生物：动物细胞工程专题复习课件

维持培养液的PH
3、应用：
大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、
干扰素、单克隆抗体） 作为基因工程中的受体细胞 培养的动物细胞可以用于检测有毒物 质，判断某种物质的毒性 用于生理、病理、药理等方面的研究， 为治疗和预防疾病提供理论依据
植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 植物组织培养 细胞的全能性 固体培养基 蔗糖、植物 激素 植株 快速繁殖、培育 无病毒植株等 动物细胞培养 细胞增殖 液体培养基 葡萄糖、动物 血清 细胞株、细胞系 获得细胞或 细胞产物
4．体细胞核移植技术存在的问题：
1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型
过大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。 2.成功率非常低及克隆动物食品的安全性问题。
1.下列哪—项属于克隆（ D ） A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤 细胞 D．将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系 2.（多选）美国杜克大学医疗中心的一个研究小组利用 成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应 器,成功地在实验室里培育出新的动脉血管，这种血管的 外形和功能都与真的血管一样,这一研究成果是生物组织 培养领域的重大进展。下列关于以上技术的叙述中，正 确的是（ ） ABD A．属于“克隆” B．可能要利用去核卵细胞 C．关键是激发血管细胞的全能性 D．关键是激发血管细胞发育成血管的潜能
2、条件：
1、无菌、无毒： （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、全部的营养物质：
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）
3、适宜的温度和PH值：
36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4
保证细胞顺利的 生长增殖
4、必要的气体条件：O 和CO （95%空气和5% CO ） 2 2 2
4.科学工作者用绿色和红色荧光材料，分别标记人和鼠的 细胞膜上的蛋白质。当两个标记细胞融合成一个细胞后， 起初一半膜发出绿色荧光，另一半膜发出红色荧光，一段 时间后，两种颜色的荧光点均匀分布，如图所示。请分析 回答：
⑴该实验结果说明了细胞膜 具有一定的流动性 ，这是因为 构成细胞膜的磷脂分子和蛋白质大都是可以运动的 ⑵若在两个细胞融合成一个细胞后，将融合细胞置于0℃ 条件下再保持40min，则融合细胞仍然是一半膜发绿色荧 光，另一半膜发红色荧光，这说明 膜的流动性受温度影响，在低温下分子的运动受抑制
动物细胞工程专题复习
动物细胞培养
1、过程：
动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞 细胞 制成 悬浮 物的组织、器官 剪碎 液 细胞系 原 细 细胞株 部分细胞“癌变”， 代
遗传物质改变，无 限传代 加培养液
培 养
胞 贴 壁
细胞 动物细胞培养不能 最终培养成动物体
50代细胞
剥离、分瓶
10代 细胞
传代培养
如何界定原代培养和传代培养；细胞株 和细胞系？
随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖
细胞株 细胞系遗传物质改变
细胞 悬浮 液
10代 细胞
原代培养
50代 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ胞
传代培养
无限传 代
多数组织细胞固定在表面 生长和分裂。
几个有关概念：
原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为 原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内 的细胞称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配 制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的 培养瓶中继续培养，称为传代培养。
⑶设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂 置大于800勒克斯光照下培养，收集分化的 种细胞，方法： ⑷将杂种细胞培养成杂种植株依据的理论基础 细胞团 是 细胞的全能性 。 II．若该过程是制备治疗“SARS”病毒的单克隆抗体，A为 人B淋巴细胞（染色体组成为2A＋XX=46），B为鼠骨髓瘤 细胞（染色体组成为2A＋XX=40） ⑸用单克隆抗体制成“生物导弹”主要利用了抗体 的 抗体与抗原结合，发挥特异性免疫效应 特性。 ⑹A细胞来自于 非典患者 ，杂种细胞C共有 4 个 染色体组。 ⑺杂交瘤细胞在体外培养时与植物组织培养的主要区别是 培养基要用 液体 培养基。（物理状态），培养基中除 了添加必要的营养物质为还需加入 动物血清 。
培养目的
C ） 1.动物细胞工程技术的基础是（ A、动物细胞融合 B、胚胎移植 C、动物细胞培养 D、核移植 B ） 2.下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是（ A、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白 B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散 C、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中 D、培养至50代后的传代细胞称为细胞株
在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培 原代培养 养到第 10 代，到这时的培养称为_____________。 ⑷为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用胰蛋白酶 处理 然后配置成 细胞悬液 ，再分装。 ⑸在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡， 原因是细胞没有发生癌变
核移植技术和克隆动物
1. 概念：将动物的一个细胞的细胞核，移 入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其 重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎 最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 原理：动物体细胞核的全能性。 胚胎细胞核移植： 细胞分化程度低， 核移植 恢复全能性容易 体细胞核移植： 受体细胞：MⅡ期的 （难度高） 卵母细胞
3.下列关于动物细胞培养的叙述中，错误的是（ D ） A、用于培养的细胞大多取自胚胎或幼龄动物的器官或组 织 B、将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单 个细胞 C、在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离， 制成悬浮液 D、动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞会衰 老死亡
4.下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答： （1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自 幼龄动物或胚胎的组织或器官 ______________________。 （2）容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是 剪碎组织 ，然后用 胰蛋白 酶处理，这是为了使细胞 分散开来，这样做的目的是使细胞与培养液充分接触 （3）培养首先在B瓶中进行，瓶中的培养基成分有 葡萄糖、氨基酸、水、无机盐、促生长因子 _______________________________________等。 与微量元素和动物血清
2.过程：
取供体细胞 供体细胞培养 取卵母细胞 培养到 MⅡ中期
卵母细胞去核
供体细胞注入去核的卵母细胞 供体核进入受体卵母细胞 重组胚胎 代孕母牛 生出与供体遗传物质基本相同的个体
3.克隆动物的研究意义：
1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病，作为供体 4.保护濒危动物

细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长 停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到 40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长 停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变， 使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代 细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质 改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容 易传代培养。
5.下图为细胞融合的简略过程（只考虑两个细胞的融合） 请据图回答：
I．若A、B是基因型分别为rrHH、RRhh两个烟草品种细胞 的花粉，且这两对基因位于非同源染色体上，由于一对 隐性纯合基因(rr或hh) 的作用，在光照强度大于800勒 克斯时，都不能生长。 ⑴实验开始时必须用 纤维素酶和果胶酶 除去不利于原 生质体融合的物质。 ⑵实验中除获得杂种细胞外，还有基因型 为 rrHH、RRhh 的融合细胞。
1、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中1过 程注射的物质和A细胞的名称为 ( D )
A、抗体、T淋巴细胞 B、抗原、T淋巴细胞 C、抗体、B淋巴细胞 D、抗原、浆细胞
2、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是 D A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产 3、“生物导弹”是指 B A、单克隆抗体 B、带有特定药物的单克隆抗体 C、杂交细胞 D、B淋巴细胞 4.单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究 中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误 的是 C A．特异性强、灵敏度高 B．与抗癌药物结合可制成“生物导弹” C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 D．由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌
动物细胞融合
1.过程：
动物细胞 A
动物细胞 B 诱导，融合 （膜融合、质融合） 2个完整的 杂交细胞AB 有丝分裂 （核融合）
注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放 在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细 胞
2.意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 （种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 3.应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物 新品种培育等的重要手段 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体
3 .从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉 核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植 入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状 （ B ） A、难以预测 B、像甲 C、像乙 D、像丙 4.生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再 是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功 C “复生”野驴的方法是 （ ） A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分 化、再分化，培育成新个体 B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个 体 C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中， 经孕育培养成新个体 D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
5.下图所示为用两栖动物卵所做的实验图解，据图回答 下列问题：