弹性纤维染色方法
Lycra T-400弹性纤维的染色
问题的发 生， 预精炼是必要的。
洗浴 ：
１ｇ ｅａ Ｗ ａｈ Ｍ － ／Ｌ Ｓ ｒ ｓ ＲＫ ；
可 以较 好 地 实 现 单 一 组 分 同 色 深 浅效 应的 染色 ， 并不 会 明 显地 损 失 拉伸 回复 性能 。
有更高的弹力和拉伸 回复。这种 现象是由于单一组分 的不 同化学 结构造成的 ， 这也导致不同的技术
艺 。ＬｃａＴ４ ０是 来 自英 威 达 （ｎｉ ａ 的 一 种 新 型 弹 性 纤 维 ， 采 用 双 组 分 ｙｒ －０ Ｉｖ ｔ） ｓ 它 纤 维技 术 ， 这种 技 术赋 予针 织 物 和 机 织 物 更 好 的舒 适 感 、 感 、 皱 性 和 免 烫 手 抗
的特点 。 ６ ℃ ２ ｎ ０ ０ ｍｉ ｏ
的外 观 。 Ｌ ｃａＴ４ ０的 这 些 优 点 ｙｒ －０
图 １ Ｌ ｃａ Ｔ一 ０ ｙｒ ４ ０
应用于各类 男装、 女装和童装 中；
其 中主 要 的 应 用 范 围 是 轻 薄 的 机 织物 和针织 物 ， 包括衬 里 。
１ 前 处 理
纤维制 备 用的化 学 药 品 、 软 柔
２ 染 色
ＬｃａＴ４０一 般 在 １０ 高 ｙｒ －０ ３％ 温下 染 色 （ ｌ 。在 这 个 温 度 下 图２ ）
关键词 ： 性纤 维， 组分 ， 色， 弹 双 染 染料
双 组 分 纤 维 中单 一 组 分 不 同 的收缩 特性 导 致 了 ＬｃａＴ４ ０在 ｙｒ －０ 精炼 和 染 色 时 比传 统 的 聚 酯 纤 维
剂和络丝油剂会在染浴中沉淀 ， 并
在成 品 上 产 生 污 点 。 避 免 这 些 为
５ ０
图 ２ 染 色曲 线
国际纺 织导 报 ２ ０ ０ ６年第 ８期
病理学特殊染色技术：Gomori醛品红染色法（弹性纤维、肥大细胞）
病理学特殊染色技术：Gomori醛品红染色法（弹性纤维、肥
大细胞）
Gomori醛品红染色法
（弹性纤维、肥大细胞）
试剂：
①醛品红液：酸性品红0.5克，70%酒精99毫升，三聚乙醛（副醛）1毫升
将酸性品红溶于70%酒精，加入鹴2和三聚乙醛，充分溶解，室温放24 48小时自然成熟，溶液呈紫色，4摄氏度冰箱保存2~3朋
②橘黄G液：橘黄G 0.5克，磷钨酸2克，95%酒精100毫升
③Lugol碘液：碘化钾2克溶于蒸馏水20毫升，再加碘1克，完全溶解后，加蒸馏水80毫升
方法：
⑴石蜡切片常规脱蜡至水
⑵碘液5~10分钟，水洗2~3分钟
⑶5%硫代硫酸钠水溶液5分钟，流水冲洗3~5分钟
⑷70%酒精稍洗
⑸醛品红液5~10分钟
⑹70%酒精洗至弹性纤维清晰，水洗2~3分钟
⑺橘黄G液10~20秒，水洗2~3分钟
⑻各级酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片
结果：
弹性纤维深紫色；
黏液紫色；
肥大细胞颗粒、胰腺B细胞颗粒、脑垂体腺细胞同时着色；
背景黄色。
舒弹丝染色工艺
舒弹丝染色工艺舒弹丝(SUTANS)是一种新型生物质弹性短纤维，其横截面类似“∞”字形，物理形态为状似弹簧的螺旋屈曲状，其染色性能接近普通涤纶。
采用分散染料在弱酸性（PＨ＝４~５）染浴中染色，但由于SUTANS的结晶区和非结晶区的玻璃化温度较普通涤纶低，故而其染色工艺与普通的涤纶稍有不同，尤其在上染过程和染色保温阶段。
1、SUTANS纤维染色转变温度（上染速度显著加快的转折点）为70℃~80℃，而普通涤纶为80℃~90℃，故而SUTANS纤维染色放慢升温速率应在70℃时开始。
2、SUTANS纤维采用低温分散染料染色临界染色温度（相对上染10%~90%的温度）为70℃~110℃.而普通涤纶为80℃~120℃；SUTANS纤维采用高温分散染料染色临界染色温度为80℃~120℃.而普通涤纶为90℃~130℃。
故而舒弹丝染色时保温温度根据所选择的染料不同而选择在110℃~120℃之间保温。
3、SUTANS纤维采用普通低温分散染料染色最高得色温度为115℃~120℃。
高温分散染料为120℃~125℃。
而普通涤纶低温分散染料染色最高得色温度为125℃~130℃。
高温型为130℃~135℃。
因此，SUTANS无论采用低温型分散染料、高温型分散染料，其得色温度均比普通涤纶低。
故而SUTANS做成的织物在染色时与普通的涤棉织物染色方法相同，只是升温速率慢些或中途保湿，整体的染色温度低一些就可以了。
4、染色温度在120℃时，所用染料及染色工艺条件相同情况下，SUTANS得色率即染色深度比普通涤纶高出40%左右。
故而在染色达到同样的深度时，舒弹丝所需用的染料数量较普通涤纶少40%。
5、为保证纤维本身蓬松柔软的手感，防止手感僵硬，在染色保温结束后不可直接降温，应慢降温以保证成品手感。
染色完成后应彻底还原清洗一次，以保证成品色牢度，宜采用纯碱2g/L.二氧化硫尿0.5g/L，80℃*10min.深色可适当加重还原清洗或采用两次还原清洗。
弹性纤维染色过程经验探讨和临床应用价值
弹性纤维染色过程经验探讨和临床应用价值摘要：在临床病理诊断中，HE染色常用于疾病的诊断，但对于一些特殊类型的组织结构中需要被准确的鉴别出来还需要加入一定的特殊染色方法，比如弹性纤维染色，通过弹性纤维染色，能将弹性纤维分布情况表达出来，比如在肺癌的诊断中对于肿瘤是否突破肺膜浸润周围组织及浸润深度需要做出一个精准的判读，我科经过了一段时期的临床实践摸索，将弹性纤维染色过程中的一些注意事项和临床应用价值的一些经验和体会总结如下。
关键词：弹性纤维染色；注意事项；应用；一、弹性纤维的分布和染色机制（一）分布：弹性纤维广泛分布于全身的各个部位，尤其是呼吸系统，皮肤系统和循环系统为多，在肺组织中，弹性纤维能够对肺泡的结构和功能起到一定的作用，是肺进行呼吸运动的结构基础，但是，HE染色后细胞核为蓝色，其它成分均染成深浅不同程度的红色，难以分辨弹性纤维和胶原纤维，通过弹性纤维染色，能够将弹性纤维分布情况表达出来，在肺癌不同病理亚型的诊断中提供强有力的支撑。
（二）染色机制：带负电荷的弹性蛋白与带弱正电荷的燃料通过非极性吸附上色，维多利亚蓝的主要成分为含有丰富的二硫键的糖蛋白，强嗜酸性易与染色液中的碱基结合，特异性着色弹性纤维，胶原纤维一般不着色。
二、染色过程（一）材料：使用广州安必平医药科技股份有限公司弹性纤维染色液配套试剂盒。
（二）染色过程及注意事项：组织送到病理科后及时的切开固定是关键的第一步，保证充足的固定时间后，取材（厚度控制在3mm以内），脱水，包埋，切片，放入65℃烤箱烘烤1h，此时我们应该准备两个脱蜡缸，缸内准备好新鲜的二甲苯，每缸浸入5min即可，然后放入新鲜无水酒精内浸泡1分钟脱二甲苯，缓慢流水冲洗两分钟；0.5%高锰酸钾水溶液氧化5min；水洗30s；亚硫酸氢钠5滴1min；75%乙醇冲洗，然后浸入维多拉亚蓝染液中8-24h；75%酒精冲洗快速洗脱多余的染液；流水冲洗1min；滴染核固红染液10min，无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
弹性纤维染色
弹性纤维染色弹性纤维主要由弹性蛋白（一种黄*色硬蛋白，它是黄*色弹性纤维组织的主要成分，干燥时易脆，而湿润时呈弯曲并富弹性）构成。
它广泛分布于全身的各个部位，尤以循环系统，呼吸系统和皮肤系统为甚。
新鲜时它呈黄*色，固又称为黄*色纤维。
弹性纤维较细，直径0.2-1.0um，有分支，不成束。
但可交织成网。
它富有弹性，容易拉长，但不能拉到超过它的极限，外力除去后又恢复原状。
弹性纤维与胶原纤维交织在一起，在HE染色的标本上，含量少时不易与胶原纤维区别，含量多时呈折光性强的淡粉红色。
由弹性蛋白构成弹性纤维的鞘，并非完全的密封，在其周围有许多微细孔，这些微细孔可作为营养物及排除废物的场所。
弹性纤维主要来源于带有平滑肌特征的间胚叶细胞，少量可由脉管的内皮细胞产生，先形成前——弹性蛋白（pro-elastin），这时在电镜下可见到直径为200nm的电子密度微纤维，在成熟的弹性纤维蛋白，电密度减少或丧失，较为均匀一致。
弹性纤维与胶原纤维，网状纤维不同，它极难容于有机或无机的溶液里。
一、弹性纤维的变形和病理变化随着年龄的增长，特别是到了老年的时候，弹性纤维可发生生理性的变化，这时可观察到弹性纤维的纵行分裂，断成碎片，最后成为颗粒，这些变化同时也伴有化学变化，氨基酸和钙的含量有所增加，这些变化在皮肤是最明显的。
当有病变的时候，我们便可在切片观察到有的弹性纤维增生，有的被破坏，断裂、崩解，失去弹性。
如主动脉瘤，就可见到瘤壁上的弹性纤维已经失去了弹性。
这是由于主动脉壁的弹性纤维受到内压的不断冲击，弹性纤维过度牵拉，超过它的极期，再也恢复不了原状，因此在切片标本上（特殊染色）只能见到其痕迹或反应物。
二、弹性纤维的染色方法(一).Weigert氏雷锁辛品红法（1898）（Weigerts resorcin-fuchsin method）试剂的配制：Wergert氏雷锁辛品红液：碱性品红 2g雷锁辛 4g蒸馏水 200ml30%三氯化铁 25ml取500ml的烧瓶加入蒸馏水和雷锁辛，用玻棒搅拌均匀，加热直至沸腾，持续1-2min，再加入30%的三氯化铁水溶液继续搅拌直至煮沸2-3min后，此时溶液的颜色变为紫罗蓝色，冷却后过滤。
弹力纤维染色检测及临床应用
弹力纤维染色检测及临床应用摘要】弹力纤维具一定的弹性，对酸、碱、沸水有抵抗性，但可被胃、胰酶消化。
在HE染色标本中，弹力纤维与其他纤维的区别，需用特殊染色方法确认，其中最重要的Weigert型技术为弹力纤维的特异性染色方法。
在病理过程中，很多疾病都可以引起弹性纤维的显著变化。
观察皮肤组织中弹力纤维的变化，有助于诊断皮肤组织病变。
显示与判断心血管疾病，如鉴别心内膜弹力纤维增生症与心内膜心肌纤维化，在动脉硬化、主动脉炎时，观察动脉壁破坏情况等。
显示组织内弹力纤维断裂、变性等病变，如慢性支气管炎、肺气肿等。
显示与鉴别肿瘤组织，如弹力纤维瘤、乳腺早期导管浸润癌等。
弹性纤维的破坏、增生、断裂与崩解，对于研究组织、器官的病变程度有一定的价值。
【关键词】弹力纤维染色;检测;临床应用【中图分类号】R44 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）22-0048-02弹力纤维多分布于皮肤、血管壁、肺泡壁、韧带、声带、气管、耳廓软骨及某些腺体导管。
弹力纤维由两种成分组成，即集合成束的弹力微原纤维(由糖蛋白形成)和均质状的弹力蛋白。
弹力纤维具一定的弹性，对酸、碱、沸水有抵抗性，但可被胃、胰酶消化。
在HE染色标本中，弹力纤维与其他纤维的区别，需用特殊染色方法确认，其中最重要的Weigert型技术为弹力纤维的特异性染色方法。
目前，此染色原理尚不明了，间苯二酚品红液(即碱性品红的铁间苯二酚色淀形成的复合物)与弹力纤维结合并将其染成蓝黑色。
现对间苯二酚品红法的实际操作分析如下。
1.材料与方法1.1 材料来自我院病理科手术后送检的血管组织。
1.2 试剂间苯二酚品红液：①碱性品红2.0g，②间苯二酚4.0g，③蒸馏水200mL，④30％三氯化铁25mL，⑤浓盐酸4mL；①+②+③加热溶解，玻棒搅拌煮沸后慢慢加入④，继续搅拌煮沸3～5min，冷却过滤；滤液倾去不用，将滤纸和沉淀物一起放回烧杯内，温箱中烘干；取出后加95％乙醇200mL，隔水煮至沉淀物完全溶解后取出滤纸，冷却后过滤；补足蒸发的乙醇，最后加入⑤，4℃冰箱保存。
弹力纤维快速染色试剂盒_地衣红法
弹力纤维快速染色试剂盒_地衣红法
【产品规格】
50T；100T
【产品用途】
本试剂盒主要应用于弹力纤维染色，常用于皮肤组织增殖和变化，呼吸道的支气管扩张，老年性肺气肿的纤维断裂、变性或萎缩，心血管的心内膜弹性纤维异常增殖症和高血压小动脉的异常增生，动脉粥样硬化弹性纤维的崩解断裂与消失，肾脏组织和肿瘤组织中的纤维病变，以及各种实验动物组织中的血管壁纤维损害或增生情况。
【产品组成】
【染色步骤】
1.切片脱蜡至70%乙醇；
2.滴加1滴试剂A染色3h；
3.70%乙醇浸洗2次(30s/次)，至染液不脱色为止；
4.脱水、透明、封片。
【结果】
弹力纤维呈深棕红色。
【注意事项】
1.第一次使用本试剂盒时建议先取少量样品预实验；
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存方法
本试剂盒在室温干燥保存，2-8°C下可保存更长时间，有效期见包装。
弹性纤维和胶原纤维
弹性纤维染色液说明书【产品名称】弹性纤维染色液【包装规格】货号：DC0064单瓶包装规格分别为：20ml、100ml、250ml；每套/盒包装规格分别为：3×20ml/盒、3×100ml/盒、3×250ml/盒。
【预期用途】用于组织细胞学染色从而定性检测组织切片中的弹性纤维。
【检验原理】弹性纤维 (Elastic Fiber)又称弹力纤维主要分布于人体的动脉壁、肺泡壁、皮肤，新鲜时呈黄色，折光性强，常用的弹力纤维染色法有Gomori醛品红法、间苯二酚碱性品红法、地衣红法、维多利亚蓝法、铁碘苏木素法等。
苯二酚碱性品红染色(又称Weigert酚复红染色)主要用于弹性纤维染色，可能机制是弹性纤维中某些部分与间苯二酚的酚基形成氢键而使弹力纤维被染成蓝色至蓝黑色，适用于显示弹性纤维和肝炎表面抗原，可以显示皮肤组织中弹力纤维的变化，如弹力纤维痣、皮肤环状肉芽肿、硬度病等；显示与判定心内膜及动脉的病变，观察某些病变中是击伴有弹力纤维的增生或破坏；还可鉴别肿瘤组织成分如弹力纤维瘤，从而协助诊断，尤其适用于显示成熟的弹性纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、间苯二酚品红染色液间苯二酚、品红2、酸性分化液盐酸3、Van Gieson染色液品红【储存条件及有效期】5～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为12个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后3个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】l、组织片常规脱蜡至95%乙醇；2、入间苯二酚品红染色液，加盖室温浸染1～3小时或56℃孵育1小时，稍水洗；3、95%乙醇分化到无染色液脱下为止(去除细胞浆背景着色)，如果分化效果不佳，可以用酸性分化液分化2～3秒；4、流水充分冲洗5～10分钟；5、入Van Gieson染色液30～60秒，倾去染色液；6、不经水洗，95%乙醇迅速分化数秒；7、无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
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改良Masson三色染色法在胶原纤维中的应用中华首席医学网 2006年05月24日11:05:41 Wednesday648作者：王珏, 朱礼国，唐幕湘, 张健《郧阳医学院学报》2006年2月25卷1期实验技术加入收藏夹【关键词】胶原纤维[关键词] 改良；Masson三色染色法；胶原纤维目前，Masson三色染色法仍是胶原纤维染色的主要方法之一。
它在临床外检和科研教学等方面有着重要的意义。
在实际工作中，我们认为传统的Masson三色染色法[1]操作程序多，染色效果欠佳，且不太稳定，对其做了改进，现将做法介绍如下。
1 方法1.1 染液的配制Harris苏木素、1%盐酸酒精、丽春红酸性品红、1%磷钼酸、2%苯胺蓝.1.2 染色方法石蜡切片3~4 μm脱蜡至水,Harris苏木素染3 min流水冲洗,1%的盐酸酒精分化3~5 s流水冲洗,温水返蓝1 min流水冲洗, 丽春红酸性品红加温染3 min，蒸馏水冲洗,1%磷钼酸分化1 min，不洗，擦净载玻片上的磷钼酸残液，2%苯胺蓝复染1 min，95%的酒精冲洗，95%酒精及无水酒精脱水，冷风吹干，中性树胶封片。
2 结果胶原纤维呈蓝色，肌纤维胞质呈红色，细胞核呈蓝褐色。
3 讨论通过长期实践探索，我们摸索出一种程序更简洁、组织着色效果更好，且性能稳定的改良Masson三色染色法。
其原理是利用苏木素，酸性品红和苯胺蓝对结缔组织和神经嗜银颗粒、胶原纤维等组织染色，使时间缩短，步骤简便。
改进后的方法，将传统的Masson三色染色法作了如下调整和改动：Bowin氏液由10%中性固定液[2]代替，省略了0.5%碘酒精作用10 min，5%硫代硫酸钠作用5 min和1%冰醋酸处理1min及地衣红染30~60 min 等过程，然后将原丽春红酸性品红，1%磷钼酸，2%苯胺蓝的染色时间分别由15 min，5 min,5 min,缩短为加热3min,1 min,1 min.通过对以上各步的调整和改进，使染色时间由原来的近3 h，缩短为30 min左右，且颜色对比度好，层次清楚，胞核胞浆着色均匀。
值得注意的是：在经过1%磷钼酸分化后的几步禁止用水冲洗，直接用95%酒精洗，然后脱水，透明封片，这样可防止切片脱色，染出的组织切片效果更好。
[参考文献][1] 凌启波.实用病理特殊染色和组织化学[M].广东高等教育出版社.1989,7.[2] 龚志锦,詹洲.病理组织制片和染色技术[M].上海:上海科学技术出版,1994,10.（郧阳医学院形态学实验室;郧阳医学院附属太和医院病理科,湖北十堰442000）网状纤维网状纤维是一种纤细的纤维。
它沿着网状细胞和突起分支，并互相交织成网，因而被称为网状纤维，又因这种纤维对银的浸染着色特别显著。
故又称为嗜银纤维。
它主要由III型胶原蛋白构成，也具有642nm周期性横纹[1]。
它主要分布于骨髓、脾、淋巴结、肝和肺等脏器。
癌组织中间未见有网状纤维，但在其边缘可见有大量的网状纤维，但在其边缘可见有大量的网状纤维围绕，俗称癌巢。
一、网状纤维的形成它的形成主要是在纤维母细胞的粗面内浆网中，合成可溶性胶原。
在醛糖、类脂的作用下，形成可溶性胶原，随后它被分泌到细胞外，在基质中（或在细胞的表面）通过原胶原蛋白分子间的交联，聚合成为不溶性的胶原原纤维即网状纤维。
二、网状纤维在组织化学上的反应网状纤维的主要成分是网硬蛋白，在组织化学上，网状纤维和胶原纤维是容易区别的。
网状纤维是分支纤细的纤维。
V an Gieson 氏染色不显色或微红色。
PAS反应呈现红紫色，银浸染为黑色。
胶原纤维用V an Gieson氏染色为红色，PAS反应呈微粉红色。
银浸染为黄*色或棕黄*色。
三、网状纤维的显示1．染色染料技术：从网状纤维的显示，区别和效果等方面，这种技术被认为是不可靠的，其原因是它只能跟胶原纤维区别开来。
2．金属浸染技术：这种技术对于显示网状纤维被认为是十分可靠和广泛使用的方法，它不但能够区别网状纤维和胶原纤维，而且可显示纤细的网状纤维。
嗜银反应（Argyrophil reaction）嗜银细胞与亲银细胞所不同的是需要一种附加的还原剂来还原，它们比亲银细胞数量多。
必须注意：亲银反应中将找不到任何的嗜银细胞。
亲银反应（Argentaffin reation）亲银细胞有能力，直接地，不靠外加试剂，将银液中的银还原为一种不溶性的黑色金属银沉淀的细胞称为亲银细胞。
（Cells that have the ability to directly reduce silver solution producing an insoluble black metallic silver precipitate are termed-angentaffin cells）。
四、网状纤维的显示方法有Gomori's法、Godon and sweet's法、Wilder's法、Foot's法（一）Gomori's法1、试剂的配制：取10%硝酸银3份，加入10%的氢氧化钾1份，混合后产生大量的黑色沉淀物，倒去表面的液体，保留下沉淀物，加入10-20倍或更多的蒸馏水进行冲洗，连续冲洗3次。
待沉淀物清晰则可。
用浓氨水逐滴加到溶液中。
使沉淀物逐步溶解。
待见沉淀物剩少数几颗时，再取10%的硝酸银液加入数滴，至溶液再现浑浊为止。
再用氨水将其溶解，然后稀释10-15倍。
即可使用。
平时保存于4℃冰箱中。
2、操作步骤：(1)、切片脱蜡至水，蒸馏水洗，(2)、用0.5%高锰酸钾氧化5min，(3)、自来水洗，继用蒸馏水洗，(4)、用2%草酸漂白切片2min，(5)、自来水洗，蒸馏水洗，(6)、2%硫酸铁铵媒染5min，(7)、水洗，蒸馏水洗，(8)、滴入氨性银溶液浸染3-5min，(9)、蒸馏水洗数次，(10)、10%甲醛液还原5-10min，(11)、水洗2min，(12)、用核固红染色10-15min，(13)、水洗10min，各级酒精脱水，(14)、常规透明，中性树胶封固。
结果：网状纤维黑色，核红色，胶原纤维黄棕色。
(二).Gordon 和sweets氏法试剂的配制：取10%硝酸银水溶液5ml,逐滴加入浓氨水，至形成沉淀物，再逐滴加氨水，将初次形成的沉淀物溶解。
注意氨水不能加入过多。
取3%过氧化钠5ml加入，即可能产生沉淀，再逐滴加入氨水至沉淀再度被溶解。
加入数滴10%硝酸银，加入蒸馏水制成50ml溶液，即可使用，贮藏于4℃冰箱中。
1、切片脱蜡至水。
2、1%高锰酸钾氧化5分钟。
3、水洗。
4、2%草酸漂白1-2分钟。
5、水洗。
6、2%硫酸铁铵媒染切片10分钟。
7、蒸馏水洗。
8、氨银溶液浸染2分钟。
9、蒸馏水冲洗数次。
10、10%福尔马林还原2分钟。
11、自来水洗。
12、5%偏重亚硫酸钠处理3分钟。
13、自来水洗。
14、0.2%氯化金调色3分钟。
15、自来水洗。
16、如果有要求，可做对比染色，如用核固红染核。
17、脱水，透明，封固。
结果：网状纤维显示黑色，如有对比染色，细胞核显示红色，胶原纤维不着色。
(三)．Wilder氏法。
1、切片脱蜡至水。
2、1%高锰酸钾氧化5分钟。
3、流水洗。
4、2%草酸处理1-2分钟。
5、流水洗。
6、1%硝酸铀10秒钟。
7、蒸馏水洗。
8、氨银溶液浸染1分钟。
9、95%酒精速洗。
10、于显影液内显色1分钟。
11、蒸馏水洗。
12、0.2%氯化金调色1分钟。
13、蒸馏水洗。
14、5%亚硫酸钠处理1-2分钟。
15、水洗。
16、如有需要，可作对比染色。
17、常规脱水，透明，封固。
结果：网状纤维：黑色，其余着对比染色，胶原纤维不着色。
(四).Foot氏法1、切片脱蜡至水。
2、1%高锰酸钾氧化5分钟。
3、自来水洗。
4、2%草酸处理1-2分钟。
5、自来水洗，蒸馏水洗。
6、于碳酸氨银液中，在56℃烤箱内浸染40-60分钟。
至切片呈黄棕色。
7、速洗蒸馏水。
8、20%福尔马林还原5分钟。
9、水洗。
10、0.2%氯化金水溶液调色1-2分钟。
11自来水洗。
12、、5%硫酸钠固定切片1-2分钟。
13、如果需要，可作对比染色。
14、脱水，透明，封固。
结果：网状纤维显示黑色，其它着染对比染色，胶原纤维不着色。
五、银染注意事项：1、所使用的玻璃仪器，须用清洁液处理。
2、配制氨银溶液时，氨水加入的量不能过多或不足，过多感应下降，会使液体过碱，滴染时，切片容易脱落，过少则感应上升，浸染效果不佳，不好掌握。
3、配制氨银液时，有可能用玻璃蒸馏水。
4、使用的化学试剂应尽量用分析纯以上。
5、切片氧化漂白应彻底，不能使残存的福尔马林留于片上，否则将导致过早还原而使浸染不均匀。
6、如果有某种原因而导致切片脱落时，应使用涂胶的载片，以增加附贴性，7、如有可能，氨银溶液以新配为佳，但也可保存于4℃冰箱中达一个月左右，这种液体易挥发，用后即须盖紧，当沉淀物出现时，该溶液应抛弃，8、20%福尔马林还原5分钟。
9、应秀氯化金调色时，可将胶原纤维着染的黄棕色去除掉。
10、上述四种方法，根据各单位个人的需要或爱好选择，没有什么区别。
六、临床应用1、可用于区别癌和肉瘤的诊断，例如：网织细胞肉瘤和转移于淋巴结内的未分化癌，这两者在HE的染色切片都较难区别，前者可产生网状纤维，后者不产生网状纤维。
鼻咽部活柱，应将网染作为常规，给予使用，可增加诊断的准确性。
2、可用于区别血管内皮瘤（肉瘤）和血管外皮瘤（肉瘤），它的瘤细胞在网状纤维膜内，而血管外皮瘤则在网状纤维膜外，血管内皮肉瘤的瘤细胞呈泡巢状，周围多被网状纤维包绕；而血管外皮肉瘤的瘤细胞可见较多的网状纤维。
3、可用于神经系统方面肿瘤的区别，如：交感神经母细胞，脑的髓母细胞瘤，这些肿瘤的形态有时象肉瘤，但银染时，神经系统的网染为阴性，不过脑的原发性肉瘤有较多的网状纤维。
4、可用于观察癌组织的发生发展过程。
如：原位癌，可见有完整的基底膜，而浸润性癌则可见到被破坏的基底膜。
5、可用于区别淋巴系统方面的肿瘤，如：淋巴肉瘤和网织细胞肉瘤，前者瘤细胞间的网状纤维比正常稍减少，后者则比正常时增多。
6、可用于急性骨髓纤维化的鉴别诊断，该病的网状纤维增多，纤维可以是致密和融合性的。
胶原纤维染色通常呈阴性，尽管偶尔有的病例可能显示胶原纤维化。
弹性纤维弹性纤维主要由弹性蛋白（一种黄*色硬蛋白，它是黄*色弹性纤维组织的主要成分，干燥时易脆，而湿润时呈弯曲并富弹性）构成。
它广泛分布于全身的各个部位，尤以循环系统，呼吸系统和皮肤系统为甚。
新鲜时它呈黄*色，固又称为黄*色纤维。
弹性纤维较细，直径0.2-1.0um，有分支，不成束。
但可交织成网。
它富有弹性，容易拉长，但不能拉到超过它的极限，外力除去后又恢复原状。
弹性纤维与胶原纤维交织在一起，在HE染色的标本上，含量少时不易与胶原纤维区别，含量多时呈折光性强的淡粉红色。