青海省部分地区藏獒及草地鼠类弓形虫抗体间接血凝试验检测

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犬弓形虫病的临床症状、实验室诊断、类症鉴别及防治措施

犬弓形虫病的临床症状、实验室诊断、类症鉴别及防治措施作者：刘春雨来源：《现代畜牧科技》 2017年第12期摘要：弓形虫病也叫做弓浆虫病、弓形体病，是由于感染刚地弓形虫而导致的一种人畜共患原虫病。

犬感染该病后通常呈现隐性感染，只有机体免疫力降低时才会出现发病。

病犬主要临床症状是高热稽留、食欲不振、呕吐、呼吸困难、眼鼻存在脓性分泌物、血性下痢以及体表淋巴结肿大等，最终由于败血症死亡。

关键词：犬；弓形虫病；病原生活史；发病机理；临床症状；实验室检查；类症鉴别；药物治疗1 病原生活史自然界中广泛分布弓形虫，中间宿主为多种动物和人，终末宿主是猫科动物，即整个生活史都在中间宿主和终末宿主体内完成。

弓形虫的发育可分成五个阶段，即滋养体、包囊、裂殖体、配子体和卵囊，其中前两个阶段是在中间宿主内进行，而后三个阶段只在终末宿主也就是猫科动物的肠道和体表上。

虫体发育过程是猫科动物食入发育成熟的卵囊或者包含弓形虫包囊的动物组织，卵囊内的子孢子或者包囊内的滋养体就会侵入机体消化道，且逐渐移动到肠上皮细胞，并在细胞内呈现球虫型的发育和繁殖。

也就是先以裂殖方式生出大量裂殖子，在一段时间之后有些裂殖子会通过配子生殖发育为配子体以及大小配子，最终发育为卵囊。

卵囊通过猫科动物的粪便排出体外，当外界环境适宜时，2～4天之后就会发育成感染性卵囊。

另外，猫科动物摄入的滋养体中有些会进入血液和淋巴循环，从而运送到机体各个脏器和组织，并侵入有核细胞，之后在有核细胞内以二分法或者内出芽法进行繁殖。

在这个繁殖过程中，猫科动物会自然形成免疫力及抵抗力来抑制滋养体繁殖，有些滋养体会被消灭，另外一些滋养体会侵入机体脑和骨骼肌等，并在该处形成包囊。

2 发病机理犬感染弓形体病通常是由于吞食含有滋养体及包囊的肉、内脏或者食入孢子化的卵囊等，还能够通过损伤的皮肤、眼、呼吸道以及胎盘等途径发生感染。

另外，该病的发生还与犬具有的食粪恶习或者捕食鼠类等相关。

当犬食入猫排出的卵囊后，里面的子孢子会通过淋巴液和血液循环侵入肠道组织以外的细胞中，并进行双芽方式繁殖，生成很多速殖子，此时为急性感染期。

动物疫病控制—实验室检测

动物防疫技术
项目五：动物疫病控制
如何进行寄生虫学检测？
2.虫体检查--2：
• 蛛形纲虫虫体检查法：通常采用煤油浸泡法,将病料置于载玻片上,滴加数滴煤油,上覆另一载玻片,用手搓动两玻片使皮屑粉碎,镜检。对蜱等其他蛛形纲虫,常采用肉眼检查法。
动物防疫技术
项目五：动物疫病控制
如何进行寄生虫学检测？
定、酶免疫技术等，如猪瘟荧光抗体染色法检测猪瘟病毒。 • 检测病毒核酸：主要针对不同病原微生物具有特异性核酸序
列和结构进行检测。如核酸杂交技术、核酸扩增技术和基因芯片技术等已研制出多种商品化试剂盒,
动物防疫技术
项目五：动物疫病控制
如何进行病毒学检测？
2.病毒的分离培养：
• 病料处理：主要作除菌处理，方法有滤器除菌、高速离心除菌和利用抗生素处理3种。
猪瘟 NY/SY 156-2000
正向间接血凝试验（IHA）
动物防疫技术
项目五：动物疫病控制
什么是动物疫病分子生物学监测？
分子生物学监测又称基因监测。主要是针对不同病原微生物所具有的特异性核酸序列和结构进行测定。如PCR 技术、核酸探针技术、DNA芯片技术等。
动物防疫技术
一次性静脉采血管
猪前腔静脉采血
动物防疫技术
项目五：动物疫病控制
免疫抗体监测的程序是什么？
鸡翅静脉采血
猪耳静脉采血
猪前腔静脉采血
牛颈静脉采血
动物防疫技术
项目五：动物疫病控制
免疫抗体监测的程序是什么？
3.抗体检测方法：常见动物疫病免疫抗体检测标准及方法，如下表：
分类
国家强制免疫的重大动物疫
• 显微镜检查：制片干澡后，滴加香柏油,用油浸镜观察细菌的形态结构和染色特性。

血凝及血凝抑制试验应注意的一些小问题

犬瘟热是由犬瘟热病毒引起犬的一种急性、热性、高度
脱水。
接触性传染性疾病。其特征是双相体温升高，白细胞减少，急
性卡他性呼吸道炎、严重的胃肠炎、皮肤湿疹和神经症状。犬瘟热病毒属副粘病毒科麻疹病毒属，在自然条件下，犬科动物（犬、貉、狐、豺、狼等）最易感，幼犬（貂）发病率可达９０％以上，病死率为３０％一８０％，传染来源主要是病犬和病兽及带毒动物，经消化道传染，也可经呼吸道传染，还可通过阴道分泌物传染。
经济动物
犬瘟热病的产地检疫及防制
马德平，道东兰，毛航平
（宁夏同心县预旺镇畜牧兽医工作站，同心７５１３００）
ＤＯＩ：１０．３９６９／Ｊ．１ＳＳＮ．１６７１ — ６０２７．２０１４．Ｏ９．０７７
１ＰＢＳ液体的配置止擅自更改反应时间。
４反应器皿的选择
的反应时间进行试验，禁
尽量选择一次性消毒用品，如，微量移液器枪头，盛放ＰＢＳ液的移液槽等，以降低外界污染物对实验结果的影响。５鸡蛋样品的检测在对鸡蛋进行抗体检测时，可以如下处理样品：将鸡蛋去壳打在平皿内，用一次性注射器去针头后迅速插入蛋黄内，吸取ｌｍＬ蛋黄放在试管内，再在试管内添加ｌｍＬＰＢＳ液，混合均匀。在读取该样品效价时，结果扩大一个单位即

青海省互助县藏羊弓形虫血清学调查

１０２
动物医学进展
２１００年
第３１卷
第７（第２５期）期总０
表１不同地区藏羊弓形虫血清学调查结果
ＴａｌＴｈｅｒｓｌｓｏｘｐｌｓｏｄｉｓｒｌｇｃｌｓｖｙｉｂｔｎｓｅｎｄｆｅｅｔｒｇｏｂｅ１ｅｕｔｆＴｏｏａｍａｇｎｉｅｏｏｉａｕｒｅｎＴｉｅａｈｅｐｉｉｒｎｅｉｎｓ
中图分类号：８２７３￥５．２文献标识码：Ｂ文章编号：０７５３（ＯＯＯ一ｌ９０１０ —Ｏ８２１）７Ｏｌ— ３
刚地弓形虫（ｏｏｌｓｏｄｉＴｘｐａｍａｇｎｉ）是一种广泛
量加样器，量振荡器。微
兽医研究所。
阳性率为４１，羊血清２．７公８份，阳性率为其
３５（２。．７表）
１１３器械．．
９６孔“ 型有机玻璃微量反应板，Ｖ” 微
＊
收稿日期：０９１－６２０－１１作者简介：李英（９７）女，青海西宁人，士，要从事动物寄生虫教学和研究工作。１７一，硕主
区的养殖户在兽医卫生管理工作做得较好有关。
助县藏羊对弓形虫病的感染率有所下降。
Ｅｉ陈为民．兽共患病［］湖北武汉：北科学技术出版社，ｌ人Ｍ．湖
２０５５．０６：０４

衣原体病,弓形虫间接血凝(IHA)试验操作方法

十一、衣原体病间接血凝（IHA）试验操作方法衣原体属的三个种都存在共同的属特异性抗原。

衣原体病间接血凝试验，则是用已知的属抗原检测人、畜、禽血清或分泌物中的抗体。

具有特异、敏感、简便、快速之优点。

（一）试剂盒内容包括衣原体属抗原致敏绵羊红细胞、阳性和阴性对照血清。

（二）试验方法1．将生理盐水滴于V型反应板也孔中，每孔50微升。

2．取被检样品（血清或分泌物）50微升于第1孔中，与生理盐水混匀后吸50微升加于第2孔，依次作对倍稀释至所要求的稀释度。

3．每孔加抗原25微升，作定性检查时只需加两孔。

人血清只加1：4和1：8两孔。

阴道分泌物只加1：2和1：46。

孔哺乳动物血清只加1：32和1：64两孔，禽类血清只加1：8和1：18两孔。

如作定量试验则可根据实际需要自行决定。

试验：设阳性血清+抗原、阴性血清+抗原、生理盐水+抗原各1孔。

（三）结果判定1．判定标准“++++”红细胞全部凝集，形成一层均匀的膜，布满整个孔底“+++”红细胞在孔底形成一层薄膜，面积比前者稍小“++”红细胞在孔底形成薄层凝集，边缘松散或呈锯齿状“+”红细胞在孔底呈稀薄、、散在、少量凝集，孔底有小圆点“±”红细胞沉于孔底，但周围不光滑或中心有空斑“-”红细胞完全沉于孔底，呈光滑的圆点“++”经上的凝集判为阳性凝集2．对照试验出现如下结果试验方可成立，否则应重试，阳性血清+抗原呈“++++”；阴性血清+抗原呈“—”，抗原+生理盐水呈“—”。

3．被检样品判定标准：人群血清效价≥1：8（++）者判为阳性；效价≤1：2者判为阴性；介于二者之间判为可疑。

人群阴道分泌效价≥1：2（++）者判为阳性；效价≤1：2（++）者判为阴性。

哺乳动物血清效价≥1：64（++）者判为阳性；效价≤1：16（++）者判为阴性；介于二者之间判为可疑。

禽类血清效价≥1：16（++）者判为阳性；效价≤1：4（++）者判为阴性；介于二者之间判为可疑。

[注]被检样品采集及处理方法：1.血清：按常规方法采血及分离血清，要求无腐败。

医学知识一人畜共患寄生虫病的检疫

2.对人的危害：猪囊虫寄生于人体的肌肉和各组织器官对人的健康产生危害。囊虫病的患者可因囊尾蚴的寄生部位而有所不同，可导致肌肉酸痛，无力发胀等症状；可引起视力障碍，甚至失明；可使人头昏，头痛记忆力减退，严重可引起癫痫发作，甚至失语昏迷死亡。体内有成虫寄生的患者主要表现为腹痛、腹泻、消化不良、贫血和消瘦。
淋巴结淋巴组织增生肿大、坏死
左：肺水肿，小叶间质增宽，充积半透明水肿液；右：肾脏瘀血肿大
猪皮肤出血，结痂（4月龄）
肺高度水肿，特别是间质水肿
脾肿大极明显（8月龄猪）脾脏肿大（下），上为正常对照
肝散在出血、坏死点、脾滤泡坏死（2月龄猪）
肾散在小白点
实验室检疫
1.涂片检查：采取患畜和病死尸体的胸腹腔渗出液、血液或肝、肺、肺门淋巴结等直接抹片或涂片镜检，可发现虫体。其中以肺脏涂片和急性感染期的血液片检出率较高。
2.动物接种试验：取病死猪肝、肺、淋巴结等病科，研碎后加16倍生理盐水，制成1：10悬液，室温下沉淀，取上清液0.5～1毫升，接种于小白鼠腹腔，接种后观察4周，小白鼠发病死亡，取腹腔液或脏器涂片镜检，可见弓形虫。
3.血清学诊断：方法有间接血凝试验、补体结合反应、荧光抗体法、酶联免疫吸附试验。
实验室检疫
旋毛虫检验的方法主要有目检和镜检法、集样消化法、酶联免疫吸附试验、间接血凝试验和免疫荧光抗体技术等。
常规镜检法：在每头猪的左、右横膈膜肌脚各剪取一块约15∼30克肉样，与胴体编为同一号码，送检验室检验。在充足自然光线下，先剥离膈肌的肌膜，再将肉样顺肌纤维方向拉紧，肉眼观察有无针尖大小的小亮点或灰白色或浅灰白色的小钙化点，然后从肉样两面顺肌纤维方向各剪取6个麦粒大的肉片（每侧膈肌剪取肉粒12个）共24片，用玻璃板压平展开，在50∼70 倍低倍镜下逐一检查有无虫体。

阿拉山口口岸周边野外区鼠情监测报告

阿拉山口口岸周边野外区鼠情监测报告郭刚;尹小平;张杰;马东虎;阿不都·扎伊尔【期刊名称】《口岸卫生控制》【年(卷),期】2008(013)005【摘要】目的掌握阿拉山口口岸周边野外区鼠、蚤密度,种群构成、季节消长规律,为鼠情防制提供依据.方法于2006年4月-2007年3月使用板夹夹夜法和弓形夹夹捕法相结合时口岸野外区鼠情进行调查,并利用微量血凝法检测F1抗体及抗原.结果经过1年的监测,在口岸野外区共捕获鼠形动物279只,经过鉴定隶属2目4科6属8种.弓形夹捕获率为10.1%,捕获优势种为大沙鼠.板夹捕获率为1.8%,捕获优势种依次为子午沙鼠、红尾沙鼠和西伯利亚五趾跳鼠.分离鼠体表寄生蚤1 539匹,优势种为臀突客蚤.血清学检测大沙鼠血清114份,检出F1阳性血清10份,阳性感染率为8.8%.结论对口岸野外区应重点加强在鼠、蚤活动高峰期对大沙鼠密度、染蚤情况及鼠疫血清学等方面的调查.由于子午沙鼠、红尾沙鼠等宿主动物经常参与大沙鼠鼠疫流行,因此也不能放松对这类宿主的监测.【总页数】4页(P42-45)【作者】郭刚;尹小平;张杰;马东虎;阿不都·扎伊尔【作者单位】阿拉山口出入境检验检疫局,阿拉山口,833418;阿拉山口出入境检验检疫局,阿拉山口,833418;阿拉山口出入境检验检疫局,阿拉山口,833418;阿拉山口出入境检验检疫局,阿拉山口,833418;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063【正文语种】中文【中图分类】R185.3【相关文献】1.哈尔滨市道外区2001—2003年居民鼠情监测报告 [J], 刘滨铎;赵力红;赵友善2.2007年新疆阿拉山口口岸地区鼠情监测对比分析报告 [J], 叶志辉;骄娃;马东虎;尹小平;阿不都·扎伊尔3.国境口岸鼠情监测方法探讨 [J], 张北鹰;魏龙江;郝雨来;王宏权;李洪明4.福州马尾口岸鼠形动物及其体表寄生虫监测报告 [J], 李昱辰;熊国欢;刘宝英;高思维;许丽皇;李航平;林醒忠5.深圳皇岗口岸鼠血清的鼠疫及肾综合征出血热抗体监测报告 [J], 吴利平;练春林;李金水因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

西藏部分地区藏猪弓形虫血清学调查研究

１．１．３仪器
１．２．３．１操作方法
酶标分析仪，型号：ＲＴ－６１００，恒温培养箱等。
１．２检测方法
１．２．１间接血凝试验（ＩＨＡ）
在检测卡的加样孔内加入２滴（１００１）待检血清样品。将检测卡平放于桌面上，在室温下静置５ —２０ｍｉｎ内判定结果。超过２０ａｒｉｎ的结果只能作为参考。
干。加酶：每孔加酶标记物１００ ‘ ｌ。温育：置３７ ℃温育３０ａｉｒｎ。从西藏拉萨市堆龙县、墨竹工卡县、林周县、达孜县、尼木洗板：同上。显色：每孔加显色剂Ａ、显色剂Ｂ各５０ｌ，振荡混县、曲水县，林芝地区米林县、林芝县等地个体养猪户共采集藏匀，３７￣Ｃ避光反应１５ａｉｒｎ。终止：每孔加终止液５Ｏｌ，振荡ｌＯ猪血样１９５份，分离血清待检。８，充分混匀。终止后５ — ３０ａｒｉｎ内读数。
弓形虫病是由刚地弓形虫引起的一种人兽共患性寄生虫病，孔允许有前滞现象 “ ＋ ” 外、其余各孔均为 “ 一 ” ，稀释对照为该病在全世界广泛流行。西方国家人群平均感染率高达１５％左 ”的前提下，对待检血清进行判定，否则重做。待检血清效右” １，我国人体平均感染率达８％】。此病主要引发母猪死胎、价 ≥１：６４，判为阳性，反之为阴性。

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豢杀豢杀＊来帐米张 ∈
ＥｌｃｒｃｒｉｇａＡｎｌｓｓｏｒｎｉａｔＦａｌｒｏｅｎＲａｓｅｔｏａｄｏｒｍａｙｉｆＣｈｏｃＨｅｒｉｕｅＭｄｌｉｔ
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动物医学进展，０２３（１２１４２１，３７：３ —３
ＰｒｇｅｓｉｔｒｎｒｅｃｎｏｒｓｎＶｅｅｉａｙＭｄｉｉｅ
青海省部分地区藏獒及草地鼠类弓形虫抗体间接血凝试验检测
马国璧
出现了以临床为中心的又一个研究热潮。弓形虫可以感染温血动物的许多属，括人，科动物是终末包猫
宿主。动物通过吃了被猫科动物粪便中卵囊污染的
１６９４年，江西发现了我国第１个病例，在同年福建
也发现１。但由于当时未引起重视，缺乏诊断例且
内。近年来，有关野生动物感染弓形虫的情况正
引起人们的高度重视＿。弓形虫病在我国发现较３］晚，９５年，建省首次从猫、、和豚鼠等动物１５福兔猪分离成功，分别于１５并９７年和１５９９年正式报道。
关键词：间接血凝试验；测；检弓形虫
文章编号：０７５３（０２０一１２０１０ —０８２１）７Ｏ３ — ３
中图分类号：８２７３￥５．２
文献标识码：Ｂ
弓形虫病（ｏｏｌｍｏｉ）是由刚地弓形虫Ｔｘｐａｓｓ，ｓ
（ａｇｈｕＵｎｖｒｉｆＣｉｅｅＭｅｉｉｅＧａｇｈｕＧｕｎｄｎ，１４５ＣｉａＧｕｎｚｏｉｅｓｙｏｈｎｓｔｄｃ，ｕｎｚｏ，ａｇｏｇ５００，ｈｎ）ｎ
ＡｂｔａｔＴｈｎａｙｓｓｉｏｄｓｕｓｔｉｉｉａｃｆｕｓｎｈｌｃｒａｄｏｇａ（ｓｒｃ：ｅａｌｉｓｔｉｃｓｈｅｓｇｎｆｃｎｅｏｉｇｔｅｅｅｔｏｃｒｉｒｍＥＣＧ）ｉｄｒｔｖｌ — ｎｏｒｅｏｅａｕａｅｔａｓｗｉｈｃｒｉａｔｆｉｕｅ（ｔｈｅｒｔｔｈｏｎｃｈｅｒａｌｒＣＨＦ）ｍｏｅ．３Ｄａｓｗｅｅｒｎｄｍｌｉｉｅｎｏ２ｇｏｕ，２ｄ１６Ｓｒｔｒａｏｙｄｖｄｄｉｔｒｐｓ４ｉｈｅｍｏｅｏｎｔｄｌｇｒｕｐ，ａｄ１ｎｔｅｎｒａｏ．Ｔｈａｓｉｄｅｏｕｐｗｅｅｉｄｕｅｙａｒａｎ２ｉｈｏｍｌｇｒｕｐｅｒｔｎｍｏｌｇｒｒｎｃｄｂｄｉｍｙｃｎｔｉＯ
ｃｐｈａｏｅｆＣＨＦＴｈｔｎａｄｌｏｌａｓＥＣＧｓｒｃｒｅｏｙｔｅｒｔｍｄｌｏ．ｅｓａｄｒｉ１ｔｃｄｍｂ１ｗａｅｏｄｄ，ａｄｔｅｈａｔｃｅｆｃｅｔａｄｎｈｅｒｏｆｉｉｎｎ
病。２Ｏ世纪７０年代后期，因猪弓形虫病大流行，而
（Ｔｚｐａｍａｇｎｉ）引起的人兽共患病ｕ。现ｏｏｌｓｏｄｉ所Ｊ
已知弓形虫存在于全球五大洲的至少２０种动物体０
引起兽医部门的重视，掀起研究家畜弓形虫病的热
ｍｙｏａｄｉｌｐｔｏｌｇｃｌｅａｎｔｏｒｓｄｔｅｉｙｔｐｏｈｓｓｃｒａａｈｏｉａｘｍｉａｉｎｗｅｅｕｅｏｖｒｆｈｅｈｙｔｅｉ．ＴｈｅｒｓｌｓｓｗｅｈａｈｅｕｔｈｏｄｔｔｔｅＥＣＧｏｈｅｒｔｎｍｏｅｏｐｗｅｅｔｐｉａｌｈｎｇｄｉｏａｗａｄＳｓｇｅｏｅｌｖｔｏｎ（ｏｔｇｌｆｔａｓｉｄｌｇｒｕｒｙｃｌｙｃａｅｎｔｎｕｐｒＴｅｍｎｔｃｎｖｘｅｅａｉｖｌａｅｅ —
潮。到２Ｏ世纪８０年代，生部门也开展了全国性卫流行病学调查，本上掌握了我国弓形虫病的流行基特征。由于新技术的采用以及诊断试剂的供应，发现的病例也逐年增多。同时，由于医疗部门的介入，
（海省畜牧兽医科学院，海西宁８０１）青青１０６
摘要：用间接血凝试验（ＨＡ）对青海省部分地区的藏獒、马拉雅旱獭、应Ｉ，喜高原鼠兔及中华鼢鼠的
３１血清样品，１份进行弓形虫特异性抗体的检测。结果检出３３份阳性血清，阳性率为１．１。０６
手段，现的病例又不多，发而被认为是一种罕见的疾
食物，或者通过母体传给胎儿的方式感染。尽管把
收稿日期：０２０ — ９２１ — ３１作者简介：国璧（９４）男，肃张家川人，马１５一，甘实验师，期从事动物疫病防治研究与推广。长