实验室做细胞常用染色
细胞染色操作
细胞染色操作细胞染色是一种广泛应用于生物学研究的技术方法，通过染色剂将细胞的结构、组成以及功能等信息可视化。
细胞染色操作是进行细胞染色的关键步骤，下面将介绍细胞染色操作的基本流程和常用染色方法。
一、细胞染色操作的基本流程1. 固定：细胞染色前，需要将细胞固定在载玻片上，以保持其形态和结构。
常用的固定剂有甲醛和乙醛等，将细胞浸泡在固定剂中，使细胞膜和细胞内部结构固定。
2. 渗透：细胞固定后，需要将染色剂渗透到细胞内部，以便染色剂能够与细胞内的目标物质结合。
常用的渗透剂有甲醇、乙醇和醋酸等，将细胞浸泡在渗透剂中，使染色剂能够进入细胞内。
3. 染色：在细胞渗透后，可以选择合适的染色方法进行染色。
常见的染色方法包括荧光染色、核染色和蛋白质染色等。
荧光染色是利用荧光染料对细胞进行标记，常用的荧光染料有荧光素和荧光蛋白等。
核染色可以用来观察细胞核的形态和数量，常用的核染色剂有伊红和苏木精等。
蛋白质染色则是用来检测细胞内特定蛋白质的分布和表达水平，常用的蛋白质染色方法有免疫组织化学染色和免疫荧光染色等。
4. 洗涤：染色后，需要将细胞表面的多余染色剂洗去，以减少背景噪音的干扰。
洗涤的次数和时间可以根据具体染色方法和试剂的要求来确定。
5. 固定封片：细胞染色完成后，需要将载玻片固定在显微镜片上，以便观察和保存。
常用的固定封片剂有海藻糖溶液和透明胶等，将载玻片浸入固定封片剂中，使其固定在显微镜片上。
二、常用的细胞染色方法1. 荧光染色：荧光染色是利用荧光染料对细胞进行标记，以实现对细胞内目标物质的可视化。
常用的荧光染料有荧光素、荧光蛋白和荧光标记的抗体等。
荧光染色可以用于观察细胞内特定分子的分布和定位，例如观察细胞内的细胞器如线粒体、内质网和高尔基体等。
2. 核染色：核染色是用来观察细胞核的形态和数量。
常用的核染色剂有伊红、苏木精和荧光染料DAPI等。
核染色可以用于观察细胞核的大小、形状和染色性质，从而研究细胞的生长和增殖过程。
常用细胞化学染色表
应
反
色
染
过氧化物酶染色POX
过碘酸-雪夫染色PAS
中性粒细胞碱性磷酸酶染色NAP
氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色NAS-DCE
中型非特异性酯酶染色NAS-DAE
碱性α-丁酸萘酚酯酶染色α-NBE
酸性磷酸酶染色ACP
酯酶双染色
铁染色
急粒
M0：微分化型
M1:未分化型
M2:部分分化局灶Fra bibliotek布的阳性反应原粒阴性或胞质呈弥漫淡色阳性
M5:单核细胞白血病
原、幼单核细胞多成小颗粒弱阳性
原、幼单核细胞弥漫分布的红色颗粒阳性
阴性
阳性或强阳性
被氟化钠抑制
阳性
被氟化钠抑制
强阳性
α-NBE阳性
NAS-DCE阴性
M6:红白血病
多为阳性，阳性率高反应强，成熟红细胞有时也可为阳性
M7:巨核细胞白血病
阳性、强阳性红色颗粒或块状
急淋
原、幼淋巴细胞均为阴性
阳性率积分值均降低
（+）-（++）
阳性
不被氟化钠抑制
阴性反应
少数为弱阳性
原粒对ACP染色反应不一
NAS-DCE阳性
α-NBE阴性
M3:急性早幼粒
颗粒增多的早幼粒细胞强阳性
异常早幼粒细胞阳性
白血病性早幼粒细胞
（++）-（+++）
强阳性
不被氟化钠抑制
M4:粒-单核细胞白血病
单核系被抑制
粒系不被抑制
双重阳性
慢粒积分值显著增高200分/100NC以上
再障增高；PNH和MDS减低
真性红细胞增多症显著增高；继发性红细胞增多症正常或减低
实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制
实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制一、实验室常用染料性能介绍1.苏木精：苏木精是一种常用的组织染料，其主要成分是吡啶类化合物。
苏木精具有很好的亲水性，对细胞核染色效果好，特别适用于观察细胞的核结构和形态。
2.基本蓝1：基本蓝1是一种亲水性染料，也是常用的组织染料。
它能与细胞内核酸结合，使细胞核显色。
基本蓝1在显微镜下观察时呈现出暗蓝色，有良好的穿透性，可以用来观察细胞的核仁、蛋白质沉积等。
3.伊红：伊红是一种细胞染色常用的酸碱指示剂。
它在碱性条件下呈红色，在酸性条件下呈黄色，可以用来染色观察细胞的酸性和碱性成分。
4.甲磺酸伊地洛尔：甲磺酸伊地洛尔是一种常用的荧光染料，可以与细胞膜结合，形成荧光标记的细胞，用于细胞增殖、迁移等研究。
在实验室中，还有很多常用的药品试剂和培养基需要配制。
下面介绍一些常见的配制方法：1.X溶液的配制：X溶液通常是用于细胞培养的培养基中的一种添加剂。
具体的配制方法是将X溶液的粉末称取适量加入适量的去离子水中，搅拌均匀即可。
X溶液可以用于抗菌、抗霉等作用。
2.磷酸缓冲盐水的配制：磷酸缓冲盐水经常用于细胞培养中的一种缓冲液。
配制磷酸缓冲盐水需要称取适量的氢磷酸盐和二氢磷酸盐加入适量的去离子水中，搅拌均匀并调节pH值即可。
3.阿霉素的配制：阿霉素是一种常用的抗生素，常用于细胞培养中的抗菌作用。
阿霉素的配制需要将相应的阿霉素粉末加入适量的溶剂中，搅拌均匀形成阿霉素溶液。
4.LB培养基的配制：LB培养基是著名的富含营养成分的培养基，常用于大肠杆菌等细菌的培养。
LB培养基的配制需要称取适量的草莓粉末、酵母粉末、纯化骨粉和氯化钠加入适量的去离子水中，通过高压灭菌形成LB培养基。
以上仅为常用染料性能介绍及部分常用药品试剂和培养基的配制方法，实验室中还有很多其他药品试剂和培养基需要进行配制或选购，要根据实际需要进行选择和使用。
实验室常用染色液和试剂配方
实验室常用染色液和试剂配方染色液和试剂在实验室中被广泛使用，用于各种科学研究和实验。
它们可以用来染色细胞、分析化合物和反应产物、诊断疾病等。
下面是一些常用的染色液和试剂配方。
1. Hematoxylin-Eosin染色液：Hematoxylin-Eosin（HE）染色液是一种经典的组织染色方法，常用于病理学研究和诊断。
配方如下：- Hematoxylin染色液：将5 g hematoxylin溶解在100 mL乙醇中，加入2 mL盐酸和900 mL蒸馏水，最后调节pH值为5-6-酸性酒红染液：将0.5g酸性酒红溶解在100mL乙醇中。
- Eosin染色液：将0.5 g eosin溶解在100 mL乙醇中。
2. Giemsa染色液：Giemsa染色液用于染色细胞，特别是白细胞，常用于血液学和微生物学研究。
配方如下：- Giemsa染色液：将4 g Giemsa粉末溶解在1 L蒸馏水中。
可以加入2 mL甲醇增强染色效果。
3.厌氧培养试剂：用于厌氧条件下培养微生物的试剂。
配方如下：- Thioglycollate培养基：将11.5 g thioglycollate溶解在1 L蒸馏水中，加热至溶解。
- Dithiothreitol（DTT）溶液：将1 g DTT溶解在100 mL蒸馏水中，用10 mL离心管分装，-20℃保存。
4. Bradford试剂：用于蛋白质的浓度测定，常用于生物化学和分子生物学实验。
配方如下：- Coomassie Brilliant Blue G-250：将100 mg染料溶解在50 mL浓硫酸中，加热至溶解。
再用1 L蒸馏水稀释至30%浓度。
5. Gill's胶片显影试剂：用于胶片的显影，常用于分子生物学实验。
配方如下：-显影溶液A：将1.5g氯化钴和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中，用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.8-显影溶液B：将3g溴化钾和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中，用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.86.RIPA裂解缓冲液：用于细胞或组织的裂解，提取蛋白质或RNA，常用于生物化学和分子生物学实验。
临检基础知识讲解：脱落细胞学检测常用染色法
染色是利用细胞中各种结构的生化组成不同，对染料的亲和力不同，而显示不同的颜色，使细胞的形态和结构易于辨认。
常用的染色有HE、巴氏及瑞-姬氏染色，其特点如下。
1.HE染色：此法染色效果也好，只是胞质色彩不丰富，不能用于观察阴道涂片对雌激素水平测定。
优点是操作简易，试剂易配制。
2.巴氏染色：此法染色特点是细胞具有多色性，色彩丰富鲜艳，胞内结构清晰，染色效果好，是细胞病理学检查常用的方法，尤其是观察女性雌激素水平对阴道上皮细胞的影响。
此法的缺点是操作程序复杂。
3.瑞一姬氏染色：此法适用于血片、淋巴穿刺液和胸腹水涂片。
细胞学中常用的染色体染色技术
细胞学中常用的染色体染色技术在细胞学研究中，染色体染色技术是一项至关重要的技术。
它能够帮助我们更好地观察和理解染色体的形态、数量、结构等基础信息，为生物医学研究、遗传学研究等提供了有力的支持。
本文就介绍几种在细胞学中常用的染色体染色技术。
1. 常规染色技术常规染色技术是指使用各种染料对细胞进行染色，从而使染色体在显微镜下呈现出色彩形态。
这种技术常用的染料有吉姆萨染剂、吉氏染剂、范氏染剂等，还有格尔染剂、伊红染剂、裴可染剂等。
各种染剂都有自己的应用范围和特点。
例如，吉姆萨染剂可以染出静止期染色体的G带区域，利用G带标记，可以精确定位染色体上的变异点、易位点等；而吉氏染剂则可染出缺乏明显G带的常染色体和亚染色体。
通常情况下，染色后的细胞覆盖物左右会用类似凡士林油的东西来保存，以免在显微镜下撕裂。
2. 原位杂交技术原位杂交作为一种重要的分子生物学技术，也被广泛地应用于细胞遗传学中。
这种技术主要是通过配对互补的核酸形成双链结构，来检测细胞中某个特定序列的存在和位置。
在染色体的分析中，我们可以通过这种方式检测到重复序列、分析染色体上的某些基因、寻找疾病相关的突变等。
原位杂交技术的应用，无论是在基础科学还是在临床诊断中都是非常重要的，比如用来确定癌症病因。
3. 荧光原位杂交技术荧光原位杂交技术是在原位杂交技术的基础上发展起来的一种新技术。
它通过标记互补核酸的荧光探针，来观察目标分子在细胞中的分布情况。
荧光原位杂交技术对于定位基因、诊断疾病等都具有十分广泛的应用前景。
同时，荧光染色技术与成像技术的发展，也为荧光原位杂交技术的应用提供了更好的条件。
4. 染色体分析仪染色体分析仪是一种专门针对染色体的形态、数量、结构等特征进行检测的设备。
它通过将细胞进行消解、成串的染色体上色、在显微镜下的观察来进行染色体的分析。
通过收集显微图像，可以对染色体进行计数、形态分析、结构分析等。
染色体分析仪的应用，不仅可以帮助我们更好地了解染色体的基本信息，对于染色体的异常检测和诊断疾病等方面，也具有非常重要的意义。
常见细胞染色试剂简介
常见细胞染色试剂简介1、酸性品红（Acid fuchsin）酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。
是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
它跟甲基绿同染，能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。
2、刚果红（Congo red）刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。
它能作染料，也用作指示剂。
它在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。
用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色。
在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。
刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作类淀粉染色，由于它能溶于水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速3、甲基蓝（Methyl blue）甲基蓝是弱酸性染料，能溶于水和酒精。
甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。
它跟伊红合用能染神经细胞，也是细菌制片中不可缺少的染料。
它的水溶液是原生动物的活体染色剂。
甲基蓝极易氧化，因此用它染色后不能长久保存。
4、固绿（Fast green）固绿是酸性染料，能溶于水（溶解度为4%）和酒精（溶解度为9%）。
固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂，在染细胞和植物组织上应用极广。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
5．苯胺蓝（Aniline blue）是一种混合酸性染料，平常所用很难有一定的标准。
此染料一般很难溶于水，也不易溶于酒精（1.5％）。
植物制片中可与番红合用，作为组织染色；也可作藻类植物染色。
因为这种染料的成分很不一致，染色效果不易掌握。
6、苏丹Ⅲ（Sudan Ⅲ）苏丹Ⅲ是弱酸性染料，不溶解于水，呈红色粉末状，易溶于脂肪和酒精（溶解度为0.15%）。
常用70％酒精中的饱和溶液。
常用细胞染色方法
常用细胞染色方法
常用的细胞染色方法包括：
1.吉姆萨染色法：使用吉姆萨染料染色，可用于观察细胞核和细胞质的形态结构。
2.荧光染色法：使用荧光染料，通过荧光显微镜观察细胞内的特定结构、蛋白质或核酸等。
3.伊诺金染色法：使用伊诺金染料，主要用于显微镜下观察和鉴别细菌和真菌等微生物。
4.嗜酸染色法：使用嗜酸染料，能够染色细胞内的酸性结构和胞质。
5.嗜碱染色法：使用嗜碱染料，能够染色细胞内的碱性结构和胞质。
6.免疫组化染色法：利用特异性抗体与细胞中的特定蛋白质结合，再使用染料标记抗体来观察和定位细胞内的特定蛋白质。
7.核酸染色法：使用DNA或RNA特异性的染料，能够染色细胞内的核酸，常用于细胞周期和细胞分裂等研究。
8.血液细胞染色法：包括委氏染色法、中日染色法等，用于观察和鉴定血液细胞
类型和形态变化。
以上是一些常用的细胞染色方法，根据需要和研究目的的不同，可以选择合适的方法来观察和研究细胞。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验室做细胞常用得细胞固定与染色方法一、爬片前盖玻片处理方法对于悬浮培养得细胞,在进行各种染色前常需先制备成涂片。
为了保证细胞在长时间得染色过程中不从载玻片脱落，必须使其牢固贴附于载玻片上。
在载玻片上涂布一层有助于细胞黏附得物质就是经常采用得方法之一.能促进细胞黏附得物质主要有多聚赖氨酸、铬矾明胶等，这里介绍多聚赖氨酸得涂布方法.1、将载玻片用玻璃专用洗涤剂(如Dｅcoｎ)浸泡５min，间或振荡。
2、用自来水冲洗5miｎ。
3、以1％盐酸—70％乙醇溶液浸泡5miｎ．4、烤箱干燥(至此即可用于普通染色)。
5、多聚L-赖氨酸(1:10溶于去离子水）浸泡5ｍin,振荡。
6、入60℃烤箱1ｈ,或室温过夜干燥(用于细胞化学、免疫细胞化学及原位杂交细胞化学).二、细胞固定常用方法固定细胞得目得在于把组织与细胞得原有结构尽可能完整地保存下来,避免组织与细胞发生降解、自溶、腐败与变形等,使细胞与组织内得各种酶失去活性，防止细胞与组织得各种分子变性、解离,使细胞得化学物质与酶能准确定位，并在以后得处理与制片过程中亦不发生改变与破坏。
同时，固定还可使细胞得各部分易于着色,适于观察、长期保存与分析.1、固定组织、细胞得基本原则：尽可能选用新鲜培养物;根据检测工具、对象、目得与要求选择固定剂与固定方法。
2、培养物得准备与固定前处理:各种细胞培养物,如双盖片悬滴培养物、悬液培养物、单层培养物与盖片单层培养物都可作固定材料.对双盖片悬滴培养物与悬液培养物来说,常通过离心收集细胞，PBS漂洗2~3次后,备固定制片；对盖片单层培养物来说,将盖片从培养器皿中取出后，PBS液漂洗2～３次,以洗去血清与附着于细胞表面得残渣,备固定用.3、常用固定液:常用得固定液分两类，一类就是以单一化学物质配成得固定液,称简单固定液。
主要有甲醇、乙醇、甲醛、醋酸、丙酮、戊二醛、苦味酸、铬酸、重铬酸钾、氯化汞、氯化镉、四氧化锇(锇酸）．另一类就是用两种或两种以上化学物质配合成得固定液，称混合固定液。
如Muｅlｌer固定液、Flｅｍｍiｎg固液、FAA固定液、 Carnoｙ固定液、Ｒosｓｍan固定液、Aｌｔｍann固定液、Bouing固定液等。
不同得固定液对细胞得化学成分、酶类及细胞结构固定效果不同。
因此,选择合适得固定液就是达到固定目得得基础。
(１)4%甲醛－PＢS:甲醛就是一种气体，其饱与水溶液无色,约含4０%甲醛.在很多情况下,甲醛常常产生多聚甲醛得白色沉淀。
4％甲醛—PBS使组织变硬速度比乙醇快，并能较好地保存组织得外部形式,固定效果不受制片影响，固定材料可用苏木精与其她合成染料染色。
甲醛得穿透力较强，对组织固定均匀,能增强组织得弹性，大标本得固定与保存多用甲醛。
甲醛就是染色体、线粒体与高尔基体得固定液,在冷冻切片中,甲醛作固定剂具有显著得优点.用40%甲醛水溶液:PBS=１:9配方制备甲醛固定液。
（2）丙酮:丙酮为无色易挥发液体,用纯冷丙酮(４℃)固定细胞内酶效果较佳.(3)乙醇:乙醇又称酒精,固定血纤维蛋白、色素、弹性纤维、细菌与白细胞等效果优良。
无水乙醇或乙醇与醋酸得混合液就是固定肝糖原及肌糖原得良好固定液。
乙醇除有固定作用外，还具有硬化与脱水得作用.作为固定用乙醇得适宜浓度为７0%~1００%。
乙醇得缺点就是渗透力差,并使组织收缩.（４）醋酸:常用0、３％~５%浓度得醋酸作固定剂.醋酸能与水及乙醇、甲醇溶合,醋酸不固定蛋白质,但能固定核酸。
醋酸得穿透力很大，它对细胞得膨胀作用显著,这就是由于它破坏了某些蛋白质分子得结合,所以,常用醋酸来减少其她固定剂引起得细胞收缩。
细胞学技术中,它能防止细胞收缩，并能较好地保存染色体,还能把染色质沉淀成为可染色得块状体.(５）苦味酸:苦味酸就是黄色结晶体，强酸,可溶于水、乙醇、苯与二甲苯,在水中得溶解度可因水温变化而变化。
苦味酸可以沉淀白蛋白、核蛋白、球蛋白、组蛋白与核酸。
苦味酸得穿透力很慢，单独使用时，造成组织严重收缩。
它与其她药物混合配制时,可以作为蛋白质得沉淀剂,同时可避免组织收缩、硬化,而且易于染色.所以在很多混合固定液中被广泛采用。
作固定用得最适浓度为1%.(6)锇酸(四氧化锇）:锇酸就是一种强氧化剂,不能同乙醇与甲醛混合使用。
它得挥发性很强,挥发出来得气体能固定结膜,对眼睛很有害，所以操作时应特别注意。
四氧化锇就是保存细胞结构得最好固定剂之一，配制时先在棕色试剂瓶中盛入５０～10０mｌ０、１mol／L磷酸缓冲液(pH7、0~7、4),再将装有1g 锇酸得安培瓶放人PBS中,以玻棒击碎安培瓶,摇荡使锇酸溶解，备用。
常用得固定液浓度为1%~2%。
(７)戊二醛：戊二醛对组织得渗透率高,与蛋白质反应快，能较好地保存蛋白质，对微管与膜性结构保存亦比较好，并能较好地保存糖原。
常用得戊二醛固定液配制方法列于表12-1。
表12—1 常用得戊二醛固定液配制方法(8）甲醇／醋酸固定液：甲醇:醋酸为3：1得固定液就是应用最广得一种培养细胞固定剂。
甲醇穿透力好，醋酸固定蛋白效果好，两者结合，能使固定细胞形态不变.不仅最适用于固定染色体,而且固定得染色体适于Gieｍｓa染色(注意:此固定液宜现用现配)。
（９)FAA固定液：此固定液适用于固定盖片单层培养得细胞,固定效果好.配制方法:90ml 80%酒精中加5ml冰乙酸与5ｍ１40%甲醛。
(10)Ｃarｎoy固定液:Carｎｏy固定液就是较好得非水溶性固定液，就是显示细胞化学成分(如粘多糖等)时常用得固定剂,固定、保真效果好,但穿透力差，适于固定培养得单层细胞.配制方法：60ml纯酒精加30ｍｌ氯仿与１0ml冰乙酸．(１１）Ｂouin固定液:用于固定双盖片法培养得标本，固定30分钟后，用70％酒精褪去苦味酸黄色，如不立即染色,可将标本保存在７０％酒精中。
本试剂适于固定组织细胞得糖原。
配制方法:先将75mｌ饱与苦味酸（100ｍl水中加１、2~１、4ｇ)过滤,加入25ml福尔马林(４0％甲醛,有沉淀时禁用),最后加入5ｍl冰醋酸,混与后存于４℃冰箱中备用。
冰醋酸最好在临用前加入。
该固定液对组织细胞穿透力较强,固定效果较好,保存得细胞结构完好.但因偏酸(pＨ为 3~3、5),对抗原有一定损害。
(12）4％多聚甲醛-PBS固定液:多聚甲醛为白色固体,在５0ml蒸馏水中加入4ｇ多聚甲醛,加热至６０~70℃时,边搅拌边逐滴加入2ｍｏl／ＬＮａＯＨ,至液体清晰透明．用１mｏｌ/LHCｌ调节ｐH 至7、４，冷却后加入 0、01ｍｏl/LPBS液至10０ml,4℃保存。
本试剂适于固定肾纤维蛋白与细胞骨架蛋白。
三、常见得细胞染色方法１普通染色观察苏木精-伊红(hematoxylin—eｏｓin,HＥ)染色与Giｅmsa染色就是观察培养细胞一般形态得最常用方法,也就是把细胞作为标本保存得主要方法．对于贴壁培养得细胞，以生长于盖玻片与塑料培养瓶壁者便于操作。
固定前先用Haｎｋｓ液、PBS、ＢSS或生理盐水清洗培养物2次,去除妨碍染色得血清。
固定后可将盖玻片用树胶贴于载玻片上，以利操作。
对于悬浮培养细胞，须先经离心沉淀(1０0０r／ｍin，1０miｎ),弃上清液后（留少量液体),将细胞悬液滴于玻片上做成涂片,冷风吹干。
1、１HＥ染色法1、1、1染液配制（１）苏木精染液:这里介绍鄂征(１995）改良得Maｙer法。
称取０、5g 苏木精,5、0g铵矾或钾矾,0、1ｇ碘酸钠加温溶于70m1蒸馏水。
再加入３0ml甘油, 2ml 冰醋酸。
混匀。
过滤后即成母液。
可长久保存。
用蒸馏水以１:２０稀释即成工作液，可用很长时间。
每次染色前宜过滤,去除氧化膜。
（2)伊红染液:伊红有醇溶性与水溶性之分。
将0、5g伊红溶于１00m1７０％乙醇或蒸馏水即成工作液.１、１、２染色程序（1)用１0％甲醛(福尔马林)固定培养物３0miｎ，或以丙酮固定15miｎ。
(2)蒸馏水洗1次后，入苏木精染液5~１0miｎ染细胞核。
（3)入0、５%盐酸—70％乙醇溶液3０～1min,脱去胞质得着色。
此时核呈紫红色.(4）入碱性溶液碱化，使细胞核变成蓝色。
如果时间允许,最好用自来水(呈弱碱性）长时间浸泡。
也可入１%NaHCO3溶液。
此过程须不断用显微镜监视，以掌握碱化时间.(５)蒸馏水洗1 ｍiｎ,去除残留得碱性溶液，否则影响伊红着色。
(6）入伊红染液3０s～1 ｍiｎ。
(７）用梯度乙醇溶液脱水:７0％、9０％、95%乙醇各30ｓ~1miｎ；100%（2次)各２ｍin。
如伊红为乙醇溶液，略去70%乙醇。
(8）用二甲苯透明2次,各5min。
(9)树胶封固。
１、1、3染色结果细胞核呈紫蓝色或深蓝色，大部分细胞得胞质呈粉红色。
如果胞质内含较多核糖体（例如淋巴细胞)则亦呈蓝色.１、2吉姆萨染色法此法可将细胞核与胞质同时染色，故便捷快速；但染液配制技术不易准确掌握,效果常不如HE染色稳定。
1、２、1吉姆萨(Giｅmｓa)染液得配制(1)取1、5g吉姆萨粉末放入5０ml甘油,置于60℃温箱,约3h后溶解。
（２）取出后倒入5０mｌ中性甲醇,即为母液.于棕色瓶可长久保存。
需要注意得就是,有得甲醇内含醋酸,会使染液中得伊红沉淀出来,不利染色。
(3)将母液与０、1 mol/LPBＳ(Ph6、9~7、２)按１:9混合即成工作液。
吉姆萨染液对pＨ极敏感,偏酸时染色过红，偏碱时则过蓝。
所以,工作液宜现用现配,保存时间不超过48h以免被CO2酸化。
1、２、2染色程序（１)将标本用甲醇固定５~1０min。
(2)入吉姆萨液染色10~１5mｉn。
可用染色缸；或将染液滴覆于标本.(３）蒸馏水清洗，空气干燥，二甲苯透明,树胶封固.1、2、3染色结果细胞核呈蓝或蓝紫色，胞质呈色与ＨE染色相仿。