04离体无性繁殖方法
04离体无性繁殖方法

在诱导不定芽时,通常采用细胞分裂素浓度高于生长素浓度的配比, 但在有些实验中也采用二者浓度比值接近于1的配比。较高水平的细 胞分裂素有利于诱导不定芽的形成,但是细胞分裂素浓度的增加也可 能引起形态上的异常,如在秋海棠中出现畸形叶。
4.2.3 影响茎芽增殖的因素
4.2.3.1 基本培养基
(1)MS基本培养基的盐分:对很多栽培植物来说,MS(1962)培养
基的无机盐可以产生令人满意的结果。同一种培养基常常既可用于培养的
起始,也可用于茎芽的增殖。不过对有些植物来说,MS培养基中的无机
盐水平或者有毒或者太高。例如乌饭树的茎芽在一种只含1/4强度MS无
机盐的培养基中就能长得很好,无机盐水平再高或是有毒或是并没什么好
效果。捕虫堇的叶片外植体甚至在半强度MS培养基无机盐中就会死亡。
因此对捕虫堇进行快繁时,盐的浓度必须减少到1/5。由此可见,倘若一
个物种在MS培养基标准配方的情况下不能存活,则应试验减少培养基中
的盐浓度,对于多数物种的快繁来说,MS培养基中的有机成分都是适当
4.2.2.3 通过增强腋芽生枝能力
当把小枝条放在一种含有适当种类和适当浓度细胞分裂素的培养基 (生长素或有或无)上培养时,则可增强腋芽生枝能力,使枝条的繁殖 系数显著提高。由于能连续得到细胞分裂素,原来存在于外植体(节 段或茎尖)上的芽所形成的枝条就会长出腋芽,这些腋芽又可以提前 直接发育成枝条。这个过程可以重复发生若干次,结果原来的外植体 就变成了一丛新枝,其中既有二级枝条,也有三级枝条,等等(图)。 在一次培养中,枝条的增殖数目虽然有限,之后腋芽生枝活动就停止 了,不过,此时若把这些小枝条切下来,放在成分相同的新鲜培养基 上,枝条的增殖又可重复发生。这个过程能够无限继续,周年保持。
植物离体快繁技术

6、移栽
• 炼苗后,将幼苗移栽入由蛭石组成的驯化 苗圃中驯化,每天定期给幼苗喷施驯化培 养液和清水,大约15-20d后,视幼苗长势, 即可移栽到苗圃中。
植物离体快繁技术
注意事项
• 芦荟的虫害主要是红蜘蛛和蚜虫,可喷施 40%的氧化乐果乳油1200倍液防治。
• 芦荟的病害主要是黑斑病,可喷施50%多菌 灵可湿性粉剂1000倍液防治。
伤组织诱导培养基的三角瓶中,在相同的 培养条件下继续培养。 • 通过继代培养,可繁殖出大量愈伤组织来, 用于分化培养。
植物离体快繁技术
3、分化培养
• 将愈伤组织用无菌水洗净,切成小块,接 种到分化培养基中。
• 30-50d后,愈伤组织就可分化出芽,并继 续长出小叶片。
植物离体快繁技术
4、生根培养
植物离体快繁技术
植物离体快繁技术
3、离体快繁的程序和技术关键
• 培养物的建立 • 茎芽的增殖 • 完整植株的形成 • 再生植株的锻炼和移植
植物离体快繁技术
(1)无菌外植体的制备方法
• 概念:在无菌条件下,用于试管内继代增殖的植 物材料,称为无菌外植体或繁殖外植体。
• 制备方法:田间取回嫩枝、消毒、接种、形成丛 芽
• 芦荟不能自花授粉结实,用种子繁殖非常 困难。
• 繁殖方法主要是分株和分蘖,难以快速、 大量地繁殖种苗
• 对芦荟茎尖进行组织培养快速繁殖试管苗, 可在短期内繁殖上百万株的种苗,成本低, 效益高
植物离体快繁技术
材料和培养基
• l0-l5cm高的芦荟幼苗 • 愈伤组织诱导培养基为MS+(1-
6mg/ )BA+(0.1一0.5mg/L)NAA • 分化培养基为MS+(2-4mg/L)BA+ (0.1-
植物快繁与脱毒培养

第一节 植物离体无性繁殖技术 第二节 植物脱病毒技术
有性繁殖 繁殖方式
无性繁殖
无融合生殖 营养繁殖
无融合生殖:在子房和胚珠内不经受精作用而以种子进行 繁殖的方式。
营养繁殖:由植物体的根、茎、叶等营养器官或某种特殊 组织产生新植株的生殖方式。广义上的无性繁殖。
无性系:指由同一个体通过无性繁殖产生的一个群体,它 们的遗传背景基本一致。
一种植物增殖的快慢,通常通过增殖(或繁殖) 速度或增殖倍数(或系数)来表示。
增殖速度(multiplication rate):即经一次
增殖培养或在一定时间段内由一个繁殖体所增殖获 得的总繁殖体数或苗数。
繁殖(或增殖)速度的计算
✓ Y=M ·Xn ✓ Y:年繁殖总数 ✓ M:起始繁殖的无菌母株数 ✓ X:每个培养周期增殖的倍数 ✓ n:全年可进行增殖培养的周期次数
又称快速无性繁殖或微繁殖、微体繁殖。 ▪ 试管苗:由离体无性繁殖获得的植株称试管苗。 ➢ 植物脱毒:利用植物组织培养技术,脱除植物细胞中侵染的
病毒,生产健康的繁殖材料。
植物离体无性繁殖的意义
起始材料少,生长周期短、繁殖速度“快”,每 年以数万倍乃至数百万倍的速度进行繁殖,不受 自然条件干扰,实现工厂化育苗;
3、体细胞胚(somatic embryo)型
特 点:
•最理想的繁殖方式,增殖系数高; •遗传相对稳定; •具有双极性结构,可以免去生根步骤; •有利于实行机械化操作。
目前只有少数植物能产生胚状体,再生植株有 返幼特性。
4、原球茎(protocorm)型
原球茎:兰花种子发芽过程中的一种形态学构造。 兰科植物的种子在萌发初期并不出现胚根,只是胚 逐渐膨大,以后种皮的一端破裂,膨大的胚呈小圆 锥状,称作原球茎。原球茎可以萌发形成具根芽的 完整小苗。
离体繁殖

二、微繁的器官发生方式
根据器官发生方式不同,将植物器官的再 生分为五种类型: 1、短枝发生型。 2、丛生芽发生型。 3、不定芽发生型。 4、胚状体发生型。 5、原球茎发生型。
1、短枝发生型
是指外植体携带的带叶茎段,在适宜的 培养环境中萌发,形成完整植株,再剪成 带叶茎段,继代再成苗的方法。
应作为一个指导原则。
器官分化的性质是由 这两种激素的相对浓度 决定的。当细胞分裂素/ 生长素比率较高时,可 促进茎芽的形成;当生 长素/细胞分裂素比率较 高时,有利于根的分化。
D.
在一种新的植物类型中,为了取得最高但又
安全的茎芽繁殖率,需要通过一系列的实验确定
其对细胞分裂素和生长素在种类和数量上的要求。
2、丛生芽发生型
是指外植体携带的顶芽或腋芽在适宜的培 养环境中不断发生腋芽而呈丛生状芽,将 单个芽转入生根培养基中,诱导生根成苗 的方法。
3、不定芽发生型
是指外植体在适宜的培养基和培养条件下, 经过脱分化形成愈伤组织,然后经过再分 化诱导愈伤组织产生不定芽;或外植体不 形成愈伤组织而直接从表面形成不定芽, 将芽苗转移到生根培养基中,经培养 获得完整植株的繁殖方法。
(3). 增强腋芽生枝能力
A. 腋芽存在于每个叶片的叶腋中,每个腋芽都有
发育成1个枝条的能力。在具有很强顶端优势的物
种中,要刺激顶芽下面的腋芽长成枝条,必需打
掉或伤害顶芽。这种顶端优势现象是由几种生长
调节物质的互作控制的。
B.
在腋芽上施用细胞分
裂素可以克服顶端优势效
应,并在顶芽存在的情况 下刺激侧芽生长,但这种 效应只是暂时的。当这种 外源生长调节物质减少时,
一、引言
1、离体繁殖的概念: 植物离体繁殖(Propagation in vitro) 又称植物快繁或微繁,是指利用植物组 织培养技术对外植体进行培养,使其短 期内获得遗传性一致的大量再生植株的 方法。
动物的无性繁殖方式与特点

动物的无性繁殖方式与特点动物繁殖方式可以分为两种:有性繁殖和无性繁殖。
有性繁殖是指通过两个个体的交配或者配子的融合来产生新的个体,而无性繁殖则是指个体通过自身的分裂或者繁殖细胞的形成,产生与其亲代相同的新个体。
在自然界中,无性繁殖在某些动物群体中十分常见。
本文将介绍动物的无性繁殖方式以及它们的特点。
1. 分裂繁殖分裂繁殖是指个体通过自身的分裂产生新的个体。
这种繁殖方式可以进一步分为二分裂、多分裂以及不完全分裂。
首先,二分裂是最简单的一种无性繁殖方式,它发生在某些原生动物、浮游生物和一些节肢动物等。
在二分裂过程中,个体逐渐分离为两个完全相同的个体,每个个体保留亲代的全部遗传信息。
其次,多分裂是指一个个体分裂成多个部分,每个部分都可以长成完整的个体。
这种方式可以见于某些涡虫、水蚤和刺盘动物等。
不同于二分裂,多分裂中的每个个体并不完全相同,存在一定的差异。
最后,不完全分裂是指个体分裂的过程中,有一部分细胞未能完全分离而结合在一起。
这种方式主要在珊瑚、海绵和某些海藻中发现。
不完全分裂使得新个体之间具有一定的关联性,共同形成一个群体。
2. 减数分裂减数分裂是无性繁殖的另一种方式,它发生在某些动物的生殖细胞中。
减数分裂与有性繁殖过程中的减数分裂相似。
在这种情况下,个体通过减数分裂产生细胞,这些细胞中的染色体数量只有亲代的一半。
产生的细胞称为配子或者生殖细胞,它们在结合后形成新的个体。
3. 芽生殖芽生殖是指个体在自身上产生新的个体。
这种繁殖方式主要可见于某些腔肠动物、水螅和植物等。
在芽生殖中,个体通过产生一个突出的小结构或者分枝,从而形成一个与亲代相似的新个体。
新个体逐渐发育独立,然后与亲代分离。
4. 子代代表子代代表是一种特殊的无性繁殖方式,主要见于某些微小动物,如水熊虫和蛭虫。
在这种方式中,每个个体都可以通过后代的无性繁殖产生多个新个体,这些新个体代表原个体的全部遗传信息。
总结起来,动物的无性繁殖方式具有多样性和适应性。
无性繁殖法离体培养和植株再生技术在花卉繁殖中的应用

无性繁殖法离体培养和植株再生技术在花卉繁殖中的应用花卉繁殖一直以来都是园艺研究领域中的重要课题,无性繁殖法离体培养和植株再生技术是一种新兴的繁殖方法,已经在花卉繁殖中得到了广泛的应用。
本文将从离体培养和植株再生技术的原理、应用案例以及未来发展前景三个方面探讨无性繁殖法在花卉繁殖中的重要作用。
一、离体培养和植株再生技术的原理离体培养和植株再生技术是通过体细胞或组织的离体培养,使其在适宜的培养基中进行生长和分化,最终生成完整的植株。
其基本原理是利用植物个体的细胞分裂和再分化能力来实现对花卉的无性繁殖。
通过提取花叶等植物组织的细胞或组织,并将其置于含有营养物质的培养基中,培养基中的激素和营养物质能够促进细胞的分裂和生长,最终形成完整的花卉植株。
二、无性繁殖法离体培养和植株再生技术在花卉繁殖中的应用案例1.百合的离体培养和植株再生百合作为一种重要的花卉品种,其离体培养和植株再生技术的应用已经取得了显著的成果。
研究人员通过收集百合的子茎和花粉,经过一系列的处理和培养,成功实现了百合的离体培养和植株再生。
这项技术不仅可以缩短繁殖周期,还能够实现对百合的育种和新品种的培育。
2.玫瑰的离体培养和植株再生玫瑰作为经济价值较高的花卉品种,其离体培养和植株再生技术的应用也得到了广泛关注。
研究人员通过培养玫瑰的茎段和叶片,利用培养基中的适宜激素和营养成分,成功培养出了完整的玫瑰植株。
这项技术不仅可以大规模快速繁殖玫瑰,还可以实现对玫瑰品质和性状的改良。
三、无性繁殖法离体培养和植株再生技术的发展前景当前,无性繁殖法离体培养和植株再生技术在花卉繁殖领域中的应用仍然存在一些挑战和问题,比如技术操作复杂、繁殖效率不高等。
然而,随着技术的不断进步和创新,无性繁殖法离体培养和植株再生技术在花卉繁殖中的应用前景仍然十分广阔。
首先,离体培养和植株再生技术可以实现对花卉的品种改良,可以通过培养基中激素的调配和处理方法的优化,培育出更多优质、高产的品种。
植物的体外生殖与无性繁殖

细胞培养技术
原生质体培养
通过酶解法去除植物细胞壁,获得具有生命力的原生质体,再进行培养使其分裂和增殖 ,用于细胞遗传和生理研究。
单细胞培养
利用单个植物细胞进行培养,使其分裂和增殖形成细胞团或愈伤组织,进而分化出不定 芽和根。
细胞悬浮培养与固定化细胞培养
将植物细胞在液体培养基中进行悬浮培养或利用固定化技术将细胞固定在特定载体上进 行培养,实现次生代谢产物的规模化生产。
植物的体外生殖与无 性繁殖
汇报人:XX 2024-01-31
目 录
• 体外生殖概述 • 无性繁殖概述 • 体外生殖与无性繁殖比较 • 体外生殖技术应用 • 无性繁殖技术应用 • 影响体外生殖与无性繁殖因素 • 体外生殖与无性繁殖在农业生产中应用 • 展望与未来发展趋势
01
体外生殖概述
定义与特点
对未来农业生产影响
提高农业生产效率
通过体外生殖和无性繁殖技术,可以快速繁殖优质植物品 种,提高农业生产效率和质量。
促进农业可持续发 展
这些技术有助于保护濒危植物物种、减少化肥和农药的使 用量,促进农业可持续发展。
推动农业科技创新
体外生殖和无性繁殖技术的发展将推动农业科技创新和产 业升级,为现代农业发展注入新动力。
04
体外生殖技术应用
组织培养技术
愈伤组织诱导
通过切割、针刺等方法处理植物 组织,诱导其产生愈伤组织,进 而分化出不定芽和根,形成完整
植株。
悬浮细胞培养
将植物细胞或组织在液体培养基中 进行悬浮培养,使其快速增殖并保 持未分化状态,可用于次生代谢产 物生产等。
胚状体培养
利用植物体细胞的全能性,通过特 定培养条件诱导其形成类似合子的 胚状体结构,进而发育成完整植株 。
第十一章植物离体无性繁殖

第十一章植物离体无性繁殖1植物离体无性繁殖的概念和特点植物有两种基本生殖方式:有性生殖和无性生殖.有性生殖是经过雌、雄性细胞融合而发育成合子胚或种子,并用种子繁殖后代的,如小麦、水稻、玉米等的繁殖。
无性生殖是不经过雌、雄性细胞融合而直接用营养体细胞繁殖后代,如甘蔗、甘薯、土豆等的繁殖。
由于很多的植物是高度杂合的,如大多数果树和观赏植物、甘蔗、甘薯、马铃薯等,因此它们的种子后代不可能与原种完全相同.只有由无性繁殖产生的植株,在遗传上才能与其亲本植物完全相同,从而可使品种的特性代代相传。
一个品种通过无性繁殖可产生在遗传上等同的多个拷贝,其中由一个个体通过无性繁殖产生的一个群体称为一个无性系(克隆)。
在自然界中,无性繁殖的途径有二种:一是无融合生殖,即不经过减数分裂和受精而形成种子;二是营养繁殖,即由母株的营养体部分再生出新的植株。
无融合生殖是指被子植物未经受精的卵或胚珠内某些细胞直接发育成胚的现象。
它不经过雌、雄性细胞融合而直接由营养体细胞或卵细胞发育成无性胚或无性种子。
包括:(1)孤雌生殖。
卵细胞不经受精直接发育成胚的现象。
孤雌生殖有两种类型:一种是由经过减数分裂的胚囊中的单倍体卵细胞发育成胚,这样的胚长成的植物体为单倍体,不能产生后代。
这种类型在自然界罕见。
另一种是由未经减数分裂的胚囊中的二倍体卵细胞发育成胚.如蒲公英。
(2)无配子生殖。
由胚囊内卵细胞以外的非生殖性细胞,如助细胞、反足细胞或极核等直接发育成胚的现象。
见于韭、含羞草、鸢尾等植物。
(3)无孢子生殖.由珠心或珠被细胞直接发育成胚的现象。
见于柑桔属、高粱属等植物。
由于无融合生殖只发生在少数几个物种,因此,人们一直采用营养繁殖的方法对入选品种进行无性繁殖。
有些栽培植物,例如香蕉、葡萄、无花果、矮牵牛和菊花等的某些品种,很少产生或不产生有生活力的种子,所以营养繁殖是惟一的繁殖方法。
作为植物营养繁殖的一个新手段,植物组织培养技术现正日益普及。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
4.2.1.2 消毒
(3)切取外植体时植物的生理状态,对于芽的反应能力有明显的影 响。在生长季开始时由活跃生长的枝条上切取的外植体,通常能产生 最好的效果。若把供体植株种在温室或生长箱中,使它们保持在连续 进行营养生长所需的光照和温度条件下,有可能把茎芽对培养反应的 季节性波动减少到最低限度。
(4)对于需要低温、高温或特殊的光周期才能打破休眠的鳞茎、球 茎、块茎和其他器官,应当在取芽之前进行必要的处理。由经过11℃ 冷处理6~8周的水仙鳞茎上切取的茎尖,比由未经处理的鳞茎上切取 的茎尖在离体培养中生长快,存活率高。
于包在很多成熟叶片中的茎尖或是鳞茎中央的鳞片来说,只要把芽或
鳞茎用70%酒精擦拭消毒,并小心地剥掉外层结构,解剖出来即是无
菌的。用自来水把植物材料冲洗20一30min,可以显著减少微生物区
系的群
茎芽增殖是快繁的关键时期,快繁的失败多数都是在这个时期发 生的。概括地说,茎芽的离体增殖,除了兰花所特有的原球茎途径之 外,有以下4个途径。
(2)不同植物的外植体具有不同的繁殖能力。根据一般经验,茎尖 以下的较老节段对于杀菌剂毒性的忍耐力比顶端要强得多,不过, Miller和Murashige(1976)在铁树和龙血树的培养中使用的是顶芽, 这是因为侧芽不能产生可供再培养的枝条。在花椰菜的无性繁殖中, Crisp和Walkey(1974)使用了尚未展开的花序的切段,它们含有大量 的分生组织,这些分生组织在培养中能回复为营养芽,并形成带叶片 的枝条。在对根状茎植物如草莓等进行离体无性繁殖时,通常是使用 匍匐枝的茎尖。
无融合生殖只发生在少数几个物种,因此,园艺家一直采用营养繁 殖的方法对入选品种进行无性繁殖。有些栽培植物,例如香蕉、葡萄、 无花果、菊花等的某些品种,很少产生或不产生有生活力的种子,所 以营养繁殖是惟一的繁殖方法。和有性生殖相比,营养繁殖的其他优 点是:①在种子休眠期很长的植物中,营养繁殖可能比种子繁殖速度 快;②在某些品种的实生苗中,常会出现一个没有实效的幼年期,而 在用营养繁殖方法由成年材料产生的植株中,不存在这样的幼年期。
作为植物营养繁殖的一个新手段,组织培养技术现正日益普及。这 种通过无菌方法进行的无性繁殖(现在通称为“快繁”)和常规方法相 比最显著的优点是:它可以用较短的时间和较少的空间,由一个个体 开始产生大量的植株。
4.2 离体无性繁殖的一般方法
商业上进行无性繁殖的整个过程分为4个不同的阶段,各阶段的主 要任务是:阶段Ⅰ,无菌培养物的建立;阶段Ⅱ,茎芽的增殖;阶段 Ⅲ,离体形成的枝条的生根;阶段Ⅳ,植株的移栽。以上4个阶段中 前3个都是在无菌条件下进行的,第4个则是在温室环境中完成的。
4.2.3.2 植物激素 由前所述可知,器官分化的性质是由这两种激素的相对浓度决定的。
当细胞分裂素对生长素的比率较高时,可促进茎芽的形成;当生长素 对细胞分裂素的比率较高时,有利于根的分化。但这并不意味着为了 促进不定芽形成或腋芽生枝,必须把这两种激素都包括在培养基中。 对外源激素的要求取决于在该植物系统中内源激素的水平,而内源激 素的水平随组织、植物类型和植物的生长时期而变化。因此,为了进 行茎芽的增殖,培养基中并不一定非加生长素不可,在若干情况下, 单独一种细胞分裂素即足以很好地促成茎芽的增殖。 在接手一种新的植物材料时,为了取得最高但又安全的繁殖效率, 需要通过一系列的实验确定它们对细胞分裂素和生长素在种类和数量 上的要求。在离体繁殖中可以使用各种细胞分裂素,不过对现有文献 的广泛比较表明,BAP(苄氨基嘌呤)是最有用和最可靠的(也是最便宜 的)细胞分裂素,其次是KT和2iP,因而在建立一个新的培养系统时, 首先应当试验BAP的效果。玉米素因为太贵,一般不愿使用。细胞分 裂素的使用浓度通常为0.1~10mg/L。 在各种生长素中,IAA最不稳定,因此在培养基中最好使用合成生 长素如NAA或IBA。由于2,4-D很容易引起愈伤组织的形成,因此当 要通过腋芽生枝或不定芽发育进行离体繁殖时,应当避免使用2,4-D。 不过对于体细胞胚胎发生来说,2,4-D是最重要的生长素(见第4章)。 生长素的用量范围一般是0.1~1 mg/L。
在诱导不定芽时,通常采用细胞分裂素浓度高于生长素浓度的配比, 但在有些实验中也采用二者浓度比值接近于1的配比。较高水平的细 胞分裂素有利于诱导不定芽的形成,但是细胞分裂素浓度的增加也可 能引起形态上的异常,如在秋海棠中出现畸形叶。
4.2.3 影响茎芽增殖的因素
4.2.3.1 基本培养基
(1)MS基本培养基的盐分:对很多栽培植物来说,MS(1962)培养
基的无机盐可以产生令人满意的结果。同一种培养基常常既可用于培养的
起始,也可用于茎芽的增殖。不过对有些植物来说,MS培养基中的无机
盐水平或者有毒或者太高。例如乌饭树的茎芽在一种只含1/4强度MS无
后来,Debergh和Maene(1981)建议,在阶段Ⅰ之前再加上一个 阶段0,其间要把供体植株在仔细监控的环境条件下栽种至少3个月, 保持较低的环境湿度,用软管或滴灌法灌溉,并且要采取措施减少供 体植株的表面污染和内生菌污染。
4.2.1 培养物的建立
4.2.1.1 外植体
(1)离体外植体的性质决定繁殖结果。例如,为了增加腋芽生枝的 数目,就应当使用带有营养芽的外植体。为了由受感染的个体生产脱 毒植株,就必须使用不足1mm长的茎尖做外植体。不过,倘若母株 是无毒的,或是不需要脱毒,最适用的外植体则是带节的插条。这是 因为,小的茎尖外植体不但存活率不高,初期生长很慢,而且还潜伏 着使某些由病毒造成的特殊园艺性状消失的危险,如天竺葵品种“鳄 鱼”的透明叶脉就属于这种性状。
的。
(2)固体与液体培养基:由于半固体培养基容易使用和保存,快繁所 用的培养基通常都用0.6%~0.8%的琼脂固化。不过在有些植物中,使用 液体培养基对于组织的存活可能是个关键。例如,在卡特兰和大多数凤梨 科植物中,只有在液体培养基中才能把培养建立起来。在大瓶草 (Cephalotusfollicularis)中,液体培养基的效果与半固体培养基相同,有 时甚至更好。应用液体振荡培养的一个特殊优点是茎芽一边增殖一边彼此 离散,不必像使用固体培养基那样必须人工把成簇的茎芽切开。
一般来说,第1.3.2节中所介绍的植物组织和器官无菌培养的标 准方法,应当足以保证培养物的无菌性。
在对优良树种进行无性繁殖的时候,通常必须由生长在田间的材 料上切取外植体,因此需要特别当心。在这种情况下,理想的办法是 先由人选的植株上切取插条,然后把它们种在温室中。
对于插枝难于生根的物种,应把树上正在生长着的枝条松松地套
机盐的培养基中就能长得很好,无机盐水平再高或是有毒或是并没什么好
效果。捕虫堇的叶片外植体甚至在半强度MS培养基无机盐中就会死亡。
因此对捕虫堇进行快繁时,盐的浓度必须减少到1/5。由此可见,倘若一
个物种在MS培养基标准配方的情况下不能存活,则应试验减少培养基中
的盐浓度,对于多数物种的快繁来说,MS培养基中的有机成分都是适当
4.离体无性繁殖方法
4.1 引言
由于大多数果树和观赏植物都是高度杂合的,因此它们的种子后代 不可能与原种完全相同。只有由无性繁殖产生的植株,在遗传上才能 与其亲本植物完全相同,从而可使品种的特性代代相传。一个品种通 过无性繁殖可产生在遗传上等同的多个拷贝,其中由一个个体通过无 性繁殖产生的一个群体称为一个无性系(克隆)。在自然界中,无性繁 殖的途径有二:一是无融合生殖,即不经过减数分裂和受精而形成种 子,二是营养繁殖,即由母株的营养体部分再生出新的植株。
(5)在通过形成不定芽进行快繁的时候,无论是否要经历愈伤组织 阶段,都可用根段、茎段、珠心、叶片或花瓣等已分化组织做外植体。 对于用做外植体源的器官的选择,是由其天然形成不定芽的能力决定 的。在单子叶植物中,叶和鳞片的分生组织处在近基部一端,在那里 它们与基板(basalplate)连在一起。若以叶片基部和鳞片基部做外植 体,其中必然包含有一小段基板。
4.2.2.2 通过不定芽形成 若干种植物在活体的情况下即能由不同的器官产生不定芽:根(福禄考
属植物、苹果的某些无性系、悬钩子属植物),鳞茎(风信子——基部受伤 以后)和叶(秋海棠、天竺葵等)。在很多栽培植物中,通过由根(黑莓、木 莓)或叶(秋海棠、青锁龙、草胡椒等)形成不定芽进行营养繁殖是一个标准 的园艺方法。然而在培养的条件下,这些植物产生不定芽的频率可以显著 提高。例如在秋海棠中,一般情况下芽只是沿着切口形成,但在含有BAP 的培养基中,形成的芽如此之多,以致整个外植体表面都被芽所覆盖。据 Takayama和Misawa(1982)报道,在用离体方法大量繁殖一种秋海棠杂 种时,由幼叶的一个7mmX 7 mm切段在一年中产生了1014个植株。 通过培养基中适当配比的激素的影响,就是那些在正常情况下不能进行 营养繁殖的植物,如芸苔属植物、除虫菊、亚麻以及番茄等,也能由叶段 和茎段上长出不定芽来。 某些蕨类植物在离体条件下产生不定芽的能力十分惊人。例如,若把骨 碎补(DavaUia)和鹿角蕨(Platycerium)放在无菌搅拌器中粉碎之后,由它 们的组织碎片就能够产生大量的新植株。 很多有特化贮藏器官的单子叶植物也具有强大的产生不定芽的能力。据 报道,当培养在无激素培养基上时,由风信子和虎眼万年青的几乎每一种 器官,都能长出很多不定芽来。
在一个聚乙烯袋中,此后长出的新枝,由于不带风媒污染物,即可用
来进行培养。或者是把由田间采回来的枝条在室内遮光水培,进行黄
化预处理,然后,消毒接种。
在准备外植体的时候,弃去植物材料的表面组织,也能减少由于