基因工程原理与应用题库
基因工程期末试题及答案
基因工程期末试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 基因工程是指利用现代生物技术手段对DNA进行操作和控制的一种技术。
2. 基因工程的主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
3. DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
4. 在基因工程中，限制性内切酶用于切割DNA分子，产生特定片段。
5. 基因工程可以产生转基因生物，通过对生物基因进行改造，使其具有特定的特性。
6. CRISPR/Cas9是一种常用的基因编辑工具，可以精确地修改基因组中的特定片段。
7. 基因工程在医学领域可以用于基因治疗，通过修复或替换异常基因，治疗遗传性疾病。
8. 在农业领域，基因工程可以用于改良作物，提高产量和抗病虫害能力。
9. PCR是一种常用的基因扩增技术，可以通过复制DNA片段来放大特定基因。
10. DNA梯度离心是基因工程中常用的分离DNA片段的方法。
二、问答题（每题10分，共30分）1. 请简要介绍基因工程的基本原理和主要方法。
基因工程的基本原理是通过对DNA进行操作和控制来改变生物的遗传性状。
其主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
基因克隆是通过将特定DNA片段放入载体中，然后转化到宿主细胞中，使重组DNA在宿主细胞中大量复制。
PCR是一种基因扩增技术，通过在DNA复制过程中加入特定引物，使特定基因片段在体外大量扩增。
DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
2. 什么是转基因生物？请举例说明。
转基因生物是指经过基因工程改造，将外源基因导入到目标生物体中，使其具有新的遗传性状的生物。
例如，将耐旱基因导入水稻，使其具有抗旱能力；将Bt毒素基因导入棉花，使其具有抗虫能力。
3. 基因工程在医学领域有哪些应用？举例说明。
基因工程在医学领域可以用于基因治疗、疫苗研发等。
例如，利用基因工程技术可以修复或替换患者体内异常基因，治疗遗传性疾病。
另外，基因工程也可以用于疫苗研发，通过基因工程技术将病原体的基因导入宿主细胞，产生病原体的抗原蛋白，从而刺激免疫系统产生抗体，用于预防传染病。
基因工程的应用练习题.docx
1.3 基因工程的应用练习题一、选择题1、下列各项中，说明目的基因完成了表达的是A、棉珠中含有杀虫蛋白基因B、大肠杆菌中具有胰岛素基因C、酵母菌中产生了干扰素 D 、抗病毒基因导入土豆细胞中2、转基因动物是指A、提供基因的动物B、基因组中增加外源基因的动物C、能产生白蛋白的动物D、能表达基因信息的动物3、抗病毒转基因植物成功表达后，以下说法正确的是A．抗病毒转基因植物，可以抵抗所有病毒B．抗病毒转基因植物，对病毒的抗性具有局限性或特异性C．抗病毒转基因植物可以抗害虫 D ．抗病毒转基因植物可以稳定遗传，不会变异4．如果通过转基因技术，成功改造了某血友病女性的造血干细胞，使其凝血功能全部恢复正常。
当她与正常男性结婚，婚后所生子女的表现型为A．儿子、女儿全部正常B．儿子、女儿中各一半正常C．儿子全部有病，女儿全部正常D．儿子全部正常，女儿全部有病5．若利用基因工程技术培育能固氮的水稻新品种，其在环保上的重要意义是A．减少氮肥的使用量，降低生产成本B．减少氮肥的使用量，节约能源C．避免氮肥过多引起环境污染 D ．改良土壤结构6．疗白化病、苯丙酮尿症等人类遗传病的根本途径是A．口服化学药物B．注射化学药物C．采用基因治疗D．利用辐射或药物诱发致病基因突变7．在基因诊断技术中，所用的探针DNA 分子中必须存在一定量的放射性同位素，后者的作用是A．为形成杂交的 DNA 分子提供能量B．引起探针 DNA 产生不定向的基因突变C. 作为探针 DNA 的示踪元素D．增加探针 DNA 的分子量8．下列关于基因工程应用的叙述，正确的是A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．一种基因探针能检测水体中的各种病毒C．基因诊断的基本原理是DNA 分子杂交 D ．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良9．采用基因工程的方法培育抗棉虫，下列导入目的基因的作法正确的是①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的 DNA 序列，注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA 序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA 序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵A．①②B．②③C．③④ D ．④①10．科学家能利用基因工程技术培育出特殊的西红柿、香蕉，食用后人体内可产生特定的抗体，这说明这些西红柿、香蕉中的某些物质至少应A．含有丰富的免疫球蛋白B．含有某种抗原特异性物质C．含有一些生活的病菌D．能刺激人体内的效应T 细胞分泌抗体11、切取某动物合成生长激素的基因，用某种方法将此基因转移到鲇鱼的受精卵中，从而鲇鱼比同类个体大 3 ～4 倍，此项研究遵循的原理是A．基因突变， DNA → RNA→蛋白质B．基因工程， DNA → tRNA→蛋白质C．细胞工程， DNA →RNA →蛋白质D．基因重组， DNA →RNA→蛋白质12．下列各项不属于基因工程在实际中的应用的是A．转基因抗虫棉的培育成功B．利用 DNA 探针检测饮用水中有无病毒C．培育工程菌使之能产生胰岛素D．将 C4植物细胞内的叶绿体移入C3植物细胞内13．有关基因工程的成果及应用的说法正确的是A．用基因工程方法培育的抗虫植物也能抗病毒B．基因工程在畜牧业上应用的主要目的是培养体型巨大、品质优良的动物C．基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物D．目前，在发达国家，基因治疗已用于临床实践14、运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt 基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，保护农业生态环境。
基因工程考研试题及答案
基因工程考研试题及答案试题：基因工程的基本原理和应用一、选择题（每题2分，共10分）1. 基因工程中常用的运载体是以下哪一项？A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A2. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 基因的随机插入D. 转化宿主细胞答案：C3. 在基因工程中，用于连接目的基因和运载体的酶是：A. 限制性内切酶B. DNA连接酶C. 反转录酶D. 聚合酶答案：B4. 基因工程在农业上的应用不包括以下哪项？A. 转基因作物B. 基因治疗C. 抗病抗虫植物D. 改良作物品质答案：B5. 以下哪个不是基因工程的潜在风险？A. 基因污染B. 生物安全C. 伦理问题D. 增加作物产量答案：D二、填空题（每空2分，共10分）6. 基因工程中，________是用来将目的基因插入到运载体中的酶。
答案：限制性内切酶7. 基因工程可以用于生产________，这是一种通过生物合成的具有特定功能的蛋白质。
答案：生物制品8. 基因治疗是一种将________导入到患者体内以治疗遗传性疾病的方法。
答案：正常基因9. 基因工程在环境保护方面的应用包括________和________。
答案：生物修复；污染监测10. 基因工程中，________技术可以用于检测特定基因的存在。
答案：PCR（聚合酶链反应）三、简答题（每题10分，共20分）11. 简述基因工程在医学领域的应用。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括：- 生产重组药物，如胰岛素、生长激素、干扰素等。
- 基因治疗，通过替换、修复或调控致病基因来治疗遗传性疾病。
- 生产疫苗，利用基因工程技术生产的疫苗可以更安全、高效。
- 基因诊断，通过检测特定基因或基因变异来诊断疾病。
12. 阐述基因工程中的限制性内切酶的作用及其重要性。
答案：限制性内切酶在基因工程中的作用是识别特定的DNA序列并在这些序列处切割DNA，产生特定的粘性末端。
基因工程的原理与应用例题和知识点总结
基因工程的原理与应用例题和知识点总结基因工程，这个听起来充满科技感的词汇，其实已经在我们的生活中发挥着越来越重要的作用。
它就像是一把神奇的钥匙，打开了生命奥秘的大门，让我们有能力对生物的基因进行改造和重组，从而实现各种奇妙的目标。
接下来，让我们一起深入了解基因工程的原理，并通过一些例题来巩固知识，同时总结其广泛的应用。
一、基因工程的原理基因工程，简单来说，就是在分子水平上对基因进行操作的技术。
它基于几个关键的原理：首先是“中心法则”。
我们知道，遗传信息从 DNA 传递到 RNA，再从 RNA 翻译成蛋白质，这是生命遗传信息传递的基本规律。
基因工程就是要在这个过程中进行干预。
其次，基因是具有特定碱基序列的 DNA 片段。
通过特定的工具，我们能够识别、切割和连接这些片段。
再者，不同生物的基因具有相同的化学本质，这意味着我们可以将一种生物的基因转移到另一种生物中，并使其发挥作用。
而实现基因工程操作的关键工具包括限制酶、DNA 连接酶和载体。
限制酶能够识别特定的碱基序列，并在特定的位点切割 DNA 分子；DNA 连接酶则负责将切割后的 DNA 片段连接起来；载体，如质粒、噬菌体等，能够将目的基因运送到受体细胞中。
二、基因工程的例题为了更好地理解基因工程的原理，让我们来看几个例题。
例 1：假设我们要从一种细菌中获取一个具有抗药性的基因，并将其转移到一种植物细胞中，使其获得抗药性。
首先，我们需要使用特定的限制酶来切割含有抗药基因的细菌 DNA 和植物细胞的 DNA。
然后，用 DNA 连接酶将抗药基因与植物细胞的 DNA 连接起来。
最后，通过适当的方法将重组后的 DNA 导入植物细胞。
例 2：给定一段 DNA 序列，要求找出可能的限制酶切割位点。
这就需要我们熟悉常见限制酶的识别序列，并运用相关知识进行分析。
三、基因工程的应用基因工程的应用范围极其广泛，给人类带来了诸多的好处。
在农业领域，基因工程使得我们能够培育出具有优良性状的农作物。
基因工程试题及答案解析
基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。
答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。
答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。
在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。
2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。
四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。
重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。
然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。
高中基因工程试题及答案
高中基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然选择B. 基因的人工选择C. 基因的人工重组D. 基因的自然重组答案：C2. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A3. 基因枪法属于哪种基因转移技术？A. 化学法B. 物理法C. 生物法D. 机械法答案：B4. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的自然选择答案：D5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 基因检测C. 基因编辑D. 基因克隆答案：D二、填空题6. 基因工程的核心技术是________。
答案：重组DNA技术7. 基因工程中常用的受体细胞有________和________。
答案：大肠杆菌、酵母菌8. 基因工程在农业上的应用包括________和________。
答案：转基因作物、基因改良9. 基因工程在环境保护中的应用包括________和________。
答案：生物修复、污染物降解10. 基因工程在工业生产中的应用包括________和________。
答案：生物催化剂、生物制药三、简答题11. 简述基因工程的基本原理。
答案：基因工程的基本原理是利用分子生物学技术，将目的基因从一种生物体中提取出来，然后通过重组DNA技术将其插入到另一种生物体的基因组中，使其在新的宿主细胞中表达，从而获得具有特定性状的生物体或生产特定的生物产品。
12. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括基因治疗，通过将正常基因导入患者体内以治疗遗传性疾病；基因检测，用于疾病诊断和风险评估；基因编辑，通过修改基因序列来治疗疾病；以及生产生物药物，如胰岛素、干扰素等。
四、论述题13. 论述基因工程的伦理问题及其解决途径。
答案：基因工程的伦理问题主要包括对人类基因组的修改可能带来的未知风险、基因歧视、生物多样性的减少等。
基因工程的应用(同步检测)2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3(含解析)
3.3 基因工程的应用（同步检测）一、单选题1．大豆为严格的自花传粉、闭花授粉植物。
我国是世界主要的大豆进口国家之一，大豆的产量低是一个重要的瓶颈。
下列说法错误的是（）A．我国丰富的大豆种质资源为大豆杂交育种提供了丰富的基因库B．通过培育大豆多倍体来育种是提高其产量的最合适途径C．大豆杂交育种与基因工程育种的原理都属于基因重组D．自然界中的大豆往往都是纯种，大豆间难以自然实现杂交2．我国的科研团队首次发现了高粱细胞中A T1基因编码的A T1蛋白可以调节作物的耐碱性表型，对于提高作物在盐碱地的存活率具有重要意义。
在盐碱地种植的作物会受胁迫产生过量的有害物质H2O2．图中的PIP2s为某种水通道蛋白，其磷酸化水平影响H2O2的跨膜运输，其机理如图所示。
下列叙述错误的是（）A．盐碱环境可引起大多数作物胞内液渗透压上升，吸水能力增强B．PIP2s失活的植物细胞在高渗溶液中仍可以发生质壁分离C．敲除AT1基因将导致PIP2s蛋白磷酸化被抑制，促进H2O2外排D．可以将耐碱基因的成果应用到大豆、油菜等更多的作物提高其抗逆性3．作物育种可以说是农业的“芯片工程”，下列关于育种的叙述，错误的是（）A．单倍体育种和多倍体育种分别是为了获得单倍体和多倍体新物种B．用化学阻断剂阻止受精后的次级卵母细胞释放极体（n），然后培育形成的最可能是三倍体C．转基因育种和杂交育种的主要原理都是基因重组D．植物体细胞杂交和秋水仙素处理都能实现植物不育向可育的转变4．科学家将蜘蛛的蛛丝蛋白基因导入山羊体内，得到转基因山羊，使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白，生产原理见下图。
下列叙述错误的是（）A．图中的核供体细胞来自雌羊B．导入了蛛丝蛋白基因的核供体细胞不需要进行传代培养C．形成重组细胞时来自核供体细胞的调节蛋白全部被卵细胞质中的蛋白因子替换D．为获得更多转基因山羊，可对早期胚胎进行胚胎分割5．科学家运用基因工程技术，将人凝血因子基因导入山羊的DNA中，培育出羊乳腺生物反应器，使羊乳汁中含有人凝血因子。
基因工程技术的原理与应用例题和知识点总结
基因工程技术的原理与应用例题和知识点总结一、基因工程技术的原理基因工程技术，简单来说，就是在分子水平上对基因进行操作的技术。
其核心原理包括以下几个关键步骤：1、目的基因的获取目的基因是我们想要研究或应用的特定基因片段。
获取目的基因的方法多种多样，常见的有从基因文库中筛选、通过 PCR 技术扩增以及人工化学合成等。
2、基因载体的选择基因载体就像是一辆“运输车”，负责将目的基因运送到受体细胞中。
常用的基因载体有质粒、噬菌体和病毒等。
它们具有能够在宿主细胞中自主复制、稳定存在等特点。
3、基因重组将获取的目的基因与选择好的基因载体进行连接，形成重组 DNA分子。
这个过程需要用到特定的限制性内切酶和 DNA 连接酶，以确保目的基因能够准确无误地插入到载体中。
4、重组 DNA 导入受体细胞将构建好的重组 DNA 分子导入到受体细胞中，使其能够在受体细胞内稳定遗传和表达。
导入的方法包括转化、转导、显微注射等。
5、目的基因的检测与鉴定导入受体细胞后，需要对目的基因是否成功导入、是否表达以及表达水平等进行检测和鉴定。
常用的方法有核酸分子杂交、PCR 检测、蛋白质检测等。
二、基因工程技术的应用例题1、胰岛素的生产糖尿病患者需要定期注射胰岛素来控制血糖。
传统的胰岛素提取方法产量低、成本高。
通过基因工程技术，科学家将人的胰岛素基因导入到大肠杆菌中，让大肠杆菌能够大量合成胰岛素，大大提高了胰岛素的产量，降低了成本，为糖尿病患者带来了福音。
2、转基因抗虫棉棉花在生长过程中常常受到棉铃虫等害虫的侵害。
利用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌中的 Bt 毒蛋白基因导入到棉花细胞中，使棉花能够自身合成毒蛋白，从而具有抗虫的特性，减少了农药的使用，保护环境的同时提高了棉花的产量。
3、基因治疗对于一些由于基因突变导致的遗传性疾病，如血友病、囊性纤维化等，基因治疗为患者带来了新的希望。
通过将正常的基因导入患者的细胞中，以替代或修复突变的基因，从而达到治疗疾病的目的。
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名词解释生物技术、RAPD、酶单位、载体、质粒、基因工程，退火，基因组文库，cDNA文库，PCR，转化，DNA甲基化，RFLP，ISSR，植物基因工程，感受态细胞，受体细胞，工具酶、YAC、探针、AFLP、基因芯片、质粒、基因治疗、基因打靶、基因疗法、原位杂交、分子标记、核酸分子杂交选择题（单选和多选）1、第一个作为重组DNA载体的质粒是( )(a)pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl82、Ⅱ型限制性内切核酸酶( )(a)有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列(b)仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供(c)限制性识别非甲基化的核苷酸序列(d)有外切核酸酶和甲基化酶活性(e)仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供3、在下列试剂中，那一种可以螯合Ca2+离子( )(a)EDTA (b)柠檬酸钠(c)SDS (d)EGTA4、同一种质粒DNA，以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是( )(a)OCDNA>SCDNA>LDNA (b)SCDNA>LDNA>OCDNA(c)LDNA>OCDNA>SCDNA (d)SCDNA>OCDNA>LDNA5、黏粒(cosmid)是一种人工建造的载体( )(a)它具有COS位点，因而可进行体外包装(b)它具有质粒DNA的复制特性(c)进入受体细胞后，可引起裂解反应(d)进入受体细胞后，可引起溶源化反应6、用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为( )(a)染色体DNA断成了碎片(b)染色体DNA分子量大，而不能释放(c)染色体变性后来不及复性(d)染色体未同蛋白质分开而沉淀7、根据构建方法的不同，基因文库分为基因组文库、cDNA文库等。
在下列文库中( )属cDNA文库(a) YAC文库(b) MAC文库(c) 扣减文库(d) BAC文库8、关于感受态细胞性质的描述，下面哪一种说法不正确( )(a)具有可诱导性(b)具有可转移性(c)细菌生长的任何时期都可以出现(d)不同细菌出现感受态的比例是不同的9、在利用lacZ失活的显色反应筛选法中，IPTG的作用是( )(a)诱导宿主的α肽的合成(b)诱导宿主的ω肽的合成(c)作为酶的作用底物(d)作为显色反应的指示剂10、基因工程发展史上理论上的三个重要发现是（）(a) DNA的发现(b)DNA双螺旋结构和半保留复制机理的建立(c)遗传信息传递方式（中心法则）(d)限制性内切酶和DNA连接酶的发现(e)载体的使用(f)基因的体外重组3、在下列进行DNA部分酶切的条件中，控制那一项最好?( )(a)反应时间(b)酶量(c)反应体积(d)酶反应的温度4、下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大?( )(a)质粒(b)黏粒(c)酵母人工染色体(Y AC) (d) 噬菌体(e) cDNA表达载体5、黏粒(cosmid)是一种人工建造的载体，( )(a)它具有COS位点，因而可进行体外包装(b)它具有质粒DNA的复制特性(c)进入受体细胞后，可引起裂解反应(d)进入受体细胞后，可引起溶源化反应6、关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确?( )(a)溶液I的作用是悬浮菌体(b)溶液Ⅱ的作用是使DNA变性(c)溶液Ⅲ的作用是使DNA复性(d)质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性7、cDNA文库包括该种生物的( )(a)某些蛋白质的结构基因(b)所有蛋白质的结构基因(c)所有结构基因(d)内含子和调控区8、Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是：( )(a)用RNA探针检测DNA片段(b)用RNA探针检测RNA片段(c)用DNA探针检测RNA片段(d)用DNA探针检测蛋白质片段9、同一种质粒DNA，以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是：( )(a)OCDNA>SCDNA>LDNA (b)SCDNA>LDNA>OCDNA(c)LDNA>OCDNA>SCDNA (d)SCDNA>OCDNA>LDNA10、在基因工程中，可用碱性磷酸酶( )(a)防止DNA的自身环化(b)同多核苷酸激酶一起进行DNA的5，末端标记(c)制备突出的3，末端(d)上述说法都正确简答题质粒作为理想的基因工程载体应具备哪些特点？在提取DNA的过程中，用无水乙醇和异丙醇均可沉淀DNA有什么区别？在碱法提取质粒的过程中应注意哪些问题？与其他转基因方法相比，基因枪法有哪些优点？如果一个DNA酶解液在电泳后发现DNA未被切动，你认为可能是什么原因。
基因工程的研究内容是什么？基因组文库与cDNA文库有何区别？PCR引物设计的原则是什么？基因工程操作要求受体细胞应该具备哪些特点？简述农杆菌介导的基因转化的特点及其在基因转化过程中的影响因素？植物基因转化受体建立中常常会遇到哪些问题？基因工程的基本操作程序包括哪几部分内容？基因组文库与cDNA文库有何区别？影响凝胶电泳的因素有哪些？采用CTAB法提取植物基因组DNA的基本原理是什么？限制性内切酶的活性受哪些因素影响？理想的分子标记必须达到的要求是什么？CTAB和SDS法提取核酸的原理各是什么？如何对转基因植株进行检测？制备目的基因片段的途径有哪些？什么是cDNA文库(complementDNAlibrary)?同基因组文库有何差别?列举质粒载体必须具备的几个基本特性。
什么是Western印迹?它与Southern印迹有什么不同?分子标记有哪几种类型？YAC载体具有什么样的功能性DNA序列？为什么在克隆大片段时，YAC具有优越性？论述题、如果实验中对照组本不该长出菌落的平板上长出了一些菌落，你如何解释这种现象？请论述植物基因工程在农业上的应用的研究进展前景根据所学的知识，论述农杆菌介导的基因转化和基因枪转化法两种方法的基本原理以及在农业生产上的应用。
请详述PCR技术的原理、种类以及在生产实际中的应用情况。
利用学过的知识设计一个植物基因转化的试验方案根据所学知识列出两个PCR使用过程中常发生的问题，并提出解决方案。
目前，许多目的基因的产物是未知的，特别是建立在遗传表型分析基础上的目的基因，试述克隆这些产物未知的目的基因的策略是什么，并简要介绍一下其基本原理。
如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码植物激素的基因，并使之在大肠杆菌中进行表达?简要说明实验中可能遇到的问题及可能的解决办法。
一、名词解释一、填空题(20分，每个4分)转化：是指将外源DNA引入受体细胞，使之获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。
DNA的物理图谱：是指DNA链的限制性酶切片段的排列顺序，即酶切片段在DNA链上的定位。
因限制性内切酶在DNA链上的切口是以特异序列为基础的,核苷酸序列不同的DNA，经酶切后就会产生不同长度的DNA片段,由此而构成独特的酶切图谱。
因此，DNA 物理图谱是DNA分子结构的特征之一。
酶单位：反映某一特定条件下，使单位时间内反应物的变化量达到某一程度所需要的酶量。
酶单位都是以酶活力为根据而定义的。
载体：把一个有用的目的基因DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体。
目前使用的载体主要有四大类：质粒，噬菌体λ、单链噬菌体和粘粒。
质粒：是一种染色体外的稳定遗传因子，大小从1-200kb不等，为双链、闭环的DNA分子，并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。
主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中，它具有自主复制和转录能力，能在子代细胞中保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息。
二、填空题：1、变性、退火、延伸2、双链环状DNA，线状DNA，超螺旋状DNA3、CTAB――核酸复合物，CTAB――核酸复合物，残留RNA4、火药爆炸力型、高压气体动力型、高压放电动力型5、凝胶浓度，DNA分子的大小和构象，电泳缓冲液、指示剂、染色6、电荷、分子大小及形状二、简答题：（每题5分，共30分）1、质粒作为理想的基因工程载体应具备哪些特点？（1）一个复制起点（2）可选择的标记，是鉴定细胞是否携带载体所必需的。
（3）合成的单一限制酶酶切位点（4）插入标记，是用来观察外源基因是否插入。
（5）合适的大小，质粒应该相对的小，小质粒不易受物理损伤，而且限制酶的酶切图谱较简单，另外，小质粒一般具有较高的拷贝数。
（6）高拷贝数，基因工程应该选择具有高拷贝数的松弛型的质粒为载体。
不同的质粒有不同的拷贝数。
（7）不易丢失2．在提取DNA的过程中，用无水乙醇和异丙醇均可沉淀DNA有什么区别？在提取DNA的过程中，利用无水乙醇和异丙醇均可沉淀DNA，但它们之间是有区别的：沉淀DNA通常使用冰乙醇，在低温条件下放置时间稍长可使DNA沉淀完全，而且沉淀的多数是大片段的DNA。
利用冰冷的异丙醇(一般用等体积)也可沉淀DNA，而且沉淀速度快，沉淀完全，但常把盐沉淀下来，所以多数还是用乙醇。
3、在碱法提取质粒的过程中应注意哪些问题？(1)整个过程都需要在低温下操作(2)加入溶液II和溶液III后操作应混和，切忌剧烈振荡。
(3)在提取的过程中应该保持动作温和，不要剧烈振荡(4)提取过程中除去蛋白很重要，采用酚/氯仿去除蛋白效果较单独用酚或氯仿好，要将蛋白尽量除干净需多次抽提。
4、与其他转基因方法相比，基因枪法有哪些优点？与其它遗传转化方法相比较，有以下优点：A、无宿主限制：根癌农杆菌只对某些双子叶植物敏感，而对多数单子叶植物尤其是重要的禾谷类作物不敏感，从而大大限制了它的应用范围。
基因枪技术没有物种限制，对双子叶和单子叶植物都可适用，对动物、微生物也同样适用。
B、靶受体类型广泛：PEG法、脂质体法、电击法等介导基因转化需要以原生质体作为受体细胞。
由于原生质体不易培养和再生，或再生周期长，基因型依赖性强，使这些方法的应用受到限制。
基因枪技术可以选用易于再生的受体，绕过原生质体再生的困难。
它不仅以原生质体、叶圆基为靶受体，而且悬浮培养细胞、茎或根切段以及种子胚、分生组织、幼穗、幼胚、愈伤组织、花粉细胞、子房等几乎所有具有潜在分生能力的中组织或细胞都可以用基因枪进行轰击转化。
C、可控度高：近代的高压放电或高压气体基因枪已可根据实验需要无级调控微弹的速度和射入浓度，可以较高的命中率把DNA微粒载体射入特定层次的细胞，即厂家态细胞和分生区细胞，从而为基因转化提供可靠的技术措施D、操作简便快速，甚至可克服无菌的困难5、如果一个DNA酶解液在电泳后发现DNA未被切动，你认为可能是什么原因。
可能的原因是：(1)所加的限制性酶已失活，(2)DNA片段结构的特殊性，对酶要求高，或相对应的酶切位点很少(3)电泳时所加的电极缓冲液的离子强度太大使DNA分离不明显，或者是离子强度太小，使DNA没有泳动。