶
TBHBA + 4-氨基安替比林+ 2H2O2醌亚胺+ 3H2O
2. 标本：
2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆，尿液。
3. 标本存放：血清、血浆的稳定性：20～25℃保存
可稳定3天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定6个月。
对尿液用蒸馏水作1＋10稀释后检测，结果乘11后报告。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。
6. 实验材料
6.1 试剂威特曼尿酸测定试剂盒。
试剂1 试剂2 6.1.1试剂准备：试剂为即用式。
6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30天。
当546nm处的试剂空白吸光度小于0.5时，试剂可正常使用。
6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的
预防措施使用试剂
6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪
8. 操作步骤
8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件
8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件
9. 检验结果的判断与分析
10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法：以TruCal U复合校准品尿酸校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠检测结果，以μmol/L报告。
12. 参考值范围：（μmol/L）
血清/血浆
女性男性
成人137～363 214～488 儿童0～5天113～470 113～470 1～4岁101～303 131～470
5～11岁178～381 178～381
12～14岁190～363 190～440
15～17岁190～381 268～482 尿液≤4.76mmol/d（正常饮食）
≤3.57mmol/d（低嘌呤饮食）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。
13. 临床意义：尿酸和尿酸盐是嘌呤代谢的最终产物。
痛风是高尿酸血症最常见的并发症，血清尿酸水平的升高导致在关节处生成尿酸钠晶体。
此外导致血液中尿酸升高的原因还有：排泄功能下降的肾脏疾病，饥饿，滥用药物，过度饮酒或某些药物的使用。
高尿酸水平也是冠心病的间接危险因子之一。
低尿酸血症较少见，其与罕见的遗传代谢紊乱有关。
14. 操作性能
14.1 线性范围：17.8～1190μmol/L。
14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU2700批内精密度小于3%，总精密度小于3%。
用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。
剂盒(x)，同时对70个样品进行UA检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.02x-26.2μmol/L；r=0.997。
14.4 灵敏度：本试剂的检测限为17.8μmol/L。
14.5 病人结果可报告范围：17.8～1190μmol/L。
15. 超出范围结果处理：本法对尿酸的检测范围为17.8～1190μmol/L。
当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+1稀释，重新测定，结果乘以2。
16. 病危报警值的处理：当尿酸测定值>720μmol/L 时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。