弧菌
弧菌检验流程
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为了确保食品安全，需要进行弧菌检验。
弧菌的鉴定要点
弧菌是一类以弧状细菌形态为特征的微生物，其中最熟知的是弧菌属（Vibrio）和弧菌弯曲菌属（Campylobacter）。
下面是进行弧菌鉴定时的一些要点：形态特征：弧菌通常呈弧状或弯曲的形态，有时也会呈直杆状。
它们是革兰氏阴性菌，通常具有单一的极少鞭毛。
营养需求：弧菌属通常是好氧菌，需要氧气进行生长。
它们多数是嗜盐菌，喜欢在高盐浓度的环境中生长。
生理特征：弧菌通常是好氧发酵菌，能够利用多种碳源进行生长。
它们具有强烈的细胞外酶活性，可以产生一些特殊的酶，如溶血素、黏附素等。
生物化学试验：进行弧菌鉴定时，可以使用一系列生物化学试验，如氧化/发酵碳水化合物试验、氧化酶试验、羟基酸氧化试验等。
分子生物学方法：近年来，分子生物学方法在微生物鉴定中得到广泛应用。
可以使用PCR或基因测序等技术，通过特定基因的序列分析来确定是否为弧菌，并进一步确定其种属。
需要注意的是，弧菌具有多样性和复杂性，在鉴定时可能会遇到一些挑战。
因此，建议在进行弧菌鉴定时结合多种方法与技术，以提高准确性和可靠性。
致病性弧菌
古典生物型（Classical biotype） 埃尔托生物型（EL-Torbio-type）。
一、生物学性状
1、形态与染色
革兰染色阴性；弧性或逗点状；在病人“米泔水” 样便中呈“鱼群”样排列；
有一根单鞭毛，运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流 星状，
有菌毛和性菌毛，0139群有荚膜。
致病性弧菌
弧菌属（Vibrio）
弧菌属，为一大群菌体短小、弯曲成弧形的 革兰阴性菌
主要特点
有单鞭毛，运动活泼 培养要求为碱性环境 自然界广泛分布，以水中最多 只要有霍乱弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌
一、霍乱弧菌
霍乱主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水，死亡率 甚高。属于国际检疫的烈性传染病。
诊断
标本采集：患者粪便、肛拭或剩余食物 分离培养：SS琼脂平板或嗜盐菌选择平板 嗜盐性试验与生化反应 诊断血清进行鉴定
防治
治疗可用抗菌药物 严重病例需输液和补充电解质
抵抗力
El Tor生物型和其它非01群霍乱弧菌 在外环境中的生存力较古典型为强
不耐酸，在正常胃酸中仅能存活4分钟 水中存活长，河水、井水、海水中1-3周 怕热，100℃1-2分钟死亡
致病物质
ToxR蛋白调控的ctxA、ctxB、tcp、zot、ace等基 因
不受ToxR蛋白调控的毒力因子基因hlyA和hap
生化反应：
过氧化氢酶、氧化酶阳性 发酵多种糖类，产酸不产气 还原亚硝酸盐，吲哚反应阳性 霍乱红反应阳性，不同生物型生化反应不同 （当培养在含硝酸盐及色氨酸的培养基中，产生靛基质与亚硝
酸盐，在浓硫酸存在时，生成红色，称为霍乱红反应）
抗原的构造与分群
有不耐热H抗原和耐热的O抗原。
弧菌
分 类
WHO腹泻控制中心将该菌属为四类
O-1群霍乱弧菌
不典型O-1群霍乱弧菌
非O-1群霍乱弧菌
其他弧菌
致病性
致病物质
定居因子：菌毛（acf、tcpA基因）、鞭 毛、溶血溶细胞蛋白（hlyA基因）、血 凝素（hap基因）、荚膜等 霍乱肠毒素（c为强烈的致泻毒素。
鉴定
根据霍或乱弧菌在各种选择培养基上的特点， 挑选可疑菌落进行鉴定。鉴定以血清学（玻 片凝集）为主，结合形态学、生化反应作出 判断。
鉴定
1） 玻片凝集试验：从分离培养基上挑取可疑菌落于霍乱弧菌 多价诊断血清作玻片凝集试验。诊断血清应稀释成1:321:64的效价使用，立即出现凝集者为阳性，同时设生理盐水
和阳性细菌株对照。
2） 形态学检查：取纯培养物涂片革兰氏染色，观察菌体形态 及染色性。用悬滴法或半固体穿刺法检测动力。
鉴定
3） 生化反应：霍乱弧菌氧化酶试验、靛基质试验、粘丝试验 和霍乱红试验均阳性。 ①粘丝试验：用于测定霍乱弧菌形成粘丝的特性。将0.5％去氧 胆酸钠水溶液于霍乱弧菌混匀制成浓厚菌液，1min内悬液由 混变清，并变得粘稠，以接种环挑取时可以拉出丝来。霍乱 弧菌古典生物型和El Tor生物型均呈阳性。
鉴定
② 霍乱红试验：出现蔷薇色，为霍乱红试验阳性。由
于霍乱弧菌和其他弧菌均有此种反应，故无特异性。 霍乱弧菌含有色氨酸酶，能分解色氨酸产生吲哚，霍 乱弧菌液能还原硝酸盐为亚硝酸盐，因此当霍乱弧菌 培养在含有硝酸盐成分的蛋白胨水中，所产生的亚硝 酸盐可与吲哚结合成亚硝酸吲哚，滴加浓硫酸即可出 现蔷薇色，称为霍乱红试验阳性）
免 疫 力
病后免疫力不强，可重复感染。
生物学性状
1、形态：弧状、杆状、丝状等多形性，G-，单端单鞭毛
微生物学沙门菌弧菌
微生物学沙门菌弧菌弧菌的简介弧菌是一类革兰氏阴性菌，属于海洋菌类，是寄生于鱼类，贝类等海洋生物体表或是海洋底层沉积物中的一种细菌。
弧菌通常具有单枝鞭毛，使其能够在水中活动。
其中，人体中最为常见的一种弧菌便是弧形菌(Vibrio cholerae)，它是霍乱病的病原体。
沙门菌的简介沙门菌是一类革兰氏阴性菌，属于Enterobacteriaceae科，通常寄生于肠道中的动物，引发了许多肠道感染。
沙门氏菌( Salmonella typhimurium) 是沙门菌中最为常见的一种，它常引起人类和动物的食物中毒症状。
沙门菌与弧菌的区别沙门菌与弧菌有很多区别，前者多在动植物肠道中寄生，而后者多生活在海洋中。
沙门菌通常侵入宿主细胞后在其中繁殖，并在细胞内形成小包泡，进而引起炎症反应，而弧菌则以单细胞的形式感染人体。
另外，沙门菌可引起腹泻、腹痛等肠胃症状，而弧菌则引起霍乱等疾病。
沙门菌与弧菌的共性沙门菌和弧菌也有一些共性，两者都是革兰氏阴性菌，具有相同的细胞形态和菌株生长特性，同时也都有一定的耐受性和适应性，能够在极端环境中存活和繁殖。
沙门菌弧菌对人类的影响沙门菌和弧菌对人类的影响非常大，它们不仅可以引起肠胃疾病，甚至还可以导致霍乱等严重疾病。
除此之外，它们还可以引起食物中毒，危害人类健康，对人民的健康造成了威胁。
为了预防和控制沙门菌和弧菌的疾病，我们应该保持个人卫生，并避免食用生的或未煮熟的食物。
在饮水方面，我们应该采用安全的饮用水源，避免通过污染的水或食物传播病原体。
对于已经感染上沙门菌或弧菌的患者，应该及时就诊，进行治疗和隔离，以防止传播给其他人。
沙门菌和弧菌是非常危险的细菌，对人类健康造成了严重的威胁，我们应该采取积极的措施来预防和控制它们的传播。
弧菌属 (Vibrio)
致病性
❖ O1群致病物质
▪ 霍乱肠毒素（A亚单位 + 5个B亚单位） ▪ 鞭毛、菌毛及其他毒力因子
• 靠鞭毛运动，穿过粘液层 • 粘附于肠壁上皮细胞刷状缘的微绒毛上
❖ O139群致病物质
▪ 荚膜多糖 ▪ 特殊LPS毒性决定簇
霍乱肠毒素（cholera toxin）
▪ 强烈的致泻作用
▪ 为聚合蛋白，由 1个A亚单 位和5个B亚单位以共价键结 合
• A1为毒性部分,A2为连接 部分
• B是结合部分，与小肠粘 膜上皮细胞膜受体（神经 节苷脂GMI）结合
霍乱肠毒素的作用机制
所致疾病----霍乱
烈性传染病,我国定为甲类法定传染病
❖ 人是霍乱弧菌的唯一易感者,传染源:患者/带菌者 ❖ 传播途径：通过污染的水源或食物经口感染 ❖ 临床表现：突然发病,首先剧烈腹泻,继以呕吐,可有米
微生物学检查法
对首例病人应快速准确诊断，并及时报告，迅速采取防治 措施，扑灭疫情。
▪ 直接镜检 • G-弧菌 • 取米泔水样粪便作悬滴法观察动力
▪ 分离培养 pH8.0-9.0的碱性蛋白胨水增菌, 选择培养基
生化反应及玻片凝集实验 ▪ 快速诊断法
荧光菌球法 协同凝集试验
防治原则
预防：①菌苗 ②疫区管理，注意饮食卫生
非O1和非O139霍乱弧菌血清 群
副溶血性弧菌
胃肠炎 胃肠炎，肠道外感染
其他：拟态弧菌、创伤弧菌、 食物中毒，创伤感染和败血症 霍利斯弧菌、河弧菌
霍乱弧菌 （V. cholerae）
❖ 流行情况 ❖ 生物学特性
▪ 革兰阴性 ▪ 弧形或逗点状 ▪ 菌体单端有一根鞭毛，运动活泼。
•直接染色镜检，可见排列如“鱼群”状； •悬滴观察，可见穿梭运动 ▪ 兼性厌氧,营养要求不高 ▪ 耐碱不耐酸，碱性环境生长良好 （碱性蛋白胨水pH8.8-9.0，选择培养基）
弧菌
一、生物学特性 (一)形态与染色 G-弧菌,逗点状,一根鞭毛, 有菌毛。病人粪便作悬滴标 本,可见"鱼群样穿梭"。无芽 胞,无荚膜。
(二)培养特性 生长较快,怕酸嗜碱。在pH8.5-9.5的碱 性蛋白胨水中生长良好。 (三)抵抗力 较弱。耐低温,耐碱,不耐酸。 (四)抗原结构 O(菌体)抗原:特异性高,有139个血清群 H(鞭毛)抗原:类属抗原 二、致病性与免疫性 (一)致病物质 1. 鞭毛与菌毛 2. 内毒素 3. 外毒素─霍乱肠毒素(蛋白质)
第10章 弧菌属(Vibriol)
霍乱弧菌(Vibrio cholerae)
真霍乱各次世界性大流行的年份及地区
───────────────────────────── 流行时期 流 行 地 区 大流行次数 (历时年数) 亚洲 非洲 欧洲 南美洲 北美洲 大洋洲 ───────────────────────────── 第1次 1817-23(6) +++ ++ ++ 第2次 1826-37(11) +++ +++ +++ +++ +++ ++ 第3次 1846-62(16) +++ +++ +++ +++ +++ 第4次 1864-75(11) +++ +++ +++ +++ +++ 第5次 1883-87(4) +++ +++ +++ +++ 第6次 1892-1925(33)+++ +++ ++ ++ ─────────────────────────────
弧菌超标标准
弧菌超标标准
弧菌超标标准因不同的环境和应用场景而异。
一般来说，弧菌超标是指弧菌数量超过了正常水平，可能会对环境和人体健康造成负面影响。
以下是弧菌超标标准的详细介绍：
海水养殖虾塘：弧菌数量应该低于103个/ml。
如果弧菌数量超过这个标准，可能会对虾类等水生生物造成病害，导致养殖失败和经济损失。
淡水养殖虾塘：弧菌数量应该低于104个/ml。
如果弧菌数量超过这个标准，可能会对淡水生物造成病害，导致养殖失败和经济损失。
人体健康：弧菌是一种常见的食源性致病菌，如果摄入过量可能会引起食物中毒、腹泻等疾病。
因此，在食品生产和加工过程中，需要控制弧菌的数量，确保食品安全。
环境污染：弧菌可以在水体中存活和繁殖，如果水体中弧菌数量超标，可能会对水生生物和人类健康造成威胁。
因此，在环境保护和水质监测中，需要检测和控制弧菌的数量。
总之，弧菌超标标准是根据不同的环境和应用场景而定的。
在养殖、食品加工、环保等领域中，需要严格控制弧菌的数量，以确保生产安全和人体健康。
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弧菌
一、弧菌是菌体短小，弯曲成弧形，尾部带一鞭毛的革兰
氏阴性菌
主要对虾致菌为：溶藻弧菌、鳗弧菌、副溶血弧菌、
哈维氏弧菌、鳗弧菌、霍乱弧菌等
弧菌适应温度10-35度，最适25度左右，弧菌在半咸
水和海水中很多，但淡水中少。
这也是淡水养殖对虾，弧
菌病发病率低，养殖成功率较高的原因。
弧菌的繁殖速度随着盐度的增加和温度的增加而加快。
二、在对虾养殖中，我们经常使用弧菌培养皿来测试弧菌
的种类和数量。
这就有我们常说的黄弧菌、绿弧菌。
绿弧菌：副溶血弧菌、河流弧菌
黄弧菌：溶藻弧菌、霍乱弧菌、哈维氏弧菌、鳗弧菌三、各种弧菌有什么危害呢？
大名鼎鼎的EMS，很多研究表明，副溶血弧菌是凶手。
溶藻弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌会引起红腿红尾等初
期症状，继而出现肠炎和肝发红、肿大或萎缩，严重的引
起菌血症“红体病“。
感染哈维氏弧菌：频死或死亡的幼体会发荧光。
成体
发病先是头胸部、腹部的腹面发荧光，严重时全身发光。
霍乱弧菌会引起瞎眼。
四、弧菌的感染途径主要是经口传播，其次是通过体表创
伤和腮进入体内。
五、水中弧菌防控，主要靠三点。
1、消毒，比如说我们的“弧菌杀“泼水可以安全有效杀灭弧菌。
消毒作用快，是处理弧菌超标时使用的一种好方法。
2、蛭弧菌，以菌吃菌，预防用。
3、以菌制菌，研究表明，当环境中的弧菌数量超过理论阀值，但水体中总异养菌的数量达到弧菌数量的30倍以上，对虾仍是安全的。
定期泼”金牌芽孢“、”护肠活水多效菌“等有益菌，有益菌从数量上抑制弧菌发病。
六对虾体内弧菌的控制。
有3种方法。
1、控制水环的弧菌。
对虾的消化道与水体相同，
水体的微生物组成直接影响对虾消化道的菌相
组成。
所以水环境中弧菌数量少，就可以有效
预防消化道弧菌感染。
这就是水体泼“弧菌杀
“的主要意义。
2、常伴乳酸菌或”护肠活水多效菌“，使其在肠
道形成优势种群，粘附在肠道表皮形成生物屏
障，使弧菌不易粘到肠壁上，避免感染。
3、抗生素和中草药。