常用网状纤维染色方法
常用网状纤维染色方法
【试剂配制】
Gordon-Sweet染色法
Gordon-Sweet二氨氢氧化银溶液 加10%的硝酸银水溶液5ml于三角烧瓶内，一滴一滴地滴加氨水，随时摇荡。硝酸银遇到氨水立即产生沉淀，继续滴加氨水，当其沉淀物被全部溶解时，再加入3%氢氧化钠水溶液5ml。溶液重新产生沉淀，此时再滴加氨水。至其沉淀被溶解以后，以蒸馏水稀释至50ml。过滤，贮存于棕色瓶中备用。
【染色方法】
（1）石蜡切片、脱蜡至水；
（2）0.25%高锰酸钾液3分钟；
（3）蒸馏水洗2次；
（4）1%草酸漂白即可；
（5）蒸馏水洗2次；
（6）2.5%铁明矾水溶液媒染5～10分钟；蒸馏水洗多次； （7）二氨氢氧化银浸染1分钟，蒸馏水洗3次；
（8）10%甲醛液还原2分钟；蒸馏水洗3次；
（9）0.2%氯化金液调色1～2分钟；蒸馏水洗3次；
（10）5%硫代硫酸钠固定5分钟；
（11）蒸馏水洗。需要时复染；
（12）水洗、脱水、透明和封固
【结果】网状维呈黑色，其他组织呈复染的颜色。
病理学技术中级(师)专业实践能力模拟试卷5(题后含答案及解析)
病理学技术中级（师）专业实践能力模拟试卷5 (题后含答案及解析)
题型有：1. A1型题
1． 下列关于网状纤维James染色法的描述，正确的是
A．网状纤维呈黑色，胶原纤维呈绿色，背景呈黄色
B．5％硝酸银使用时要滴染
C．甲醛配好后，要放在冰箱内储存
D．二氨银配制时，氨水要一滴一滴加E．二氨银配制时，要加入充分氨水使沉淀物完全溶解
正确答案：D
解析：James染色法使网状纤维呈黑色，胶原纤维呈红色，背景呈淡黄色。55％硝酸银使用时不能滴染，应放在立式5片染色缸内进行。甲醛要新配制。配制二氨银液时，氨水一滴一滴加，边加边摇动容器，直至滴加到最初形成的沉淀恰好溶解，要避免氨水加得太多，最好使沉淀物不要全部溶解。 知识模块：常用的特殊染色技术
2． 弹性、胶原纤维的双重染色法中，弹力纤维和胶原各呈什么颜色
A．弹性纤维呈蓝绿色，胶原纤维呈黄色
B．弹性纤维呈蓝绿色，胶原纤维呈红色
C．弹性纤维呈蓝色，胶原纤维呈绿色
D．弹性纤维呈红色，胶原纤维呈绿色E．弹性纤维呈黄色，胶原纤维呈红色
正确答案：B 涉及知识点：常用的特殊染色技术
3． 关于Shift阿尔辛蓝地衣红染色法的叙述，错误的是
A．高锰酸钾氧化液需要新配制
B．地衣红染色液可反复使用
C．酸性黏多糖呈蓝色
D．中性黏多糖呈棕色E．阿尔辛蓝染色时间越长效果越好
正确答案：E
解析：阿尔辛蓝染色5分钟，水洗。 知识模块：常用的特殊染色技术
4． Lillie硫酸亚铁染色法常用于观察
A．胆色素
B．黏多糖
C．黑色素
D．肌肉E．纤维
正确答案：C 涉及知识点：常用的特殊染色技术
5． 关于使用刚果红进行淀粉样物质染色时，需注意的问题不包括
谈特殊染色及光镜观察与免疫组化在软组织肿瘤诊断中的应用
谈特殊染色及光镜观察与免疫组化在软组织肿瘤诊断中的应用
目的 探讨特殊染色及光镜观察与免疫组化在软组织肿瘤诊断中的应用。方法 选择特殊染色法、免疫组化染色法及电镜观察的方法。结果 特殊染色、免疫组化染色及电镜观察的辅助诊断，满足了临床病理诊断的要求。结论 特殊染色有助于诊断与鉴别诊断，在软组织肿瘤的诊断上具有重要作用，光镜观察HE切片是病理诊断的基础，是合理选择免疫组化染色的依据。免疫组化染色对软组织肿瘤常用抗体进行标记，其诊断价值是很明显的。
标签：软组织肿瘤诊断；特殊染色＼光镜观察＼免疫组化；应用价值
通常85%～90%的软组织肉瘤，通过光镜观察可做出正确诊断。约l0%～15%的肉瘤，尤其是圆形、卵圆形或梭形类的肿瘤，因分化程度低，单纯用HE染色切片很难判断其组织来源，常需借助特殊染色、免疫组化染色及电镜观察辅助诊断，以满足病理诊断要求[1]。
1.特殊染色
特殊染色有助于诊断与鉴别诊断[1]。在软组织肿瘤的诊断上具有重要作用，常用的特染包括：①网状纤维染色：可区分血管内皮肉瘤和血管外皮瘤，血管内皮肉瘤可见网织纤维包绕血管构成，瘤细胞位于网织纤维包绕的管腔内，而血管外皮瘤则见网织纤维丰富，分布于血管周围瘤细胞之间，并呈辐射状分布。此外，对鉴别腺泡状肉瘤、化感瘤及转移癌亦有帮助，网织纤维均包绕于瘤细胞巢周围；②Masson三色染色：可区分肌原纤维还是胶原纤维，肌原纤维显红色，胶原纤维显蓝色；③PTAH染色：瘤细胞内可查见蓝黑色横纹，有助于诊断横纹肌肉瘤；④PAS染色：腺泡状软组织肉瘤，瘤细胞胞浆内可见PAS阳性晶体状物质，除显示中性粘多糖外，亦可显示糖原（经淀粉酶消化后呈阴性），对含有糖原的软组织肿瘤，如横纹肌肉瘤、Ewing瘤、透明细胞肉瘤、平滑肌肉瘤及脊索样肉瘤等的诊断有一定辅助作用；⑤脂肪染色：对脂肪肉瘤的诊断有重要意义，但必须有相当数量、弥漫，小颗粒，绝不能仅见少数几个瘤细胞阳性就诊断脂肪肉瘤，在一些淋巴瘤、各种癌细胞及一些间叶组织肿瘤，如恶性纤维组织细胞瘤、横纹肌肉瘤等均可见脂肪染色阳性；⑥其它特殊染色：如黑色素，嗜银染色分别对转移性梭形细胞黑色素瘤，恶性间皮瘤及神经内分泌细胞肿瘤的诊断有重要意义。
Masson三色染色
Masson 三色染色
一、实验原理
结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维（collagen fiber）是 分布最广、含量最多的一种纤维。Masson 三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原 纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透 性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而，淡绿或苯胺蓝的分子量很大，因此 Masson 染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
二、实验材料
Masson 试剂盒厂家货号：索莱宝 G1340
产品组成：
试剂(A):Weigert 铁苏木素染色液
A1:Weigert 染液A 25ml RT避光
A2:Weigert 染液B 25ml RT
临用时，取 A1、A2 等量混合，成为 Weigert 铁苏木素染色液，不可预配制后放置。
试剂(B): 酸性乙醇分化液 50ml RT
试剂(C): Masson 蓝化液 50ml RT
试剂(D): 丽春红品红染色液 50ml RT 避光
试剂(E): 弱酸溶液 50ml RT
试剂(F): 磷钼酸溶液 50ml RT 避光
试剂(G): 苯胺蓝染色液 50ml RT 避光
自备材料： 固定液：选用甲醛升汞或甲醛盐溶液
系列乙醇
二甲苯
操作步骤（仅供参考）： 1、 切片常规脱蜡至水。
2、 用配制好的 Weigert 铁苏木素染色液染色
5min-10min。
3、 酸性乙醇分化液分化 5-15s，水洗。
4、 Masson 蓝化液返蓝 3-5min，水洗。
《组织学与胚胎学》名词解释
组胚名词解释
第一章 绪论
1．组织：组织是形态和功能相同或相似的细胞组成的细胞群体。据形态结构和功能，可分为上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织4种基本类型。
2．H-E染色法：是组织学中最常用的染色方法，使用苏木精和伊红；苏木精是碱性染料，将细胞核染成蓝紫色；伊红是酸性染料，将细胞质染成红色。
3．组织化学术：是应用化学反应、物理反应或免疫学反应等原理，在组织、细胞原位检测组织或细胞内化学成分，并对其进行定位、定量及相关功能研究的实验技术。凡是组织、细胞内的糖类、脂类、蛋白质、酶类和核酸等都可与相应试剂反应，最终形成有色反应终产物或电子致密物，应用光镜或电镜进行观察。广义的组织化学术还包括免疫组织化学术、原位杂交术等。
4．PAS反应：即过碘酸-希夫反应，是显示多糖的一种组织化学反应。根据反应产物的多少、颜色的深浅、光密度可对多糖进行半定量。
第二章 上皮组织
1．内皮：铺衬于心血管和淋巴管内表面的一层单层扁平上皮，其表面光滑，利于血液或淋巴流动。
2．间皮：覆盖在胸膜、腹膜和心包膜表面的单层扁平上皮，其主要功能是保持器官表面光滑，减少器官间的摩擦。
3．间充质：是胚胎时期，由间充质细胞和无定形基质组成。
间充质细胞：呈星形，细胞核较大，核仁明显，胞质弱嗜碱性，细胞间以突起相互连接成网。间充质细胞分化程度很低，但增殖和分化能力很强。
4．基膜：是上皮细胞基底面与深部结缔组织之间共同形成的薄膜。在HE染色的标本一般不易分辨。电镜下，基膜分为两部分，靠近基底面的部分为基板，与结缔组织相接的部分为网板。基膜具有支持、连接和固定作用；还是半透膜，有利于上皮细胞与深部结缔组织进行物质交换；还能引导上皮细胞移动，影响细胞的增殖和分化。
5．微绒毛：是上皮细胞游离面伸出的微细指状突起，在电镜下，微绒毛的胞质中有许多纵行的微丝。微绒毛使细胞的表面积显著增大。 第三章 结缔组织
1．细胞外基质：即细胞间质，由基质、纤维和组织液组成。细胞外基质由细胞产生，构成细胞生存的微环境，有支持、联系、保护和营养细胞的作用，对细胞增殖、分化、迁移以及信息传导有重要影响。
胶原染色法——精选推荐
结締组织染色 胶原纤维染色法
一般而言，疏松结缔组织、致密结缔组织、脂肪组织、网状纤维组织、软骨
组织、骨组织和血液均属结缔组织。 结缔组织由细胞和大量的细胞间质构成。间质包括基质和纤维两种成分。疏
松结缔组织和致密结缔组织的纤维有胶原纤维，弹力纤维和网状纤维。 光学技术切片的结缔组织染色是指胶原纤维，弹力纤维和网状纤维染色，而
通常所说的结缔组织染色多指胶原纤维染色。
胶原纤维染色法：胶原纤维由纤维母细胞分泌产生。纤维母细胞，纤维粗细
不等直径在1－2微米之间，呈分枝状，相互交织，少量常呈明显的纤维状；成熟
的和大量存在于组织时，则显均质性，具较强的的嗜酸性，在苏木素—伊红染色
（简称HE染色）的切片上易于识别。但在某些情况下，它与肌纤维的鉴别是有困
难的。例如纤维瘤或纤维肉瘤与平滑肌瘤或平滑肌肉瘤及横纹肌瘤及横纹肌肉瘤
的鉴别。为此，适宜的采用某些特殊染色就十分必要了。如Ven Gieson氏染色法
（胶原纤维呈红色，肌纤维呈黄色）；Masson氏三色染色法（胶原纤维呈绿色或兰
色，肌纤维呈红色）。
1 结締组织染色
1.1 胶原纤维染色法
1.1.1.Van Gieson氏染色法
[固 定]
10%甲醛，Zenker氏液，酒精等。
[试 剂]
Weigert氏铁苏木精液
1%盐酸酒精（70%）溶液
Van Gieson氏染液：
1%酸性品红液 10ml
苦味酸饱和液（约1.22%） 90ml
（分瓶盛放，临用前按比例混合） [操作步骤]
1．石蜡切片脱蜡至水。
2．Weigert氏铁苏木精液内染5-10分钟。
3．流水稍冲洗。
4．1%盐酸酒精溶液迅速分化，自来水充分冲洗。。
5．Van Gieson氏液内30-60秒钟。
6．蒸馏水速洗，用滤纸吸干（或从染色液内将切片取出，直接用95%洒精分
化数秒)。 7．常规脱水，透明，封固。
[结 果]
胶原纤维呈红至粉红色；肌肉和神经胶质呈黄色；细胞核呈蓝至蓝黑色。
组织胚胎学名词解释
H-E染色法是组织学中最常用的染色方法。染色时使用苏木精和伊红；苏木精是碱性染料，将细胞核染成
蓝紫色；伊红是酸性染料，将细胞质和细胞外基质中的胶原纤维染成淡红色。
PAS反应即过碘酸-Schiff反应，是显示多糖的一种组织化学反应。其基本原理是过碘酸将糖分子中的乙
二醇基氧化为乙二醛基，后者再与Schiff试剂中的亚硫酸品红反应，形成紫红色不溶性反应产物，沉积
于多糖存在的部位。根据反应产物的多少或颜色的深浅（或光密度）可对多糖进行半定量。
浆液性细胞：浆液性细胞的核为圆形，位于细胞偏基底部；基底部胞质呈强嗜碱性染色，顶部胞质含许
多嗜酸性的酶原颗粒，电镜下可见胞质中有密集的粗面内质网，在核上区可见较发达的高尔基复合体和
丰富的分泌颗粒。浆液性细胞的分泌物含较多的酶类。
微绒毛是细胞表面向外伸出的细小指状突起，常见于上皮细胞的游离面。电镜下可见微绒毛的表面是细
胞膜，内为细胞质；其中轴有许多纵行的微丝，后者从微绒毛的尖端向下连于胞质顶部的终末网；在某
些细胞，大量微绒毛整齐排列，形成光镜下的纹状缘或刷状缘。微绒毛可扩大细胞表面面积，并可适当
伸长或缩短，促进细胞的吸收。
纤毛多位于上皮细胞的游离面，是细胞表面伸出的细长指状突起，比微绒毛粗长，光镜下可见。电镜下，
纤毛的表面是细胞膜，内为细胞质；胞质中有纵行的微管，微管的排列呈“9+2”，即周围是9组二联微
管，中央是2根单独的微管；微管的根部连于胞质顶部的基体。纤毛的二联微管上有动力蛋白形成的动
力臂，通过分解ATP释放能量使微管之间产生滑动，纤毛的运动呈节律性定向摆动，可清洁细胞表面。
终末网是上皮细胞顶部微绒毛的基部胞质中与细胞表面平行的微丝网，其边缘部附着于细胞侧面的中间
连接处胞质内面薄层致密物质上。微丝为肌动蛋白丝，终末网中还有肌球蛋白，其收缩可使微绒毛伸长
或变短。
质膜内褶是上皮细胞基底面的细胞膜折向胞质形成的许多质膜皱褶；内褶质膜两侧的细胞质内有许多纵
行的线粒体，形成光镜下的基底纵纹。质膜内褶扩大了细胞基底面的表面积，有利于水和电解质的转运，
组织与胚胎学重点整理
组胚
第一章 绪论
1·（MJ）组织是由细胞群和细胞外基质构成的。人体的组织可归纳为上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织四大基本类型。
2·苏木精—伊红染色法，简称HE染色法。苏木精染料为碱性，主要使细胞核内的染色质和细胞质内的核糖体着紫蓝色,称为嗜碱性;伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质的成分着粉红色，称嗜酸性.
第二章 上皮组织
上皮组织特征：
1. 排列紧密、形态规则，极少量的细胞外基质
2. 有明显的极性，分游离面和基底面
3. 有基膜
4. 上皮内无血管
5. 具有保护、吸收、分泌、感觉等功能
第一节 被覆上皮类型和分布
单层上皮 单层扁平上皮 内皮：心、血管和淋巴管的内表面
间皮：胸膜、腹膜和心包膜的腔面
单层立方上皮 肾小管、甲状腺滤泡
单层柱状上皮 胃、肠、胆囊、子宫等腔面
假复层纤毛柱状上皮 呼吸道内表面
复层上皮 复层扁平上皮 未角化的：口腔、食管和阴道的内表面
角化：皮肤表面
复层柱状上皮 眼睑结膜、男性尿道等
变移上皮 肾盏、肾盂、输尿管和膀胱的腔面
⒈单层扁平上皮： （MJ)内皮:分布在心、血管和淋巴管的内表面的单层扁平上皮称内皮。
(MJ）间皮:分布在胸膜、腹膜和心包膜的腔面单层扁平上皮称间皮。
⒉单层立方上皮：细胞呈立方形，核圆形，位于中央
分布：甲状腺、肾小管
胶原纤维染色
天津天士力集团研究院药理所 文件编号：
1 胶原纤维染色
胶原纤维是人体中的结缔组织的主要成分，分布在全身的各个部位，组成胶原纤维的主要成分是胶原蛋白。新鲜时呈白色，故一般称为白色纤维。在HE染色中被染为淡红色。它的性质是具有一定韧性及紧固性，因此它能够抵抗一定的牵拉力而不至于撕裂或拉断它们常聚集成粗细不等的束，呈波浪状。胶原纤维由许多根纤细的胶原纤维组成。在电镜下胶原原纤维又由更细的原纤维构成。根据Kramen和Little所进行的电镜研究证实，胶原纤维是特有的，具有横纹的（重复期为650）原纤维。当有病变时这些纤维可发生变形，常出现的就是胶原纤维的坏死，胶原纤维在稀酸里可发生膨胀，变成胶样物。它们能被酸性染料染成深浅不一的粉红色，这些往往跟淀粉样物难以区别。由于它们的屈光率较弱，因而在光学显微镜下，很难与纤维区别。胶原纤维的分子长度约为3000，直径约为14，分子量为300000。
一、胶原纤维的组成：
1、细胞内合成前胶原蛋白分子，成纤维细胞摄取合成蛋白质所需的氨基酸，包括脯氨酸、赖氨酸和甘氨酸。在粗面内质网的核糖体上按照特定的胶厚mRNA的碱基序列，合成前α-多肽链。后者边合成边进入粗面内质网腔中，并在羟化酶的作用下，将肽链中的脯氨酸和赖氨酸羟化经羟化后，三条前α-多肽链互相缠绕成绳索状的前胶原蛋白分子。溶解状态的前胶原蛋白分子，两端未缠绕，呈球状构形，在粗面内质网腔风或转移到高尔基复合体内加入糖基后，分泌到细胞外。
2、厚胶原蛋白分子的细胞外聚合。细胞外的前胶原蛋白分子，在肽内切酶的作用下，切去分子两端球状构表部分，形成厚胶原蛋白分子，粗约1.5nm，长约300nm，厚胶原蛋白分子平行排列聚合成胶原纤维。聚合时，相互平的相邻分子错开1/4分子长度，同一排的分子，菌尾相对并保持一定距离，聚合成束，于是形成具有64nm周期横纹的胶原原纤维。聚合时，分子内，分子间的化学基因进行缩合，交联，增加厚纤维的稳固性。若干胶原原纤维经糖蛋白粘合成粗细子等的胶原纤维。中性自溶型胶原（neutrla-soluble collagen）→醛糖、缩醛类脂/肉豆蔻酸、类脂→不溶型胶原（insoluble collagen）
病理技师三基测试试题及答案
病理技师三基测试试题及答案
1、(1分) 下列哪项不是活检的意义
A、组织新鲜固定后能基本保持病变的原貌，有利于及时、准确地对疾病作出病理学诊断
B、必要时还可在手术进行中做冷冻切片快速诊断，协助临床医生选择最佳手术治疗方案
C、在疾病治疗过程中，定期活检可动态了解病变的发展和判断疗效
D、发现和确诊某些新的疾病、传染病、地方病、流行病等，为卫生防疫部门采取防治措施提供依据
E、可采用如免疫组化等研究方法对疾病进行更深入的研究
答案：D
2、在免疫组化染色中哪一项不是出现背景染色的原因: （ ）
A、内源性过氧化物酶没有完全阻断
B、脱蜡不够彻底
C、正常动物血清使用不合理
D、缓冲液中加入了吐温
E、显色剂浓度过高
答案：D
3、与电镜样品制作无关的试剂是
A、戊二醛
B、环氧树脂
C、石蜡
D、锇酸
E、丙酮
答案：C
4、细胞质包括:（ ）
A、糖原
B、脂类
C、蛋白质
D、基质、细胞器和包含物
E、色素颗粒
答案：D
5、刚果红染色显示淀粉样物正确结果是: （ ）
A、淀粉样物质呈红色，细胞核呈蓝色
B、淀粉样物质呈蓝色，细胞核呈红色 C、淀粉样物质呈粉色，细胞核呈黑色
D、淀粉样物质呈红色，细胞核呈绿色
E、淀粉样物质呈黑色，细胞核呈蓝色
答案：A
6、网状纤维用银氨浸染，甲醛还原呈: （ ）
A、红色
B、蓝色
C、黑色
D、绿色
E、黄色
答案：C
7、下列解剖学方位术语正确的是
A、小腿胫侧代表外侧
B、前臂桡侧代表内侧
C、小腿腓侧代表内侧
D、距身体腹侧面近者为前侧
答案：D
8、胸腔、腹腔被覆上皮是: （ ）
A、间皮
B、移行上皮
C、单层立方上皮
D、单层柱状上皮
E、内皮
答案：A
9、免疫的现代概念是:（ ）
A、免于疾患
B、机体抗感染过程
C、机体识别与排除抗原性异物的功能
D、消除和杀灭自身突变细胞
E、机体清除自身的损伤或衰老细胞的一种功能
答案：C
10、(1分) 结核性脑膜炎病变最明显部位是
二。网状纤维染色法
二、网状纤维染色 网状纤维是一种纤细的纤维。它沿着网状细胞和突起分支，并互相交织成网，因而被称为
网状纤维，又因这种纤维对银的浸染着色特别显著。故又称为嗜银纤维。它主要由III型胶原蛋白构成，也具有642nm周期性横纹[1]。它主要分布于骨髓、脾、淋巴结、肝和肺等脏
器。癌组织中间未见有网状纤维，但在其边缘可见有大量的网状纤维，但在其边缘可见有大
量的网状纤维围绕，俗称癌巢。
（1） 网状纤维的形成
它的形成主要是在纤维母细胞的粗面内浆网中，合成可溶性胶原。在醛糖、类脂的作用下，形成可溶性胶原，随后它被分泌到细胞外，在基质中（或在细胞的表面）通过原胶原蛋白分
子间的交联，聚合成为不溶性的胶原原纤维即网状纤维。
（2） 网状纤维在组织化学上的反应
网状纤维的主要成分是网硬蛋白，在组织化学上，网状纤维和胶原纤维是容易区别的。网状
纤维是分支纤细的纤维。Van Gieson 氏染色不显色或微红色。PAS反应呈现红紫色，银浸染为黑色。胶原纤维用Van Gieson氏染色为红色，PAS反应呈微粉红色。银浸染为黄色或
棕黄色。
（3） 状纤维的显示 1． 染色染料技术：从网状纤维的显示，区别和效果等方面，这种技术被认为是不
可靠的，其原因是它只能跟胶原纤维区别开来。 2． 金属浸染技术：这种技术对于显示网状纤维被认为是十分可靠和广泛使用的方
法，它不但能够区别网状纤维和胶原纤维，而且可显示纤细的网状纤维。
嗜银反应（Argyrophil reaction）嗜银细胞与亲银细胞所不同的是需要一种附加的还原剂来还
原，它们比亲银细胞数量多。必须注意：亲银反应中将找不到任何的嗜银细胞。
亲银反应（Argentaffin reation）亲银细胞有能力，直接地，不靠外加试剂，将银液中的银还原为一种不溶性的黑色金属银沉淀的细胞称为亲银细胞。（Cells that have the ability to directly
reduce silver solution producing an insoluble black metallic silver precipitate are termed-angentaffin cells）。[3]