儿茶药材化学成分分析_反相高效液相色谱法测定儿茶中儿茶素和表儿茶素的含量
高效液相色谱法测定植物果实中儿茶素、表儿茶素和原花青素B2
高效液相色谱法测定植物果实中儿茶素、表儿茶素和原花青素B2胡凤;娄大伟;祝波;连丽丽;任红;金丽;陈晓影;杨巧玲【摘要】提出了高效液相色谱法测定植物果实中儿茶素、表儿茶素和原花青素B2.样品经乙醇(6+4)溶液索氏提取后,用固相萃取技术对提取液进行净化.以SinoChrom ODS C18色谱柱为分离柱,以乙腈-0.1％((φ))磷酸溶液(15+85)为流动相进行洗脱,检测波长为280 nm.3种目标分析物质量浓度的线性范围为5.0～100.0 mg·L-1,方法的检出限(3S/N)在1.03～2.38 mg·L-1之间.对样品进行加标回收试验,回收率在83.6％～98.5％之间,测定值的相对标准偏差(n=3)在0.4％～2.1％之间.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2015(051)004【总页数】4页(P489-492)【关键词】高效液相色谱法;儿茶素;表儿茶素;原花青素B2【作者】胡凤;娄大伟;祝波;连丽丽;任红;金丽;陈晓影;杨巧玲【作者单位】吉林化工学院化学系,吉林132022;东北师范大学化学学院,长春130024;吉林化工学院化学系,吉林132022;吉林化工学院化学系,吉林132022;吉林化工学院化学系,吉林132022;吉林大学化学学院,长春130012;吉林化工学院化学系,吉林132022;吉林化工学院化学系,吉林132022;吉林化工学院化学系,吉林132022;吉林大学化学学院,长春130012;吉林化工学院化学系,吉林132022;东北师范大学化学学院,长春130024【正文语种】中文【中图分类】O657.7原花青素(OPC)是植物界中广泛存在的一大类多酚类化合物,它是由不同数量的儿茶素或表儿茶素缩合而成,最简单的原花青素是儿茶素或表儿茶素自身缩合或儿茶素与表儿茶素共同形成的二聚体[1]。
原花青素具有多种药理活性,是一种天然的自由基清除剂和抗氧化剂,具有抗衰老、抗肿瘤、抗癌变,预防心脑血管疾病,预防动脉粥样硬化等功能[2-3]。
西双版纳产儿茶药材儿茶素含量的测定
西双版纳产儿茶药材儿茶素含量的测定目的：测定云南西双版纳产儿茶药材中儿茶素的含量。
方法：采用反相高效液相色谱法，以儿茶素为对照品。
结果：按选定的色谱条件，儿茶素在0．6125～9．8μg范围内线性良好，加样回收率为99．6％，RSD为1．8％(n＝5)；儿茶样品检测含量在14．95～15．84％范围内。
结论：云南西双版纳产儿茶药材儿茶素含量在15．37％左右，有很高的药用价值和经济价值。
标签：儿茶素；反相高效液相色谱法；西双版纳儿茶以豆科植物儿茶树Acacia catechu(L)Willd去皮后的心材煎汁浓缩而成的干燥浸膏入药。
儿茶为云南特产的“南药”，是我国民族药中最早收载《中国药典》的正品中药之一。
也是我国历史上有记载的进口“南药”品种之一。
《中国药典》[1]收载儿茶的功能是收湿生肌敛疮。
主治溃疡不敛，湿疹，口疮，跌打伤痛，外伤出血。
儿茶素类化合物具有明显的清除体内自由基、阻断N－亚硝基化合物形成、抑制脂氧化酶活性和脂质过氧化物作用，并有防突变、防癌等药理活性。
儿茶在国外主产于印度、印尼及缅甸；国内主产于云南西双版纳，广西有少量栽培。
儿茶主要含有儿茶鞣酸(Catechutannic acid)20％～50％，儿茶素(d－catechin)2％～20％，表儿茶素(epicatechin)，儿茶红(Catechred)，槲皮素，树胶等[2]。
西双版纳傣族称儿茶为“西谢”(傣语)，有悠久的栽种历史。
为了更好地开发利用，笔者用反相高效液相色谱法[3～5]，按选定的色谱条件，对云南西双版纳产区儿茶药材6批市售来源的儿茶膏以及自制的儿茶膏进行了儿茶素含量测定。
1仪器与试药岛津LC－20AT(二元泵，无柱温箱，温度主要靠空调调节)；电子分析天平FA2004200g／0．1mg(上海衡平仪器厂)；对照品(+)－CATECHIN98％(SIGMA)；乙腈(HPLC级，美国天地)；甲醇(HPLC级，美国天地)；磷酸(分析纯，国产)；0．45um微孔过滤膜。
高效液相色谱快速测定茶叶中儿茶素的含量
高效液相色谱快速测定茶叶中儿茶素的含量罗晓明;蒋雪薇【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2003(020)001【摘要】分析了酸的种类及pH对高效液相色谱(HPLC)法测定表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表没食子儿茶素(EGC)、儿茶素(C)和咖啡因的影响,实验表明:酸尤其是乙酸不仅能改善各组分的峰形,而且对保留时间和出峰顺序均有较大的影响.确定了简单、快速分析5种儿茶素及咖啡因的高效液相色谱分析方法.采用C18反相柱,水-甲醇-乙酸(73.0/23.0/2.0)为流动相,在流速为1.0 mL*min-1,柱温30℃,检测波长280 nm时等度洗脱分析样品,分析时间仅为25 min, 线性范围为0.8～90 mg*mL-1(r=0.998～0.999),回收率为98.2%～100.3%,检测限为5～10 ng.【总页数】3页(P46-48)【作者】罗晓明;蒋雪薇【作者单位】长沙电力学院分析测试中心,湖南,长沙,410015;长沙电力学院分析测试中心,湖南,长沙,410015【正文语种】中文【中图分类】TS202;O657.72【相关文献】1.高效液相色谱法测定茶黄酊中儿茶素和表儿茶素的含量 [J], 刘刚;谭生建;姜韧;张华2.高效液相色谱法测定茶叶中儿茶素含量 [J], 林俐莎;葛建;杨晶晶;韩帅玮琦;邓丽娟;韩宝瑜3.反相高效液相色谱法测定青荚叶中表儿茶素含量 [J], 刘利娥;李红萍;吴予明;刘洁;于斐;张洪权4.高效液相色谱法测定茶叶中儿茶素含量的不确定度评定 [J], 罗凡;费学谦;丁明5.高效液相色谱法对"黄金菊"茶中儿茶素和氨基酸组分含量的测定 [J], 江新凤;李琛;石旭平;蔡翔;岳翠男;李文金;杨普香因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定茶叶中儿茶素含量
高效液相色谱法测定茶叶中儿茶素含量林俐莎;葛建;杨晶晶;韩帅玮琦;邓丽娟;韩宝瑜【摘要】Objective To establish a method for determination of three kinds catechin in tea and compare content of which from different species of tea in current market. Methods The content of three kinds of catechin was measured by modified HPLC method and difference of which was tested. The determination was performed on Hypersil BDS C18( 250 mmx 4. 6 mm,5 |xm )column with acetonitrile-0. 1% citric acid ( 10 '. 90 )as mobile phase at detection wavelength of 280 nm. And the column temperature was set at 30 °C and the wave length was 280 nm. Results The good linear relationship of three kinds of catechin occurred in the range of 2-400 mg ■ L" ( r>0. 999 ). And the average recoveries were more than 99. 0% and RSD were less than 2. 0% . Conclusion There was great difference in the content of catechin from five species of tea. It is suggested to further study and complete picking,processing and preserving of tea and formulate scientific and resonable quality standard.%目的建立茶叶中3种儿茶素检测方法,比较目前市场不同品种茶叶中儿茶素含量差异性.方法采用改进的高效液相色谱(HPLC)法测定了不同茶叶中3种儿茶素的含量,对5个不同品种茶叶进行了儿茶素含量差异性检查.色谱柱为Hypersil BDS C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)柱;流动相为乙腈:0.1%柠檬酸溶液＝10:90;柱温30 ℃,波长280 nm.结果改进的HPLC方法测定3种儿茶素在2～400 mg·L-1范围内线性关系良好(r＞0.999),平均回收率＞99.0%,精密度＜2.0%.结论不同品种茶叶中儿茶素含量变化差异性较显著.建议进一步研究和完善茶叶的采摘、加工及贮存等流程,并制定出科学、合理的质量标准.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2011(030)012【总页数】3页(P1639-1641)【关键词】茶叶;儿茶素;色谱法;高效液相【作者】林俐莎;葛建;杨晶晶;韩帅玮琦;邓丽娟;韩宝瑜【作者单位】中国计量学院药学系,杭州,310018;中国计量学院药学系,杭州,310018;浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室,杭州,310018;中国计量学院药学系,杭州,310018;中国计量学院药学系,杭州,310018;中国计量学院药学系,杭州,310018;浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室,杭州,310018【正文语种】中文【中图分类】R282.71;R927.2儿茶素、咖啡因等为茶叶以及茶制品中有效成分，目前关于儿茶素的研究主要集中在茶叶及其制品中含量检测、生物活性[1]，国内外大量研究表明儿茶素具有抗癌、抗突变、预防和治疗心脑血管系统疾病以及调节内分泌、免疫系统等生物活性[2-8]，同时对机体内生物代谢酶、肺损伤等也具有抑制活性[9]，由此将对机体的肝解毒功能及药物的联合应用产生重要影响。
儿茶药材化学成分分析_反相高效液相色谱法测定儿茶中儿茶素和表儿茶素的含量
柠檬酸 、 N 、 N - 二甲基甲酰胺 , 四氢 呋喃均为分析纯 。
儿茶素对照品 (纯度 > 98 %) 及表儿茶 素对照品 (纯度 96 %) 购自 Sigma 公司 。 2 分析条件的确定 211 色谱条件 色谱柱 : Phenomenex ODS (2) 柱 (5μm , 416 mm ×150 mm) ; 理论塔 板数 按 儿 茶 素 计 算 大 于 3000 。流 动 相 : 0104mol·L - 1 柠檬酸 - N , N2二甲基甲酰胺 - 四 氢 呋 喃 ( 45 ∶8 ∶2 ) , 流 速 : 018 mL · min - 1 。柱 温 : 35 ℃。检 测 波 长 : 280 nm 。 进样量 : 5～10μL 。灵敏度 : 6 。在本色谱条 件下 , 对照品与样品色谱图见图 1 。
图 1 儿茶 HPL C 色谱图 A1 对照品 B1 样品
11 儿茶素 21 表儿茶素
212 线性关系试验 精密称取儿茶素对照品 1128 mg 及表儿茶素对照品 3164 mg , 分别 置于 10 mL 容量瓶中 , 加甲醇超声溶解并稀
3 本项研究由九五国家重点科技攻关项目资助 (编号 962903202202)
135 (本文于 1998 年 5 月 26 日收到)
Study on Chemical Composition of Catechu —Quantitative Determination of Catechin and Epicatechin by RP - HPLC
Wang Gangli , Yu Jiandong , Tian Jingai and Zhang Ji
高效液相色谱法测定黏膜溃疡含片中儿茶素和表儿茶素的含量
高效液相色谱法测定黏膜溃疡含片中儿茶素和表儿茶素的含量【摘要】目的建立黏膜溃疡含片中儿茶素和表儿茶素的含量测定方法。
方法采用高效液相色谱法，以0.04 mol·L-1枸橼酸N，N二甲基甲酰胺-四氢呋喃（45∶8∶1）为流动相，检测波长265 nm。
结果儿茶素和表儿茶素分别在0.103～2.568μg（r=0.999 9）和0.011～0.275 μg（r=0.999 9）范围内线性关系良好，平均回收率分别为102.17%和99.84%，RSD分别为1.69%和1.44%。
结论该方法简便、准确、重现性好，可用于该制剂的质量控制。
【关键词】黏膜溃疡含片儿茶素表儿茶素高效液相色谱法Determination of Catechin and Epicatechin in NianMoKuiYang Buccal Tablet by HPLCAbstract：ObjectiveTo establish a determination method for Catechin and Epicatechin in NianMoKuiYang Buccal Tablet. MethodsHPLC method was selected. The mobile phase was 0.04 mol·L-1 citric acid-N,N dimethylformamide tetrahydrofuran（45∶8∶1）.The detection wavelength was set at 265 nm.ResultsThe linear ranges for Catechin and Epicatechin were 0.103～2.568 μg（r=0.999 9）and 0.011～0.275μg（r=0.999 9）,respectively. Its average recoveries were 102.17% with RSD of 1.69% and 99.84% with RSD of 1.44%, respectively. ConclusionThe method is simple, reliable and reproducible. It can be used for quality control of NianMoKuiYang Buccal Tablet.Key words：NianMoKuiYang Buccal Tablet；Catechin；Epicatechin；HPLC黏膜溃疡含片由儿茶、青黛、冰片共三味药组成，具有清热解毒、收敛止痛的功效，用于热毒内盛而致的咽喉肿痛、口舌生疮以及其它黏膜溃疡的治疗。
儿茶及儿茶素的研究进展
・综述与讲座・儿茶及儿茶素的研究进展尹志萍 张古英 王建军作者单位:050031 石家庄市,河北省儿童医院药剂科 儿茶,又名乌爹泥、乌垒泥、乌丁泥,为豆科植物儿茶的枝干或茜草科植物儿茶钩藤的枝叶煎汁浓缩而成的干燥浸膏。
儿茶在我国应用广泛,早在明朝,《本草述》便对其有详细记载;现代临床应用于小儿消化不良、腹泻、外用治疗溃疡、湿疹等症。
儿茶素为儿茶的主要有效成分,近年来已有的研究表明,儿茶素类物质有抗癌、抗心律失常、调血脂、抗病毒等活性,可能在防治慢性疾病过程中发挥重要作用[1-3],因此日益受到有关学者的关注。
1 化学成分及其含量测定现代化学研究已从儿茶中分得儿茶鞣酸、儿茶素、表儿茶素等。
儿茶素类化合物虽存在广泛,但含量却分布不均,而且随着品种、产地及药用部位的不同而存在着显著的差异。
如豆科儿茶和茜草科儿茶钩藤相比较,前者心材中儿茶鞣酸的含量最高可达50%,而在后者的叶和根茎中儿茶鞣酸最高只有24%;前者不同产地的6个样品中儿茶素的均量为16.05%,表儿茶素的均量为10.80%;而后者另6个样品中儿茶素的均量可达25.03%,表儿茶素的均量却仅为2.47%。
于健东等[4]分别取自洪县曼京堡(加工现场)、思茅药材公司(当地收购)、云南药材公司(进口)的儿茶样品对其进行分析。
按照《中国药典》1990年版测定,鞣质含量测定结果分别为78.5%,77%,71.5%,水分分别为15%、14.8%、14.5%,杂质含量分别为3.2%,2.8%,5.1%,为进一步探讨儿茶临床作用的物质基础,又对其宏量、微量、稀土、放射性元素进行了分析研究。
结果在宏量、微量元素分析中K 、Na 、Ca 、Zn 、Cu 、Fe 等元素的含量进口药品高于国产药品,其余元素进口药品低于国产药品。
在稀土、放射性元素分析中,各种元素进口药品均低于国产。
《中国药典》2000年版之前,药材质量标准中含量测定项均为测定儿茶中总鞣质的含量,操作繁琐,不能很好地控制药材质量。
高效液相色谱法(HPLC)测定龙香膏中儿茶素和表儿茶素的含量
高效液相色谱法(HPLC)测定龙香膏中儿茶素和表儿茶素的含量蓝义琨;刘东文;潘见欢;郑芳昊【摘要】目的:采用高效液相色谱法(HPLC)建立同时测定龙香膏中儿茶素和表儿茶素含量的方法.方法:采用Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-50 mmol·L-1磷酸二氢钾水溶液(8:92)为流动相,流速1.0 mL· min-1,检测波长280 nm,柱温35℃,进样体积5μL.结果:儿茶素和表儿茶素色谱峰分离良好,无明显干扰峰;儿茶素浓度在1.5～75.0μg·mL-1(r=0.9998),表儿茶素浓度在1.0～50.0μg·mL-1(r=0.9999)范围内峰面积积分与样品浓度线性关系良好;儿茶素平均加样回收率为101.52％,RSD为3.21％,表儿茶素平均加样回收率为99.7％,RSD 为2.49％;受试样品在24 h内儿茶素和表儿茶素含量无明显变化.3批受试样品的儿茶素平均含量为5.34 mg·g-1,表儿茶素平均含量为4.27 mg·g-1.结论:本实验建立的HPLC法经方法学验证,可用于龙香膏中儿茶素和表儿茶素含量的同时测定.【期刊名称】《内蒙古中医药》【年(卷),期】2016(035)004【总页数】2页(P99-100)【关键词】龙香膏;高相液相色谱;儿茶素;表儿茶素【作者】蓝义琨;刘东文;潘见欢;郑芳昊【作者单位】佛山市中医院 528000;;佛山市中医院 528000;佛山市中医院528000【正文语种】中文【中图分类】R284龙香膏是佛山市中医院研制的院内制剂，由滑石、炉甘石和儿茶等共8味药材组成，具有收湿敛疮、散肿消结、解毒生肌的功效，临床主要用来治疗湿热肿毒、疮疡不敛等。
龙香膏原处方中滑石、炉甘石所占比例较大，但是作为矿物药，自身质量评价存在一定缺陷，目前尚无法作为龙香膏质量的评价指标［1］。
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Abstract Objective : To determine two component s catechin and epicatechin in Catechu . Method : Using RP - HPL C wit h catechin and epicatechin as standards1 Results : According to t he selected chromatograp hic conditions , t he linear range of t hese two compounds are 01256～1128 μg and 01728～31641μg respectively1 The average recoveries of catechin and epicatechin are 10011 % and 9610 % , RS D are 214 % and 217 % ( n = 5 ) , respectively1Conclusion : The met hod is easy and rapid , wit h good repeatability1 Key words Catechu , catechin , epicatechin , RP - HPL C
1816 2612 1612 1116 1912
1112 2194 1219 7156 1412
本所馆藏 (进口 15 5 茜草科
496025)
3012 1157
16 5 豆科 缅甸 17 5 豆科 缅甸 18 5 茜草科 友谊医院 (进口) 19 5 茜草科 天坛医院 (进口)
1512 1515 2214 2418
关键词 儿茶 儿茶素 表儿茶素 反相高效液相色谱法
儿茶 ( Catechu) 为传统药物 , 中国药典 (1995 年版一部) 收载的儿茶为豆科金合欢 属植物儿茶树 A cacia catechu (L1) Willd1 去 皮后的枝干煎汁浓缩而成的干燥浸膏[1 ] , 卫 生部进口药材质量标准收载有除豆科儿茶外 , 还有 茜 草 科 钩 藤 属 植 物 儿 茶 钩 藤 U ncaria gam bier Roxb1 带叶嫩枝煎汁浓缩而成的干 燥浸膏 , 商品上前者称为儿茶膏 , 后者称为 棕儿茶[2 ] 。现有的药材质量标准中含量测定 项均为测定儿茶中总鞣质的含量 , 操作繁琐 , 不能很好地控制药材质量 。药理研究表明 , 儿茶素类化合物具有明显的清除体内自由基 、 阻断 N - 亚硝基化合物形成 、抑制脂氧化酶 活性和脂质过氧化物作用 , 并有防突变 、防 癌等药理活性[3 ] 。本文采用反相高效液相色 谱法 , 按选定的色谱条件 , 同时测定豆科和 茜草 科 ( 进 口) 儿 茶 药 材 中 儿 茶 素 ( cate2 chin) 及表儿茶素 (epicatechin) 的含量 。该 法操作简便 , 灵敏度高 , 分离度好 , 适用性 强 , 可用于检测和控制该药的内在质量 。 1 仪器和试药
提取方法的选择 : 由于儿茶素及表儿茶 素为同分异构体 , 儿茶素经长时间加热易发 生差向立体异构化反应[4 ] , 使表儿茶素向儿 茶素转化 。实验也表明 , 加热回流提取后提 取液中的儿茶素含量较高 , 表儿茶素的含量 较少 。故采用室温条件下超声提取 , 避免了
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因加热对样品测定产生的影响 。 412 曾采用甲醇 - 水 (28∶72 , 冰醋酸调 p H 至 310) , 乙腈 - 011 %磷酸 (20∶80) 等作为 流动相 , 但分离效果不好 , 以 0104 mol·L - 1 柠檬酸 - N , N2二甲基甲酰胺 - 四氢呋喃 (45∶8∶2) 为流动相 , 样品可以得到较好的分 离。 413 由于儿茶素类化合物在加热条件下不稳 定 , 我们曾对对照品溶液和供试品溶液的稳 定性进行考察 。结果表明 : 为保证测定工作 的准确性 , 对照品溶液最好在制备的当天使 用 , 如果测定工作不能在当天完成 , 应将对 照品溶液在低温冰箱中保存 (2～3 d) 。但时 间不宜过长 , 因长时间放置后 , 溶液颜色会 逐渐变深 (可能系由于化合物发生缔合反应 所致) ; 由于供试品溶液的提取方法较为简 单 , 测定周期较短 (40 min) , 通常在 1 个工 作日内可完成 3～4 批样品的测定 , 故对供试
19 (2) , 1999
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释至 刻 度 , 摇 匀 , 各 吸 取 2 、4 、6 、8 、10 μL , 进样 测 定 , 以 对 照 品 的 含 量 X (μg ) 对峰面积积分值 Y 作图 , 各得到一条直线 。 结果表明 : 儿茶素及表儿茶素分别在 01256 ～1128 、01728 ～31641 μg 范围内线性关系 良好 , 2 种成分的回归方程分别为 : Y = 61111 ×106 X + 215 ×104 r = 019999 Y = 71296 ×105 X - 218 ×103 r = 019998 213 精密度考察 取同一样品溶液反复进样 5 次 (每次 5 μL ) 进行测定 , 计算 。结果儿 茶素 、表儿茶素峰面积积分值的 RS D 分别 为 319 %、412 %。 214 重现性考察 取儿茶样品 6 份 , 每 份 0102 g , 分别精密称定 , 置 50 mL 容量瓶中 , 加甲醇 - 水 (1∶1) 40 mL 超声 20 min 溶解 , 并以甲醇 - 水 (1 ∶1) 稀释至刻度 , 溶液过 0145μm 滤膜 , 精密吸取此溶液 5μL , 进样 , 测定 , 计算儿茶素和表儿茶素的含量 。结果 儿茶素及表儿茶素含量的 RS D 分别为 112
药物分析杂志
品采取的方法为制备的当天测定 。 414 据从事儿茶产地加工的人员介绍 : 该药 材加工方法系选用新鲜砍伐的植物树干 , 立 即砍成碎块 , 加水煎煮 8 h , 浓缩水煎液后制 成 。如木材放置一段时间后加工 , 药材质量 明显下降 。表 1 中 7 号样品系我们选用陈旧 木材 (放置 1 年以上) 按上述方法加工提取 所制 , 其儿茶素类化合物的含量明显较其它 样品低得多 。可见儿茶素类化合物的含量与 儿茶药材质量有着直接的关系 。
图 1 儿茶 HPL C 色谱图 A1 对照品 B1 样品
11 儿茶素 21 表儿茶素
212 线性关系试验 精密称取儿茶素对照品 1128 mg 及表儿茶素对照品 3164 mg , 分别 置于 10 mL 容量瓶中 , 加甲醇超声溶解并稀
3 本项研究由九五国家重点科技攻关项目资助 (编号 962903202202)
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茜草科 (进口)
2416 2118
7 10 豆科 药材自制
219 1183
8 5 茜草科 江西樟树 (进口) 2118 1192
长沙制药二厂提供
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茜草科 (进口)
2418 2126
10 5 豆科 云南红河 11 5 茜草科 云南 (进口) 12 5 豆科 云南 13 5 豆科 成都药材公司 14 5 豆科 云南思茅
135 (本文于 1998 年 5 月 26 日收到)
Study on Chemical Composition of Catechu —Quantitative Determination of Catechin and Epicatechin by RP - HPLC
Wang Gangli , Yu Jiandong , Tian Jingai and Zhang Ji
%、119 %。 215 回收率的测定 精密称取儿茶素对照品 16107 mg 及表儿茶素对照品 13121 mg , 置 25mL 容量瓶中 , 以甲醇 - 水 (1∶1) 超声溶 解并稀释至刻度 , 摇匀即得对照品溶液 。取 已知含量的儿茶样品 5 份 , 每份 0101 g , 分 别精密称定 , 精密加入对照品溶液 3 mL , 按 “214”项下从 “置 50 mL 容 量 瓶 中”起 操 作 , 进样 10 μL , 测得儿茶素及表儿茶素的 平 均 回 收 率 分 别 为 10011 % 和 9610 % , RS D 分别为 214 %和 217 % , n = 5 。 3 样品测定
取实验用样品各 2 份 , 每份 0102g , 照 “214”项下方法操作 , 进样 5～10 μL , 测定 结果见表 1 。 4 讨论 411 提取方法的确定
提取溶剂的选择 : 虽然儿茶素及表儿茶 素同为黄酮化合物 , 但它们的母核上连有 5 个酚羟基 ,增加了它们在水和强极性溶剂中
表 1 儿茶中儿茶素及表儿茶素的含量
PE L C - 200 高 效 液 相 色 谱 仪 ; L C295 紫外可见检测器 ; HP3295 积分仪 。
柠檬酸 、 N 、 N - 二甲基甲酰胺> 98 %) 及表儿茶 素对照品 (纯度 96 %) 购自 Sigma 公司 。 2 分析条件的确定 211 色谱条件 色谱柱 : Phenomenex ODS (2) 柱 (5μm , 416 mm ×150 mm) ; 理论塔 板数 按 儿 茶 素 计 算 大 于 3000 。流 动 相 : 0104mol·L - 1 柠檬酸 - N , N2二甲基甲酰胺 - 四 氢 呋 喃 ( 45 ∶8 ∶2 ) , 流 速 : 018 mL · min - 1 。柱 温 : 35 ℃。检 测 波 长 : 280 nm 。 进样量 : 5～10μL 。灵敏度 : 6 。在本色谱条 件下 , 对照品与样品色谱图见图 1 。
进样量
编号
种类
/μL
来源
含量/ % 儿茶素 表儿茶素
1 5 豆科 云南西双版纳
2016 1217