血液样本采集和血涂片制备
血液样本采集和血涂片制备
1、抽血时针栓只能外抽，不能内推，以免静脉内注入空气形
成气栓，造成严重后果。
2、属于酸性染料的是：伊红属于酸性染料，通常为钠盐，有
色部分为阴离子。
3、疟原虫检查常用的染色方法是：吉姆萨染液对细胞核、
寄生虫（如疟原虫等）找色较好，结构更清晰，但对细胞质的着色能力略差。
4、手工推片法，推片与载玻片的夹角为25°～30°。
5、血液黏度与血细胞比容和血浆黏度有关，其中，血浆黏度
受血浆中纤维蛋白原、球蛋白等大分子蛋白质的影响，它们的浓度越高，血浆黏度越高。
6、涂片瑞氏染色时，缓冲液常用的pH为6.4～6.8。
7、瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝（又名美
蓝）组成。染色原理既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染伊红结合，染粉红色；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料亚甲蓝或天青结合，染紫蓝色或蓝色；
中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合，染淡紫红色；原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物
质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。瑞氏染色法是最经典、最常用染色法。
8、瑞氏染料亚甲蓝容易氧化为一二三甲基硫堇等次级染料
（即天青）。将适量伊红、亚甲蓝溶解在甲醇中，即为瑞氏染料，由酸性染料伊红（E－）和碱性染料亚甲蓝（M＋）组成。
Ⅱ液磷酸盐缓冲液pH为6.4～6.8。在偏碱性环境中负电荷增多，易与亚甲蓝结合，所有细胞呈灰蓝色，颗粒呈深暗，嗜酸
颗粒呈暗褐，甚至棕黑色，中性颗粒偏粗，呈紫黑色。
9、细胞各种成分均属蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液pH而定，在偏酸环境中正电荷增多易与伊红结合染色偏红；在偏碱环境中负电荷增多易与亚甲蓝或天青结合偏蓝。因此，细胞染色对氢离子浓度十分敏感，所以在瑞氏染色中缓冲液起到恒定pH作用。
10、染色原理：既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。11、血清与血浆的差别是：血清中缺少某些凝血因子，如凝血因子Ⅰ（纤维蛋白原）、凝血因子Ⅱ（凝血酶原）、凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ等。
12、正常成人血量约为（70±10ml）/kg体重，成人4～5L，占体重的6%～8%，其中血浆占55%，血细胞占45%。
13、全血由血细胞和血浆组成；血浆为全血除去血细胞部分，除钙离子外，含有其他全部凝血因子；血清是离体后的血液自然凝固后析出的液体部分，除纤维蛋白原等凝血因子在凝血时消耗外，其他成分与血浆基本相同。
14、涂片瑞氏染色时，缓冲液常用的pH为6.4～6.8。
15、很多因素影响血涂片时血膜的厚度，血滴大、血黏度高、推片角度大、速度快则血膜厚，反之则血膜薄。
16、引起血涂片分布不均的主要原因有：推片边缘不整齐，用力不均匀，载片不清洁。
17、疟原虫、微丝蚴检查，采用厚血膜涂片法。
18、红细胞沉降率测定时，抗凝剂与血液的比例为1：4。
19、肝素能加强凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成。过量肝素可引起白细胞聚集合血小板减少，均不适合白细胞分类和血小板计数，更不适用于止血学检验，但是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂。每毫升血液的肝素用量为10.0～12.5IU，多为肝素钠盐或钾盐
20、血液由血细胞和血浆组成，将抗凝的全血离心后除去血细胞成分即为血浆。
21、双草酸盐抗凝剂可用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等项目检查，但其可使血小板聚集，影响白细胞形态，不适用于血小板计数、白细胞分类计数。
22、枸橼酸盐：常用有枸橼酸钠，能与血液中钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。
23、肝素：加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。24、血液常规分析所用的抗凝剂：EDTA-K2。临床上常用的抗凝剂有：①枸橼酸盐，可与钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固，常用于凝血象和红细胞沉降率的测定；②草酸盐，可与钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固，常用于凝血象检查；③双草抗凝剂，适用于血细胞比容、血细胞计数、网织红细胞计数等检查，不适用于血小板计数和白细胞分类计数；④肝素，是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂，但不适用于细胞形态学检查和全血细胞计数；⑤乙二胺四乙酸EDTA盐，可与钙离子形成螯合物，使钙离子失去凝血作用，阻止血液凝固，适用于全血细胞计数，不适用于凝血检查、血小板功能试验。
24、EDTA抗凝剂对血细胞形态、血小板计数影响很小，适用于血液学检查，尤其是血小板计数。
25、纤维蛋白原国际命名为凝血因子Ⅰ，是血浆的成分之一。
26、抗凝血标本采集后保存的最佳温度为4℃左右，通常室温（22℃左右）放置的待测血标本应在采集后8h内测定完毕；如果室温大于32℃，血标本采集后应在4h内完成检测。
27、皮肤采血法又称毛细血管采血法。耳垂采血痛感较轻，但血液循环较差，受气温影响较大，检查结果不够恒定（如红细胞、
白细胞、血红蛋白和血细胞比容等测定结果比手指血或静脉血高），一般情况下不宜使用。手指采血检查结果比较恒定，世界卫生组织（WHO）推荐采集左手无名指指端内侧血液。
28、毛细血管采血法如血液不易流出，可于伤口远端稍加压力或重新穿刺，切勿用力挤压，以免造成组织液混入，影响结果的准确性。
29、皮肤采血多选择手指或耳垂采血部位采血。耳垂血的红细胞、白细胞、血红蛋白和血细胞比容的测定结果均比手指血或静脉血高，一般情况下不宜使用。手指采血操作方便，可获较多血量，检查结果比较恒定。
30、静脉采血法根据采血量可选用不同型号注射器，配备相应的针头。某些特殊检查，为避免血小板激活，要使用塑料注射器和硅化处理后的试管或塑料试管。
31、EDTA-K2适用于全血细胞分析，护士把血常规中的血液倒入生化管中也一并把EDTA-K2抗凝剂倒入管中，使K+升高。
32、皮肤采血法，曾长期被称为毛细血管采血法，所采之血实质是微动脉血、微静脉和毛细血管的混合血，含有细胞间质和细胞内液。
33、婴幼儿手指太小，可从大趾或足跟采血。
34、位于体表的浅静脉几乎均可作为采血部位，通常采用肘部静脉；如肘部静脉不明显时，可改用手背静脉或内踝静脉，必要时也可从股静脉采血。
35、抽血完毕，取下注射器针头，将血液沿试管壁缓缓注入抗凝管中，防止溶血和泡沫产生。
36、血涂片在用光学显微镜观察前需要固定和染色。固定是将细胞蛋白质和多糖等成分迅速交联凝固，以保持细胞原有形态结构不发生变化。染色是使细胞的主要结构，如细胞膜、细胞质、细胞核等染上不同的颜色，以便于镜下观察识别。血涂片染色方法大多源自罗氏染色法，常用瑞氏染色法、姬姆萨染色法。
37结核杆菌抗酸染色时因菌体含有大量脂类而不易着色，无论是否经碘液处理，着色后均不易被盐酸乙醇脱色，所以使菌体呈红色。
38、嗜碱性点彩红细胞染色是用50g/L碱性亚甲蓝液染色1～2min，用水冲洗后晾干。
39、网织红细胞计数的普通光学显微镜法原理：经体外活体染色，网织红细胞内RNA的磷酸基带有负电荷，能与新亚甲蓝、煌焦油蓝、中性红等碱性染料带正电荷的有色反应基团结合，使RNA胶体间电荷减少，分子间斥力下降失去分散力，形成核酸与碱性染料复合物的多聚体，呈深染的颗粒状或网状结构。凡含两个以上的深染颗粒或具有线网状结构的无核红细胞，即为网织红细胞。
40、血液黏度与血细胞比容和血浆黏度有关，其中，血浆黏度受血浆中纤维蛋白原、球蛋白等大分子蛋白质的影响，它们的浓度
越高，血浆黏度越高。
41、清蛋白具有维持血浆胶体渗透压和缓冲血液酸碱的能力。
42、EDTA-K2抗凝剂用于：血小板计数、
43、
44、
45、
46、正确：
47、。
48、
49、抗凝剂正确的是：
50、瑞氏染液正确的是：
51、双草酸盐抗凝剂正确：
52、
53、
54、
55、52、
53 54、
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57 58、60
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80、
血涂片及骨髓涂片的制片与读片
血涂片及骨髓涂片的制作与读片 潘志强 2006-3-30 实验准备 一．器材： 载玻片：每只动物一块 盖玻片：每只动物一块 滴管：4个 橡皮吸头：4个 中号镊子：4把 大剪刀：4把 眼科镊：4把 玻璃棒：4根 烧杯：1000 ml，2个 量筒：100ml、500 ml、1000 ml各一 蜡笔 棕色小口瓶 碾钵 载玻片处理：一般将载玻片先用洗衣粉水溶液煮沸20分钟，用流水冲洗，再经清洁液浸泡过夜，用流水反复冲洗，最后入95%酒精浸泡约1小时。取出，以洁净布巾夹持玻片边缘擦干备用。 二．试剂： 瑞氏染液240ml 瑞氏染料粉剂0.1g 纯甲醇（AR）60ml 将粉剂放入洁净干燥碾钵内，先加少量甲醇研磨使染料溶解，然后将已溶解的染料倒入洁净的棕色玻璃瓶内，剩下未溶解的再加入少量甲醇研磨，如此反复，直至染料完全溶解为止。新配制的染液需密封保存，室温放置1周后才能使用。染料存放越久，染色效果越好。 磷酸盐缓冲液 1%KH2PO4 30ml 1%Na2HPO4 20ml ，定容至1000ml。 甲醇 鸡蛋清：蒸馏水与鸡蛋清按1/1的比例稀释。 中性树胶：如果中性树胶过于粘稠，可将中性树胶与二甲苯按7/3的比例稀释。 二甲苯
实验步骤 一．涂片 （一）血液涂片的制作 （1）需载玻片2张，分别称为玻片1和玻片2（推片）。 （2）用玻片1一端接约3mm直径的血滴，将此玻片1保持水平。 （3）取另一边缘平整的载玻片2（推片），将其前端放在血滴前，与片1保持30°角并稍向后移与血滴接触，即见血液沿片2（推片）下缘散开，使血液展开并充满整个推片的宽度。 （4）立刻将推片与载玻片呈30°角，边轻压推片边将血液按下图的箭头方向推动涂抹，至血液铺完血膜为止。 （5）挥动片1使血膜吹干，用蜡笔将血膜边缘圈画备染色。 （6）每只动物涂片一张。 （7）一张良好的血片，要求厚薄适宜，头、体、尾分明。 （8）置30min～1hr后较利于观察红细胞的形态。 注意事项： ●如标本本身太短，可观察的部分会受局限，故以在离开载玻片另一端2cm地方涂抹为宜。 ●载玻片、推片的角度越小、血液越薄；涂抹速度越慢、也越薄。在涂抹贫血病人的血液时，将推片稍竖起（不 是30°而是35°～40°左右），以较快的速度推比较好，而对红细胞增高的病人则相反。 ●如用力过猛白细胞容易破损。 （二）骨髓涂片的制作 用手术剪刀剪掉大腿部的肌肉，充分暴露股骨，再用大剪刀从上端剪断第2股骨，用中号 镊子夹股骨以挤出骨髓，如果骨髓不易取出，可用直头眼科镊插入骨髓腔挑出骨髓，置骨髓于 一载玻片上，由于骨髓液的纤维蛋白原含量较高，易于凝固，可先在骨髓液内加5~10倍的稀 释后鸡蛋清，充分混匀，取1滴至另一载玻片上，涂片。涂片方法同血液涂片，但推片要快并 迅速使之干燥。每只动物涂片一张。 二．染色 （一）血液涂片的染色 （1）将待染涂片平放于染色架上。 （2）用滴管将染液滴于涂片上，覆盖整张涂片，放置1～3分钟。 （3）加入等量的磷酸缓冲液或蒸馏水，与染液混匀，可以用滴管从一端吸入，另一端放出，混匀为止，或用嘴来回轻轻吹之，使之混匀，室温下染色5～10分钟（白细胞数多或骨 髓标本时间应长一些，如20～30min）。 （4）染色结束时，先用蒸馏水或缓冲液洗将涂片上的染液直接冲掉。 （5）再将片子用自来水温和冲洗，至血液膜呈淡红色。 （6）甩干或晾干玻片。 （7）封片。 （二）骨髓涂片的染色 同血液涂片。
血液样本的采集与保存
实用帖｜血液样本的采集与保存 在脊椎动物中，外周血一直被认为是侵害性较小、富有价值的检测样本。在许多生物样本库中，由于血液样本的常规收集、处理及保存方法简便、成本低且富含可利用成分和生物分子，因此是进行多种项目分析的理想实验材料。然鹅，科研僧们历经千辛万苦最后发现获得的血液样本RNA降解了。。。。额，这就很惆怅了。 所以呢，在样本采集、处理及储存过程中必须格外注意，从根本上确保获得高质量的RNA。 今天小编和大家一起来聊一聊在进行RNA实验时血液样本如何进行收集与保存。 血液的组成 首先来熟悉一下血液的组成。 人类的血液由血浆和血细胞组成。其中血浆约占血液的55%，是水，糖，脂肪，蛋白质，钾盐和钙盐等的混合物。血细胞约占血液的45%，主要分为红细胞、白细胞和血小板。而哺乳动物成熟的红细胞和血小板是无核的。
血浆和血清 血浆是离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体，其中含有纤维蛋白原，不含游离的Ca2+，若向血浆中加入Ca2+，血浆会发生再凝固。 血清是离体的血液凝固之后，经血凝块聚缩释出的液体，其中已无纤维蛋白原，但含有游离的Ca2+，血清中少了很多的凝血因子但多了很多的凝血产物。
采血管的选择 采血管，大家都不陌生，去医院抽个血，一定会用到采血管，那么问题来鸟，这么多颜色的采血管，有什么区别呢？下面小编来给大家介绍一下采血管的分类及不同颜色试管帽代表的含义。 1.蓝色头盖管（含有柠檬酸钠抗凝剂的采血管） 2.黑色头盖管(含有 0.109mol/L 柠檬酸钠) 3.紫色头盖管(含有乙二胺四乙酸以及其盐的采血管) 4.绿色头盖管（肝素抗凝管） 5.灰色头盖管(含有草酸钾/氟化钠） 6.橘红色头盖管（促凝管） 7.金黄色头盖管（含有惰性分离胶及促凝剂的采血管）
血样样本的采集和处理
血液样本的采集和处理 血液样本的采集和处理 (1) CD4+和CD8+ T淋巴细胞样品的采集和处理 (4) 血液样本的采集和处理 一、血清样品的采集和处理 1、用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量静脉血，室温下自然放置1～2h，待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min，吸出血清于血清管内备用。 2、如用滤纸片采样，则手指或耳垂局部严格进行消毒，在刺破皮肤后，迅速把滤纸片沾上，切勿让血液滴落在其他物体表面造成污染。采血后要待血样干燥后再包装送检。 二、抗凝血样品采集和处理 1、用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管），反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。 2、应根据实验要求选用适当的抗凝剂，如CD4+ /CD 8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或枸橼酸钠，HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选取K3EDTA或枸橼酸纳。 3、用于核酸定性检测时，采集的抗凝全血应在4～8h内分离PBMC和血浆，否则应在24～48h内分离血浆和血细胞。
三、采集样品注意事项 1、采集样品原则上应按临床采血技术规范操作（试剂盒说明书有特殊要求除外）。 2、采集样品时应注意安全，建议采用真空采血管及蝶形针具（有条件者可用持针器），以避免直接接触血液；直接接触HIV感染者/艾滋病（AIDS）病人血液/体液的操作，应戴双层手套。 四、样品的保存 1、用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20℃以下，短期（一周）内进行检测的样品可存放于2-8℃。 2、用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃以下，进行病毒RNA检测的样品如需存放3个月以上应置于-80℃。 3、用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期存放，样品采集时间超过48h则不可检测。 五、样品的运送 1、实验室间传递的样品应为血清和血浆，除特殊情况外一般不运送全血。 (1) 第一层容器：装样品，要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免破碎。随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。 (2) 第二层容器：要求耐受性好，防渗漏，容纳和保护第一层
实验四 血涂片的制备与染色
实验四血涂片的制备与染色 【目的】掌握血涂片的制备和染色方法（preparation and staining of thin blood films）。 【原理】将一小滴血液均匀涂在玻片上，呈单层紧密分布，制成薄血片。用含天青B和伊红的Romannowsky类染料进行染色。细胞中的碱性物质如RBC中的血红蛋白及嗜酸性粒细胞胞质中的嗜酸性颗粒等与酸性染料伊红结合染成红色；细胞中的酸性物质如淋巴细胞胞质及嗜碱性粒细胞质中的嗜碱性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合染成蓝色；中性粒细胞的中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染成淡紫红色。 【器材】 1．载玻片使用前，必须仔细清洗，并用乙醇或软布清洁。 2．推片选择边缘光滑的载玻片，在两角分别作斜线标记，然后用玻璃切割刀裁去两角，制成约15mm 宽度的推片。 3．吸耳球。 4．显微镜。 5．酒精灯或Bunsen灯。 6．采血针。 7．注射器和针头。 【试剂】 1．瑞氏（Wright）染液 （1）Ⅰ液：包含瑞氏染料1.0g、纯甲醇（AR级以上)600ml、甘油15ml。将全部染料放入清洁干燥的乳钵中，先加少量甲醇慢慢地研磨（至少30min），以使染料充分溶解，再加一些甲醇混匀，然后将溶解的部分倒入洁净的棕色瓶内，乳钵内剩余的未溶解的染料，再加入少许甲醇细研，如此多次研磨，直至染料全部溶解，甲醇用完为止。再加15ml甘油密闭保存。 （2）Ⅱ液：磷酸盐缓冲液（pH6.4～6.8），包含磷酸二氢钾（KH2PO4）0.3g、磷酸氢二钠（Na2HPO4）0.2g、蒸馏水加至1000ml。配好后用磷酸盐溶液校正pH，塞紧瓶口贮存。如无缓冲液可用新鲜蒸馏水代替。 2．吉姆萨染液包含吉姆萨染料0.75g、甘油35ml、甲醇65ml。将吉姆萨染料、甘油和甲醇放入含玻璃珠的容器内，每天混匀3次，连续4天，最后过滤备用。 3．瑞-吉复合染液 （1）I液：包含瑞氏染料1g、吉姆萨染料0.3g、甲醇500ml、中性甘油10ml。将瑞氏染料和吉姆萨染料置洁净研钵中，加少量甲醇，研磨片刻，再吸出上液。如此连续几次，共用甲醇500ml。收集于棕色玻璃瓶中，每天早、晚各摇3min，共5d，以后存放1周即能使用。 （2）Ⅱ液：即磷酸盐缓冲液（pH6.4～6.8）。包含无水磷酸二氢钾6.64g、无水磷酸氢二钠2.56g，加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整pH，加水至1000ml。 【标本】 EDTA抗凝静脉血或末梢血。 【操作】 1．采血 （1）静脉采血法：用EDTA·K2抗凝1～2h内的标本，使用玻棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血，直径约4mm。 （2）皮肤采血法：选择第三、四手指，并先采红细胞、白细胞计数，再采血1滴置洁净玻片上用于血涂片制备。
血液样本采集标准操作规程
血液样本采集标准操作规程 1.目的 规范样本库采集人体血液样本的操作规程。 2.适用范围 适用于使用真空采血管采集人体血液样本的活动过程。 3.定义和术语 3.1知情同意 保证被收集者了解并理解研究的目的和内容，并自愿同意参加试验的原则。知情同意具有国际性，是对所有进行人体研究或人体取样调查的研究人员的伦理要求。在以人为研究/试验对象的科研领域，收集者必须获得研究对象/参与者的知情同意，保护被收集者合法权益的同时保护收集者免于诉讼。 3.2知情同意书 知情同意书，是每位被收集者表示自愿参加某一项试验而签署的文件。知情同意的具体体现是知情同意书的签署。知情同意书由收集者和被收集者共同签署，一式两份。正本由收集者保存，被收集者保存副本。 3.3真空采血管采血法 将有头盖胶塞的采血试管预先抽成不同的真空度，利用其负压自动定量采集静脉血样。 3.4血清和血凝块 指在凝血过程中，血浆中的纤维蛋白原转变为不溶的血纤维。血纤维交织成网，将很多血细胞网罗在内，形成血凝块。血液凝固后，血凝块又发生回缩，并释放出淡黄色液体，称为血清，其中已无纤维蛋白原。
3.5血浆 血浆是离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体，其中含有纤维蛋白原。 3.6白细胞 白细胞人体血液及组织中的无色细胞，是血液中的一类细胞，有细胞核。根据形态特征可分为粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。 3.7枸橼酸钠(柠檬酸钠) 枸橼酸能与血液中的钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。 3.8乙二胺四乙酸二钾(EDTA·K2) 与枸橼酸钠的抗凝机制相同，用21.5-2.2mg EDTA·K2可阻止1ml血液凝固。 3.9肝素 一种相对分子质量为15000，含硫酸基团的黏多糖，与抗凝血酶Ⅲ结合，促进其对凝血因子和凝血酶活性的抑制，抑制血小板聚集从而达到抗凝。 4.职责 4.1临床护理人员 按照标准操作规程采集血液。 4.2样本管理员 协助样本的采集，对样本进行处理和储存，并作相关记录。 5.设备和耗材 5.1个人防护装备 实验防护服、手套、口罩、护目镜及其它相关防护装备。 5.2设备
动脉血气分析标本采集操作流程
动脉血气分析标本采集操作流程 注意事项： （1）、氧浓度计算方法;21+4×氧流量；如上呼吸机应在化验单上注明呼吸机参数及采血时间。 （2）、采血是指导患者尽量放松平静呼吸，若患者饮热水、洗澡、运动，需休息30 分钟后再取血，避免影响血气分析结果。 （3）、严格执行无菌操作技术，消毒面积应较静脉穿刺大，预防感染。（4）、做血气分析时注射器内勿有空气。 （5）、首选桡动脉，必要时选择股动脉或肱动脉。 （6）、血气分析参考值 PH 值：7.35~7.45.（P H<7.35 为失代偿性酸中毒；PH>7.45 为失代偿性碱中毒。） 动脉血氧分压（PaO2）：95~100mmHg。（ PaO2 是判断是否缺氧及其
程度的重要指标。PaO2<60 mmHg 是判断呼吸衰竭的标准，<30 mmHg 可有生命危险。 动脉血氧饱和度（SaO2）：0.95~0.98。 动脉血二氧化碳分压（PaCO2）：35~45mmHg。（ PaCO2 衡量肺泡通气功能的指标。肺泡通气不足，PaCO2增高，当 PaCO2 大于50mmHg 时，提示呼吸性酸中毒，亦为Ⅱ型呼吸衰竭的标准。肺泡通气过度，PaCO2则下降。）实际碳酸氢根（AB）：21.4~27.3mmol/L。 标准碳酸氢根（SB）：21.3~24.8 mmol/L。（AB 是体内代谢性酸碱失衡重要指标，在特定条件下计算处SB 也反映代谢因素。二者正常为酸碱内稳正常。二者皆低为代谢性酸中毒（未代偿），二者皆高为代谢性碱中毒（未代偿），A B>SB 为呼吸性酸中毒。）二氧化碳总量（TCO2）：参考值24~32 mmHg。（代表血中CO2和HCO3 之和，在体内受呼吸和代谢二方面影响。代谢性酸中毒是明显下降，碱中毒时明显上升。）剩碱值 （BE）:－3~+3 mmol/L.（正值指示增加，负值指示降低。）阴离子隙 （AG）：8~16 mmol/L.（是早期发现混合性酸碱中毒重要指标。） 判断酸碱失衡应先了解临床情况，一般根据PH、PaO2、BE（或AB）判断失衡，根据PaO2及PaCO2。PH超过正常范围提示存在失衡。但PH正常仍可能有酸碱失衡。PaCO2超出正常范围提示呼吸性酸碱失衡，BE超出正常范围提示代谢性酸碱失衡。但血气和酸碱分析有时还要结合其他检查，结合临床动态观察，才能得到正确判断。
动脉血标本采集技术答案教学内容
动脉血标本采集技术 答案
精品文档 动脉血标本采集技术答案 [选择题] [A型题] 1．血气分析时，标本的采集处理中，以下做法错误的是： A．采集动脉血 B．以肝素抗凝 C．立即送检D．不需与空气隔绝E．抽血后将针头刺入胶塞摇匀血液 2．I型呼衰是指： A．PaO2＞60mmHg，PaCO2＞50mmHg B．PaO2＞60mmHg，PaCO2＜50mmHg C．PaO2＞70mmHg，PaCO2＜55mmHg D．PaO2＜60mmHg E．以上都不是 3．Ⅱ型呼衰是指： A．PaO2＜60mmHg，PaCO2＜40mmHg B．PaO2＜55mmHg，PaCO2＞30mmHg C．PaO2＜50mmHg，PaCO2＞20mmHg D．PaO2＜60mmHg，PaCO2＞50mmHg E．PaO2＞60mmHg，PaCO2＜15mmHg 4．关于I型呼衰，说法不正确的是： A．缺氧但不伴二氧化碳潴留 B．为肺泡换气不足所致 C．若伴通气功能障碍则缺氧更为严重 D．常见于肺间质纤维化 E．常见于慢性阻塞性肺疾病 5．动脉血气分析pH = 7.46，PCO2 = 32mmHg，BE = 3mmol／L，提示：A．正常范围B．呼吸性碱中毒 C．呼吸性酸中毒D．代谢性碱中毒 E．代谢性酸中毒 6．代谢性酸中毒的临床表现为： A．呼吸快而浅B．呼吸慢而浅 C．尿液呈碱性 D．肌肉震颤 E．呼吸深而快 7．股动脉位于： A．股三角内由髂外动脉发出B．股神经外侧C．股静脉内侧 D．股静脉外侧 E．股深动脉内侧 8．判断机体低氧血症最敏感的指标为： A．发绀 B．静脉血氧分压 C．动脉血氧分压 D．动脉血氧饱和度 E．弥散功能测定 9．呼吸衰竭时，其血气分析结果会出现哪些改变： A．PaO2＜70mmHg、PaCO2＞50mmHg B．PaO2＜60mmHg(伴或不伴)PaCO2＞50mmHg C.PaO2＜80mmHg、PaCO2＞60mmHg D．PaO2＜60mmHg、PaCO2＞60mmHg E．PaO2＜65mmHg、PaCO2＞70mmHg 10．纠正缺氧和二氧化碳潴留最重要的措施是： A．氧气疗法B．保持气道通畅C．增加通气量 D．纠正酸碱平衡失调 E．提高呼吸系统兴奋性 收集于网络，如有侵权请联系管理员删除
实验一 血涂片的制备
实验二、血涂片的制备和血细胞的观察 目的要求 1.掌握血涂片的的制备方法 2.认识红细胞及各种白细胞的典型形态 基本原理 涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本，染色后可对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。 实验用品 1.器材：医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片； 2.试剂：Wright’s染液：Wright’s色素粉末0.1g，溶于60 ml甲醇。 方法与步骤 1．采血采血前用70％酒精棉球消毒人的指腹或耳垂，干后用采血针刺破指腹或耳垂的皮肤；动物采血时先将耳部剪毛，酒精消毒后，刺破动物耳部皮肤，挤去第一滴血不要（因含单核白细胞较多）。 2．涂片挤出第二滴血置于载玻片的一端，再取另一张边缘光滑的载玻片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状，两玻片的角度以45°为宜（角度过大血膜较厚，角度小则血膜薄），轻轻将载玻片向前推进，即涂成血液薄膜（图2-2）。推进时速度要一致，否则血膜成波浪形，厚薄不匀，初学者可把玻片放在桌上操作。 3．染色待涂片在空气中完全干燥后，滴加数滴Wright’s染液盖满血膜为止，染色1～3 min。然后滴加等量的缓冲液（pH6.4）或蒸馏水，使其与染液均匀混合，静置2～5 min。用蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干。 4．镜检显微镜观察可见人红细胞为凹圆盘形，无核，淡红色，缘部分染色较深，中心较浅，直径7-8微米。白细胞数目少，为圆形。 颗粒白细胞（1）嗜中性颗粒白细胞：体积略大于红细胞，细胞核被染成紫色分叶状，可分1-5叶，直径10-12微米；（2）嗜酸性颗粒白细胞：略大于嗜中性白细胞，细胞核染成紫色，通常为2叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成鲜红色，直径10-15微米；（3）嗜碱性颗粒白细胞：体积略小于嗜酸性白细胞，细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少，核1-2叶，染成淡蓝色，直径10-11微米。 无颗粒白细胞（1）淋巴细胞：可观察到中、小型两种。小淋巴细胞与红细胞大小相似，圆形，核致密，染成深紫色。周围仅一薄层嗜碱性染成淡蓝的细胞质。中淋巴细胞较大，核圆形。直径6-8微米。（2）单核细胞：体积最大，细胞圆形。胞质染成灰蓝色。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。直径14-20微米。 血小板为不规则小体，直径2 - 3微米。其周围部分浅蓝色，中央有细小的紫红色颗粒，聚集成群。 实验报告内容 绘制人血涂片镜下图
血涂片制作
血涂片制作 将血标本均匀地涂抹在清洁干燥的载玻片上，经染色后在显微镜下检查，这是血细胞形态学检查的基本方法，临床应用很广，特别是对各种血液病的形态学诊断很有价值。但是，如果血徐片制备不良，染色不佳，常使血细胞的形态学鉴别和诊断发生困难，甚至导致错误的结论。如血膜过厚，细胞重叠缩小；血膜太薄，白细胞多集中于边缘。因此，制备厚薄适宜、分布均匀的血涂片是血液学检验的基本技术之一。 一、载玻片的清洁 新载玻片上常有游离碱质，必须用约lmol／L HCI浸泡24h 后，再用清水彻底冲洗，干燥备用。用过的载玻片可放入含适量肥皂或合成洗涤剂的清水中煮沸20min，再用热水将肥皂和血膜洗净，用清水反复冲洗，干燥备用。如急用载玻片，可将其置0、9乙醇中浸泡lh，用蒸馏水洗净后，擦干或烘干备用。使用载玻片时，只能手持玻片边缘，切勿用手触及玻片表面，以保持玻片清洁、干燥、中性、无油腻。 二、制作血涂片的标本 血涂片既可由非抗凝的静脉血和毛细血管血制备，也可由
EDTA抗凝血制备。EDTA抗凝血中，钙离子被螫合后，能阻止血小板聚集，推片时血小板均匀平铺，显微镜下易于对血小板进行观察评价。但有时可观察到因EDTA引起的红细胞皱缩及白细胞丛集现象。但随着血液分析仪的逐步普及，血标本多为EDTA抗凝血，除作全血细细胞计数及多参数分析外，制备血涂片也非常方便，虽有上述弊端，但显微镜下易于发现。 三、血涂片的制备 血涂片的制备方法很多，如手工推片法、自动推片法、载（盖）玻片压拉法、旋转涂片法、棕黄层（buffy－coat）涂片法及厚血膜涂片法等，现介绍如下。 1、手工推片法取血标本一滴置载玻片的一端，以边缘平滑的推片一端，从血滴前沿方向接触血液，使血液沿推片散开，推片与载玻片保持25～30o的平面夹角，平稳地将血向前推动，血液即在载玻片上形成一薄层血膜。将制成的血膜在空气中挥动，使迅速干燥，以免血细胞皱缩。 一张良好的涂片，要求厚薄适宜，头体尾分明，边缘整齐，两侧应留有空隙。玻片的一端应留有贴标签的地方。涂片的好坏与血滴大小、推片与载片之间角度、推片时的速度有关。血滴大、角度大、速度快，则血膜厚；反之则血膜薄。血膜分布不匀，主要是推片边缘不齐、用力不匀或载玻片不清洁
血液标本的采集方法及注意事项
血液标本的采集方法及注意事项 生化检验用的血液标本可来自于静脉、动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本，静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采血主要用于儿童，血气分析多使用动脉血。 （一）静脉采血法 1.采血步骤 采血前要核对病人姓名、年龄、性别、编号及检验项目等，按试验项目要求，准备好相应的容器，如空白试管、抗凝管或促凝管等。病人应取坐位或卧位，采血部位通常是前臂肘窝的正中静脉。若用普通采血法，采血后应取下针头，将血液沿管壁缓慢注入试管内。 2.注意事项 （1）很多生化成分受膳食影响，因此，采血前要确认病人是否空腹。 （2）避免充血和血液浓缩：采血时应动作迅速，尽可能缩短止血带使用时间。用止血带压迫时间最好不超过半分钟，否则将使生化结果升高或下降。 （3）若病人正在进行静脉输液，不宜在输液同侧手臂采血；若女性病人做了乳腺切除术，应在手术对侧手臂采血。 （4）采血的体位：体位改变可引起一系列的生理变化，使血液中的许多指标发生改变。一般采取直立位采血，其二标本的测定值比卧位高5％～15％。因此，采血时要注意保持正确的体位（坐位或卧位），以及体位的一致性。 （5）采血时只能向外抽，决不能向静脉内推，以免注入空气，形成气栓而造成严重后果。 （6）防止溶血：造成溶血的因素有注射器和容器不干燥、不清洁；穿刺不顺利，组织损伤过多；淤血时间过长；抽血速度太快；血液注入容器时未取下针头或注入速度过快产生大量泡沫；震荡过于剧烈等。若用普通注射器采血后，未取针头直接将血注入真空管内，也易造成溶血。体内溶血属合格标本，但应在报告单上注明。 （二）动脉采血法 肱动脉、股动脉、桡动脉以及其它任何部位的动脉都可以作为采血点，但多选择肱动脉和桡动脉。在摸到明显搏动处，按常规消毒，左手固定搏动处，右手持注射器，针头成60°角刺入，血液将自动进入注射器内。 （三）真空采血法 双向针一端插入真空试管内，另一端在持针器的帮助下刺入静脉，血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血，避免了血液外溢引起的污染，并有利于标本的转运和保存。标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和试验用途。
临床血液标本采集指南 (一医院资料)
临床血液标本采集指南 一、检验申请 规范填写检验申请单 项目填写齐全，用词规范、字迹清楚、避免涂改。不同标本类型最好分开申请对于被检者的特殊情况，应当在申请单上注明，供检验人员判断结果参考。 检验科要求检验人员加强与临床医护人员沟通，及时解决检验项目申请和送检标本存在的问题和疑问；对于不合格检验申请单和不合格送检标本按照“医学检验工作制度”进行登记、处理。对于漏填或错填申请科室的检验申请单，检验科一律禁止发送检验报告，必要时送交医务科处理。 二、病人准备 医护、检验人员指导病人做好准备 考虑饮食、运动、生理周期、疾病及药物等对检验结果可能产生的影响，指导病人正确采集标本。 (一) 控制饮食 （1）大多数检验项目都要求在早晨空腹采血，咖啡、浓茶、高糖及可乐类饮料也应禁食。 （2）肝功、血脂、凝血等项目要求禁食12-16小时，且提前一天的晚餐应当避免饮酒、禁止高脂肪、高蛋白饮食。 （3）饮食对血脂检验影响重大，至少应当在抽血前的三天内注意保持正常饮食。
（4）在做内生肌酐清除率测定之前，待检者应禁食肉类3天，不饮咖啡和茶，停用利尿剂，实验前避免剧烈运动，饮足量的水。（二）避免药物影响 许多药物（如VitC、雌激素、降血脂药等）对检验结果尤其是血、尿、便的生化检验结果产生影响，抗生素应用将对微生物培养检验结果产生直接的影响。申请检验前医生应该了解待检者近期及当前相关药物使用情况并给予适当指导，在对检验结果可能产生明显影响时，应当在检验申请单上注明，或以电话或其他方式告知相关检验人员。 举例：降血脂、避孕药、噻嗪类利尿剂、§-受体阻滞剂、免疫抑制剂、某些降压药、降糖药、胰岛素及其它激素制剂等可影响血脂检验结果；应根据药物特性，在作血脂检验前停药数天至数周。如不能停药，应记录用药情况，恰当评估药物及检验结果的影响。（三）避免运动影响 （1）剧烈运动可以使许多血液成分发生变化，甚至持续24小时以上，因此剧烈运动之后不能立即抽血；快步行走之后至少应休息10-15分钟后再抽血。 （2）应在平静状态抽血，避免情绪激动。 （四）注意生理差异 临床医生申请检验项目及评估检验报告时，应考虑性别、年龄、昼夜节律、季节变动、生理周期（如怀孕、月经）等因素对检验结果的影响，并给与必要指导。
血涂片的制备及染色
血涂片的制备及染色 摘要 血涂片是世界上使用最广泛的实验室检测方法之一，应用于疾病的筛查，发现，诊断以及监控。本文提供了在临床检验中制备及染色出优质血涂片的一种参考。虽然在如何人工制备血涂片上仍存在某些“工艺”，但是已尽可能采用了客观标准使得临床实验室能准备和染色出优质血片。本参考中包含固定和染色手工工艺中的问题解决方法。 关键词：血涂片制备，染色 前言 血涂片是世界上使用最广泛和最频繁的检测方法之一，但似乎没有关于血涂片制备要求，程序及潜在问题等的综合性文献。虽然血涂片的制备是个简单的过程，但作为一种检测方法，有很多因素可导致检测失败或比其预期低效。本文应国际血液学标准化委员会的请求所写，并作为实验室血细胞计数板的指导方针。本文旨在提供临床检验中用于形态评价的血涂片制备及其染色的指导和标准化。显微镜分析过程和解释不在本文的范围内。 列举的方法中包括最先进的技术以及发展中国家实验室的适用方法。发展中国家不具备最高水平的指标，但应在所有条件下可达到其规定的指标，以确保诊断测试的质量，以免降低病人护理。这点尤其重要，因为无论对于病例发现，诊断或疾病监测，血涂片显微镜分析所得数据通常在临床情况中起最终和决定性的作用。 为了方便参考使用，本文采用一种特殊的格式来描述涉及血涂片制备和染色的各个步骤。 血涂片制备 载玻片 载玻片应由最高纯度的耐腐蚀玻璃制成；通常不可接受其他材料如塑料。典型玻片为75×25mm，约有1mm厚度，必须平整，无扭曲和波痕，而且必须澄清无色（“水白，无色透明”）。荧光显微镜检测必须使用无自发荧光的玻片。 最好使用预洗过的载玻片，但至少实验室必须确保载玻片无划痕，干净无尘、绒线，油脂（指纹），而且必须干燥。这就意味着在潮湿环境中，载玻片必须能抗水。在所处密闭容器开启后，载玻片必须保存于干燥器或装有无水（甲基）乙醇或乙醇与丙酮混合液（3:1）的容器内直至被使用。 载玻片需一直保存于密闭容器中，只能在立即使用前开启。载玻片可以是平面的或有磨砂或涂层面以供书写。与有直角边缘的载玻片相比，圆边或有破口的载玻片使用上更安全，降低了皮肤和手套割破或刺破的几率。 载玻片的清洗 脏的载玻片需浸透在60℃的清洁剂中清洗15-20分钟，然后用热水冲洗并干燥。新载玻片需置于重铬酸钾洗涤液中（20g Cr 2 K 2 O 7 溶于100mL水并加入900mL浓硫酸）48小时。之后用流动自来水彻底冲洗。载玻片应保存于95%甲醇中，使用前小心擦拭干净并干燥。 血涂片制备方法 典型的血涂片制备方法是：人工（楔入，盖玻片），半自动（楔入，旋转），以及自动（楔入）。 楔入法（“推”） 人工、半自动及自动化环境中常用此法。若正确使用楔入法，可有足够大的区域供显微镜检测使用：这种区域中所有的细胞彼此几乎不接触或分离（单层部分）。对于显微镜检查来说，涂片上距推动起始处最远的部分会很薄（导致产生形态改变），然而距推动起始处邻近的部分会很厚。 自动化装置能够制得优质的血涂片，比通过人工方法得到的血涂片相比更具一致性。楔入法制备的主要问题是不同类型细胞的不均匀分布。特别是单核细胞（以及其他大的白细胞）被推向铺展膜（“羽状”边缘）底部以及两侧。与以单克隆抗体为基础的流式细胞术分类计数仪相比，
血液样本采集和血涂片制备
血液样本采集和血涂片制备 1、抽血时针栓只能外抽，不能内推，以免静脉内注入空气形 成气栓，造成严重后果。 2、属于酸性染料的是：伊红属于酸性染料，通常为钠盐，有 色部分为阴离子。 3、疟原虫检查常用的染色方法是：吉姆萨染液对细胞核、 寄生虫（如疟原虫等）找色较好，结构更清晰，但对细胞质的着色能力略差。 4、手工推片法，推片与载玻片的夹角为25°～30°。 5、血液黏度与血细胞比容和血浆黏度有关，其中，血浆黏度 受血浆中纤维蛋白原、球蛋白等大分子蛋白质的影响，它们的浓度越高，血浆黏度越高。 6、涂片瑞氏染色时，缓冲液常用的pH为6.4～6.8。 7、瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝（又名美 蓝）组成。染色原理既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染伊红结合，染粉红色；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料亚甲蓝或天青结合，染紫蓝色或蓝色； 中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合，染淡紫红色；原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物
质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。瑞氏染色法是最经典、最常用染色法。 8、瑞氏染料亚甲蓝容易氧化为一二三甲基硫堇等次级染料 （即天青）。将适量伊红、亚甲蓝溶解在甲醇中，即为瑞氏染料，由酸性染料伊红（E－）和碱性染料亚甲蓝（M＋）组成。 Ⅱ液磷酸盐缓冲液pH为6.4～6.8。在偏碱性环境中负电荷增多，易与亚甲蓝结合，所有细胞呈灰蓝色，颗粒呈深暗，嗜酸 颗粒呈暗褐，甚至棕黑色，中性颗粒偏粗，呈紫黑色。 9、细胞各种成分均属蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液pH而定，在偏酸环境中正电荷增多易与伊红结合染色偏红；在偏碱环境中负电荷增多易与亚甲蓝或天青结合偏蓝。因此，细胞染色对氢离子浓度十分敏感，所以在瑞氏染色中缓冲液起到恒定pH作用。 10、染色原理：既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。11、血清与血浆的差别是：血清中缺少某些凝血因子，如凝血因子Ⅰ（纤维蛋白原）、凝血因子Ⅱ（凝血酶原）、凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ等。 12、正常成人血量约为（70±10ml）/kg体重，成人4～5L，占体重的6%～8%，其中血浆占55%，血细胞占45%。
动脉血标本采集技术答案
动脉血标本采集技术答案 [选择题] [A型题] 1．血气分析时，标本的采集处理中，以下做法错误的是： A．采集动脉血 B．以肝素抗凝 C．立即送检 D．不需与空气隔绝E．抽血后将针头刺入胶塞摇匀血液 2．I型呼衰是指： A．PaO2＞60mmHg，PaCO2＞50mmHg B．PaO2＞60mmHg，PaCO2＜50mmHg C．PaO2＞70mmHg，PaCO2＜55mmHg D．PaO2＜60mmHg E．以上都不是 3．Ⅱ型呼衰是指： A．PaO2＜60mmHg，PaCO2＜40mmHg B．PaO2＜55mmHg，PaCO2＞30mmHg C．PaO2＜50mmHg，PaCO2＞20mmHg D．PaO2＜60mmHg，PaCO2＞50mmHg E．PaO2＞60mmHg，PaCO2＜15mmHg 4．关于I型呼衰，说法不正确的是： A．缺氧但不伴二氧化碳潴留 B．为肺泡换气不足所致 C．若伴通气功能障碍则缺氧更为严重 D．常见于肺间质纤维化 E．常见于慢性阻塞性肺疾病 5．动脉血气分析pH = 7.46，PCO2 = 32mmHg，BE = 3mmol／L，提示： A．正常范围B．呼吸性碱中毒 C．呼吸性酸中毒 D．代谢性碱中毒 E．代谢性酸中毒 6．代谢性酸中毒的临床表现为： A．呼吸快而浅B．呼吸慢而浅 C．尿液呈碱性 D．肌肉震颤 E．呼吸深而快 7．股动脉位于： A．股三角内由髂外动脉发出B．股神经外侧C．股静脉内侧 D．股静脉外侧 E．股深动脉内侧 8．判断机体低氧血症最敏感的指标为： A．发绀 B．静脉血氧分压 C．动脉血氧分压 D．动脉血氧饱和度 E．弥散功能测定 9．呼吸衰竭时，其血气分析结果会出现哪些改变： A．PaO2＜70mmHg、PaCO2＞50mmHg B．PaO2＜60mmHg(伴或不伴)PaCO2＞50mmHg C.PaO2＜80mmHg、PaCO2＞60mmHg D．PaO2＜60mmHg、PaCO2＞60mmHg E．PaO2＜65mmHg、PaCO2＞70mmHg 10．纠正缺氧和二氧化碳潴留最重要的措施是： A．氧气疗法B．保持气道通畅C．增加通气量 D．纠正酸碱平衡失调 E．提高呼吸系统兴奋性 [X型题]
实验 血涂片的制作与血细胞的观察
实验血涂片的制作与血细胞的观察 一、引言 血涂片显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对各种血液病的诊断有很大价值，但血涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论，因此，制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。 二、实验目的 掌握血涂片的制作，观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。 三、实验器材与试剂 器材：显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等。 试剂：瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸馏水等。 四、实验步骤 1、消毒与采血 先按摩采血部位（人的指腹），使血流通畅，采血前用70%酒精消毒人的指腹，干燥后用采血针刺破指腹，使血液自然流出（第一滴血不要）。取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处，注意手指持载玻片的边缘，不触电及表面，也不能使载玻片接触取血部位的皮肤。 2、推片 取一块边缘光滑的载玻片做推片。将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40o角，向另一端平稳地推出（图1）。涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。 图1 推片示意图 3、染色 用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。再将瑞氏染色液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染30秒。加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟。最后用蒸馏水把染色液洗掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。 4、封片 经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。 五、结果观察 显微镜下观察血涂片结果如图2所示。血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞： 小而圆，没有细胞核，血涂片中最多，常被染成淡红色，细胞的边缘厚，中间薄，使细胞边缘的颜色比中间的深。 2、白细胞： 分为有粒白细胞和无粒白细胞，有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞；无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。 （1）嗜酸性白细胞： 数量较少，但在血涂片中可以找到。细胞质中存在粗大的嗜酸性颗粒，胞质常被染成红色或玫瑰花色，细胞核分叶形，染成紫红色。 （2）嗜碱性白细胞： 数量最少，在血涂片中很难找到。细胞质中存在粗大的嗜碱性颗粒，胞质常被染成兰紫色，细胞核分叶形，染色较深，但常被粗大的兰紫色颗粒掩盖。 （3）嗜中性白细胞： 在有粒白细胞中，它的数量最多，很容易找到。细胞质染成淡红色，胞质内含有细小的颗粒，一般不易看清，细胞核为兰紫色，核分杆状、蹄形和分叶形。 （4）淋巴细胞： 在白细胞中数目是最多的，大小不等，可分为大淋巴细胞、中淋巴细胞、小淋巴细胞。大淋巴细胞较少，占中小淋巴细胞的1/4～1/18。细胞质所占的比例较小，但随细胞体积增大而相应增多，核周围细胞质，染成天兰色，细胞核大，圆形，染成紫兰色。 （5）单核细胞： 数目不多，是血细胞中最大的细胞。核为肾形或马蹄形，颜色比淋巴细胞较淡，细胞质为淡灰兰色。 3、血小板： 为不规则的细胞质小块或碎片，形状象雪花，在血小板中有细小的紫兰色颗粒。血小板常聚集在红细胞之间（注意：在观察过程中注意染料、渣子和细胞及血小板等的区别）。 图2 血涂片中血细胞观察结果 五、注意事项： 1、载玻片的清洗：新玻片有游离碱质，因此应用10%盐酸浸泡24小时，然后再清水和蒸 馏水清洗。2、使用玻璃片时只能手持边缘，切忌触及玻片表面，以保持玻片清洁、干燥，无油腻。3、血涂片制好后，立即固定染色，以免细胞溶解和发生退行性变。3、血
血涂片与分类流程
血涂片与分类流程Revised on November 25, 2020
血涂片和分类计数的质量控制流程1、目的： 规范血涂片评价和分类计数的质量控制管理流程，确保检验质量。 2、适用范围： 检验科门诊化验室、细胞室 3、职责： 检验科门诊化验室、细菌室检验人员均须熟知并遵守本程序。 4、质量控制流程： 血涂片的制备 玻片：保持中性、洁净、无油腻 制备血涂片：血涂片外观应头、体、尾分明，分布均匀，边缘整齐，两侧留有空隙。血膜外观应厚薄适宜。血膜厚度、长度和血滴的大小、推片与玻片之间的角度、推片时的速度及血细胞比容有关。一般血滴大、角度大、推片速度快则血膜厚；反之，则血膜薄。血细胞比容低于正常时，血液粘度高，宜保持较小的角度，可得满意结果；相反，血细胞比容低于正常时，血液较稀，则需用较大的角度和较快的推片速度，才可得满意的血涂片。良好的血涂片的“标准”为血膜由厚到薄逐渐过渡。 染色：血涂片应在1h内完成染色，或在1h内用无水甲醇固定后染色。 血涂片分类计数质量控制流程
血涂片白细胞分类计数方法：是有血涂片经瑞氏染色后，在油镜下根据白细胞形态特点逐个分类计数（一般计数100-200个白细胞），并观察其形态变化，然后求各种白细胞的比值。 血涂片分类计数注意事项：血涂片进行白细胞分类科稳定6-8h，但2h后粒细胞形态即有变化，故需要镜检分类应及早分血片：正确判断是否需要人工显微镜复查，凡出现以下情况之一者，都应当进行显微镜复查。（1）血细胞计数结果明显异常（WBC<×109/L，WBC>×109/L，Hb<50g/L，PLT<50×109/L）。（2）血细胞直方图异常：红细胞、白细胞、血小板任何一项直方图的峰值出现偏移。（3）出现警示信号。这需要我们操作人员在日常生活中严格执行，注意分析检验结果各参数之间的关系，才能对异常结果做出正确判断。加强与医护人员的联系：对在检测中出现的异常和阳性结果，要及时主动和临床医生取得联系，与临床资料进行相关性分析，对有疑问的做到合理解释。 1 、目的：
血培养标本采集操作流程及要点说明
【护理目标】遵循无菌操作原则，患者、标本、送检准确。 【操作重点步骤】1．严格执行查对制度、无菌技术操作原则、标本采集原则。2．需两人共同核对医嘱，患者的血型必须与用血申请单、交叉配血申请单、血型 检验报告单、医嘱上的血型相符。 3．告知患者／家属交叉配血的目的和配合方法及采血后的注意事项。 4．按静脉采血法评估患者的静脉、皮肤情况并进行采血。 5 ．根据申请用血量决定交叉配血标本的量，若申请用血为200 mL 则标本量为2 mL ，申请用血量每增加200 mL 标本量增加1 mL。 6．床旁采血前再需两人同时在床旁再次核对医嘱、患者（按采血容器标签上内容）、患者血型、用血申请单、交叉配血申请单。 7．采血完毕，标本连同输血申请单马上送输血科（或检验科）。 8．医疗废物按“感染性医疗垃圾”处理。 【结果标准】1．患者／家属对所做的护理操作和解释表示理解和满意。 2 ．采血准确、送检及时。【操作流程及要点说明】与静脉采血法 流程图同。
【护理目标】 标本采集时间及容器符合检查要求，标本无污染，患者安全。【操作重点步骤】 1．严格执行查对制度、无菌技术操作原则、标本采集原则、标准预防原则。 2．评估患者的病情、抗生素使用情况，准备血培养基。 3．告知患者／家属采血的目的、方法及采血后的注意事项。 4．根据医嘱、评估结果选择恰当的血培养基和采血量。 5．采血过程中严格无菌技术操作，防止污染。 6．在申请单上准确记录采血量、采血时间、操作者姓名。 7．采血后，标本马上送检验室，防止标本变质、被污染。 8．医疗废物按“感染性医疗垃圾”处理。 【结果标准】 1．患者／家属对所做的解释和护理表示理解和满意。 2．采取标本方法正确，标本符合检验要求。 3．标本送检和异常结果回报及时，异常情况得到及时处理。
血液样本的采集与保存
实用帖血液样本的采集与保存 在脊椎动物中，外周血一直被认为是侵害性较小、富有价值的检测样本。在许多生物样 本库中，由于血液样本的常规收集、处理及保存方法简便、成本低且富含可利用成分和生物分子，因此是进行多种项目分析的理想实验材料。然鹅，科研僧们历经千辛万苦最后发现获 得的血液样本RNA降解了。。。。额，这就很惆怅了。 所以呢，在样本采集、处理及储存过程中必须格外注意，从根本上确保获得高质量的 RNA 今天小编和大家一起来聊一聊在进行RNA实验时血液样本如何进行收集与保存。 血液的组成 首先来熟悉一下血液的组成。 人类的血液由血浆和血细胞组成。其中血浆约占血液的55%是水，糖，脂肪，蛋白质, 钾盐和钙盐等的混合物。血细胞约占血液的45%主要分为红细胞、白细胞和血小板。而哺 乳动物成熟的红细胞和血小板是无核的。
11^ 血浆和血清 血浆是离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体, 其中含有纤维蛋白原，不含游离的 Ca 2+ ，若向血浆中加入 ，血浆会发生再凝固。 血清是离体的血液凝固之后， 经血凝块聚缩释出的液体， 其中已无纤维蛋白原, 游离的Ca 2+ ，血清中少了很多的凝血因子但多了很多的凝血产物。 不加卿赛 mm BW. 血囲 其他有形咸分 但含有 血浆 有形成分
采血管的选择 采血管，大家都不陌生，去医院抽个血，一定会用到采血管，那么问题来鸟，这么多颜 色的采血管，有什么区别呢？下面小编来给大家介绍一下采血管的分类及不同颜色试管帽代 表的含义。 1. 蓝色头盖管（含有柠檬酸钠抗凝剂的采血管） 2. 黑色头盖管（含有0.109mol/L 柠檬酸钠） 3. 紫色头盖管（含有乙二胺四乙酸以及其盐的采血管 ） 4. 绿色头盖管（肝素抗凝管） 5. 灰色头盖管（含有草酸钾/氟化钠） 6. 橘红色头盖管（促凝管） 7. 金黄色头盖管（含有惰性分离胶及促凝剂的采血管） 8.红色头盖管（无添加剂的干燥真空管） f l m ■ M M ■ ■ 机 ■ 忡-M M