系统性硬化症自身抗体研究进展

系统性硬化症自身抗体研究进展系统性硬化症（systemic sclerosis, SSc）是一种以皮肤及多脏器纤维化为突出表现的系统性自身免疫性疾病，目前认为炎症和自身免疫应答，血管病变及纤维化是介导SSc发病的重要环节。

免疫细胞活化后释放大量促炎、促纤维化因子，合成自身抗体，参与组织损伤和器官功能障碍。

针对细胞内、外靶点的自身抗体可作为SSc血清标志物。

超过95％的SSc患者在首次诊断时可检测到自身抗体，并与疾病亚型，皮肤病变，内脏受累及预后密切相关。

超过90%的SSc患者外周血抗核抗体阳性。

而60%~80%的SSc患者标志性抗体阳性[1]，包括抗拓扑异构酶Ⅰ抗体、抗着丝点抗体和抗RNA聚合酶抗体，三者对SSc诊断具有较高特异性，因而纳入了2013年美国风湿病学会（ACR）/欧洲抗风湿病联盟（EULAR）对SSc的分类标准之中[2]，并且有助于识别早期或极早期SSc[3, 4]。

尽管三种标志性抗体已广泛应用于临床，然而关于抗体功能和临床意义的研究仍不断进展。

此外，研究发现一系列自身抗体具有功能性序列可参与SSc纤维化和血管病变，如抗血管紧张素II-1型受体和内皮素1受体抗体、抗血小板源性生长因子受体抗体、抗毒蕈碱-3受体抗体等，与SSc临床特征与发病环节密切相关，也为致病机制提供新的见解，而阐明自身抗体介导发病相关通路也有助于寻找潜在治疗靶点。

本综述将重点关注SSc相关自身抗体，尤其是新近发现的功能性自身抗体，着重介绍其临床应用价值和潜在致病机制。

1 抗拓扑异构酶Ⅰ（Topoisomerase I / Scl-70）抗体抗Scl-70抗体最初在SSc血清中鉴定发现，因其可与70 kDa核抗原反应而得名。

后来人们认识到全长自身抗原是拓扑异构酶I（Topoisomerase I , topo I），而70 kDa蛋白是天然全长100 kDa蛋白分解产物。

虽然抗Scl-70的术语仍在使用，但更准确的命名应为抗topo I抗体。

抗topo I抗体在SSc中报道的阳性率为9.4％~42％，最常见的是IgG亚型，IgA和IgM亚型亦可见。

尽管抗topo I抗体对SSc高度特异，但研究报道也可见于SLE [5]，然而血清识别抗原表位有所不同。

抗topo II抗体并非SSc所特异，可见于其他免疫相关疾病，如局灶性硬皮病，特发性肺纤维化，SLE和幼年型类风关等。

抗topo I抗体被认为与弥漫性皮肤型（diffuse cutaneous SSc, dcSSc）高度相关，但也可见于局限性皮肤型（localized cutaneous SSc, lcSSc）患者。

抗topo I抗体强烈提示不良预后，病死率增高，与间质性肺病高度相关。

另有报道抗topo I抗体与骨骼肌和心肌受累，手指挛缩畸形，及蛋白尿相关[6]。

而抗topo I抗体与肿瘤间的关联仍存在争议。

目前研究认为内皮细胞破坏释放拓扑异构酶，或翻译后修饰如乙酰化水平增高[7, 8]，最终导致抗原释放，免疫耐受失衡，机体产生抗topo I抗体。

研究支持抗topo I抗体可能是SSc的致病性抗体，而非单纯的伴随抗体：1）使用topo I 抗原联合佐剂免疫小鼠可诱导抗topo I抗体产生，导致皮肤和肺组织的炎症和纤维化病变[9]；2）抗topo I抗体可作用于SSc皮肤成纤维细胞，促进胶原合成，以及单核细胞募集[10]；3）topo I抗原抗体免疫复合物可刺激原代人皮肤成纤维细胞上调表达促炎、促纤维化和缩血管因子[11]。

因而抗topo I抗体在SSc发生中具有潜在的致病性，可能在SSc自身免疫应答与纤维化间起“桥接”作用，然而具体机制有待深入研究。

2 抗着丝点（Centromere protein, CENP）抗体抗CENP抗体在SSc中的检出率为20％~40％，CENP-B是一类80kDa的着丝粒蛋白，是与几乎所有抗CENP阳性血清反应的主要抗原，而抗CENP-A抗体比抗CENP-B抗体对SSc更具特异性[12]，两种亚型具有相似的临床特征[13]。

其他抗CENP亚型也被陆续发现，抗CENP-C抗体与干燥综合征相关，而抗CENP-I抗体可能是自身免疫性肝病的血清标志物。

抗CENP抗体与lcSSc密切相关，尤其是CREST综合征（钙质沉着，雷诺现象，食管运动障碍，指硬化和毛细血管扩张）。

严重的间质性肺病和肾危象少见[13]。

约20％的抗CENP阳性患者合并肺动脉高压（pulmonary arterial hypertension, PAH），约50％该类患者死亡归因于PAH[14]。

抗CENP抗体阳性的孤立性雷诺未来发展为SSc的风险显著升高[15]，然而合并严重指端溃疡的发生率并未增加[13]。

抗CENP抗体阳性SSc患者较其他标志性抗体阳性患者总体预后相对较佳，死亡率较低[16]。

3 抗RNA聚合酶（RNA polymerase, RNAP）抗体针对RNAP I和RNAP III的自身抗体经常共存，且对SSc高度特异。

SSc中的阳性率约为20％。

然而中国汉族SSc患者中阳性率仅为1.3%，远低于美国高加索人群17.4%，推测与种族基因背景相关[17]。

针对RNAP II的抗体少见，且并不特异于SSc，可在SLE和重叠综合征患者中检出[18]。

抗RNAP III抗体在传统以Hep-2细胞为底物的间接免疫荧光中显示为斑点核仁型，但缺乏特异性，常与其他自身抗体同时检出，因而采用酶联免疫吸附测定（Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）测定可能是优选方法[19]。

抗RNAP I和III抗体与弥漫皮肤型SSc相关，且罹患肾危象的风险更高。

值得关注的是，基于EUSTAR队列进行的病例对照研究，结果显示抗RNAP III 抗体除了与肾脏受累、弥漫皮肤亚型、胃窦血管扩张，快速进展的皮肤病变相关外，还与伴随的肿瘤发生（-6 ~ +12月）密切相关（OR 7.38, 95% CI 1.61-33.8）[20]。

而Johns Hopkins队列数据也应证了这一结果，抗RNAP III抗体阳性患者中3年肿瘤标化发病比为2.84 （95% CI 1.89~4.10），而乳腺癌和肺癌分列抗RNAP III抗体阳性的dcSSc和lcSSc患者之首[21]。

因而对于抗RNAP III抗体阳性的SSc 患者而言，除需密切随访肾脏病变外，还应加强肿瘤筛查。

4 抗血管紧张素II-1型受体（angiotensin II type 1 receptor, AT1R）和内皮素1受体（endothelin-1 type A receptor, ETAR）抗体AT1R和ETAR广泛表达于脉管系统及免疫细胞。

针对AT1R和ETAR的抗体可激活相应受体参与多种血管病变，两者高度相关且可发生交叉反应。

85%的SSc患者抗AT1R和ETAR的抗体阳性[22]，与指端溃疡[23]及PAH[24]密切相关，也可见于其他结缔组织病合并的PAH，可作为提示预后的血清标志物[24]。

体内实验证实抗AT1R和ETAR抗体可作用于血管内皮细胞导致中性粒细胞黏附及胶原合成[25]，也可促进内皮细胞和免疫细胞分泌促炎症因子[26]。

体内实验中过继回输抗AT1R和ETAR抗体IgG至小鼠体内，可出现气道血管壁增厚和间质细胞浸润[24]，从而提示了抗AT1R和ETAR抗体在SSc血管病变中的致病性。

5 抗血小板源性生长因子受体（Platelet-derived growth factor receptor, PDGFR）抗体PDGF通过作用于成纤维细胞或平滑肌细胞受体PDGFR，诱导活性氧（reactive oxygen species, ROS）产生，促进胶原合成。

有研究将来自SSc患者的生物工程皮肤移植至免疫缺陷小鼠，同时输注针对PDGFR的刺激性抗体，证实这一抗体可促进并维系SSc皮肤纤维化病变[27]。

此外，抗PDGFR抗体可诱导人肺血管平滑肌细胞的增殖和迁移，可能参与SSc血管病变[28]。

有研究报道SSc 来源的抗PDGFR抗体发挥激活作用参与发病，虽然健康对照、SLE和原发性雷诺患者外周血中均可检出抗PDGFR抗体，然而并不能发挥类似效应[29]，推测可能是天然存在的抗体，其作用表位与致病性抗体有所不同。

已有研究通过区分刺激性和非刺激性抗PDGFR抗体结合的抗原表位，绘制功能性表位图谱，从而推动临床应用[30]。

6 抗毒蕈碱-3受体（Muscarinic-3 receptor, M3R）抗体包括胃食管反流在内的消化道病变是SSc患者常见且突出的临床表现，既往认为食管蠕动障碍，平滑肌萎缩，胶原沉积和纤维化是引起胃食管反流的重要原因，而Goldblatt等发现来自SSc患者的IgG可特异性阻断肠肌层中的毒蕈碱-3受体对胆碱的应答，并与SSc消化道症状密切相关[31]。

进一步发现来自SSc的自身抗体首先阻断神经节胆碱能神经传递引起神经病变，随着疾病进展，可改变平滑肌细胞膜上乙酰胆碱功能引起肌肉病变。

抗M3R抗体主要作用于靶点为M3R的第二胞外段，静脉用丙种球蛋白（Intravenous gamma globulin, IVIG）可阻断抗M3R抗体Fab段的特异性作用，包括对神经病变和肌肉病变的双重调控[32]。

抗M3R抗体除了可见于SSc患者，还可见于干燥综合征及重症肌无力患者，但抗M3R抗体阳性的SSc中，64%的患者有营养吸收障碍和/或胃肠道假性梗阻[33]。

因而抗M3R抗体的发现有助于加深我们对SSc消化道病变的认识，在临床应用中，不但可以提示消化道合并症，并为IVIG等免疫治疗提供理论依据。

7 抗干扰素诱导基因16（Interferon-inducible gene 16，IFI16）抗体IFI16是HIN-200家族成员，构成性表达于血管内皮细胞和角质形成细胞，过表达IFI16可导致血管内皮凋亡和促炎症因子释放[34]。

研究发现SSc外周血中存在抗IFI-16抗体，其阳性率在21%~25%[35],[36]，lcSSc中更高[35]，且与肢端溃疡相关[37]，抗CENP和抗IFI-16抗体双阳性性患者的肢端血管事件风险增加。

目前研究推测抗IFI-16抗体作用于内皮细胞特异性抗原，参与SSc血管病变[38]。

8 抗RuvBL1和RuvBL2抗体RuvBL1和RuvBL2是ATP酶同源物，参与转录、DNA修复及染色质结构重塑等生理过程[39]。

最近在SSc中发现抗RuvBL1和RuvBL2抗体，其在日本和北美人群中阳性率约为2％，与dcSSc和骨骼肌受累相关[40]。

9 抗真核起始因子-2B（Eukaryotic Initiation Factor-2B，eIF-2B）抗体eIF-2B是一种细胞质多聚体蛋白，参与真核细胞蛋白质合成，帮助tRNA与核糖体结合[41]。