中性红用途
几种常见培养基作用
1.中国蓝平板：含有牛肉粉、蛋白胨、乳糖、琼脂、氯化钠、中国蓝、玫瑰红等成份。
是一种弱选择性（亦有学者称为无抑制性）选择培养基。
成份中的中国蓝为指示剂，玫瑰红为弱抑制剂，仅能抑制革兰阳性菌生长，而对大肠杆菌没有抑制作用，发酵性革兰阴性杆菌因分解乳糖能力不同，在此平板上的菌落颜色不同，便于鉴别菌种。
根据菌落形态，可做出相应的处理或报告。
例如：大肠埃希菌菌落呈蓝色；痢疾志贺菌呈淡红色；鼠伤寒沙门菌呈淡红色。
2.巧克力平板：普通营养琼脂成份添加进氯化血红素，万古霉素，辅酶A。
用途：除可以分离奈瑟菌，嗜血杆菌外，由于加入了万古霉素，可抑制绝大多数的革兰阳性菌的生长，在分离培养上具有重要意义，不能用血平板来替代。
巧克力平板含有嗜血杆菌生长需要的营养因子X因子和V因子。
其原理为：绵羊血中的V因子通常处于被抑制状态，加热到80～90℃12Min即可破坏红细胞膜上的不耐热抑制物，可使V因子释放，故嗜血杆菌在加热的血琼脂培养基即巧克力琼脂培养基上生长较佳。
3. TCBS：含酵母膏粉蛋白胨氯化钠柠檬酸钠硫代硫酸钠胆酸钠牛胆粉蔗糖柠檬酸铁溴麝香草酚兰麝香草酚兰琼脂；其中：氯化钠可刺激弧菌的生长；蔗糖是可发酵的糖类；胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH（8.6）可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群；霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长；硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂；溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂。
利用指示剂来区分是否发酵蔗糖：副溶血性弧菌不发酵蔗糖，菌落呈蓝绿色。
霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色。
TCBS常用于致病性弧菌的选择性分离，是GB2008、SN标准指定培养基。
4.MAC平板：即麦康凯琼脂培养基，用于大肠杆菌和大肠菌群的分离培养(05药典)，主要成分：蛋白胨脙胨猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠琼脂乳糖1%结晶紫水溶液0.5%中性红水溶液。
麦康凯平板的原理：利用胆盐来抑制革兰阳性细菌的生长，而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用．利用乳糖发酵，中性红的颜色可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区别开．沙门菌及志贺菌呈无色菌落，大肠埃希菌呈桃红色菌落．SS培养基2.原理培养基中牛肉膏、蛋白胨等为营养物;煌绿、胆盐、硫代硫酸钠、枸橼酸钠等抑制非病原菌生长,而胆盐能促进某些病原菌生长。
常用平板
3. TCBS：含 酵母膏粉 蛋白胨 氯化钠 柠檬酸钠 硫代硫酸钠 胆酸钠 牛胆粉 蔗糖 柠檬酸铁 溴麝香草酚兰 麝香草酚兰 琼脂；其中：氯化钠可刺激弧菌的生长；蔗糖是可发酵的糖类；胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH（8.6）可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群；霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长；硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂；溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂。利用指示剂来区分是否发酵蔗糖：副溶血性弧菌不发酵蔗糖，菌落呈蓝绿色。霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色。TCBS常用于致病性弧菌的选择性分离，是GB2008、SN标准指定培养基。
PS:ss是 沙门氏菌 志贺氏菌的意思 .沙门 志贺氏培养基。
对于培养基的理解特别是鉴别性或选择性的培养基，关键的地方在于理解引起变色的原因（一般是对糖的利用引起）及起选择作用的原因（抑霍乱的传染性极强，易导致疾病大流行。一旦发生大流行，短时间出现的大量病人很快会摧毁我们的防治体系，严重危害社会安全，所以有疑似患者要及时上报。
4.MAC平板：即麦康凯琼脂培养基，用于大肠杆菌和大肠菌群的分离培养(05药典)，主要成分：蛋白胨 脙胨 猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠 琼脂 乳糖 1%结晶紫水溶液 0.5%中性红水溶液。麦康凯平板的原理：利用胆盐来抑制革兰阳性细菌的生长，而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用．利用乳糖发酵，中性红的颜色可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区别开．沙门菌及志贺菌呈无色菌落，大肠埃希菌呈桃红色菌落．
PS:中国蓝平板本身为淡紫色或淡红色（与PH值有关），在乳糖被发酵后，PH变低，因而中国蓝变蓝。
实验二 线粒体和液泡系的超活染色与观察
实验二线粒体和液泡系的超活染色与观察一、实验目的：（1）观察动、植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布。
（2）学习一些细胞器的超活染色技术。
二、实验原理：线粒体是细胞进行呼吸作用的场所，其形态和数量随不同物种、不同组织器官和不同的生理状态而发生变化。
詹纳斯绿B是毒性较小的碱性染料，可专一性地对线粒体进行超活染色，这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保持氧化状态（即有色状态），呈蓝绿色；而线粒体周围的细胞质中，这些染料被还原为无色的色基（即无色状态）。
中性红为弱碱性染料，对液泡系（即高尔基体）的染色有专一性，只将活细胞中的液泡系染成红色，细胞核与细胞质完全不着色，这可能是与液泡中某些蛋白质有关。
三、实验用品：1、材料：人口腔上皮细胞。
小麦种子或黄豆幼根根尖。
2、试剂：（1）Ringer溶液：氯化钠—0.85g氯化钾—0.25g氯化钙—0.03g蒸馏水—100ml（2）1%，1/3000中性红溶液（已配好）（3）1%，1/5000詹纳斯绿B溶液（已配好）3、器材：显微镜、恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、镊子、双面刀片、载玻片、凹面载玻片、盖玻片、表面皿、吸管、牙签、吸水纸等四、实验方法：1、人口腔黏膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察：（1）取清洁载玻片放在37℃恒温水浴锅的金属板上，滴2滴1/5000詹纳斯绿B染液。
（2）实验者用牙签宽头在自己口腔颊黏膜处稍用力刮取上皮细胞，将刮下的黏液状物放入载玻片的染液滴中，染色10-15分钟（注意不可使染液干燥，必要时可再加滴染液），盖上盖玻片，用吸水纸吸去四周溢出的染液，置显微镜下观察。
2、植物细胞液泡系的超活染色与观察：（1）用双面刀片把初生的小麦或黄豆幼苗根尖（1-2cm长）小心切一纵切面，放入载玻片中的1/3000中性红染液滴中，染色5-10分钟。
（2）吸去染液，滴一滴Ringer 液，盖上盖玻片，并用镊子轻轻地下压盖玻片，使根尖压扁，利于观察。
DNA的酶切、连接、转化和重组子的筛选与鉴定
第二次分子生物学实验报告DNA的酶切、连接、转化和重组子的筛选与鉴定一、实验目的1、学习和掌握限制性内切酶的分类、特性与作用原理，掌握载体和外源目的DNA酶切的操作技术。
2、学习利用T4 DNA 连接酶把酶切后的载体片段和外源目的DNA 片段连接起来，构建体外重组DNA 分子的技术，了解并掌握几种常用的连接方法。
3、掌握利用CaCl2 制备感受态细胞的方法；学习和掌握热击法转化E. coli 的原理与方法。
4、学习并掌握使用红白菌落法筛选获得重组子以及α互补筛选法的原理及方法。
5、学习和掌握使用试剂盒抽提质粒的方法；6、复习琼脂糖凝胶电泳的原理和方法；7、通过对重组子进行重组质粒DNA 的抽提与酶切鉴定，进一步确定重组质粒中含有外源目的DNA 片段，并验证重组子是期望的重组子。
二、实验原理1、限制性内切酶限制性核酸内切酶是一类能够识别双链DNA 分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA 双链结构的酶，主要是从原核生物中分离纯化出来的。
在限制性核酸内切限制酶的作用下，侵入细菌的“外源”DNA 分子便会被切割成不同大小的片段，而细菌自己固有的DNA 由于修饰酶(通常是一种甲基化酶)的保护作用，则可免受限制酶的降解。
目前已经鉴定出3 种不同类型的限制性核酸内切酶，即Ⅰ型酶、II 型酶和III 型酶。
Ⅰ型酶切割位点是随机的，至少距识别位点1000bp。
Ⅲ型限制酶的切割位点距识别序列3'端为24—26bp。
Ⅱ型限制酶的切割位点一般在识别序列上或与之靠近，而且具有序列特异性，故在基因克隆中有特别广泛的用途。
Ⅱ型核酸内切限制酶具有3个基本的特性：①在DNA 分子双链的特异性识别序列部位切割DNA 分子，产生链的断裂；②2个单链断裂部位在DNA 分子上的分布通常不是彼此直接相对的；③断裂结果形成的DNA 片段往往具有互补的单链延伸末端。
限制性核酸内切酶对DNA 底物的酶切作用是否完全，直接关系到连接反应、重组体分子的筛选和鉴定等实验结果。
常见细胞染色试剂简介
常见细胞染色试剂简介1、酸性品红（Acid fuchsin）酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。
是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
它跟甲基绿同染，能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。
2、刚果红（Congo red）刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。
它能作染料，也用作指示剂。
它在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。
用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色。
在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。
刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作类淀粉染色，由于它能溶于水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速3、甲基蓝（Methyl blue）甲基蓝是弱酸性染料，能溶于水和酒精。
甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。
它跟伊红合用能染神经细胞，也是细菌制片中不可缺少的染料。
它的水溶液是原生动物的活体染色剂。
甲基蓝极易氧化，因此用它染色后不能长久保存。
4、固绿（Fast green）固绿是酸性染料，能溶于水（溶解度为4%）和酒精（溶解度为9%）。
固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂，在染细胞和植物组织上应用极广。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
5．苯胺蓝（Aniline blue）是一种混合酸性染料，平常所用很难有一定的标准。
此染料一般很难溶于水，也不易溶于酒精（1.5％）。
植物制片中可与番红合用，作为组织染色；也可作藻类植物染色。
因为这种染料的成分很不一致，染色效果不易掌握。
6、苏丹Ⅲ（Sudan Ⅲ）苏丹Ⅲ是弱酸性染料，不溶解于水，呈红色粉末状，易溶于脂肪和酒精（溶解度为0.15%）。
常用70％酒精中的饱和溶液。
鸡白痢的国家诊断标准
NY/T 536—2002前言鸡伤寒和鸡白痢(fowl typhoid and pullorum disease)是由鸡白痢沙门氏菌(salmonella pullorum)和鸡伤寒沙门氏菌(salmonella gallinarum)引起的各种日龄鸡和火鸡的传染病，以急性败血性经过或以慢性隐性感染为特征。
本病呈世界性分布，所有养鸡的国家和地区都有发生。
雏鸡发生本病时，发病率和死亡率均较高，严重影响雏鸡成活率；青年鸡发病后，死亡率可达10%～20%，病程可达20天～30天，鸡只生长发育受阻；成年鸡感染本病多为慢性或隐性经过，不表现明显的症状，但可长期带菌，成为本病的主要传染源，产蛋鸡可经蛋垂直传播，因此种鸡感染后可造成更大范围的传播，集约化养鸡场一旦发生本病会造成巨大的经济损失。
世界动物卫生组织[World Organization for Animal Health(英)，Office Intentional des Epizootic(法)，OIE]将鸡伤寒和鸡白痢列为B类疾病，并规定了诊断标准和相应生物制品(多价抗原)的制造、标定和使用的国际标准，指定了专业实验室向全世界提供鸡白痢阳性血清标准型(S)和变异型(V)国际标准品。
我国农业部也将其列为二类疫病。
本标准中的病原分离和鉴定及全血平板凝集试验是参照OIE《诊断试验和疫苗标准手册》(2000版)(Manual of Standards for Diagnostic Tests And Vaccines，2000)等相关标准性文件制定的。
本标准中的附录A为规范性附录。
本标准由农业部畜牧兽医局提出。
本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。
本标准起草单位:中国兽医药品监察所。
本标准起草人:夏业才、张学琴、康凯、姚文生。
1范围本标准规定了鸡伤寒和鸡白痢病原分离和鉴定及全血平板凝集试验技术。
本标准所规定的病原分离鉴定适用于各种日龄鸡的鸡伤寒和鸡白痢的诊断；全血平板凝集试验适用于成年鸡的鸡伤寒和鸡白痢的诊断，可用于诊断、流行病学调查和无本病健康鸡群监测。
乳酸菌、双歧杆菌检验培养基
改良番茄汁培养基Tomato Juice Agar,Modified 用途：用于食品中乳酸菌总数测定改良MC培养基Chalmers Agar ,Modified 用途：用于食品中乳酸菌总数测定MRS琼脂MRS Agar Base 用途：用于食品中乳酸菌总数测定LBS琼脂LBS agar 用途：用于乳酸菌检测和分离培养BLB培养基BLB Modified 用途：用于双歧杆菌的分离培养改良的M17培养基M17培养基是酸奶中嗜热链球菌计数的重要培养基,它也是从酸奶或牛奶中分离嗜热链球菌的常用培养基。
配方：胰蛋白胨5.0g、鱼蛋白胨5.0 g、牛肉膏5.0 g、酵母浸膏2.5 g、抗坏血酸0.5g、硫酸镁0.25g、甘油10.0g、乳糖3.0g、磷酸二氢钾5.0g、琼脂11.0 g、蒸溜水lL，用NaOH调节pH至6.9，121℃蒸汽灭菌15min。
乳酸杆菌选择性琼脂Lactobacillus Selective Agar用途：用于乳酸杆菌检测和分离培养APT琼脂APT Agar用途：用于乳酸菌分离培养BL琼脂培养基BL Agar Medium 用途：用于双岐杆菌分离培养（GB标准）BBL琼脂培养基BBL Agar Medium 用途：用于双岐杆菌分离培养（GB标准）TPY琼脂培养基TPY Agar Medium 用途：用于双岐杆菌分离培养（GB标准）PYG液体培养基基础PYG Broth Medium Base用途：用于双岐杆菌增菌培养，使用时需加入氯化血红素和维生素K1（GB标准）MC培养基MC Medium 用途：用于食品中乳酸菌检测的肉汤APT Broth用途：用于异质发酵乳酸杆菌和其它需高含量盐酸硫酸胺素菌的培养。
乳酸杆菌肉汤培养基Lactobacillus broth Medium用途：用于乳酸杆菌增菌培养MRS肉汤MRS Broth 用途：用于乳酸菌增菌培养双歧杆菌BS培养基Bifidobacterium BS Medium 用途：用于双歧杆菌分离培养。
中性红染色液
中性红染色液(Neutral Red,0.1%)产品简介：中性红是一种弱碱性pH 指示剂，变色范围pH6.4～8.0之间(由红变黄)。
分子式：C15H16N4·HCl，分子量：288.78。
在中性或微碱性环境中，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌，由于液泡在一般情况下呈酸性反应，因此，进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色，在这种情况下，原生质和细胞壁一般不着色；死细胞由于原生质变性凝固，细胞液不能维持在液泡内，因此，用中性红染色后，不产生液泡着色现象，相反，中性红的阳离子，却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合，而使原生质与细胞核染色。
中性红染色液(Neutral Red stain)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成红色的染色液。
本染色液常用于组织或细胞染色中细胞核的红色复染。
产品组成：主要成分：主要由中性红、去离子水等组成。
自备材料：1、4%的多聚甲醛，亦可采购Leagene的多聚甲醛溶液(4% PFA)(DF0135)2、蒸馏水3、不同浓度的乙醇操作步骤（仅供参考）：1. 样品处理a) 对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5～10min。
换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5～10min。
无水乙醇5min。
90%乙醇2min。
70%乙醇2min。
蒸馏水2min。
b) 对于冰冻切片：蒸馏水2min。
c) 对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10min以上。
蒸馏水洗涤2min。
换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。
2. 中性红染色a) 对于上述处理好的样品，用Neutral Red stain (0.1%)染色2～5minb) 用蒸馏水或自来水充分洗涤。
c) 进行观察和拍照。
注意事项：1、如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。
如果样品是石蜡切片，需自备70%和90%乙醇，无水乙醇以及二甲苯。
2、首次使用本试剂时建议先取1~2个样品做预实验。
3、中性红染色液可以根据染色结果和要求调整时间。
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中性红用途
中性红，又称中性大红或酞菁红，是一种常见的有机合成染料，它具有明亮、鲜艳的红色。
中性红是一种高度稳定的有机颜料，具有耐光、耐酸碱、耐候性好的特点，广泛应用于各种领域。
下面将详细介绍中性红的主要用途。
1. 纺织印染
中性红是一种广泛应用于纺织印染的染料。
它能够与纤维表面形成稳定的化学键，具有良好的附着力和耐洗性。
中性红在纺织品上呈现出鲜艳的红色，具有很高的色牢度，不易褪色。
因此，在纺织品印染中，中性红被广泛用于丝绸、棉织品、毛织品等各类纤维材料的染色。
2. 涂料颜料
由于中性红具有较高的稳定性和良好的耐候性，它被广泛应用于各类涂料颜料中。
中性红可以用于油漆、水性涂料和粉末涂料等领域，能够提供艳丽的红色效果。
同时，中性红还能够提高涂层的耐候性和光泽度，使涂层具有更好的抗紫外线性能，延长涂层的使用寿命。
3. 印刷油墨
中性红也是一种常用的印刷油墨颜料。
中性红的鲜艳红色能够提高印刷品的色彩效果，使印刷品更加吸引人。
中性红具有良好的附着力和耐光性，能够保持印刷品的色彩稳定性。
因此，中性红广泛用于包装材料、出版物等各类印刷品的制作。
4. 塑料制品
中性红也是一种常用的塑料制品着色剂。
中性红可以被溶解在塑料中，使塑料制品呈现出鲜艳的红色。
中性红具有良好的热稳定性和耐光性，可以抵抗紫外线的照射，从而保持塑料制品的色彩稳定性。
中性红广泛应用于各类塑料制品的生产，如家居用品、工业制品、汽车零件等。
5. 染料墨水
中性红是一种常用的染料墨水成分。
中性红可以被溶解在水中，形成饱和的红色染料溶液。
中性红染料墨水具有较高的色素浓度和良好的稳定性，能够提供清晰、鲜艳的红色印刷效果。
中性红染料墨水广泛应用于喷墨打印、图文制作、绘画等领域。
总之，中性红是一种广泛应用的有机合成染料，具有良好的稳定性和鲜艳的颜色。
它在纺织印染、涂料颜料、印刷油墨、塑料制品和染料墨水等各个领域都有着重要的用途。
随着科技的发展和人们对色彩的不断追求，中性红的应用前景将更加广阔。