紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸
实验四、紫外-可见分光光度法测苯甲酸含量精选全文
可编辑修改精选全文完整版实验四、紫外-可见分光光度法测苯甲酸含量一、实验目的1．学会使用紫外-可见分光光度计，掌握标准对比法。
2．掌握标准对照法曲线的绘制和含量的计算。
二、实验原理在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm。
可采用紫外分光光度计测定物质在紫外光区的吸收光谱并进行定量分析。
三、实验器材试药：0.01mol/L、0.1mol/L氢氧化钠、苯甲酸仪器：量瓶、烧杯、紫外-可见分光光度计四、实验步骤1、苯甲酸标准储备液的制备精确称取苯甲酸100mg，用0.1mol/L氢氧化钠溶液100ml溶解后，再用蒸馏水稀释1000ml。
此溶液1ml含0.1mg苯甲酸。
2、苯甲酸吸收曲线的测量吸取苯甲酸贮备液4.00ml，放入50ml容量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液定容，摇匀。
此溶液1ml含8μg苯甲酸。
测量条件光源：氢灯；参比液：0.01mol/L氢氧化钠；测量波长范围：210～240nm。
3、标准曲线的制备取标准储备液适量，置于50mL容量瓶中，加0.01mol/L氢氧化钠稀释，分别得到浓度为4、8、12、16、20、24μg.L-1的溶液，取各溶液于“2项”曲线中的最大吸收波长处测吸收度A，得回归方程和相关系数R2。
4、标准对比法测定样品液苯甲酸的含量取10.00ml样品液，放入50ml容量瓶中，用0.01mol/L氢氧化钠定容，摇匀。
在上述曲线中找出最大吸收波长，以此作定量分析的入射光。
以0.01mol/L 氢氧化钠溶液为参比。
在完全相同的条件下测出标准苯甲酸溶液和稀释好的样品液的吸光度值。
5、按“3项”所得回归方程计算样品液中苯甲酸的浓度。
五、数据处理1）样品液中苯甲酸含量试样溶液的吸光度为,从标准曲线上可查得c= mg/ml。
六、思考题1、如果试液测得的吸光度不在标准曲线范围之内怎么办？2、从实验测出的吸光度求苯甲酸含量的根据是什么？如何求得？。
紫外分光光度法测定苯甲酸含量
实验四
紫外分光光度法测定苯甲酸含量
仪器分析实验
1
实验目的
1. 了解756CRT型紫外可见分光光度计的结构。 2. 了解紫外分光光度法定性的原理和方法。 3. 掌握利用756CRT型紫外可见分光光度计测
定苯甲酸含量的原理方和法。
2
实验原理
紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry)， 主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是 研究物质电子光谱的分析方法。
中，用蒸馏水将其稀释定容，摇匀。将此溶液放 在光路上，在仪器上直接进行 样品测定，记下其 浓度值。
12
结果记录和数据处理
1、工作曲线的绘制
项目
标样编号 1
V（mL）
C(µg/mL)
吸关系数R
13
问题讨论
1、紫外可见分光光度法的定性、定量分析的依据是什么？ 2、紫外可见分光光度计的主要组成部件有哪些？ 3、设计一个采用分光光度法测定三组分含量的实验方案。
4
紫外分光光度计的使用
1．开机： 2 ．吸收池配套性检查 3．吸收曲线绘制 4．工作曲线的绘制 5．样品测定
5
实验步骤
1．开机：打开计算机，进入window 98操作系统后， 打开仪器开关，点击桌面上的“756CRT”操作软 件，“联机”后，系统直接进入初始化窗口。如 已初始化过， 系统提示“是否初始化？” 可选择 “否”， 则系统进行系统设置后进入工作窗口； 也可选择“是”，则系统进入初始化窗口，待仪 器初始化结束，进入操作主页面。然后仪器预热 20分钟后开始进行测定工作。
通过吸收曲线对求知样品进行定性分析。 根据朗伯－比耳定律：A=εbc，只要绘出标准曲
线，测出试液的吸光度，就可以得到未知样的含 量。
【论文】紫外分光光度法测定食品添加剂苯甲酸的研究
摘 要苯甲酸是目前食品中较为理想的防腐剂。
少量食用，并无生命危险。
但如果大量食用，会导致中毒，甚至危及生命。
所以，确定食品中苯甲酸的含量并严格控制食用量是十分必要的。
本文采用紫外分光光度法对食品中苯甲酸含量进行了研究。
苯甲酸的特征峰在224nm处。
为选择最佳的UV-VIS分析条件，对饱和氯化钠溶液加入量、1:1HCl加入量、振荡和静置时间进行了研究。
正交实验结果表明，最佳的分析条件为，用10ml饱和氯化钠溶液、8ml:1HCl萃取含有苯甲酸的溶液，振荡3min 后静置2min，测其吸光度。
分别配制不同浓度的苯甲酸标准溶液，在224nm处测吸光度绘制A-C标准曲线。
同时测定回收率为93.8%-109.5%、RSD为0.6%、最小检出限为0.005mg/ml。
最后对样品中苯甲酸含量进行了测定。
结果表明，此方法灵敏、快速、准确。
关键词：苯甲酸，测定，紫外分光光度法AbstractBenzoic acid is the ideal food preservative. A small amount of it in food has no danger, but a large amount of it in food will lead poisoning and even life threatening . Therefore, determining the content of benzoic acid in food consumption and a strict control is necessary. A Ultraviolet Spectrophotometric determination of the food additive of benzoic acid has been studied. The maximum absorption of benzoic acid is 224nm. The best conditions for UV-VIS analysis :the quantity of saturated NaCl solution is 10ml, 1:1HCl is 8ml,shaking and standing time are 3min and 2min, and then measure the absorbance. We prepare with different concentrations of benzoic acid standard solution and measure absorbance for drawing A-C standard curve. The result shows that the recovery is 93.8%-109.5%,RSD is0.6%, the detection limit is 0.005 mg/ml. This method for determination of benzoic acid in sample is sensitive, rapid and accurate.Key words: benzoic acid, determine, Ultraviolet Spectrophotometric目 录第一章 前言 (1)1.1 苯甲酸含量的研究意义 (1)1.2 选题背景 (1)1.3 文献综述 (2)1.4 研究的基本内容，拟解决的主要问题 (8)第二章 实验材料与方法 (9)2.1 实验药品及仪器 (9)2.2 实验方法 (11)第三章 实验结果与讨论 (15)3.1 λmax选择 (15)3.2 饱和NaCl溶液加入量 (15)3.31:1HCl加入量 (16)3.4 振荡时间 (18)3.5 静置时间 (19)3.6 最佳实验条件选择（正交实验） (20)3.7 工作曲线绘制 (20)3.8 回收率测定 (22)3.9RSD测定 (22)3.10 共存离子干扰实验 (23)3.11 样品测定 (28)3.12 讨论 (29)第四章 结论与展望 (30)4.1 结论 (30)4.2 对进一步研究的展望 (30)参考文献 (31)致 谢 (33)声 明 (34)第一章 前 言1.1 苯甲酸含量的研究意义社会的发展，人们生活节奏的加快，促使食品工业特别是方便食品、半成品迅速发展。
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸TYYGROUP system office room 【TYYUA16H-TYY-TYYYUA8Q8-实验三紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸1 实验试剂与仪器试剂苯甲酸（AR），雪碧汽水仪器日立UV-3010紫外-可见光谱仪，1cm石英比色皿2 实验原理与方法为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
3 实验步骤苯甲酸标准储备液配制称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。
标准曲线绘制取苯甲酸标准储备液、、、、，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。
以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），找出λmax ，然后在λmax处测定五个标准溶液的吸光度A。
样品处理和测定雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λ处测定max吸光度。
4 实验结果测得苯甲酸在227nm波长处有最大吸光值表1 标准液吸光度测定标准液（μg/ml） 0 2 4 8 12吸光度图1 苯甲酸标准溶液标准曲线测得雪碧样品的苯甲酸吸光度为=μg/ml从曲线上找出相应的苯甲酸浓度Cx: 样品定容后体积为100mlV1: 所取样品体积为 25mlV2因为雪碧的密度约等于1kg/m3,故μg/ml≈μg/g=kg根据中华人民共和国国家标准《食品添加剂使用卫生标准一》对汽水类食品中苯甲酸的最大使用量做了规定：苯甲酸<=0.2g/Kg，本实验使用的雪碧样品苯甲酸浓度Kg<0.2g/Kg,即低于国家标准，符合国家标准。
碳酸饮料中笨甲酸钠含量的测定与分析
碳酸饮料中笨甲酸钠含量的测定与分析摘要碳酸饮料中苯甲酸钠添加含量不仅影响着企业的品牌效益还会影响到消费者安全问题，然而目前国家标准中苯甲酸钠含量的测定方法不太适合测定实验研究，本实验提供了两种比较实用便捷和低成本的分析测定技术。
碱滴定法测定笨甲酸钠用标准氢氧化钠溶液滴定处理液至初显粉红色为终点，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积，再运用公式计算出样品中苯甲酸钠含量。
紫外分光光度法测碳酸饮料中的苯甲酸钠在酸性条件下经乙醚提取分离后,测定样品中苯甲酸钠的吸光度, 通过标准曲线的回归方程查得样品中苯甲酸钠的含量。
这两种方法不需要贵重的气相或液相色谱仪, 样品处理简单易于操作, 检验结果与国家标准中高效液相色谱法测定结果基本一致。
可作为饮料产品中苯甲酸钠含量监控的有效方法。
关键词：碳酸饮料苯甲酸钠碱滴定法紫外分光光度计1、前言苯甲酸钠又称安息香酸钠，分子式为C7H5NaO2，性状白色颗粒或结晶性粉末。
无臭或微带安息香气味,味微甜,有收敛性;易溶于水（常温）53.0g/100ml 左右,PH在8左右；是酸性防腐剂,在碱性介质中无杀菌,抑菌作用;其防腐最佳PH是2.5-4.0，在PH5.0时5%的溶液杀菌效果也不是很好.苯甲酸钠亲油性较大,易穿透细胞膜进,细胞体内,干扰细胞膜的通透性,抑制细胞膜对氨基酸的吸收;进入细胞体内电离酸化细胞内的碱储,并抑制细胞的呼吸酶系的活性,阻止乙酰辅酶A缩合反应,从而起到食品防腐的目的。
苯甲酸钠是用于内服液体药剂的防腐剂，有防止变质发酸、延长保质期的效果。
我国食品防腐剂主要采用苯甲酸钠及山梨酸钾，由于苯甲酸钠价格便宜，在碳酸饮料等饮品中作为防腐剂被广泛使用。
但苯甲酸钠用量过多会对人体肝脏产生危害, 甚至致癌。
为确保食品添加剂的绝对安全使用, 根据GB2760- 1996国家卫生标准规定,碳酸饮料中苯甲酸钠的允许最大使用量为0.2g/kg。
在中国大多数地区,碳酸饮料生产企业众多,规模较大,对防腐剂苯甲酸钠的添加控制水平较高,然而也有可能会发生防腐剂苯甲酸钠超标的情况。
实验一 紫外分光光度法测定苯甲酸
的含量 取10.00ml样品液，放入50ml容量瓶中，用 0.01mol/L的NaOH溶液定容，摇匀得稀释好的样 品液X。 在上述曲线中找出最大吸收波长，以此作测定波 长。以0.01mol/L的NaOH溶液为参比液。在完全 相同的条件下测出稀释好的样品液X的吸光度值。 3、按下式计算样品液中苯甲酸的浓度：
比色皿使用注意事项
1、拿取比色皿时，只能用手指接触毛玻璃面，避免接触 光学面，注意保护，防止摔破。 2、盛装溶液时，高度为比色皿的2/3处即可，光学面如有 残液可先用滤纸轻轻吸附，然后再用擦镜纸擦拭。 3、 不可随时调换参比用的比色皿和承载样品比色皿，也 就是说参比比色皿应该固定。 4、使用比色皿时, 还应特别注意通光方向。一般比色皿 的毛玻璃面上都刻有箭头, 或在透光面上蚀刻有标记, 以供 使用者辨认通光方向。 5、不能把装有溶液的比色皿放在仪器上以防止溅湿仪器。 6、比色皿在使用后，应立即用水冲洗干净，收好。
实验报告的格式
一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、实验数据与处理 五、结果与讨论
作图统一用Excel格式并打印粘帖
Ax
Cs
Cx
五、结果与讨论
结果如何？是否符合预期？ 分析失败的原因：仪器因素？溶液因素？ 人为因素？环境因素？
紫外分光光度计的使用方法
1.打开电源，预热20分钟 2.按MODE键设为吸光度方式 显示器显示“---nm,----Abs” 3.设定波长,如220nm 显示器显示“220nm,----Abs” 4.打开样品室盖，将参比液比色皿和待测液比色皿放入样 品室盖上样品室盖 5.将参比液比色皿拉入光路中，按100%T键调零 调零完成时显示器显示“220nm,0.000Abs” 6.将待测溶液拉入光路中，直接读数 注意：每改变波长，必须重新调零 注意倒溶液时远离仪器，避免溅湿仪器
紫外可见分光光度法测定饮料中的防腐剂——苯甲酸
4、苯甲酸钠溶液0.5mg/ml：
59.02mg苯甲酸，加入100ml的0.1mol/L NaOH溶解，最后加入900ml纯化水，浓度为50mg/L；
0.2361g苯甲酸，加入400ml的0.1mol/L NaOH溶解，最后加入3600ml纯化水，浓度为50mg/L；
序号
试剂名称
瓶
Байду номын сангаас备注
1
85%磷酸
6
白试剂瓶（60ml），AR（原瓶）分装
2
无水Na2SO4
3
AR（原瓶），用量25g/组
3
NaOH溶液
6
0.1mol/L，白试剂瓶（250ml），用量10ml/组
4
H2SO4溶液
6
2mol/L，白试剂瓶（250ml）
5
K2Cr2O7溶液
6
0.033mol/L，白试剂瓶（250ml）
紫外可见分光光度法测定饮料中的防腐剂——苯甲酸
仪器：10组（2-4人/组）
序号
仪器名称
个
备注
1
紫外可见分光光度计
2
411仪器室，配擦镜纸、滤纸条、比色皿（1cm）
2
蒸馏装置
20
2个/组，单口圆底烧瓶（250ml、磨口24#）
10
平衡管（磨口24#），胶管连接
10
蛇形冷凝管（40cm、磨口24#），配胶管
6
苯甲酸钠溶液
6
0.1mg/ml，棕试剂瓶（500ml），用量30ml/组
7
玻璃珠
3
白试剂瓶（广口，60ml）
8
紫外分光光度法测定苯甲酸
紫外分光光度法测定苯甲酸一 实验目的1. 掌握吸收曲线的测定与绘制方法2. 学习运用直接比较法求样品含量3. 掌握752型分光光度计的使用方法二 基本原理样品中的苯甲酸在碱性条件下形成苯甲酸盐。
苯甲酸及其盐对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm 左右。
用752型分光光度计可测定物质在紫外光区、可见光区的吸收光谱，并可定量测定物质含量。
三 仪器与试剂（一） 仪器752型分光光度计，1cm 石英吸收池一套，50ml 容量瓶二只，刻度吸管5ml 、10ml 各一支，滴管一支（二） 试剂L NaOH 溶液；苯甲酸标准贮备液：精确称取分析纯苯甲酸100mg （预先经105℃烘干），用LNaOH 溶液100ml 溶解后，再用蒸馏水稀释至1000ml 。
此液1ml 相当于苯甲酸。
苯甲酸标准溶液：取苯甲酸贮备液，置于50ml 容量瓶中，用LNaOH 溶液定容，摇匀。
此液1ml 相当于8μg 苯甲酸。
四 操作步骤1. 苯甲酸吸收曲线的绘制测定条件：氘灯，1cm 石英比色皿，苯甲酸标准溶液，LNaOH 为参比液测定波长（nm ）：从210nm~240nm 每隔一定波长（2nm~5nm ）测定一次吸光度，在225nm 左右隔1nm 测定一次吸光度。
用以上波长为横坐标，测得的吸光度为纵坐标绘制苯甲酸的紫外吸收曲线。
2. 直接比较法测定样品溶液中苯甲酸的含量取样品溶液，置于50ml 容量瓶中，用LNaOH 溶液定容，摇匀后备用。
在上述吸收曲线中找出最大吸收波长，用此波长作为定量分析的测定波长。
以LNaOH 溶液为参比液，在完全相同的条件下测定苯甲酸标准溶液和稀释后样品溶液的吸光度。
五 数据处理 按下式计算样品溶液中苯甲酸的浓度：58A A 1050C A A )ml /g (sx s s x x ⨯⨯=⨯⨯=μC 式中C x 是待测样品液的浓度；C s 是苯甲酸标准液的浓度；A x 是待测样品液的吸光度；A s 是苯甲酸标准液的吸光度。
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紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸
一、目的要求
1．了解和熟悉紫外可见分光光度计。
2．掌握紫外可见分光光度法测定苯甲酸的方法和原理。
3．学习掌握用标准曲线定量分析的方法。
二、实验原理
为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收
由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
三、仪器与试剂
日立UV-3010紫外-可见光谱仪；1cm石英比色皿；苯甲酸（AR）；市售饮料
四、操作步骤
1.苯甲酸标准储备液配制：
称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成
1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。
2.标准曲线绘制：
取苯甲酸标准储备液0.
00、1.
00、2.
00、4.
00、6.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。
以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为
200~350nm），找出λ
个标准溶液的吸光度A。
3.样品处理和测定：
雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取2.5mL于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λ
五、结果与计算
从曲线上找出相应的苯甲酸浓度C
x，按下列公式计算样品中苯甲酸含量。
w=C
x×V
1/V2V
1样品定容后体积V2所取样品体积
六、提问
1.举例说明日常生活中遇到的哪些食品中有防腐剂？
2.用什么方法从样品中把苯甲酸分离出来？
3.食品中苯甲酸检测还有哪些方法？
4.苯甲酸通过什么排泄？
5.如何利用一元线性回归法绘制标准曲线及计算样品中苯甲酸含量？max处测定吸光度。
然后在λ
max处测定五max，。