尿酸(UA) 酶比色法
尿酸(UA)测定试剂盒(尿酸酶-POD法)产品技术要求sainuopu
尿酸（UA）测定试剂盒（尿酸酶-POD法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中尿酸的浓度。
1.1试剂盒包装规格试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml；试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：1×10L，试剂2：1×2L；试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml。
校准品（选配）：1×1ml，1×3ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观液体双试剂：试剂1无色澄清液体；试剂2无色澄清液体。
校准品：无色至淡黄色液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、546nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.2。
2.4 分析灵敏度测定浓度为300μmol/L的样本，吸光度变化值（ΔA）应在（0.05，0.25）范围内。
2.5 线性范围在（0，1100）μmol/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.996。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于4%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于6%。
2.8 准确度相对偏差：相对偏差应不超过±10%。
2.9 校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至NIST生产的有证参考物质（SRM913a）。
2.10稳定性效期稳定性：试剂盒在2℃~8℃下有效期为15个月，取失效期的试剂盒进行检测，试验结果满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
尿酸测定试剂盒(尿酸酶法)标准化操作规程UA-SOP
尿酸测定试剂盒（尿酸酶法）标准化操作规程1 目的规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。
2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。
3 适用范围本试剂适用于体外定量检测人血清或尿液中尿酸的含量。
4 检验方法本试剂盒采用酶法测定尿酸的含量。
5 检验原理样品中的尿酸在试剂中尿酸氧化酶（GOD）的催化作用下氧化生成尿酸酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶（POD）的催化下与苯胺类色原物质和4-氨基安替比林作用产生水和醌亚胺色素，醌亚胺色素的生成量与样品中尿酸的含量成正比，通过测定特定波长处反应最终生成的色素量，可以计算出样品中尿酸的浓度。
尿酸＋ H2O + O2−−−→−GOD尿酸酸＋ H2O2H 2O2+ 4-氨基安替比林 + 苯胺类色原物质−−−→−POD醌亚胺色素 + 水6 标本要求6.1 血清样本应及时离心分离，不得使用溶血或被污染的样本。
6.2 建议尿液样本作pH测定，若pH＜8.0，可用NaOH调至pH=8.0。
尿液样本测定前需用水稀释10倍。
6.3 血清、尿液样本无微生物污染在2℃~8℃可稳定3天，冷冻保存可稳定6个月。
7 试剂及配套品7.1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司尿酸试剂盒（酶法）7.27.3试剂的稳定性与贮存7.3.1试剂在2℃~8℃条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期为18个月。
7.3.2试剂开封后在2℃~8℃可稳定30天。
7.4试剂的变质指示若试剂混浊，或以水为空白在520 nm处吸光度值大于0.100A时，则不能使用。
8 实验仪器及性能指标8.1 实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1 试剂空白吸光度：A≤0.100。
8.2.1 分析灵敏度：测试1mmol/L被测物时，吸光度变化△A＞0.10。
8.2.3 线性范围：0.01mmol/L～1.5mmol/L；线性相关系数r≥0.9900；[0.01，0.3] mmol/L区间内，线性绝对偏差应不超过±0.06mmol/L；（0.3,1.5] mmol/L 区间内，相对偏差不超过±15％。
UA血清项目操作手册
SOP标准操作程序UA 尿酸（货号：OSR6198，OSR6298）一、目的：规范尿酸测定的操作程序，确保尿酸测定的结果准确二、适用范围：在Beckman Coulter AU分析仪上定量测定人血清中的尿酸（UA）三、临床意义尿酸是人体内嘌呤分解代谢的主要产物。
绝大多数尿酸在肝脏中形成，通过肾脏排泄，体内尿酸库由合成和排泄之间的平衡决定。
高尿酸血症可以分为原发性高尿酸血症和继发性高尿酸血症，包括生成过量或排泄减少。
原发性高尿酸血症也称作特发性或者家族性高尿酸血症。
在大多数病例中，肾小管分泌尿酸减少引起尿酸水平升高。
大约 1% 的原发性高尿酸血症患者在嘌呤代谢中存在酶缺陷，因而导致尿酸生成过多。
原发性高尿酸血症与痛风、Lesch-Nyhan 综合征，Kelley Seegmiller 综合征和磷酸核糖基焦磷酸盐合酶活性升高有关。
继发性高尿酸血症可能由营养型嘌呤摄取增加引起，伴有尿液中尿酸排泄增多。
继发性高尿酸血症与许多情况有关，这些情况包括肾功能不全，骨髓增生性疾病，溶血性疾病，牛皮癣、真性红细胞增多症、I 型糖原贮积病，酒精摄入过多，铅中毒，高嘌呤饮食，禁食，饥饿和化疗。
低尿酸血症可能由于尿酸产生减少引起，例如在遗传性黄嘌呤尿症，遗传性嘌呤核苷磷酸化酶缺乏和别嘌呤醇法治疗中。
低尿酸血症可能由于肾脏尿酸排泄增多引起，这种情况可能出现于恶性疾病，AIDS，Fanconi 综合征，糖尿病，严重烧伤和嗜酸性白细胞增多综合征。
此外，使用促尿酸排泄药物治疗和食入 X 光造影剂也会引发低尿酸血症。
定量测定尿酸的排泄有助于确定高尿酸血症的治疗方案，确认患者是应当使用促尿酸排泄药治疗以增加肾脏排泄，还是应当使用别嘌呤醇治疗以抑制嘌呤合成。
四、方法原理尿酸被尿酸酶转化为尿囊素和过氧化氢。
通过 Trinder 反应测定 H2O2。
在过氧化物酶 (POD) 的作用下，所形成的 H2O2 与 4-氨基比林和 N,N-二（4-磺丁基）- 3,5-二甲苯胺二钠盐 (MADB) 以及 4-氨基比林发生反应，生成发色团，该物质可通过双色分析仪在 660/800nm 处测定。
生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书
生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书1、前言试验名称：尿酸测定，英文名称：UA，方法：氧化酶法。
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室，目的是指导工作人员正确的在科华KHB-450全自动生化分析仪上测定血清、血浆、样本中的尿酸浓度，以保证测定结果的准确可靠。
尿酸是嘌呤、核酸的代谢产物，因此，尿酸水平异常可作为上述物质代谢异常的指征，高尿酸血症可见于：肾功能障碍、痛风、白血病、红细胞增多症、动肪粥样硬化、糖尿病、甲状腺机能减退、或其他遗传疾病，尿酸水平低可见于威乐逊氏病。
2、测定原理本试验采用改良的Trinder氏方法，其反应原理：尿酸+O2+H2O尿酸酶尿囊素+CO2+H2O2H2O2+AAP+TBHBA过氧化物酶醌亚胺色素+H2O上式中AAP为4-氨基安替比林TBHBA为3-羟基-2,4,6三溴甲酸在上述反应中，红色醌亚胺色素的生成量与样本中尿酸的浓度成正比，通过在520nm波长处测定吸光度的变化值，从而计算出尿酸的浓度，试剂中亚铁氰化钾可抑制样本中胆红素的干扰。
3、试剂试剂生产商：长海科华生物工程股份有限公司。
剂型：液体双试剂。
包装量：R1：4*40ml R2：4*20ml注册号：沪食药监械（准）字2010第2400028号。
生产许可证号：沪药管械生产许20030916号。
基本成份：试剂1：过氧化物酶300u/l3-羟基-2,4,6三溴甲酸 2.5mmol/l亚铁氰化钾0.05mmol/l磷酸盐缓冲液150mmol/l4-氨基安替比林0.7mmol/l含非反应性填充物及稳定剂试剂2：磷酸盐缓冲液150mmol/l尿酸酶500u/l储存条件和有效期：试剂避光储存于2―8℃可稳定12个月。
启用后2―10℃可稳定14天，若试剂混浊，或空白在520nm 下吸光度值高于0.4A时，则不能使用。
4、标准品：使用试剂盒附带标准品5、质控品：生产商：英国Randox公司。
剂型：干粉试剂，用5ml去离子水复溶，完全溶解30分钟后使用。
05 UA
复星长征体外诊断试剂标准操作规程试剂名称：尿酸试剂盒(尿酸酶比色法) 上海复星长征医学科学有限公司目录1 试剂盒概况2 方法学原理3 试剂主要组分4 样本准备5 试剂准备6 校准要求7 质量控制8 计算方法9 参数设定10 参考范围11 试剂性能概要12 超出可报告范围的处理13 其他必须说明的内容14 参考文献1 试剂盒概况1．1 货号：1.02.2001/1.02.2002/1.02.2003/1.02.2008/1.02.2101。
1．2 包装规格：试剂1（R1）：4×50mL ；试剂2（R2）：1×50mL 。
试剂1（R1）：4×50mL ；试剂2（R2）：2×25mL 。
1．3 产品注册证号：沪食药监械（准）字2014第2400169号1．4 产品标准号：YZB/沪 1638-40-20141．5 版本号：2014－12 方法学原理本试剂采用改良Trinder ’s 方法，其反应为：22222O H CO 尿囊素尿酸酶O H O 尿酸++−−−→−++O H 醌亚胺色素过氧化物酶TBHBA AAP O H 222+−−−−−→−++式中AAP = 4-氨基安替比林 TBHBA = 3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸在上述反应中，红色醌亚胺色素的生成量与样本中尿酸的浓度成正比，通过可在520nm 波长处测定吸光度的变化值，从而计算出尿酸的浓度。
试剂中亚铁氰化钾可抑制样本中胆红素的干扰。
3 试剂主要组分3．1 试剂1（R1）过氧化物酶300U/L 3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸 2.5mmol/L 亚铁氰化钾0.05mmol/L 磷酸盐缓冲液150mmol/L 4-氨基安替比林0.7mmol/L含非反应性填充物及稳定剂3．2 试剂2（R2）磷酸盐缓冲液150mmol/L尿酸酶500U/L3．3 储存条件3．3 . 1 在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起效期12个月。
血清尿酸UA测定
血清尿酸UA测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理尿酸酶分解尿酸生成尿囊素和过氧化氢。
尿酸+2H2O+O2尿酸酶尿囊素+ CO2 + H2O2在过氧化物酶存在的情况下，4-氨基比林由过氧化氢氧化生成醌二亚胺。
2H2O2+H++TOOSa+4-氨基比林过氧化物酶醌二亚胺+4 H2O醌二亚胺的颜色深浅与尿酸浓度成正比，可通过测定吸光度的上升来获得。
3 标本：3.1 病人准备：使用新鲜血清,不使用血浆.在采集血液后2h 分离血清.3.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆，尿液。
3.3 标本存放：血清、血浆的稳定性：20～25℃保存可稳定3天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定6个月。
对尿液用蒸馏水作1:10稀释后检测，结果乘11后报告。
3.4 标本运输：常温条件下保存运输。
3.5 标本拒收标准：细菌污染的标本。
4 实验材料4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司UA试剂盒,国械注进20142405056YZB/GER 5724-2014）4.1.1 试剂组成R 1 磷酸盐缓冲液：0.05 mol/L，pH 7.8；TOOS：7 mmol/L；脂肪醇聚乙二醇醚：4.8%；抗坏血酸盐氧化酶（EC 1.10.3.3；胡瓜）≥83.5 μkat/L（25℃）R 2 磷酸盐缓冲液：0.1 mol/L，pH 7.8；亚铁氰化钾（Ⅱ）：0.3 mmol/L；4-氨基比林≥3mmol/L；尿酸酶（EC1.7.3.3；原生节杆菌）≥83.4 μkat/L（25℃）；过氧化物酶（POD）（EC 1.11.1.7；辣根）≥50μkat/L（25℃）4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：2-8℃下的保存期限：见试剂标签上的有效期。
机上稳定期： 4周4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
高血压患者血清尿酸水平检测及其临床意义
例 ， 高血压 ４ 例 ， 级高血压 ４ ２级 １ ３ ７例 。高 血 压 诊 断 和 分 级 遵
循《 国高 血 压 防治 指 南 》 准 。排 除痛 风 、 中 标 。 疾病 、 尿病 、 肾脏 糖
水 平 与高 血 压 呈 正相 关 。ｗａｈ ａ等 对 ５ ７ 中年 男 性 随 访 １ ｓｍｉ ４例 １ ２年 ， 现 Ｓ 发 ＵＡ 水 平 每 增 加 ５ ． ／ ｏ／ １ ｇ ｄ） 发 生 高 血 ９ ５ ｍ ｌＬ（ｍ ／１， ｌ 压 的 危 险 增 加 ２ ， 础 ＵＡ 水 平 已成 为 高 血压 病 发 病 的 最 独 ３ 基 立预报因子。 ＨＵＡ 引 起 高 血 压 机 制 尚 不十 分 清 楚 ， 能 与 同 时 可
伴 随的。 一 肾素 血管 紧 张 素 系 统兴 奋 和一 氧化 氮合 成 酶 表 达 下 调
肥胖 、 脂血 症 者 。对 照 组 ： 机 抽 取 本 院 同期 健 康 体 检 者 １８ 高 随 Ｏ 例 ， ５ 例 ， ５ 例 ， 均年龄 ４．±ｌ． 男 ６ 女 ２ 平 ９３ ０ ６岁 。两 组 间 以 及 高 血压 病 各 亚 组 年 龄 、 别 比 例 、 程 、 重 指数 均无 统计 学差 异 性 病 体
为 探 讨 血 尿 酸 （ ｅ ｕ ｒ ｃ ， ＵＡ） 高 血 压 病 的 关 Ｓ ｒｍ ｕｉ ａｉ Ｓ ｃ ｄ 与
讨 论
系 ， 文 对 测 ， 与 １ ８ 本 ２例 并 ０
例健 康 体 检 者 进 行 对 照分 析 ， 道如 下 。 报 对 象 与 方 法 １ 对 象 高血 压 病 组 ： ０ ７年 ｌ 月 至 ２ ０ ２０ ０ ０ ８年 ｌ ０月
尿酸(UA)测定标准操作程序SOP文件
3.1血液：血清及肝素/EDTA抗凝血浆，处理方法见标本准备。
稳定性：2-8℃5天
-20℃6个月
收集后的标本应该尽快检测，或者与细胞进行分离。
3.2尿液：新鲜标本、不要冷冻、加入NaOH后可以
稳定性：20-25℃4天
4试剂
4.1试剂
来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。
贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末
S.VOLUME(DECREASE) [14/5/140]
SENSITIVITY LIMIT(LOW) [ 1 ]
S.VOLUME(INCREASE) [ 10 ]
SENSITIVITY LIMIT(HIGH) [ 1.9 ]
R.VOLUME(R1) [ 180 ]
S1 ABS(LOW) [ -32000 ]
R.VOLUME(R2) [ 0 ]
S1 ABS(HIGH) [ 32000 ]
R.VOLUME(R3) [ 36 ]
10.3溶血：溶血指数达到750时不会有明显干扰。（血红素浓度约为750mg/dl）
10.4脂血：乳糜指数达到1000明显干扰。（甘油三酯浓度约为2000mg/dl）
10.5抗坏血酸浓度低于30mg/dl时不会有明显干扰。
11临床意义
11.1血清尿酸测定对痛风诊断最有帮助，痛风患者血清中尿酸升高。
11.2在核酸代谢增加时，如白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等，血清尿酸值常升高。
7.2.2 24小时尿：200-1000mg/24h(1200-5900umol/l)
7.2.3平常饮食：250-750mg/24h
7.2.4低嘌呤饮食：
男性：<480mg/24h
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目录
1. 检测原理
2. 标本采集与处理
2.1 受检者的准备
2.2 静脉采血
2.3 抗凝剂
2.4 标本处理
3. 试剂
3.1 试剂
3.2 校准血清
3.3 试剂与校准血清的稳定性
4. 仪器
5. 操作
6. 计算
7. 操作性能
7.1 精密度
7.2 准确度
7.3 灵敏度
7.4 可报告范围
7.5 特异性
7.6 干扰
8. 参考值
9. 临床意义
附录A: 参数
1. 检测原理
反应生成的醌亚胺在505nm波长有最大吸收，所产生的颜色强度与血清中尿酸含量成正比，再通过与同样处理的尿酸标准溶液比较，经过计算可求出血清中尿酸的含量。
试剂中的抗坏血酸氧化酶可排除抗坏血酸对结果的影响，测定尿酸所用的酶反应如下:
尿酸酶
尿酸＋O2 ＋2H2O ------------ 尿囊素＋CO2 ＋2H2O2
过氧化物酶
H2O2＋4-氨基安替比林＋2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸---------------醌亚胺＋H2O
2．标本采集与处理
2.1 受检者的准备：
病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：
除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：
血浆使用0.1mg/ml肝素作为抗凝剂。
2.4 标本处理：
血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂
3.1 试剂：
本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司UA试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：
尿酸标准液：590umol/L
3.2 尿酸校准血清：
使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
校准频次：
空白定标：每日需做试剂空白定标。
全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的±2SD范围，需要全点定标。
3.3 试剂与校准血清的稳定性：
原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。
试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。
试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。
试剂R1, R2颜色为无色，当试剂变色，按照试剂失效处理。
多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。
参见校准血清说明书。
试剂盒配备的水标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，开瓶后2-8℃储存避免污染，可稳定2个月。
4．仪器
KONELAB 30型号仪器。
性能：波长505nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。
5．操作
样品为血清或肝素抗凝血浆。
本法为终点法。
参数见后附，附录A。
试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。
6．计算
ΔA测定
C = ————×C o
ΔA标准
式中：
c——测定尿酸浓度，μmol/L；ΔA = A2 - A1
ΔA测定——标本管吸光度；ΔA标准——标准管吸光度；
C O——校准血清尿酸浓度，μmol/L；
7．操作性能
7.1 精密度：
批内CV≤8.3%，批间CV≤10.0%。
7.2 准确度：
检测结果的相对不准确度≤±10%。
7.3 灵敏度：
尿酸浓度为：330μmol /L时，显色吸光度为0.123～0.134。
7.4 可报告范围：
样本:R1:R2 =1:40:10时，测定上限为1180μmol /L。
7.5 特异性：
测量值在给定值的95%-105％范围内。
7.6 干扰：
内源性干扰物为Hb 1000mg/ml、TG 2000mg/ml、BIL 30mg/ml、VitC 300mg/ml对测试结果无明显影响。
8．参考值
男：210～430μmol /L；女：150～360μmol /L。
9．临床意义
尿酸是核酸中嘌呤分解代谢的最终产物，由肾脏排泄，随尿液排出体外。
肾脏疾病如急慢性肾炎、肾结石、痛风、以及体内核酸分解代谢过盛的疾病，如慢性白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等可使尿酸量增高；而恶性贫血及应用ACTH、皮质素、阿斯匹林等药物时，血中尿酸量下降。
附录A: 参数。