第三章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全-临床执业医师考试医学微生物学重点培训讲义
微生物学第03章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全
实验室工作人员应掌握实验室技术规范、 操作规程、生物安全防护知识和实际操作技 能。应有符合要求的防护用品，应建立健康 档案；进行预防接种。
实验室应有科学、严格的管理制度，定 期对实验室设施设备、材料等进行检查、维 护和更新，应对废水、废气以及其他废物进 行合理处置，防止环境污染。
生物安全
三、实验室感染的控制以及
整理课件
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（二）室内空气消毒灭菌
1.物理消毒法 ①紫外线照射（1.5W/m3，1h）最常用；②滤过除菌： 空气通过孔径小于0.2μm的高效过滤装置以除去细菌 和带菌尘埃。
2．化学消毒法 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸①过氧乙酸喷雾、熏蒸； ②过氧化氢喷雾；③二氧化氯溶液喷洒；④中草药点 燃烟熏。
（三）手和皮肤的消毒
级别
处理对象
一级 二级 三级
对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植 物致病的致病因子。
对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病 因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害，具有 有效的预防和治疗措施。
对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使 人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物和环境具 有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施。
病原微生物所致的安全问题，如病原微 生物实验室的安全隐患、生物武器、生物恐 怖、重大传染病的暴发流行等，也是人类社 会所面临的最现实的生物安全问题。
病原微生物实验室生物安全的核心是 防扩散和防感染。
关于病原微生物实验室生物安全，我 国法令包括对病原微生物的分类管理，对实 验室的分级管理，实验室感染的控制以及监 督和法律责任等。
牛奶、酒类、饮料
整理课件
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煮沸消毒法
l 原理
第3章消毒灭菌与病原微生物PPT课件
–快速周转医疗器械 内窥镜, 牙科器械等。瞬时 灭菌、微波灭菌等。
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二 室内空气消毒灭菌
–物理消毒 紫外线照射 1.5w/m3 1hr,空气物体表面。 滤过除菌法 0.2um高效过滤,除去尘埃。
–化学消毒 过氧乙酸喷雾 0.5%水溶液30ml/m3 1hr。 过氧化氢喷雾 0.3%溶液,30ml/m3 1hr。 二氧化氯熏蒸 水溶解饱合液自然逸散。 中药烟熏
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二、 化学消毒灭菌法
许多化学药物能影响细菌的化学组成、物理 结构和生理活动，从而发挥防腐、消毒甚至杀菌 作用。这些化学药物称为化学消毒剂。一般对人 体组织有害，只能外用或用于环境的消毒。
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***化学消毒剂的杀菌机制
①促进菌体蛋白质变性或凝固 如酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、醛类等 ②干扰细菌的酶系统和代谢 破坏蛋白与核酸的基团，如某些氧化重金属盐类 与细菌蛋白的-SH基结合； ③损伤细菌的细胞膜 如酚类、表面活性剂、脂溶剂等能降低细菌胞膜 和病毒包膜的表面张力并增加其通透性。
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手和皮肤的消毒
–医护人员带菌,院内感染重要途径,30%。 –勤洗手,会洗手,肥皂,水;乙醇,次氯酸钠。
用以消毒的药品称为消毒剂。
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防 腐 (antisepsis)
体外防止或抑制细菌生长繁殖的方法。 用以防腐的药品称为防腐剂。
同一化学药品在高浓度为消毒剂，低浓度时常 为防腐剂。
清 洁（cleaning)
除去尘埃和一切污秽以减少微生物数 量的过程。
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无 菌 (asepsis)
不存在任何活菌、多是灭菌的结果。
第3章
消毒灭菌与病原微生物 实验室生物安全
第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全
三）、Filtration 过滤 ）、
• sterilize solutions that may be damaged or denatured by high temperatures or chemical agents
四）、干燥与低温抑菌法
二、 化学消毒灭菌法 （Chemical method for sterilization） ）
第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全 章
第一节 消毒灭菌的常用术语
Basic terms
• • • • • sterilization灭菌 disinfection消毒 Antisepsis 防腐 Bacteriostasis抑菌 Asepsis 无菌
1、消毒(disinfection) ： 杀死物体上病原微生物的方法,称为消 毒。(不一定能杀死含芽胞的细菌和非病原微生物) Disinfection (消毒):
(一)干热灭菌法(dry heat sterilization) 干热灭菌法(dry 1. 原 理 : 脱 水 干 燥 和 大 分 子 变 性 。 mechanism: The cells get dried through dehydration(脱水）. 脱水） 脱水 2.方法: 方法: ⑴焚烧（burn ）; 焚烧（ 用于微生物实验的接种环和试管口的灭菌; ⑵烧灼（cautery ）:用于微生物实验的接种环和试管口的灭菌; 烧灼（ 烤箱灭菌;160℃--170 170℃ 小时;适用于高温下不 ⑶干烤（bake ）:烤箱灭菌;160℃--170℃,2小时;适用于高温下不 干烤（ 变质、不损坏、不蒸发的物品,例玻璃器皿、瓷器、 变质、 不损坏、 不蒸发的物品, 例玻璃器皿 、瓷器 、 玻璃注射器等 的灭菌。 的灭菌。 ⑷ 红外线（ infrared):是一种 0.77-1000µm 波长的电磁波， 其中1红外线 （ 是一种0 77-1000 m 波长的电磁波 ， 其中 1 是一种 10µm波长的热效应最强，但只能加热物体表面，温度与时间同干烤。 10 m波长的热效应最强，但只能加热物体表面，温度与时间同干烤。
第三章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全
化学消毒剂的种类
（一）高效消毒剂 次氯酸钠、漂白粉） 1.含氯消毒剂 （次氯酸钠、漂白粉） 过氧化氢、过氧乙酸） 2.过氧化物消毒剂 （过氧化氢、过氧乙酸） 戊二醛、甲醛） 3.醛类消毒剂 （戊二醛、甲醛） 4.环氧乙烷 （二）中效消毒剂 1.含碘消毒剂 2.醇类消毒剂 （三）低效消毒剂 苯扎溴铵） 1.季铵盐类消毒剂 （苯扎溴铵） 季铵盐类消毒剂 2.氯已定 3.高锰酸钾 （碘酊、碘伏） 碘酊、碘伏） （乙醇、异丙醇） 乙醇、异丙醇）
层流室
无菌手术室
（四） 干燥与低温抑菌法
干燥：细菌在干燥的环境中失去大量水分， 干燥：细菌在干燥的环境中失去大量水分，新陈代谢便会发生障
碍，甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。 甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。
低温：低温下，细菌代谢活动降低到最低水平，生长繁殖停止， 低温：低温下，细菌代谢活动降低到最低水平，生长繁殖停止，
但仍可长时间保持活力。 但仍可长时间保持活力。 常用作保存细菌菌种，冷冻真空干燥法可避免解冻时对细菌的损 常用作保存细菌菌种，冷冻真空干燥法可避免解冻时对细菌的损 是目前保存菌种的最好方法。 伤，是目前保存菌种的最好方法。
菌种保存管
（五）化学消毒灭菌法 化学消毒灭菌法
杀菌机制 促进菌体蛋白质变性或凝固。 促进菌体蛋白质变性或凝固。 干扰细菌的酶系统和代谢。 干扰细菌的酶系统和代谢。 损伤细菌的细胞膜，使细胞膜通透性增加，胞外液内渗， 损伤细菌的细胞膜，使细胞膜通透性增加，胞外液内渗， 细菌裂解。 细菌裂解。
（三）滤过除菌法
滤菌器(filter)----液体除菌 液体除菌 滤菌器
① ② ③ ④
薄膜滤菌器 玻璃滤菌器 石棉滤菌器 素陶瓷滤菌器
病原微生物第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全习题与答案
第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全一、选择题【A型题】1. 杀灭包括芽胞的所有微生物的方法称作：A.消毒B.无菌C.灭菌D.灭活E.防腐2. 判断彻底灭菌的依据是：A.细菌繁殖体被完全消灭B.芽胞被完全消灭C.细菌菌毛蛋白变性D.鞭毛蛋白被破坏E.细菌的荚膜被破坏3. 热力灭菌的方法中，效力最强的是：A.煮沸法B.干烤C.巴氏消毒法D.使用流通蒸气E.使用103.4kPa高压蒸气4. 去除血清标本中污染的细菌常用：A.巴氏消毒法B.紫外线照射法C.煮沸法D.滤过除菌法E.高压蒸气灭菌法5. 外科手术敷料使用前宜采用的灭菌方法是：A.干烤B.巴氏消毒法C.紫外线照射法D.流动蒸气消毒法E.高压蒸气灭菌法6. 将牛乳加热71.7 C经15-30S的目的是:A.消毒B.灭菌C.防腐D.灭活病毒E.保鲜7. 细胞培养用24孔塑料板适用下列哪种杀菌法？A.煮沸法B.紫外线照射法C.红外线照射法D.高压蒸气灭菌法E.间歇灭菌法8. 紫外线的杀菌机制是：A.破坏细菌DNA勾型B.破坏酶系统C.破坏菌体蛋白D.干扰蛋白质合成E.破坏RNA9. 紫外线杀菌的最佳波长为：A.200nmB.265nmC.300nmD.560nmE.650nm10. 属于表面活性剂的消毒剂是：A.高镒酸钾B.来苏C.甲醛D.0.05%〜0.1 %杜灭芬E.龙胆紫11. 漂白粉属于：A.酚类消毒剂B.醇类消毒剂C.氧化剂消毒剂D.表面活性剂E.酸碱类12. 用于除菌的薄膜滤菌器，其滤膜孔径应为：A.O.12 〜0.25(1 mB.O.22 〜0.45mC.O.52 〜0.65mD.0.72 〜0.85mE.O.95 〜1.0m【X型题】1. 可以杀灭芽胞的方法是：A.煮沸法2小时B.巴氏消毒法C.流动蒸气消毒法15〜30分钟D.间歇蒸气灭菌法E.高压蒸气灭菌法2. 关于紫外线杀菌，正确的叙述是：A.其杀菌与波长有关B.可直接破坏细菌的DNA勾型C.穿透力弱，故适用于空气或物体表面消毒D.可杀死细菌的芽胞 E.波长265〜266m杀菌作用最强3. 化学消毒剂的杀菌机制是：A.促使菌体蛋白变性B.破坏细菌DNA勾型C.干扰细菌的酶系统和代谢D.损伤菌细胞膜 F.使菌体蛋白凝固4. 影响消毒剂消毒效果的因素有：A.消毒剂浓度、性质与作用时间B.温度C.酸碱度D.菌种与生长期3. 61.1 〜62.8 C 30min 71.7 C 15〜30s牛乳E.环境中有机物和其他因素的影响5. 在温度和时间相同的情况下，湿热杀菌效力比干热杀菌效力大的原因是 A.湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 B.湿热灭菌能够杀死细菌芽胞 C.湿热蒸气的穿透力比干热强 D.湿热灭菌对细菌DN 础害较大E.湿热的蒸气有潜热存在二、填空题1. 消毒(disinfection)2. 灭菌(sterilization)3. 抑菌(bacteriostasis)4. 无菌(asepsis)5. 无菌操作(asepticteChnique)6. 防腐(antisepsis)四、问答题1. 简述高压蒸气灭菌法的原理和用途。
《医学微生物学》第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全练习题及答案
《医学微生物学》第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全练习题及答案【知识要点】1.掌握：（1）消毒、灭菌、清洁、防腐、无菌及无菌操作的概念。
（2）消毒灭菌的运用（3）病原微生物实验室的分级2.熟悉：常用的高压蒸气灭菌法、巴氏消毒法等热力杀菌法日光与紫外线杀菌机理及其应用；常用的化学消毒剂的种类及其应用。
实验室感染的控制以及监督和法律责任。
3.了解：热力灭菌法的种类和应用范围；常用化学消毒剂的作用机制及影响作用的因素。
【课程内容】第一节消毒灭菌常用术语第二节消毒灭菌的方法一、物理消毒与灭菌（一）热力灭菌法（二）辐射杀菌法（三）滤过除菌法（四）超声波消毒法（五）干燥与低温抑菌法二、化学消毒灭菌法（一）化学消毒灭菌法的原理（二）消毒剂的主要种类第三节消毒灭菌的运用一、医疗器械物品的消毒灭菌二、室内空气消毒灭菌三、手和皮肤的消毒四、黏膜消毒五、病人排泄物与分泌物的消毒灭菌六、病人污染物品的消毒七、饮水的消毒八、环境的消毒第四节影响消毒灭菌效果的因素一、微生物的种类二、微生物的物理状态三、微生物的数量四、消毒剂的性质、浓度与作用时间五、温度六、酸碱度七、有机物第五节病原微生物实验室生物安全一、病原微生物的分类二、病原微生物实验室的分级实验室感染的控制以及监督和法律责任【应试习题】一、名词解释1．防腐2．高压蒸气灭菌法3．灭菌4．无菌5．消毒6．抑菌7．巴氏消毒法8. 清洁二、填空题1．化学消毒剂杀菌或抑菌的作用机理是_______、_______和。
2．高压蒸气灭菌法的蒸气压力为_______kg／C㎡，温度达_______℃，维持时间是_______min。
3．紫外线杀菌力最强的波长为_______，常用于无菌室的_______消毒。
4．预防新生儿淋病奈瑟菌感染常用的滴眼剂是_______。
5．消毒手术包常采用的方法是______________________，其温度达到______________，维持时间是_____________________，可去除细菌及___________________。
消毒灭菌与病原微生物实验室安全
• 高压灭菌几点注意事项：
二、物理消毒灭菌法： （二）电磁波辐射杀菌法：
第二节 消毒与灭菌
1、日光与紫外线：
紫外线波长在265-266nm杀菌能 力最强,它能干扰DNA复制,导致细菌 变异或死亡,但穿透力弱,故只能用于 房间空气和物品表面的消毒.
第二节 消毒与灭菌
2、电离辐射
包括β和γ射线，电离射线具有较高的能量，对各种细菌均有致 死作用，机制是干扰DNA合成、破坏细胞膜、引起酶系统紊乱 等，主要用于一次性医用塑料制品消毒，食品、药品等消毒灭 菌，而不破坏其营养。
种类
2.中效消毒剂 乙醇 碘酊 碘伏
常用浓度
70%-75% 20g碘/L75%乙醇 1-2mg游离/L
用途
作用机制
医疗器械、皮肤
蛋白质变性凝
皮肤、黏膜、物表面皮肤、 固、干扰代谢
黏膜、物表面
ห้องสมุดไป่ตู้
3.低效消毒剂
苯扎溴铵（新洁尔灭）0.4%-1.6%溶液 氯已定（洗必泰）
高锰酸钾
0.5%-4.0%
1-10g/L
核心是防感染和防扩散！
二、病原微生物的分类
根据传染性和危害程度，病原微生物分为四类：
第一类是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微 生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。
第二类是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易 直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微 生物。
第三类是指能够引起人或动物疾病，但一般情况下对人、 动物或环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后 很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。
第四类是指在通常情况下不会引起人或动物疾病的微 生物。
病原微生物实验室生物安全防护水平（BSL）分级
第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全
酚类：石炭酸、来苏、 酚类：石炭酸、来苏、氯己定 醇类： 乙醇、 醇类：70%~75%乙醇、50%~80%异丙醇 乙醇 异丙醇 醛类：甲醛、 醛类：甲醛、戊二醛 重金属盐类：升汞、 硝酸银 重金属盐类：升汞、1%硝酸银 过氧化物类：过氧化氢、过氧乙酸、 过氧化物类：过氧化氢、过氧乙酸、二氧化氯 含氯消毒剂：次氯酸钠、 含氯消毒剂：次氯酸钠、次氯酸钙 含碘化合物：碘酊、 含碘化合物：碘酊、碘伏 烷化剂：环氧乙烷、甲醛、 烷化剂：环氧乙烷、甲醛、戊二醛 表面活性剂：苯扎溴铵、 表面活性剂：苯扎溴铵、氯己定 染料： 染料：龙胆紫 高锰酸钾
第四类是指在通常情况下不会引起人或动物 第四类是指在通常情况下不会引起人或动物 疾病的微生物。 疾病的微生物。
病原微生物实验室生物安全防护水平 安全防护水平（ 三、病原微生物实验室生物安全防护水平（BSL）分级 ）
级别 安全装备 处理对象 对人体、动植物或环境危害较低， 对人体、动植物或环境危害较低，不具有对 健康成人、动植物致病的致病因子。 健康成人、动植物致病的致病因子。 对人体、 对人体、动植物或环境具有中等危害或具有 潜在危险的致病因子，对健康成人、 潜在危险的致病因子，对健康成人、动植物 和环境不会造成严重危害， 和环境不会造成严重危害，具有有效的预防 和治疗措施。 和治疗措施。 对人体、动植物或环境具有高度危险性， 对人体、动植物或环境具有高度危险性，主 要通过气溶胶使人类传染上严重的甚至是致 命的疾病， 命的疾病，或对动植物和环境具有高度危害 的致病因子。通常有预防治疗措施。 的致病因子。通常有预防治疗措施。
第二节 消毒灭菌的方法
一、物理消毒灭菌法
热力灭菌法 辐射杀菌法 滤过除菌法 干燥与低温抑菌法
（一）热力灭菌法
1.干热灭菌法 干热灭菌法 焚烧；烧灼；干烤； 焚烧；烧灼；干烤；红外线 2.湿热灭菌法 湿热灭菌法 巴氏消毒法（ 巴氏消毒法（pasteurization） ） 煮沸法 高压蒸汽灭菌法（ 高压蒸汽灭菌法（autoclaving） ）
临床微生物与检验 第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全
（4）环氧乙烷
作用机理：对细菌蛋白质和核酸的烷化作用。 特点：
①为杂环类化合物，沸点10.8℃，易蒸发。气体消毒剂。
②有穿透力，杀菌广谱高效，杀灭芽胞能力强。 ③对多数物品无损害作用。 ④易燃，对人有一定毒性。空气中浓度不得超过1ppm。 用途：现已有特制的环氧乙烷灭菌箱。使用安全方便。
2.中效消毒剂—能杀灭微生物的繁殖体，结核分枝杆菌、某些
辐射杀菌法
日晒和紫外线
[原理] 日光中杀菌的成分主要是紫外线。紫外线的波长在 200～300nm时，具有杀菌作用，其中以265～266nm杀菌 力最强，易被DNA吸收。细菌DNA吸收紫外线后，其生物学 活性发生改变，同时蛋白质也光解变性，导致细菌死亡。 [特点] 紫外线穿透力弱，玻璃、尘埃、纸张、水蒸气均能阻 挡紫外线。 [应用范围] 日晒是有效的杀菌方法，用于病人的衣服、被褥、 书报等的灭菌。紫外线仅适用于手术室、婴儿室、烧伤病房、 传染病房和无菌室的空气消毒，亦可用于不耐热物品的表面 消毒。
2.熏蒸
3.二氧化氯溶液 4mg/m3
4.中草药
三、手和皮肤的消毒
（一）肥皂和流动水经常正确洗手是预防多种病原微生物感染的有效方法。 （二）被病原微生物污染时
1. 75%酒精 2. 氯己定溶液 3. 过氧乙酸 4. 次氯酸钠溶液 5. 碘伏
四、黏膜的消毒
（一）口腔黏膜 3%H2O2 （二）冲洗尿道、阴道、膀胱0.1%~0.5%氯己定溶液；1g/L高锰酸钾溶液
（1）含氯消毒剂
次氯酸钠
常用种类
二氯异氰酸尿酸钠
漂白粉
作用机理：
这类制剂遇水可产生氯（Cl2）、次氯酸（HClO）及新生态氧。 氯可氧化细菌的-SH、次氯酸（HClO）可与胞质成分作用，形成氮 -氯复合物，干扰细胞代谢。 特 点：（1）具有强大的杀菌作用。
第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全
第三章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全一、名词解释1.消毒（disinfection）2.灭菌(sterilization)3.防腐(antisepsis)4.无菌(asepsis)5.无菌操作6.生物安全二、填空1.常用的湿热消毒灭菌法有、、、和。
2.巴氏消毒法常用于和的消毒，常用的方法为℃min 或℃秒。
3.微生物实验室空气消毒常用的物理消毒法是法。
4.高压蒸汽灭菌法的蒸气压力为，温度达，维持时间是。
5.血清除菌常用的方法是。
6.常用于消毒饮水的消毒剂是和。
生石灰常用于和的消毒。
7.乙醇消毒常用的浓度是。
三、选择题1.人和动物血清的除菌宜采用A.高压蒸汽灭菌B. 间歇蒸汽灭菌法C.滤菌器过滤Ｄ.巴氏消毒法 E.煮沸消毒2.防止微生物侵入手术创口宜采用A.消毒B.灭菌C.防腐D.无菌操作E.抑菌3.关于紫外线杀菌，下述哪项不正确A.紫外线杀菌的最佳波长为265nmB.能干扰DNA合成C.常用于空气、物品表面消毒D.消毒效果与作用时间有关E.紫外线的穿透力弱，故对人体无害4.外科敷料、手术用金属器械宜采用Ａ.高压蒸汽灭菌Ｂ.紫外线照射Ｃ.煮沸消毒Ｄ.巴氏消毒法Ｅ.干烤5.判断灭菌是否彻底的主要依据是Ａ.细菌繁殖体被完全杀死 B.细菌芽胞被完全杀灭Ｃ.菌体内DNA变性Ｄ.细菌鞭毛蛋白变性Ｅ.细菌荚膜被破坏6.杀灭细菌芽胞最有效的方法是A.紫外线照射B.煮沸消毒法C.巴氏消毒法D.流通蒸气消毒法E.高压蒸气灭菌法7.能用干烤法灭菌的物品是A．瓷器 B.滤膜Ｃ.手术刀Ｄ.橡胶手套Ｅ.一次性注射器8.保存菌种最好的方法是A.4℃冰箱保存B.半固体培养基接种C.甘油盐水保存液D.-20℃冰箱保存E.冷冻真空干燥法9.预防新生儿脓漏眼常用的消毒剂是A.1％新洁尔灭B. 0.1％高锰酸钾C. 2％龙胆紫D.1％硝酸银E. 2％碘伏四、问答题1.常用的物理消毒灭菌法有哪些？分述其杀菌原理及适用范围。
2.试述化学消毒剂杀菌原理及影响消毒剂消毒灭菌效果的主要因素。
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第三章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全-临床执业医师考试医学微生物学重
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第三章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全
第一节消毒灭菌的常用术语
1、灭菌：杀灭生物体上所有微生物的方法。
2、消毒：杀死物体上或环境中的病原微生物，并不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。
3、防腐：防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。
4、无菌：无菌即不存在活菌，多是灭菌的结果。
无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。
5、清洁：减少微生物数量的过程。
第二节消毒灭菌的方法
一、物理消毒灭菌法：热力、辐射、滤过、干燥和低温等。
㈠热力灭菌法：分为干热灭菌和湿热灭菌
1、干热灭菌法：一般细菌繁殖体在干燥状态下，80-100℃经1小时可被杀死，芽胞则需要更高温度才能被杀死。
①焚烧：废弃物、尸体
②灼烧：接种环、试管口
③干烤：(160~170℃，2h)利用干烤箱灭菌，一般加热至171℃经1h或160℃ 2h或1 21℃ 16h。
适用于高温下不变质、不损害、不蒸发的器皿(如：玻璃器皿)。
④红外线(0.7~1000um波长的电磁波)：医疗器械
2、湿热灭菌法：最常用，在相同温度下湿热灭菌法比干热灭菌法效果更好，因为：ⅰ湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性;ⅱ湿热的穿透力比干热大;ⅲ湿热的蒸汽有潜热效应存在。
①巴氏消毒法：用较低的温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，以保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法(61.1-62.8 ℃ 30min 或71.7℃15-30s，主要用于牛乳消毒和酒类)。
②煮沸法(100 ℃，5min)食具、注射器等消毒
③流动蒸汽消毒法(100 ℃ 15-30min)
④间歇蒸汽灭菌法(100 ℃ 5-30min，37 ℃24h×3天)
⑤高压蒸汽灭菌法：
*压力—103.4KPa(1.05Kg/cm2)
*温度—121.3 ℃
*时间—15-20min
*效果—杀灭包括芽孢在内所有微生物
*应用—所有耐高温、高压、耐湿的物品
㈡辐射杀菌法：
①紫外线：波长240—300nm的紫外线具有杀菌作用，其中以265—266nm最强。
紫外线杀菌机理是干扰细菌DNA合成，导致细菌变异和死亡。
手术室空气消毒常采用紫外线消毒
②电离辐射：高速电子、X射线、γ射线
③微波：波长为1—1000mm的电磁波，不能穿透金属表面。
微波主要靠热效应发挥作用，且必须在有一定含水量条件下才能显示出来。
㈢滤过杀菌法
㈣干燥杀菌法
㈤低温杀菌法
二、化学消毒灭菌法
原理（填空）：⑴破坏菌体蛋白；⑵干扰细菌的酶系统和代谢；⑶改变细胞膜的通透性。