《免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较》作者彭凤

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透射免疫比浊终点法与速率法测定免疫球蛋白对比分析

透射免疫比浊终点法与速率法测定免疫球蛋白对比分析

/L、聚乙二醇 40g/L,试 剂 2 为 羊 抗 人 I
100 mmo
l
gG
抗体适量、叠 氮 钠 0.
95g/L)及 定 标 校 准 品 (浓 度 为
6、
12、
20、
30g/L),批 号 为 190904. 校 准 品 量 值 可 溯
源至IRMM ERM DA470 参考物质.
1.
3 方法
1.
3.
速率法,副波长无,加入试剂 R2 混匀后立即测定初始
吸光度,连续 监 测 2 mi
n 测 定 吸 光 度 变 化 率 ΔA/mi
n
计算出 浓 度. 其 余 参 数、反 应 过 程 和 校 准 方 法 同 终
检验医学与临床 2021 年第 18 卷增刊 Ⅰ Lab MedC
l
i
n,
2021,
Vo
l.
种方法测定结果比较 差 异 无 统 计 学 意 义 (
P >0.
05),
有良好的相关性,见表 1.
结果(
x±s,
g/L)
方法
终点法
速率法
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不同浓度 I
gG(
g/L)

12
20
30
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12±0.
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96±0.
4822.
04±3.
1732.
13±6.
12
0.
08
>0.
05
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>0.
05
2.
抗体相似的 球 蛋 白,能 与 相 应 抗 原 特 异 性 结 合,介 导
体 液 免 疫 作 用 [1]. 同 时,其 本 身 也 是 抗 原,具 有 免 疫

免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较

免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较

免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较目的:对免疫透射比浊法与免疫散射比浊法在检测特定蛋白抗干扰能力的效果进行对比。

方法:收集血清样本,且制作浓度不同的特定蛋白混合血清,同时将比例不同的两种干扰物置于混合血清当中,之后再用免疫透射比浊法、免疫散射比浊法对其进行测定,且对干扰率加以计算,以了解两种检测方法的抗干扰能力。

结果:CH在9000与15000时,免疫散射比浊法对IgM进行检测受到干扰;Hb在9.9与29.8浓度时,免疫散射比浊法对高浓度IgM、低浓度CRP检测时受到干扰;采取免疫透射比浊法对三种含有干扰物的特定蛋白进行检测时,未受到任何干扰影响。

结论:在对CH、Hb等干扰物的抗干扰能力方面,免疫透射比浊法比免疫散射比浊法更为优越。

标签:特定蛋白;免疫透射比浊法;免疫散射比浊法在临床上,对于人血清内特定蛋白的检测,一般是采取免疫散射比浊法、免疫透射比浊法进行检测;然而,在检测的过程中,如游离血红蛋白、脂蛋白等会对检测的结果带来一定的干扰,继而影响检测结果的准确性[1]。

对此,为保证血清检测的准确性,笔者对免疫透射比浊法、免疫散射比浊法在特定蛋白抗干扰能力的效果进行探讨,具体报道如下。

1.资料与方法1.1对象本次研究的样本源自于某医院门诊与住院患者当天的新鲜血清,其中排除存在脂血、溶血、浑浊等血清。

同时,事前准备好IgM、CRP等浓度不等的混合血清,具体为IgM低浓度1.0~1.5g/L,高浓度大于2.0g/L;CRP低浓度4~10mg/L,高浓度大于100mg/L。

1.2仪器设备选用Dade Behring BNProSpec特定蛋白测定仪、Roche Modular P全自动生化分析仪,试验所用试剂皆为仪器配套试剂。

同时选取三个干扰物,即FBil(游离胆红素)、CH(乳糜)、Hb(血红蛋白),每种干扰物各准备两瓶试剂盒,一瓶作为空白对照使用,另外,干扰物的浓度具体为FBil3280μmol/L、CH15000FTU、Hb49.6μmol/L[2]。

浅谈免疫比浊法技术优势

浅谈免疫比浊法技术优势

结果一致, 有很好的相关性和重复性, 胶乳增强免疫
的灵敏度高出两倍。但另一方面, 免疫透射比浊法 。
透射比浊法检测的灵敏度高、 线性范围广、 结果稳 定、 操作简单、 抗干扰能力强、 速度快、 适合各种有全 自动生化分析仪的医院, 完全符合实验室常规检测 的要求。因此, 免疫透射比浊法比免疫散射比浊法 在临床实验室的应用中, 更具有广泛的应用价值与 圆愿苑员
检验领域普遍使用。人们传统地认为散射比浊法要 比透射比浊法更灵敏, 准确度高, 包括许多教科书也 测定法, 即免疫透射比浊测定和免疫散射比浊
[ 员]
这样述说。圆园 世纪 苑园 年代起出现了微量免疫沉淀 此免疫比浊测定逐渐被广泛应用于临床体液中蛋白
, 自
质含量检测的领域。近几年来, 免疫透射比浊测定 技术被广泛使用在全自动生化分析仪上, 实现高速、 灵敏和自动化。 一束光线通过有悬浮质点的胶体溶液时, 会产 生丁铎尔现象, 这是胶体粒子散射光的结果。粒子 被光照射后而发光, 同时受到散射和吸收两个因素 万方数据 圆愿苑园
皂藻贼澡燥凿 早燥燥凿 葬灶凿 遭葬凿 责燥蚤灶贼泽援 酝藻贼澡燥凿泽: 粤灶凿 糟燥皂责葬则藻 遭燥贼澡 贼澡则燥怎早澡 贼澡藻 藻曾葬皂蚤灶葬贼蚤燥灶 蚤皂皂怎灶蚤贼赠 贼则葬灶泽皂蚤泽泽蚤燥灶 贼怎则遭蚤凿蚤皂藻贼则蚤糟 皂藻贼澡燥凿 葬灶凿 贼澡藻
摇 摇 比浊法也称浊度法, 属于散射光谱分析, 是在比 许多方面和比色法相似, 但本质上又有区别
糟造怎泽蚤燥灶泽:蚤皂皂怎灶燥贼怎则遭蚤凿蚤皂藻贼则蚤糟 皂藻贼澡燥凿 蚤皂皂怎灶藻 灶藻责澡藻造燥皂藻贼则赠 澡葬泽 皂葬灶赠 葬凿增葬灶贼葬早藻泽援 月怎贼 贼澡藻 贼怎则遭蚤凿蚤皂藻贼则蚤糟 蚤皂皂怎灶燥葬泽泽葬赠 皂藻贼澡燥凿 澡葬泽 葬 灶蚤择怎藻 遭藻糟燥皂藻泽 澡藻贼藻则燥早藻灶藻燥怎泽 则藻葬糟贼蚤燥灶 蚤泽 澡燥皂燥早藻灶藻燥怎泽 则藻葬糟贼蚤燥灶,早则藻葬贼造赠 蚤皂责则燥增藻泽 贼澡藻 泽藻灶泽蚤贼蚤增蚤贼赠,憎澡蚤糟澡 皂葬噪藻泽 贼澡藻 贼藻糟澡灶蚤择怎藻 澡葬泽 遭藻贼贼藻则 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 葬凿增葬灶贼葬早藻援 【 运藻赠 憎燥则凿泽】 栽澡藻 蚤皂皂怎灶蚤贼赠 贼则葬灶泽皂蚤泽泽蚤增蚤贼赠 贼怎则遭蚤凿蚤皂藻贼则蚤糟;栽澡藻 蚤皂皂怎灶蚤贼赠 泽糟葬贼贼藻则蚤灶早 贼怎则遭蚤凿蚤皂藻贼则蚤糟; 杂怎责藻则蚤燥则蚤贼赠 造燥憎藻则 泽藻灶泽蚤贼蚤增蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 蚤泽泽怎藻,贼燥 凿藻增藻造燥责 造葬贼藻曾 藻灶澡葬灶糟藻凿 贼藻糟澡灶燥造燥早赠,葬灶贼蚤早藻灶 葬灶贼蚤遭燥凿赠 遭蚤灶凿蚤灶早 糟燥葬糟藻则增葬贼蚤燥灶 则藻葬糟贼蚤燥灶( 圆 ) ,贼澡蚤泽 贼藻糟澡鄄

黄疸因素对免疫透射比浊法检测血清白蛋白的影响

黄疸因素对免疫透射比浊法检测血清白蛋白的影响

黄疸因素对免疫透射比浊法检测血清白蛋白的影响目的探讨免疫透射比浊法中黄疸对检测血清白蛋白结果的影响。

方法将双份已知白蛋白浓度(低、高值)的血清中分别加入胆红素纯品,制成含不同胆红素浓度梯度的黄疸血清,再用免疫透射比浊法测定其白蛋白含量,比较分析黄疸因素对血清白蛋白检测的影响。

结果普通黄疸(胆红素浓度低于400 umol/L)对白蛋白检测结果无显著性差异(P>0.05)。

结论选用免疫透射比浊法检测血清白蛋白对黄疸的抗干扰能力较强。

标签:黄疸;免疫透射比浊法;白蛋白;抗干扰在临床工作中,人血清中很多因素对生化检测结果存在干扰,其中标本黄疸是临床生化检验中最常见的一种干扰和影响因素[1]。

随着现代医学的快速发展,检验结果的准确性在诊疗中起着重要的作用,多数诊疗的决定是根据实验室检验结果做出的。

近来有公司推出血清白蛋白免疫透射比浊法的商品化试剂,该试剂基于抗原抗体结合反应开发出来的,具有特异性强,稳定性好的优点,但其抗干扰能力目前尚无权威性的报告,国内临床普遍担心由于标本因素会给检测结果带来影响,以致现在这种新型免疫透射比浊法的商品化试剂还没有在临床上大规模使用。

因此,本实验单就黄疸因素对免疫透射比浊法检测血清白蛋白的影响进行探讨。

现报道如下。

1 仪器与方法1.1 仪器与试剂1.1.1 仪器日立7180(日本)生化分析仪。

1.1.2 试剂及校准品采用芬兰Orion Diagnostica公司产品,批号为67748。

1.1.3 质控品低值、高值采用北京利德曼公司生产的质控液(低值208091G、高值205311E),中值采用北京豪迈公司生产的质控液(6872F)。

1.2 黄疸的血清标本的制备取含低、高浓度白蛋白双份新鲜血清,白蛋白含量分别为35.50 g/L(低值白蛋白组)及51.08 g/L(高值白蛋白组),将胆红素纯品与上述双份新鲜血清制成含不同胆红素浓度梯度的黄疸血清,黄疸浓度依次为34.5 μmol/L,99.0 μmol/L,189.0 μmol/L,378 μmol/L,756 μmol/L。

mian对比研究免疫透射比浊法及免疫散射比浊法在血清免疫球蛋白检测中的应用效果

mian对比研究免疫透射比浊法及免疫散射比浊法在血清免疫球蛋白检测中的应用效果

mian对比研究免疫透射比浊法及免疫散射比浊法在血清免疫球蛋白检测中的应用效果【摘要】目的:对比应用免疫散射比浊法、免疫透射比浊法实施血清免疫球蛋白检测的效果。

方法:应用透射比浊法、散射比浊法对2013年5月-2014年9月期间在我院接受健康体检的82例健康人员进行血清免疫球蛋白检测,并对2种方法的检测结果进行比较分析。

结果:2组方法的检测结果较为相似,比较未存在显著性(P>0.05)。

结论:使用透射比浊法、散射比浊法对患者实施血清免疫球蛋白检测均可取到相似的检测结果,但是免疫透射比浊法具有更好的精密度,检测误差更小。

【关键词】散射比浊法;免疫球蛋白;免疫球蛋白【中图分类号】R446.62 【文献标识码】B 【文章编号】1674-8999(2015)9-0671-02血清免疫球蛋白(Ig)为人体内极为重要的免疫蛋白,因此通过对血清免疫球蛋白进行检测可为人体免疫功能评定提高可靠参考依据[1]。

目前,临床上主要应用的血清免疫球蛋白检测方法主要有两种,分别为透射比浊法和散射比浊法。

本次研究主要对比该2中检测方法在临床应用中的效果,现将研究结果报告如下。

1 资料与方法1.1一般资料选择2013年5月-2014年9月期间在我院接受健康体检的82例健康人员作为研究对象,分别应用免疫透射比浊法、免疫散射比浊法对患者实施血清免疫球蛋白检测。

性别:男性49例,女性33例;年龄:最小为19岁,最大为75岁,平均年龄(37.1±2.8)岁。

1.2方法在研究过程中,分别应用免疫散射比浊法、免疫透射比浊法对82位研究对象的血清免疫球蛋白A、血清免疫球蛋白G、血清免疫球蛋白M进行常规性检测。

然后再使用该两种方法对研究对象的免疫球蛋白G进行精确检测。

本次研究的具体检测操作表现如下:在研究对象空腹的状态下进行静脉血抽取,抽取量为3ml。

在本次研究中,实施免疫透射比浊法检测时所应用的仪器主要为Olym pus AU640型全自动生化分析仪(生产企业:上海执诚生物技术有限公司),实施免疫散射比浊法检测时所使用的仪器主要为man lmmage 800蛋白分析仪(生产企业:上海以达进出口有限公司)。

免疫透射比浊法

免疫透射比浊法

图18-4 抗原抗体反应曲线在免疫比浊过程中,由于抗原抗体结合的三过程,从而导致光密度与浓度之间不呈线性关系,一般是3次方程曲线关系。

若将抗原与抗体两个变量之间的变动特征恰当地反映出来,需要经过3次方程拟合成近似直线化的曲线方程,再进行运算,免疫比浊中,采用终点法或速率法,用5个或7个不同梯度进行定标,经3次曲线方程求出一条能反映真实情况的浓度与光密度的关系曲线方程,才能作为定量的工作曲线。

二、血清ApoAⅠ(B100)透射比浊测定法脂蛋白抗原在溶液中与相应特异抗体形成抗原抗体复合物的混浊颗粒,分散于溶液介质中,在一定波长下测定其混浊程度,进行ApoAⅠ(B100)的定量测定。

(一)手工操作1.原理血清ApoAⅠ(B100)+抗人ApoAⅠ(B100)→抗原抗体复合物→测定光密度2.试剂(伊利康)(1)Apo缓冲液(RⅠ),含4%PEG6000和表面活性剂ApoAⅠ(B100)+抗人ApoAⅠ(B100)→抗原抗体复合物→测定吸光光密度2.双试剂单(双)波长法(1)试剂(温州伊利康)RⅠ:Apo缓冲液,含4% PEG6000和表面活性。

RⅡ:羊抗人ApoA(B100)稀释抗血清RⅢ:Apo定值血清(2)各试剂及标本用量如下表:项目血清Apo缓冲液(RⅠ)ApoAⅠ抗血清液(RⅡ)ApoB100抗血清液(RⅡ)ApoAⅠ2~5μl300~350μl80~100μlApoB100 2~5μl300~350μl80-100μl(3)定标:以5点Apo梯度浓度,采用免疫定标法按表18-21参数上机定标,如图18-5所示。

图18-5 ApoAⅠ 五点免疫定标曲线图(以CL-7200仪器为例)(4)上机(终点法或两点法)(5)说明:①Apo测定的光密度从340~700nm范围都可采用,多用340nm;②国内已有的Apo试剂盒均无需处理;③血清标本也无需处理,均可直接检测;④本法适用于多种类型的全自动生化分析仪检测,自动扣除空白,快速准确;⑤效价不同的抗血清,其用量应作适当的调整。

散射比浊法和透射比浊法测定血浆免疫蛋白的比较

散射比浊法和透射比浊法测定血浆免疫蛋白的比较

散射比浊法和透射比浊法测定血浆免疫蛋白的比较标签:散射比浊法;透射比浊法;血浆蛋白散射比浊分析(nephelometry assay)是一种微量、快速、自动化检测体液中特定蛋白质成分的免疫化学分析技术。

该技术是将免疫测定与散射比浊法的原理相結合而设计的一种快速免疫测定方法,主要用于对体液中单蛋白成分的测定。

免疫透射比浊分析(turbidimetry)是一种比较老的方法,最常用于生化指标的测定。

我们应用散射比浊法和透射比浊法测定血浆免疫蛋白并对结果进行分析,现报道如下:1 材料与方法透射比浊法采用日本OLYMPUS生产的AU640全自动生化仪与配套试剂及校准品。

散射比浊法用贝克曼公司生产的IMMAGE全自动比浊仪与配套试剂及校准品。

质控品使用省临检中心的质控样品。

检验样品为68份健康人混合血清。

2 仪器性能评价2.1批内精密度测定透射比浊法的CV值:IgG 1.50%、IgA 0.95%、IgM 1.95%、C3 2.98%、C4 3.98%。

仪器标明为CV≤5%。

散射比浊法的CV值分别为IgG 1.30%、IgA 0.80%、IgM 1.75%、C3 2.08%、C4 3.14%。

2.2批间精密度测定透射比浊法的CV值:IgG 3.15%、IgA 1.24%、IgM 2.36%、C3 3.66 %、C4 4.28%。

仪器标明为CV≤5%。

散射比浊法的CV值分别为IgG 1.52%、IgA 0.96%、IgM 1.96%、C3 2.37%、C4 3.56%。

2.3准确度的检测2批6份质控样品结果见表1,透射比浊法测定与靶值的偏差分别为0.1、0.12、0.1、0.1、0.1、0.1。

散射比浊法测定与靶值的偏差分别为0.1、0.12、0.1、0.1、0.1、0.1。

结果显示,两种方法都有较高的准确性,见表1。

3 讨论从以上结果看出,透射比浊法测定法用于血浆免疫蛋白测定有一些缺陷:①溶液中存在的抗原-抗体复合物分子应足够大,分子太小则阻挡不了光线的通过;②溶液中的抗原-抗体复合物的数量要足够多,如果数量太小,溶液浊度变化太小,对光通量影响不大;③透光比浊采用光电池直接接收光通量,即光度计的灵敏度不高,微小的浊度变化不易影响透光率的改变;④透光比浊是依据透射光减弱的原理来定量的,因此只能测定抗原-抗体反应的第二阶段,检测仍需抗原-抗体温育反应时间,但检测时间速度快、重复性好。

免疫透射比浊法常见干扰因素的识别与应对策略

免疫透射比浊法常见干扰因素的识别与应对策略

作者简介:贾珂珂,女,1976年生,硕士,副主任技师,主要从事临床生化检验工作。

通信作者:崔丽艳,E-mail :。

免疫透射比浊法常见干扰因素的识别与应对策略贾珂珂, 孙文苑, 聂 睿, 崔丽艳(北京大学第三医院检验科,北京 100191)摘要:免疫透射比浊法检测结果的准确性常受到一些干扰因素的影响,如样本性状、内源性干扰、钩状效应和携带污染等,这些干扰因素可使检测结果假性升高或降低,影响临床诊断和治疗监测等。

文章对免疫透射比浊法常见的干扰因素及机制进行综述,以帮助检验人员识别和确认可能存在的干扰,及时纠正检测结果,尽可能减少不良后果的发生。

关键词:免疫透射比浊法;样本性状;内源性干扰;钩状效应;携带污染;干扰Detection and prevention of common interference in turbidimetric immunoassay JIA Keke ,SUN Wenyuan ,NIE Rui ,CUI Liyan.(Department of Clinical Laboratory ,Peking University Third Hospital ,Beijing 100191,China )Abstract :The accuracy of turbidimetric immunoassay is affected by a few interference factors ,such as sample appearance ,endogenous interference ,hook effect and carry-over contamination. These interference factors may cause the results increasing or decreasing falsely and further affect clinical diagnosis and treatment monitoring. The laboratory staff should be familiar with common interference factors and mechanisms ,communicate with doctors in time and identify ,confirm and prevent possible interference ,in order to reduce the occurrence of adverse events.Key words :Turbidimetric immunoassay ;Sample appearance ;Endogenous interference ;Hook effect ;Carry-over contamination ;Interference文章编号:1673-8640(2021)04-0362-07 中图分类号:R446.1 文献标志码:A DOI :10.3969/j.issn.1673-8640.2021.04.002免疫比浊法是将液相内的沉淀反应与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一种分析技术,常用方法为免疫散射比浊法和免疫透射比浊法。

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Key words: Immunoglobulin G; Immunoglobulin M; C reactive protein; Immune turbidimetry; Immune nephelometry; Anti-interference ability
在临床检测样本时,经常遇到溶血、黄疸和脂 血样本。脂蛋白、胆红素或游离血红蛋白等都可 对光散射或光透射分析结果产生干扰。为了解免 疫透射比浊法和免疫散射比浊法在检测特定蛋白 时各种干扰物对结果造成的影响,我们按照美国 临床实验室标准化协会( CLSI) EP7-A2 文件[1]来 评价 2 种 方 法 在 检 测 特 定 蛋 白[免 疫 球 蛋 白 G ( IgG) 、免 疫 球 蛋 白 M ( IgM ) 和 C 反 应 蛋 白 ( CRP) ]时 对 游 离 胆 红 素 ( FBil ) 、结 合 胆 红 素 ( CBil) 、血 红 蛋 白 ( Hb) 和 乳 糜 ( CH) 的 抗 干 扰 能力。
Abstract: Objective To compare the anti-interference abilities of immune turbidimetry and immune nephelometry for detecting specific proteins [immunoglobulin G ( IgG) ,immunoglobulin M ( IgM) and C reactive protein ( CRP) ] through the interferers of free bilirubin ( FBil) ,conjugated bilirubin ( CBil) ,hemoglobin ( Hb) and chyle ( CH) . Methods A total of 6 mixed serum samples were prepared under 2 levels ( high / low) of specific proteins ( IgG: 812 g / L,> 16 g / L; IgM: 1. 0-1. 5 g / L, > 2. 0 g / L; CRP: 4-10 mg / L, > 100mg / L) . The 4 interferers were prepared into 5 different concentrations( FBil: 656,1 312,1 968,2 624 and 3 280 μmol / L; CBil: 688,1 376,2 064,2 752 and 3 440 μmol / L; Hb: 9. 9,19. 8,29. 8,39. 7 and 49. 6 μmol / L; CH: 3 000,6 000,9 000,12 000 and 15 000 FTU) by rules( 1∶ 5,2∶ 5,3∶ 5,4∶ 5 and 5∶ 5) ,and the interferers were added to the mixed serum. The concentration of the specific proteins was detected by immune turbidimetry and immune nephelometry respectively,and the interference rate was calculated. The anti-interference abilities of the 2 methods were calculated according to Clinical and Laboratory Standards Institute ( CLSI) EP7-A standard. The average concentration of the specific proteins with different interferers ± 5% of the control tubes at the same concentration was considered to have interference. Results By the immune nephelometry,the values to detect IgM ( high level ) and CRP ( low level ) with the interferer of Hb ( 9. 9 and 29. 8 μmol / L) and Hb( 9. 9,29. 8 and 39. 7 μmol / L) respectively,also the values to detect IgM ( high level and low level ) with the interferer of CH ( 9 000,12 000 and 15 000 FTU) and CH ( 6 000,9 000,12 000 and 15 000 FTU) were all considered to have interference. However,by the immune turbidimetry,the values to detect IgG,IgM and CRP with the 4 interferers were considered to have no interference. Conclusions To 4 interferers ( FBil,CBil,Hb and CH) ,the anti-interference ability of immune turbidimetry is better than that of immune nephelometry. The immune
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检验医学 2013 年 2 月第 28 卷第 2 期 Laboratory Medicine,February 2013,Vol 28. No 2.
文章编号: 1673-8640( 2013) 02-0142-04 中图分类号: R446. 62 文献标志码: A DOI: 10. 3969 / j. issn. 1673-8640. 2013. 02. 015
turbidimetry shows better accuracy to detect specimens with the interferers of lipidemia and haemolysis as large particles in the clinical application.
材料和方法
一、材料 1. 对象 样本来源于上海交通大学医学院 附属仁济医院( 东院) 门诊及住院患者血清样本。 要求无浑浊、无溶血、无黄疸、无脂血。3 种特定 蛋白 IgG、IgM 和 CRP 各取高、低 2 个浓度,分别
为 IgG: 8 ~ 12 g / L、> 16 g / L; IgM: 1. 0 ~ 1. 5 g / L、 > 2. 0 g / L; CRP: 4 ~ 10 mg / L、> 100 mg / L。
关键词: 免疫球蛋白 G; 免疫球蛋白 M; C 反应蛋白; 免疫透射比浊法; 免疫散射比浊法; 抗干扰能力
Comparison on the anti-interference abilities of immune turbidimetry and immune nephelometry for detecting specific proteins PENG Feng,XU Xiaoping,WANG Lin,YING Chunmei. ( Department of Clinical Laboratory,Renji Hospital,Shanghai Jiaotong University School of Medicine,Shanghai 200127,China)
2. 仪器 ROCHE Modular P 全自动生化分 析仪( 免疫透射比浊法) ,SIEMENS BN ProSpec 特 定蛋白测定仪( 免疫散射比浊法) 。
3. 试剂 特定蛋白试剂均为仪器配套试剂。 2 台仪器上的配套试剂、质控品及校准品批号见 表 1,其中 SIEMENS BN ProSpec 特定蛋白测定仪 高、低值质控品来自上海临检中心。CRP 校准品 值均可溯源至 ERM-DA472,其他特定蛋白校准品 值均可溯源至 ERM-DA470k。干扰试剂盒[包括 游离胆红素( FBil) 、结合胆红素( CBil) 、血红蛋白 ( Hb) 和乳糜( CH) 4 种干扰物各 2 瓶,其中 1 瓶 为空白对照]由日本 Sysmex 株式会社提供( 批号 ZS0002 ) 。 干 扰 物 浓 度 ( 靶 值 ) 分 别 为 FBil 3 280 μmol / L ( 192 mg / dL ) 、CBil 3 440 μmol / L ( 210 mg / dL) 、Hb 49. 6 μmol / L ( 4 960 mg / dL) 、 CH 15 000 FTU。
作者简介: 彭 凤,女,1978 年生,学士,主管技师,主要从事临床生物化学检验工作。 通讯作者: 应春妹,联系电话:月第 28 卷第 2 期 Laboratory Medicine,February 2013,Vol 28. No 2.
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免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白 的抗干扰能力比较
彭 凤, 徐晓萍, 王 琳, 应春妹 ( 上海交通大学医学院附属仁济医院检验科,上海 200127)
摘要: 目的 比较免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白[免疫球蛋白 G( IgG) 、免疫球蛋白 M ( IgM) 和 C 反应蛋白( CRP) ]时对游离胆红素( FBil) 、结合胆红素( CBil) 、血红蛋白( Hb) 和乳糜( CH) 的抗干扰 能力。方法 收集血清样本,分别制备高、低 2 种浓度( IgG: 8 ~ 12 g / L、> 16 g / L; IgM: 1. 0 ~ 1. 5 g / L、> 2. 0 g / L; CRP: 4 ~ 10 mg / L、> 100 mg / L) 的特定蛋白混合血清 6 管,按 1∶ 5、2∶ 5、3∶ 5、4∶ 5、5∶ 5 将 4 种干扰物分别配成 5 种不同浓度( FBil: 656、1 312、1 968、2 624、3 280 μmol / L; CBil: 688、1 376、2 064、2 752、3440 μmol / L; Hb: 9. 9、 19. 8、29. 8、39. 7、49. 6 μmol / L; CH: 3 000、6 000、9 000、12 000、15 000 FTU) 添加于混合血清中,用免疫透射比浊 法和免疫散射比浊法分别检测相应的特定蛋白浓度,计算干扰率,按美国临床实验室标准化协会( CLSI) EP7-A 文件评价 2 种方法的抗干扰能力。添加不同浓度干扰物之后的特定蛋白测定均值超过同一浓度下的空白对照 管的 ± 5% 为产生了干扰作用。结果 免疫散射比浊法检测高浓度 IgM、低浓度 CRP 分别在 Hb 浓度为 9. 9、29. 8 和 9. 9、29. 8、39. 7 μmol / L 时有干扰作用; 免疫散射比浊法测定高、低浓度 IgM 分别在 CH 浓度为9 000、12 000、 15 000 和 6 000、9 000、12 000、15 000 FTU 时有干扰作用; 而 4 种干扰物对免疫透射比浊法检测 IgG、IgM 和 CRP 均无干扰作用。结论 免疫透射比浊法对临床常见的 4 种干扰物( FBil、CBil、Hb 和 CH) 的抗干扰能力优于免疫 散射比浊法。免疫透射比浊法对于干扰物颗粒较大的脂血、溶血样本具有更高的准确性。
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