细胞生物学研究相关仪器设备简介2012
生物实验室器材清单明细表

生物实验室器材清单明细表简介生物实验室是科学研究和技术开发的重要场所,为了保证实验的顺利进行和实验人员的安全,合理选择和使用适当的器材是非常重要的。
本文档将详细列出生物实验室常用的器材清单明细表,以帮助实验室人员进行器材的统一管理和合理使用。
器材清单以下是生物实验室常用的器材清单明细表:1.实验台实验台是生物实验室中必需的器材之一。
实验台通常由耐腐蚀材料制成,表面光滑易于清洁,具有耐酸碱性能。
实验台上通常配备有水槽、气源和电源接口等设施,以满足实验需要。
2.显微镜显微镜是生物实验室中常用的器材之一,用于观察微小的生物结构和细胞等。
显微镜可分为光学显微镜和电子显微镜两种类型。
光学显微镜通过透射光观察样本,电子显微镜则利用电子束的物理性质对样本进行观察。
3.离心机离心机用于分离液体中的悬浮固体或液体混合物,广泛应用于细胞学、分子生物学和临床实验室。
离心机的转速和离心力可以调节,以满足不同实验需求。
4.培养箱培养箱用于实验室中的培养和保存细胞、微生物和植物等。
培养箱通常具有温度、湿度和通风等控制系统,以提供适宜的生长环境。
5.试剂瓶和量筒试剂瓶和量筒是生物实验室中常用的容器,用于盛装试剂、溶液和样品等。
试剂瓶通常由耐腐蚀材料制成,具有良好的密封性能。
量筒则用于准确测量液体体积。
6.离心管和试管离心管和试管是用于盛装样品、反应物和试剂的通用容器。
离心管可以耐受高速离心过程中的离心力,试管则用于一般实验操作。
7.PCR仪PCR仪是一种用于聚合酶链式反应(PCR)的仪器。
PCR是一种常用的分子生物学技术,用于扩增DNA片段。
PCR仪可以控制反应体系的温度变化,以完成PCR反应的循环。
8.电泳仪电泳仪用于分离和检测DNA、RNA和蛋白质等生物大分子。
电泳仪通过电场作用将不同大小、电荷的分子分离开来,并通过染色或探测技术进行可视化和分析。
9.pH计pH计用于测量溶液的酸碱度。
在生物实验室中,pH计常用于调节和监测培养基、缓冲液和试剂的酸碱平衡。
细胞生物学实验室常用仪器

细胞生物学实验室常用仪器嘿,朋友们!今天咱就来唠唠细胞生物学实验室里那些常用的宝贝仪器。
先说说显微镜吧,这可真是个神奇的玩意儿!它就像我们进入细胞世界的小窗口,能让我们看到那些微小得不可思议的细胞结构。
你想想啊,平时咱肉眼啥都看不见的细胞,在显微镜下变得清晰可见,多有意思呀!通过它,我们能观察到细胞的形态、大小,就好像在探索一个神秘的微观宇宙,每次都能有新发现,你说妙不妙?还有离心机呢,这东西就像是个大力士,能把不同的物质快速分开。
比如说,我们要把细胞从液体里分离出来,离心机一转,嘿,就搞定啦!它的工作效率可高啦,感觉就像是有一双无形的大手在快速地分拣东西一样,厉害吧!培养箱也不能落下呀!它就像是细胞的温暖小窝。
细胞们在里面舒舒服服地生长、繁殖,就像我们在温暖的家里一样自在。
它能提供适宜的温度、湿度和气体环境,让细胞茁壮成长。
要是没有培养箱,那些细胞可怎么活呀,对吧?再讲讲电泳仪,这东西就像是个细胞的赛跑赛道。
我们可以让不同的分子在上面跑起来,看看谁跑得快,谁跑得慢。
通过这个,我们能了解分子的特性和差异,是不是很神奇?就好像我们看一场精彩的比赛一样。
还有那些移液器,它们就像精准的小助手,能准确地吸取和分配各种液体。
小小的一支移液器,却有着大大的作用呢!每次使用它,都感觉自己像是个专业的科学家在进行精细的操作。
这些仪器啊,就像是细胞生物学实验室里的明星,各自发挥着重要的作用。
没有它们,我们怎么能深入了解细胞的奥秘呢?它们就像是我们探索细胞世界的工具,帮助我们解开一个又一个谜题。
所以呀,我们可得好好珍惜这些仪器,好好利用它们来探索更多的未知。
它们是我们打开细胞世界大门的钥匙,让我们能在这个神奇的领域里尽情遨游。
大家说是不是呀!。
生物实验室仪器设备一览表

生物实验室仪器设备一览表本文将详细介绍生物实验室中常用的各种仪器设备,帮助读者了解它们的功能和用途,以便更好地选择和使用。
基本实验设备1. 显微镜显微镜是生物实验室中最基本的仪器之一。
它能够放大样本,使我们能够观察微小的细胞结构和微生物。
根据放大倍数和功能的不同,显微镜可以分为光学显微镜和电子显微镜。
光学显微镜在生物领域中广泛应用,电子显微镜则用于观察更小的物体,如蛋白质分子。
2. 离心机离心机用于分离液体混合物中的固体和液体成分,利用离心力将重物质沉淀到底部。
它在生物实验室中常被用来分离血液成分、提取细胞等。
离心机通常有不同的转速和容量,以适应不同的实验需求。
3. 恒温器恒温器用于控制实验室的温度,保持稳定的环境条件。
在生物实验中,很多反应和培养需要在特定的温度下进行。
恒温器可以提供恒定的温度,并确保实验结果的准确性和可重复性。
4.pH计pH计用于测量溶液的酸碱度。
在生物实验中,许多生化反应和生物体内的许多过程都受pH影响。
pH计能够准确测量溶液的pH值,帮助研究人员控制和监测实验条件。
分析仪器设备1. 气相色谱仪气相色谱仪是一种用于分离和分析物质的仪器。
它通过将样品蒸发成气体,并通过柱子中的填料分离它们,然后利用检测器检测出来。
气相色谱仪常被用于分析有机物和无机物的成分,具有高分辨率和高灵敏度。
2. 液相色谱仪液相色谱仪是一种利用液相作为移动相进行分离的仪器。
它通过样品在固定相上的分配行为进行分离,并通过检测器测量分离的成分。
液相色谱仪广泛应用于生物化学、药物分析等领域。
3. 质谱仪质谱仪是一种用于分析化学物质的仪器。
它通过将样品分子中的原子或分子离子化,并使用磁场将它们分离,并利用检测器检测出来。
质谱仪在生物实验室中常用于分析蛋白质、核酸等生物大分子的结构和组成。
4. 核磁共振仪核磁共振仪利用原子核在磁场中的特定共振频率进行分析。
它可以提供有关样品的结构、组成和环境的信息。
核磁共振仪广泛应用于有机化学、生物化学、药物研发等领域。
生物实验室器材清单表

生物实验室器材清单表一、基本实验器材•称量仪器:电子天平、分析天平、移液器等。
•容器:试管、烧杯、量筒、离心管、培养皿等。
•温度控制设备:恒温水浴锅、恒温培养箱、恒温恶冷冻箱等。
•搅拌设备:磁力搅拌器、振荡器等。
•过滤设备:滤纸、滤液漏斗、滤膜、滤芯等。
•离心设备:高速离心机、台式离心机等。
•加热设备:电热板、电炉、燃气灶等。
•p H计:用于测量溶液的酸碱度。
•光学设备:显微镜、反射显微镜等。
二、分子生物学实验器材•离心管架:用于离心管的固定和摇晃。
•冻存管和冻存管盒:用于样品的长期保存和冷冻。
•培养皿和培养瓶:用于生物样品的培养和生长。
•PCR试管和PCR板:用于聚合酶链式反应(PCR)实验。
•电泳仪和电泳槽:用于DNA或蛋白质的分离和检测。
•转印设备:用于将DNA或蛋白质转移到膜上。
•半自动和全自动PCR仪:用于PCR反应的自动化控制。
•基因测序仪:用于测定DNA序列。
•真空泵和真空过滤器:用于快速过滤和生物样品的处理。
•超低温冰箱:用于存放生物样品和试剂。
三、细胞生物学实验器材•细胞培养器:细胞培养瓶、细胞培养皿等。
•色素和荧光标记试剂:用于细胞成像和染色。
•显微镜和显微摄像系统:用于观察和记录细胞结构和功能。
•细胞计数仪:用于计算细胞数量和密度。
•酶消解试剂:用于细胞的消化和分离。
•均质机和超声波颚化器:用于细胞的破碎和分散。
•细胞培养水浴锅和细胞培养箱:用于细胞培养的温度控制。
•细胞冻存液和细胞恢复液:用于细胞冻存和解冻。
四、免疫学实验器材•免疫试剂盒:用于免疫检测和定量。
•过滤膜和孔板:用于免疫试剂的过滤和固定。
•孵育箱和孵育器:用于免疫试剂的孵育和反应。
•光谱仪和荧光仪:用于测量光信号和荧光强度。
•干燥器和浓缩器:用于免疫样品的脱水和浓缩。
•凝胶电泳仪和蛋白质标记试剂:用于免疫印迹和蛋白质定量。
•细胞悬液和抗体标记试剂:用于免疫细胞的染色和标记。
五、遗传学实验器材•DNA提取试剂盒和RNA提取试剂盒:用于提取DNA和RNA。
初中生物实验室仪器设备大全

初中生物实验室仪器设备大全生物实验室是进行生物学研究和实验的场所,其中需要使用各种仪器设备来进行实验。
以下是初中生物实验室常用的仪器设备大全:1.显微镜显微镜是生物学实验室中最基本的仪器之一,用于放大和观察微小的生物样本。
常见的显微镜有光学显微镜和电子显微镜,其中光学显微镜适用于观察细胞结构和微生物,电子显微镜则可以放大更小的细胞结构和生物分子。
2.离心机离心机是用来分离悬浮液中的固体颗粒或液体的仪器。
在生物实验中,常用离心机来离心细胞、蛋白质或DNA分子等。
3.酶标仪酶标仪是用来测定酶活性或检测生物分子的浓度的仪器。
通过测定酶活性,可以了解生物体内的代谢过程;通过测定生物分子浓度,可以对生物样本进行定量分析。
4.电泳仪电泳仪是用来分离和检测DNA、RNA和蛋白质等生物分子的仪器。
在实验中,可以利用电泳仪来分辨不同长度和大小的DNA片段或蛋白质,从而进行分子生物学实验和研究。
5. pH计pH计是用来测定溶液酸碱度的仪器,它可以帮助实验人员了解生物体内各种生理过程中的酸碱调节情况。
6.温度控制设备在生物实验中,常常需要控制实验环境的温度以保证实验的准确性。
因此,温度控制设备如温度水浴器、恒温培养箱和恒温离心机等是不可或缺的仪器设备。
7.加热设备加热设备如恒温加热板和恒温振荡器等用来提供实验中需要的热能,并保持温度的稳定。
8.生物安全柜生物安全柜是用来防止实验人员接触和污染生物样本的仪器设备,对于一些需要严格控制环境的生物实验,使用生物安全柜是非常重要的。
9.均质机均质机是用来对生物样本进行均质处理的仪器,可以有效打破样本中的细胞壁或细胞膜,使样本更易于处理和分析。
10.吸光度计吸光度计是用来测定生物样本中特定物质的浓度或纯度的仪器,通过测定样本对特定波长光线的吸收情况,可以对样本进行快速、准确的分析。
11.显微摄影系统显微摄影系统是连接到显微镜上的设备,可以帮助实验人员记录和保存显微镜下的观察结果,以及进行数字图像分析。
生物实验室常用仪器简介课件

提供恒定的温度环境,用于培养微生物、细胞等生物材料。
光照培养箱
具备光照和温度控制功能,适用于植物、藻类等需要光照的生物材料的培养。
厌氧培养箱
创造无氧环境,用于厌氧微生物的培养。
CO2培养箱
模拟细胞在体内的生理环境,提供恒定的温度、湿度和CO2浓度,用于细胞培养。
培养箱的工作原理
通过电热元件加热或制冷剂循环实现温度 控制。
生物实验室常用仪器简介
CONTENTS
• 显微镜 • 分光光度计 • 离心机 • PCR仪 • 培养箱
01
显微镜
显微镜的种类
光学显微镜
利用可见光和透镜组合放大物体 ,主要用于观察固定样本。
01
Байду номын сангаас电子显微镜
02 利用电子替代可见光放大物体, 具有更高的分辨率,常用于观察 细微结构。
荧光显微镜
利用荧光物质标记样本,通过特
注意平衡放置样品,确保转子平衡,避免 发生意外。
在使用前应检查仪器是否正常工作,并定 期进行维护和保养。
04
PCR仪
PCR仪的种类
普通PCR仪
适用于一般基因扩增实验。
荧光定量PCR仪
适用于实时荧光定量PCR实验,可对 DNA、RNA进行定量检测。
高通量PCR仪
具有高通量、高效率的特点,适用于大规 模基因组学研究。
使用前的准备
检查仪器是否正常工作,准备好 所需的试剂和样品。
操作步骤
按照实验要求设定程序,包括变 性温度、复性温度、延伸时间等 参数,启动程序开始实验。
注意事项
避免交叉污染,每次实验前要清 洗仪器和实验台面;定期对仪器 进行维护和保养;注意安全,避 免烫伤和电击等意外事故。
生物实验室的仪器

生物实验室的仪器生物实验室是生物学研究的重要环境之一,为了顺利进行各项生物学实验和研究,生物实验室需要配备各种精密的仪器设备。
这些仪器设备通过提供精确的测量、观察和分析功能,帮助科研人员深入研究生物学的奥秘。
本文将介绍一些常见的生物实验室仪器,包括离心机、PCR仪、高效液相色谱仪和电泳仪。
离心机离心机是生物实验室中最常见的仪器之一。
它主要通过应用离心力,用于分离和沉淀悬浮物质。
离心机的基本原理是利用离心力使样品分离成不同密度的组分。
离心机可以用于分离DNA、RNA、蛋白质等生物分子,也可用于细胞沉降和离心收集微生物。
离心机通常由离心机盖、离心转子和控制系统组成。
离心机盖用于装载样品管和离心转子,控制系统用于调节离心机的转速和离心时间。
根据不同的离心实验要求,可以选择不同类型和规格的离心机。
PCR仪PCR(聚合酶链反应)仪是生物实验室中的重要设备。
PCR是一种在体外扩增DNA产量的技术,能够从少量DNA样本中扩增出足够多的DNA片段,以进行后续的分析和研究。
PCR仪的主要部件包括热循环装置、温控系统和控制面板。
热循环装置通过一系列的温度变化,包括变性、退火和延伸,使DNA模板通过酶的作用被扩增。
温控系统能够精确控制反应的温度和时间,以确保PCR反应的可靠性。
控制面板则用于设置和监控PCR反应的参数和进度。
PCR仪的应用非常广泛,包括基因组学研究、医学诊断、犯罪鉴定等领域。
高效液相色谱仪高效液相色谱仪(HPLC)是一种用于分离、纯化和分析化合物的技术。
它利用溶液在固定相上的流动性能,通过控制流动相的速度和组成,来分离样品中的化合物。
HPLC主要由流动相系统、进样系统、色谱柱和检测器组成。
流动相系统通过提供流动相,使样品在色谱柱中进行分离。
进样系统用于将样品引入色谱柱。
色谱柱则是分离化合物的核心部分,通过选择不同的柱相,可以实现对不同化合物的分离。
检测器则用于检测染色质并生成色谱图。
HPLC被广泛应用于药物分析、环境监测、食品安全等领域,并成为现代生物实验室中不可或缺的仪器之一。
生物实验室仪器设备大全

生物实验室仪器设备大全引言生物实验室是进行生物学研究和实验的重要场所,其中的仪器设备对于实验的顺利进行至关重要。
本文将介绍一些常见的生物实验室仪器设备,包括其功能、特点以及适用范围,以便研究人员在实验室工作中选择合适的设备。
1. 显微镜功能:显微镜用于观察微观生物结构和细胞的形态,通过放大镜头的倍数来使细胞和组织的细节更加清晰可见。
特点: - 不同类型的显微镜如光学显微镜、电子显微镜等有不同的放大倍数和分辨率。
- 光学显微镜适用于普通细胞和组织的观察,电子显微镜适用于观察更高分辨率的细胞结构。
- 高级显微镜设备还能进行荧光显微镜等特殊实验。
适用范围:显微镜广泛应用于细胞生物学、组织学、病理学等领域的研究。
2. 离心机功能:离心机用于分离混合物中的固体颗粒或液体,通过快速旋转产生离心力,使颗粒或液体分层。
特点: - 不同类型的离心机如常规离心机、高速离心机等有不同的最高转速和容量。
- 高速离心机适用于离心过程中需要更高离心力的实验。
适用范围:离心机广泛应用于分离细胞、沉淀蛋白质、提取核酸等实验。
3. PCR仪功能:PCR仪(聚合酶链反应仪)用于扩增DNA分子,通过反复进行循环加热来复制DNA。
特点: - PCR仪可设定不同的温度和时间参数,以适应不同的PCR反应需求。
- 高级PCR仪还能实现定量PCR和实时荧光PCR等特殊实验。
适用范围:PCR仪广泛应用于分子生物学、基因工程等领域的研究。
4. 电泳设备功能:电泳设备用于分离DNA、RNA或蛋白质等生物大分子,通过电场作用使其在凝胶上移动并分离。
特点: - 不同类型的电泳设备如水平电泳仪、垂直电泳仪等有不同的凝胶尺寸和电场强度。
- 高级电泳设备还能实现蛋白质Western blot等特殊实验。
适用范围:电泳设备广泛应用于分子生物学、生化学等领域的研究。
5. 高压灭菌器功能:高压灭菌器用于灭菌实验器械和培养基等材料,通过高温高压的环境有效杀灭细菌和病毒。
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【相差显微镜】
【微分干涉显微镜/DIC】
处理透过光,把肉眼不可见 的光程差,变成肉眼可见的 振幅差(明暗),从而看到 活细胞内一些结构。 处理入射光,通过特殊棱镜,使图 像呈现三维立体效果。
细胞生物学研究方法与技术
细胞生物学研究方法与技术
信息转换显微镜
荧光显微镜:基于荧光染料特异性标记的显微镜
分辨率高;多信息同时标记;定位定性定量
单核
பைடு நூலகம்
双参数散点图
淋巴 横纵坐标均表示参 数的强度,细胞数量 由不同方式表达(密 度,等高线等)
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流式的重要概念
设门(gating)
依据散射光信号——确定流式分析的对象范围
1、单细胞系——排除细胞碎片和细胞团; 2、多细胞混合物——从混合物中指定需要分析的细胞成分,门圈的不 同,分析结果也不同。
正常
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多发性骨髓瘤
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10
4.细胞凋亡分析
AnnexinV/PI 检测 基本原理: PI:DNA染料,不能透过完整的细胞 膜,只能进入已破损的细胞膜。 AnnexinV:与磷脂酰丝氨酸(PS) 结合,正常细胞PS位于细胞膜内 侧,发生凋亡的细胞发生PS外 翻。 结果:
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三、图像流式系统
5. 细胞增殖分析
CFSE染色
原理:羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)是 一种对细胞无毒的细胞活性染色剂,通过酯酶裂解 和细胞质扩散过程进入细胞。当细胞分裂时, CFSE平均分配到子代细胞,并伴随检测CFSE信号 值的降低,细胞分裂代数越多,信号降低程度也越 大。
1、定义:指物镜框口能纳进的光通量的大小。数值孔径越 大则进入物镜的光越亮,物镜成像越清晰,镜头越好。 2、计算公式: NA = ·sin/2 NA与介质的折射率和物镜的框口夹角有关。
介 质 折 射 率
材质 真空 空气 水 玻璃 香柏油
折射率 1.0000 1.0003 1.333 1.5~1.9 1.518
缺点 T细胞亚群研究 没有抗体级联 放大效应 非特异性吸附 增强 只能获得一个 指标的结果 能获得多个指 标的相互关系 B细胞亚群研究 树突细胞研究 干细胞表面标志研究 调节性T细胞研究
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2. 胞内分子分析 用试剂破膜(细胞膜/核膜)打孔,让抗体进入细胞。
淋巴细胞
红细胞
大肠杆菌
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细胞生物学研究方法与技术
4
透射电镜的主要制样技术
负染技术:用重金属盐对铺展在载网上的样品
染色,吸去多余染料,干燥后,使样品凹陷处铺 上一层重金属盐,从而出现负染效果,分辨率可 达1.5nm左右 。 主要用于观察病毒、大分子蛋白形态结构
第一节重点
1.光镜: ① 物镜的重要参数及意义 ② 不同种类光镜及应用 2.电镜: ①最常用的两种类型 ②观察主要内容
实际放大倍数:目镜的放大倍数乘以物镜的放大倍数
信息转换显微镜
荧光显微镜(FL) 激光共聚焦显微镜
细胞生物学研究方法与技术
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2
几何光学显微镜
【明视野观察】
最常见的透射光显微镜模式。 又可分为正置显微镜和倒置显 微镜。
物理光学显微镜
【暗视野观察】
入射光斜射,通过被检 物体的反射光或衍射光 进行观察。消除了强光 直射时因强光绕射造成 的人眼观察不到效果。
光学显微镜的种类与应用
从工作原理分
几何光学显微镜
从视觉效果分
明场(BF) 暗场(DF) 相差(PH)
= 0.61 ————————— NA(数值孔径)
分辨率也与数值孔径相关
物理光学显微镜
微分干涉(DIC) 浮雕相衬(RC)
放大倍数
分为低倍 (4×)、中倍(10×或20×)、高倍 (40×)和油浸物镜(100×)
5、观察细胞膜分子的运动——FLIP/FRAP
光漂白/光漂白后修复: 体现细胞膜蛋白质分子 运动过程,可通过荧光 物质的消失和再生对靶 分子进行观察。
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7
二、流式细胞仪
什么是流式细胞技术?
1、样品:细胞(常用)或其他微粒; 2、方式:样品在液流环境中逐个被光源照射; 3、结果:收集照射后样品的相关信号。
主要原理
流路系统、光路系统、电路系统、分析系统
激发和分别 收集不同的 光信号
Accuri C6
流式细胞技术能用来干什么?
1、对待测样品实现多参数检测分析(相对大小,相对颗粒 度,相对荧光强度)——大样本量; 2、对混合样品中感兴趣的成分实现分离(分选型)。
液流聚焦
光电信号 的转换和 放大
BD FACSAria Coulter Epics XL
细胞生物学研究方法与技术
细胞生物学研究方法与技术
一、激光扫描共聚焦显微镜
Laser Scanning Confocal Microscope
第二节:鉴定细胞的设备——基于特 异性荧光染色 1、激光扫描共聚焦显微镜 2、流式细胞仪 3、图像流式系统
激光 扫描
光源(单色光、点光源) 激光在样品上的工作方式
Pinhole
123 标本
因为标本有 厚度,1、 2、3表示不 同的平面
1 2 3
1 物镜 2 3 景深内各点均成像 “2”点位最清晰
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激光扫描层面
2 物镜
仅焦平面上 的点成像
普通荧光显微镜
激光扫描共聚焦显微镜
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逐点扫描,光学切片
沿X轴逐点扫描成行 沿Y轴重复行扫
蛋白质磷酸化(常用western blot检测) 转录因子表达(调节性T细胞foxp3染色) 细胞因子分泌(ELISA、ELISPOT检测)
3.细胞周期分析 原理:特异性标记DNA,检测细胞DNA含量的变化
G0/G1期:单倍、 S期:DNA复制(1-2倍之间)、 G2/M期:2倍
S期比率、组织 学分级、预后
同型对照:与实验抗体所带荧光标记及抗体种属、亚型、剂量都 一致的无关抗体
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9
流式实验的染色方法
流式细胞技术的应用
1.细胞免疫表型分析
染色 方法 直标 间标 单染 多染
优点 简便,特异 性好 提高弱信号 检测灵敏度 不用考虑荧 光补偿 需要调节荧 光补偿
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细胞生物学研究常用仪器
感兴趣的细胞
光镜、电镜 共焦显微镜、流式
观察、鉴定、分离
第一节:观察细胞形态结构的设备 1、光学显微镜 2、电子显微镜
流式、磁珠分选、离心 ELISPOT、液相芯片、 活细胞工作站
细胞生物学研究方法与技术 细胞生物学研究方法与技术
功能
1
一、光学显微镜知识
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6
2、目标分子的定量分析——根据荧光强度
3、图像三维重组
细胞内钙离子定量
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4、目标分子间相互关系研究——FRET
荧光共振能量转移:当两种荧光染料距离 非常近时(2-7nm),第一种荧光物质的发射 光,成为第二种荧光物质的激发光,使第 二种荧光被激发的现象。
共聚焦 荧光成像原理,光学切片 显微镜 成像分辨率更高,更清晰
人眼分辨率:0.2 mm 光学显微镜分辨率:0.25m 共焦显微镜分辨率:0.18m(属于光学显微镜) 电子显微镜分辨率:0.2 nm 细胞生物学研究方法与技术
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共聚焦原理——针孔成像
成像焦平面 焦平面上有探测针孔
主要是通过特异性抗体标记实现。 荧光信号的变化是流式实验的主要的结果。
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8
外周血细胞
侧 向 散 射 : 结 构 前向散射:大小
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流式分析的图形
中性粒
单参数直方图
横坐标:参数的强度 纵坐标:各个不同强度 处细胞样品数量统计 值(细胞计数)
AV-/PI-活细胞 AV+/PI-早期凋亡细胞 AV+/PI+晚期凋亡细胞
DNA断裂点标记——BrdU法
细胞凋亡时核酸内切酶将DNA从 核小体处切断,产生3’-OH末端, 能与标记的dUTP结合。
PI单染——非整倍体凋亡峰
凋亡峰:细胞凋亡,DNA降解, 不完整,在G1期峰之前形成非整 倍体凋亡峰。
光学显微镜最重要的原件——物镜 性能 参数
1、数值孔径(NA, numeric apeture) 2、分辨率() 3、放大倍数,工作距离,视场直径,等等 1、相差等特殊记载 2、矫正相差和色差的能力 3、放大倍数、数值孔径、介质 4、镜筒、盖玻片厚度 5、放大倍数颜色标志
物镜的数值孔径
数值孔径 numeric apeture (NA)
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扫描电镜
观察样本表面 完整细胞 细胞断面
冷冻蚀刻
将冷冻断裂的样品的 温度升高,让样品中 的冰在真空中升华, 而在表面上浮雕出细 胞膜的超微结构。而 后对浮雕表面进行铂 碳复型。
透射电镜
电镜受电子束穿透能力的限 制,必须把标本切成厚度小于 0.1um的薄片才适用,这种薄 片称为超薄切片。 电镜的实际分辨率与切片的 厚度相关,实际分辨率 = 切片 厚度的1/10 细胞直径:20um 超薄切片:40~50nm 分辨率:4~5nm(观察亚细胞结构)
流式实验的对照