三角帆蚌人工感染细菌性疾病的组织病理学观察
色 ．观 察 由细 菌 性 疾 病 引 起 的病 蚌 肝 脏 、肠道 、闭壳 肌 、外 套 膜 、鳃 和 斧 足 等 组 织 的 病 理 学 变 化 。解 剖 观 察 结 果 显 示 ，病 蚌 肠 黏 膜 上 皮 细 胞 有 不 同 程度 的变 性 和 坏死 ，肠 道 中空 泡 结 构 变 得 小 而 稀 疏 ；肝 脏 细 胞 排 列 不 整 齐 ， 细胞 核 深 染 ，且 细 胞 的 连 接 变 得 松 散 ；鳃 组 织 糜 烂 ，细 胞 排 列 疏 松 ；闭 壳 肌 纤 维 变 得 膨 大 ；外 套 膜 细 胞 大 面 积 坏 死 ，丧 失 了细 胞 形 态 ；直 肠 和 斧 足 的 变 化 不 明 显 。表 明 肝 脏 、肠 道 和 鳃 组 织 是 三 角 帆 蚌 发 病 时 的 主 要 典 型 病 变器官。 关键 词 ：三 角 帆 蚌 ；细 菌性 疾 病 ；组 织 病 理 学 ； 工 感 染 人
真 瓣 鳃 目 （Ｅ ｌｍ ｌｂａｃ ｉ 、 珠 蚌 科 ｕａ ｅ ｉｒｎ ｈａ） ｌ （ ｉ ｉａ ） Ｕ ｏ ｄ ｅ 、帆 蚌属 （ ｙｉ ｓ ） ｎ Ｈ ｒ ｐｉ ，是 广泛 分 布于 我 ｏ ｓ
国淡 水湖 泊等水 域 的大型 双壳类 底栖 动物 ，也是 我
角 帆蚌 的病害 防治研究 提供 理论基 础 ，现将 相关结
角蚌 、珍 珠 蚌 ，隶 属 于 瓣 鳃 纲 （ ａ ｌｂａｈａ 、 Ｌ ｍｅ ｉｒｃｉ ） ｌ
采集 到典 型 症 状 的病 蚌 ，分 离 鉴 定 出其 细 菌 性 病 原 ，并 以此 用人 工方法 感染 健康三 角 帆蚌 ，探 讨该
细菌病 对 三角 帆蚌 主要 组织 器官 的影 响 ，旨在为 三
澎 右－ 学 ２２ 第 期 江 Ｊ ０年 ３ ： 种 １
曩 墨
文 献 著 录 格 式 ：王伟 ，蒋 帧 ，钱 国 英 ，等 ．三 角 帆 蚌 人 工感 染 细 菌 性 疾 病 的 组 织病 理 学 观 察 ［ ］ 浙 江 农 业 科 学 ，２ １ （ ） ９ Ｊ ０ ２ ３ ：３ ５—３９ ９
三 角 帆蚌 人 工感 染 细菌 性 疾病 的组 织 病 理学 观察
王 伟 ，蒋 帧 ，钱 国英 ，陈吉 刚
（ 江 省 重 中之 重 学科 实 验 室 浙 江 万里 学 院生 物 与 环 境 学 院 ，浙 江 宁 波 浙 ３ ５０ ） １１０
摘
要 ：从 自然 发 病 的三 角 帆 蚌 病 蚌 中 分 离 出 ４株 致 病 菌 ，人 工 感 染 健 康 三 角 帆 蚌 。 通 过 组 织 切 片 和 Ｈ Ｅ染
验 。三角 帆蚌活 病体 同样采 集于绍 兴大 阪南 大江养 殖场 ，为 １～ ３龄 。
１ ２ 人 工 感 染 ．
开展 了三 角帆蚌 死亡 原 因分 析 、疾病 防治及 流行 规
从 具有 明显症 状 的蚌 的病灶组 织分 离到 ４株优 势细 菌 ，进 行 培 养 接 种 。试 验 组 注 射 细 菌 浓 度 为
育珠 三角 帆蚌 ｌ ０只取 自绍 兴 大 阪南 大 江 养殖 场 ，３龄 ，平 均体 长 １ ． ｍ，饲 养 在 浙 江 万 里学 ６９ｃ
院水 生 生 物 健 康 养 殖试 验 室 水族 箱 中 ，恒 温 （ ５ ２ ±０ ５ ｏ ． ）Ｃ，饲养 １ 确认无 病菌后 进行 人工 感染试 周
８６×１ ～ ，对 照 组 注 射 的 是 ０ ０ ｏ ・ 的 ． ０ ｍＬ ． １ｔ ｌ Ｌ ｏ
律等 方面 的研究 。但关 于三 角 帆蚌组织 病理 的相关
研究 和报 道 尚 比较 缺 乏 。刘 巧 林 等 运 用 光 学 显 微镜 和 电子 显微 镜观察 了三 角 帆蚌感染 瘟病后 外套 膜 、鳃和 斧 足 的 病 理 变 化 特 征 。最 近 ，钟 蕾 等
Ｐ Ｓ 冲 液 。注射 总剂 量 为 １ｍＬ Ｂ 缓 ，从 斧 足 多次 点 状注 射 ，注 射 深 度 为 ０ ５～ １０ ｃ ． ． ｍ。 注 射 后 置 （ ５± ． ） ２ ０ ５ ℃水 中饲 养 。 每 天 观察 并 记 录试 验 蚌 的发 病 情 况 和死 亡 情 况 ，以吐水 无力 、分泌 大量粘 液和 闭壳肌 收缩 无力
报道 了人工 感染 三角 帆蚌病 毒性 疾病 的组织 病理 学
结果 ，发现 消化 腺 、 胃：肠 、外套 膜 、斧足 和鳃 等 均 出现大量 细胞 空泡化 、肿 大 ，为病毒 损害 的主要
靶 器 官 。本 课题组 在前 期三 角帆蚌 流行 病学调 查 中
收稿 日期 ：２ ２－ ． ２ ０１ ０１ １ 基金 项 目 ：浙 江 省 科 技厅 厅 市会 商 重 大 科 技 项 目 （０ ８ ０ ０ ０２ ２０ Ｃ ２ １ ．）
中 图分 类 号 ：Ｓ９ ６ ２ １ ６ ． ２ 文 献 标 志 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：０ ２ — １ （ ０ ２ ０ —３ ５ ０ ５ ８９ ７ ２ １ ） ３０ ９ ．５ ０
三角 帆蚌 （ ｙｉ ｓ ｕ ｉｇｉ 又 称河 蚌 、三 Ｈ ｒ ｐｉ ｃｍ ｎ ｌ ） ｏ ｓ ｉ
果报 道如 下 。
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
国特 有 的优 质淡 水珍珠 蚌 。因该 蚌贝壳 外形 略呈 不 等边 三角 形 ，背缘 向上伸展 成 三角 帆状 ，故 名三 角 帆蚌 。多 年来 ，三 角 帆 蚌 的蚌 病 一 直 是 制 约 淡
水珍 珠养殖 发展 的瓶 颈 问题 之一 ，严重 时大 范 围 内 频繁 发生 。近年 来 ，我 国南 方各 省三角 帆蚌 养殖 发 展势 头迅 猛 ，三 角 帆 蚌 病 害 也 呈 现 逐 年 增 多 的 趋 势 ，造成 三角 帆蚌大 批死 亡 ，给三角 帆蚌养 殖户 带 来 了巨大 的经济 损失 。 自 １８ ９ ２年 国内首 次 报 道 了 三 角 帆蚌 疾 病 病 例 并分 离 到点 状 产 气 单 胞 菌 后 ，科 学 家 们 才 陆 续
病例研究：未知病因的凡纳滨对虾溞状幼体的病原和微生物组分析
第40卷 第5期 渔 业 科 学 进 展Vol.40, No.5 2019年10月Oct., 2019* 青岛海洋科学与技术试点国家实验室主任基金(QNLM201706)、中国-东盟海上合作基金项目(2016-2018)、中国水产科学研究院基本科研业务费专项(2017HY-ZD10)和现代农业产业技术体系(CARS-48)共同资助 [This work was supported by Pilot National Laboratory for Marine Science and Technology (Qingdao) (QNLM201706), China ASEAN Maritime Cooperation Fund Project (2016-2018), the Fundamental Research Funds for Chinese Academy of Fishery Sciences (2017HY-ZD10), and China Agriculture Research System (CARS-48)]. 孙 静，E-mail:****************.cn① 通讯作者：黄 倢，研究员，E-mail:*****************.cn 收稿日期: 2018-06-29, 收修改稿日期: 2018-08-22DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20180629001 /孙静, 万晓媛, 杨倩, 谢国驷, 董宣, 黄倢. 病例研究：未知病因的凡纳滨对虾溞状幼体的病原和微生物组分析. 渔业科学进展, 2019, 40(5): 134–144Sun J, Wan XY, Yang Q, Xie GS, Dong X, Huang J. Case studies: Pathogenic agent and microbiome analysis for zoea of Litopenaeus vannamei suffering from an unknown disease. Progress in Fishery Sciences, 2019, 40(5): 134–144病例研究：未知病因的凡纳滨对虾溞状幼体的病原和微生物组分析*孙 静 万晓媛 杨 倩 谢国驷 董 宣 黄 倢①(中国水产科学研究院黄海水产研究所 农业农村部海水养殖病害防治重点实验室 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室 青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室 青岛 266071)摘要 从某对虾育苗场2个育苗池中分别采集了发生摄食下降、活力降低及死亡率增高等症状的未知疾病的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei )溞状幼体3期(Z3)和1期(Z1)的样品。
三角帆蚌怀珠蚌与非怀珠蚌免疫力差异性研究
三角帆蚌怀珠蚌与非怀珠蚌免疫力差异性研究作者：肖调义刘敏来源：《湖南饲料》 2012年第5期肖调义1 刘敏2（1.湖南农业大学动科院，长沙410000 ；2.湖南九鼎科技（集团）有限公司，岳阳414000）摘要：取1-5 龄不同蚌龄的三角帆蚌怀珠蚌与非怀珠蚌若干只，提取其外套膜、心脏、斧足、鳃四个组织的粗酶液，然后利用丙酮酸钠作底物，加入还原性辅酶NADH（烟碱胺腺嘌呤二核苷酸）生成NAD。
据NAD在340nm处无吸光度显示，根据吸光度的降低情况来了解酶的反应速度，从而测定超氧化物歧化酶（SOD）的活性。
结果表明：在三角帆蚌的心脏和斧足中，怀珠蚌和非怀珠蚌的1、2、3、4 和5龄蚌的机体免疫力无显著性差异；在外套膜和鳃中，怀珠蚌的机体免疫力为5 龄蚌>1、2、3、4 龄蚌，而非怀珠蚌的1、2、3、4 和5 龄蚌的机体免疫力无显著性差异。
关键词：三角帆蚌；组织；蚌龄；SOD；差异性三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)-又称“翼蚌”、“劈蚌”，简称帆蚌。
它属于软体动物门(Mollusca)、瓣鳃纲(Lamellibranchia)、真瓣腮目(Eulamelli原branchia)、蚌科。
它广泛分布于湖南、湖北、安徽、江苏、浙江、江西等省，尤以我省洞庭湖以及中型湖泊分布较多。
三角帆蚌资源虽然较丰富，但随着珍珠养殖业的发展，该蚌捕捞数量猛增，导致天然资源衰退。
因此，积极开展三角帆蚌的基础性研究已势在必行，具有重要的现实意义。
近年来由于育珠技术的普及与珠农的趋利，造成大规模无序发展，养殖技术有一定的限制和所采用的蚌种种质混杂导致三角帆蚌因近亲繁殖，造成育珠蚌抗病能力差，造成淡水珍珠养殖病害的发生和大批死亡。
本试验通过对三角帆蚌怀珠蚌怀珠蚌与非怀珠蚌免疫力差异性研究，揭示其机体的自我调控机理。
以期为生产实践中最大限度地发掘机体本身的调控效能，提高淡水珍珠产量、品质和养殖成活率。
超氧化物歧化酶（SOD）是一种肽链大分子的金属酶，能促使过氧化物游离基转化成过氧化氢和氧，从而清除炎症过程中伴随产生的过氧化物游离基，而有强大的抗炎作用。
三角帆蚌养殖水体微生物群的动态研究
30. 0 30. 0 30. 0 30. 0 30. 0 28. 5 27. 5 18. 7 12. 7 8. 6 8. 8 20. 3 24. 4 26. 9 27. 9
细菌平 细菌
p H BOD/ COD/ 均数/ 对数
mg·L - 1 mg·L - 1 cfu·mL - 1
值
7. 27 0. 60 59. 98 1. 86 E6 6. 27
取样 部位
项目
4月 4月 4月 5月 8 日 18 日 28 日 8 日
蚌肠道 总数 ( ×107cfu/ g) 51012 31339 21332 201829
好氧细菌
对数值
71700 71531 71357 81320
蚌肠道 总数 ( ×107cfu/ g) 11363 131980 131000 01141
2004 年第 24 卷第 3 期 水 利 渔 业 (总第 133 期) ·41 ·
培养和生化鉴定 ,以确定是否符合双歧杆菌的基本特征 。
2 结果
211 养蚌水体的微生物检测 养蚌水体的微生物和理化因子检测结果见表 2 。 表 2 养蚌水体的微生物和理化因子检测结果
图 2 细菌总数与 COD 值的关系 314 养蚌水体细菌总数与水温之间的关系
三角帆蚌不同组织基因组DNA提取效果比较
３ 讨论
３．１ 组织细胞 ＤＮＡ的提取方法 生物体组 织 细 胞 中 的 脱 氧 核 糖 核 酸 （ＤＮＡ）部
分与 蛋 白 质 结 合，以 核 蛋 白 －脱 氧 核 糖 核 蛋 白 （ＤＮＰ）的形式存在。平衡酚 －氯仿法是利用 ＳＤＳ 裂解细胞，蛋白酶 Ｋ消化大部分蛋白质，最后用酚： 氯仿：异戊醇除去剩余的蛋白质。如果提取的 ＤＮＡ 中含有蛋白质污染会影响后续的试验，因而采用酚： 氯仿：异戊醇 ２次抽提的方法尽可能将其中的蛋白 质除去干净。此外，考虑到软体动物斧足内部结构 坚硬、蛋白质含量高（包永波等，２００５），因而相对于 刘瑾和舒妙 安 （２００８）所 描 述 的 提 取 三 角 帆 蚌 基 因 组 ＤＮＡ的 ４种方法（苯酚法、改进苯酚法、ＣＴＡＢ法 和改进 ＲＯＳＥ法）来说，本试验采用的平衡酚 －氯仿 法增加了 １倍的蛋白酶 Ｋ的加入量，电泳结果以及 分光光度计测定的 ＯＤ２６０／ＯＤ２８０结果表明，这种方法 达到了很好的效果，各个组织所提取的 ＤＮＡ中基本 无蛋白污染。此外，本方法不需要液氮，方便于一般 的实验室操作。
项目
斧足
鳃
闭壳肌
ＯＤ２６０／ＯＤ２８０ 得率 ／μｇ·ｇ－１
１．８３±０．０４ ４５．６±４．９ａ
１．８９±０．０９ ２９．０±３．６ｂ
１．９４±０．０８ ４１．３±５．１ａｂ
注：同行内不同字母表示显著差异（Ｐ＜０．０５）。
Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｅｔｔｅｒｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｒｏｗｓｈｏｗｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５）．
加入 ５４０μＬＨＢ（１０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ，ｐＨ８．０，１００ ｍｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ），在冰上将各个组织充分匀碎后，将 所有 液 体 吸 入 ２ｍＬＥｐｐｅｎｄｏｒｆ管 中，加 入 ６０μＬ １０％十二烷基磺酸钠和 ２０μＬ１０ｍｇ／ｍＬ的蛋白酶 Ｋ，于 ５５℃水浴锅中消化至裂解液变澄清。
三角帆蚌一种新型SOD基因的克隆与表达分析
来水 。 每箱放水 Ｉ Ｏ Ｏ Ｌ （ 水温 ２ ０ ± ２ ℃） ． 设 对 照 组 和 处理组 ， 每组 ３个 平 行 ． 处 理组 中 。 每 只蚌用 注射 器 从 闭壳 肌 注 射 １ ０ ０ ￣ Ｌ嗜水 气 单 胞 菌 悬 液 （ ５ ｘ １ ０ ｃ ｆ ｕ ／ ｍ Ｌ ） ， 对 照组 注射 等量 的 ０ ． ６ ５ ％Ｎ ａ Ｃ １ ＿ １ ．
三 角帆 蚌 一 种 新 型 Ｓ Ｏ Ｄ基 因 的克 隆 与表 达 分析
杨 受保 林钰如 钱 瑶璇 吕思 思 陆 赕 王 恒
生命科学学 院， 浙江 绍兴 ３ １ ２ ０ ０ ０ ） （ 绍兴 文理 学院 摘
要： 采用 Ｒ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ和 Ｒ ＡＣ Ｅ技术 ， 从三角帆蚌 （ Ｈ ｙ ｒ ｉ ｏ ｐ ｓ ｉ ｓ ｃ ｕ ｍ ｉ ｎ ｇ ｉ ｉ ） 中克隆到了一个新型超氧 化物歧化 酶基 因（ 命名
０ 引 言
超氧化物歧化酶 （ Ｓ ｕ ｐ ｅ ｒ ｏ ｘ ｉ ｄ ｅ ｄ ｉ ｓ ｍ ｕ ｔ ａ ｓ ｅ ， Ｅ Ｃ １ ． １ ５ ． １ ． １ ， Ｓ Ｏ Ｄ） 是在 从 细 菌 到 哺 乳 动 物 中均 广 泛 存 在 的一种 金属 酶 ． 能催 化 超 氧 阴离 子 转 变 为 Ｈ ， ０ ， 和０ ，的歧 化 反应 （ ２ ０ 一 ＋ ２ Ｈ 一Ｈ ０ ＋ Ｏ ） ， 维 持机 体内 Ｏ ， 一 等 活性 氧 （ Ｒ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｏ ｘ ｙ ｇ ｅ ｎ ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｅ ｓ ， Ｒ Ｏ Ｓ ） 产生 与消 除 的动 态 平 衡 ［ １ － ２ ］ 。 在抗 氧化 、 抗 辐 射 损
为Ｈ ｃ Ｓ Ｏ Ｄ ｎ ） ． Ｈ ｃ Ｓ Ｏ Ｄ ｎ基 因的长度为 １ ５ ７ ５ ｂ ｐ ， 包括一个长 ８ ０ ４ ｂ ｐ的开放阅读框 ， 编码 ２ ６ ７个氨基酸 的蛋 白 ， 并含有一个保守 的Ｃ ｕ — Ｚ ｎ — Ｓ Ｏ Ｄ结构域 ． Ｈ ｃ Ｓ Ｏ Ｄ ｎ ｍ Ｒ Ｎ Ａ在所检测 的三角 帆蚌 的各个组织 中均有表达 ， 而腮 中最 高． 在 嗜水气单 胞菌诱导 下 ， 血细胞 中的 Ｈ ｃ Ｓ Ｏ Ｄ ｎ ｍ Ｒ Ｎ Ａ的表达水平在 ３ ｈ时显著上调 （ Ｐ ＜ ０ ． ０ ５ ） ， 表明Ｈ ｃ Ｓ Ｏ Ｄｎ 在 三角帆蚌抗 细菌感染 的天然免疫反应
《水产动物病害学》第九章 贝类的疾病
预防措施: (1)清除池塘过多淤泥。用生石灰浓度为2OOmg/L或漂白粉2Omg/L消毒。 (2)加强饲料管理，合理混养和密养，及时施肥和灌注清水，使池水
保持爽而肥。防止池水污浊。 (3)不到疫区购买三角帆蚌。 (4)选择健壮的蚌做手术蚌，提高插片技术，注意无菌操作。插片后，
将手术蚌在2mg/L的氟派酸溶液中药浴10min。 (5)发病季节，定期泼洒生石灰、漂白粉等药物。 治疗方法: 漂白粉挂袋或lmg几全池泼洒。
（4）斧足的表皮细胞肿大，由于水肿，肌肉群间形成 空隙。
3.流行情况
流行地区
自1985年以来，在江苏、上海、浙江、安徽、江西和湖北等地养 殖的三角帆蚌均发生此病.
发病规律
以2-4龄的蚌最易感染发病，自4月中旬至10月均有发生，5一7月 为发病高峰。病情发展迅速、流行季节长，发病率和死亡率均较高， 死亡率一般在65-90%，有的养殖场甚全部死亡。
死亡率在90%以上，呈暴发性。
（四）诊断方法
行观防治方法
防措施。
目前尚无有效的治疗方法。只能采取预
二、鲍病毒性死亡病（鲍裂壳病）
（一）病原
鲍球形病毒，根据大小和复制部位分4种类型。 1.从大连和中国北方养殖的皱纹盘鲍分离； 2.二、三、四种类型从中国南方（福建、海南和广东等）
虾夷扇贝
海湾扇贝
栉孔扇贝
近江牡蛎
皱纹盘鲍
杂色鲍
第九章 贝类的疾病
第一节 病毒性疾病
一、栉孔扇贝的病毒病
（一）病原
王崇明等 (2002)报告了栉孔扇贝 (Chlamys farreri)
大规模死亡是由一种球形病毒引起。 栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒（AVNV)。 病毒粒子近似圆形，大小为130-170nm，核衣壳直径为
三角帆蚌theromacin基因克隆及其表达分析
湖 南 文 理 学 院 学 报 （ 然 科 学 版） 自
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ ｎ ｎＵｎｖ ｒｉ ｆ ｒｓ ｎ ｃ ｎ ｅＮａｕ ａ ｃ ｎｅＥ ｉｏ ） ｏ ｒ ａ ａ ｉｅｓ ｙ Ａ ｔ ａ ｄＳｉ ｃ（ ｔｒｌ ｉ ｃ ｄｔ ｎ ｏ Ｈｕ ｔｏ ｅ Ｓｅ ｉ
ｃ ｏ ｓ ｄ ｔ ｈ ｋ ｎ ｏｔｅｉ ｃ ｂ ｔ ｇ ａ ２ ／ ｎ ３ ℃ ． ｈ ａ ｔ ｒａｌ ｕ ｄ ｗａ ｅ ｔ ｄ ｂ ｏｏ ｙ ＰＣ ａ ｄ ｓ ｑ ｅ ｃ ｎ ， ｈ ｏ ｅ ｓ ａ ｉ ｇ ｂ ｔ ｎ ｕ ａ ｉ ｔ ０ ｒ ｏ ｌ ｎ ２ ｍｉ ， ７ Ｔ ｅｂ ｃｅ ｉ ｉ ｓｔ ｓｅ ｙ ｃ ｌ ｎ Ｒ ｅ ｕ ｎ ｉ ｇ ｉ ｑ ｎ
ｅｐｅｓ ｎｐａｍｉ ｅｔ ｄｍａｅｉｓｃｅｓ ｌ ｘ ｒｓｅ ． ｈ ｅｏ ｃ ｐ ｎｒａ ｉｇｆ ｍｅＯＲ ） ａ ｓｌ ｅ ｘ ｒｓｉ ｌｓ ｄｖ ｃ ｒａ ｋ ｕ ｃｓｆ ｌ ｅｐｅｓｄ Ｔ ｅｔ ｒｍａｉ ｏ ｅ ｅｄｎ ａ （ Ｆ ｗ ｓ ｏａ ｄ ｏ ｏｎ ｔ ｕ ｙ ｈ ｎ ｒ ｉ ｔ
Ｌ ｄ ｅ 购 自北京 Ｓ ｌ ｂｏ ｂｏｔｋＥＺＮ． Ｐａｍｉ ａｄ ｒ ｏａ ｉ． ｉ ｅ ． ． ＡⅢ ｌｓ ｄ ｒ Ｍｉ ｄＫｉＩ购 自 Ｏ Ｇ 公 司． ｎ ｉ ｔ ＭＥ Ａ
Ｌ ａ － ｕ ， ＵＪａ－ ｎ ， Ｉ ａ－ｉ， Ａ ｉｏ ｙ Ｉ ｏ ｇ ｏ Ｓ ｎ ｍｉｇ ＬＵ Ｑｉ ｌ ＸＩ Ｏ Ｔａ － ｉ Ｙ ｉ ｏ ｎ （ ａｏａ ｒ ｆ ｕ ｃｌ ｒ Ｂ ｏ ｇ， ｏｌ ｅ ｆ ｉ ｌ ｃｅｃ ｄＴｃｎ ｌｇ， ｕ ａ ｒ ｕｔｒ ｎｖｒｉ ， Ｌ ｂｒｔ ｙｏ Ａｑ ａｕｔ ｅ ｉｌ ｙ Ｃ ｌ ｇ Ａｎｍａ Ｓｉｎｅ ｎ ｅｈ ｏｏ ｙ Ｈ ｎ ｎ ｉ ｌ ｅＵ ｉｅｓｙ ｏ ｕ ｏ ｅ ｏ ａ Ａｇ ｃ ｕ ｔ Ｃ ａｇｈ １ １ ８ Ｃ ｉａ ｈ ｎ ｓａ ０ ２ ， ｈｎ ） ４
响应面法优化提取三角帆蚌粗多糖及分离纯化和一级结构表征的研究
响应面法优化提取三角帆蚌粗多糖及分离纯化和一级结构表征的研究摘要：本课题主要是对三角帆蚌多糖（HCPS）的提取、纯化和一级结构表征进行研究。
首先，在单因素的基础上，采用三因素三水平Box-Behnken设计和响应面分析法优化提取三角帆蚌多糖（HCPS）。
结果表明，最佳条件为：提取温度80℃, 提取时间4.5h，固液比为：1:8（v / w），在此条件下，粗多糖得率为3.66%。
粗HCPS通过DEAE-cellulose 52色谱和Sephadex G-100色谱分离得到三种组分：HCPS-1, HCPS-2 和HCPS-3，各自的得率分别为HCPS-1 26.91% HCPS-2 30.18%为和HCPS-3 3.93%。
通过傅里叶变换-红外光谱法，液相色谱方法和气相色谱法对进行结构研究，表明：HCPS-3与HCPS-1或HCPS-2相比结构上具有很大差异。
关键词：优化；多糖；提取；纯化；三角帆蛙1 介绍从植物、附生菌和动物中提取的多糖包含物已经被广泛应用在传统中医药一些疾病的治疗方面。
蚌类是生物多糖资源的一个研究热点。
据报道，蚌类多糖具有潜在的生物功能，如：抗肿瘤、抗病毒、免疫调节、抗氧化等等。
因此，从各种各样的蚌类中发现和鉴定新多糖已经成为一个研究热点。
在中国，三角帆蚌作为淡水珍珠贝家族的一员是最经济、最重要的贻贝种类。
在世界市场上，95%的淡水贻贝来自于中国，而95%的淡水贻贝来自于三角帆蚌。
在中国质量高的三角帆蚌被广泛的养殖。
但是三角帆蚌下脚料（淡水贻贝生产废弃物）多被用于动物饲料和肥料当中。
事实上，这些下脚料可以应用于食品和医药的原材料中。
据报道，三角帆蚌在传统中医药中用于治疗一些疾病。
另外，最近研究表明，三角帆蚌下脚料富含多糖，这些多糖具有营养和药理功能，如：抗肿瘤、增强免疫力、抗炎症和抗老化。
但是，对于三角帆蚌多糖（HCPS）的提取、纯化、结构特征和生物活性的研究关注还少。
因此，本研究详细报道了HCPS提取参数的优化和精制HCPS的一级特征。
三角帆蚌免疫系统及其珍珠层研究进展
三角帆蚌免疫系统及其珍珠层研究进展葛耀;施维林;吴晓乾【摘要】为蚌病害的防治及培育出更优质的珍珠,根据近年来淡水育珠蚌三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)及部分其他贝类的研究资料,综述了三角帆蚌血细胞免疫、体液免疫,及其珍珠层结构与形成方面的研究进展,同时分析指出了现有研究的不足及以后的研究重点.%In order to control ihe oyster diseases and cultivate excellenl pearls, the studies on the haemocyte, humoral immunity, and thernstructure and formation of nacre in Hyriopsis cumingii were reviewed according to the research data about H. cumingii and other shellfish, andrnsimultaneously the deficiencies of existing studies and the focus of future researches were pointed out.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2012(040)016【总页数】4页(P8901-8904)【关键词】三角帆蚌;免疫系统;珍珠层;基质蛋白;研究进展【作者】葛耀;施维林;吴晓乾【作者单位】苏州科技学院环境科学与工程学院,江苏苏州215011;苏州科技学院环境科学与工程学院,江苏苏州215011;苏州科技学院环境科学与工程学院,江苏苏州215011【正文语种】中文【中图分类】S185三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)是我国主要的淡水育珠蚌之一，也是主产于我国的重要经济贝类，其历史悠久、产量高、成珠质量上乘［1］。
目前其产量仍在逐年提高，年产量达1 800 t左右，为世界总产量的95%以上。
插核手术对三角帆蚌血淋巴中
第16卷第6期 2009年11月
中国水产科学
Journal of Fishery Sciences of China
Vol.16 No.6 November 2009
插核手术对三角帆蚌血淋巴中 3 种免疫防御因子的影响
何秀娟，施志仪，李文娟
（上海海洋大学 生物技术研究中心，上海 201306）
摘要：对三角帆蚌（Hyriopsis cumingii Lea）进行内脏团插核手术，并对术后机体免疫相关因子基因 alpha-2 巨球蛋白（α2M）、 酶酸性磷酸酶（ACP）和超氧化物歧化酶（SOD）的变化情况进行研究，旨在为三角帆蚌内脏团育珠实践提供理论依据。实 验选取 100 只健康三角帆蚌分为 2 组（各 50 只，每组各设 5 个重复，每重复各 10 只蚌），一组在蚌体内脏团进行插核手术 （实验组），一组未经处理（对照组），分别饲养于相同条件恒温（24 ℃）淡水缸内。两组分别于插核后 1 天、2 天、3 天、5 天及 10 天采集淋巴血，通过 RT-PCR 及酶活测定法研究 α2M 基因表达和 ACP、SOD 在术后活性的变化。结果发现，α2M 基因 在手术后表达量增加，在插核后第 3 天和第 5 天与对照组差异显著（P<0.05）；实验组血清和血细胞中 ACP 活性均显著高 于对照组；实验组血清中 SOD 活性在第 3 天、5 天、10 天高于对照组（P<0.05）；实验组血细胞中 SOD 的活性低于对照组。 本研究表明，内脏团插核手术后三角帆蚌机体的免疫防御调节增强，血液中免疫相关基因 α2M 的表达水平和免疫相关酶 ACP 和 SOD 活性均有明显变化。[ 中国水产科学，2009，16（6）：859-867]