沙鼠脑缺血模型特点及应用的研究进展
脑卒中动物模型实验原理
脑卒中动物模型实验原理
1.1 缺血性脑卒中
2.1.2 线栓法
实验动物：MCAO大鼠、MCAO小鼠
模型特点：利用线栓闭塞大脑动脉血管，无需开颅，缺血时间和部位易控制，并发症少，是目前使用最广泛的脑卒中模型。
获取方法：可直接购买商品化模型
2.1.2 光化学法
实验动物：大鼠、小鼠
模型特点：无需开颅，重复性较高，病灶部位可控，但缺乏缺血半暗带，无法模拟部分病例的生理变化，适用于慢性脑缺血研究。
获取方法：系统给与光敏剂后，利用高强度光源照射，以激活脑区的光敏剂，产生脑水肿和血小板微血栓，造成局部梗死。
2.1.3 开颅电凝法
实验动物：大鼠、小鼠
模型特点：缺血效果稳定，出血量少，是目前公认的标准大脑中动脉闭塞模型，但开颅存在一定风险。
获取方法：右侧颞下入路进行开颅，采用双极电凝将大脑中动脉闭塞后切断。
1.2 出血性脑卒中
2.2.1 自体注入法
实验动物：ICH大鼠
模型特点：采集自体股动脉血注射至大鼠右侧基底节制作ICH模型，操作简便，出血部位稳定，与人类脑出血病理过程相似。
2.2.2 自发脑出血
实验动物：大鼠
模型特点：将高血压与出血性脑卒中有机结合，适用于高血压引起的脑出血病理生理机制研究。
获取方法：对SHR（自发性高血压）大鼠进行大脑中动脉结扎处
理
2.2.3 胶原酶注入法
实验动物：大鼠、小鼠
模型特点：操作简便，重复性高，与临床脑出血病理生理相似性高，但实验影响因素较多，稳定性较差。
获取方法：将胶原酶通过微量注射器注射入动物尾壳核内。
大鼠缺血模型
大鼠和小鼠的优势
1. 大鼠品种多，易于饲养，价格低廉 2. 纯种鼠属近亲交配，基因型相似，脑血管解剖和生理机能也相 似 3. 大鼠脑血管解剖和生理机能接近于人类 4. 脑血管损伤部位恒定，实验重复性好 5. 动物存活时间长，利于脑缺血相关病理改变过程的研究 6. 脑体积大小适宜，易施低温固定技术和组织生化分析 7. 有关系列大鼠的生理、药理和生化方面的实验资料可供分析比 较 8. 克服了体外实验无法实施再灌流的缺陷 9. 沙土鼠缺乏后交通动脉及完整的基底动脉环，两侧大脑供血相 对独立，通过闭塞一侧或双侧CCA即可复制效果明显的同侧或 双侧脑缺血模型
栓线法
由 ECA 插入 4 -0 尼龙线进入 ICA , 阻断 MCA起 始端而导致局灶性脑缺血。通过提拉插线可以造成 再灌流损伤模型。
优点：该法手术创伤小, 动物易长时间存活血栓形
成过程与人类相似可选择皮层梗塞部位
缺点：较早地导致终末动脉及微血管永久性闭塞 ,
不利于扩血管及促进侧支循环作，切开皮肤， 暴露颅骨，静脉注射光敏材料虎红酸钠，用特 定冷光源(500--600nm)照射切口处颅骨，光 线透过颅骨与血管内的光敏物质接触，激发光 化学反应而产生单线态氧，直接损伤血管内皮 细胞而诱导血栓形成。 优点：不开颅，手术创伤小，动物易长时间存 活，血栓形成过程与人类近似，适用于抗血小 板、抗血栓及内皮细胞保护药物的急慢性动物 实验研究。 缺点：较早地导致终未动脉及微血管永久性闭 塞，不利于扩血管及促进侧支循环作用的研究
开颅法、光学法、栓塞法、栓线法。
开颅法
麻醉动物，耳眼连线的中点垂直切开皮肤，通过钝
性分离颞肌，开颅后暴露MCA，用电凝器横过嗅束旁 的MCA使其凝闭，用10号手术丝线结扎MCA，造成MCA 支配区局灶性脑缺血模型。
长爪沙鼠脑底动脉Willis环变异缺失遗传特性分析及脑缺血模型高发群体的初步培育
中 国 比较 医学 杂 志
ＣＨＩ ＮＥＳ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＣＯＭＰ ＥＪ ＡＲＡＴＩ ＶＥ ＭＥＤＩ ＮＥ ＣＩ
Ａｕ ｕ ｔ ０１ ｇ ｓ ，２ １ Ｖ０ ＿ Ｎ Ｏ ８ ｌ２ｌ ．
第 ２ ｌ卷
第 ８期
长爪沙 鼠脑底动脉 Ｗｉｉ环变异缺失遗传特性分析及 ｌｓ ｌ 脑缺血模 型高发群体 的初步培育
型高发生率种群。
【 关键 词】 长爪沙 鼠； ｌｓ ； Ｗｉｉ 环 脑缺血高发模型 ； 向培育 ｌ 定 【 中图分类号】Ｒ ３ ３ 【 文献标识码 】Ａ 【 文章 编号 】１７ —８ ６ ２ １ ）８０ ４ － ６ １ ５ （ ０ １ ０ －００ ４ ７ ０
ｄ ｉ ０ ３ ６ ／．ｓｎ １ ７ ． ８ ６ ２ １ ． ８ ０ ０ ｏ ：１ ． ９ ９ ｊ ｉ ． ６ １ ７ ５ ． ０ ０ ． １ ｓ １
细 小 的 同 类 型 的 长 爪 沙 鼠父 母 所 生 的 子代 雌雄 个 体 配对 繁殖 ， 向培 育 长 爪 沙 鼠半 脑 缺 血 模 型 高 发 生 率 种 群 。结 定 果 当 双 亲 的 Ｗｉｉ环 类 型 一 致 时 ， ｌｓ ｌ 其子 代 大 部 分 与其 父 母 一 致 ； 当 双 亲 的 Ｗｉｉ环 类 型 不 一 致 时 ， ｌｓ 前 交 而 ｌｓ ｌ Ｗｉｉ环 ｌ 通支与母亲一致率为 ６．％ ， 交通支与父亲的一致率为 ４．％ ， 者的差异有显著性意义 （ ０４ 前 ８２ 两 Ｐ＝００ ５ 。 长 爪 沙 ．１） 鼠半 脑 缺 血模 型 高 发 生 率 种 群 定 向培 育 ５代 后 ， 单 侧 颈 总 动 脉 结 扎 时 ， 侧 脑 缺 血 造 模 成 功 率 由 Ｆ 代 的 ４ ％ 提 行 一 ｌ ０ 高 到 Ｆ 代 的 ７ ％ 。 结 论 长 爪 沙 鼠脑 底 动 脉 Ｗｉｉ环 变 异 有 明显 的 遗 传 性 ， 步 培 育 出 了 长 爪 沙 鼠半 脑 缺 血 模 ５ ５ ｌｓ ｌ 初
脑血管病动物模型制作步骤及方法
脑血管病动物模型制作步骤及方法1自发性脑梗死模型高血压动物可形成自发性脑梗死。
常用的有原发性高血压和继发性高血压两大类。
前者以日本种的自发性高血压大鼠(SHR)及其易卒中亚型(SHRsp)为常用，后者为各种肾性高血压动物。
这种脑梗死与人类的脑梗死发病情况为接近，是目前较为理想的动物模型之一，国内主要的实验动物研究机构都有供应。
2沙鼠大脑中动脉缺血模型【操作步骤】成年沙鼠，10％水合氯醛(4ml/kg)腹腔麻醉，沿腹部中线于颈部切开。
剥离出一侧颈动脉，用银制钳夹夹闭。
考虑实验需要可实行长期夹闭或可再灌注。
【结果分析】由于沙鼠后交通动脉缺失，Willis环前后不连续，故经颈部夹闭一侧总动脉可以方便地造成同侧半球缺血，可依据沙鼠表现的体征，结合眼底观察镜观察眼底缺血情况判别。
3急性大鼠大脑中动脉阻塞全脑缺血模型【操作步骤】成年SD或Wistar大鼠，10％水合氯醛(4ml/kg体重)麻醉。
右侧卧位，在左眼外缘到左外耳道连线的中点，垂直于连线切开皮肤约2cm，沿颧弓和下颌骨，用文氏钳将手术面撑大，暴露鳞状骨的大部分，用牙科钻在颧骨前联合前内2cm处钻孔开颅。
在手术显微镜下切开硬脑膜，暴露出大脑中动脉，分离出中动脉周围的软脑膜和蛛网膜，使中动脉游离。
用双电极(电压12V)电灼损毁Willis环起始部至嗅沟段的大脑中动脉，使之阻塞。
为防止电极的电流对脑组织造成电损伤，在操作过程中不断向中动脉周围滴加生理盐水，并尽量缩短操作时间。
创面覆盖一小块明胶后，缝合肌肉和皮肤。
【结果分析】大脑中动脉从Willis环发出后向外跨过嗅束蜿蜒走行于大脑的外侧面，供应大部分的大脑半球，大脑中动脉在Willis环起始到嗅沟区发出许多的分支，供应豆壳复合体，所以电灼此段大脑中动脉的主干血流，复制中风模型的成功率较高。
用本实验手术方法复制的大鼠中风模型的成功率较高，死亡率低，较为理想，有面积不等的梗死区出现，行为障碍约占90％。
由于手术部切断颧弓，术后基本不影响动物的采食行为，并可以进行长期的观察，有利于建立慢性中风动物模型。
长爪沙鼠
省内分布于环县、定西、陇西、皋兰、兰州、永登、天祝、古浪、景泰、山丹、张掖、民乐等。
国内分布吉林、辽宁、内蒙、河北、山西、陕西北部、青海、宁夏。
国外分布于蒙古。
长爪沙鼠是一种小型草原动物，大小介于大白鼠和小白鼠之间，通常成熟期体重不超过100（30－113）克，体长112.5（97-132）毫米，尾长101.5(97－106)毫米，背毛棕灰色，腹毛灰白色，耳明显，耳壳前缘有灰白色长毛，内侧顶端有少而短的毛，其系部分裸露。
尾上被以密毛，尾端毛较长，形成毛束。
爪较长，趾端有弯锥形强爪，适于掘洞，后肢蹠的和掌被以细毛，眼大而圆。
喜居沙质土壤中的洞穴中，行动敏捷，喜群居，有贮粮习惯，不冬眠，一年四季活动，繁殖以春秋为主，每年12月和1月基本不繁殖。
成年雌鼠一年繁殖3～4胎，每胎平均5～6只，最多达11只，每只出身时体重2.5～3.0克，在人工饲养条件下，一年可繁殖5～8胎，一生的繁殖期为7～20个月，雌鼠一生最高可繁殖14胎，寿命2～3年。
生后3～4个月性成熟，通常5～6个月配种，性周期4～6天，妊娠期24～26天，哺乳期21天，成年雌鼠体重60～75克，雄性70～80克。
沙鼠尾巴与大、小鼠几乎无毛的尾巴不同，长满披毛并常在尾尖部集中成毛簇。
后肢长而发达，可作垂直与水平的快速运动。
沙鼠中腹部有一个卵圆形、棕褐色的无毛区域称为腹标记腺或腹标记垫，雄性沙鼠的腹标记腺较雌性沙鼠大且出现得早。
沙鼠在物体上磨擦腹标记腺时引起腺体分泌，作为嗅觉鉴别其活动地盘的方法。
雄性沙鼠的标记行为和腺体的完整性受雄激素控制。
一般在群养时，以其中最常分泌腺体的动物变为统治者。
雌性沙鼠的嗅觉标记活动在妊娠和早期哺乳期增强。
沙鼠另一个有趣的腺体是副泪腺，它位于眼球之后，眼角内侧。
此腺体分泌一种吸引素，从鼻孔排出并与唾液混合。
在动物清洁腹部时扩散出来，有证据说明，雄性沙鼠副泪腺分泌的吸引素对于动情期雌性沙鼠有促进交配的作用。
与体重相比，沙鼠的肾上腺几乎为大白鼠肾上腺的三倍，其产生的皮质甾酮多。
巴曲酶对缺血再灌注沙土鼠海马CA1区神经元的保护作用
巴曲酶对缺血再灌注沙土鼠海马CA1区神经元的保护作用印卫兵;丁新生;冯美江;龚洁;顾萍;李娟【期刊名称】《中国康复》【年(卷),期】2006(021)005【摘要】目的:探讨巴曲酶对沙土鼠脑缺血再灌注神经元保护作用的可能机制.方法:蒙古沙土鼠63只分为巴曲酶组45只,假手术组9只及对照组9只.对照组及巴曲酶组鼠制作缺血再灌注模型,假手术组仅行手术操作,不行缺血处理.巴曲酶组于缺血再灌注前0、0.5、1、3和6h时分别给予腹腔注射巴曲酶8 BU/kg,每个时间点9只.缺血再灌注96 h后3组鼠进行免疫组化SP法检测海马CA1区的Bcl-2、eNOS、VEGF及Akt蛋白的表达及电镜下神经元超微结构观察;并在光镜下计算海马CA1区的神经元阳性细胞数.结果:巴曲酶组使用巴曲酶后,Bcl-2、eNOS、VEGF及Akt蛋白表达明显增加,神经元阳性细胞数在各时间点与对照组比较差异均有显著性意义(P＜0.01),而巴曲酶组各个时间点间比较差异无统计学意义;超微结构显示巴曲酶各时间点抗细胞凋亡明显.结论:巴曲酶具有明显的海马CA1区的神经元保护作用,其机制可能是通过其上调Bcl-2、eNOS、VEGF及Akt蛋白的表达.【总页数】3页(P302-304)【作者】印卫兵;丁新生;冯美江;龚洁;顾萍;李娟【作者单位】南京医科大学第一附属医院神经内科,南京,210029;南京医科大学第一附属医院神经内科,南京,210029;南京医科大学第一附属医院神经内科,南京,210029;南京医科大学第一附属医院神经内科,南京,210029;南京医科大学第一附属医院神经内科,南京,210029;南京医科大学第一附属医院神经内科,南京,210029【正文语种】中文【中图分类】R49;R743.3【相关文献】1.联合应用巴曲酶和依达拉奉对沙土鼠缺血再灌注后凋亡相关基因表达的影响 [J], 李娟;丁新生;印卫兵;冯美江;高阳;龚洁2.巴曲酶对沙土鼠海马CA1区的神经元保护作用的量效、时效及可能机制的探讨[J], 印卫兵;丁新生;冯美江;龚洁;高阳;李娟;张萍3.巴曲酶对沙土鼠海马CA1区神经元保护作用及其机制的研究 [J], 印卫兵;丁新生;冯美江;龚洁;顾萍4.巴曲酶对沙土鼠前脑缺血再灌注损伤后神经元凋亡的时间效应关系研究 [J], 龚洁;丁新生;印卫兵;冯美江;高阳;李娟;高飞5.不同剂量巴曲酶对脑缺血沙土鼠的脑保护作用 [J], 印卫兵;丁新生;冯美江;张平;邓晓萱;姚娟;宋春杰;龚洁;顾萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同剂量巴曲酶对脑缺血沙土鼠的脑保护作用
不同剂量巴曲酶对脑缺血沙土鼠的脑保护作用印卫兵;丁新生;冯美江;张平;邓晓萱;姚娟;宋春杰;龚洁;顾萍【期刊名称】《临床神经病学杂志》【年(卷),期】2005(18)2【摘要】目的探讨巴曲酶对脑缺血沙土鼠脑保护作用的最佳剂量.方法 80只沙土鼠随机分为假手术组、对照组、巴曲酶治疗组(又分为1 BU/kg、2 BU/ kg、4 BU/ kg、8 BU/ kg 、16 BU/ kg、32 BU/ kg组),每组10只.制作完全性前脑缺血再灌注沙土鼠模型,制作模型前3 h给予对照组沙土鼠腹腔注射生理盐水;巴曲酶组腹腔注射相应剂量的巴曲酶.用原位末端标记(TUNEL)法染色检测沙土鼠海马CA1区凋亡细胞,光镜下计算海马CA1区的神经元凋亡率.结果巴曲酶8 BU/ kg 、16 BU/ kg、32 BU/ kg组海马CA1区细胞凋亡率明显减少,与对照组及巴曲酶1 BU/ kg、2 BU/ kg、4 BU/kg组比较差异有显著性(均P＜0.01), 8 BU/ kg 、16 BU/ kg、32 BU/ kg组之间差异无显著性(均P>0.05). 结论巴曲酶具有抗脑缺血后的细胞凋亡作用;巴曲酶 8 BU/ kg为对脑缺血沙土鼠脑保护作用的最佳剂量.【总页数】3页(P124-126)【作者】印卫兵;丁新生;冯美江;张平;邓晓萱;姚娟;宋春杰;龚洁;顾萍【作者单位】210029,南京,江苏省人民医院神经内科;210029,南京,江苏省人民医院神经内科;南京医科大学第二附属医院;南京医科大学第二附属医院;210029,南京,江苏省人民医院神经内科;210029,南京,江苏省人民医院神经内科;210029,南京,江苏省人民医院神经内科;210029,南京,江苏省人民医院神经内科;210029,南京,江苏省人民医院神经内科【正文语种】中文【中图分类】R743.32【相关文献】1.巴曲酶和依达拉奉联用对缺血再灌注脑损伤沙土鼠脑保护作用 [J], 邵大荣;徐连宝;印卫兵;丁新生2.巴曲酶对脑缺血后沙土鼠海马锥体细胞延迟性坏死的影响 [J], 陈群;曾因明3.巴曲酶对沙土鼠前脑缺血再灌注损伤后神经元凋亡的时间效应关系研究 [J], 龚洁;丁新生;印卫兵;冯美江;高阳;李娟;高飞4.巴曲酶用药次数对脑缺血再灌注沙土鼠脑保护作用的影响 [J], 徐连宝;印卫兵;丁新生;龚洁5.延迟低温复合巴曲酶对沙土鼠全脑缺血后脑神经细胞突触体ATP酶活力的影响[J], 王士雷;曾因明;陈群;许鹏程因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小鼠脑缺血模型
小鼠脑缺血模型大脑中动脉阻塞 (middle cerebral artery occlusion，MCAO) 是目前最常用的局灶性脑缺血模型,MCAO 模型先阻断颈外动脉（ECA）及其分支，且阻断翼腭动脉（PPA），以切断颅外来源的侧副循环血流。
从ECA插入尼龙线，经颈内动脉（ICA）到大脑前动脉（ACA），机械性阻断大脑中动脉（MCA）发出处的血供来建立大脑中动脉缺血模型。
此模型可在无麻醉状态下拔出尼龙线，恢复血流，实现再灌注。
线栓法具有不开颅、效果肯定、可准确控制缺血及再灌注时间的优点，用于研究神经元对缺血的敏感性、耐受性，药物疗效观察以及再灌注损害和治疗时间窗较为理想，同时也具有对全身影响小、动物存活时间长的特点，适于慢性脑损伤的研究。
控制好易变因素，可避免实验结果的不稳定性。
1.实验动物SPF级BablC小鼠，健康，雄性，体重为25g-30g2.实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组，每组15只动物。
3.主要试剂2，3，5-Triphenyltetrazolium chloride（sigma）4.建模方法1. 3%戊巴比妥钠麻醉小鼠，颈部备皮，消毒，插入肛温探头，保持体温在37±0.5℃。
2. 颈部正中切口，暴露右侧颈总动脉，颈内动脉和颈外动脉。
使用7-0丝线在距离颈总动脉分叉2mm 处结扎颈外动脉远心端，在颈外动脉穿入另一根7-0丝线，在靠近颈总动脉分叉处打一个活结。
3. 使用动脉夹夹闭颈总动脉。
在距离颈总动脉分叉处1.5mm处的颈外动脉上剪一个小口，将一根头端处理过的0.18mm直径的尼龙线从小口中插入，进入颈内动脉，并向内插入大脑中动脉，尼龙线的插入深度距离颈总动脉分叉处约9±1mm。
4. 缺血后60min拔掉线栓，用7-0丝线结扎外动脉近心端，用5-0丝线缝合颈部伤口，活力碘消毒伤口，将小鼠放在加热垫上，待清醒后放入恒温抚养箱饲养。
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【 摘要 】 脑 缺 血 因其 高 的 发 病 率 而 成 为 近 年 来 研 究 的 热 点 。用 于 研 究 脑 缺 血 的 动 物 模 型 较 多 ， 其 中 沙 鼠 因 大脑 基 底 动 脉 环 先 天 性 发 育 不 完 全 而成 为 脑 缺 血 研 究 的 较 理 想 模 型 。沙 鼠 脑 缺 血 模 型 在 研 究 单 侧 脑 缺 血 和 全 脑 缺血方 面都具有独特的优势 ， 在 研 究 脑 缺 血 后 脑 区的 病 理 变 化 、 再 灌 注 损 伤 机 制 及 开 发 脑 保 护 药 方 面 都 得 到 十 分
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９ 延 综述・ 进展 ；
；
沙 鼠脑 缺 血 模 型特 点及 应 用 的研 究 进 展
刘 胜 敏 ， 杨 志 宏 ， 孙 晓 波
（ １ ．中 国 医 学科 学 院 药 用 植 物 研 究 所 ， 北京 １ ０ ０ １ ９ ３ ； ２ ．河 北 北 方 学 院 ， 河 北 张家 口 ０ ７ ５ ０ ０ ０ ）
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广 泛 的应 用 。 本 文 针 对 不 同脑 缺 血 模 型尤 其 是 沙 鼠 模 型 的 制 作 方 法 、 优 缺点及 应用 领域 ， 将 近 年 来 国 内 外 相 关 研 究 文 献 进 行 较 为 系 统 的梳 理 和综 述 。
【 关键词 】 沙鼠 ； 脑 缺 血 ；动 物 模 型 ； 应 用
【 中图分类 号】Ｒ ７ ４ ３ ． ３ １
【 文献标识码 】Ａ
【 文章编号 】１ ０ ０ ５ － ４ ８ ４ ７ （ ２ ０ １ ３ ）０ ６ － ０ ０ ７ ９ ． ０ ５
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
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Ｄｅ ｃ ｅ ｍｂ ｅ ｒ ， ２ ０１ ３ Ｖ ｏ １ ． ２ｌ ＮＯ ．６
第 ２ ｌ 卷
第 ６期
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